CN103709222A - 7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途 - Google Patents

7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途 Download PDF

Info

Publication number
CN103709222A
CN103709222A CN201410013024.0A CN201410013024A CN103709222A CN 103709222 A CN103709222 A CN 103709222A CN 201410013024 A CN201410013024 A CN 201410013024A CN 103709222 A CN103709222 A CN 103709222A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
compounds
methyl alcohol
ribonucleoside compounds
evaporate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201410013024.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103709222B (zh
Inventor
郭晓河
李玉江
陶乐
常俊标
王强
董黎红
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
High and New Technology Research Center of Henan Academy of Sciences
Original Assignee
High and New Technology Research Center of Henan Academy of Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by High and New Technology Research Center of Henan Academy of Sciences filed Critical High and New Technology Research Center of Henan Academy of Sciences
Priority to CN201410013024.0A priority Critical patent/CN103709222B/zh
Publication of CN103709222A publication Critical patent/CN103709222A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103709222B publication Critical patent/CN103709222B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一类7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物和其合成方法及其药物用途,属药物化学领域。其具有通式(I)结构:式中,R1=HorF;R2为如下取代基之一:,其中R3=H或CH3,R4=H或CH3,R5=H或CH3;R2为如下取代基之一:(CH2)nCH3,其中,n=0-4;CH2(CH2)nCH2OCH3,其中,n=0-18;CH2(CH2)nCH2NH2,其中n=0-18;CH2(CH2)nCH2N(CH3)2,其中n=0-18;

Description

7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途
技术领域
本发明涉及核苷类化合物,尤其涉及7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物,合成方法及其药物用途,属药物化学领域。
背景技术
病毒是一群体积微小、结构简单,核酸为中心、蛋白质为外壳,没有细胞颗粒,具有遗传性和变异性。它们寄生于细胞内并利用宿主细胞代谢系统进行增值复制。人类许多流行性传染病是由病毒引起的,如流感、麻疹、病毒性肝炎及艾滋病等。乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒(HBV)引起的、以肝脏炎性病变为主,并可引起多器官损害的一种疾病。乙肝广泛流行于世界各国,主要侵犯儿童及青壮年,少数患者可转化为肝硬化或肝癌。因此,它已成为严重威胁人类健康的世界性疾病,也是我国当前流行最为广泛、危害性最严重的一种疾病。近年来乙肝发病率呈明显增高的趋势。核苷类和嘌呤核糖核苷及其类似物在抗病毒、抗肿瘤方面起着极其重要的作用,一系列活性化合物,如阿巴卡韦(abacavir)、去羟肌苷 (didanosine)等用于抗艾滋病病毒(HIV),恩替卡韦(entecavir)用于抗慢性乙型肝炎病毒(HBV),嘌呤类如氟达拉滨(fludarabine)(治疗B-细胞慢性淋巴细胞白血病)、2'-脱氧助间型(fludarabine)(治疗B-细胞慢性淋巴细胞白血病)、、2'-脱氧助间型霉素(2'-deoxycoformycin)(治疗毛细管白血病)、卡培他滨(capecitabine)(抗肿瘤药)、奈拉滨(nelarabine)(用于罕见白血病和淋巴瘤的新药)等核苷类化合物已经获得了广泛的临床应用.由于病毒必须借助于宿主细胞的酶系统合成其自身的核酸和蛋白质才能生长繁殖,因此药物在杀伤病毒的同时也可伤害宿主的正常细胞。近年来,虽筛选出一些选择性较高的抗病毒药,但它们的抗病毒谱较窄,远不能满足临床需要。为了发现更有效的核苷类抗病毒药物,人们对核苷类化合物进行了不同的结构修饰,其中类嘌呤核糖核苷就是其中的一类。(文献1. Frank, S.; Peng, X. J. Org.Chem.2006,71, 81; 2. Kasai, H.; Oashi, Z.; Harada, F.; Nishimura, S.; Oppenheimer, N. J.; Crain, P. F.; Liehr, J. G.; Von Minden, D. L.; McCloskey, J. A. Biochem.1975, 14, 4198;  3. Kazlauskas, R.; Murphy, P. T.; Wells, J. A.; Jamieson, D. D. Aust. J. Chem.1983, 36, 165.)研究表明该类化合物有不同程度抗病毒活性,是一类新型的具有抗病毒活性的化合物。但是在现有文献中,尚未发现含7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物的合成,以及将其应用于抗HBV病毒药物的相关报道。
发明内容
    本发明的主要目的在于提供一种活性好、毒性低含有7-去氮嘌呤核糖核苷类化合物;另一目的在于提供该类化合物的合成方法;又一目的在于提供该类化合物在药物方面的应用。
为实现本发明目的,技术方案如下:
本发明7-去氮嘌呤核糖核苷类化合物,具有通式(I)结构:
Figure 77984DEST_PATH_IMAGE001
式中,R1=H或 F;
      R2为如下取代基之一:
Figure 995124DEST_PATH_IMAGE002
;,其中R3=H或CH3, R4=H或CH3, R5=H或CH3; R2还可以为如下取代基之一:(CH2)nCH3,其中,n=0-4;
           CH2(CH2)nCH2OCH3,其中,n=0-18;
          CH2(CH2)nCH2NH2,其中n=0-18;
          CH2(CH2)nCH2N(CH3)2,其中n=0-18;
     
