CN103860571A - 一种梓醇的新用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种梓醇的新用途。所述新用途是梓醇在制备治疗甲状腺功能亢进症的药物或保健食品中的应用，以及在甲状腺功能亢进症相关的甲亢性心脏病的药物或保健食品中的应用。实验研究结果表明：梓醇能够改善甲亢小鼠的外观行为表现；有增加甲亢小鼠体重的趋势；减轻耗氧量、减慢心率；对T3、FT3和FT4有显著降低作用；对小鼠的全心重量指数、左心室重量指数有显著降低作用。

Description

一种梓醇的新用途
技术领域
本发明涉及梓醇的一种新用途，具体说，是涉及梓醇在制备治疗甲状腺功能亢进症的药物或保健食品中的应用，属于中药技术领域。
背景技术
甲状腺功能亢进症，简称“甲状腺功能亢进”、“甲亢”，是由多种病因引起的甲状腺激素过量，进入血循环中，作用于全身的组织和器官，致机体出现高代谢和神经精神兴奋性增高症群为主要表现的临床综合症。随着社会、工作压力的增大，生活节奏的加快，甲状腺功能亢进的发病率明显增加。流行病学调查发现，男女发病比例为1∶4-1∶6，以20-40岁多见，本病多见于女性，我国甲状腺功能亢进的总发病率竟高达3％。
甲亢发病临床表现轻重不一，典型患者的表现有：①神经系统：甲亢患者易激动、精神过敏、多言多动、失眠紧张、思想不集中、焦虑烦躁、多猜疑等，患者伸舌和双手平举向前伸出时有细震颤。②高代谢综合征：患者怕热多汗，常有低热、皮肤温暖潮湿，自觉疲乏无力。③甲状腺肿大：多呈弥漫性对称性肿大，少数不对称。青年女性多见，体检时可在患者甲状腺闻及收缩期杂音，扪及震颤，尤以甲状腺体上部明显，为特征性体征。④眼征：患者眼球突出，眼裂增宽。分为浸润性突眼和非浸润性突眼。⑤心血管系统：患者出现心悸气促，活动时上述症状加剧。常有心动过速(多为窦性心动过速)、心律失常、心脏肥大和充血性心力衰竭等表现。⑥消化系统：食量明显增大，但体重下降，部分患者大便次数增多。⑦运动系统：肌肉软弱无力。⑧生殖系统：女性患者月经量减少，月经周期延长甚至闭经。男性多阳痿。⑨皮肤及肢端：有些患者出现对称性粘液性水肿，多见于小腿胫前下段。⑩严重的可出现甲亢危相、昏迷甚至危及生命。
甲亢的病因和发病机制至今尚不完全清楚，西医认为本病的发生主要是由于甲状腺分泌过多所致。甲状腺的分泌活动受大脑垂体前叶促甲状腺素(TSH)的影响。当高级神经活动发生紊乱以后，大脑垂体前叶就分泌过多的促甲状腺激素，刺激甲状腺增生肥大，而分泌过多的甲状腺激素会使机体代谢率升高，氧化过程加速而出现一系列甲亢症候群，引起能量、糖、脂肪、蛋白质、维生素的代谢紊乱及循环、消化、造血、神经、内分泌等系统的功能紊乱。也有认为遗传因素和自身免疫因素对疾病发生起主导作用。
目前，对该病的治疗药物虽然有多种，但均存在一定的不足和副作用。我国最常用的治疗方法为药物治疗常用的药物包括抗甲状腺药(ATD)、β受体阻滞剂、碘剂、糖皮质激素等。最常用的ATD包括甲巯咪唑(MMI)和丙基硫氧嘧啶(PTU)，其主要作用机制是抑制甲状腺激素的合成。甲亢患者具有肾上腺素能活性增强的症状和体征，应用β受体阻滞剂可以对抗肾上腺素能效应，可使心动过速、精神紧张、多汗、震颤、肌病等症状得以改善。盐酸普萘洛尔作为最常用的β受体阻滞剂还可以降低5’-脱碘酶活性，抑制T4向T3转化。碘化物是最古老的抗甲亢药物。碘化物能减少甲状腺的血液供应使甲状腺缩小，抑制甲状腺激素的合成和释放，疗效显著而迅速，但使用2-3周后会出现“脱逸”现象，而使甲亢加重，并且令以后甲亢的治疗更加困难。临床上一般将复方碘溶液用于治疗甲亢危象、甲亢术前准备以及甲亢放射性碘治疗用药。目前公认的糖皮质激素主要用于甲状腺相关性眼病(TAO)、甲亢危象、重症亚急性甲状腺炎的治疗。