CN103675124B - 酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法 - Google Patents
酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103675124B CN103675124B CN201310610998.2A CN201310610998A CN103675124B CN 103675124 B CN103675124 B CN 103675124B CN 201310610998 A CN201310610998 A CN 201310610998A CN 103675124 B CN103675124 B CN 103675124B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phase microextraction
- steamed bun
- volatile flavor
- headspace solid
- flour dough
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 title claims abstract description 34
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 238000001319 headspace solid-phase micro-extraction Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims abstract description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 claims description 58
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims description 11
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims description 11
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 claims description 6
- 238000010792 warming Methods 0.000 claims description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 5
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 5
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims description 5
- 238000004898 kneading Methods 0.000 claims description 4
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 claims description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 claims description 3
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N octamethyltrisiloxane Chemical compound C[Si](C)(C)O[Si](C)(C)O[Si](C)(C)C CXQXSVUQTKDNFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 238000004987 plasma desorption mass spectroscopy Methods 0.000 claims description 3
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 claims description 3
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 abstract description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 238000002470 solid-phase micro-extraction Methods 0.000 description 7
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 2
- 239000012159 carrier gas Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 2
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 2
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Bakery Products And Manufacturing Methods Therefor (AREA)
Abstract
本发明公开了一种酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法，包括：将酸面团馒头冷却、切块后，置于70-75℃水浴中预平衡30-40min；采用顶空固相微萃取技术对预平衡后的酸面团馒头中的挥发性风味物质进行吸附萃取；利用气相色谱-质谱分析技术对挥发性风味物质进行鉴定。本发明方法不需有机溶剂，能快速、准确地检测出酸面团馒头中的挥发性风味物质。
Description
技术领域
