CN103627653A - 一种赤红球菌菌株及其在含有机污染物的废水处理中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种赤红球菌菌株及其在含有机污染物的废水处理中的应用，命名为赤红球菌（Rhodococcus ruber）ZHY1-6，保藏号为CGMCC No.8173。由赤红球菌菌株制成微生物菌剂；本发明的赤红球菌ZHY1-6和微生物菌剂用于处理含有机污染物的废水处理工艺中，用于降解废水中的有机污染物，本发明的菌株及菌剂应用于高盐苯酚废水、含烃类废水和香料废水的处理中时，不仅降低了污水处理的成本，而且对于保护生态环境，保护人民的身体健康具有重要的意义。

Description

一种赤红球菌菌株及其在含有机污染物的废水处理中的应用

技术领域

本发明涉及有机污染物降解技术领域，具体涉及一种赤红球菌、由该赤红球菌制成的微生物菌剂及该赤红球菌及微生物菌剂在有机污染物降解中的应用。 

背景技术

苯酚、烃类及芳烃类化合物是重要的化工原料，是制药、香料废水等工业废水的主要成分，这些化合物对人类和环境生物均具有较大的危害。尤其现在很多工业废水为化学合成废水，成分复杂、且含有大量的盐分，加大了污水处理的难度，造成排放的污水难以达标，这些污水中含有的有毒有机污染物不仅对人、环境产生直接危害，还会抑制环境生物去除有机污染物的能力。 

公开号为CN103241886A的中国发明申请公开了一种含有机物废水的处理工艺，包括以下步骤：（1）对含有机物废水进行预处理，以除去含有机物废水中的悬浮物；（2）对经步骤（1）之后的含有机物废水进行加压处理；（3）将经步骤（2）之后的含有机物废水送至加压燃烧蒸发器中进行加压燃烧蒸发处理，含有机物废水被蒸发后与燃烧过程中的烟气一起混合形成含有机物蒸汽的一级气体混合物；（4）将经步骤（3）之后的一级气体混合物通入加压氧化转化器中进行加压燃烧氧化转化处理，一级气体混合物中的有机物蒸汽被燃烧氧化转化后得到二级气体混合物；（5）将经步骤（4）之后的二级气体混合物通入到调质单元中进行调质降温处理。 

公开号为CN1621364A的中国发明申请公开了一种有机物废水处理工艺。其技术方案是:用碱将废水的pH值调节至5-6,温度调节至38-40℃,然后进厌氧生物滤床反应器进行生物处理,反映温度控制在35-38℃;生物滤床反应器由下进水口进水上流依次通过污泥段、填料段、三相分离段和澄清段,在三相分离段引出甲烷气,在澄清段溢流槽引出清水回流。在厌氧生物滤床反应器进行生物处理过程中培养的厌氧生物菌种包括:水解菌、酸 化菌、醋酸菌和甲烷菌。 

高盐的存在使得一般的生物治理难以达到处理的效果，所以采用投加具有降解有机污染物的耐盐微生物强化处理，使得生化处理不经过长期的驯化，短期内就能达到一定的处理效果，自然界中存在的微生物因具有强大的降解功能和较强的适应性， 

例如公开号为CN101812418A的中国发明申请公开了一株耐盐净污菌及其用途，属于含盐废水生物处理技术领域。耐盐净污菌菌株,其中:它保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏编号CGMCC No.3314。该耐盐净污菌菌株的用途是将该菌株制备成微生物制剂后用于含盐废水处理或海水利用后的废水处理。 

发明内容

本发明提供了一种赤红球菌菌株及其在含有机污染物的废水处理中的应用，菌株对多种有毒有机污染物有降解作用以及对工业废水具有较好处理效果。 

一种赤红球菌菌株，命名为赤红球菌（Rhodococcus ruber）ZHY1-6，保藏号为CGMCC No.8173。 

本发明的赤红球菌保藏于位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2013年9月11日，保藏号为CGMCC No.8173。 

所述的赤红球菌分离至长庆油田被石油污染的污泥，菌体为短杆状；所述赤红球菌的培养特征： 

在固体培养基（成分如下：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，pH7.0-7.2）上，35-37℃培养5-7天，菌落大小3-4mm，浅橘黄色，菌落凸起，边缘不规则，有褶皱，菌落表面干燥、粗糙、不透明。 

本发明还提供一种如所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用。所述废水的含盐质量分数为1～2%。 

所述有机污染物为苯酚、烃类、芳烃类、杂环类或氯代化合物。优选为苯酚、烃类或芳烃类。 

一种优选的应用方法：将所述赤红球菌ZHY1-6配制成微生物菌液，赤红球菌菌液驯化后投加到含有机污染物的废水处理工艺的好氧活性污 泥中。 

废水处理工艺为常规的含有有机污染物的处理工艺，投加量按根据废水情况按常规量投加。 

制成赤红球菌菌液的培养基中加入NaCl，培养基成分优选为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，pH7.0-7.2。 

另一种优选的应用方法：将所述赤红球菌ZHY1-6配制成微生物菌剂，将所述微生物菌剂投加到含有机污染物的废水处理工艺的好氧活性污泥中。 

本发明的微生物菌剂投加到常规含有机污染物的废水处理工艺中的好氧池中。 

将所述赤红球菌ZHY1-6配制成微生物菌剂的方法包括如下步骤： 

（1）将赤红球菌ZHY1-6活化后接种至摇瓶培养基中，35～37℃振荡培养至对数生长后期，收集摇瓶菌种； 

（2）将摇瓶菌种接种至种子培养基中，34～36℃培养至对数生长期，得种子液； 

（3）将所述种子液接种至发酵培养基中，34～36℃发酵完成后收集发酵液即得所述微生物菌剂。 

所述摇瓶培养基成分为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖2g/L，pH7.0-7.2； 

所述发酵培养基与种子培养基的成分相同，其成分为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖3g/L，pH7.0-7.2。 

步骤（2）的培养过程中无菌空气通入量为1:0.7（V/V）；步骤（3）的培养过程中无菌空气的通气量为1：（0.8-1.2）（V/V）； 

步骤（2）的培养过程中搅拌速度为200转/分；步骤（3）的培养过程中搅拌速度为200-240转/分。 

本发明还提供一种由所述赤红球菌菌株制备得到的微生物菌剂，所述微生物菌剂由如下方法制备： 

（1）将赤红球菌ZHY1-6活化后接种至摇瓶培养基中，35～37℃振荡培养至对数生长后期，收集摇瓶菌种； 

（2）将摇瓶菌种接种至种子培养基中，34～36℃培养至对数生长期，得种子液； 

（3）将所述种子液接种至发酵培养基中，34～36℃发酵完成后收集发酵液即得所述微生物菌剂。 

制备微生物菌剂的方法具体步骤如下： 

（1）、斜面种：将菌株ZHY1-6（原种）在培养皿上活化，固体培养基成分：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，琼脂：20g/L，pH7.0-7.2上，35-37℃上倒置恒温培养。 

（2）、摇瓶种：将活化好的单菌落接种于100mL的液体培养基中（成分如下：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖2g/L，pH7.0-7.2）上，35-37℃，180转/分培养。恒温振荡培养至对数生长期，准备接种子罐。 

（3）、种子罐：培养基成分为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖3g/L，pH7.0-7.2，在100L种子罐里按照60%（V/V）的比例投加培养基，121℃高压湿热灭菌，冷却至35℃后，将摇瓶种子按10%（V/V）的接种量接入种子罐，搅拌速度为200转/分，无菌空气通入量为1:0.7（V/V），培养至对数生长期。 

（4）、发酵罐：发酵罐为500L，所用培养基与种子罐培养基相同，发酵液装量为容积的60%（V/V），在1.1kg/cm²的压力下，121℃高压湿热灭菌，灭菌后冷却至35℃以下，通入无菌空气保持无菌状态备用。将到达对数期的种子液按10%（V/V）的接种量接入发酵罐，接种后的发酵罐温度控制在35℃左右，发酵液的培养过程中无菌空气的通气量为1:（0.8-1.2）（V/V），搅拌速度为200-240转/分，整个工艺流程培养时间为24-36小时，发酵结束后菌体数量达到8-10亿个/mL以上。 