但同时，抗甲状腺药物(ATD)的不良反应备受学者们关注。总的来说，ATD治疗是安全且有效的，但其临床不良反应亦较常见，如对肝脏、血液系统的毒性作用、抗中性粒细胞胞浆抗体相关性肺小血管炎、低血糖、变态反应、肌肉损伤等，一般程度较轻，如能及时停用ATD则能够自行恢复，但亦可出现少见、严重的副作用，可能存在潜在致命的危险，故需引起临床医生的重视。MMI与PTU比较，其不良反应显著低于PTU，且前者大多具有剂量依赖性，后者与药物的剂量无显著相关。此外，PTU的肝毒性强于MMI，甚至可能发生致命性肝损伤和肝衰竭。硫脲类抗甲状腺药物不良反应包括药疹、粒细胞缺乏症、严重肝损伤、抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)相关性血管炎等，并有一定的致畸作用。严重肝损伤和ANCA相关性血管炎的发生多与丙硫氧嘧啶有关，致崎作用主要见于甲巯咪唑。中医治疗大多是复方汤剂治疗或者中西医结合治疗，针对个案较多，缺乏大量的临床数据统计资料。
梓醇是一种环烯醚萜单糖苷类化合物，分子式C15H22O10。梓醇广泛分布于合瓣花亚纲、马钱科醉鱼草属、玄参科泡梧属及地黄属、柴葳科樟属、列当科肉苁蓉属、车前科车前属等植物中，来源及其丰富。
Figure BSA00000822825500021
梓醇化学结构式
发明内容
本发明的目的是提供一种梓醇的新用途，以充分发挥梓醇在临床中的药用价值。
为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种梓醇的新用途，是指梓醇在制备治疗甲状腺功能亢进症的药物或保健食品中的应用。
一种梓醇的新用途，是指梓醇在制备治疗与甲状腺功能亢进症相关的甲亢性心脏病的药物或保健食品中的应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细、完整地说明。
1材料
1.1实验动物
清洁级昆明种小鼠，18-25克。
1.2药物
受试药物：梓醇(20g)。
对照药物：左旋甲状腺钠、甲巯咪唑片。
1.3试剂
碘[125I]三碘甲状腺原氨酸(T3)放射免疫分析药盒；碘[125I]甲状腺素(T4)放射免疫分析药盒；碘[125I]游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)放射免疫分析药盒；碘[125I]游离甲状腺素(FT4)放射免疫分析药盒。
1.4仪器
JA5003A电子天平；ECG-6511心电图机；CY-3型数字式测氧仪；SN-697放射免疫γ计数器；KK25E73TI西门子冰箱；Scanspeed mini离心机；DL-50RC低温离心机。
2方法
2.1动物模型制备
实验前置动物于室内适应环境2天。随机抽取20只昆明小鼠作为空白组，每天皮下注射生理盐水，其余小鼠每天皮下注射左旋甲状腺素钠350μg/kg，给药容量均为10ml/kg，连续给药7天。
于给药第6天三小时后，从空白组和模型组各随机抽取10只(雌雄各半)测其心率。通过麻醉后，用心电图计算小鼠心率，进而再进行统计分析，比较其差异性。
若心率明显加快，可于末次给药(第7天)后，当日晚八时开始禁食不禁水12h，于次日早上八时称量并记录各组小鼠体重，然后眼球取血，待凝血后，3500r/min离心15min，留取血清，采用放射免疫分析法测定T3、T4含量。处死小鼠，取其心脏，称取全心重量(HWI)与左心室重量(LVWI)，实验结束后计算全心重量指数与左心室重量指数。[全心重量指数HWI＝全心重量(HW)/体重(BW)；左心室重量指数(LVWI)＝左心室重量(LVW)/体重(BW)]
若这些水平明显提高，可视为模型制备成功。
2.2动物分组与给药
