CN103694053B - 一种墨汁鬼伞菌丝原种培养基 - Google Patents
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Abstract
一种墨汁鬼伞菌丝原种培养基,它是以风干猪粪100-300份、蔗糖20份、琼脂20份、蛋白胨1份、酵母膏1份、干酪素2.5份、氯化钠0.5份和胰蛋白胨2份,均以重量份数计;风干猪粪的铜、锌、铁含量分别为:160-200mg/kg、700-750mg/kg、800-850mg/kg。本发明墨汁鬼伞快速生长培养基组成成分明确、稳定,促进墨汁鬼伞菌丝生长,萌发完全所需时间提前10d以上,而且菌丝体产量较高,菌丝干重可达26g/L以上,可达等量PDA培养基产量的1.76倍。本发明墨汁鬼伞快速生长培养基培养得到活力强的原种,为产业化运用墨汁鬼伞高效吸收猪粪中的重金属提供了有力保障。
Description
技术领域
本发明涉及一种大型真菌培养基,特别是一种墨汁鬼伞菌丝的原种培养基。
背景技术
墨汁鬼伞(Coprinopsisatramentaria)属担子菌亚门,层菌纲,伞菌目,鬼伞科,鬼伞属,具有药用价值。墨汁鬼伞是野生杂菌,子实体较大,菌盖伸展后直径在4-11cm范围内,地上部分易于采摘,开伞后逐步液化成墨汁。多生于粪堆、肥土及植物残体上,耐低C/N,生命力较强,生物产量高。研究发现,鬼伞对Pb、Hg等重金属具有较强的富集作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种墨汁鬼伞菌丝的原种培养基,该培养基组成成分明确、简单,菌丝萌发较快、产量高。
一种墨汁鬼伞原种培养基,其特征在于:它是以风干猪粪100-300份、蔗糖20份、琼脂20份、蛋白胨1份、酵母膏1份、干酪素2.5份、氯化钠0.5份和胰蛋白胨2份,均以重量份数计。
其中对于风干猪粪,猪的不同生长时期猪粪铜含量5-240mg/kg、锌含量28-4030mg/kg、铁含量56-2016mg/kg,本发明采用铜、锌、铁含量分别为:160-200mg/kg、700-750mg/kg、800-850mg/kg的风干猪粪。
本发明墨汁鬼伞原种培养基的制备是将上述风干猪粪用水煮汁10-15分钟、加入上述其他组分用水定容、、灭菌、冷却;灭菌条件为:温度为121℃,压力范围0.1MPa-0.15MPa,时间为30min。接种前,需将培养基冷却至35℃以下。接种量与培养基量的重量比在20%以内。
在畜禽粪便重金属污染治理中,将本发明原种培养基培养的活力强的墨汁鬼伞原种接种到后续栽培包里使得栽培包的菌丝培养污染率低、菌丝强壮,将该栽培包放置于猪粪上出菇,从而使墨汁鬼伞吸收猪粪中重金属的吸收效果好,充分吸收猪粪中的重金属进而利用墨汁鬼伞易自溶的特性提高对重金属的回收效率,即完成畜禽粪便的“去毒”化处理。因其生物学特性及对重金属的高效富集作用,墨汁鬼伞将成为猪粪重金属萃取的新生物工具;本发明原种培养基成本低廉、培养出的墨汁鬼伞菌丝萌发力、强壮、产量高,菌丝干重可达26.0g/L,最高为等量对照PDA培养基的1.76倍,为其进行大规模的生产应用提供了有力保障。
附图说明
图1:本发明墨汁鬼伞原种培养基下墨汁鬼伞菌丝半径;
图2:本发明墨汁鬼伞原种培养基下墨汁鬼伞菌丝生长速率;
图3:本发明墨汁鬼伞原种培养基下墨汁鬼伞菌丝鲜重;
图4:本发明墨汁鬼伞原种培养基下墨汁鬼伞菌丝干重;
图5:本发明墨汁鬼伞原种培养基下墨汁鬼伞菌丝折干率。
具体实施方式
以上是本发明的较佳实施例,凡依本发明技术方案所做的改变,所产生的功能作用未超出本发明技术方案的范围时,均属于本发明的保护范围。
以下实施例中,墨汁鬼伞母种:中国林业科学院引进墨汁鬼伞菌种XJ-0017。对照PDA培养基:马铃薯200g、蛋白胨2g、蔗糖20g、KH2PO40.46g、MgSO40.5g、琼脂20g、酵母膏1g、维生素B10.01%、尿素1.0g,氯化钙0.5g、玉米淀粉2.0g。采用铜、锌、铁含量分别为:187.75mg/kg、741.64mg/kg、823.86mg/kg的风干猪粪。
实施例1:将引进的墨汁鬼伞母种进行活化,并将菌种接种至墨汁鬼伞快速生长培养基和对照PDA培养基上,分别按照人工气候箱温度25℃,湿度85%条件下进行菌丝培养。结果表明墨汁鬼伞快速生长培养基的菌丝接种1d后开始萌发,干重达18.0g/L(培养15天长满),对照PDA培养基菌丝(接种2d后开始萌发)干重15.10g/L(培养15天长满)。其中,墨汁鬼伞快速生长培养基为:风干猪粪100.0g、蔗糖20.0g,琼脂20.0g,蛋白胨1.0g、酵母膏1.0g、干酪素2.5g、氯化钠0.5g、胰蛋白胨2.0g。
实施例2:将引进的墨汁鬼伞母种进行活化,并将菌种接种至墨汁鬼伞快速生长培养基和对照PDA培养基上,分别按照人工气候箱温度25℃,湿度85%条件下进行菌丝培养。结果表明墨汁鬼伞快速生长培养基的菌丝接种1d后开始萌发,干重21.84g/L(培养15天长满),对照PDA培养基菌丝(接种2d后开始萌发)干重15.10g/L(培养15天长满)。其中,墨汁鬼伞快速生长培养基为:风干猪粪150.0、蔗糖20.0g,琼脂20.0g,蛋白胨1.0g、酵母膏1.0g、干酪素2.5g、氯化钠0.5g、胰蛋白胨2.0g。
实施例3:将引进的墨汁鬼伞母种进行活化,并将菌种接种至墨汁鬼伞快速生长培养基和对照PDA培养基上,分别按照人工气候箱温度25℃,湿度85%条件下进行菌丝培养。结果表明墨汁鬼伞快速生长培养基的菌丝接种1d后开始萌发,干重达26.58g/L(培养15天长满),对照PDA培养基菌丝(接种2d后开始萌发)干重15.10g/L(培养15天长满)。其中,墨汁鬼伞快速生长培养基为:风干猪粪200.0、蔗糖20.0g,琼脂20.0g,蛋白胨1.0g、酵母膏1.0g、干酪素2.5g、氯化钠0.5g、胰蛋白胨2.0g。
实施例4:将引进的墨汁鬼伞母种进行活化,并将菌种接种至墨汁鬼伞快速生长培养基和对照PDA培养基上,分别按照人工气候箱温度25℃,湿度85%条件下进行菌丝培养。结果表明墨汁鬼伞快速生长培养基的菌丝接种1d后开始萌发,干重达22.96g/L(培养15天长满),对照PDA培养基菌丝(接种2d后开始萌发)干重15.10g/L(培养15天长满)。其中,墨汁鬼伞快速生长培养基为:风干猪粪300.0g、蔗糖20.0g,琼脂20.0g,蛋白胨1.0g、酵母膏1.0g、干酪素2.5g、氯化钠0.5g、胰蛋白胨2.0g。
采用对照PDA培养基与实施例1-4采用的墨汁鬼伞快速生长培养基培养墨汁鬼伞原种的实验见以下表1-6、图1-5(实施例1-4采用的墨汁鬼伞快速生长培养基编号分别为PMMI、PMMII、PMMIII、PMMIV)。
表1不同培养基上墨汁鬼伞菌丝生长状况比较
表2猪粪培养基下墨汁鬼伞菌丝半径(单位:cm)
表3.猪粪培养基下墨汁鬼伞生长速率(单位:cm/d)
表4.猪粪培养基下墨汁鬼伞菌丝鲜重(单位:g)
表5.猪粪培养基下墨汁鬼伞菌丝干重(单位:g)
表6.猪粪培养基下墨汁鬼伞菌丝折干率
本发明墨汁鬼伞快速生长培养基组成成分明确、稳定,促进墨汁鬼伞菌丝生长,萌发完全所需时间提前10d以上,而且菌丝体产量较高,菌丝干重可达26g/L以上,可达等量PDA培养基产量的1.76倍。本发明墨汁鬼伞快速生长培养基培养得到活力强的原种,为产业化运用墨汁鬼伞高效吸收猪粪中的重金属提供了有力保障。
Claims (1)
1.一种墨汁鬼伞原种培养基,其特征在于:它是以铜、锌、铁含量分别为160~200mg/kg、700~750mg/kg、800~850mg/kg的风干猪粪100~300份、蔗糖20份、琼脂20份、蛋白胨1份、酵母膏1份、干酪素2.5份、氯化钠0.5份和胰蛋白胨2份,均以重量份数计;
它具体是按以下步骤进行制备的:将所述风干猪粪用水煮汁10~15分钟,再加入其他组分用水定容、灭菌、冷却;所述灭菌条件为:121℃,压力范围0.1MPa~0.15MPa,时间30min。
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