Figure 243703DEST_PATH_IMAGE003
        其可以是如下化合物之一且不仅限于这些化合物:
Figure 107754DEST_PATH_IMAGE004
Figure 390968DEST_PATH_IMAGE005
Figure 682272DEST_PATH_IMAGE006
Figure 916682DEST_PATH_IMAGE007
Figure 115582DEST_PATH_IMAGE008
Figure 715508DEST_PATH_IMAGE010
其反应路线、方法如下:
化合物(I)的合成:将已知化合物4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)加入到甲醇和/或四氢呋喃溶解,再加入带有不同取代基的胺,密闭,加热反应,反应完毕后减压蒸干,用柱层析分离纯化得到化合物I。
Figure 407520DEST_PATH_IMAGE011
 
化合物1的合成:
在密闭反应器中,依次加入化合物(a)、乙胺水溶液、四氢呋喃和甲醇,加热反应,薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜反应蒸干,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇洗脱,蒸干得到化合物1。
化合物2的合成:
在密闭反应器中,依次加入化合物(a)、3-氨甲基吡啶、四氢呋喃和甲醇,加热反应,薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜反应蒸干,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇洗脱,冲去3-氨甲基吡啶,后用2%三乙胺的二氯甲烷:甲醇粗略过柱子,再用乙酸乙酯:甲醇洗脱过硅胶柱,蒸干得到白色化合物2。
化合物3的合成:
在密闭反应器中,依次加入化合物(a)、3-甲氧基丙胺和四氢呋喃,加热反应薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜反应。然后蒸干,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇洗脱过硅胶柱,得到白色泡沫状目标化合物3。
化合物4的合成:
在密闭反应器中,依次加入化合物(a)、甲胺水溶液和甲醇,加热反应,反应,薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜反应。蒸干后,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇洗脱过硅胶柱,得到化合物4。
化合物5的合成:
在密闭反应器中,化合物(a)、乙二胺和四氢呋喃,加热反应,薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜。蒸干后,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇为洗脱液洗脱,再用含三乙胺的二氯甲烷:甲醇为洗脱液洗脱洗脱过硅胶柱,得到化合物5。
化合物6的合成:
在密闭反应器中,依次加入化合物(a)、N,N-二甲基乙二胺和四氢呋喃,加热反应,薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜反应。蒸干后,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇为洗脱液洗脱,再分别含三乙胺的二氯甲烷:甲醇、乙酸乙酯:甲醇做淋洗剂洗脱,得到化合物6。
化合物7的合成:
在密闭反应器中,依次加入化合物(a)、环丙胺和四氢呋喃,加热反应,薄层层析跟踪检测至原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇,过夜反应。蒸干后,干法上硅胶柱,用二氯甲烷:甲醇为洗脱液洗脱,得到化合物7。
   本发明所述通式中所涵盖的化合物用于制备抗病毒药物(抗HBV 、抗HIV、抗HCV)。所指病毒优选乙型肝炎(HBV)。
 本发明创新点及优点在于:对7-去氮嘌呤核糖核苷类化合物的碱基进行了修
饰,合成了系列4-取代-9-(2′-脱氧-2′-β-氟 -β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶衍生物,这些化合物具有较好的抗乙肝病毒活性;制备方法可行;将其应用于治疗病毒药物,具有很好的应用前景。
具体实施方式
通过以下详细实施例对本发明进行更好的说明。
根据本发明通式化合物(I)的合成路线并结合实施例对发明进行进一步的说明,但并非限制本发明的范围。
实施例1:
    4-乙胺基-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(1)的制备