将造模成功的小鼠随机分为5组，每组10只，即分为甲亢模型组、梓醇低剂量组(简称梓低组)、梓醇高剂量组(简称梓高组)、甲巯咪唑组，再加上空白组(10只)。
梓醇低剂量组30mg/kg、梓醇高剂量组60mg/kg、甲巯咪唑组给予甲巯咪唑7.5mg/kg，分别进行灌胃给药，空白组和甲亢模型组灌胃等量的蒸馏水。连续20天，每天一次。除空白组外，其余各组每只每日均继续皮下注射甲状腺素钠350μg/kg。
2.3指标测定及方法
2.3.1小鼠外观行为的观察
实验期间全程观察并记录小鼠的整体情况，包括小鼠的精神状态、毛色变化、行为活动等。同时，每隔一天测量各组小鼠的进食量。
2.3.2小鼠体重变化的测定
于小鼠初次给药的前一天晚八时开始禁食不禁水12h，次日称取全部小鼠的体重(bodyweight，BW)，即治疗前体重(BW1)；于末次给药后，当日晚八时开始禁食不禁水12h，次日进行称量，即治疗后体重(BW2)，并计算治疗后与治疗前体重的差值，比较各组小鼠体重的变化情况。
2.3.3小鼠耗氧量测定
于末次给药前二天，测定小鼠的耗氧量。具体方法为：取CY-3型测氧仪，装入氧电极。连接并进行调零处理，并反复调试，稳定后待用。另取500ml抽滤玻璃瓶，将其外通玻璃管用胶皮套套牢，并用凡士林密封，胶皮套通过三通管相连，可通过三通管档位调换，选择与外界连通或密闭。测定时将小鼠放入瓶中，将抽滤瓶瓶口迅速用木塞塞紧，使瓶内外空气不相通，并将抽滤瓶横放与实验台上，同时开始计时，共计20min。20min末用注射器通过三通管吸取瓶内空气10ml，迅速注入CY-3测氧仪的进气管接口处，测氧仪显示所注入气体的含氧量，待稳定记录该数据，该数据为剩余氧含量，氧含量下降值＝21％-剩余氧含量(％)。(按空气中21％氧含量计算)
2.3.4小鼠心率的测定
于末次给药前一天，全部小鼠禁食不禁水12h，于次日给药3h左右测其心率。通过心电图计算小鼠心率(heart rate，HR)，进而再进行统计分析，比较其差异性。
2.3.5小鼠血浆甲状腺激素水平的测定
于小鼠末次给药后禁食不禁水12h，摘眼球取血后，3500r/min离心15min，吸取血浆，采用放射免疫分析法测定血清中的T3、T4、FT3、FT4的含量。具体操作均按放免试剂盒说明书进行。
2.3.6小鼠脏器指数的测定
处死小鼠，迅速开胸取心脏，称取全心重量(heart weight，HW)与左心室重量(leftventricular weight，LVW)，实验结束后计算全心重量指数(heart weight index，HWI)(HWI＝HW/BW)、左心室重量指数(left ventricular weight index，LVWI)(LVWI＝LVW/BW)。
2.4统计学方法
实验数据以均数±标差
Figure BSA00000822825500051
表示，采用SPSS 19.0统计软件进行分析，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较方差齐性用q检验，方差不齐用Dunnett’s T3检验。P＜0.05为有显著性差异。
3实验结果
3.1判定模型是否成功的结果
3.1.1对小鼠心率的影响
与空白组比较，造模第6天模型组小鼠心率(HR)明显加快，两者比较有极其显著性差异(P＜0.001)。(见表1)
表1注射左旋甲状腺钠6天对小鼠心率的影响
Figure BSA00000822825500052
Figure BSA00000822825500053
注：与空白组相比，△△△P＜0.001
3.1.2对小鼠血清T3、T4的影响
与空白组相比，连续给药7天后，模型组小鼠的T3、T4显著升高(P＜0.001)。(见表2)
表2注射左旋甲状腺素钠7天对小鼠血浆三碘甲状腺原氨酸及甲状腺素的影响
Figure BSA00000822825500054