本发明涉及发酵食品风味分析技术领域，尤其涉及一种酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法。
背景技术
馒头(Chinese Steamed Bread)也称为馍或馍馍，是起源于我国的传统主食，在我国特别是北方地区日常生活中占有重要地位。据统计，我国北方每年馒头的用粉量占面粉总量的70%左右。馒头主要是以小麦粉为原料，加水、酵母或发酵剂（酵子、面肥、起子、老面）等和成面团发酵，经过面团的揉制、成型及醒发等过程，最后经过汽蒸熟化为成品。
酸面团馒头，是指用上次做馒头留下来的发酵面团，以此作为发酵剂，加入面粉和成面团进行发酵，加入适量碱，和面后成型，醒发蒸制馒头。我国早在13世纪就开始使用酸面团发酵生产馒头。随着20世纪80年代中期即发活性干酵母进入我国市场，由于活性干酵母活性高，发酵力大，使用量少等优点，所以人们开始用活性酵母蒸制馒头。由于干酵母是纯种发酵，制作的馒头风味单调，而传统发酵酸面团是多种微生物共生的微生态体系，是多种微生物糖化、发酵、酯化的协同作用，组织结构更趋于柔软细腻而富有弹性的口感，而且生成了醇、酯、醛、酚、酸、低分子糖、多肽、氨基酸等多种风味物质。所以制作的馒头质地细致，风味独特，备受广大消费者的青睐。
目前，关于酸面团馒头品质及营养成分的研究较多，而对于其挥发性风味成分研究较少。顶空固相微萃取(Headspace-Solid PhaseMicro-Extraction，HS-SPME)是20世纪90年代新发展起来的一种用于食品风味物质分析检测的技术。这种方法最大的特点是把取样、萃取、富集、进样等过程在同一个装置完成，减少了实验的繁琐。与其他分离方法相比，此方法选择性好，不需要溶剂，所需样品用量少，且操作简单、快速、费用低，并可与气相色谱或液相色谱直接联用。
公开号CN103105440A的发明专利申请公开了一种测定牛肝菌中挥发性风味物质的方法，方法如下：(1)采用顶空固相微萃取(HS-SPME)方法对牛肝菌中的挥发性成分进行萃取；(2)利用气相色谱-质谱联用技术结合Kovats保留指数(KI)对萃取到的挥发性成分进行分离鉴定；(3)利用气相色谱-嗅觉测量法(GC-O)对牛肝菌中的挥发性风味物质进行鉴定。该方法能简单快速地分析牛肝菌中的挥发性风味成分。
HS-SPME技术已广泛应用于食品领域，但对酸面团制备的馒头中挥发性风味成分的研究还尚未报道。
发明内容
本发明提供了一种酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法，不需有机溶剂，能快速、有效地检测出酸面团馒头中的挥发性风味物质。
一种酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法，包括：
（1）将酸面团馒头冷却、切块后，置于70-75℃水浴中预平衡30-40min；
（2）采用顶空固相微萃取技术对预平衡后的酸面团馒头中的挥发性风味物质进行吸附萃取；
（3）利用气相色谱-质谱分析技术对挥发性风味物质进行鉴定。
采用顶空固相微萃取技术可有效分离挥发性成分，再利用质谱谱图分析和保留指数方法结合，能准确鉴别待测挥发性化合物。
步骤（1）中，所述的酸面团馒头的冷却时间可以为5-10min，便于馒头切块。
所述的酸面团馒头切块后，粒径为50-100目，便于萃取。通过所述的预平衡，可以使馒头中风味物质充分挥发出来，在样品瓶顶空形成相对饱和的浓度，可有效提高萃取效率。
步骤（2）中，所述的顶空固相微萃取采用的65μm PDMS/DVB萃取头，对样品中挥发性风味物质有较强吸附能力，萃取效果稳定。
顶空固相微萃取时，萃取温度为75℃，萃取时间为30-40min；优选为30min。
步骤（3）中，气相色谱分析时，色谱柱可以采用DB-WAX(30m×0.25mm×0.25μm)，载气为高纯度氦气(99.999％)，流速为1ml/min，进样口温度为250℃，进样时以不分流方式进样。
气相色谱分析时，采用以下程序升温：初始温度40℃，保持3min，以5℃/min升温至200℃，再以10℃/min升温至230℃，保持3min。通过试验发现此升温程序对样品中挥发性风味物质分离效果较好，并且重复性好。
质谱分析条件可以为：电离方式为EI，电离电压70eV，灯丝发射电流35μA，离子源温度230℃，接口温度280℃，检测方式为全离子扫描。
所述的酸面团馒头可以通过如下方法制备：
（1）将酸面团加入水中浸泡，浸泡完成后加入小麦面粉，混匀，置于温度28-32℃、相对湿度70-80%条件下发酵2.5-4h；
（2）发酵完成后，加入小麦面粉和水，然后进行揉面、分割、搓圆、成型，再置于温度28-32℃、相对湿度70-80%条件下醒发40-70min；
（3）醒发完成后，蒸制，得到酸面团馒头。
其中，步骤（1）中，以每千克酸面团计，所述的浸泡用水量为0.3-0.5kg，小麦面粉的添加量为0.6-0.9kg；步骤（2）中，以每千克酸面团计，所述的小麦面粉的添加量为1.1-1.4kg，水的添加量为0.5-0.8kg。
采用以上方法制的酸面团馒头，口感好，组织结构柔软细腻，且风味物质种类多，营养丰富。
本发明建立的方法能够简单快速的分析酸面团馒头中的挥发性风味成分，采用HS-SPME方法不需有机溶剂，操作简单，避免了样品在加热过程中的挥发和产生其它物质，能有效地收集挥发性成分；利用质谱谱图分析和保留指数方法结合准确检测了待测挥发性化合物，提高了结果的可信度。
附图说明
图1为实施例1中采用SPME技术萃取酸面团馒头Hn得到的化合物经气质分析后的全离子扫描色谱图；
图2为实施例1中采用SPME技术萃取酸面团馒头Sx得到的化合物经气质分析后的全离子扫描色谱图；
图3为实施例1中采用SPME技术萃取酸面团馒头Gs得到的化合物经气质分析后的全离子扫描色谱图；
图4为实施例1中采用SPME技术萃取酸面团馒头Hf得到的化合物经气质分析后的全离子扫描色谱图；
图5为实施例1中采用SPME技术萃取酸面团馒头Hr得到的化合物经气质分析后的全离子扫描色谱图。
具体实施方式
本实施例在本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和过程。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件。
实施例1
1、酸面团：取五个来自我国不同地区的传统发酵酸面团，编号为Hn-87、Sx-91、Gs-107、Hf-112和Hr-122。
2、对五个酸面团，分别通过如下步骤，制备得到相应的酸面团馒头，编号分别为Hn、Sx、Gs、Hf和Hr：
（1）将酸面团加入水中浸泡，浸泡完成后加入小麦面粉，混匀，置于温度28℃、相对湿度75%条件下发酵3.0h；
（2）发酵完成后，加入小麦面粉和水，然后进行揉面、分割、搓圆、成型，再置于温度30℃、相对湿度80%条件下醒发50min；
（3）醒发完成后，蒸制，得到酸面团馒头。
3、通过如下步骤分别对五个地区的酸面团馒头样品进行挥发性风味物质检测：
取100g酸面团馒头，冷却10min后切块成粒径80目的小块，置于75℃水浴中预平衡35min，然后采用顶空固相微萃取技术对馒头中挥发性风味物质进行吸附萃取，萃取头为65μm PDMS/DVB，萃取温度为75℃，萃取30min。
利用气相色谱-质谱分析技术对挥发性风味物质进行鉴定，气相色谱的色谱柱可以采用DB-WAX(30m×0.25mm×0.25μm)，载气为氦气(99.999％)，流速为1ml/min，进样口温度为250℃，以不分流方式进样，其升温程序为：初始温度40℃，保持3min，以5℃/min升温至200℃，再以10℃/min升温至230℃，保持3min；
质谱分析条件为：电离方式为EI，电离电压70eV，灯丝发射电流35μA，离子源温度230℃，接口温度280℃，检测方式为全离子扫描。
4、化合物鉴定方法
GC-MS图谱通过计算机和人工检索，把每个峰与NIST Library08提供的标准质谱图对照鉴定化合物，仅当正反匹配度均大于700的鉴定结果才给予列出；通过系列正构烷烃计算出未知化合物的RI值，并与www.odour.org.uk中报道的化合物RI值进行比对，±50范围内为一致。化合物含量可按峰面积归一化法计算相对百分含量。
式中：RI为样品a的保留时间(min)；
ta为样品a的保留时间(min)；
tn为正构烷烃Cn的保留时间(min)。
试验结果见表1（采用SPME技术分别萃取五个地区酸面团馒头经气质分析后检测到的风味化合物）和图1-5。
由结果可知：SPME技术不需化学试剂，对分析样品无损伤，对易损失或易氧化的醇类、酮类或醛类风味化合物检测有较好的分析效果，是分析酸面团馒头中挥发性风味成分的有效技术方法。
表1SPME联合GC/MS技术检测的酸面团馒头中风味化合物
Claims (3)
1.一种酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法，包括：
(1)将酸面团馒头冷却、切成粒径为50-100目的块后，置于70-75℃水浴中预平衡30-40min；
(2)采用顶空固相微萃取技术对预平衡后的酸面团馒头中的挥发性风味物质进行吸附萃取，所述的顶空固相微萃取采用65μm PDMS/DVB萃取头；顶空固相微萃取时，萃取温度为75℃，萃取时间为30-40min；
(3)利用气相色谱-质谱分析技术对挥发性风味物质进行鉴定，气相色谱分析时，采用以下程序升温：初始温度40℃，保持3min，以5℃/min升温至200℃，再以10℃/min升温至230℃，保持3min；质谱分析条件为：电离方式为EI，电离电压70eV，灯丝发射电流35μA，离子源温度230℃，接口温度280℃，检测方式为全离子扫描。
2.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取检测方法，其特征在于，所述的酸面团馒头通过如下方法制备：
(1)将酸面团加入水中浸泡，浸泡完成后加入小麦面粉，混匀，置于温度28-32℃、相对湿度70-80％条件下发酵2.5-4h；
(2)发酵完成后，加入小麦面粉和水，然后进行揉面、分割、搓圆、成型，再置于温度28-32℃、相对湿度70-80％条件下醒发40-70min；
(3)醒发完成后，蒸制，得到酸面团馒头。
3.根据权利要求2所述的顶空固相微萃取检测方法，其特征在于，步骤(1)中，以每千克酸面团计，所述的浸泡用水量为0.3-0.5kg，小麦面粉的添加量为0.6-0.9kg；步骤(2)中，以每千克酸面团计，所述的小麦面粉的添加量为1.1-1.4kg，水的添加量为0.5-0.8kg。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310610998.2A CN103675124B (zh) | 2013-11-26 | 2013-11-26 | 酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310610998.2A CN103675124B (zh) | 2013-11-26 | 2013-11-26 | 酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103675124A CN103675124A (zh) | 2014-03-26 |
| CN103675124B true CN103675124B (zh) | 2015-06-03 |
Family
ID=50313321
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310610998.2A Expired - Fee Related CN103675124B (zh) | 2013-11-26 | 2013-11-26 | 酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103675124B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105092737A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-25 | 浙江大学 | 一种测定馒头中挥发性风味物质种类的方法 |
