CN103621792A - 一种含l-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂，该添加剂由下述重量百分比的组分组成，L-赖氨酸粉1-3%，复合益生菌粉97-99%。该添加剂可以提高蛋白质的利用率，促进畜禽生长，增强畜禽体质。添加本发明添加剂的饲料产品属于多个菌属多个菌种组合，菌种稳定，保存期长，在畜禽肠道内有良好的定植能力，营养丰富，增进畜禽食欲，增强畜禽抗病能力，促进畜禽生长发育，提高饲料利用率。
Description
技术领域
本发明涉及一种益生菌饲料添加剂，尤其是涉及一种L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
自上世纪50年代开始，在动物饲料中添加抗生素显著促进了动物生长，并对集约化畜牧业的发展做出了重大贡献。然而随着时间的推移，饲料中添加抗生素的危害日益显现，并受到社会的广泛关注。欧盟自2006年1月起全面禁止在畜禽饲料中添加抗生素。人们开始纷纷寻求其它的替代品和替代技术，以保证畜牧业生产的效率与效益不受影响。
益生菌发酵饲料技术是新近成长起来的具有许多优点的新型饲料技术。益生菌饲料添加剂是利用有益功能微生物与预混合饲料经过混合、发酵、低温干燥等工艺加工而成含活性益生菌的安全无污染无药物残留的优质饲料添加剂。由于它具有生物学活性，能够很好的参与动物胃肠微生物菌群的生态平衡，促进动物的消化吸收，提高饲料转化率和生产性能；同时增强畜禽的抗病能力，因此被公认为是一种新型优质无公害的绿色饲料添加剂。
赖氨酸是蛋白质的重要组分之一，是动物体不能自身合成但又十分需要的八种氨基酸之一，是一种优良的食品强化剂。因食物中缺乏赖氨酸，所以又称“第一必需氨基酸”。将赖氨酸添加到饲料中可以提高蛋白质的利用率，从而大大强化食品的营养，起到促进生长发育、增加食欲、减少疾病、增强体质的作用。
目前，我国微生物饲料添加剂种类繁多，但大多数产品菌种比较单一，只含一种菌，功能也比较单一，菌种不太稳定，保存期短，而且不能很好的在畜禽肠道内定植，效果不太理想。将赖氨酸与复合益生菌同时加入饲料中作为添加剂的更鲜见。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂,将该添加剂用于动物饲料，可提高蛋白质的利用率，促进畜禽生长，增强畜禽体质。
本发明采用的技术方案是提供一种L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂，该添加剂由重量百分比如下的组分组成，L-赖氨酸粉1-3%，复合益生菌粉97-99%。
本发明还提供了制备该添加剂的方法，其特征在于包括如下方法：
(1)L-赖氨酸粉的制备：取谷氨酸棒状杆菌菌株，接种于液体培养基中，活化，摇床培养24h，得谷氨酸棒状杆菌培养液；用水将蛋白胨溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，灭菌1小时，冷却至30℃，接入谷氨酸棒状杆菌培养液进行再次扩大培养，发酵72h，得L-赖氨酸液，用离子交换法提取L-赖氨酸，经结晶、干燥得到L-赖氨酸粉；
(2)复合益生菌培养液的制备：用水将葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，于120℃灭菌30分钟，冷却至30℃，分别接入枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母菌和粪肠球斜面菌种进行纯培养，培养结束后，按等体积进行混合，配制成复合益生菌培养液；
(3)复合益生菌发酵液的制备：用水将红糖、磷酸二氢钾溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，灭菌1小时，冷却至30℃，接入复合益生菌培养液，得复合益生菌发酵液；
(4)复合益生菌粉的制备：将玉米粉、豆粕粉混合搅拌均匀，用水将红糖溶解后，于100℃灭菌1小时，待温度降至30℃，再加入复合益生菌发酵液混合后，均匀喷洒在玉米粉和豆粕粉的混合物上搅拌均匀，使玉米粉和豆粕粉的混合物保持水分，好氧发酵5天，然后再厌氧发酵2天，于50℃温度下烘干粉碎得复合益生菌粉；
(5)将L-赖氨酸粉与复合益生菌粉按比例混合均匀制成含L-赖氨酸的复合益生菌饲料添加剂。
优选地，步骤(1)所述活化温度为30-34℃，所述灭菌温度为100-120℃，所述培养液进行再次扩大培养的温度控制在30-32℃；优选地，所述活化温度为30-32℃，所述灭菌温度为110-120℃，所述培养液进行再次扩大培养的温度控制在30℃。
优选地，步骤(2)所述纯培养为，枯草芽孢杆菌45-50℃培养48小时，嗜酸乳杆菌35-37℃培养72小时，产朊假丝酵母菌25-30℃培养48小时，粪肠球菌35-40℃培养48小时。