在50mL密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.29 g, 0.59mmol)、60-70%的乙胺水溶液(30mL)、四氢呋喃(10mL)和甲醇(7mL),在90℃油浴下,反应12h, TLC检测,原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇(30mL),过夜。蒸干后,用二氯甲烷:甲醇=13:1做洗脱液,柱层析分离,得到白色泡沫状化合物(1)(0.17g,0.59mmol),收率:99.65%。HRMS[M+H]:297.1357; 1H-NMR(DMSO,400Hz),δ:8.14(1H,s,H-2),7.55-7.53(1H,m,H-NHCH2CH3),7.25-7.24(1H,m,H-8),6.63-6.62(1H,m,H-7),6.57-6.52(1H,m,H-1’),5.89-5.88(1H,m,H-O),5.15-5.05(1H,m,H-3’),5.04-5.00(1H,m,H-O),4.37-4.32(1H,m,H-2’),3.79-3.78(1H,m,H-4’),3.65-3.63(2H,m,H-5’),3.59-3.47(2H,m,H-NCH2),1.12-1.17(3H,m,H-NCH2CH3)。
实施例2:
    4-(3-氨甲基吡啶)-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(2)的制备
在50mL密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.29g, 0.59mmol)、3-氨甲基吡啶(6mL)和四氢呋喃(40mL),在90℃油浴下,反应12h, TLC检测,原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇(30mL),过夜。蒸干后,用柱层析分离提纯,先用二氯甲烷:甲醇=20:1做洗脱液除去3-氨甲基吡啶,后用2%三乙胺的二氯甲烷:甲醇=3:1为洗脱液洗脱,最后用乙酸乙酯:甲醇=10:1为洗脱液洗脱,得到白色泡沫状化合物(2)(0.14g,0.28mmol),收率:47.23%。HRMS[M+H]:360.1472;1H-NMR(DMSO, 400Hz),δ: 8.58(1H,s,H-2),8.45-8.44(1H, m,H-N),8.18-8.17(1H,m,H-8),8.16-8.15(1H,m,H-Py),7.74-7.73(1H,m,H-Py),7.31-7.30(2H,m,H-Py),6.67-6.66(1H,m,H-7),6.54-6.53(1H,m,H-1’),5.89-5.88(1H,m,H-O),5.16-5.15(1H,m,H-O),5.03-5.02(1H,m,H-3’),4.74-4.71(2H,m,H-CH2-Py),4.38-4.32(1H,m,H-4’),3.79-3.78(1H,m,H-2’),3.64-3.59(2H,m,H-5’)。
实施例3:
    4-(3-甲氧基丙胺基)-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(3)的制备
在50mL密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.32 g, 0.64mmol)、3-甲氧基丙胺(6mL)和四氢呋喃(40mL),在90℃油浴下,反应12h, TLC检测,原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇(30mL),过夜。蒸干后,用柱层析分离提纯,用二氯甲烷:甲醇=10:1做洗脱液洗脱,得到白色泡沫状化合物(3)(0.21g,0.62mmol),收率:96.59%。HRMS[M+H]:341.1620;1H-NMR(DMSO,400Hz),δ:8.14(1H,s, H-2),7.56(1H, br s, H-N), 7.26-7.25 (1H,m,H-8), 6.64-6.63(1H, m,H-7), 6.57-6.56 (1H, m, H-1’),5.89-5.88(1H,m,H-O),5.15-5.00(1H,m, H-3’),5.07-5.04 (1H,m,H-O), 4.38-4.32 (1H,m,H-4’),3.79-3.78(1H,m,H-2’), 3.64-3.61(2H,m, H-5’), 3.51-3.48(2H,m,H-CH2),3.40-3.38(2H,,m,H-CH2),3.36-3.35(3H,m,H-CH2),1.85-1.79(2H,m,H-CH2)。
实施例4:
     4-甲胺基-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(4)的制备