Figure BSA00000822825500055
注：与空白组相比，△△△P＜0.001
3.1.3对小鼠心重指数的影响
与空白组相比，连续给药7天后，模型小鼠的全心重量指数和左心室重量指数有显著性增大(P＜0.001)。(见表3)
表3注射左旋甲状腺素钠7天对小鼠心脏指数的影响
Figure BSA00000822825500062
注1：与空白组相比，△△△P＜0.001
注2：HWI(全心重量指数)＝HW/BW，LVWI(左心室重量指数)＝LVW/BW
综上，模型组小鼠连续给药7天后，与空白组小鼠相比，其心率，血清中T3、T4含量以及心脏指数均有明显增大(P＜0.001)，故可认为造模成功，从而可以进行药物治疗。
3.2梓醇对甲亢模型小鼠外观行为的影响
实验过程中，空白组小鼠的活动情况、精神状况和毛色光泽均未见异常。而甲亢模型组小鼠第5日开始出现烦躁不安、活动频繁，易激怒，尤其在进行皮下注射时，其烦躁更加明显。饮食饮水量增多，鼠笼内潮湿，排泄物增多。与空白组相比，模型组小鼠毛色枯槁，无光泽。梓醇组小鼠较安静，烦躁、易激惹、毛色枯槁等较模型组症状轻。
3.3梓醇对甲亢模型小鼠体重的影响
各组小鼠治疗前体重、治疗后体重及两者的差值皆无显著性差异(P＞0.05)；但是有一定趋势：与空白组相比，模型组体重增加量较小。但与模型组相比，梓醇组和甲巯咪唑组的小鼠体重增加量都不同程度的大于模型组小鼠的体重增加量。(见表4)
表4 梓醇对甲亢模型小鼠体重的影响
Figure BSA00000822825500063
3.4梓醇对甲亢模型小鼠耗氧量的影响
与空白组小鼠相比，模型组小鼠的耗氧量明显增加，两者比较具有极其显著性差异(P＜0.001)。与模型组相比，梓醇低剂量组和甲巯咪唑组小鼠耗氧量明显降低，和模型组小鼠比较具有统计学意义(P＜0.05)。(见表5)
表5梓醇对甲亢模型小鼠耗氧量的影响
Figure BSA00000822825500071
Figure BSA00000822825500072
注：与空白组相比，△△△P＜0.001；与模型组性相比，▲P＜0.05
3.5梓醇对甲亢模型小鼠心率的影响
与空白组小鼠相比，模型组小鼠的心率明显增加，两者比较P＜0.001。与模型组相比，梓醇组和甲巯咪唑组小鼠的心率都有不同程度的减慢，其中梓醇高剂量组的小鼠心率和模型组相比，有显著性差异(P＜0.01)；梓醇低剂量组和甲巯咪唑组小鼠的心率明显减慢(P＜0.001)。(见表6)
表6梓醇对甲亢模型小鼠心率的影响
Figure BSA00000822825500073
Figure BSA00000822825500074
注：和空白组相比，△△△P＜0.001；与模型组相比，▲▲P＜0.01，▲▲▲P＜0.001
3.6梓醇对甲亢模型小鼠T3、T4的影响
与空白对照组小鼠相比，模型组小鼠血清T3水平明显增高，两者比较P＜0.001。与模型组相比，梓醇组和甲巯咪唑组小鼠的血清T3水平都有不同程度的下降：其中梓醇低剂量组、梓醇高剂量组和甲巯咪唑组小鼠分别与模型组小鼠相比，都具有显著性差异(P＜0.05)。(见表7)
与空白组小鼠相比，模型组小鼠血清T4.水平明显增高，两者比较P＜0.001。与模型组相比，给药组和甲巯咪唑组小鼠血清T4水平都有不同程度的下降，其中甲巯咪唑组小鼠分别与模型组小鼠相比，有显著性差异(P＜0.05)。(见表7)
表7梓醇对甲亢模型小鼠T3、T4的影响
Figure BSA00000822825500075
Figure BSA00000822825500076
Figure BSA00000822825500081
注：与空白组相比，△△△P＜0.001；与模型组相比，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01
