CN103777004B - 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法 - Google Patents

一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103777004B
CN103777004B CN201410051704.1A CN201410051704A CN103777004B CN 103777004 B CN103777004 B CN 103777004B CN 201410051704 A CN201410051704 A CN 201410051704A CN 103777004 B CN103777004 B CN 103777004B
Authority
CN
China
Prior art keywords
detection
staphylococcus aureus
gold
antibody
pad
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410051704.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103777004A (zh
Inventor
匡华
胥传来
孔德昭
马伟
徐丽广
宋珊珊
刘丽强
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201410051704.1A priority Critical patent/CN103777004B/zh
Publication of CN103777004A publication Critical patent/CN103777004A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103777004B publication Critical patent/CN103777004B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911—Bacteria
    • G01N33/56938—Staphylococcus
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G01N33/54386—Analytical elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
    • G01N2333/305—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Micrococcaceae (F)
    • G01N2333/31—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Micrococcaceae (F) from Staphylococcus (G)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，以及该免疫胶体金试纸条的制备方法，属于免疫检测技术领域。该试纸条由样品垫、涂覆金标标记抗SEE抗体1E5（CGMCC？No.7214）的金标垫，在检测线、质控线分别包被有抗SEE抗体2E3（CGMCC？No.7215）及羊抗鼠IgG的硝酸纤维素膜构成，依次按样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫粘附在PVC底板上。该试纸条操作简便、快速、准确，测试全过程只需5分钟，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL。本发明适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测。

Description

一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，以及该免疫胶体金试纸条的制备方法，可以实现金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测诊断，适用于大量样品的现场检测、食物中毒的快速检测与应急处理，属于免疫检测技术领域。
背景技术
金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）是一种常见的食源性致病菌，金黄色葡萄球菌分泌的肠毒素SEA、SEB、SEC、SED、SEE引起的中毒占金黄色葡萄球菌食物中毒的95%。
在食品加工过程中，经过热处理可以杀灭金黄色葡萄球菌，然而一旦菌体产生外分泌的肠毒素，那么存在于食物中的肠毒素非常稳定，100℃30min不被破坏，摄入人体后可以抵抗肠胃液中蛋白酶的分解，并引起人体的呕吐、腹泻等症状。2011年我国公布速冻面米制品新国标GB19295—2011，金黄色葡萄球菌由原来的不得检出变为限量检出，因此为了杜绝食品中金黄色葡萄球菌活菌数合格而肠毒素超标的情况，肠毒素的快速检测对于保障食品安全具有更加重要的意义。
近年来，ELISA凭借其灵敏、快速、特异性好、易于推广的特点越来越多地用于肠毒素的检测，但胶体金试纸条具有操作简单、稳定性高、不需要借助专门仪器、适合现场快速检测的优点，因此对于大量样品的现场检测、食物中毒的快速检测具有重要的意义。
发明内容
本发明目的在于提供一种检测金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，操作简单，快速方便，灵敏度高，稳定性好，成本低廉。
本发明另一个目的在于提供一种免疫胶体金试纸条的制备方法，包括抗SEE特异性抗体的制备，SEE双抗体检测抗体的筛选，SEE免疫胶体金检测试纸条的制备。该试纸条操作简便、快速、准确，检测全过程只需5分钟，不受环境条件的干扰，特异性好，检测灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL。本发明适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测。
本发明的技术方案，一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，包括PVC底板，在PVC底板两端分别设有样品垫和吸水垫；
PVC底板中部设置有硝酸纤维素膜检测层，在硝酸纤维素膜检测层与样品垫之间设置有金标垫；所述金标垫一端与样品垫相连接叠放，另一端叠放于硝酸纤维素膜检测层上；
所述硝酸纤维素膜检测层上依次设置有检测线和质控线。
所述金标垫包被有金标标记抗SEE抗体1E5（CGMCCNo.7214）。所述检测线上包被有抗SEE抗体2E3（CGMCCNo.7215）。所述质控线上包被有羊抗鼠IgG。
所述金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条的制备方法，金黄色葡萄球菌肠毒素E缩写为SEE，步骤为：
（1）抗SEE特异性单克隆抗体的制备：
以北京军事医学科学院提供的重组表达的SEE为免疫原，免疫8周龄的BALB/c小鼠，经免疫、细胞融合、筛选，共筛选到10个细胞株；
（2）特异性SEE双抗体检测抗体的筛选：
将步骤（1）纯化后的10株单克隆抗体分别标记辣根过氧化物酶HRP，直接法鉴定标记成功后进行双抗体夹心法配对，确定特异性免疫胶体金快速检测试纸条所需要抗SEE抗体；其中1E5为金标抗体，2E3为包被抗体；
（3）金黄色葡萄球菌肠毒素E免疫胶体金快速检测试纸条的制备：
a、空白胶体金的制备：
采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒，在锥形瓶中加入200mL去离子水和2mL质量浓度为1%的氯金酸，搅拌加热至沸腾，快速加入4mL质量浓度为1%的柠檬酸钠，继续加热15~20分钟，至呈亮红色，然后室温中冷却，4℃冷藏保存；
b、胶体金标记抗体的制备：
空白胶体金溶液用0.1MK2CO3调节PH值至7.4，搅拌中滴加适量浓度抗体，每毫升空白胶体金溶液加入30μg抗体1E5（CGMCCNo.7214），继续搅拌30分钟，离心，吸取上清，用金标抗体保存液重旋；
c、金标垫的制备：
调试三维平面点膜喷金仪仪器HM3055，将标记好胶体金的抗SEE抗体1E5（CGMCCNo.7214）均匀的喷在玻璃纤维膜上，喷液量0.6μL/cm，37℃烘干过夜，封袋备用；
d、包被膜的制备：
调试三维平面点膜喷金仪仪器HM3055，将稀释好的抗SEE抗体2E3（CGMCCNo.7215）均匀喷在硝酸纤维素膜上，得到检测线；将稀释好的羊抗鼠IgG均匀喷在硝酸纤维素膜上，得到质控线，喷液量为0.6μL/cm，37℃烘干过夜，封袋备用；
将PVC底板、硝酸纤维素膜检测层、样品垫、金标垫、检测线、质控线和吸水垫组合，即得产品金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条。
适用于海关、企业、医院、检验检疫单位等，可实现食品或临床样本中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测，最低检测限为0.25ng/mL。
本发明试纸条的工作原理：采用胶体金免疫层析技术，选用SEE特异性抗体作为固相物，利用双抗体夹心法原理检测样品中是否含有SEE。当待检样品中含有SEE时，抗原先和胶体金标记的抗SEE抗体（1E5）结合，由于层析作用复合物沿包被膜向前移动，当遇到检测线上的抗SEE抗体（2E3）时，形成抗体-抗原-金标抗体复合物，在检测线上富集，形成红色沉淀线。
本发明与现有技术相比具有如下优点：
1、检测速度快，全过程只需要5分钟即可，可以试验大批量样品的快速检测；
2、灵敏度高，最低检测限为0.25ng/mL；
3、操作简便，无需经过专业培训，易于推广；
4、不需要仪器，适合现场检测；
5、过程简单，直接上样检测，样本量少。
生物材料样品保藏：
1、一株单克隆细胞株，细胞株14号，株号为1E5，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，登记编号为CGMCCNo.7214，保藏曰期为2013年1月23日。
2、一株单克隆细胞株，细胞株15号，株号为2E3，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，登记编号为CGMCCNo.7215，保藏曰期为2013年1月23日。
附图说明
图1是本发明试纸条结构主视图。
图2是本发明试纸条结构俯视图。
附图标记说明：1、PVC底板；2、硝酸纤维素膜检测层；3、样品垫；4、金标垫；5、检测线（T线）；6、质控线（C线）；7、吸水垫。
具体实施方式
实施例1
如图1-2所示，一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，包括PVC底板1，在PVC底板1两端分别设有样品垫3和吸水垫7；
PVC底板1中部设置有硝酸纤维素膜检测层2，在硝酸纤维素膜检测层2与样品垫3之间设置有金标垫4；所述金标垫4一端与样品垫3相连接叠放，另一端叠放于硝酸纤维素膜检测层2上；
所述硝酸纤维素膜检测层2上依次设置有检测线5和质控线6。
所述金标垫4包被有金标标记抗SEE抗体1E5。所述检测线5上包被有抗SEE抗体2E3。所述质控线6上包被有羊抗鼠IgG。
实施例2
所述金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条的制备方法，金黄色葡萄球菌肠毒素E缩写为SEE，步骤为：
（1）抗SEE特异性单克隆抗体的制备：
以重组表达的SEE（北京军事医学科学院）为免疫原，免疫8周龄的BALB/c小鼠，免疫程序如下：第一周进行首免，10μg/只，弗氏完全佐剂乳化后皮下多点注射；第四周进行二免，8μg/只，弗氏不完全佐剂乳化后皮下多点注射；第六周进行三免，6μg/只，弗氏不完全佐剂乳化后皮下多点注射；第七周尾部采血测效价，选择效价最高的小鼠；第八周进行冲刺免疫，4μg/只，生理盐水溶解，腹腔注射；冲刺免疫3天后眼眶采血后进行融合。筛选采用间接ELISA进行，共筛选到10个细胞株；
（2）特异性SEE双抗体检测抗体的筛选：
将步骤（1）纯化后的10株单克隆抗体分别标记辣根过氧化物酶HRP，直接法鉴定标记成功后进行双抗体夹心法配对，确定特异性免疫胶体金快速检测试纸条所需要抗SEE抗体；其中1E5为金标抗体，2E3为包被抗体；
（3）金黄色葡萄球菌肠毒素E免疫胶体金快速检测试纸条的制备：
a、空白胶体金的制备：
采用柠檬酸盐还原法制备胶体金颗粒，在锥形瓶中加入200mL去离子水和2mL质量浓度为1%的氯金酸，搅拌加热至沸腾，快速加入4mL质量浓度为1%的柠檬酸钠，继续加热15~20分钟，至呈亮红色，然后室温中冷却，4℃冷藏保存；
b、胶体金标记抗体的制备：
空白胶体金溶液用0.1MK2CO3调节pH值至7.4，搅拌中滴加适量浓度抗体，每毫升空白胶体金溶液加入30μg抗体1E5，继续搅拌30分钟，离心，吸取上清，用金标抗体保存液重旋；
c、金标垫的制备：
调试三维平面点膜喷金仪仪器HM3055，将标记好胶体金的抗SEE抗体1E5均匀的喷在玻璃纤维膜上，喷液量0.6μL/cm，37℃烘干过夜，封袋备用；
d、包被膜的制备：
调试三维平面点膜喷金仪仪器HM3055，将稀释好的抗SEE抗体2E3均匀喷在硝酸纤维素膜上，得到检测线；将稀释好的羊抗鼠IgG均匀喷在硝酸纤维素膜上，得到质控线，喷液量为0.6μL/cm，37℃烘干过夜，封袋备用；
将PVC底板1、硝酸纤维素膜检测层2、样品垫3、金标垫4、检测线5、质控线6和吸水垫7组合，即得产品金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条。
本发明试纸条的工作原理：采用胶体金免疫层析技术，选用SEE特异性抗体作为固相物，利用双抗体夹心法原理检测样品中是否含有SEE。当待检样品中含有SEE时，抗原先和胶体金标记的抗SEE抗体（1E5）结合，由于层析作用复合物沿包被膜向前移动，当遇到检测线上的抗SEE抗体（2E3）时，形成抗体-抗原-金标抗体复合物，在检测线上富集，形成红色沉淀线。
检测时如样品为阴性，则试纸条只有质控线C线显色；如果样品为阳性，肠毒素E含量值大于0.25ng/mL，则试纸条质控线C线、检测线T线均显色。如果试纸条C线不显色，则说明试纸条质量出现问题。

Claims (1)

1.一种金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条的应用，其特征在于：金标垫（4）上包被有金标标记抗SEE抗体1E5，即CGMCCNo.7214所分泌的单克隆抗体；检测线（5）上包被有抗SEE抗体2E3，即CGMCCNo.7215所分泌的单克隆抗体；用于食品中金黄色葡萄球菌肠毒素E的快速检测，最低检测限为0.25ng/mL；
所述金黄色葡萄球菌肠毒素E的免疫胶体金快速检测试纸条，包括PVC底板（1），在PVC底板（1）两端分别设有样品垫（3）和吸水垫（7）；
PVC底板（1）中部设置有硝酸纤维素膜检测层（2），在硝酸纤维素膜检测层（2）与样品垫（3）之间设置有金标垫（4）；所述金标垫（4）一端与样品垫（3）相连接叠放，另一端叠放于硝酸纤维素膜检测层（2）上；
所述硝酸纤维素膜检测层（2）上依次设置有检测线（5）和质控线（6）。
CN201410051704.1A 2014-02-14 2014-02-14 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法 Active CN103777004B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410051704.1A CN103777004B (zh) 2014-02-14 2014-02-14 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410051704.1A CN103777004B (zh) 2014-02-14 2014-02-14 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103777004A CN103777004A (zh) 2014-05-07
CN103777004B true CN103777004B (zh) 2015-12-02

Family

ID=50569494

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410051704.1A Active CN103777004B (zh) 2014-02-14 2014-02-14 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103777004B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104280555B (zh) * 2014-10-24 2017-09-26 江南大学 一种快速检测花生过敏原Ara h 2的胶体金试纸条及其制备方法
CN105353128B (zh) * 2015-10-16 2017-01-25 江南大学 一种同时检测5种金黄色葡萄球菌肠毒素 a、b、c、d、e的胶体金试纸条及其制备方法
CN115980343B (zh) * 2023-03-21 2023-07-07 北京大学 一种化学发光法侧流免疫检测方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1880961A (zh) * 2006-04-18 2006-12-20 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 一种检测b型金黄色葡萄球菌肠毒素的免疫层析试纸及其制备方法
CN1955739A (zh) * 2005-10-26 2007-05-02 吴斌 葡萄球菌肠毒素快速检测试剂条
CN101561435A (zh) * 2009-06-05 2009-10-21 中国检验检疫科学研究院 一种金葡菌肠毒素b型(seb)胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN101666802A (zh) * 2009-07-29 2010-03-10 中国检验检疫科学研究院 定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素b的胶体金免疫层析方法以及胶体金免疫检测试纸条
CN102768275A (zh) * 2012-07-10 2012-11-07 北京陆桥技术有限责任公司 金黄色葡萄球菌肠毒素检测试剂盒及其制备方法和应用
CN203732545U (zh) * 2014-02-14 2014-07-23 江南大学 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101332336B1 (ko) * 2013-05-07 2013-11-22 (주)래피젠 프로존 효과를 회피할 수 있는 면역크로마토그래피 스트립 및 이를 포함하는 키트

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1955739A (zh) * 2005-10-26 2007-05-02 吴斌 葡萄球菌肠毒素快速检测试剂条
CN1880961A (zh) * 2006-04-18 2006-12-20 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 一种检测b型金黄色葡萄球菌肠毒素的免疫层析试纸及其制备方法
CN101561435A (zh) * 2009-06-05 2009-10-21 中国检验检疫科学研究院 一种金葡菌肠毒素b型(seb)胶体金试纸条及其制备方法和应用
CN101666802A (zh) * 2009-07-29 2010-03-10 中国检验检疫科学研究院 定量检测金黄色葡萄球菌肠毒素b的胶体金免疫层析方法以及胶体金免疫检测试纸条
CN102768275A (zh) * 2012-07-10 2012-11-07 北京陆桥技术有限责任公司 金黄色葡萄球菌肠毒素检测试剂盒及其制备方法和应用
CN203732545U (zh) * 2014-02-14 2014-07-23 江南大学 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Detection of Staphylococcal Enterotoxins by Enzyme-Linked Immunosorbent Assays and Radioimmunoassays: Comparison of Monoclonal and Polyclonal Antibody Systems;NANCY E. THOMPSON et al;《APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY》;19860531;第51卷(第5期);摘要，第885页右栏第2-3段，表1、表2，第886页右栏倒数第2段至第887页左栏第一段，第888页左栏最后一段至第889页左栏第6段，第889页右栏倒数第1段至第890页左栏第1段 *
Development and application of immunochromatographic tests for the detection of staphylococcal enterotoxin E;Meret Lakner,et al;《Food and Agricultural Immunology》;19981231;第10卷(第3期);摘要、第250页第3段至第252页图1，第253页第7行至第255页第2段 *
快速检测食品中金黄色葡萄球菌及其肠毒素型的研究进展;李荔枝等;《江西农业学报》;20111231;第23卷(第08期);144-146 *
金黄色葡萄球菌肠毒素检测方法研究进展;张俊伟等;《浙江预防医学》;20070930;第19卷(第09期);63-65 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103777004A (zh) 2014-05-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102735851B (zh) 一种猪肺炎支原体多重组抗原elisa检测试剂盒
CN105116146B (zh) 纳米免疫磁珠技术联合胶体金层析快速检测单增李斯特菌
CN104593332B (zh) 一种检测小麦矮腥黑粉菌的试剂盒及方法
CN102426229B (zh) 一种用于富集金黄色葡萄球菌的人IgG免疫磁珠的制备方法及应用
CN103777004B (zh) 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法
CN106018799A (zh) 一种沙门氏菌的检测试纸及其制备方法
CN102830229A (zh) 梅毒螺旋体IgM抗体胶体金法检测试剂及其制备方法
CN104237521B (zh) 检测甲砜霉素、氯霉素及氟苯尼考三合一胶体金层析试纸条及其制备方法
CN102087294A (zh) 一种疟疾免疫层析快速检测试纸条及其制备方法
CN103076450A (zh) 一种检测副猪嗜血杆菌病抗体的试纸条及其制备方法
CN103760354A (zh) 一种金黄色葡萄球菌肠毒素d的免疫胶体金快速检测试纸条及其制备方法
CN105821133A (zh) 一种同时检测副溶血弧菌、大肠杆菌o157:h7、沙门氏菌和志贺氏菌的试剂盒
CN203732543U (zh) 一种金黄色葡萄球菌肠毒素d的免疫胶体金快速检测试纸条
CN203732545U (zh) 一种金黄色葡萄球菌肠毒素e的免疫胶体金快速检测试纸条
CN105237634A (zh) 一种蜡样芽孢杆菌单克隆抗体制备方法及应用
CN104130979A (zh) 阪崎肠杆菌单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用
Coutu et al. Development of a highly specific sandwich ELISA for the detection of Listeria monocytogenes, an important foodborne pathogen
CN105353128B (zh) 一种同时检测5种金黄色葡萄球菌肠毒素 a、b、c、d、e的胶体金试纸条及其制备方法
CN204287191U (zh) 一种水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的二合一免疫胶体金快速检测试纸条
CN101900727A (zh) 一种应用Rv3872新型融合蛋白制备的牛结核抗体鉴别检测试纸条
CN103792362B (zh) 出血性大肠杆菌o157:h7免疫胶体金快速检测试纸条
CN106950368B (zh) 一种病原性溶藻弧菌的检测试纸
Arakawa et al. Production of monoclonal antibodies against Renibacterium salmoninarum.
CN101000345B (zh) 一种检测霍乱弧菌的免疫层析试纸及其制备方法
CN103941012B (zh) 李斯特菌免疫胶体金快速检测试纸条

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: 214016 Jiangsu city of Wuxi Province District Liangxi No. 898 South Road 7 layer beam Creek area of food science and Technology Park

Patentee after: Jiangnan University

Address before: Food College of Jiangnan University No. 1800 Li Lake Avenue 214122 in Jiangsu province Wuxi City Binhu District

Patentee before: Jiangnan University

CP02 Change in the address of a patent holder