CN103585473A - 铁皮石斛防治大脑衰老的新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药技术领域,具体涉及一种中药的新用途,即石斛抗大脑衰老的作用用途,本发明以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型和自然衰老小鼠模型,从整体水平观察石斛对衰老小鼠的影响,进行迷宫实验和跳台实验,表明石斛能改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠大脑功能如运动、记忆力等的病理变化。而对于自然衰老模型,经过10周的给药过程中,石斛也能明显地改善小鼠大脑的运动、记忆力等功能,抑制大脑衰老的发展。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域,具体涉及中药铁皮石斛的一种新的药用用途。
背景技术
《神农本草经》中记载:石斛“主伤中,除痹,下气,补五脏,虚痨羸瘦,强阴,久服厚肠胃”。李时珍的《本草纲目》记载:“强阴益精。久服,厚肠胃,补内绝不足,平胃气,长肌肉,逐皮肤邪热痱气,脚膝疼冷痹弱,定志除惊,轻身延年。益气除热,健阳,逐皮肤风痹,骨中久冷,补肾益力。治发热自汗,痈疽排脓内塞”。唐开元年间的道家经典著作《道藏》中讲到,铁皮石斛位居“中华九大仙草”之首(石斛、天山雪莲、三两重人参、百二十年首乌、花甲之茯苓、苁蓉、深山灵芝、海底珍珠、冬虫夏草),其延年益寿,补五脏虚劳的功效尤甚人参。
机体的衰老发生在整体水平,根据文献资料的综合报道,提出了“整体衰老假说”,认为机体“组织再生性细胞”减少是导致机体衰老的原因。组织再生性细胞的减少,不仅使组织从外观上逐渐表现出衰老,而且也使组织代谢功能不断减弱,到了一定年龄阶段后,由于整个组织细胞生长更新的减弱而使组织发生萎缩。而高等动物和人体细胞均只保存部分的合成功能,不能单独完成其生命活动,组织细胞和组织细胞之间必须在代谢活动过程中相互交换物质和补偿。由于机体细胞在代谢上的互补性,就造成了机体各种细胞“牵一发而动全身”的相互依存现象,任何组织出现功能衰退,都会直接影响到机体各种组织,因为衰老对于人体而言,均是在整体水平发生的。衰老是机体不可逆转的过程,涉及各个系统和器官,大脑的衰老是其主要方面。脑在发育成熟后,随着年龄的进一步增长将逐渐衰老,进而影响记忆力、运动等功能。基于上述理论,研究开发抗大脑衰老药物,将会给临床提供新的药物。。
发明内容
基于上述原因,申请人以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠模型和自然衰老小鼠模型从整体水平观察铁皮石斛对衰老小鼠的影响,进行迷宫实验、跳台实验和脏器系数的测定,从整体上体现衰老的现象以及铁皮石斛抗衰老的作用,表明铁皮石斛能改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠痴呆状态。而对于自然衰老模型,经过10周的给药过程中,铁皮石斛也能明显地改善雌性小鼠大脑记忆功能,抑制衰老的发展。
本发明通过下述技术方案实现的。
铁皮石斛在制备治疗大脑衰老药物中的应用。
上述所属抗衰老药物不限于铁皮石斛,包括鲜品、石斛多糖等。
上述所述衰老包括但不限于脑的功能。
上述所述的脑的功能包括但不限于运动、记忆力等。
具体实施方式
实施例1
对D-半乳糖致亚急性衰老小鼠痴呆模型的作用
一、实验材料:
试药:石斛榨汁液,给药剂量:1 g/kg(按生药量算,即含多糖约0.3g/kg);粗多糖溶液,给药剂量:0.32 g/kg(即含多糖约0.3g/kg),均由广州中医药大学新药开发研究中心提供。
药物:参维灵片(广东永康药业有限公司,批号: 100301,每片含灵芝菌干粉0.1 g、蘑菇浸膏粉0.2 g、维生素B62 mg、人参粉0.1 g,剂量:1 片/kg);
D-半乳糖(广州威佳科技有限公司,规格25 g,CAS#:59-23-4,批号:2K06D518);
氯化钠注射液(昆明市宇斯药业有限责任公司,规格:500 ml,批号:08091902,生产日期2008.09.19,有效期至2010.9.18);
氯化钠注射液(中国广州百特医疗用品有限公司,规格:500 ml,批号:GS1004006,有效期至2012.03);
甲醛溶液(广州化学试剂厂,规格:500ml,批号:20090702-1)。