（5）、产品：发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型。 

与现有的处理方法相比，本发明具有如下有益效果： 

本发明通过筛选到的耐盐微生物及菌剂，用于环境污染修复，将是高盐工业废水处理的一个重要工具。 

本发明提供的菌株ZHY1-6及其菌剂对工业废水的有毒有害物质及高盐环境对有毒有害物质有较好的去除效果，具有较广的降解谱，能够降解苯酚、烃类、芳烃类化合物，能使苯酚的降解率达到90%以上，对烃类、芳烃类化合物的去除效果达到70%以上。特别是在高盐环境下也能有较好 的降解效果。 

本发明的微生物菌剂具有生产使用成本低、使用方便、降解谱较广、去除效果好的优点，尤其对高盐废水中的苯酚降解率可达到90%以上。 

本发明提供的菌株和菌剂可用于降解工业废水中的有机有毒成分处理，适用于现代工业废水如香料废水、制药废水等高盐废水以及其它石油化工生产过程中产生的含有苯酚、烃类、芳烃类有机废水的处理。 

本发明成功地解决了工业废水处理过程中苯酚、烃类、芳烃类化合物去除效果不高的问题，降低了生产和使用成本，对于保护生态环境，保护人民的身体健康具有重要的意义。 

附图说明

图1是本发明菌株在油镜下（10X100）的图片。 

具体实施方式

实施例1赤红球菌ZHY1-6的获得及鉴定 

一、菌株ZHY1-6的获得及鉴定 

取长庆油田被石油污染的污泥，含盐量在3%（质量百分数）左右，取2g污泥加到基础盐培养基中，100mL基础盐培养基中加5g的原油，37℃，200转/分，培养过程观察摇瓶中黑色的原油颜色逐渐变浅直至原油降解到最小量时，再取1mL菌液接种在同样的培养基中，重复驯化富集培养3次。 

然后接种富集好的1mL菌液接种到分别含有苯酚、C₁₈烷烃、萘为唯一碳源的基础盐培养基中，同样富集培养3次，然后分别取1mL菌液做梯度稀释，平板涂布，含有苯酚和萘的平板放30℃培养，含C₁₈烷烃的平板37℃培养，培养过程中观察平板有单菌落长出，挑取单菌落接种在同样的培养基上划线纯化后保存。 

基础盐培养基成分：NH₄NO₃2g，K₂HPO₄1.5g，KH₂PO₄3g，MgSO₄·7H₂O0.1g，无水CaCl₂0.01g，Na₂EDTA·2H₂O0.01g，蒸馏水：1000mL，pH值7.2-7.4 

基础盐液体培养基中苯酚浓度测定方法：取1mL液体培养基，加入 等体积的甲醇，充分振荡，使化合物溶解，用0.22μm的微孔滤膜过滤后进样。 

高效液相色谱进行检测，检测条件：色谱柱，C18（250×4.6mm×5μm），流动相，甲醇：水=5：2（体积比），流速，1.0ml/min，进样量，20μL，苯酚的检测波长271nm，浓度外标法定量。 

基础盐液体培养基中萘浓度测定方法：采用气相色谱法测定，在含有萘的液体培养基中加入5mL甲苯，振荡萃取3次，将3次的萃取液合并定容到15mL。取1mL样品用0.22μm的微孔滤膜过滤后进样，气相色谱检测条件，采用DB-5毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)，氢火焰离子化检测器(FID)，程序升温(起始温度140℃，5min，以40℃/min速率升温至250℃，保持5min)，进样口温度：250℃，分流比：30：1，检测器温度：250℃，载气：氢气，流量：35mL/min，空气流量：350mL/min，尾吹气流量：35mL/min，自动进样量：0.5μL。采用外标法定量。 

基础盐液体培养基中C18烷烃浓度测定方法：采用气相色谱法测定，在含有C18烷烃的液体培养基中，加入5mL的正己烷，萃取3次，将3次的萃取液合并后，取1mL样品用0.22μm的微孔滤膜过滤后进样，气相色谱检测条件，采用DB-5毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)，氢火焰离子化检测器(FID)，程序升温：起始温度，140℃，2min，以10℃/min速率升温至190℃，保持5min，以20℃/min速率升温至250℃，保持5min；进样口温度：250℃，分流比：30：1，检测器温度：250℃，载气：氢气，流量：45mL/min，空气流量：450mL/min，尾吹气流量：45mL/min，自动进样量：0.5μL。采用外标法定量。 

COD测定：国标GB11914-89。 

二、菌株ZHY1-6的鉴定 

（1）、形态特征：菌体为短杆状，其在油镜下的图片如图1所示。 

（2）、培养特征：在培养基：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，琼脂20g/L，pH7.0-7.2，37℃培养5-7天，菌落大小3-4mm，浅橘黄色，菌落凸起，边缘不规则，有褶皱，菌落表面干燥、粗糙、不透明。 

（3）、16S rDNA序列鉴定 

F27：5′-AGAGTTTGATCTGGCTCAG-3′（SEQ ID NO.2） 

R1492：5′-TACCTTGTTACGACTT-3′（SEQ ID NO.3） 

采用上述引物进行PCR扩增，从菌株ZHY1-6中扩增到16S rDNA基因片段，将所获得16S rDNA克隆到pGEM T-easy载体后送上海基康生物技术有限公司测序。16S rDNA的部分序列如SEQ ID NO.1所示，与GenBank中的序列比对发现，菌株ZHY1-6的16S rDNA序列与Rhodococcus ruber菌株序列的同源性为99%。 

菌株ZHY1-6的保藏： 

通过以上鉴定结果，确认菌株为Rhodococcus ruber，将其命名为次赤红球菌（Rhodococcus ruber）ZHY1-6，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏号为CGMCC No.8173，保藏时间2013年9月11日。 

实施例2菌株ZHY1-6在高盐基础液体培养基对不同化合物的降解 

挑取菌株ZHY1-6单菌落接种在100mL的液体培养基中（蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，pH7.0-7.2），37℃、180转/分振荡培养48小时，获得新鲜菌液。 

在100mL基础盐培养基（同实施例1中的盐基础培养基）中，含2%NaCl（g/V），分别加入终浓度为200mg/L的苯酚、200mg/L C₁₈烷烃，200mg/L萘，接入5mL新鲜菌液，35℃，180转/分，摇床培养72小时，取样测定化合物的降解率。 

表1菌株ZHY1-6对不同化合物的降解率 

底物	苯酚	C18烷烃	萘
				降解率（%）	91.6	68.5	<55

实施例3菌株ZHY1-6在高盐含酚制药废水中的降解效果 

挑取菌株ZHY1-6单菌落接种在100mL的液体培养基中（蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，pH7.0-7.2），37℃、180转/分振荡培养48小时，获得新鲜菌液。 

取100mL高盐含酚制药废水，含盐量在2%左右，检测其中苯酚的含量在181mg/L。 

接入5mL新鲜菌液，置于35℃，160转/分摇床培养，分别在培养2 天、3天、4天取样测定化合物的降解率。 

表2菌株ZHY1-6在高盐含酚废水中对苯酚的去除 

底物	培养2天	培养3天	培养4天
				降解率（%）	61.4	78.6	89.1

实施例4菌株ZHY1-6在处理含烃类化合物制药废水的效果 

挑取菌株ZHY1-6单菌落接种在100mL的液体培养基中，（蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，pH7.0-7.2），37℃、180转/分振荡培养48小时，获得新鲜菌液。 

采用一级接触氧化—出水的工艺处理，用2L的圆柱体做反应器，聚氨酯填料做载体，在反应器里加入该企业的好氧池活性污泥5g/L，每天按照5%（V/V）投加菌株ZHY1-6的新鲜的菌液，连续投加9天。 

在这9天的驯化挂膜过程中进水为该企业进好氧池的水，COD基本在2400mg/L左右，前3天，HRT为48h，DO为2.5mg/L。驯化3天后，HRT为36h，DO为2.5mg/L。第七天开始，HRT为24h，DO为2.5mg/L。经过9天的驯化，挂膜基本成功之后连续进水，HRT为24h，DO为2.5mg/L。从第三天开始，每天测定出水COD的浓度。 

企业采用调节池-一级好氧活性污泥-二级好氧活性污泥-厌氧-CASS-出水的工艺，出水COD常年基本稳定在1000mg/L左右，从好氧池到出水COD去除率为58.33%。 

企业对出水水质的要求：COD≤500mg/L。 

表3菌株ZHY1-6对含烃类废水处理的效果 

实施例5菌株ZHY1-6处理生产香料废水的效果 

挑取菌株ZHY1-6单菌落接种在100mL的液体培养基中，（蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，pH7.0-7.2），37℃、 180转/分振荡培养48小时，获得新鲜菌液。 

采用一级接触氧化—二级接触氧化—出水的工艺处理，用2L的圆柱体做反应器，组合填料做载体，在反应器里加入该企业的好氧池活性污泥5g/L，每天按照5%（V/V）投加新鲜的菌液，连续投加10天。 

在这10天的驯化挂膜过程中进水为该企业进好氧池的污水，COD1864mg/L，前5天，HRT为72h，DO为2.5mg/L。驯化第6天，HRT为48h，DO为2.5mg/L。经过10天的驯化，挂膜基本成功，连续进水，HRT为48h，DO为2.5mg/L。从第三天开始，每天测定出水COD的浓度。 

企业采用调节池-厌氧-水解酸化-好氧活性污泥-接触氧化-出水的工艺，出水COD常年基本稳定在900mg/L左右，从好氧池到出水COD去除率为51.72%。 

企业对出水水质的要求：COD≤500mg/L。 

表4菌株ZHY1-6处理生产香料废水的效果 

检测时间（天）	第3天	第4天	第5天	第6天
					出水COD(mg/L)	360.29	328.54	341.06	338.74
去除率（%）	80.67	82.37	81.70	81.83

实施例6微生物菌剂的制备及其在合成香料废水中的应用 

（1）、斜面种：将菌株ZHY1-6（原种）在培养皿上活化，固体培养基成分：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖1g/L，琼脂：20g/L，pH7.0-7.2上，35-37℃上倒置恒温培养。 

（2）、摇瓶种：将活化好的单菌落接种于100mL的液体培养基中（成分如下：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖2g/L，pH7.0-7.2）上，35-37℃，180转/分培养。恒温振荡培养至对数生长期，准备接种子罐。 

（3）、种子罐：培养基成分为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖3g/L，pH7.0-7.2，在100L种子罐里按照60%（V/V）的比例投加培养基，121℃高压湿热灭菌，冷却至35℃后，将摇瓶种子按10%（V/V）的接种量接入种子罐，搅拌速度为200转/分，无菌空气通入量为1:0.7（V/V），培养至对数生长期。 

（4）、发酵罐：发酵罐为500L，所用培养基与种子罐培养基相同， 发酵液装量为容积的60%（V/V），在1.1kg/cm²的压力下，121℃高压湿热灭菌，灭菌后冷却至35℃以下，通入无菌空气保持无菌状态备用。将到达对数期的种子液按10%（V/V）的接种量接入发酵罐，接种后的发酵罐温度控制在35℃左右，发酵液的培养过程中无菌空气的通气量为1:（0.8-1.2）（V/V），搅拌速度为200-240转/分，整个工艺流程培养时间为24-36小时，发酵结束后菌体数量达到8-10亿个/mL以上。 

