CN103798044B - 甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法 - Google Patents
甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103798044B CN103798044B CN201410058578.2A CN201410058578A CN103798044B CN 103798044 B CN103798044 B CN 103798044B CN 201410058578 A CN201410058578 A CN 201410058578A CN 103798044 B CN103798044 B CN 103798044B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sweet potato
- stem
- wild species
- disease
- resistance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Abstract
本发明公开了一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法，属农作物近缘野生种病害抗性鉴定方法。将待鉴定的甘薯野生种栽种于盛有消毒土壤的花盆中，每盆栽种1棵。用根部滴加法向每棵野生种苗接种200头茎线虫，后在25℃，80%湿度，光周期14/10（L/D）的条件下培养。每天适量浇水，将花盆中土壤湿度控制在18-25%范围内。培养40天后，挖取野生种地下茎部分，用解剖剪将茎杆纵向剖开，测量茎杆内茎线虫病受害面积，根据受害部分占茎杆的比例划分病情指数，确定野生种的抗性等级。该鉴定方法处理手段科学有效，操作过程简单，实验周期短，且能够避免试验材料对环境造成的污染。试验结果能够全面的体现甘薯近缘野生种对茎线虫病的抗性水平。
Description
技术领域
本发明涉及一种农作物近缘野生种抗茎线虫病的抗性鉴定方法，具体的说是一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病的抗性鉴定方法，属于农业植物保护领域。
背景技术
我国是世界第一大甘薯生产国，近年甘薯种植面积约为7000万亩，占世界甘薯种植面积的50.0％左右。甘薯茎线虫病是影响甘薯产量和品质最为严重的病害之一，经南京农业大学丁再福等鉴定，甘薯茎线虫病的病原为马铃薯腐烂茎线虫（Ditylenchus destructor Thome），属线虫纲，垫刃目，茎线虫属。甘薯茎线虫病在我国主要分布在河北、河南、山东、山西、安徽、江苏等省。该病害在甘薯贮藏期可导致烂窖，育苗期可引起烂床。大田期甘薯受害后，薯块出现糠心，表皮龟裂等症状，一般年份可引起甘薯减产10-20％，严重年份可达50-60％，甚至绝收，现已成为我国北方薯区最为严重的病害之一。抗性育种是控制茎线虫病最为经济有效的方法，然而，在现有的甘薯品种中，可利用的抗性材料十分有限。自1949年以来，我国94%育成品种与南瑞苕和胜利百号有血缘关系，导致甘薯遗传背景狭窄，制约了甘薯品种改良的进度和质量。甘薯近缘野生资源十分丰富，其中很多野生种具有抗病虫害的优良基因，这为从根本上解决甘薯遗传基础狭窄，有效资源匮乏，品种遗传改良缓慢等问题提供了可能。因此开展甘薯近缘野生种有益性状鉴定工作能够有效的促进甘薯品种改良和对病虫害抗性的提高。与甘薯不同，并不是所有甘薯野生种都能形成块状根，所以打孔接种的抗线鉴定方法不适用于野生种，且目前尚未见标准的甘薯野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法。
发明内容
本发明提供一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法，操作过程简单，实验周期短，且能够避免试验材料对环境造成的污染。试验结果能够全面的体现甘薯近缘野生种对茎线虫病的抗性水平。是评价甘薯野生种抗茎线虫病抗性的有效方法。
本发明是以如下技术方案实现的：一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法，将待鉴定的甘薯野生种单棵栽种于花盆中，采用根部滴加法向每盆接种200头茎线虫，40天后挖取野生种地下茎部分，对茎线虫病的为害情况进行调查，评价甘薯野生种抗茎线虫病抗性；具体按如下步骤进行：
（1）茎线虫培养：在田间采集茎线虫病发病薯块，带回实验室后用浅盘法分离茎线虫；镜检确定为甘薯茎线虫后，用1%硫酸链霉素消毒，灭菌水冲洗3次，采用打孔法将茎线虫接种于茎线虫高感品种栗子香薯块中，用石蜡封口，置于25℃培养箱中培养，备用；
（2）待测材料准备：向直径为10cm的圆形塑料花盆中装入1kg灭菌后的土壤，将待测甘薯野生种栽种于花盆中，每盆栽种1棵。将甘薯野生种防治于植物生长间中，在25℃,80%湿度，光周期14/10（L/D）的条件下培养；每天；浇水，将花盆中土壤湿度大约控制在18-25%范围内；
（3）待甘薯野生种幼苗长出4片真叶时接入茎线虫。茎线虫接种时，先在幼苗根围打一深5cm的小孔，将5ml消毒的茎线虫悬浮液（含200头茎线虫）加入到小孔中，后用土将孔填平；每个鉴定的野生种栽种5盆，即5次重复，可以甘薯品种栗子香为感病对照；接种茎线虫40天后对茎线虫病的发病情况进行调查；
（4）发病情况调查：将野生种苗挖出后用清水冲洗干净，用解剖剪将地下茎剖开，测量受害部宽度，根据受害部所占比例对病害进行分级；
分级标准：
0级：全株不发病；
1级：开始发病，尚不明显；
2级：受害部达全株1/3；
3级：受害部达全株1/2；
4级：受害部达全株2/3；
5级：全株发病。
对样品进行分级后，根据以下公式计算病情指数：
分级标准：
高感：病指≥80%；感病：80%＞病指≥60%；中抗：60%＞病指≥40%；
抗病：40%＞病指≥20%；高抗：20%＞病指。
本发明的有益效果是：该鉴定方法处理手段科学有效，操作过程简单。采用室内盆栽的方法大大缩短了试验周期，不受季节限制，且能够避免试验材料对环境造成的污染。根部滴加法接种茎线虫，可同时评价鉴定样品的抗侵入性和抗扩展性，试验结果可更全面的体现野生种对茎线虫病的抗性水平。
附图说明
图1是不同茎线虫接种剂量在薯苗内种群增长情况。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明：
实施例1：
将待鉴定的甘薯野生种栽种于盛有1kg消毒土壤的花盆中，每盆栽种1棵；采用根部滴加法向每盆接种200头茎线虫，40天后挖取野生种地下茎部分，对茎线虫病的为害情况进行调查，评价甘薯野生种抗茎线虫病抗性；
（1）茎线虫培养：在田间采集茎线虫病发病薯块，带回实验室后用浅盘法分离茎线虫。镜检确定为甘薯茎线虫后，用1%硫酸链霉素消毒，灭菌水冲洗3次，采用打孔法将茎线虫接种于茎线虫高感品种栗子香薯块中，用石蜡封口，置于25℃培养箱中培养，备用。
（2）待测材料准备：向直径为10cm的圆形塑料花盆中装入1kg灭菌后的土壤，将待测甘薯野生种栽种于花盆中，每盆栽种1棵。将甘薯野生种防治于植物生长间中，在25℃,80%湿度，光周期14/10（L/D）的条件下培养。每天适量浇水，将花盆中土壤湿度大约控制在18-25%范围内。
（3）待甘薯野生种幼苗长出4片真叶时接入茎线虫。茎线虫接种时，先在幼苗根围打一深5cm的小孔，将5ml消毒的茎线虫悬浮液（含200头茎线虫）加入到小孔中，后用土将孔填平。每个鉴定的野生种栽种5盆，即5次重复，可以甘薯品种栗子香为感病对照。接种茎线虫40天后对茎线虫病的发病情况进行调查。
（4）发病情况调查：将野生种苗挖出后用清水冲洗干净，用解剖剪将地下茎剖开，测量受害部宽度，根据受害部所占比例对病害进行分级。
分级标准：
0级：全株不发病；
1级：开始发病，尚不明显；
2级：受害部达全株1/3；
3级：受害部达全株1/2；
4级：受害部达全株2/3；
5级：全株发病。
对样品进行分级后，根据以下公式计算病情指数：
分级标准：高感：病指≥80%；感病：80%＞病指≥60%；中抗：60%＞病指≥40%；抗病：40%＞病指≥20%；高抗：20%＞病指。
甘薯近缘野生种抗茎线虫病鉴定结果见表1.
表1.
