CN103548684A

CN103548684A - 一种马铃薯组培苗的接种方法

Info

Publication number: CN103548684A
Application number: CN201310530396.6A
Authority: CN
Inventors: 李恺; 屠建章; 张才强; 火有仁; 吴成秀
Original assignee: DINGXI CITY KAIKAI ECOLOGICAL PARK PLANT PROPAGATION Co Ltd
Current assignee: DINGXI CITY KAIKAI ECOLOGICAL PARK PLANT PROPAGATION Co Ltd
Priority date: 2013-10-31
Filing date: 2013-10-31
Publication date: 2014-02-05

Abstract

本发明公开了一种马铃薯组培苗的接种方法，其特征在于：严格控制马铃薯脱毒组培苗生长的影响因子，并对接种器械、培养室、接种室严格消毒灭菌后采用整组切段、分散组培再切段的接种方法，实现马铃薯脱毒组培繁育高速度、短周期、低污染、简操作、低成本的目的。

Description

一种马铃薯组培苗的接种方法

技术领域

本发明属于植物栽培技术领域，尤其涉及一种马铃薯组培苗的接种方法。

背景技术

随着农业技术的不断发展，马铃薯脱毒技术已广泛应用。所谓脱毒即是：切取马铃薯幼芽茎尖生长锥0.2-0.3毫米，进行组织培养，育成脱毒试管苗，进而结出无病毒的块茎，它已成为防治马铃薯病毒,提高马铃薯产量最好的方法。把茎尖脱毒、组织培养、无病毒种薯繁育结合起来，形成一个完整的脱毒快繁体系，才能真正实现马铃薯繁育速度快、质量好的目的。

然而，现有脱毒组培技术中，组织培养投资大、经济效益低，严重影响了脱毒组培技术的推广，主要表现为组培用培养基价格昂贵，组培速度缓慢，组培苗接种时病毒污染大，操作步骤复杂，费时费力。

CN10182221A专利号文件公开了马铃薯茎节段直接培育微型种薯的育种方法，提供了一种马铃薯脱毒组培苗接种技术，该方法是将组培脱毒苗切成3～5个带有叶柄腋芽的小段，然后在无菌超净的工作台中，将马铃薯无毒苗切断均匀接种到诱导营养基中。该方法提高了组培速度，但操作时采用单个切段技术，存在费时费力、操作复杂、易染病毒、周期长的缺陷。

发明内容

本发明的目的在于：采用整组切段、分散组培再切段的接种方法，实现马铃薯脱毒组培繁育过程中切段时，病毒感染率更低、繁育速度更快、操作简单、省时省力的目的。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

本发明结合马铃薯种薯生长过程中根茎发育的特性，根据现代生物学技术，在控制温度、湿度、光照、pH值等各项影响因子条件下，以脱毒组培苗为母体，采用克隆技术进行无性繁殖，达到马铃薯脱毒繁育速度快、品质高的要求，具体方法如下：

1、消毒灭菌

（1）培养基的消毒灭菌：本发明脱毒苗组培用的培养基为液体培养基，将配制好的营养基在高温高压下消毒灭菌20分钟，其中，温度为121℃，气压为1.11－1.14kpa；

（2）接种器械消毒灭菌：对接种室、培养室、配制室等采用紫外灯照射和用0.1％苯扎溴铵拖洗地板，不定时地用甲酫和高锰酸钾进行薰蒸；接种前用75％的酒精浸泡剪刀、镊子以及培养皿；浸泡后的剪刀、镊子再进行高温处理或在酒精灯上灼烧方可进行接种，培养皿则进行高温处理或用沾有75%酒精的脱脂棉反复擦拭；牛皮纸用75%的酒精浸泡；用脱脂棉沾75％酒精反复擦手、工作台。

2、马铃薯脱毒苗组培及接种影响因素的控制

（1）温度控制：培养室和接种室内，昼温控制20～27℃，夜温宜偏低，以减少呼吸作用的物质消耗，温度控制为5～8℃。

（2）湿度控制：针对不同地区的气候特点，合理控制空气相对湿度，一般控制湿度为50～70%，湿度过高，引起污染增加的概率增大，不利于脱毒组培苗的繁育。

（3）、光照控制：每天尽可能利用最长时间的自然光照，光照强度为2000～3000lx；若遇阴天，则利用灯光照射，灯光照射可适当延长时间，最宜为12～15小时。

（4）培养基pH值控制：严格控制培养基的pH值为5.8。

3、接种：在马铃薯脱毒苗接种的时候，把组培苗从培养瓶中取出，放在经所述的高温灭菌的培养皿里面的牛皮纸上，然后用手术刀片分段切割接种。其特征在于：首次接种时，培养瓶中为一株脱毒组培苗，从培养瓶中取出后切割成3～4个带有叶柄腋芽的节段，然后接种到原培养瓶中，培养15～20天；组培苗可接种的时候，将培养瓶中的组培苗全部取出，每个培养瓶中的组培苗分为一组，采用整体切割的方法，将组培苗切割成2～3个带有叶柄腋芽的节段，然后分组接种到备用的培养瓶中组培，按照所述的方法循环接种、组培，经本发明接种、组培的马铃薯脱毒苗生根速度快，根系发达、根茎健壮，生命力强。

与现有马铃薯接种技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、采用整组切割方法，接种速度快、病毒污染几率低；

2、采用整组切段、分散组培再切段的接种方法，操作简单、生长周期短、繁育速度快。

具体实施方式

为了说明本发明的技术方案，下面结合实例进一步说明。

实施例1

选择培养15天苗龄的强壮组培脱毒苗10株，然后采用本发明技术方案进行接种。

1、消毒灭菌

2、温度控制：培养室和接种室内，昼温控制20～27℃，夜温宜偏低，以减少呼吸作用的物质消耗，温度控制为5～8℃。

3、湿度控制：针对不同地区的气候特点，合理控制空气相对湿度，一般控制湿度为50～70%，湿度过高，引起污染增加的概率增大，不利于脱毒组培苗的繁育。

4、光照控制：每天尽可能利用最长时间的自然光照，光照强度为2000～3000lx；若遇阴天，则利用灯光照射，灯光照射可适当延长时间，最宜为12～15小时。

5、培养基pH值控制：严格控制培养基的pH值为5.8。

6、接种：将选择的10株马铃薯组培脱毒苗用镊子从培养瓶中取出，注意防止伤苗，逐个放在经所述的高温灭菌的培养皿里面的牛皮纸上，然后用手术刀片分段切割成3个带有叶柄腋芽的节段，所述的每株母本组培脱毒苗切割得到的3个节段接种到原培养瓶中，培养15天，即可收获30株子一代组培脱毒苗；再将培养瓶中的组培苗全部取出，每个培养瓶中的3株子一代组培苗分为一组，整理后采用整体切割的方法，将组培苗切割成3个带有叶柄腋芽的节段，即可得到90株子二代组培脱毒苗节段，然后分组接种到备用的培养瓶中培养，每个培养瓶中均匀接种3株子二代马铃薯组培脱毒苗节段，培养15天，即可收获90株子二代组培脱毒苗；再将培养瓶中的组培苗全部取出，每个培养瓶中的3株子二代组培苗分为一组，整理后采用整体切割的方法，将组培苗切割成3个带有叶柄腋芽的节段，即可得到270株子三代组培脱毒苗节段，然后分组接种到备用的培养瓶中培养，培养15天后，可收获270株组培脱毒苗。

实施例2

1、消毒灭菌

5、培养基pH值控制：严格控制培养基的pH值为5.8。

6、接种：将选择的10株马铃薯组培脱毒苗用镊子从培养瓶中取出，注意防止伤苗，逐个放在经所述的高温灭菌的培养皿里面的牛皮纸上，然后用手术刀片分段切割成4个带有叶柄腋芽的节段，所述的每株母本组培脱毒苗切割得到的4个节段接种到原培养瓶中，培养15天，即可收获40株子一代组培脱毒苗；再将培养瓶中的组培苗全部取出，每个培养瓶中的4株子一代组培苗分为一组，整理后采用整体切割的方法，将组培苗切割成4个带有叶柄腋芽的节段，即可得到160株子二代组培脱毒苗节段，然后分组接种到备用的培养瓶中培养，每个培养瓶中均匀接种4株子二代马铃薯组培脱毒苗节段，培养15天，即可收获160株子二代组培脱毒苗；再将培养瓶中的组培苗全部取出，每个培养瓶中的4株子二代组培苗分为一组，整理后采用整体切割的方法，将组培苗切割成3个带有叶柄腋芽的节段，即可得到640株子三代组培脱毒苗节段，然后分组接种到备用的培养瓶中培养，培养15天后，可收获640株组培脱毒苗。

Claims

1.一种马铃薯组培苗的接种方法，其特征是采用整组切段、分散组培再切段的接种方法，具体步骤为：（1）根据马铃薯脱毒苗的组培条件，严格控制培养室和接种室的温度、湿度、光照、pH值；（2）接种器械和培养基消毒灭菌处理；（3）分段切割接种。

2.如权利要求1所述的一种马铃薯组培苗的接种方法，其特征在于：所述的培养室和接种室的温度控制为：昼温20～27℃，夜温5～8℃。

3.如权利要求1所述的一种马铃薯组培苗的接种方法，其特征在于：所述的培养室和接种室的湿度控制为：针对不同地区的气候特点，控制相对湿度为50～70%。

4.如权利要求1所述的一种马铃薯组培苗的接种方法，其特征在于：所述的培养室和接种室的光照控制为：利用最长时间的自然光照，光照强度为2000～3000lx；若遇阴天，则利用灯光照射，灯光照射时间控制为12～15小时。

5.一种马铃薯组培苗的接种方法，其特征在于：在马铃薯脱毒苗接种的时候，把组培苗从培养瓶中取出，放在经所述的高温灭菌的培养皿里面的牛皮纸上，然后用手术刀片分段切割接种，具体方法是：首次接种时，培养瓶中为一株脱毒组培苗，从培养瓶中取出后切割成3～4个带有叶柄腋芽的节段，然后接种到原培养瓶中，培养15～20天；组培苗可接种的时候，将培养瓶中的组培苗全部取出，每个培养瓶中的组培苗分为一组，采用整体切割的方法，将组培苗切割成2～3个带有叶柄腋芽的节段，然后分组接种到备用的培养瓶中组培，按照所述的方法循环接种、组培。