| CN106018630A (zh) * | 2016-08-09 | 2016-10-12 | 安徽青松食品有限公司 | 一种馒头中风味物质的检测方法 |
| CN106018293A (zh) * | 2016-08-09 | 2016-10-12 | 安徽青松食品有限公司 | 一种馒头品质的检测方法 |
| CN112051349A (zh) * | 2020-07-24 | 2020-12-08 | 上海市农业科学院 | 一种大麦幼苗挥发性成分的检测方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103284063A (zh) * | 2013-06-20 | 2013-09-11 | 江南大学 | 一种利用植物乳杆菌制作馒头的方法 |
-
2013
- 2013-11-26 CN CN201310610998.2A patent/CN103675124B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103284063A (zh) * | 2013-06-20 | 2013-09-11 | 江南大学 | 一种利用植物乳杆菌制作馒头的方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 同时蒸馏萃取与固相微萃取法提取馒头中挥发性物质;胡丽花等;《中国农学通报》;20101231;第26卷(第17期);第98-102页 * |
| 固相微萃取-气质联用比较馒头和面包中风味物质;胡丽花等;《粮食加工》;20101231;第35卷(第6期);第49-53页 * |
| 绿茶粉对馒头制作过程中挥发性风味物质的变化研究;蒋玉兰等;《中国茶叶加工》;20111231(第4期);第42-46页 * |
| 顶空固相微萃取-气质联用分析小麦馒头制作过程中的挥发性成分变化;燕雯等;《食品科学》;20121231;第33卷(第12期);第255页第1节 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103675124A (zh) | 2014-03-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103675124B (zh) | 酸面团馒头中挥发性风味物质的顶空固相微萃取检测方法 | |
| CN103675159B (zh) | 酸面团馒头中挥发性风味物质的同时蒸馏萃取检测方法 | |
| Le Boucher et al. | First mass spectrometry metabolic fingerprinting of bacterial metabolism in a model cheese | |
| CN104034820A (zh) | 一种快速鉴别樱桃酒品牌的方法 | |
| Capozzi et al. | PTR-ToF-MS coupled with an automated sampling system and tailored data analysis for food studies: bioprocess monitoring, screening and nose-space analysis | |
| CN102445505A (zh) | 一种快速测定饮料酒中氨基甲酸乙酯的方法 | |
| CN109991324A (zh) | 一种鉴别多浪羊羊肉的方法 | |
| CN107782827B (zh) | 一种奶酪特征风味物质分析方法及其指纹图谱 | |
| Scarpellino et al. | Evolution of volatile compounds in ripening raw and pasteurized milk Cheddar cheese observed by gas chromatography | |
| CN102636375A (zh) | 从白酒中提取目标气味物质的方法及白酒气味分析方法 | |
| CN103675136A (zh) | 一种中华鳖脂肪酸分析方法 | |
| CN103675126B (zh) | 酸面团馒头中挥发性风味物质的吹扫捕集检测方法 | |
| Feng et al. | New Model for Flavour Quality Evaluation of Soy Sauce. | |
| CN107607666A (zh) | 一种生物样品中有机酸的检测方法 | |
| CN110412183B (zh) | 一种针捕集-气相色谱-质谱联用对玫瑰花香气成份分析方法 | |
| CN107315038B (zh) | 一种批量化对酒类样品中氨基甲酸乙酯快速测定的方法 | |
| CN105021748A (zh) | 一种茶叶挥发性香气成分分析方法 | |
| CN103822980B (zh) | 一种金华火腿品质的快速判别方法 | |
| CN107179375B (zh) | 一种超声法辅助测定糙米中挥发性风味物质的方法 | |
| JP6482215B2 (ja) | 脂質の解析方法 | |
| CN113406260A (zh) | 一种酸菜发酵周期的鉴别方法 | |
| CN106198804A (zh) | 一种樱桃酒中含氮化合物的鉴定方法 | |
| CN110887921B (zh) | 一种高效快速分析杜仲叶及其发酵产物特征挥发性成分的方法 | |
| CN105572286A (zh) | 一种甲鱼腥味物质的测定方法 | |
| CN109991333A (zh) | 一种利用气相色谱质谱联用技术分析豆浆中脂肪酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20150603 Termination date: 20201126 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |