CN103751253B - 一种治疗猪瘟的兽用药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种治疗猪瘟的兽用药物组合物，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：黄芪多糖提取物1～3份、金银花提取物4～6份。本发明还提供了兽用药物组合物的制备方法和用途。本发明通过特定方法制备的黄芪多糖提取物和金银花提取物联合使用后，发挥了协同增效作用，显著提高了单一药物对猪瘟的预防或治疗活性，为临床用药提供了新的选择。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗猪瘟的兽用药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术
猪瘟俗称“烂肠瘟”，是由黄病毒科猪瘟病毒属的猪瘟病毒引起的一种急性、发热、接触性传染传染病。具有高度传染性和致死性。是威胁养猪业的主要传染病之一，其特征是：急性，呈败血性变化，实质器官出血，坏死和梗死；慢性呈纤维素性坏死性肠炎，后期常有副伤寒及巴氏杆菌病继发。1885年首先在美国发现，以后传播到世界各大洲。中国大部分省都有发生。1903年美国兽医学家德希尼兹和多赛特鉴定本病的病原是披盖病毒科的瘟病毒属（Pestivirus）中的猪瘟病毒。主要通过直接接触，或由于接触污染的媒介物而发病。消化道、鼻腔粘膜和破裂的皮肤均是感染途径。一年四季都可发生，以春夏多雨季节为多。
预防猪瘟最有效的方法就是接种猪瘟疫苗，目前市售的猪瘟疫苗有三种，分别是乳兔苗、细胞苗和淋脾苗。除使用疫苗治疗外，中药治疗猪瘟也是常用的治疗手段之一，例如专利公开号：CN102302570A，公开了一种清热解毒的中药粉剂，其原料药包括荆芥、防风、升麻、连翘、大黄、车前子和雄黄等药物。除单用中药治疗外，还有人采用中西药联合治疗的方式，如专利号：201110291383.9,公开了一种治疗猪瘟的复方中药组合物，包括蜂胶、猪用干扰素、贯众、夏枯草、石膏、蒲公英、知母和大黄。
但目前常用于治疗猪瘟的中药复方制剂中，药味较多，原料成本较高，不利于产业上的实际使用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种对猪瘟有良好治疗效果、药味配伍精当的药物组合物及其制备方法和用途。
本发明提供了一种治疗猪瘟的兽用药物组合物，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：
黄芪多糖提取物1～3份、金银花提取物4～6份；
其中，黄芪多糖提取物的制备方法如下：取黄芪，粉碎后，加水，调节pH4.5-6.5，并按活性酶：黄芪=10-15U/g的比例加入纤维素酶，在40-50℃下浸提，过滤，滤液备用，滤渣再加水在40-50℃下浸提，过滤，合并两次滤液，再浓缩100℃下测得至相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
金银花提取物的制备方法如下：取金银花，加水，调节pH4.0-6.0，40-50℃下浸提，过滤，滤液备用，滤渣再加水在40-50℃下浸提，合并两次滤液，浓缩，再分别加入清膏4倍量、5倍量的95％v/v乙醇沉淀两次，取上清液，回收乙醇，再浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物。
本发明中使用的纤维素酶购自于市售产品，可用于水解纤维素。
进一步地，它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：
黄芪多糖提取物2份、金银花提取物5份。
进一步地，进一步地，黄芪多糖提取物的制备方法如下：取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶，40-50℃浸泡1-2小时，过滤，滤液备用，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次滤液，再浓缩至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
金银花提取物的制备方法如下：将金银花与其重量8-10倍水混合，加入冰醋酸调节pH4-6.0，40-50℃浸泡1-2小时，过滤，滤液备用，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次滤液，浓缩，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％v/v乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物。
其中，所述制剂为注射剂，其中，每10万ml注射液中，含有黄芪多糖提取物1～3Kg、金银花提取物4～6Kg、依地酸二钠0.02-0.08Kg、吊白块0.2-0.4Kg、防腐剂0.01-0.03Kg、80-120ml非离子表面活性剂和pH调节剂，余量为水；其中，注射液pH为5-7。
进一步地，每10万ml注射液中，含有黄芪多糖提取物2Kg、金银花提取物5Kg、依地酸二钠0.05Kg、吊白块0.3Kg、防腐剂0.01Kg、100ml非离子表面活性剂和pH调节剂，余量为水。
更进一步地，所述防腐剂为苯甲酸钠，所述非离子表面活性剂为吐温、司盘或两者的混合物；优选地，所述吐温为吐温80，所述司盘为司盘80；吐温和司盘的混合物中两者的比例为1:1v/v。
其中，所述pH调节剂选自冰醋酸或氢氧化钠。调节pH时，可以根据溶液的酸碱度自行选择合适的pH调节剂。
本发明还提供了上述注射剂的制备方法，它包括如下工艺步骤：
取注射用水5-7万ml，依次加入依地酸二钠、吊白块、防腐剂、黄芪多糖提取物、金银花提取物、非离子表面活性剂，混匀后，加水至10万ml，调节pH至5-7，过滤，分装，115℃灭菌，包装，即得。
本发明还提供了上述兽用药物组合物在制备预防、治疗或辅助治疗猪瘟的药物中的用途。
本发明还提供了猪瘟疫苗和上述兽用药物组合物在制备联合用于预防或治疗猪瘟的药物中的用途。
本发明通过特定方法制备的黄芪多糖提取物和金银花提取物联合使用后，发挥了协同增效作用，显著提高了单一药物对猪瘟的预防或治疗活性，为临床用药提供了新的选择。
另外，本发明将适宜的原辅料制备成注射液后，成品澄明度良好，符合注射液的相关规定。将本发明注射液与猪瘟疫苗联合使用后，对猪瘟的预防和治疗作用异常良好，为对抗猪瘟提供了新的联合用药。
具体实施方式
实施例1
（1）黄芪多糖提取物的制备：
取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶（杭州贝奥生物技术工程有限公司购买），恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，再浓缩温度至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
（2）金银花提取物的制备：
将金银花与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，加入冰醋酸调节pH4-6.0，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，将浓缩后的清膏自然冷却至40℃以下，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物；
（3）注射液的制备：
取注射用水6万ml，依次加入0.05kg依地酸二钠、0.3kg吊白块、0.01Kg苯甲酸钠、2kg黄芪多糖提取物、5Kg金银花提取物、加入100ml（吐温80和司班80按照1:1混合），混匀后，加水至10万ml，用冰醋酸或者10%氢氧化钠溶液调节pH5-7，过滤，分装，灭菌115℃灭菌30分钟，包装，即得。
实施例2
（1）黄芪多糖提取物的制备：
取黄芪，粉碎后，与其重量10-15倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，再浓缩温度至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
（2）金银花提取物的制备：
将金银花与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，加入冰醋酸调节pH4-6.0，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，将浓缩后的清膏自然冷却至40℃以下，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物；
（3）注射液的制备：
取注射用水6万ml，依次加入0.05kg依地酸二钠、0.3kg吊白块、0.01Kg苯甲酸钠、2kg黄芪多糖提取物、5Kg金银花提取物、加入100ml（吐温80和司班80按照1:1混合）、加水至10万ml，用冰醋酸或者10%氢氧化钠溶液调节pH5-7，过滤，分装，灭菌115℃灭菌30分钟，包装，即得。
实施例3
（1）黄芪多糖提取物的制备：
取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，再浓缩温度至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
（2）金银花提取物的制备：
将金银花与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，加入冰醋酸调节pH4-6.0，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，将浓缩后的清膏自然冷却至40℃以下，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物；
（3）注射液的制备：
取注射用水6万ml，依次加入0.05kg依地酸二钠、0.3kg吊白块、0.01Kg苯甲酸钠、2kg黄芪多糖提取物、5Kg金银花提取物、加入100ml吐温80、加水至10万ml，用冰醋酸或者10%氢氧化钠溶液调节pH5-7，过滤，分装，灭菌115℃灭菌30分钟，包装，即得。
实施例4
（1）黄芪多糖提取物的制备：
取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪15-20U/g的比例加入纤维素酶，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，再浓缩温度至相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
（2）金银花提取物的制备：
将金银花与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，加入冰醋酸调节pH4-6.0，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，将浓缩后的清膏自然冷却至40℃以下，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物；
（3）注射液的制备：
取注射用水6万ml，依次加入0.05kg依地酸二钠、0.3kg吊白块、0.01Kg苯甲酸钠、2kg黄芪多糖提取物、5Kg金银花提取物、加入100ml司班80、加水至10万ml，用冰醋酸或者10%氢氧化钠溶液调节pH5-7，过滤，分装，灭菌115℃灭菌30分钟，包装，即得。
实施例5
（1）黄芪多糖提取物的制备：
取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，再浓缩温度至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
（2）金银花提取物的制备：
将金银花与其重量10-15倍水混合，加热至40-50℃，加入冰醋酸调节pH4-6.0，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，将浓缩后的清膏自然冷却至40℃以下，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物；
（3）注射液的制备：
取注射用水6万ml，依次加入0.05kg依地酸二钠、0.3kg吊白块、0.01Kg苯甲酸钠、2kg黄芪多糖提取物、5Kg金银花提取物、加入100ml（吐温80和司班80按照1:1混合）、加水至10万ml，用冰醋酸或者10%氢氧化钠溶液调节pH5-7，过滤，分装，灭菌115℃灭菌30分钟，包装，即得。
实施例6
（1）黄芪多糖提取物的制备：
取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，再浓缩温度至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
（2）金银花提取物的制备：
金银花提取物的制备：
将金银花与其重量10-15倍水混合，加热至40-50℃，加入冰醋酸调节pH4-6.0，恒温浸泡1-2小时，过滤，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次提取液，将浓缩后的清膏自然冷却至40℃以下，在搅拌下分别加入清膏2倍量、3倍量的95％乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物；
（3）注射液的制备：
取注射用水6万ml，依次加入0.05kg依地酸二钠、0.3kg吊白块、0.01Kg苯甲酸钠、2kg黄芪多糖提取物、5Kg金银花提取物、加入100ml（吐温80和司班80按照1:1混合）、加水至10万ml，用冰醋酸或者10%氢氧化钠溶液调节pH5-7，过滤，分装，灭菌115℃灭菌30分钟，包装，即得。
经后期观察和使用发现，以上实施例所得注射液中，仅实施例1制备的注射剂澄明度和药效活性最佳。
以下通过试验例具体说明本发明的有益效果。
试验例1临床试验
某大型养殖场随机抽取大猪1500头，从猪体内未分离出猪瘟病毒，在注射猪瘟脾淋苗前同时注射本品来观察其对猪瘟脾淋苗免疫效果的影响。试验随机分为3组。
表1
其中，2%黄芪多糖注射液是由本发明实施例1制备的黄芪多糖提取物制备而成，其中，黄芪多糖提取物含量为2g/100ml。
由上述试验可知，本发明复方注射液能够提高猪只对猪瘟的预防作用；并且，复方注射液仅使用0.05ml/Kg时，其黄芪多糖提取物含量仅为2%黄芪多糖注射液组中含量的50%，但预防作用却显著提高，表明金银花提取物的配伍使用，也增强了黄芪多糖提取物的药效活性。
试验例2临床试验
某大型养殖场随机抽取发病猪150头，从猪体内分离出猪瘟病毒，药物配合疫苗进行治疗。试验随机分为3组。
表1
其中，2%黄芪多糖注射液是由本发明实施例1制备的黄芪多糖提取物制备而成，其中，黄芪多糖提取物含量为2g/100ml。
由上述试验可知，本发明复方注射液能够提高对猪瘟的治疗作用；并且，复方注射液仅使用0.1ml/Kg时，其黄芪多糖提取物含量仅为2%黄芪多糖注射液组中含量的50%，但对猪瘟的治愈作用却显著提高了200%，表明金银花提取物的配伍使用，显著增强了黄芪多糖提取物的药效活性。
Claims (11)
1.一种治疗猪瘟的兽用药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：
黄芪多糖提取物1～3份、金银花提取物4～6份；
其中，黄芪多糖提取物的制备方法如下：取黄芪，粉碎后，加水，调节pH4.5-6.5，并按活性酶：黄芪＝10-15U/g的比例加入纤维素酶，在40-50℃下浸提，过滤，滤液备用，滤渣再加水在40-50℃下浸提，过滤，合并两次滤液，再浓缩至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
金银花提取物的制备方法如下：取金银花，加水，调节pH4.0-6.0，40-50℃下浸提，过滤，滤液备用，滤渣再加水在40-50℃下浸提，合并两次滤液，浓缩，再分别加入清膏4倍量、5倍量的95％v/v乙醇沉淀两次，取上清液，回收乙醇，再浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物。
2.根据权利要求1所述的兽用药物组合物，其特征在于：它是由如下重量配比的原料药制备而成的制剂：
黄芪多糖提取物2份、金银花提取物5份。
3.根据权利要求1所述的兽用药物组合物，其特征在于：黄芪多糖提取物的制备方法如下：取黄芪，粉碎后，与其重量8-10倍水混合，加热至40-50℃，冰醋酸调节pH4.5-6.5，并按活性酶与黄芪10-15U/g的比例加入纤维素酶，40-50℃浸泡1-2小时，过滤，滤液备用，滤渣用黄芪重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次滤液，再浓缩至100℃下测得相对密度为1.3-1.35，得到黄芪多糖提取物；
金银花提取物的制备方法如下：将金银花与其重量8-10倍水混合，加入冰醋酸调节pH4-6.0，40-50℃浸泡1-2小时，过滤，滤液备用，滤渣用金银花重量6-10倍的水40-50℃浸泡1-1.5小时，合并两次滤液，浓缩，在搅拌下分别加入清膏4倍量、5倍量的95％v/v乙醇沉淀两次，每次静置48小时，滤取上清液；将醇提取后的上清液回收乙醇并浓缩至100℃下测得相对密度为1.30～1.35，得到金银花提取物。
4.根据权利要求1或2所述的兽用药物组合物，其特征在于：所述制剂为注射剂，其中，每10万ml注射液中，含有黄芪多糖提取物1～3Kg、金银花提取物4～6Kg、依地酸二钠0.02-0.08Kg、吊白块0.2-0.4Kg、防腐剂0.01-0.03Kg、80-120ml非离子表面活性剂和pH调节剂，余量为水；其中，注射液pH为5-7。
5.根据权利要求4所述的兽用药物组合物，其特征在于：每10万ml注射液中，含有黄芪多糖提取物2Kg、金银花提取物5Kg、依地酸二钠0.05Kg、吊白块0.3Kg、防腐剂0.01Kg、100ml非离子表面活性剂和pH调节剂，余量为水。
6.根据权利要求4或5所述的兽用药物组合物，其特征在于：所述防腐剂为苯甲酸钠，所述非离子表面活性剂为吐温、司盘或两者的混合物。
7.根据权利要求6所述的兽用药物组合物，其特征在于：所述吐温为吐温80，所述司盘为司盘80；吐温和司盘的混合物中两者的比例为1:1v/v。
8.根据权利要求4或5所述的兽用药物组合物，其特征在于：所述pH调节剂选自冰醋酸或氢氧化钠。
9.权利要求4所述注射剂的制备方法，其特征在于：它包括如下工艺步骤：
取注射用水5-7万ml，依次加入依地酸二钠、吊白块、防腐剂、黄芪多糖提取物、金银花提取物、非离子表面活性剂，混匀后，加水至10万ml，调节pH至5-7，过滤，分装，115℃灭菌，包装，即得。
10.权利要求1～8任意一项所述兽用药物组合物在制备预防、治疗或辅助治疗猪瘟的药物中的用途。
11.猪瘟疫苗和权利要求1～8任意一项所述兽用药物组合物在制备联合用于预防或治疗猪瘟的药物中的用途。
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Non-Patent Citations (1)
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| 常用中药制剂在猪病防控中的科学应用;万遂如;《养猪》;20121231(第6期);第121-126页 * |
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