在50mL密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.32g, 0.65mmol)、甲胺质量百分比30-40%水溶液(35mL)和甲醇(15mL),在90℃油浴下,反应12h后,蒸干后,加入氨甲醇(30mL),过夜。蒸干后,用柱层析分离提纯,二氯甲烷:甲醇=10:1做洗脱液洗脱,得到白色泡沫状化合物(4)(0.17g,0.59mmol),收率:91.05%。HRMS[M+H]:283.1210;1H-NMR(DMSO,400Hz),δ:8.16((1H,s,H-2), 7.55-7.54 (1H,m,H-N),7.26-7.24(1H,m,H-8),6.60-6.59(1H,m,H-7), 6.58-6.52(1H, m,H-1’), 5.89-5.88(1H,m,H-O),5.15-5.00(1H,m,H-3’),5.05-5.02(1H,m,H-O),4.38-4.32(1H,m,H-4’),3.79-3.78(1H,m,H-2’),3.64-3.61(2H,m,H-5’),2.96-2.95(3H,m,H-CH3)。
实施例5:
     4-乙二胺基-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(5)的合成
在50mL密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.30 g, 0.60mmol)、乙二胺(3ml)和四氢呋喃(40mL),在90℃油浴下,反应12h, TLC检测,原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇(30mL),过夜。蒸干后,用柱层析分离提纯,先用二氯甲烷:甲醇=5:1为洗脱剂洗脱,后用2%三乙胺的二氯甲烷:甲醇=5:1为洗脱剂洗脱,得到白色泡沫状化合物(5)(0.17g,0.54mmol),收率:88.37%。HRMS[M+H]:312.1466;1H-NMR(DMSO,400Hz),δ:8.13(1H,s,H-2),7.59(1H,br s, H-N),7.26-7.25(1H,m,H-8),6.65-6.64(1H,m,H-8),6.57-6.52(1H,m,H-1’),5.15-5.13(1H,m,H-O),5.01-4.99(1H,m,H-3’),4.38-4.31(1H,m,H-4’),3.79-3.77(1H,m,H-2’),3.64-3.60(2H,m,H-5’), 3.49-3.46(2H,m,H-CH2NH2),2.78-2.75((2H,m,H-NHCH2)。
实施例6:
    4-(N,N-二甲基乙二胺基)-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(6)的合成
在50mL密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.30 g, 0.60mmol)、N,N-二甲基乙二胺(6mL)和四氢呋喃(40mL),在90℃油浴下,反应12h, TLC检测,原料反应完,蒸干后,加入氨甲醇(30mL),过夜。蒸干后,柱层析分离提纯,用二氯甲烷:甲醇=10:1做洗脱液洗脱,后用含2%三乙胺的二氯甲烷:甲醇=3:1冲洗,得到白色泡沫状化合物(6)(0.20g,0.56mmol),收率:92.12%。HRMS[M+H]:340.1780;1H-NMR(DMSO,400Hz),δ:8.21(1H,s, H-2),8.01(1H,br s,H-N),7.31(1H,br s,H-8),6.71-6.70(1H, m,H-7), 6.58-6.54 (1H,m,H-1’),5.96-5.95 (1H,m,H-O), 5.16-5.03 (1H,m,H-3’), 5.09(1H, m,H-O), 4.39-4.33(1H,m,H-4’), 3.82-3.81(1H,m,H-2’),3.80-3.79 (2H, m,H-5’), 3.64-3.61(2H,m,H-NHCH2), 326-3.23 (2H,m,H-CH2N(CH3)2),2.77(6H,s,CH3)。
实施例7:
     4-环丙胺基-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(7)的合成
在50ml密闭反应器中,依次加入4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)(0.32g, 0.64mmol)、环丙胺(4ml)和四氢呋喃(40ml),在90℃油浴下,反应12h, TLC检测,约有10%的原料未反应完,蒸干后,加入氨甲醇(30ml),过夜。蒸干后,柱层析分离提纯,用二氯甲烷:甲醇=10:1为洗脱剂洗脱,得到白色泡沫状化合物(7)(0.17g,0.54mmol),收率:83.85%。HRMS[M+H]:309.1357;1H-NMR(DMSO,400Hz),δ:8.16(1H,s,H-2), 7.68(1H, br s,H-N),7.271H,br s,H-8),6.68(1H,br s,H-7), 6.59-6.54(1H,m,H-1’), 5.89-5.88 (1H,m,H-O), 5.15-5.01 (1H,m,H-3’), 5.07-5.04(1H, m,H-O),4.38-4.32(1H, m,H-4’), 3.79-3.78(1H,m,H-2’),3.65-3.62 (2H, m,H-5’), 2.92-2.90(1H,m, H-NHCH (CH2)2), 0.78-0.77(2H,m,H-NH-CH(CH2)2), 0.56-0.55(2H, m,H-NH-CH(CH2)2)。