3.7梓醇对甲亢模型小鼠FT3、FT4的影响
与空白对照组小鼠相比，模型组小鼠血清FT3水平明显增高，两者比较有极其显著性差异(P＜0.001)。与模型组小鼠相比，梓醇组和甲巯咪唑组小鼠血清FT3水平都有不同程度的下降：其中梓醇低剂量组小鼠与模型组小鼠相比，其血清FT3水平下降极其明显(P＜0.01)；梓醇高剂量组和甲巯咪唑组小鼠与模型组小鼠相比，血清FT3指标也具有显著性差异(P＜0.05)。(见表8)
与空白对照组小鼠相比，模型组小鼠血清FT4水平明显增高，两者比较有极其显著性差异(P＜0.001)。与模型组相比，梓醇组和甲巯咪唑组小鼠血清FT4水平都有不同程度的下降：其中，梓醇低剂量组小鼠与模型组小鼠相比，两者也具有显著性差异(P＜0.05)；梓醇高剂量组和甲巯咪唑组和模型组相比，两者无统计学意义(P＞0.05)。(见表8)
表8梓醇对甲亢模型小鼠FT3、FT4的影响
Figure BSA00000822825500082
Figure BSA00000822825500083
注：与空白组相比，△△△P＜0.001；与模型组相比，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05
3.8梓醇对甲亢模型小鼠心重指数的影响
与空白组小鼠相比，模型组小鼠的全心重量指数明显上升，两者比较P＜0.001。与模型组小鼠相比，给药组和甲巯咪唑组小鼠的全心重量指数都有不同程度的降低：其中梓醇高剂量组小鼠的全心重量指数和模型组小鼠相比，有显著性差异(P＜0.01)；甲巯咪唑组小鼠和模型组小鼠相比，全心重量指数也明显降低(P＜0.05)。(见表9)
与空白组小鼠相比，模型组小鼠的左心室重量指数明显上升，两者比较P＜0.001。与模型组小鼠相比，给药组和甲巯咪唑组小鼠的左心室重量指数都有不同程度的降低：其中梓醇高剂量组和甲巯咪唑组与模型组小鼠相比，左心室重量指数有显著性差异(P＜0.01)。(见表9)
表9梓醇对甲亢模型小鼠心重指数的影响
Figure BSA00000822825500091
Figure BSA00000822825500092
注1：与空白组相比，△△△P＜0.001；与模型组相比，▲▲P＜0.01，▲P＜0.05
注2：HWI(全心重量指数)＝HW/BW，LVWI(左心室重量指数)＝LVW/BW
4结论
对外观行为影响方面，梓醇组小鼠较安静，烦躁、易激惹、毛色枯槁等症状轻。对体重影响方面，梓醇组的小鼠体重增加量大于模型组小鼠的体重增加量。对耗氧量影响方面，梓醇低剂量组和模型组小鼠比较具有统计学意义(P＜0.05)。对心率影响方面，和模型组相比，梓醇高剂量组对小鼠减慢心率有显著性差异(P＜0.01)、梓醇低剂量组对减慢心率有显著差异(P＜0.001)。对T3的影响，梓醇组和模型组小鼠比较具有统计学意义(P＜0.05)；对FT3的影响，梓醇低剂量组小鼠与模型组小鼠相比，其血清FT3水平下降极其明显(P＜0.01)、梓醇高剂量组也具有显著性差异(P＜0.05)；对FT4的影响，与模型组相比，梓醇低剂量组小鼠与模型组小鼠相比，两者也具有显著性差异(P＜0.05)；梓醇高剂量组小鼠的全心重量指数、左心室重量指数和模型组小鼠相比，有显著性差异(P＜0.01)。
综上，梓醇组具有治疗甲亢和甲亢性心脏病的疗效。

Claims (2)

1.一种梓醇的新用途，其特征是指梓醇在制备治疗甲状腺功能亢进症的药物或保健食品中的应用。
2.一种梓醇的新用途，其特征是指梓醇在制备治疗与甲状腺功能亢进症相关的甲亢性心脏病的药物或保健食品中的应用。
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