（5）、产品：发酵完成后培养液出罐直接用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型。 

（6）、香料企业污水处理厂采用的工艺：格栅-调节池-隔油池-混凝气浮-厌氧池-一级好氧活性污泥池-二级好氧活性污泥池-接触氧化池-二沉池-出水。 

（7）、企业进水量1500-2000m³/d，调节池COD3500-4000mg/L，氨氮70-100mg/L，进调节池的废水其含盐量1.0%左右，pH6-8。 

（8）、在企业污水处理的一级好氧活性污泥池内投加1000L菌剂，在二级好氧活性污泥池内投加1000L菌剂，在接触氧化池内投加500L菌剂。 

（9）企业污水处理厂经过自己的处理工艺，出水COD基本维持在1000mg/L左右，氨氮50-80mg/L。 

（10）企业要求出水COD≤500mg/L，氨氮≤20mg/L。 

（11）菌剂投加后的半个月内企业污水处理厂出水见表5： 

表5：微生物菌剂对合成香料废水的处理结果 

由以上实施例可见，本发明提供的菌株ZHY1-6及其菌剂对工业废水中的有毒有害物质及高盐环境下处理该类物质具有较好的效果，具有较广的降解谱，能够同时降解苯酚、烃类、芳烃类等化合物，能使含盐2%的苯酚废水，对苯酚的去除率最高达到89.1%。 

本发明的菌株对含烃类制药废水和香料废水中的有毒有机污染物有很好的降解作用，对含烃类制药废水COD的去除率最高达到83.77%，与企业的处理工艺比，COD的去除率提高了25.44%，出水基本保持在450mg/L以下，达到了企业要求的出水COD低于500mg/L的排放要求。对香料废水COD的去除率最高达到82.37%，与企业的处理工艺比COD的去除率提高了30.65%，出水COD基本稳定在400mg/L以下。菌剂对合成香料废水在实际工程运行中对COD和氨氮的去除基本能达到企业的处理要求。所以该菌株和菌剂可以成功的应用于高盐苯酚废水、含烃类废水和香料废水的处理中，不仅降低了污水处理的成本，而且对于保护生态环境，保护人民的身体健康具有重要的意义。 

序列表

 

Claims (10)

1.一种赤红球菌菌株，其特征在于，命名为赤红球菌（Rhodococcus ruber）ZHY1-6，保藏号为CGMCC No.8173。 

2.如权利要求1所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用。 

3.如权利要求2所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用，其特征在于，所述废水的含盐质量分数为1～2%。 

4.如权利要求2所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用，其特征在于，所述有机污染物为苯酚、烃类、芳烃类、杂环类或氯代化合物。 

5.如权利要求2所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用，其特征在于，将所述赤红球菌ZHY1-6配制成微生物菌液，赤红球菌菌液驯化后投加到含有机污染物的废水处理工艺的好氧活性污泥中。 

6.如权利要求2所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用，其特征在于，将所述赤红球菌ZHY1-6配制成微生物菌剂，将所述微生物菌剂投加到含有机污染物的废水处理工艺的好氧活性污泥中。 

7.如权利要求6所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用，其特征在于，将所述赤红球菌ZHY1-6配制成微生物菌剂的方法包括如下步骤： 

（1）将赤红球菌ZHY1-6活化后接种至摇瓶培养基中，35～37℃振荡培养至对数生长后期，收集摇瓶菌种； 

（2）将摇瓶菌种接种至种子培养基中，34～36℃培养至对数生长期，得种子液； 

（3）将所述种子液接种至发酵培养基中，34～36℃发酵完成后收集发酵液即得所述微生物菌剂。 

8.根据权利要求7所述赤红球菌菌株在含有机污染物的废水处理中的应用，其特征在于，所述摇瓶培养基成分为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖2g/L，pH7.0-7.2； 

所述发酵培养基与种子培养基的成分相同，其成分为：蛋白胨10g/L，酵母浸出粉5g/L，NaCl10g/L，葡萄糖3g/L，pH7.0-7.2。 

9.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于，步骤（2）的培养过程中无菌空气通入量为1:0.7（V/V）；步骤（3）的培养过程中无菌空气的通气量为1：（0.8-1.2）（V/V）； 

步骤（2）的培养过程中搅拌速度为200转/分；步骤（3）的培养过程中搅拌速度为200-240转/分。 

10.一种由权利要求1所述赤红球菌菌株制备得到的微生物菌剂，所述微生物菌剂由如下方法制备： 

（1）将赤红球菌ZHY1-6活化后接种至摇瓶培养基中，35～37℃振荡培养至对数生长后期，收集摇瓶菌种； 

（2）将摇瓶菌种接种至种子培养基中，34～36℃培养至对数生长期，得种子液； 

（3）将所述种子液接种至发酵培养基中，34～36℃发酵完成后收集发酵液即得所述微生物菌剂。