以上所述,仅是本发明的部分实施例而已,并非对本发明做任何形式上的限制,凡是依据本发明的技术实质对上述实施例作的任何简单的修改,等同变化与修饰,均属于本发明技术方案范围内。
本发明合成的化合物可用于抗病毒药物的活性成分,可以单独使用,也可以与其他抗病毒药物联合用药,本发明所指的联合用药治疗过程中,包括运用至少一种本发明化合物或其活性衍生物与其他一种或多种抗病毒药物一起使用以增加总体疗效。联合用药时的药量和给药时间应根据不同的情况下所取得的最合理治疗效果而定。
本发明通式中的化合物用于治疗或预防或缓解某病毒引起疾病药物的制备。所指病毒包括但不仅限于乙型肝炎(HBV)。
抗病毒活性
本发明中所涵盖的化合物具有抗病毒活性,包括抗HBV活性。
抗乙型肝炎HBV体外活性试验:
1.1  待测化合物和阳性对照药
待测样品 7个(本发明化合物1-7),样品溶解于无血清RPMI-1640中,贮存浓度10mM,0.22μm过滤除菌,分装后-20℃保存,每次试验现用现配制成为工作液;
阳性对照化合物拉米夫定(3TC),购于葛兰素史克制药(苏州)有限公司,溶解于无血清RPMI-1640中,贮存浓度10mM,0.22μm过滤除菌, -20℃保存,每次试验现用现配制成为工作液。
试剂和仪器设备
试剂
胎牛血清,购自杭州四季青生物工程材料有限公司;1640培养基,购自北京索莱宝生物医药科技有限公司;G418和胰蛋白酶为Gibco公司产品;SYBR Green I染料为宝生物工程(大连)有限公司产品;二甲基亚砜(DMSO)为天津市富宇精细化工有限公司产品;四甲基偶氮唑盐(MTT)为Sigma(美国)公司生产;HBsAg和HBeAg抗原诊断试剂盒为上海科华生物工程股份有限公司产品。
仪器设备
168-1000XC酶标仪,BIORAD(美国)公司产品; IL-161HT CO2培养箱,施都凯仪器设备(上海)有限公司产品;XD-30倒置显微镜,舜宇光学科技(浙江)集团有限公司。
细胞株
HepG2.2.15细胞株,为HBV转染的肝癌细胞株,由本实验室保存和自行传代培养。
细胞的培养:RPMI 1640培养液中加入10%胎牛血清、200μg/ml G418,37℃、5% CO2培养箱中静置培养,每2天换1次液,每3~5天传代一次,取对数生长期细胞进行试验。
实验方法
细胞毒性检测 
       HepG2.2.15细胞以2×104个/ml浓度接种于96孔培养板,每孔100μl,设4个重复孔,置CO2培养箱(37℃, 5.0% CO2)中培养24 h,加入含不同浓度药物的培养基,并设不含药物的细胞对照孔;3TC为阳性对照药物。连续培养9d后,应用MTT比色法检测样品对HepG2.2.15细胞的毒性(Ferrari et al., 1990)。酶标仪(检测波长490 nm,参考波长630nm)读取各孔OD值,计算样品对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度CC50(50% Cytotoxic concentration)。
细胞上清液中HBsAg和HBeAg的检测 
HepG2.2.15细胞以2×104个/ml浓度接种于24孔培养板,每孔1ml,置CO2培养箱(37℃, 5.0% CO2)中培养24 h,加入含不同浓度药物的培养基,并设不含药物的细胞对照孔。于第3天、第6天、第9天收集细胞培养上清液,按照ELISA试剂盒检测说明书操作,酶标仪(检测波长450 nm,参考波长630nm)读取各孔OD值,计算样品对HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg、HBeAg的抗原表达抑制率。
毒性和活性实验结果见表1和表2。
表1. MTT法检测样品1-7细胞9天毒性CC50
本发明化合物   1   2    3    4   5    6    7
CC50 >1000 >1000 927.8μM 579.5μM 35.5μM 784.2μM 544.28μM
表2.  ELISA检测样品1-7的HBV S 和E抗原的抑制率
Figure 331483DEST_PATH_IMAGE013
由表1和表2可以看出,化合物1-7均具有良好的抗HBV活性,尤其是化合物1、化合物2、化合物3、化合物6的细胞毒性较低,具有较好的应用开发前景。该类化合物的开发,将为病毒患者特别是乙肝病毒患者带来光明。

Claims (4)

1.7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物,其特征在于,其具有通式(I)结构:
式中,R1=H 或 F; R2为如下取代基之一:
Figure 488295DEST_PATH_IMAGE002
,其中R3=H或CH3, R4=H或CH3, R5=H或CH3;
R2为如下取代基之一: (CH2)nCH3,其中,n=0-4;CH2(CH2)nCH2OCH3,其中,n=0-18; CH2(CH2)nCH2NH2,其中n=0-18; CH2(CH2)nCH2N(CH3)2,其中n=0-18;
Figure 132903DEST_PATH_IMAGE003
2.根据权利要求1所述的7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物,其特征在于,优选如下化合物之一:
Figure 464659DEST_PATH_IMAGE004
Figure 688967DEST_PATH_IMAGE005
Figure 281622DEST_PATH_IMAGE006
Figure 969568DEST_PATH_IMAGE007
Figure 382095DEST_PATH_IMAGE008
Figure 941252DEST_PATH_IMAGE009
3.合成如权利要求1所述的7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物方法,其特征在于,将化合物4-氯-9-(2′-脱氧-2′-β-氟-3′,5′-二-O-苯甲酰基-β-D-呋喃糖基)吡咯[2,3-d]嘧啶(a)加入到甲醇和/或四氢呋喃溶解,再加入带有不同取代基的胺,密闭,加热反应,反应完毕后减压蒸干,用柱层析分离纯化得到化合物I;
Figure 656715DEST_PATH_IMAGE011
式中,R1=H或F; R2为如下取代基之一:
Figure 556538DEST_PATH_IMAGE012
,其中R3=H或CH3, R4=H或CH3, R5=H或CH3;
R2为如下取代基之一: (CH2)nCH3,其中,n=0-4;CH2(CH2)nCH2OCH3,其中,n=0-18; CH2(CH2)nCH2NH2,其中n=0-18; CH2(CH2)nCH2N(CH3)2,其中n=0-18;
Figure 653807DEST_PATH_IMAGE003
4.如权利要求1或2所述的7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物在制备药物中的应用,其特征在于,以其为活性成分将其制备成抗HBV药物。
CN201410013024.0A 2014-01-13 2014-01-13 7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途 Active CN103709222B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410013024.0A CN103709222B (zh) 2014-01-13 2014-01-13 7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410013024.0A CN103709222B (zh) 2014-01-13 2014-01-13 7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103709222A true CN103709222A (zh) 2014-04-09
CN103709222B CN103709222B (zh) 2016-02-17

Family

ID=50402610

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410013024.0A Active CN103709222B (zh) 2014-01-13 2014-01-13 7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103709222B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101852260B1 (ko) 2016-07-18 2018-04-25 한국해양과학기술원 퓨린리보뉴클레오사이드 또는 그 유도체의 베타 락타메이즈 저해제로서의 용도

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101177442A (zh) * 2007-07-16 2008-05-14 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其制备方法及其应用
WO2008101157A1 (en) * 2007-02-15 2008-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-substituted-2'-f modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
CN101407534A (zh) * 2007-07-16 2009-04-15 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物及其应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008101157A1 (en) * 2007-02-15 2008-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-substituted-2'-f modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
CN101177442A (zh) * 2007-07-16 2008-05-14 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物、其制备方法及其应用
CN101407534A (zh) * 2007-07-16 2009-04-15 郑州大学 2’-氟-4’-取代-核苷类似物及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BIRENDRA K. BHATTACHARYA,等: "Synthesis and Anti-DNA Viral Activities in Vitro of Certain 2,4-Disubstituted-7-(2-deox-2-fluoro-β-D-arabinofuranosyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidine Nucleosides", 《JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 38, no. 20, 31 December 1995 (1995-12-31), XP002277614, DOI: 10.1021/jm00020a009 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101852260B1 (ko) 2016-07-18 2018-04-25 한국해양과학기술원 퓨린리보뉴클레오사이드 또는 그 유도체의 베타 락타메이즈 저해제로서의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
CN103709222B (zh) 2016-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104114568B (zh) 取代的核苷、核苷酸及其类似物
CN102351931B (zh) 嘧啶核苷衍生物、合成方法及其在制备抗肿瘤、抗病毒药物中的应用
CN104812747B (zh) 用于治疗病毒感染的1,2,4‑三嗪衍生物
CN103232490B (zh) 具有抑制hiv-1/hbv病毒复制活性的核苷类化合物、制备方法及抗病毒方面的应用
CN108289931A (zh) 4’-取代的核苷逆转录酶抑制剂及其制备
Drenichev et al. Modification of the length and structure of the linker of N6-benzyladenosine modulates its selective antiviral activity against enterovirus 71
WO2003055896A2 (en) Anti-viral 7-deaza l-nucleosides
CN104086612A (zh) 4-取代胺基-2′-脱氧-2′-氟-4′-叠氮-β-D-胞苷类核苷化合物、制备方法及其应用
JP2017512774A5 (zh)
CN112979735A (zh) 抗肝炎病毒的化合物及其制备方法和应用
CN109265504B (zh) 4-氨基酸取代嘧啶核苷化合物及其药物用途
CN101212968B (zh) 3,5-二取代的和3,5,7-三取代的-3H-噁唑并以及3H-噻唑并[4,5-d]嘧啶-2-酮化合物及其前药
JPH03167197A (ja) 治療的ヌクレオシド
CN103709222B (zh) 7-去氮类嘌呤核糖核苷类化合物、合成方法及其药物用途
CN108129366B (zh) 抗病毒化合物、制备方法及其用途
CN113461760B (zh) 4-硫代脱氧胸苷衍生物及其抗乙肝病毒制药应用
CN112409431B (zh) 阿糖胞苷结构类似物及其制备方法和用途
RU2418795C2 (ru) Производные диоксолана для лечения рака
JPH10507763A (ja) L−ピラノシルヌクレオシド
CN113336816B (zh) 胞苷类化合物及其抗肿瘤用途
CN104211748B (zh) 6‑羟基双脱氧鸟嘌呤核苷磷酸酯制备和用途
Matyugina et al. Synthesis and antiviral evaluation against the Vaccinia virus of new N 1-oxide analogs of 5′-noraristeromycin
CN108623630A (zh) 氘代核苷酸类似物及其用途
CN109180596B (zh) 一类含稀有糖基的蒽醌并三氮唑核苷类似物及其合成方法和应用
CN103275157B (zh) 一枝蒿酮酸含杂环和糖的酰胺类衍生物及制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant