CN103717206A - 用于肽分子和多肽分子的受控释放的基质组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供用于肽分子的受控释放的、包括脂质饱和的基质和与PEG结合的肽分子的组合物,所述脂质饱和的基质包括生物相容的聚合物。本发明还提供产生基质组合物的方法和利用基质组合物以提供肽分子的受控释放的方法。
Description
发明领域
本发明提供用于肽分子的受控释放的、包括脂质饱和的基质和与PEG结合的肽分子的组合物,所述脂质饱和的基质包括生物相容的聚合物。本发明还提供产生基质组合物的方法和利用基质组合物以提供肽活性分子的受控释放的方法。
发明背景
在过去的几十年中不同的肽类或蛋白质类的潜在的治疗或诊断效果已被集中研究,且多种疾病和临床病症通过施用这种药物活性剂来治疗。然而,肽分子的使用的技术障碍是对它们的递送及持续释放和/或受控释放的实用的、有效的和安全的手段的需求。
用于生物活性剂,特别是治疗剂的基于脂质的递送系统在药物科学领域中是众所周知的。通常,它们被用于配制具有差的生物利用度或高毒性或两者兼具的剂。在已获得接受的普遍的剂量形式中有包括小的单层囊泡、多层囊泡及许多其他类型的脂质体的许多不同类型的脂质体;包括油包水乳液、水包油乳液、水包油包水双乳液、亚微米乳液、微米乳液的不同类型的乳剂;胶束和许多其他疏水性药物载体。基于脂质的递送系统的这些类型可以是高度专门化的以允许靶向递送或减小毒性或增加代谢稳定性等等。在数天、数周和更长的范围内的生物活性剂的延长释放不是通常与体内基于脂质的递送系统关联的特征。
理想地持续释放药物递送系统应当展示由使用的特定赋形剂的类型和比例容易地控制的动力学特征和其他特征。有利地,持续释放药物递送系统应当为亲水性药物、两亲性药物以及疏水性药物提供提供解决方案。
长期以已理解的是,以不提供受控释放的方式施用治疗剂可导致其水平的大幅振荡,有时达到可以中毒或产生不期望的副作用的浓度,且在其他时候下降至治疗功效所要求的水平以下。使用用于受控释放的设备和/或方法的主要目标是在治疗剂的全身水平方面产生更大的控制。
已经展开了针对实现治疗剂的受控释放的不同的策略。通过受控扩散来释放是这些策略中的一个策略。不同的材料已被用于制造扩散受控的缓慢释放装置。这些材料包括不可降解的聚合物比如聚二甲基硅氧烷、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物和甲基丙烯酸羟烷基酯以及可降解的聚合物,在其中有乳酸/乙醇酸共聚物。由乙烯-乙酸乙烯酯共聚物制成的微孔膜已被用于蛋白质的释放,提供高的释放能力。
受控释放的另外的策略涉及化学受控的持续释放,其要求从治疗剂所固定到的基材上的化学分裂,和/或剂所固定到的聚合物的生物降解。这种分类还包括受控的非共价分解,其涉及由剂的分解引起的释放,所述剂通过非共价结合被暂时地键合至基材。这种方法特别好地适合于蛋白质或多肽的受控释放,所述蛋白质或多肽是能够形成给予蛋白质与合适的基材的稳定但不永久的附接的多个非共价键、离子键、疏水键和/或氢键的大分子。
理想地持续释放药物递送系统应当展示由使用的特定的赋形剂的类型和比例容易地控制的动力学和其他特征。有利地,持续释放药物递送系统应当为亲水性药物、两亲性药物以及疏水性药物提供解决方案。
本发明的发明人的国际专利申请公布第WO2010/007623号和第WO2011/0072525号提供了用于一种或多种活性成分的延长释放的组合物,其包括由可生物降解的聚合物、不可生物降解的聚合物或嵌段共聚物形成的脂质饱和的基质,所述嵌段共聚物包括不可生物降解的聚合物和可生物降解的聚合物。产生基质组合物的方法和利用基质组合物以在需要其的受治疗者身体中提供活性成分的受控释放的方法也被公开。
尽管本领域中近已取得了进展,但是对适合于实现从多个药物活性剂的脂质饱和的聚合基质中持续释放或程序化释放或受控释放,优选地实现其与相同或另外的活性剂的快速释放的结合的改进的药物组合物存在需要。
发明概述
本发明提供用于肽分子的受控释放的、包括脂质饱和的基质和与PEG结合的肽分子的组合物,所述脂质饱和的基质包括生物相容的聚合物。基质组合物特别适合于肽分子的局部递送或局部应用。本发明还提供产生基质组合物的方法和利用基质组合物以提供生物活性肽分子的受控释放和/或持续释放的方法。
本发明部分地基于如下的意外发现:存在于有机溶剂溶液(还包括聚乙二醇(PEG))中的肽、多肽或蛋白质且特别是极性肽分子可以有效地装载到包括至少一种生物相容的聚合物的基于脂质的基质中,其中聚合物可以是可生物降解的聚合物、不可生物降解的聚合物或其组合。另外,肽分子可以以受控的方式和/或延长的方式从基质中释放。
本发明的基质组合物相对于目前为止已知的用于生物活性肽分子的递送的组合物和基质是有优势的,因为其将生物活性分子至细胞或组织的有效的局部递送与所述分子的受控释放和/或持续释放结合。
一方面,本发明提供包括以下的基质组合物:(a)与包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分结合的药学上可接受的生物相容的聚合物;(b)包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂的第二脂质组分;(c)至少一种肽分子且与聚乙二醇(PEG)结合,其中基质组合物适合于提供肽分子的持续释放和/或受控释放。根据某些实施方案,肽分子是极性的。根据某些实施方案,肽分子是亲水性的。
根据某些目前典型的实施方案,聚合物和磷脂形成基本上不含水的基质组合物。
如本文所使用的术语“肽分子”指由一种或多种氨基酸,典型地两种或更多种氨基酸组或的任何结构。所述术语意图包括肽、多肽和蛋白质。肽分子可以是天然存在的肽、多肽或蛋白质,可以是改性的、重组的或化学合成的肽、多肽或蛋白质。
与如上面所定义的肽分子结合的术语“极性”意思是肽分子包括具有极性官能团的至少一种氨基酸。例如,阳离子侧链(精氨酸和赖氨酸)、阴离子侧链(天门冬氨酸和谷氨酸)和中性的极性侧链(天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸和苏氨酸)。根据一些实施方案,其意味着分子的整体性质是极性的。根据一些实施方案中,其意味着分子在极性溶剂中是可溶的。
根据某些实施方案,肽分子具有治疗活性。根据某些实施方案,肽分子选自酶、激素、抗菌剂、抗体、抗癌药,成骨因子、生长因子或低口服生物利用度蛋白质或肽。根据一些实施方案,肽分子是极性的。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。根据某些典型的实施方案,肽分子是抗菌肽。根据其他典型的实施方案,肽分子是酶。
根据某些实施方案,肽分子与PEG非共价地结合。不希望受理论或作用机制的束缚,据建议,肽分子和PEG的结合通常是包括氢键和范德华力的吸引作用的分子间相互作用的产物。
根据某些实施方案,PEG是具有在1,000-10,000的范围内的分子量的直链PEG。根据典型的实施方案,PEG分子量在1,000-8,000的范围内,更典型地在5,000或更小的范围内。根据本发明的教导,也可以使用可生物降解的PEG分子,特别是包括具有更高的分子量的可降解的间隔物(spacer)的PEG分子。
具有5,000或更小的分子量的PEG分子目前被批准用于药物用途。因此,根据某些典型的实施方案,活性PEG分子具有最高至5,000的分子量。
根据某些实施方案,基质组合物还可以包括至少一种阳离子脂质。根据某些实施方案,阳离子脂质选自由DC-胆固醇、1,2-二油酰-3-三甲基铵-丙烷(DOTAP)、二甲基双十八烷基铵(DDAB)、1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-乙基磷酸胆碱(乙基PC)、1,2-二-O-十八烯基-3-三甲基铵丙烷(DOTMA)以及其他阳离子脂质组成的组。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。
根据某些实施方案,生物相容的聚合物选自由可生物降解的聚合物、不可生物降解的聚合物及其组合组成的组。根据某些实施方案,可生物降解的聚合物包括选自由PLA(聚乳酸)、PGA(聚乙醇酸)、PLGA(聚(乳酸-共-乙醇酸))及其组合组成的组的聚酯。根据另外的实施方案,可生物降解的聚合物选自由壳聚糖和胶原组成的组。根据其他实施方案,不可生物降解的聚合物选自由聚乙二醇(PEG)、PEG丙烯酸酯、PEG甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸月桂酯、甲基丙烯酸羟乙酯、2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(MPC)、聚苯乙烯、衍生的聚苯乙烯、聚赖氨酸、聚N-乙基-4-乙烯基-溴化吡啶、聚丙烯酸甲酯、硅酮、聚甲醛、聚氨酯、聚酰胺、聚丙烯、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸、及其单独的或作为共聚合混合物的衍生物组成的组。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。
根据另外的实施方案,不可生物降解的聚合物和可生物降解的聚合物形成嵌段共聚物,例如,PLGA-PEG-PLGA等等。
根据某些实施方案具有极性基团的脂质选自甾醇、生育酚、脂肪酸、磷脂酰乙醇胺或其任意组合组成的组。根据某些特别的实施方案,具有极性基团的脂质是甾醇或其衍生物。根据典型的实施方案,甾醇是胆固醇。
根据某些实施方案,第一脂质组分与生物相容的聚合物混合,以形成非共价结合。在不限于任何特别的理论或作用机制的情况下,据建议,聚合物和具有极性基团的第一脂质经由氢键的形成而结合。
根据某些特别的实施方案,第一脂质组分是甾醇或其衍生物,且生物相容的聚合物是可生物降解的聚酯。根据这些实施方案,可生物降解的聚酯经由非共价键特别是经由氢键与甾醇结合。
根据一些实施方案,第二脂质组分包括具有两个脂肪酸部分(其中脂肪酸部分的至少一个具有至少14个碳)的磷脂酰胆碱或其衍生物。根据一些实施方案,脂肪酸部分的至少一个是饱和的。根据一些实施方案,两个脂肪酸部分皆是饱和的。根据其他的实施方案,第二脂质组分包括具有两个脂肪酸部分(其中脂肪酸部分的至少一个具有至少14个碳)的磷脂酰胆碱或其衍生物的混合物。根据一些实施方案,脂肪酸部分的至少一个是饱和的。根据一些实施方案,两个脂肪酸部分皆是饱和的。根据又一些其他的实施方案,第二脂质组分包括磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺或其衍生物的混合物。根据另外的实施方案,第二脂质组分还包括甾醇及其衍生物。根据典型的实施方案,甾醇是胆固醇。根据还有的又一些实施方案,第二脂质组分包括不同类型的磷脂的混合物。根据某些典型的实施方案,第二脂质组分还包括鞘脂、生育酚、聚乙二醇化的脂质中的至少一种。
根据另外的实施方案,总脂质与生物相容的聚合物的重量比在1:1和9:1之间,包括端值在内。根据一些实施方案,第一脂质与第二脂质的重量比在1:20至1:1之间。根据一些实施方案,肽分子和PEG的重量比在20:1和1:1之间。根据一些实施方案,PEG以按重量计在基质组合物的总重量的0.1%和10%之间的量存在。
根据某些实施方案,基质组合物是均质的。在其他实施方案中,基质组合物为基于脂质的基质的形式,其形状和边界由生物相容的聚合物来确定。在还有的又一些实施方案中,基质组合物为植入物的形式。
在某些特别的实施方案中,本发明提供包括以下的基质组合物:(a)可生物降解的聚酯;(b)甾醇;(c)具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂酰胆碱;(d)肽分子以及(e)PEG。
在其他特别的实施方案中,本发明提供包括以下的基质组合物:(a)可生物降解的聚酯;(b)甾醇;(c)具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂酰胆碱;(d)极性肽分子以及(e)PEG。
在又一些其他实施方案中,本发明提供包括以下的基质组合物:(a)可生物降解的聚酯;(b)甾醇;(c)具有至少14个碳的饱和脂肪酸部分的磷脂酰胆碱;(d)极性肽分子以及(e)PEG。
在某些实施方案中,基质组合物包括以重量计至少50%脂质。在某些实施方案中,基质组合物还包括靶向部分。
根据某些实施方案,基质组合物基本上不含水。术语“基本上不含水”指含有按重量计少于1%的水、按重量计少于0.8%的水、按重量计少于0.6%的水、按重量计少于0.4%的水或按重量计少于0.2%的水的组合物。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。在另一个实施方案中,所述术语指不存在影响基质的抗水性质的量的水。
根据另外的实施方案,基质组合物实质上不含水。“实质上不含”指包含按重量计少于0.1%的水、按重量计少于0.08%的水、按重量计少于0.06%的水、按重量计少于0.04%的水或按重量计少于0.02%的水的组合物。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。在另一个实施方案中,所述术语指包括按重量计少于0.01%的水的组合物。
根据另外的实施方案,每种基质组合物不含水。在另一个实施方案中,所述术语指不含有可检测的量的水的组合物。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。
在某些实施方案中,基质组合物能够在体内被降解为囊泡,在囊泡中整合了一些或所有质量的被释放的肽、多肽或蛋白质。在其他实施方案中,基质组合物能够在体内被降解,以形成其中整合了活性肽分子和靶向部分的囊泡。
根据另外的方面,本发明提供包括本发明的基质组合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
根据本发明某些实施方案,在除去有机溶剂和水后,本发明的基质组合物为植入物的形式。在另一个实施方案中,植入物是均质的。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。
根据某些实施方案,由本发明的组合物产生植入物的过程包括步骤(a)根据本发明的方法产生疏松材料形式的基质组合物;和(b)将疏松材料转移入所期望形状的模具或固体容器中。
根据另外的方面,本发明提供产生用于生物活性肽分子的递送和持续释放和/或受控释放的基质组合物的方法,所述方法包括:
(a)将(i)生物相容的聚合物和(ii)包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分混合到第一溶剂中;
(b)将肽分子混合到第二溶剂中以形成溶液并将聚乙二醇加入到溶液中;
(c)将在步骤(b)中得到的溶液与包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂的第二脂质组分混合;
(d)将步骤(a)和(c)中得到的溶液混合,以形成均质的混合物;及
(e)除去溶剂,
从而产生均质的包括肽分子的聚合物-磷脂基质。
根据一些实施方案,第一溶剂是挥发性有机溶剂。根据某些实施方案,第二溶剂选自由挥发性有机溶剂、极性溶剂及其任何混合物组成的组。根据典型的实施方案,极性溶剂是水。
根据某些实施方案,步骤(c)任选地还包括(i)通过蒸发、冷冻干燥或离心除去溶剂,以形成沉淀物,及(ii)使所得的沉淀物悬浮于第二挥发性有机溶剂中。
根据特别的制剂中使用的特定的肽、多肽或蛋白质和其他物质,和生物活性肽、多肽或蛋白质的预期用途,以及根据本文中所描述的本发明的实施方案来选择特定的溶剂。根据肽、多肽或蛋白质的期望的释放速率和根据本文中所描述的本发明的实施方案来选择形成本发明的基质的特别的脂质。
溶剂通常通过在根据获得的溶液的性质和生物活性肽分子的类型确定的受控的温度下进行蒸发来除去。有机溶剂和水的残留进一步通过真空除去。
根据本发明,使用不同类型的挥发性有机溶液能够形成均质的抗水的、基于脂质的基质组合物。根据不同的实施方案,第一和第二溶剂可以是相同的或不同的。根据一些实施方案,一种溶剂可以是非极性的且另一种可以是可与水混溶的。
根据某些实施方案,可生物降解的聚酯选自由PLA、PGA和PLGA、壳聚糖和胶原组成的组。在其他实施方案中,可生物降解的聚酯是本领域中已知的任何其他合适的可生物降解的聚酯或聚胺。
在某些实施方案中,步骤(a)的混合物中的聚合物是脂质饱和的。在另外的实施方案中,基质组合物是脂质饱和的。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
本发明的基质组合物可以用于全部地或部分地涂覆不同基材的表面。根据某些实施方案,待涂覆的基材包括选自由碳纤维、不锈钢、羟基磷灰石涂覆的金属、合成聚合物、橡胶、硅、钴-铬、钛合金、钽、陶瓷和胶原或明胶组成的组的至少一种材料。在其他实施方案中,基材可以包括任何医疗装置和骨填充颗粒(bone filler particle)。骨填充颗粒可以是同种异体的骨颗粒(即,来自人来源)、异种的骨颗粒(即,来自动物来源)和人造骨颗粒中的任何一种。根据某些典型的实施方案,涂层具有1-200微米,优选地在5-100微米之间的厚度。在其他实施方案中,利用涂覆过的基材的治疗和涂覆过的基材的施用将遵循本领域中已知的用于相似的未涂覆过的基材的治疗和施用的程序。
值得强调的是,利用本发明的组合物的持续释放期可以考虑四个主要因素来设定:(i)聚合物和脂质含量(特别是具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂)之间的重量比;(ii)生物聚合物和脂质的生物化学和/或生物物理性质;(iii)用于给定的组合物中的不同的脂质之间的比例。肽、多肽或蛋白质与聚乙二醇的孵育时间(incubation time)也可以影响持续释放期。
特别地,应当考虑聚合物的降解速率和脂质的流动性。例如,PLGA(85:15)聚合物将比PLGA(50:50)聚合物的降解慢。磷脂酰胆碱(14:0)在体温下比磷脂酰胆碱(18:0)的流动性高(较低的刚性和较低的有序性)。因此,例如,掺入到包括PLGA(85:15)和磷脂酰胆碱(18:0)的基质组合物中的肽分子的释放速率将比掺入到由PLGA(50:50)和磷脂酰胆碱(14:0)组成的基质中的分子的释放速率缓慢。将决定释放速率的另一方面是掺入到基质中的肽、多肽或蛋白质的物理特征。另外,治疗性肽分子的释放速率还可以通过在第二脂质组分的制剂中添加其他脂质来进一步控制。这可以包括不同长度的脂肪酸比如月桂酸(C12:0)、膜活性甾醇(如胆固醇)或其他磷脂如磷脂酰乙醇胺。利用聚乙二醇的肽、多肽或蛋白质的孵育时间也可以影响肽分子从基质中的释放速率。
根据某些实施方案,肽分子的至少30%以零级动力学从基质组合物中释放。根据其他实施方案,肽分子的至少50%以零级动力学从组合物中释放。
从以下的对本发明的详细描述将更容易地理解和认识本发明的这些和其他的特征和优势。
附图简述
图1示出了根据本发明一些实施方案的来自基质中的NBD标记的抗菌肽的释放曲线。
发明详述
本发明提供用于具有治疗活性的肽分子的延长释放和/或受控释放的组合物,其包括具有生物相容的聚合物的基于脂质的基质。特别地,本发明的基质组合物适合于活性分子的局部释放。本发明还提供产生基质组合物的方法和利用基质组合物以在需要其的受治疗者身体中提供活性成分的受控释放的方法。
根据一方面,本发明提供了包括以下的基质组合物:(a)与包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分结合的药学上可接受的生物相容的聚合物;(b)包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂的第二脂质组分;(c)与聚乙二醇(PEG)结合的至少一种肽分子,其中基质组合物适于提供的肽分子的受控释放。根据一些实施方案,肽分子是极性的。
根据某些实施方案,生物相容的聚合物是可生物降解的。根据其它实施方案,生物相容的聚合物是不可生物降解的。根据另外的实施方案,生物相容的聚合物包括任选地作为嵌段共聚物的可生物降解的和不可生物降解的聚合物的组合。
根据某些实施方案,本发明提供了包括以下的基质组合物:(a)药学上可接受的可生物降解的聚酯;(b)具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂;(c)药物活性肽分子;及(d)PEG。
肽分子可以是具有治疗效果的任何寡肽、多肽或蛋白质。根据某些实施方案,肽分子选自酶、激素、抗体、抗菌肽、抗癌肽、抗癌蛋白质、成骨因子、生长因子或低口服生物利用度的蛋白质或肽。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。根据某些典型的实施方案,肽分子是抗菌肽。根据其他典型的实施方案,肽分子是酶。
根据某些实施方案脂质饱和的基质组合物包括至少一种阳离子脂质。术语“阳离子脂质”是指在选定的pH值,如生理pH下带净正电荷的许多脂质种类中的任何一种。这种脂质包括但不限于N,N-二油烯基-N,N-二甲基氯化铵(“DODAC”);N-(2,3-二油烯氧基)丙基-N,N,N-三甲基氯化铵(“DOTMA”);N,N-二硬脂酰-N,N-二甲基溴化铵(“DDAB”);N-(2,3-二油酰氧基)丙基-N,N,N-三甲基氯化铵(“DOTAP”);3-(N-(N',N'-二甲基氨基乙基)胺基甲酰基)胆固醇(“DC-Chol”)和N-(1,2-二肉豆蔻氧基丙-3-基)-N,N-二甲基-N-羟乙基溴化铵(“DMRIE”)。另外,本发明中使用的阳离子脂质的许多商业制剂是可获得的。这些包括例如(来自美国纽约州格兰德岛的GIBCO/BRL(GIBCO/BRL,Grand Island,N.Y,USA)的包括DOTMA和1,2-二油酰-sn-3-磷酸乙醇胺(“DOPE”)的市售的阳离子脂质体,);(来自GIBCO/BRL的包括N-(1-(2,3-二油烯氧基)丙基)-N-(2-(精胺甲酰胺)乙基)N,N-二甲基三氟乙酸铵(“DOSPA”)和(“DOPE”)的市售的阳离子脂质体);及(来自美国威斯康星洲麦迪逊的Promega公司(Promega Corp,Madison,Wis,USA)的在乙醇中的包括二-十八烷基酰氨基甘氨酰基羧基精胺(“DOGS”)的市售的阳离子脂质)。下面的脂质为阳离子的并在生理pH以下带正电荷:DODAP、DODMA、DMDMA等等。不希望受任何特定的理论或作用机理的束缚,基质的阳离子脂质有助于本发明的基质(包括肽分子)内化到细胞或组织中。根据某些实施方案,细胞和/或组织形成人体的部分。
根据其他实施方案,可生物降解的聚合物包括阳离子聚合物,比如阳离子化的瓜尔胶、二烯丙基季铵盐/丙烯酰胺共聚物、季铵化的聚乙烯基吡咯烷酮及其衍生物,以及不同的聚季铵盐化合物。
根据某些实施方案,第二脂质组分的磷脂是具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂酰胆碱。在另一个实施方案中,第二脂质组分还包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,第二的脂质组分还包括甾醇,特别是胆固醇。
在某些实施方案中,基质组合物是脂质饱和的。如本文所用的“脂质饱和的”,指基质组合物的聚合物用脂质(包括磷脂、联合存在于基质中的任何肽分子和任选的靶向部分)及可以存在的任何其他脂质饱和。基质组合物由存在的任何脂质饱和。本发明的脂质饱和的基质展现出另外的优点,即不需要合成乳化剂或表面活性剂,比如聚乙烯醇;因此,本发明的组合物通常是基本上没有聚乙烯醇。用于确定达到脂质饱和的聚合物:脂质比率的方法和确定基质的脂质饱和度的方法在本领域中是已知的。
在其它实施方案中,基质组合物是均质的。在还有的另外的实施方案中,基质组合物为脂质饱和的基质的形式,其形状和边界由生物相容的聚合物来确定。根据某些实施方案,基质组合物为植入物的形式。
在某些特定实施方案中,本发明提供包括以下的基质组合物:(a)可生物降解的聚酯;(b)甾醇;(c)具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂酰胆碱;(d)具有的治疗效果的至少一种肽分子,以及(c)PEG。在其它典型的实施方案中,基质组合物是脂质饱和的。在其它典型的实施方案中,肽分子是极性的。在还有的其它典型的实施方案中,磷脂酰胆碱具有至少14个碳的饱和脂肪酸部分。
根据某些实施方案,可生物降解的聚酯经由非共价键与甾醇结合。
如本文所提供的,本发明的基质能够被塑形成不同的厚度和形状的三维构造。因此,所形成的基质可以成形为呈现特定的形状,包括球、立方体、棒、管、片,或成形为线。在基质的制备过程中利用冷冻干燥步骤的情况下,形状由模具或支持物的形状确定,所述模具或支持物可以由任何惰性材料制成,且对于球和立方体来说可以在所有侧面与基质接触,或对于片来说可以在有限数目的侧面与基质接触。基质可以被成形为如植入物设计所需的形式。用剪刀、手术刀、激光束或任何其他切割器械去除基质的部分可以产生三维结构中所需的任何精细加工。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
根据另外的实施方案,本发明的基质组合物提供骨移植材料的涂层。根据某些实施方案,骨移植物材料选自由同种异体移植物、异体移植物和异种移植物组成的组。根据另外的实施方案,本发明的基质可以与胶原或胶原基质蛋白质结合。根据另外的实施方案,基质可用于涂覆羟基磷灰石涂覆的金属、合成聚合物,橡胶和硅基材。根据一些实施方案,涂层具有小于200微米;可选地,小于150微米;可选地,小于100微米;可选地,小于90微米;可选地,小于80微米;可选地,小于70微米;可选地,小于60微米;可选地,小于50微米的厚度。
脂质
“磷脂酰胆碱”指具有磷酸胆碱首基(head group)的磷酸甘油酯。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱化合物,具有下面的结构:
R1和R2部分是脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在一些实施方案中,脂肪酸部分是饱和的脂肪酸部分。在一些实施方案中,脂肪酸部分是不饱和的脂肪酸部分。在一些实施方案中,至少一个脂肪酸部分是饱和的。在某些目前优选的实施方案中,两个脂肪酸部分皆是饱和的。“饱和的”指在烃链中没有双键。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有18个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有16-18个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分被选择,使得所产生的基质的凝胶至液晶转变温度为至少40℃。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是棕榈酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是花生酰基(arachidoyl)。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是棕榈酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是棕榈酰基和花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是花生酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是肉豆蔻酰。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱是天然存在的磷脂酰胆碱。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱是合成的磷脂酰胆碱。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱含有天然存在的同位素分布。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱是氘化的磷脂酰胆碱。通常,磷脂酰胆碱是对称的磷脂酰胆碱(即,其中两个脂肪酸部分相同的磷脂酰胆碱)。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱是不对称的磷脂酰胆碱。
磷脂酰胆碱的非限制性实例是1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)、二棕榈酰-磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆蔻酰-磷脂酰胆碱(DMPC)、二油酰-磷脂酰胆碱(DOPC)、1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰胆碱,及用上文列举的任何脂肪酸部分改性的磷脂酰胆碱。在某些实施方案中,磷脂酰胆碱选自由DSPC、DPPC和DMPC组成的组。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱是本领域中已知的任何其它磷脂酰胆碱。每个磷脂酰胆碱代表本发明独立的实施方案。
氘化的磷脂酰胆碱的非限制性实例是氘化的1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(氘化的DSPC)、氘化的二油酰-磷脂酰胆碱(氘化的DOPC)和氘化的1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰胆碱。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱选自由氘化的DSPC、氘化的DOPC和氘化的1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰胆碱组成的组。在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱是本领域中已知的任何其他氘化的磷脂酰胆碱。
在某些实施方案中,磷脂酰胆碱(PC)包含基质组合物的总脂质含量的至少30%。在其它实施方案中,PC包含总脂质含量的至少35%,可选地,总脂质含量至少40%,还可选地,总脂质含量的至少45%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%或至少95%。在另一个实施方案中,PC包含总脂质含量的95%以上。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
“磷脂酰乙醇胺”指具有磷酰基乙醇胺首基的磷酸甘油酯。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺的化合物具有以下结构:
R1和R2部分是脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是饱和的脂肪酸部分。在另一个实施方案中,“饱和的”指烃链中没有双键。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有18个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有14-18个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有14-16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有16-18个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分被选择,使得所产生的基质的凝胶至液晶转变温度为至少40℃。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是肉豆蔻酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是棕榈酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是肉豆蔻酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是肉豆蔻酰基和花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是肉豆蔻酰基和棕榈酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是棕榈酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是棕榈酰基和花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是花生酰基和硬脂酰基。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是天然存在的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是合成的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是氘化的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺含有天然存在的同位素分布。通常,磷脂酰乙醇胺是对称的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是不对称的磷脂酰乙醇胺。
磷脂酰乙醇胺的非限制性实例是二甲基二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)和二棕榈酰-磷脂酰乙醇胺(DPPE),以及用上文列举的任何脂肪酸部分改性的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺选自由DMPE和DPPE组成的组。
氘化的磷脂酰乙醇胺的非限制性实例是氘化的DMPE和氘化的DPPE。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺选自由氘化的DMPE和氘化的DPPE组成的组。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是在本领域中已知的任何其他氘化的磷脂酰乙醇胺。
在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是本领域中已知的任何其它磷脂酰乙醇胺。每个磷脂酰乙醇胺代表本发明独立的实施方案。
在一个实施方案中,“甾醇”指在A环的3-位具有羟基基团的甾类。在另一个实施方案中,所述术语是指具有以下结构的甾类:
在另一个实施方案中,本发明的方法和组合物中的甾醇是动物甾醇。在另一个实施方案中,甾醇是胆固醇:
在另一个实施方案中,甾醇是本领域中已知的任何其它动物固醇。在另一个实施方案中,甾醇的摩尔数最高至存在的总脂质的摩尔数的40%。在另一个实施方案中,甾醇被掺入基质组合物。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,胆固醇以基质组合物的脂质含量的总重量的10%-60%的量存在。在另一个实施方案中,重量百分比是20%-50%。在另一个实施方案中,重量百分比是10%-40%。在另一个实施方案中,重量百分比是30%-50%。在另一个实施方案中,重量百分比是20%-60%。在另一个实施方案中,重量百分比是25%-55%。在另一个实施方案中,重量百分比是35%-55%。在另一个实施方案中,重量百分比是30%-60%。在另一个实施方案中,重量百分比是30%-55%。在另一个实施方案中,重量百分比是20%-50%。在另一个实施方案中,重量百分比是25%-55%。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,本发明的组合物还包括不同于磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺或甾醇的脂质。根据某些实施方案,另外的脂质是磷酸甘油酯。根据其它实施方案,另外的脂质选自由磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油及磷脂酰肌醇组成的组。在还有的另外的实施方案中,另外的脂质选自由磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇及鞘磷脂组成的组。根据在另外的实施方案,上面的另外的脂质的任何2个或更多个的组合存在于本发明的基质中。根据某些实施方案,所述聚合物、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、甾醇及另外的脂质都被掺入基质组合物中。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
根据还有的另外的实施方案,本发明的组合物还包括磷脂酰丝氨酸。如本文所用的,“磷脂酰丝氨酸”指具有磷酸丝氨酸首基的磷酸甘油酯。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸化合物具有以下结构:
R1和R2部分是脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是饱和的脂肪酸部分。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分被选择,使得所产生的基质的凝胶至液晶转变温度为至少40℃。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是肉豆蔻酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是棕榈酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分两者都是硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分两者都是花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是肉豆蔻酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是上面脂肪酸部分中的两种的组合。
在其它实施方案中,磷脂酰丝氨酸是天然存在的磷脂酰丝氨酸。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸是合成的磷脂酰丝氨酸。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸是氘化的磷脂酰丝氨酸。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸含有天然存在的同位素分布。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸是对称的磷脂酰丝氨酸。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸是不对称的磷脂酰丝氨酸。
磷脂酰丝氨酸的非限制性实例是用上文列举的脂肪酸部分的任何一个改性的磷脂酰丝氨酸。在另一个实施方案中,磷脂酰丝氨酸是本领域中已知的任何其它磷脂酰丝氨酸。每个磷脂酰丝氨酸代表本发明独立的实施方案。
在其它实施方案中,本发明的组合物还包含磷脂酰甘油。如本文所使用的“磷脂酰甘油”指具有磷酰基甘油首基的磷酸甘油酯。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油的化合物具有以下结构:
左侧的2个键被连接到脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油是天然存在的磷脂酰甘油。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油是合成的磷脂酰甘油。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油是氘化的磷脂酰甘油。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油含有天然存在的同位素分布。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油是对称的磷脂酰甘油。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油是不对称的磷脂酰甘油。在另一个实施方案中,所述术语包括具有以下结构的二磷脂酰甘油化合物:
R1、R2、R3和R4部分是脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是饱和的脂肪酸部分。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分被选择,使得所产生的基质的凝胶至液晶转变温度为至少40℃。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是肉豆蔻酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是棕榈酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分两者硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是肉豆蔻酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是上面脂肪酸部分中的两种的组合。
磷脂酰甘油的非限制性实例是用上文列举的脂肪酸部分的任何一个改性的磷脂酰甘油。在另一个实施方案中,磷脂酰甘油是本领域中已知的任何其它磷脂酰甘油。每个磷脂酰甘油代表本发明独立的实施方案。
在还有的另外的实施方案中,本发明的组合物还包含磷脂酰肌醇。如本文所使用的,“磷脂酰肌醇”是指具有磷酸肌醇首基的磷酸甘油酯。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇化合物具有以下结构:
R和R'部分是脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是饱和的脂肪酸部分。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分被选择,使得所产生的基质的凝胶至液晶转变温度为至少40℃。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是肉豆蔻酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是棕榈酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分都是花生酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是肉豆蔻酰基和硬脂酰基。在另一个实施方案中,脂肪酸部分是上面脂肪酸部分中的两种的组合。
在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇是天然存在的磷脂酰肌醇。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇是合成的磷脂酰肌醇。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇是氘化的磷脂酰肌醇。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇含有天然存在的同位素分布。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇是对称的磷脂酰肌醇。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇是不对称的磷脂酰肌醇。
磷脂酰肌醇的非限制性实例是用上文列举的脂肪酸部分任何一个改性的磷脂酰肌醇。在另一个实施方案中,磷脂酰肌醇是本领域中已知的任何其它磷脂酰肌醇。每个磷脂酰肌醇代表本发明独立的实施方案。
在另外的实施方案中,本发明的组合物还包含鞘脂。在某些实施方案中,鞘脂是神经酰胺。在还有的其它实施方案中,鞘脂是鞘磷脂。“鞘磷脂”指鞘氨醇衍生的磷脂。在另一个实施方案中,鞘磷脂化合物具有以下结构:
R部分是脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,鞘磷脂是天然存在的神经鞘磷脂。在另一个实施方案中,鞘磷脂是合成的鞘磷脂。在另一个实施方案中,鞘磷脂是氘化的鞘磷脂。在另一个实施方案中,鞘磷脂含有天然存在的同位素分布。
在另一个实施方案中,本发明的方法和组合物中的鞘磷脂的脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分被选择,使得所产生的基质的凝胶至液晶转变温度为至少40℃。
鞘磷脂的非限制性实例是用上文列举的脂肪酸部分的任何一个改性的鞘磷脂。在另一个实施方案中,鞘磷脂是本领域中已知的任何其它鞘磷脂。每个鞘磷脂代表本发明独立的实施方案。
“神经酰胺”是指具有以下结构的化合物:
左侧的2个键被连接到脂肪酸,通常是天然存在的脂肪酸或天然存在的脂肪酸的衍生物。在另一个实施方案中,脂肪酸是较长的链(达到C24的或更大)。在另一个实施方案中,脂肪酸是饱和脂肪酸。在另一个实施方案中,脂肪酸是单烯脂肪酸。在另一个实施方案中,脂肪酸是n-9单烯脂肪酸。在另一个实施方案中,脂肪酸在2位含有羟基基团。在另一个实施方案中,脂肪酸是本领域中已知的其它合适的脂肪酸。在另一个实施方案中,神经酰胺是天然存在的神经酰胺。在另一个实施方案中,神经酰胺是合成的神经酰胺。在另一个实施方案中,所述神经酰胺被掺入基质组合物中。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
每个鞘脂代表本发明独立的实施方案。
在某些实施方案中,本发明的组合物还包含聚乙二醇化的脂质。在另一个实施方案中,所述PEG部分具有500-5000道尔顿的分子量。在另一个实施方案中,所述PEG部分具有任何其他合适的分子量。合适的PEG改性的脂质的非限制性实例包括具有甲氧基末端基团的PEG部分,例如,如下描绘的PEG改性的磷脂酰乙醇胺和磷脂酸(结构A和B)、PEG改性的二酰基甘油和二烷基甘油(结构C和D)、PEG改性的二烷基胺(结构E)和PEG改性的1,2-酰氧基丙-3-胺(结构F)。在另一个实施方案中,PEG部分具有在本领域中使用的任何其它末端基团。在另一个实施方案中,聚乙二醇化的脂质选自由PEG改性的磷脂酰乙醇胺、PEG改性的磷脂酸、PEG改性的二酰基甘油、PEG改性的二烷基甘油、PEG改性的二烷基胺及PEG改性的1,2-二酰氧基丙-3-胺组成的组。在另一个实施方案中,聚乙二醇化的脂质是本领域中已知的任何其它聚乙二醇化的磷脂。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
根据某些实施方案中,聚乙二醇化的脂质以基质组合物中的总脂质的约50摩尔百分比的量存在。在其它实施方案中,百分比为约45摩尔百分比,可选地,约40摩尔百分比、约35摩尔百分比、约30摩尔百分比、约25摩尔百分比、约20摩尔百分比、约15摩尔百分比、约10摩尔百分比及约5摩尔百分比或更低。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
聚合物
根据某些实施方案,生物相容的聚合物是可生物降解的。根据某些目前典型的实施方案,可生物降解的聚合物是聚酯。
根据某些实施方案中,根据本发明的教导的可生物降解的聚酯是PLA(聚乳酸)。根据典型的实施方案,“PLA”指聚(L-丙交酯)、聚(D-丙交酯)和聚(DL-丙交酯)。聚(DL-丙交酯)的代表结构描绘如下:
在其他实施方案中,聚合物是PGA(聚乙醇酸)。在还有的另外的实施方案中,聚合物是PLGA(聚(乳酸-共-乙醇酸))。PLGA中所含的PLA可以是在本领域中已知的任何PLA,例如,对映异构体或外消旋混合物。PLGA的代表性结构描绘如下:
根据某些实施方案,PLGA包括1:1的乳酸/乙醇酸比率。在另一个实施方案中,该比率为60:40。在另一个实施方案中,该比率为70:30。在另一个实施方案中,该比率为80:20。在另一个实施方案中,该比率为90:10。在另一个实施方案中,该比率为95:5。在另一个实施方案中,比率为适合在体内延长释放曲线的另一比率,如本文所定义的。在另一个实施方案中,该比率为50:50。在某些典型实施方案中,该比率为75:25。PLGA可以是无规共聚物或嵌段共聚物。PLGA也可以是与其它聚合物比如PEG的嵌段共聚物。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,可生物降解的聚酯是选自由聚己内酯、聚羟基链烷酸酯、聚丙烯延胡索酸酯(polypropylenefumarate)、聚原酸酯、聚酐和聚烃基氰基丙烯酸酯(polyalkylcyanoacrylate)组成的组,条件是聚酯含有氢键受体部分。在另一个实施方案中,可生物降解的聚酯是含有选自PLA、PGA、PLGA、聚己内酯、聚羟基链烷酸酯、聚丙烯延胡索酸酯、聚原酸酯、聚酐和聚烃基氰基丙烯酸酯组成的组的任意两种单体的组合的嵌段共聚物。在另一个实施方案中,可生物降解的聚酯是含有以上所列的单体的任意两种的组合的无规共聚物。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,根据本发明的教导的可生物降解的聚酯的分子量(MW)在约10-150千道尔顿之间。在另一个实施方案中,MW在约20-150千道尔顿之间。在另一个实施方案中,MW在约10-140千道尔顿之间。在另一个实施方案中,MW在约20-130千道尔顿之间。在另一个实施方案中,MW在约30-120千道尔顿的之间。在另一个实施方案中,MW为约45-120千道尔顿之间。在另一个典型的实施方案中,MW为约60-110千道尔顿之间。在另一个实施方案中,不同MW的PLGA聚合物的混合物被利用。在另一个实施方案中,不同的聚合物都具有以上范围之一中的MW。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,可生物降解的聚合物选自由含有一种或多种类型氨基酸的、具有至少10个氨基酸的肽组成的聚胺的组。
如本文所用的“可生物降解的”指能够在生理pH下通过自然的生物过程被分解的物质。“生理pH”指身体组织的pH,通常在6-8之间。“生理pH”并不是指胃液的高酸性pH,所述高酸性pH通常在1和3之间。
根据一些实施方案,生物相容的聚合物是不可生物降解的聚合物。根据某些实施方案,不可生物降解的聚合物可以选自但不限于由以下组成的组:聚乙二醇、聚乙二醇(PEG)丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯类(如聚乙二醇甲基丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸乙酯、聚甲基丙烯酸丁酯、聚甲基丙烯酸-2-乙基己酯、聚甲基丙烯酸月桂酯、聚甲基丙烯酸羟乙酯)、聚甲基丙烯酸酯、2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(MPC)、聚苯乙烯、衍生的聚苯乙烯、聚赖氨酸、聚N-乙基-4-乙烯基溴化吡啶、硅酮、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、聚乙烯、聚丙烯、聚四氟乙烯、聚氨酯、聚丙烯酸酯、聚乙酸乙烯酯、乙烯乙酸乙烯酯、聚乙烯、聚氯乙烯、聚氟乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯和酰基取代的纤维素乙酸酯的聚合物的共聚物、聚(乙烯基咪唑)、氯磺化聚烯烃、聚氧化乙烯及其混合物。
肽分子
如本文所使用的术语“肽分子”旨在包括由一种或多种氨基酸组成的任何结构。通常,肽分子由两种或更多种氨基酸组成,并且是肽,多肽或蛋白质。本发明的基质可以包括宽尺寸范围的肽分子,包括肽,多肽和蛋白质。形成肽分子的全部或部分的氨基酸可以是二十种常见的、天然存在的氨基酸中的任何一种。根据某些实施方案,肽分子的氨基酸中任何一个可以被非常见的氨基酸替换。替换可以是保守的或非保守的。保守替换用在其特征性质(例如,电荷、疏水性、硬脂酸的大小(stearic bulk))的一个或多个方面类似于原氨基酸的非常见的氨基酸来取代原氨基酸。术语“非常见的氨基酸”指不同于常见的氨基酸的氨基酸,且包括例如常见的氨基酸的同分异构体和改性形式(modification),例如,D-氨基酸、非蛋白质氨基酸、翻译后改性的氨基酸、酶改性的氨基酸,被设计为模仿氨基酸的构造或结构(例如,α-α-二取代氨基酸、N-烷基氨基酸、乳酸、β-丙氨酸、萘基丙氨酸、3-吡啶基丙氨酸、4-羟基脯氨酸、O-磷酸丝氨酸、N-乙酰丝氨酸、N-甲酰甲硫氨酸、3-甲基组氨酸、5-羟基赖氨酸及正亮氨酸),及其他非常见的氨基酸,例如,在如在美国专利第5,679,782号中所描述的。肽分子也可以包含非肽骨架的键,其中在肽骨架中的一个或多个部位处,天然存在的酰胺--CONH--键由如下的非常见的键替换,比如N-取代的酰胺键、酯键、硫代酰胺键、反肽键(-NHCO-)、反硫代酰胺键(--NHCS)、磺酰胺基键(--SO2NH--)和/或类肽(N-取代的甘氨酸)键。因此,根据本发明教导的肽分子可以包括假肽和肽模拟物(peptidomimetics)。本发明的肽可以是:(a)天然存在的,(b)通过化学合成产生的,(c)通过重组DNA技术产生的,(d)通过较大的分子生物化学或酶促片段化产生的,(e)通过由上面所列的方法(a)到(d)的组合得到的方法产生的,或(f)通过如本领域中已知的用于产生肽的任何其他手段产生的。
应明确理解的是,术语“肽分子”包括肽,多肽和蛋白质。根据目前优选的实施方案,肽化合物包含具有极性官能团的至少一个氨基酸。
“肽”指其中单体是通过酰胺键连接在一起的氨基酸的聚合物。“肽”通常比蛋白质小,通常总共在30-50个氨基酸以下。
“多肽”指氨基酸的单一聚合物,通常超过50个氨基酸。
如本文所使用的“蛋白质”指通常超过50个氨基酸的氨基酸的聚合物。只要肽、多肽或蛋白质的衍生物、类似物和片段保留治疗效果,则它们包含在本发明中。
根据某些实施方案,肽分子具有治疗活性。根据某些实施方案,肽分子选自酶、激素、抗菌剂,抗体、抗癌药、成骨因子、生长或低口服生物利用度的蛋白质或肽。每种可能性代表本发明的独立的实施方案。根据某些典型的实施方案中,肽分子是抗菌肽。
根据一些实施方案,肽分子是抗炎剂。合适的肽抗炎剂的非限制性实例可以选自由TNF、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-17、IL-18、GM-CSF、M-CSF、MCP-1、MIP-1、RANTES、ENA-78、OSM、FGF、及VEGF组成的组。本发明中考虑使用的各种抗炎剂描述在US2003/0176332中,其通过引用并入本文。
可以根据一些实施方案使用的抗癌剂的非限制性的实例可以包括比如但不限于以下的治疗方法和分子:免疫调节分子的使用,比如,例如,选自由以下组成的组的分子:肿瘤抗原、抗体、细胞因子(比如、例如、白介素(比如、例如、白介素2、白介素4、白介素12)、干扰素(比如、例如、干扰素E1、干扰素D、干扰素α)、肿瘤坏死因子(TNF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF))、肿瘤抑制基因、趋化因子、补体组分和补充组分受体。
在另一个实施方案中,本发明的方法和组合物中的活性剂是诱导或刺激骨的形成的化合物。在另一个实施方案中,活性剂是骨诱导因子(也被称为成骨因子)。在另一个实施方案中,成骨因子,是指诱导或刺激骨的形成的任何肽、多肽、蛋白质。在另一个实施方案中,成骨因子诱导骨修复细胞分化为骨细胞,如成骨细胞或骨细胞。根据一些实施方案,骨诱导因子是重组人骨形态发生蛋白质(rhBMP)。最优选地,所述骨形态发生蛋白质是一个的rhBMP-2、rhBMP-7或其异型二聚体。然而,包括被指定为BMP-1至BMP-13的骨形态发生蛋白质的任何骨形态发生蛋白质均被考虑。BMP是从马萨诸塞州剑桥遗传学研究所公司(Genetics Institute,Inc,Cambridge,Mass)可获得的,并且还可以由本领域技术人员制备,如例如在美国专利第5,187,076、US5,366,875、US4,877,864、US5,108,922、US5,116,738、US5,013,649和US5,106,748号中所描述的。可以被包括在根据本发明的实施方案的基质组合物中的骨诱导因子可以通过本领域中已知的以上方法中的任何一种方法获得或者从骨中分离。用于从骨中分离骨形态发生蛋白质的方法描述在美国专利第4,294,753号中。
生长因子可包括但不限于骨形态发生蛋白质,已示出其在生长骨中是优秀的,例如,BMP-1、BMP-2、rhBMP-2、BMP-3、BMP-4、rhBMP-4、BMP-5、BMP-6、rhBMP-6、BMP-7[OP-1]、rhBMP-7、BMP-8、BMP-9、BMP-10、BMP-11、BMP-12、BMP-13、BMP-14、BMP-15、BMP-16、BMP-17、BMP-18、GDF-5及rhGDF-5,例如,如在美国专利第7,833,270号中所公开的。
此外,合适的生长因子包括但不限于软骨衍生的形态发生蛋白质(Cartilage Derived Morphogenic Proteins),LIM矿化蛋白质、血小板衍生生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β(TGF-β)、胰岛素相关的生长因子-I(IGF-I)、胰岛素相关的生长因子-II(IGF-II)、成纤维细胞生长因子(FGF)及β-2-微球蛋白(BDGF II),如美国专利第7,833,270号中所公开的。
聚乙二醇
另外,本发明部分地基于如下的意外发现:用聚乙二醇(PEG)孵育溶解在适当溶剂中的肽分子增强基于脂质的基质中的肽分子的捕获且影响在合适的条件下分子从基质中的释放速率。根据肽分子的类型,溶剂可以是有机挥发性溶剂、可与水混溶的溶剂或水。如本领域中常用的,聚(乙烯)二醇通常是指聚(乙烯二醇)的直链形式,因为这些是最常见的、可商购的PEG。直链PEG可以由式OH-(CH2CH2O)n-OH(二醇)或mPEG、CH3O-(CH2CH2O)nOH代表,其中n是重复氧化乙烯基团的平均数。从1000至300,000范围的各种分子量的这些PEG化合物可商购自例如Sigma-Aldrich。直链PEG作为单官能形式或双官能形式是可获得的。PEG可以在链的任一端含有官能反应基团且可以是同双官能的(两个相同的反应基团)或异双官能的(两个不同的反应基团)。例如,式NHx-(CH2CH2O)nCOOH的异双官能PEG是市售的且可用于形成PEG衍生物。存在由他们的平均分子量代表的PEG化合物的许多等级。药用级PEG通常是在最高至8,000的分子范围内。根据某些典型的实施方案,根据本发明的教导使用的PEG具有最高至5,000,通常约2,000-5000的分子量。
根据一些实施方案,PEG以按重量计在基质组合物的总重量的0.1%和10%之间的量存在。根据某些实施方案,PEG以按重量计在基质组合物的总重量的0.1%和5%之间的量存在。根据某些实施方案,PEG以按重量计在基质组合物的总重量的0.1%和2%之间的量存在。根据一些实施方案肽分子和PEG的重量比在20:1至1:5之间。根据某些实施方案肽分子和PEG的重量比在20:1和1:1之间。根据某些典型的实施方案肽分子和PEG的重量比在10:1和1:1之间。
另外的组分
本发明的基质组合物任选地还包含游离脂肪酸。在某些实施方案中,游离脂肪酸是ω-6脂肪酸。在其它实施方案中,游离脂肪酸是ω-9脂肪酸。在另一个实施方案中,游离脂肪酸选自由ω-6和ω-9脂肪酸组成的组。在另外的实施方案中,游离脂肪酸具有14个或更多个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有16个或更多个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸部分具有16个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有18个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有16-22个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有16-20个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有16-18个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有18-22个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有18-20个碳原子。在另一个实施方案中,游离脂肪酸是亚油酸。在另一个实施方案中,游离脂肪酸是亚麻酸。在另一个实施方案中,游离脂肪酸是油酸。在另一个实施方案中,游离脂肪酸选自由亚油酸,亚麻酸和油酸组成的组。在另一个实施方案中,游离脂肪酸是在本领域中已知的另一种合适的游离脂肪酸。在另一个实施方案中,游离脂肪酸增加基质组合物的柔性(flexibility)。在另一个实施方案中,游离脂肪酸减慢释放速率,包括体内释放速率。在另一个实施方案中,游离脂肪酸改进受控释放的一致性,特别是体内受控释放的一致性。在另一个实施方案中,游离脂肪酸是饱和的。在另一个实施方案中,具有至少14个碳原子的饱和脂肪酸的掺入增加所产生的基质组合物的凝胶-流体转变温度。
在另一个实施方案中,游离脂肪酸被掺入基质组合物中。
在另一个实施方案中,游离脂肪酸被氘化。在另一个实施方案中,脂质酰基链的氘化降低凝胶-流体转变温度。
每种类型的脂肪酸代表本发明独立的实施方案。
根据某些实施方案中,本发明的基质组合物还包括生育酚。在另一个实施方案中,生育酚是E307(α-生育酚)。在另一个实施方案中,生育酚是γ-生育酚。在另一个实施方案中,生育酚是E308(γ-生育酚)。在另一个实施方案中,生育酚是E309(δ-生育酚)。在另一个实施方案中,生育酚选自由α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚组成的组。在另一个实施方案中,生育酚被掺入基质组合物中。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
本发明的基质组合物任选地还包括本领域中熟知的生理学上可接受的缓冲盐。生理学上可接受的缓冲盐的非限制性实例是磷酸盐缓冲液。磷酸盐缓冲液的典型的实例是40份NaCl、1份KCl、7份Na2HPO4·2H2O和1份KH2PO4。在另一个实施方案中,缓冲盐是本领域中已知的任何其它生理学上可接受的缓冲盐。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
基质组合物的释放速率和一般特征
在合适的条件下本发明的基质组合物的活性成分的90%的释放时间优选地在4天和6个月之间。根据某些实施方案,释放时间在1周和6个月之间、在1周和5个月之间、在1周和5个月之间、在1周和4个月之间、在1周和3个月之间、在1周和2个月之间或在1周和1个月之间。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
使用本发明的组合物的持续释放期可以考虑三个主要因素来设定:(i)聚合物和脂质含量(特别是具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂)之间的重量比,(ii)所使用的生物聚合物和脂质的生物化学和/或生物物理性质;以及(iii)在给定的组合物中所使用的不同脂质之间的比率。用聚乙二醇对肽、多肽或蛋白质的孵育时间也可以影响释放速率。
为了达到脂质饱和的总脂质对聚合物的比率可通过如本文中所描述的多种方法来确定。根据某些实施方案,本发明的组合物的脂质:聚合物的重量比在1:1至9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在1.5:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在2:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在3:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在4:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在5:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在6:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在7:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在8:1和9:1之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,比率在1.5:1和5:1之间,包括端值在内。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在用于说明的目的的另一个实施方案中,在其中聚合物主要是40千道尔顿的PLGA(聚(乳酸-共-乙醇酸,比率1:1))的情况下,总脂质对40千道尔顿PLGA的摩尔比率通常在20-100的范围内,包括端值在内。在另一个实施方案中,总脂质对40千道尔顿PLGA的摩尔比率在20-200之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在10-100之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在10-200之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在10-50之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在20-50之间,包括端值在内。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
植入物和其他药物组合物
除去有机溶剂和水后,本发明的基质组合物可以被塑形为植入物的形式。溶剂的除去通常通过在特定的温度下蒸发,随后抽真空来进行,所述特定的温度在室温和60℃之间不会引起肽分子的变性。根据某些典型的实施方案中,蒸发温度在50℃以下。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,植入物是均质的。在另一个实施方案中,植入物通过包括在模具中冷冻干燥材料的步骤的过程来制造。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
根据另外的实施方案,本发明提供包括根据本发明的教导的基质组合物(包括肽分子)的植入物。
本发明还提供由本发明的组合物产生植入物的过程,所述过程包括步骤(a)根据本发明的方法产生疏松材料形式的基质组合物;(b)将疏松材料转移入期望形状的模具或固体容器中;(c)冷冻疏松材料;和(d)冻干疏松材料。
在另外的实施方案中,本发明提供了包括本发明的基质组合物的药物组合物。根据某些实施方案,药物组合物还包括另外的药学上可接受的赋形剂。在另外的实施方案中,药物组合物为肠胃外可注射的形式。在其它实施方案中,药物组合物为可输注(infusible)的形式。在还有的另外的实施方案中,赋形剂适合于注射。在另外的实施方案中,赋形剂适合于输注。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
本发明的基质组合物用于产生范围从100纳米至50毫米的微囊泡的用途也在本发明的范围之内。
根据某些实施方案,除去有机溶剂和水后,本发明的基质组合物为微球的形式。在其他实施方案中,微球是均质的。根据某些实施方案,微球通过包括喷雾干燥的步骤的过程制造。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,本发明提供了由本发明的基质组合物制成的微球。在另一个实施方案中,本发明提供了包括本发明的微球和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,本发明的微球的粒度为约500-2000纳米。在另一个实施方案中,粒度为约400-2500纳米。在另一个实施方案中,粒度为约600-1900纳米。在另一个实施方案中,粒度为约700-1800纳米。在另一个实施方案中,粒度为约500-1800纳米。在另一个实施方案中,粒度为约500-1600纳米。在另一个实施方案中,粒度为约600-2000纳米。在另一个实施方案中,粒度为约700-2000纳米。在另一个实施方案中,颗粒具有合适于药物施用的任何其它大小。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
制造本发明的基质组合物的方法
本发明还提供用来产生用于肽分子的受控释放的基质组合物的过程,所述过程包括:
(a)将(i)生物相容的聚合物和(ii)包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分混合到第一溶剂中,其中所述第一溶剂是挥发性的有机溶剂;
(b)将肽分子混合到第二溶剂中以形成溶液并将聚乙二醇加入到溶液中;
(c)将步骤(b)中得到的溶液与包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂的第二脂质组分混合;
(d)将步骤(a)和(c)中得到的溶液混合,以形成均质的混合物;及
(e)除去溶剂,
从而产生包括肽的分子的均质的聚合物-磷脂基质。
根据某些实施方案,第二溶剂选自由挥发性有机溶剂和极性溶剂组成的组。根据典型的实施方案,极性溶剂是水。
根据某些典型的实施方案中,所述方法包括以下步骤:(a)将(i)可生物降解的聚酯及(ii)甾醇混合到第一溶剂中,优选地混合到挥发性有机溶剂中;(b)将(1)第二挥发性有机溶剂中的磷脂酰胆碱和/或(2)挥发性有机溶剂中的磷脂酰乙醇胺混合到含有溶解在第二挥发性有机溶剂或水和聚乙二醇中的肽分子的不同的容器中,以及(3)在给定温度下混合得到的溶液,(4)任选地通过离心或通过冷冻干燥沉淀得到的材料,和任选地在选定的挥发性溶剂中再悬浮沉淀物;以及(c)混合并均质化由步骤(a)和(b)产生的产物。
根据某些实施方案,可生物降解的聚合物选自PLGA、PGA、PLA、壳聚糖、胶原或其组合组成的组。根据一些实施方案,胶原可以是任何天然或合成的胶原,例如,牛胶原、人胶原、胶原衍生物、海洋胶原,重组或其它人造胶原或其衍生物或改性的类型(如明胶)。胶原可以是任何天然的或变性的表型如I、II、III或IV型。在其它实施方案中,可生物降解的聚酯是在本领域中已知的任何其他合适的可生物降解的聚酯。根据还有的另外的实施方案,可生物降解的聚合物是聚胺。在第一有机溶剂中混合聚合物与具有极性基团的至少一种脂质(非限制性的实例是甾醇,特别是胆固醇)通常在室温下进行。任选地,α-生育酚和/或γ-生育酚被添加到溶液中。形成脂质-聚合物基质。
通常在搅拌下,将含有至少一种肽分子和聚乙二醇的溶液与包括至少一种磷脂的挥发性性有机溶剂(选自但不限于由N-甲基吡咯烷酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯或其组合组成的组)混合。根据某些实施方案,磷脂是磷酸胆碱或磷脂酰胆碱或其衍生物。根据其它实施方案,磷脂是磷脂酰乙醇胺或其衍生物。根据另外的实施方案,第二挥发性有机溶剂包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺或其衍生物的组合。根据某些实施方案,磷酸胆碱或磷脂酰胆碱或其衍生物以所有脂质的10-90质量百分比(即磷脂、甾醇、神经酰胺、脂肪酸等的10-90质量百分比)存在于基质中。根据其他实施方案,磷脂酰乙醇胺以所有脂质的10-90质量百分比存在于基质中。
根据还有的其它实施方案,在有机溶剂被添加到包括肽、多肽或蛋白质和PEG的溶液之前,磷酸胆碱或磷脂酰胆碱衍生物或它们的组合以与磷脂酰乙醇胺的不同比率被混合到有机溶剂中。
在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺也被包括在第一脂质组分中。
在另一个实施方案中,包含生物相容的聚合物的混合物(a)在其与包含肽分子和PEG的混合物混合之前被均质化。在另一个实施方案中,在步骤(a)的混合物中的聚合物是脂质饱和的。在另一个实施方案中,基质组合物是脂质饱和的。通常,聚合物和磷脂酰胆碱被掺入基质组合物中。在另一个实施方案中,活性肽分子也被掺入基质组合物中。在另一个实施方案中,基质组合物为脂质饱和的基质的形式,其形状和边界由可生物降解的聚合物确定。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺具有饱和的脂肪酸部分。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有14-18个碳原子。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,磷脂酰胆碱具有饱和的脂肪酸部分。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少14个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有至少16个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有14-18个碳原子。在另一个实施方案中,脂肪酸部分具有16-18个碳原子。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,非极性有机溶剂中总脂质对聚合物的摩尔比率为使得该混合物中的聚合物是脂质饱和的。在用于说明的目的的另一个实施方案中,在其中聚合物主要为50千道尔顿的PLGA(聚(乳酸-共-乙醇酸),比率1:1)的情况下,总脂质对50千道尔顿的PLGA的摩尔比率通常在10-50的范围内,包括端值在内。在另一个实施方案中,总脂质对50千道尔顿的PLGA的摩尔比率在10-100之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在20-200之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在20-300之间,包括端值在内。在另一个实施方案中,摩尔比率在30-400之间,包括端值在内。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
本发明的上面的方法和其它方法的组分的每一个以与本发明的基质组合物的相应的组分相同的方式来定义。
在另一个实施方案中,产生方法的步骤(a)还包括向挥发性有机溶剂(典型地是非极性溶剂)中添加磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺是与步骤(c)中包括的磷脂酰乙醇胺相同的磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺为是不同的磷脂酰乙醇胺,其可以是本领域中已知的任何其它磷脂酰乙醇胺。在另一个实施方案中,磷脂酰乙醇胺选自由步骤(c)的磷脂酰乙醇胺和不同的磷脂酰乙醇胺组成的组。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,产生方法的步骤(c)还包括向溶剂中,典型地是挥发性有机溶剂,更典型地是可与水混溶的溶剂中添加选自由磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、鞘磷脂和磷脂酰肌醇组成的组的磷脂。
在另一个实施方案中,产生方法的步骤(c)还包括向可与水混溶的挥发性有机溶剂中添加鞘脂。在另一个实施方案中,鞘脂是神经酰胺。在另一个实施方案中,鞘脂是鞘磷脂。在另一个实施方案中,鞘脂是在本领域中已知的任何其他鞘脂。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,产生方法的步骤(c)还包括向可与水混溶的挥发性有机溶剂中添加ω-6或ω-9游离脂肪酸。在另一个实施方案中,游离脂肪酸具有16个或更多个碳原子。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
因为聚合物在步骤(a)的混合物中是脂质饱和的,所以在混合之后,形成均质混合物。在另一个实施方案中,均质混合物呈均质液体的形式。在另一个实施方案中,在冷冻干燥或喷雾干燥混合物之后,形成囊泡。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,产生方法还包括除去存在于步骤(d)的产物中的溶剂和任选的水的步骤。在某些实施方案中,溶剂和水的除去利用混合物的雾化。在其它实施方案中,混合物被雾化到干燥的、加热过的空气中。通常情况下,雾化到加热过的空气中立即蒸发所有溶剂和水,消除对随后的干燥步骤的需要。在另一个实施方案中,混合物被雾化到无水溶剂中。在另一个实施方案中,通过喷雾干燥来进行液体除去。在另一个实施方案中,通过冷冻干燥来进行液体除去。在另一个实施方案中,利用液氮来进行液体除去。在另一个实施方案中,利用已经预先与乙醇预混合的液氮来进行液体除去。在另一个实施方案中,利用本领域中已知的另一种合适的技术来进行液体除去。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,本发明的方法还包括真空干燥组合物的步骤。在另一个实施方案中,真空干燥的步骤在蒸发的步骤之后进行。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,本发明的方法还包括通过加热步骤(d)的产物蒸发溶剂的步骤。持续加热直至溶剂被除去且在室温至90℃之间的典型温度内,更典型地最高至50℃。在另一个实施方案中真空干燥的步骤在蒸发的步骤之后进行。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
本发明还提供用用于肽分子的受控释放的基质组合物涂覆基材的过程,所述过程包括:
(a)将(i)生物相容的聚合物和(ii)包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分混合到第一溶剂中,其中所述第一溶剂是挥发性有机溶剂;
(b)将肽分子混合到第二溶剂中以形成溶液并将聚乙二醇加入到溶液中;
(c)将步骤(b)中得到的溶液与包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂的第二脂质组分混合;
(d)将步骤(a)和(c)中得到的溶液混合以形成均质的混合物;
(e)将基材添加到、浸渍或浸泡到在步骤(d)中得到的均质混合物中,或用步骤(d)中得到的均质混合物喷涂基材;
(f)将溶剂从被涂覆的基材除去。根据某些实施方案,待涂覆的基材包括选自由碳纤维、不锈钢、羟基磷灰石涂覆的金属、合成聚合物、橡胶、硅、钴-铬、钛合金、钽、陶瓷和胶原或明胶组成的组的至少一种材料。在其它实施方案中,基材可以包括任何医疗装置和骨填充颗粒。骨填充颗粒可以是同种异体的骨颗粒(即,来自人来源)、异种的骨颗粒(即,来自动物来源)和人造骨颗粒中的任何一个。根据某些典型的实施方案,涂层具有1微米-200微米的厚度,优选地在5微米-100微米之间的厚度。
根据一些实施方案,从被涂覆的基材除去溶剂可以通过蒸发来进行,例如,通过将被涂覆的基材放入温度为37℃的孵育器中,或通过在真空下持续干燥,或通过施加负压以加速溶剂除去。最后,在某些情况下,负压的另一个步骤是用于除去任何残留溶剂。本文所使用的术语‘负压’指低于大气压力的压力。
脂质饱和和用于确定其的技术
如本文所使用的“脂质饱和的”指基质组合物的聚合物用磷脂、联合存在于基质中的治疗性肽分子和任选的靶向部分及可以存在的任何其他脂质的饱和。如本文所描述的,在一些实施方案中,本发明的基质组合物包括不同于磷脂酰胆碱的磷脂。在其它实施方案中,基质组合物可包括不同于磷脂的脂质。基质组合物通过任何存在的脂质来饱和。“饱和”指其中基质含有可以被掺入基质中的所使用类型的脂质的最大量的状态。用于确定达到脂质饱和的聚合物:脂质比率的方法和确定基质的脂质饱和度的方法对本领域技术人员来说是已知的。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
根据某些典型的实施方案,本发明的最终的基质组合物相对于被设计用于肽分子(特别是具有治疗活性的肽、多肽和蛋白质)的递送的迄今已知的基于脂质的基质是基本上不含水的。换句话说,甚至当活性成分最初溶解在水溶液中时所有溶剂在制备脂质聚合物组合物的过程中被除去。最终的组合物基本上不含水防止生物活性肽分子降解或化学改性,特别是防止酶降解。当将组合物应用到含水生物环境时,基质组合物的外表面接触生物液体,同时基本上不含水的内部可保护剩余的活性成分从而使未受损的活性成分的持续释放成为可能。
根据某些实施方案中,术语“基本上不含水”指含有按重量计少于1%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.8%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.6%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.4%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.2%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指不存在影响基质的抗水性质的量的水。
在另一个实施方案中,基质组合物是实质上不含水的。“实质上不含”指含有按重量计少于0.1%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.08%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.06%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.04%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.02%的水的组合物。在另一个实施方案中,所述术语指含有按重量计小于0.01%的水的组合物。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
在另一个实施方案中,基质组合物不含水。在另一个实施方案中,所述术语指不含有可检测的量的水的组合物。每种可能性代表本发明独立的实施方案。
本发明的基质的制备过程仅包括一个步骤,其中可以使用水溶液。这种溶液与有机挥发性溶剂混合,且之后将所有液体除去。从而本发明的过程能够达到脂质饱和。脂质饱和赋予基质组合物抵抗在体内大量降解的能力;因此,基质组合物表现出在几周或几个月的水平上介导延长释放的能力。
在另一个实施方案中,基质组合物是干燥的。在另一个实施方案中,“干燥的”指以不存在可检测的量的水或有机溶剂。
在另一个实施方案中,基质组合物的透水性已经被最小化。将透水性“最小化”指在已被确定使所加入的水的渗透的渗透性最小化的量的脂质的存在下,如本文所描述的,主要在有机溶剂中产生基质组合物的过程。所需要的脂质的量可通过用含有氚标记的水的溶液水合囊泡来确定,如本文所描述的。
在另一个实施方案中,“脂质饱和”指对脂质基质内的由聚合物骨架的外部边界所界定的内部间隙(净容积(free volume))的填充。间隙被磷脂与存在于基质中的任何其他类型脂质、肽分子和任选的靶向部分填充至这样的程度:另外的脂质部分不能够再以可察觉的程度被掺入到基质中。
“零级释放速率”或“零级释放动力学”意思是生物活性肽分子从聚合物基质中的恒定的、线性的、连续的、持续的和受控的释放速率,即被释放的肽分子的量对时间的图是线性的。
生物活性肽分子的治疗应用
本发明还涉及各种应用,其中药物活性肽分子的持续释放或受控释放是所期望的。因此,根据某些实施方案中,本发明提供将至少一种类型的治疗上有效的肽分子施用到需要其的受治疗者的方法,所述方法包括向受治疗者施用本发明的药物组合物从而向受治疗者施用至少一种肽分子的步骤。
根据某些典型的实施方案,本发明提供将至少一种类型的抗菌肽施用到需要其的受治疗者的方法,所述方法包括将药物组合物施用到受治疗者的步骤。
为了更充分地说明本发明的一些实施方案而提出下面的实施例。然而它们应决不被解释为限制本发明的宽广范围。本领域技术人员在不脱离本发明的范围的情况下可以容易地设想出本文公开的原理的许多变化形式和修改。
实施例
实施例1-用来产生用于肽分子的递送的药物载体组合物的平台技术
I.第一溶液的制备
将聚合物(例如PLGA、PGA、PLA或其组合)和甾醇(例如胆固醇)和/或α-生育酚或γ-生育酚混合到挥发性有机溶剂(如带三氯甲烷/不带三氯甲烷的乙酸乙酯)中。整个过程在室温下进行。因此,得到脂质-聚合物基材。
II.第二溶液的制备
将选自肽、蛋白质或其任何组合的至少一个分子溶解在挥发性有机溶剂(通常为N-甲基吡咯烷酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯或其组合)或水中且添加聚乙二醇(PEG)1,000-8000,通常是PEG5,000。当肽分子溶解在有机溶剂中时,直接添加磷脂。当肽分子溶解在水中时,通常是在搅拌下,将所得的溶液与包括磷脂的挥发性有机溶剂(通常为N-甲基吡咯烷酮、乙醇、甲醇、乙酸乙酯或其组合)混合。所添加的磷脂包括:
磷酸胆碱或磷脂酰胆碱衍生物,例如氘化的1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)或二油酰-磷脂酰胆碱(DOPC),二棕榈酰-磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆蔻酰-磷脂酰胆碱(DMPC)、二油酰-磷脂酰胆碱(DOPC)、1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰胆碱,以所有脂质的10-90质量百分比(即磷脂、甾醇、神经酰胺、脂肪酸等的10-90质量百分比)存在于基质中;
任选地,磷脂酰乙醇胺-例如二甲基二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺(DMPE)或二棕榈酰-磷脂酰乙醇胺(DPPE)-以所有脂质的10-90质量百分比存在于基质中;
任选地,磷酸胆碱或磷脂酰胆碱衍生物或它们的组合以不同比例的磷脂酰乙醇胺在其添加到NA药物的基于水的溶液之前混合于有机溶剂中。
任选地,阳离子脂质以所有脂质的0.1-10摩尔百分比包括在基质中。
任选地,0.1-15质量百分比的游离脂肪酸,例如亚油酸(LN),或油酸(OA),作为在基质中所有脂质的0.1-10质量百分比;
混合物被均质化,声处理或被用于涂覆医疗装置的表面。通常整个过程在室温且最高至50℃下进行。
III.将聚合物与肽分子-PEG混合物混合
在搅拌下将第二悬浮液(或溶液)添加到第一溶液中。持续搅拌直至约5小时。整个过程优选地在室温下进行,如果必要的话优选地加热至不超过60℃,但在任何情况下全部根据特定的制剂、所使用的脂质的性质和特定的肽分子在不引起肽分子变性的温度下加热。所产生的混合物应该是均质的,但也可以是稍微混浊的。
IV.溶剂的除去
当进行表面的涂覆时,将来自第III阶段的悬浮液与待涂覆的颗粒或装置混合,然后蒸发挥发性有机溶剂。整个涂覆过程在约30℃-60℃,通常约45℃的温度下进行。
该挥发性有机溶剂可以任选地通过将涂覆过的基材放置在温度为37℃的孵育器中通过蒸发来除去,或通过在真空下持续干燥,或通过施加负压以加速溶剂除去。
来自阶段III的溶液可以任选地雾化到干燥的、加热过的空气中。
可选地,将来自阶段III的溶液雾化到水基溶液中,其可以含有碳水化合物,或雾化到被液氮覆盖的乙醇或无乙醇的仅仅的液氮中,之后将氮气和/或乙醇(如上面的)蒸发。
V.真空干燥
将基质组合物、涂覆过的颗粒和涂覆过的装置进行真空干燥。将所有有机溶剂和水残留物除去。为存储包括肽分子的基于脂质的基质做好准备。
实施例2:不利用PEG制备包括抗菌肽的基质
所使用的抗菌肽是在其N-端用荧光染料NBD标记的Temporin-L(SEQ:FVQWFSKFLGRIL)。
1.将肽(1毫克)溶解在MeOH/EA中且为了不利用PEG产生基质制剂而使用这种溶液。
2.将DPPC溶解在肽溶液中至225毫克/毫升的最终浓度。
3.将PLGA75/25是溶解在乙酸乙酯(300毫克/毫升)中。
4.将胆固醇溶解在乙酸乙酯(30毫克/毫升)中。
5.将一体积的PLGA溶液与5体积的胆固醇溶液混合。
6.将两体积的DPPC-肽溶液与三体积的PLGA-胆固醇溶液混合。
7.将100毫克磷酸三钙颗粒(TCP)称量到4毫升玻璃瓶中。
8.将0.15毫升PLGA-胆固醇-DPPC肽溶液添加到TCP颗粒中。将所产生的溶液在45℃下进行孵育,直至所有的溶剂被蒸发;任何剩余的溶剂通过过夜真空来除去。
实施例3:利用PEG制备包括抗菌肽的基质
1.如上面实施例2中,将肽溶解在MeOH/EA中。
2.将0.5毫克的PEG8,000溶解到步骤1的肽溶液中。
3.将溶液在45℃下孵育10分钟。
4.将DMPC或DPPC溶解在肽-PEG溶液中(最终磷脂浓度225毫克/毫升)
5.将PLGA75/25溶解在乙酸乙酯(300毫克/毫升)中。
6.将胆固醇(30毫克/毫升)溶解在乙酸乙酯中。
7.将一体积的PLGA溶液与5体积的胆固醇溶液混合。
8.将两体积的DPPC-PEG-肽或DMPC-PEG-肽溶液与三体积的PLGA-胆固醇溶液混合。
9.将200毫克的TCP称量到4毫升玻璃瓶中。
10.将0.2毫升的PLGA-胆固醇-DPPC-PEG-肽的溶液或PLGA-胆固醇-DMPC-PEG-肽溶液添加到TCP颗粒中。
11.将所得的溶液在45℃下孵育,直至所有的溶剂蒸发掉,任何剩余的溶剂通过过夜真空来除去。
实施例4:肽从制剂中的释放
用0.2毫升的双蒸馏水(DDW)对涂覆有包括抗菌肽Temporin-L的基质组合物的移植骨TCP(磷酸三钙)进行水合,且通过用新鲜的新体积的上层清液替换所述上层清液来每天收集样品。通过将一体积的MeOH添加到1体积的样品中,涡旋和在16000rpm下离心2分钟来提取肽。然后将上层清液在MeOH/DDW中稀释2倍。
释放到溶液中的抗菌肽的量通过下面的NBD荧光(Ex485纳米,Em520纳米)来评估。对来源于ddw/MeOH中肽的两倍连续稀释的荧光强度的线性标准曲线作图的结果显示在图1中。结果清楚地表明,将聚乙二醇添加到基质中显著改进蛋白质释放的周期和速率。
实施例5-涂有根据本发明的一些实施方案的基质组合物的骨填料中成纤维细胞生长因子(FGF)的持续释放:
利用PEG和不利用PEG的涂覆有包括FGF(人FGF-2Sigma)的基质组合物的骨填充颗粒如上面实施例2和实施例3所描述的来制备。在这种基质组合物中,将磷脂成功地溶解在甲醇和乙酸乙酯的混合物中,直到那时将利用PEG和不利用PEG的1体积的FGF溶液与10体积的磷脂溶液混合。
用DDW对涂覆过的骨填充颗粒的样品进行水合以便引发FGF从基质组合物中的释放。每天替换并收集样品中的溶液且将其保持在4℃下直至分析。
前面的对特定的实施方案的描述将充分揭示本发明的总的本质,以致其他人可以通过应用现有的知识,容易地修改和/或适应于这些特定的实施方案的不同的应用,而无需进行过多的实验和不偏离总的构思,并且因此,这种适应和修改应当且意图被理解为在所公开的实施方案的等同物的含义和范围内。应当理解的是,本文所使用的措辞或术语是为了描述而不是限制的目的。在不偏离本发明的情况下用于进行不同的所公开的功能的方法、材料和步骤可以采取各种替代形式。
Claims (51)
1.一种基质组合物,包括:
a.生物相容的聚合物,所述生物相容的聚合物与包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分结合;
b.第二脂质组分,所述第二脂质组分包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂;和
c.与聚乙二醇(PEG)结合的至少一种肽分子;
其中所述基质组合物适于提供所述肽分子的持续释放和/或受控释放。
2.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述肽分子是极性的。
3.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述PEG是具有在1,000-8,000的范围内的分子量的直链PEG。
4.如权利要求1所述的基质组合物,其中具有极性基团的所述脂质选自由甾醇、生育酚、磷脂酰乙醇胺及其衍生物组成的组。
5.如权利要求4所述的基质组合物,其中具有极性基团的所述脂质是甾醇。
6.如权利要求5所述的基质组合物,其中所述甾醇是胆固醇。
7.如权利要求6所述的基质组合物,其中所述胆固醇以所述基质组合物的总脂质含量的2摩尔%-30摩尔%的量存在。
8.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述第二脂质组分包括选自由磷脂酰胆碱或其衍生物;磷脂酰胆碱或其衍生物的混合物;磷脂酰乙醇胺或其衍生物;及其任意组合组成的组的磷脂。
9.如权利要求8所述的基质组合物,其中所述磷脂包括至少14个碳的至少一个饱和脂肪酸部分。
10.如权利要求8所述的基质组合物,其中所述磷脂包括至少14个碳的两个饱和脂肪酸部分。
11.如权利要求1所述的基质组合物,还包括选自由DC-胆固醇、1,2-二油酰-3-三甲基铵-丙烷(DOTAP)、二甲基双十八烷基铵(DDAB)、1,2-二月桂酰-sn-甘油-3-乙基磷酸胆碱(乙基PC)、1,2-二-O-十八烯基-3-三甲基铵丙烷(DOTMA)及其任意组合组成的组的阳离子脂质。
12.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述生物相容的聚合物选自由可生物降解的聚合物、不可生物降解的聚合物及其组合组成的组。
13.如权利要求12所述的基质组合物,其中所述可生物降解的聚合物选自由PLA(聚乳酸)、PGA(聚乙醇酸)、PLGA(聚(乳酸共乙醇酸))、壳聚糖、胶原及其衍生物以及其组合组成的组。
14.如权利要求13所述的基质组合物,其中所述不可生物降解的聚合物选自由聚乙二醇(PEG)、PEG丙烯酸酯、PEG甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸月桂酯、甲基丙烯酸羟乙酯、2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(MPC)、聚苯乙烯、衍生的聚苯乙烯、聚赖氨酸、聚N-乙基-4-乙烯基-溴化吡啶、聚丙烯酸甲酯、硅酮、聚甲醛、聚氨酯、聚酰胺、聚丙烯、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸及其组合组成的组。
15.如权利要求14所述的基质组合物,其中所述生物相容的聚合物包括可生物降解的聚合物和不可生物降解的聚合物的共嵌段。
16.如权利要求1所述的基质组合物,其中总脂质与所述可生物降解的聚合物的重量比在1:1和9:1之间,包括端值在内。
17.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述肽分子和PEG的重量比在10:1和1:1之间,包括端值在内。
18.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述基质组合物是均质的。
19.如权利要求1所述的基质组合物,还包括鞘脂。
20.如权利要求1所述的基质组合物,还包括生育酚。
21.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述基质组合物基本上不含水。
22.如权利要求1所述的基质组合物,还包括选自由磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇组成的组的另外的磷脂。
23.如权利要求1所述的基质组合物,还包括具有14个或更多个碳原子的游离脂肪酸。
24.如权利要求1所述的基质组合物,还包括聚乙二醇化的脂质。
25.如权利要求1所述的基质组合物,用于所述肽分子的持续释放,其中所述剂的至少30%以零级动力学从所述组合物中释放。
26.如权利要求25所述的基质组合物,用于所述肽分子的持续释放,其中所述剂的至少50%以零级动力学从所述组合物中释放。
27.如权利要求1所述的基质组合物,其中所述肽分子具有治疗活性。
28.如权利要求27所述的基质组合物,其中所述肽分子选自由酶、激素、抗菌剂、抗体、抗癌药、成骨因子、生长因子或低口服生物利用度蛋白质或肽组成的组。
29.如权利要求28所述的基质组合物,其中所述肽分子是抗菌肽。
30.如权利要求28所述的基质组合物,其中所述肽分子是蛋白质。
31.如权利要求30所述的基质组合物,其中所述蛋白质是酶。
32.如权利要求1所述的基质组合物,所述基质包括(a)可生物降解的聚酯;(b)甾醇,(c)具有至少14个碳的脂肪酸部分的磷脂酰胆碱;(d)极性肽分子;及(e)PEG。
33.一种包括权利要求1所述的基质组合物的植入物。
34.一种用于将治疗性肽分子施用于需要其的受治疗者的药物组合物,所述药物组合物包括权利要求1所述的基质组合物。
35.一种将治疗性肽分子施用于需要其的受治疗者的方法,所述方法包括将根据权利要求1所述的基质组合物施用于所述受治疗者,从而将治疗性肽分子施用于需要其的受治疗者的步骤。
36.一种医疗装置,包括:基材和沉积在所述基材的至少一部分上的生物相容的涂层,其中所述生物相容的涂层包括权利要求1所述的基质组合物。
37.如权利要求36所述的医疗装置,其中所述生物相容的涂层包括多层。
38.一种产生用于肽分子的递送和持续释放和/或受控释放的基质组合物的方法,包括步骤:
a.将(i)生物相容的聚合物和(ii)包括具有极性基团的至少一种脂质的第一脂质组分混合到第一溶剂中;其中所述第一溶剂是挥发性有机溶剂;
b.将所述肽分子混合到第二溶剂中以形成溶液并将聚乙二醇添加到所述溶液中;
c.将在步骤(b)中得到的所述溶液与包括具有至少14个碳的脂肪酸部分的至少一种磷脂的第二脂质组分混合;
d.将步骤(a)和(c)中得到的所述溶液混合,以形成均质的混合物;及
e.除去所述溶剂;
从而产生均质的包括所述肽分子的聚合物-磷脂基质。
39.如权利要求38所述的方法,其中所述第二溶剂选自由挥发性有机溶剂和极性溶剂组成的组。
40.如权利要求38所述的方法,其中步骤(c)还包括:(i)通过蒸发除去溶剂;及(ii)使得到的沉淀物悬浮于所述第二挥发性有机溶剂中。
41.如权利要求38所述的方法,其中所述肽分子是极性的。
42.如权利要求38所述的方法,其中所述PEG是具有在1,000-5,000范围内的分子量的直链PEG。
43.如权利要求38所述的方法,其中具有极性基团的所述脂质选自由甾醇、生育酚、磷脂酰乙醇胺及其衍生物组成的组。
44.如权利要求43所述的方法,其中具有极性基团的所述脂质是甾醇或其衍生物。
45.如权利要求38所述的方法,其至所述第二脂质组分包括选自由磷脂酰胆碱或其衍生物;磷脂酰胆碱或其衍生物的混合物;磷脂酰乙醇胺或其衍生物;及其任意组合组成的组的磷脂。
46.如权利要求38所述的方法,其中所述生物相容的聚合物选自由可生物降解的聚合物、不可生物降解的聚合物及其组合组成的组。
47.如权利要求46所述的方法,其中所述可生物降解的聚合物是选自由PLA(聚乳酸)、PGA(聚乙醇酸)、PLGA(聚(乳酸-共-乙醇酸))、阳离子生物相容的聚合物及其组合组成的组的可生物降解的聚酯。
48.如权利要求46所述的方法,其中所述不可生物降解的聚合物选自由聚乙二醇(PEG)、PEG丙烯酸酯、PEG甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸月桂酯、甲基丙烯酸羟乙酯、2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(MPC)、聚苯乙烯、衍生的聚苯乙烯、聚赖氨酸、聚N-乙基-4-乙烯基-溴化吡啶、聚丙烯酸甲酯、硅酮、聚甲醛、聚氨酯、聚酰胺、聚丙烯、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸及其组合组成的组。
49.如权利要求38所述的方法,其中在步骤(d)之后将所得到的溶液放入模具中,且随后将所述溶剂除去以便得到特定结构的基质。
50.如权利要求38所述的方法,其中基材被添加到、浸渍或浸泡在步骤(d)中得到的均匀溶液中,且随后将所述溶剂除去,从而产生涂覆有包括所述肽分子的所述均质的聚合物-磷脂基质的基材。
51.如权利要求38所述的方法,其中步骤(e)包括通过加热最高至60℃、通过施加负压力或通过这两者蒸发所述溶剂。
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