Tab.1Resistance identification of wild species of sweet potato against potato rot nematode
结论：
从上述列举的鉴定结果可以看出：①利用盆栽甘薯近缘野生种，人工接种茎线虫的方法，能够准确的体现出不同甘薯近缘野生种对茎线虫病的抗性。②不同剂量接种表明，当接种剂量为100头和200头茎线虫时，甘薯抗、感对照品种郑红22和栗子香之间发病程度存在显著差异。当接种剂量增加到300头茎线虫时，抗感品种间无差异；接种剂量为200头茎线虫时，参试的各野生种和甘薯对照品种表现出与田间实验鉴定结果相一致的抗性鉴定结果，而接种100头茎线虫时，感病品种栗子香的病情指数仅为53.3%；综合上述研究结果，确定盆栽法鉴定甘薯近缘野生种抗性的适宜茎线虫接种剂量为200头/株。③表1中参试品种巴西牵牛和鸟卢在100头-300头茎线虫接种剂量下都未见明显的发病症状，表明二者很可能不是茎线虫的适宜寄主。
Claims (1)
1.一种甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法，其特征是：将待鉴定的甘薯近缘野生种单棵栽种于花盆中，采用根部滴加法向每盆接种200头茎线虫，40天后挖取甘薯近缘野生种地下茎部分，对茎线虫病的为害情况进行调查，评价甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性；具体按如下步骤进行：
(1)茎线虫培养：在田间采集茎线虫病发病薯块，带回实验室后用浅盘法分离茎线虫；镜检确定为甘薯茎线虫后，用1％硫酸链霉素消毒，灭菌水冲洗3次，采用打孔法将茎线虫接种于茎线虫高感品种栗子香薯块中，用石蜡封口，置于25℃培养箱中培养，备用；
(2)待测材料准备：向直径为10cm的圆形塑料花盆中装入1kg灭菌后的土壤，将待测甘薯近缘野生种栽种于花盆中，每盆栽种1棵；将甘薯近缘野生种放置于植物生长间中，在25℃,80％湿度，光周期14L/10D的条件下培养；每天浇水，将花盆中土壤湿度控制在18-25％范围内；
(3)待甘薯近缘野生种幼苗长出4片真叶时接入茎线虫；茎线虫接种时，先在幼苗根围打一深5cm的小孔，将5ml消毒的茎线虫悬浮液，含200头茎线虫加入到小孔中，后用土将孔填平；每个鉴定的甘薯近缘野生种栽种5盆，即5次重复，以甘薯品种栗子香为感病对照；接种茎线虫40天后对茎线虫病的发病情况进行调查；
(4)发病情况调查：将甘薯近缘野生种苗挖出后用清水冲洗干净，用解剖剪将地下茎剖开，测量受害部宽度，根据受害部所占比例对病害进行分级；
分级标准：
0级：全株不发病；
1级：开始发病，尚不明显；
2级：受害部达全株1/3；
3级：受害部达全株1/2；
4级：受害部达全株2/3；
5级：全株发病；
对样品进行分级后，根据以下公式计算病情指数：
分级标准：高感：病情指数≥80％；感病：80％＞病情指数≥60％；中抗：60％＞病情指数≥40％；抗病：40％＞病情指数≥20％；高抗：20％＞病情指数。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410058578.2A CN103798044B (zh) | 2014-02-21 | 2014-02-21 | 甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410058578.2A CN103798044B (zh) | 2014-02-21 | 2014-02-21 | 甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103798044A CN103798044A (zh) | 2014-05-21 |
| CN103798044B true CN103798044B (zh) | 2015-06-17 |
Family
ID=50695822
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410058578.2A Expired - Fee Related CN103798044B (zh) | 2014-02-21 | 2014-02-21 | 甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103798044B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105875231A (zh) * | 2016-04-12 | 2016-08-24 | 江苏徐州甘薯研究中心 | 一种甘薯茎线虫病室内抗侵入性鉴定方法 |
| CN107771561B (zh) * | 2017-10-14 | 2020-11-03 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种爪哇根结线虫的抗/耐病性鉴定方法 |
| CN109042273A (zh) * | 2018-10-29 | 2018-12-21 | 河南省农业科学院粮食作物研究所 | 观赏甘薯盆栽栽培方法 |
| CN111387051A (zh) * | 2020-05-12 | 2020-07-10 | 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心) | 一种优质抗病高产甘薯品种的育种方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101260422A (zh) * | 2008-04-10 | 2008-09-10 | 江苏徐州甘薯研究中心 | 甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法 |
| CN102318585A (zh) * | 2011-05-18 | 2012-01-18 | 江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所 | 一种纯化培养甘薯腐烂茎线虫的方法 |
| CN102972355A (zh) * | 2012-12-05 | 2013-03-20 | 华南农业大学 | 利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法 |
-
2014
- 2014-02-21 CN CN201410058578.2A patent/CN103798044B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101260422A (zh) * | 2008-04-10 | 2008-09-10 | 江苏徐州甘薯研究中心 | 甘薯茎线虫病抗扩展性鉴定方法 |
| CN102318585A (zh) * | 2011-05-18 | 2012-01-18 | 江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所 | 一种纯化培养甘薯腐烂茎线虫的方法 |
| CN102972355A (zh) * | 2012-12-05 | 2013-03-20 | 华南农业大学 | 利用甘薯愈伤组织繁殖培养和保存植物寄生线虫的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 甘薯品种资源抗茎线虫病鉴定;王庆美等;《作物品种资源》;19950421(第2期);第36～37页 * |
| 甘薯茎线虫病抗性鉴定方法及评价;谢逸萍等;《杂粮作物》;20020225;第22卷(第1期);第50～51页 * |
| 甘薯近缘野生种的抗病性鉴定与新型种间杂种的获得;曹清河等;《植物遗传资源学报》;20090616;第10卷(第2期);第224～229页 * |
| 章淑玲.甘薯线虫病害及线虫种类鉴定.《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(硕士) 农业科技辑》.2005,(第8期), * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103798044A (zh) | 2014-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103798044B (zh) | 甘薯近缘野生种抗茎线虫病抗性鉴定方法 | |
| CN104542265A (zh) | 一种杉木的诱变选育方法 | |
| CN109507368A (zh) | 一种苗期甘薯黑斑病精准抗性鉴定方法 | |
| CN105265320B (zh) | 一种绵毛马兜铃的组织培养繁殖方法 | |
| Gimenes et al. | Propagation of Cabralea canjerana by mini-cutting | |
| CN105766654B (zh) | 一种南川木菠萝组织培养方法 | |
| CN110301337A (zh) | 一种橡胶树扦插育苗方法 | |
| Esmaeilpour et al. | Evaluation of seed soaking times on germination percentage, germination rate and growth characteristics of pistachio seedlings | |
| CN102612962A (zh) | 一种甘薯黑斑病苗期抗性鉴定方法 | |
| CN108142281A (zh) | 一种杜仲组织培养方法 | |
| Ranagalage et al. | Allelopathic potential of improved rice (Oryza sativa L.) varieties against Echinochloa crus-galli L. | |
| CN110024685A (zh) | 一种水稻稻曲病抗病材料的选育方法 | |
| CN101743909B (zh) | 八角科植物“孩儿莲”的组织培养繁殖方法 | |
| CN102125064B (zh) | 一种设施菜地根结线虫根际综合调控剂及其应用方法 | |
| Akinyemi et al. | Effect of light regime and water stress on germination and seedling growth of Moringa oleifera Lam | |
| CN111492886A (zh) | 一种砂生槐种子直播的方法 | |
| CN104642110A (zh) | 石榴同源四倍体的诱导方法 | |
| KR20190050015A (ko) | 상추 시들음병 저항성 품종을 선별하기 위한 대량 접종 시스템 및 이를 이용한 저항성 자원의 선발 방법 | |
| Millangoda et al. | Does over-abundance of Bambusa bambos (L.) Voss. alter edaphic properties? | |
| Świerczyński et al. | Maiden pear trees growth in replant soil after inoculation of rootstocks with mycorrhizal inoculum | |
| Kabir et al. | Effects of varying temperature on the reproduction and damage potential of Heterodera schachtii to Chinese cabbage (Brassica rapa pekinensis) | |
| CN106962115A (zh) | 一种提高杨树抗病能力的方法 | |
| Qian et al. | DE building of tissue culture system and post-transplant quality comparison of ‘baihuayushizi’pomegranates (PUNICA GRANATUM L.) | |
| Ma et al. | Control effect on root-knot nematodes by hot water dipping treatment in kiwifruit | |
| CN105918116B (zh) | 一种植物单倍体加倍方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20150617 Termination date: 20160221 |