仪器:自制木制迷宫(广州中医药大学药理教研室提供);XZC-5A型小鼠跳台仪(山东省医学科学院设备站,编号:0012);粗绳(直径为8mm)。
实验动物:昆明小鼠,SPF级,18-22 g,雌性,由广东省医学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(粤)2008-0002,合格证号:0070152。动物放置在室温18℃~22℃,相对湿度为50~70%,12h明暗交替的环境下饲养。实验期间自由饮水、饮食,饲料为标准全价饲料。
二、实验方法
造模:按《药理实验方法学》的方法,取昆明种成年小鼠体重20±2g,雌性。将动物随机分5组,分别为:正常对照组、衰老模型组、阳性药组、榨汁液组、多糖组,每组14只。除正常对照组外,各鼠每天在颈背部皮下注射D-半乳糖(注射用水配制)125mg/kg,连续10周,普通饲料常规喂养。各组动物在造模第10d后,同时每日灌胃相应受试药液0.1ml/10g,正常对照组以同等剂量的蒸馏水灌胃。造模与给药期间,每周测定两次体重。
迷宫实验:迷宫是一个矩形区域,只有两个门,一个叫做入口(起点),另一个叫做出口(终点),迷宫内部包含不能穿越的墙或障碍。给药8周后,将一只老小鼠放在迷宫的入口处,开始计时,在出口处放上饲料,记录每只小鼠找到出口的时间。
跳台实验:给药8周后,将小鼠放置于小鼠跳台仪的活动室内,各室底部为间距5mm的金属栅(可通电),箱内一角装有一直径为45mm的绝缘平台(作为动物回避电击的安全台),适应环境10min。正式实验时,将小鼠放入活动室的金属栅上,通以0.25mA交流电流,小鼠受到电击后将寻找跳台以躲避电击,小鼠逃到安全台上,记时开始,至小鼠从安全台跳下时,停止记时,此段时间为潜伏期。同时检测小鼠5min内从安全台上跳下受到电击的次数为错误次数。观察各组小鼠学习3天后的潜伏期和错误次数。
脏器系数:给药期间,每周测定其体重。给药9周后,取血后颈椎脱臼处死,称取脑,计算脏器系数。
三、实验结果与结论
迷宫实验:
组别 | 时间(s) |
正常组 | 43.9±18.6* |
模型组 | 78.0±48.3 |
阳性组 | 46.0±17.7* |
榨汁组 | 53.3±10.0 |
多糖组 | 43.3±9.0* |
注:与模型组相比:*P<0.05**P<0.01
由表1可见,与正常组比较,模型组小鼠走出迷宫的时间有所延长,差异具有统计学意义(P<0.05);其余各给药组与模型组比较,阳性组及多糖组时间缩短,差异具有统计学意义(P<0.05)。
跳台实验:
组别 | 时间(s) | 次数 | 错误百分率 |
正常组 | 269.50±76.92* | 0.12±0.33* | 16.7% |
模型组 | 206.22±105.40 | 0.50±0.71 | 38.9% |
阳性组 | 251.00±95.29 | 0.33±0.49 | 33.3% |
榨汁组 | 253.89±83.47 | 0.41±0.71 | 33.3% |
多糖组 | 266.06±75.16* | 0.24±0.56 | 16.7% |
注:与模型组相比:*P<0.05**P<0.01
由表2可见,与正常组比较,模型组小鼠跳台潜伏期有所缩短;除多糖组外,其余各给药组与模型组比较,无显著性差异;与正常组比较,模型组小鼠错误次数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05);其余各给药组与模型组比较,次数有减少的趋势,但差异无统计学意义。
脑系数:
脑系数(‰) | |
正常组 | 14.67±1.47* |
模型组 | 13.23±0.64 |
阳性组 | 13.03±1.09 |
榨汁组 | 13.50±1.48 |
多糖组 | 12.42±0.71* |
注:与模型组相比:*P<0.05**P<0.01
由表3可见,各组脑系数差异不大。
脑超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及一氧化氮(NO)的含量:
注:与模型组相比:*P<0.05**P<0.01
雌性小鼠脑各指标含量情况见表4。
(1)SOD:
与正常组相比,模型组的脑SOD明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。其余各给药组与模型组比较,阳性组(P<0.05)、榨汁组(P<0.05)及多糖组(P<0.01)SOD均明显增加,差异具有统计学意义。
(2)GSH-Px:
与正常组相比,模型组的GSH-Px有所增加。其余各给药组与模型组比较,榨汁组与多糖组GSH-Px有增加的趋势,差异没有统计学意义(P>0.05)。
(3)NO:
与正常组相比,模型组的脑NO有所增加。其余各给药组与模型组比较,榨汁组及多糖组NO有减少的趋势,差异没有有统计学意义(P>0.05)。
实验结果说明试药可提高小鼠脑抗氧化能力,以SOD、GSH-Px均明显增加,NO减少为主要表现。
实施例2
一、实验材料
试药:石斛榨汁液,给药剂量:1 g/kg(按生药量算,即含多糖约0.3g/kg);粗多糖溶液,给药剂量:0.32 g/kg(即含多糖约0.3g/kg),均由广州中医药大学新药开发研究中心提供。
实验动物:青年组:昆明小鼠,SPF级,17-20g,雌性,25只,由广东省医学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(粤)2008-0002,合格证号:0073131。普通饲料常规喂养1个月。
衰老组:昆明小鼠,9月龄,雌性,由广东省医学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(粤)2008-0002,合格证号:0070142。普通饲料常规喂养3个月至12月龄。
动物放置在室温18℃~22℃,相对湿度为50~70%,12h明暗交替的环境下饲养。实验期间自由饮水、饮食,饲料为标准全价饲料。
二、实验方法
分组及给药:将12月龄衰老动物随机分3组,分别为:衰老模型组、榨汁液组、多糖组,以3月龄青年小鼠作为青年对照组,每组14只,普通饲料常规喂养。各组动物每日灌胃相应受试药液0.1ml/10g,衰老模型组和青年对照组以同等剂量的蒸馏水灌胃,给药10周,给药期间,每周测定两次体重。
迷宫实验:迷宫是一个矩形区域,只有两个门,一个叫做入口(起点),另一个叫做出口(终点),迷宫内部包含不能穿越的墙或障碍。给药10周后,将一只老小鼠放在迷宫的入口处,开始计时,在出口处放上饲料,记录每只小鼠找到出口的时间。
跳台实验:给药10周后,将小鼠放置于小鼠跳台仪的活动室内,各室底部为间距5mm的金属栅(可通电),箱内一角装有一直径为45mm的绝缘平台(作为动物回避电击的安全台),适应环境10min。正式实验时,将小鼠放入活动室的金属栅上,通以0.25mA交流电流,小鼠受到电击后将寻找跳台以躲避电击,小鼠逃到安全台上,记时开始,至小鼠从安全台跳下时,停止记时,此段时间为潜伏期。同时检测小鼠5min内从安全台上跳下受到电击的次数为错误次数。观察各组小鼠学习3天后的潜伏期和错误次数。
脏器系数:给药期间,每周测定其体重。给药10周后,取血后颈椎脱臼处死,称取脑,计算脏器系数。
三、实验结果与结论
迷宫实验:
组别 | 时间(s) |
青年组 | 57.2±13.0** |
衰老组 | 129.3±22.9 |
榨汁组 | 97.7±20.8** |
多糖组 | 87.5±31.0** |
注:与衰老组相比:*P<0.05**P<0.01
由表5可见,与青年组比较,衰老模型组小鼠走出迷宫的时间显著延长;其余各给药组与衰老组比较,通过迷宫时间明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。
跳台实验:
组别 | 时间(s) | 次数 | 错误百分率 |
青年组 | 285.93±54.48** | 0.13±0.52* | 6.7% |
衰老组 | 201.94±124.61 | 0.83±1.34 | 44.4% |
榨汁组 | 287.41±48.90* | 0.12±0.33* | 11.7% |
多糖组 | 282.24±72.22* | 0.18±0.53* | 11.7% |
注:与衰老组相比:*P<0.05**P<0.01
由表6可见,与青年组比较,衰老组小鼠跳台潜伏期有所缩短;其余各给药组与衰老组比较,潜伏期有延长的趋势(P<0.05);与青年组比较,衰老组小鼠错误次数明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05);其余各给药组与衰老组比较,次数有减少的趋势,多糖组、榨汁组与衰老组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。
脑系数:
组别 | 脑系数(‰) |
青年组 | 11.90±1.85 |
衰老组 | 11.2±1.22** |
榨汁组 | 11.75±0.68* |
多糖组 | 11.42±1.33 |
注:与衰老组相比:*P<0.05**P<0.01
由表7可见,12月龄衰老小鼠的脑系数小于青年小鼠的脑系数,差异具有统计学意义(P<0.01)。经过2个月的石斛榨汁和石斛多糖液灌胃给药,脑系数与模型组相比,有增加的趋势,其中榨汁组有明显性差异(P<0.05)。
实验结论
D-半乳糖致衰老是一种易获得的衰老模型。D-半乳糖诱导的衰老模型与糖代谢紊乱、D-半乳糖醇中毒和活性氧自由基过剩等相关。衰老的代谢学说认为,衰老是极度代谢性障碍的结果,糖代谢在三大物质代谢中具有很重要的意义;糖代谢紊乱必然会引起心,肝,肾,脑,肺等重要脏器代谢异常,最终出现衰老。
在一定时期内连续给动物注射D-半乳糖,使机体细胞内半乳糖浓度增高,在醛糖还原酶催化下,还原成半乳糖醇,这种物质不能被细胞进一步代谢而堆积在细胞内,影响正常渗透压,导致细胞肿胀,功能障碍、代谢紊乱,破坏并消耗机体抗氧化防御系统,使自由基积聚。同时在半乳糖还原成半乳糖醇的过程中又产生(O2-),这样使细胞膜脂质受损,过氧化脂质、脂褐质等增高,出现衰老。
通过迷宫实验及跳台实验结果表明铁皮石斛能一定程度改善D-半乳糖致亚急性衰老小鼠痴呆状态。
随着增龄,动物机体的组织器官出现退行性变化而表现出老化征象,选用老龄动物作为自然衰老动物模型,比人工造成的衰老模型在衰老的生理进程中更符合人类衰老的特点,为最理想的衰老模型。但饲养周期较长,所受影响因素较多,动物个体差异较大。实验过程中,动物易感染疾病甚至出现死亡,因此需严格控制饲养条件:保证通风及光照良好,室温控制在18~25℃,配以营养全面的混合饲料饲养,饮水、垫料每日更换,饮水器及鼠笼隔日清洗,保持清洁。
由上述结果可见,12月龄雌鼠大脑发生衰老,表现为脑系数降低,记忆力衰退,应激反应潜伏期缩短、错误率增加等变化。
铁皮石斛能改善雌性衰老小鼠大脑的功能。在10周的给药过程中,铁皮石斛能明显改善雌性衰老小鼠的大脑的病变,抑制大脑衰老的发展。
铁皮石斛从整体上表现出对大脑的抗衰老功能。
Claims (3)
1.铁皮石斛在制备治疗大脑衰老药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其中衰老包括大脑功能。
3. 根据权利要求2所述的应用,其中大脑功能包括运动、记忆。
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CN201310564203.9A CN103585473A (zh) | 2013-11-14 | 2013-11-14 | 铁皮石斛防治大脑衰老的新用途 |
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Publications (1)
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CN201310564203.9A Pending CN103585473A (zh) | 2013-11-14 | 2013-11-14 | 铁皮石斛防治大脑衰老的新用途 |
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CN (1) | CN103585473A (zh) |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN102552698A (zh) * | 2012-01-16 | 2012-07-11 | 广东永生源生物科技有限公司 | 铁皮石斛的药用用途 |
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2013
- 2013-11-14 CN CN201310564203.9A patent/CN103585473A/zh active Pending
Patent Citations (2)
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