优选地，步骤(3)所述灭菌温度为100℃-120℃，所述接入复合益生菌培养液得复合益生菌发酵液的培养时间为72-80小时，温度控制为30℃-35℃。
优选地，步骤(4)所述玉米粉和豆粕粉的混合物水分保持在28-30%，温度控制在30-35℃好氧发酵，温度控制25-30℃厌氧发酵。
本发明的有益效果是：
(1)本发明产品含有L-赖氨酸，可以提高蛋白质的利用率，促进畜禽生长，增强畜禽体质。
(2)本发明产品多个菌属多个菌种组合，菌种稳定，保存期长，在畜禽肠道内有良好的定植能力，营养丰富，增进畜禽食欲，增强畜禽抗病能力，促进畜禽生长发育，提高饲料利用率。
本发明产品在饲料中的添加量按质量分数的1%比例。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步加以说明。
实施例1
(1)L-赖氨酸粉的制备：取谷氨酸棒状杆菌菌种4支，接入已灭好菌的2千克液体培养基中，摇床温度设置30℃，转速设置1200r/h，培养24h，备用；取60目的豆粕粉、甜菜渣各5千克，蛋白胨0.5千克，谷氨酸棒状杆菌培养液2千克，水87.5千克。先将蛋白胨用水溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌匀，于120℃灭菌30分钟，冷却至30℃，接入谷氨酸棒状杆菌培养液进行再次扩大培养，温度控制在30℃，好氧发酵72h，得L-赖氨酸液，用离子交换法提取L-赖氨酸，经结晶、干燥得到L-赖氨酸粉剂产品。
(2)复合益生菌培养液的制备：取葡萄糖0.06千克，蔗糖0.12千克，豆粕粉0.06千克，磷酸二氢钾0.006千克，甜菜渣0.09千克，枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母斜面菌和粪肠球菌各2支，水2.664千克。先用水将葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾溶解，然后加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，分成3等份，120℃灭菌30分钟，冷却至30℃以后，分别接入枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母斜面菌和粪肠球菌种，进行纯培养；枯草芽孢杆菌45℃培养48小时，嗜酸乳杆菌35℃培养72小时，产朊假丝酵母25℃培养48小时，粪肠球菌35℃培养48小时，发酵结束后，取枯草芽孢杆菌液l千克、嗜酸乳杆菌液l千克、产朊假丝酵母菌液1千克、粪肠球菌菌液1千克进行混合，配制成复合益生菌培养液。
(3)复合益生菌发酵液的制备：取甜菜渣12千克，红糖10千克，豆粕粉2千克，磷酸二氢钾0.2千克，复合益生菌培养液2千克，水73.8千克。先用水将红糖、磷酸二氢钾溶解后，再加入甜菜渣、豆粕粉混合搅拌后，120℃灭菌1小时，冷却至30℃，接种复合益生菌培养液，温度控制在30℃，培养72小时，得复合益生菌发酵液。
(4)复合益生菌粉的制备：取60目的玉米粉380千克、60目的豆粕粉300千克、红糖100千克、复合益生菌发酵液20千克、水200千克。先将玉米粉、豆粕粉混合搅拌均匀，然后用水将红糖溶解，100℃灭菌1小时，待温度降至30℃，再加入复合益生菌发酵液混合后，均匀喷洒在玉米粉和豆粕粉的混合物上搅拌均匀，使玉米粉和豆粕粉的混合物水分保持在28%，温度控制在30℃，好氧发酵5天，然后再将温度控制25℃，厌氧发酵2天，在50℃温度下烘干，粉碎得复合益生菌粉。
(5)生产1000千克含L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂，取L-赖氨酸粉10千克，复合益生菌粉990千克混合均匀即可。
实施例2
(1)L-赖氨酸粉的制备：取谷氨酸棒状杆菌菌种4支，接入已灭好菌的2千克液体培养基中，摇床温度设置32℃，转速设置1200r/h，培养24h，备用；取60目的豆粕粉、甜菜渣各5千克，蛋白胨0.5千克，谷氨酸棒状杆菌培养液2千克，水87.5千克。先将蛋白胨用水溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌匀，于110℃灭菌30分钟，冷却至30℃，接入谷氨酸棒状杆菌培养液进行再次扩大培养，温度控制在31℃，好氧发酵72h，得L-赖氨酸液，用离子交换法提取L-赖氨酸，经结晶、干燥得到L-赖氨酸粉剂产品。
(2)复合益生菌培养液的制备：取葡萄糖0.06千克，蔗糖0.12千克，豆粕粉0.06千克，磷酸二氢钾0.006千克，甜菜渣0.09千克，枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母斜面菌和粪肠球菌各2支，水2.664千克。先用水将葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾溶解，然后加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，分成3等份，120℃灭菌30分钟，冷却至30℃以后，分别接入枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母斜面菌和粪肠球菌种，进行纯培养；枯草芽孢杆菌48℃培养48小时，嗜酸乳杆菌36℃培养72小时，产朊假丝酵母28℃培养48小时，粪肠球菌38℃培养48小时，发酵结束后，取枯草芽孢杆菌液l千克、嗜酸乳杆菌液l千克、产朊假丝酵母菌液1千克、粪肠球菌菌液1千克进行混合，配制成复合益生菌培养液。
(3)复合益生菌发酵液的制备：取甜菜渣12千克，红糖10千克，豆粕粉2千克，磷酸二氢钾0.2千克，复合益生菌培养液2千克，水73.8千克。先用水将红糖、磷酸二氢钾溶解后，再加入甜菜渣、豆粕粉混合搅拌后，110℃灭菌1小时，冷却至30℃，接种复合益生菌培养液，温度控制在32℃，培养76小时，得复合益生菌发酵液。
(4)复合益生菌粉的制备：取60目的玉米粉380千克、60目的豆粕粉300千克、红糖100千克、复合益生菌发酵液20千克、水200千克。先将玉米粉、豆粕粉混合搅拌均匀，然后用水将红糖溶解，100℃灭菌1小时，待温度降至30℃，再加入复合益生菌发酵液混合后，均匀喷洒在玉米粉和豆粕粉的混合物上搅拌均匀，使玉米粉和豆粕粉的混合物水分保持在29%，温度控制在33℃，好氧发酵5天，然后再将温度控制28℃，厌氧发酵2天，在50℃温度下烘干，粉碎得复合益生菌粉。
（5）生产1000千克含L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂，取L-赖氨酸粉20千克，复合益生菌粉980千克混合均匀即可。
实施例3
(1)L-赖氨酸粉的制备：取谷氨酸棒状杆菌菌种4支，接入已灭好菌的2千克液体培养基中，摇床温度设置34℃，转速设置1200r/h，培养24h，备用；取60目的豆粕粉、甜菜渣各5千克，蛋白胨0.5千克，谷氨酸棒状杆菌培养液2千克，水87.5千克。先将蛋白胨用水溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌匀，于100℃灭菌30分钟，冷却至30℃，接入谷氨酸棒状杆菌培养液进行再次扩大培养，温度控制在32℃，好氧发酵72h，得L-赖氨酸液，用离子交换法提取L-赖氨酸，经结晶、干燥得到L-赖氨酸粉剂产品。
(2)复合益生菌培养液的制备：取葡萄糖0.06千克，蔗糖0.12千克，豆粕粉0.06千克，磷酸二氢钾0.006千克，甜菜渣0.09千克，枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母斜面菌和粪肠球菌各2支，水2.664千克。先用水将葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾溶解，然后加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，分成3等份，120℃灭菌30分钟，冷却至30℃以后，分别接入枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母斜面菌和粪肠球菌种，进行纯培养；枯草芽孢杆菌50℃培养48小时，嗜酸乳杆菌37℃培养72小时，产朊假丝酵母30℃培养48小时，粪肠球菌40℃培养48小时，发酵结束后，取枯草芽孢杆菌液l千克、嗜酸乳杆菌液l千克、产朊假丝酵母菌液1千克、粪肠球菌菌液1千克进行混合，配制成复合益生菌培养液。
(3)复合益生菌发酵液的制备：取甜菜渣12千克，红糖10千克，豆粕粉2千克，磷酸二氢钾0.2千克，复合益生菌培养液2千克，水73.8千克。先用水将红糖、磷酸二氢钾溶解后，再加入甜菜渣、豆粕粉混合搅拌后，100℃灭菌1小时，冷却至30℃，接种复合益生菌培养液，温度控制在34℃，培养80小时，得复合益生菌发酵液。
(4)复合益生菌粉的制备：取60目的玉米粉380千克、60目的豆粕粉300千克、红糖100千克、复合益生菌发酵液20千克、水200千克。先将玉米粉、豆粕粉混合搅拌均匀，然后用水将红糖溶解，100℃灭菌1小时，待温度降至30℃，再加入复合益生菌发酵液混合后，均匀喷洒在玉米粉和豆粕粉的混合物上搅拌均匀，使玉米粉和豆粕粉的混合物水分保持在30%，温度控制在35℃，好氧发酵5天，然后再将温度控制30℃，厌氧发酵2天，在50℃温度下烘干，粉碎得复合益生菌粉。
（5）生产1000千克含L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂，取L-赖氨酸粉30千克，复合益生菌粉970千克混合均匀即可。
试验例1
选择28日龄断奶仔猪，根据体重、性别随机分成4个处理，每个处理6个重复，每个重复6头猪，公母比例均衡。
表1实验设计
| 添加剂 | 浓度 | 仔猪头数 | |
| 处理1（空白） | - | - | 36 |
| 处理2 | 实施例1 | 1% | 36 |
| 处理3 | 实施例2 | 2% | 36 |
| 处理4 | 实施例3 | 3% | 36 |
试验规程：
试验从仔猪断奶时即28日龄左右时开始，一共进行35天，63日龄时结束。试验开始、结束时称量仔猪体重，早晨空腹进行，试验结束前12小时将仔猪饲槽清理干净，仔猪饥饿12小时后进行称重。
平均日增重（ADG）=（试验结束窝重-试验开始窝重）/试验猪头数/试验天数
平均日耗料(ADFI)=消耗饲料/试验猪头数/试验天数
料肉比(F/G)=ADFI/ADG
表2断奶仔猪饲喂L-赖氨酸复合菌剂35天生产性能统计
| ADG(kg) | ADFI（kg） | F/G | |
| 处理1（空白） | 0.41 | 0.65 | 1.59 |
| 处理2 | 0.48 | 0.60 | 1.25 |
| 处理3 | 0.45 | 0.61 | 1.36 |
| 处理4 | 0.43 | 0.60 | 1.40 |
从上表可以看出，添加L-赖氨酸复合益生菌的处理组仔猪的生产性能均优于空白组，说明添加L-赖氨酸复合益生菌作为添加剂能够维持断奶仔猪肠道微生态区系平衡，促进其消化食物，提高蛋白质的利用率，促进畜禽生长发育，增强畜禽体质，提高饲料利用率。
Claims (6)
1.一种含L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂，其特征在于，包括下述重量百分比的组分：L-赖氨酸粉1-3%，复合益生菌粉97-99%。
2.根据权利要求1所述的含L-赖氨酸复合益生菌的饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
(1)L-赖氨酸粉的制备：取谷氨酸棒状杆菌菌株，接种于液体培养基中，活化，摇床培养24h，得谷氨酸棒状杆菌培养液；用水将蛋白胨溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，灭菌1小时，冷却至30℃，接入谷氨酸棒状杆菌培养液进行再次扩大培养，发酵72h，得L-赖氨酸液，用离子交换法提取L-赖氨酸，经结晶、干燥得到L-赖氨酸粉；
(2)复合益生菌培养液的制备：用水将葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，于120℃灭菌30分钟，冷却至30℃，分别接入枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、产朊假丝酵母菌和粪肠球斜面菌种进行纯培养，培养结束后，按等体积进行混合，配制成复合益生菌培养液；
(3)复合益生菌发酵液的制备：用水将红糖、磷酸二氢钾溶解后，加入豆粕粉、甜菜渣混合搅拌后，灭菌1小时，冷却至30℃，接入复合益生菌培养液，得复合益生菌发酵液；
(4)复合益生菌粉的制备：将玉米粉、豆粕粉混合搅拌均匀，用水将红糖溶解后，于100℃灭菌1小时，待温度降至30℃，再加入复合益生菌发酵液混合后，均匀喷洒在玉米粉和豆粕粉的混合物上搅拌均匀，使玉米粉和豆粕粉的混合物保持水分，好氧发酵5天，然后再厌氧发酵2天，于50℃温度下烘干粉碎得复合益生菌粉；
(5)将L-赖氨酸粉与复合益生菌粉按比例混合均匀制成含L-赖氨酸的复合益生菌饲料添加剂。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述活化温度为30-34℃，所述灭菌温度为100-120℃，所述培养液进行再次扩大培养的温度控制在30-32℃；优选地，所述活化温度为30-32℃，所述灭菌温度为110-120℃，所述培养液进行再次扩大培养的温度控制在30℃。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述纯培养为，枯草芽孢杆菌45-50℃培养48小时，嗜酸乳杆菌35-37℃培养72小时，产朊假丝酵母菌25-30℃培养48小时，粪肠球菌35-40℃培养48小时。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述灭菌温度为100℃-120℃，所述接入复合益生菌培养液得复合益生菌发酵液的培养时间为72-80小时，温度控制为30℃-35℃。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤(4)所述玉米粉和豆粕粉的混合物水分保持在28-30%，温度控制在30-35℃好氧发酵，温度控制25-30℃厌氧发酵。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140312 |