CN103539769A - 用作激酶抑制剂和hsp90抑制剂的大环化合物 - Google Patents

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Abstract

Description

用作激酶抑制剂和HSP90抑制剂的大环化合物
本申请是2007年8月10日提交的，发明名称为“用作激酶抑制剂和HSP90抑制剂的大环化合物”的中国专利申请200780038141.0的分案申请。
相关申请的交叉引用
本申请要求2006年8月11日提交的美国临时专利申请60/837,154和2006年11月13日提交的美国临时专利申请60/858,731的优先权。
发明领域
本发明涉及天然产物根赤壳菌素和pochonin的新的衍生物、类似物和中间体以及它们的合成。本发明进一步涉及这些化合物作为激酶抑制剂和被称为热休克蛋白90(HSP90)的酶家族的抑制剂的用途。
发明背景
在20世纪50年代中期，已发现磷酸化通过催化磷酸化的蛋白激酶或通过涉及脱磷酸化步骤的蛋白磷酸酯酶可以可逆地改变酶的功能。这些反应在调节许多细胞过程(特别是信号转导途径)中起重要作用。在20世纪70年代后期，发现劳氏肉瘤病毒(v-Src)转化因子是蛋白激酶，而且也发现肿瘤促进佛波醇酯是蛋白激酶C的有效激活剂，这揭示了首次了解的疾病和异常蛋白质磷酸化之间的联系。从那以后，已经发现转导机理的缺陷引起许多致癌过程并且在糖尿病、炎性病症和心血管疾病中起作用(T.Hunter,Cell,100:113-127(2000);P.Cohen,Nat.Rev.Drug Discov.,1:309(2002))。因此，选择性的激酶和磷酸酶抑制剂已呈现为重要的药物靶，并且抑制激酶磷酸化活性是化学治疗的最有希望的策略之一。已经批准三种激酶抑制剂药物：格列卫(Gleevec，其抑制Ab1)以及易瑞沙(Iressa)和特罗凯(Tarceva)(后两者均抑制EGFR)。
Figure BDA0000381115570000021
通过丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的激酶介导的磷酸化或磷酸酶介导的去磷酸化来调节蛋白质活性是大多数信号转导机理的核心。(T.Hunter,Cell,100:113(2000))。小分子抑制剂(例如6-二甲基氨基嘌呤和星形孢菌素)有助于阐述这样的磷酸化机理的重要性，并且阐明了激酶的生物功能。激酶以0.1-10μM的Km结合于ATP，并将γ-磷酸酯基团选择性地转移至给定蛋白质的特定残基。激酶的核心结构域由所述ATP结合位点和涉及磷酸转移反应的残基组成，在整个激酶组中高度保守。(G.Manning等人,Science,298:1912(2002))。这导致了以下推测：靶向该高度保守的ATP结合袋的抑制剂不仅必须与以高浓度(mM)存在的ATP竞争，而且必将缺乏选择性。修饰的嘌呤(例如(R)-roscovitine)是强效并具有相当选择性的抑制剂的发现(L.Meijer和E.Raymond,Acc.Chem.Res.,36:417(2003))驳斥了那种观点并且激发了合成围绕嘌呤骨架的组合库(Y.T.Chang等人,Chem.Biol.,6:361(1999);S.Ding等人,J.Am.Chem.Soc.,124:1594(2002))，获得了重要的先导物(lead)(N.S.Gray等人,Science,281:533(1998);M.Knockaert等人,Chem.Biol.,7:411(2000))。
Figure BDA0000381115570000031
在这方面也已研究了大环二羟基苯甲酸内酯。这类化合物的原型(archetype)是根赤壳菌素和相关的pochonin，它们是从麦角菌目丝孢菌普可尼亚属(clavicipitaceous hyphomycete Pochonia genus)(例如厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)变异链状菌株P0297的培养物分离的次级代谢物的结构相关的组。参见例如V.Hellwig等人,J.Natural Prod.,66(6):829-837(2003)。制备根赤壳菌素的卤代醇和肟衍生物并评估它们的v-src酪氨酸激酶抑制、抗增殖和抗肿瘤的体外活性(T.Agatsuma等人,Bioorg.&Med.Chem.,10(11):3445-3454(2002)。
像激酶一样，热休克蛋白(HSP)与ATP相互作用并且是控制疾病的重要靶，然而它们具有不同的机理效应。接触应激(例如热、缺氧或酸中毒)后，大多数组织中的细胞立即迅速地逐步增加HSP的产生速率。目前认为热HSP是分子伴侣，即它们防止不合适的缔合并且帮助正确地折叠其他分子蛋白质，统称为客户(client)和底物。还发现HSP与肿瘤和其他病理生理学状态有关。事实上，伴侣蛋白通过促进对细胞内部变化的耐受性进而促进肿瘤细胞在应激环境中的存活。HSP是普遍存在的，在物种中高度保守，并且通常按照分子量分为以下主要的家族：HSP100、HSP90、HSP70、HSP60和小HSP。这些家族具有结构和功能差异，但是它们在蛋白质折叠的不同阶段协同工作。HSP90受到了特别的关注，因为它与许多类型的信号分子(例如v-Src和Raf)有关，所述信号分子在恶性转化和转移发展中起重要作用。因此，期望HSP90抑制剂用于设计化学治疗，并且还用于阐述复杂信号网络中的相互作用。
热休克蛋白90(Hsp90)是普遍存在的伴侣蛋白，其维持许多“客户”蛋白的合适的构象(参见Kamal等人，Trends Mol.Med.2004,10,283-290;Dymock等人，Expert Opin.Ther.Patents2004,14,837-847;Isaacs等人，Cancer Cell,2003,3,213;Maloney等人，Expert Opin.Biol.Ther.2002,2,3-24和Richter等人，J.Cell.Physiol.2001,188,281-290)并且参与折叠、活化和装配大范围的蛋白质，包括涉及信号转导、细胞周期控制和转录调节的关键蛋白质。研究人员已经报道了HSP90伴侣蛋白与重要的信号蛋白有关，所述重要的信号蛋白诸如类固醇激素受体和蛋白激酶，包括例如Raf-1、EGFR、v-Src家族激酶、Cdk4和ErbB-2(Buchner,TIBS,1999,24,136-141;Stepanova等人,Genes Dev.1996,10,1491-502;Dai等人,J.Biol.Chem.1996,271,22030-4)。研究进一步指示某些辅陪伴蛋白(co-chaperone)(例如Hsp70、p60/Hop/Sti1、Hip、Bag1、HSP40/Hdj2/Hsj1、抑免蛋白、p23和p50)促进HSP90的功能(参见例如Caplan,Trends in Cell Biol.,1999,9,262-268)。抑制Hsp90引起这些客户蛋白采用异常构象，并且这些异常折叠的蛋白质由细胞经由泛素化(ubiquitinylation)和蛋白酶体降解迅速消除。有趣地是，Hsp90客户蛋白的列表包括一系列众人皆知的致癌基因。它们中的四种是临床验证的癌症靶：HER-2/neu(
Figure BDA0000381115570000041
(曲妥著单抗))、Bcr-Abl(
Figure BDA0000381115570000042
(甲磺酸伊马替尼))、雌激素受体(他莫昔芬)和雄激素受体((比卡鲁胺))，而其他基因在癌症的发展中起重要的作用。一些最敏感的Hsp90客户涉及生长信号转导(Raf-1、Akt、cdk4、Src、Bcr-Abl等)。相比之下，似乎很少有肿瘤抑制基因(如果有)是Hsp90的客户(客户蛋白的列表参见Pratt等人，Exp.Biol.Med.2003,228,111-133;Workman等人，Cancer Lett.2004,206,149-157和Zhang等人，J.Mol.Med.2004,82,488-499.)，因此抑制Hsp90具有全面的抗增殖效应。此外，一些客户蛋白涉及肿瘤发生的其他基本过程，即凋亡逃逸(apoptosis evasion)(例如Apaf-1、RIP、Akt)、永生性(immortality)(例如hTert)、血管发生(例如VEGFR、Flt-3、FAK、HIF-1)和转移(c-Met)。
然而，药用的HSP抑制剂必须是选择性的，因为HSP还具有构造(constructive)作用。在非应激条件下，HSP90是存在于真核细胞的最大量的蛋白质之一，代表1-2%的总细胞蛋白质含量并且当细胞受到应激时仅增加约两倍。当结合天然客户时，HSP90主管例如折叠新生多肽、跨膜转运蛋白质以及正常蛋白质周转。此外，HSP90在翻译后调节信号分子(导致它们的活化)中起关键作用。HSP90很少单独起作用，但其是与辅陪伴蛋白(HSP40、CDC37/p50、AHA1、p23)和与辅助蛋白一起工作，而不是与伴侣蛋白HSP70一起工作。
HSP90的许多客户蛋白在生长控制、细胞存活和发育过程中起关键作用，且已知那些客户包括受体酪氨酸激酶、丝氨酸/苏氨酸激酶、类固醇激素受体、转录因子和端粒末端转移酶。客户的致癌突变体也是客户自身，只是对HSP90的功能具有更高的需求，例如突变体v-SRC酪氨酸激酶需要从蛋白质的HSP90协同装配中得到更多的蛋白质折叠能力(Y.Xu等人,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,96:109(1999);.H.Oppermann等人,同上,78:1067(1981);L.Whitesell等人,同上,91:8324(1994)。同样，肿瘤抑制蛋白p53的突变导致发现于人类癌症中的最普通的分子遗传缺陷，并且大多数p53突变导致与HSP90的扩大的相互作用(可能由于异常构象)，防止了它们通常的泛素化和随后被蛋白酶体降解(M.V.Blagosklonny等人,同上,93:8379(1996)。然而，尽管HSP90客户的普遍参与，但是它们大多数是前生长信号转导蛋白(pro-growth signaling protein)，并且其伴侣蛋白功能在肿瘤发生期间被破坏，导致恶性转化的发展以及所转化表型的维持。
除了抗癌和抗肿瘤形成(antitumorgenic)活性外，HSP90抑制剂还涉及许多其他应用，包括用作抗炎剂、抗传染病剂、治疗自身免疫的药剂、治疗缺血的药剂和用于治疗神经变性疾病和促进神经再生的药剂(参见M.Waza等人,Nature Med.11:1088(2005);Rosen等人,WO 02/09696;PCT/US01/23640;Degranco等人,WO 99/51223;PCT/US99/07242;Gold,美国专利第6,210,974 B1号)。文献报道了纤维形成病症(包括但不限于硬皮病、多肌炎、系统性狼疮(systemic lupus)、类风湿性关节炎、肝硬化、瘢痕形成、间质性肾炎和肺纤维化)是可治疗的(Strehlow,WO 02/02123;PCT/US01/20578)。
因此，安沙霉素类和其他HSP90抑制剂对治疗和/或预防许多类型的病症是很有前途的。然而，许多天然产物衍生的Hsp90抑制剂表现出药学上的缺陷；它们相对的不溶性使它们难以配制和给药，并且它们不容易合成而且目前必须(至少部分地)通过发酵生产。此外，安沙霉素的剂量限制毒性与肝有关。例如，半合成抑制剂17-烯丙基氨基,17-去甲氧基-格尔德霉素(17-AAG)，目前在II期临床试验中，其造价昂贵，配制困难(NCI临床方案由注射17-AAG的DMSO溶液组成)，且目前只能肠胃外给药。尽管17-二甲基氨基乙基氨基类似物(17-DMAG)更加易溶，但它表现出所有17-AAG的副作用，并且在临床前毒性研究中出现胃肠出血(Glaze等人.Proc.Am.Assoc.Cancer.Res.2003,44,162-162和Eiseman等人，CancerChemother.Pharmacol.2005,55,21-32)。另一种天然产物Hsp90抑制剂——根赤壳菌素(RC)，水溶性差，并且在肿瘤异种移植模型中没有活性。根赤壳菌素的半合成肟衍生物提供较好的溶解性并且大大改善了鼠科模型中的药理学特征，但是仍然仅限于静脉内给药(Ikuina等人.J.Med.Chem.2003,46,2534-2541。此外，根赤壳菌素和其肟含有环氧乙烷环，所述环氧乙烷环被看作对稳定性和毒性负责，促进环丙根赤壳菌素(cycloproparadicicol)的合成：Yang等人.J.Am.Chem.Soc.2004,126,7881和2003,125,9602-9603)。尽管安沙霉素类具有潜力，但因此需要可选的HSP90抑制剂。
已经寻找Hsp90的全合成口服活性抑制剂，以便提供更加灵活的剂量方案选择，并且可能避免天然产物抑制剂的副反应。Chiosis等人描述了嘌呤类似物的设计和合成，所述嘌呤类似物模拟格尔德霉素和其他安沙霉素类结合HSP90的ATP结合袋并且因此抑制HSP90的能力。参见国际专利申请PCT/US01/46303(WO 02/36075;Chemistry & Biology(化学与生物学)8:289-299(2001))。Chiosis等人描述的具体化合物包括在3、4和5位取代的三甲氧苄基实体。使用凝胶结合测定，证明这些化合物结合HSP90，比17-AAG低近20倍。
最近，已经报道了其他新的非天然产物Hsp90抑制剂(例如PU3和CCT018159;参见Chiosis等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.2002,10,3555-3564;Vilenchik等人，Chem.Biol.2004,11,787-797;Chiosis等人，WO0236075,2002;Drysdale等人，WO 03/055860A1,2003;Wright等人，Chem.Biol.2004,11,775-785;Dymock等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.2004,14,325-328;Dymock等人，J.Med.Chem.2005,48,4212-4215.Hsp90incomplex with PU3pdb code1UY6,and with PU24FCl:pdb coad1UYF，和Clevenger等人，Org.Lett.2004,6,4459-4462)。使用Hsp90与ATP、格尔德霉素或根赤壳菌素的复合体的晶体结构设计这些抑制剂的结构。将8-苄基腺嘌呤(例如PU3)设计成采用与格尔德霉素相同的C型构象(Chiosis等人.Current Cancer Drug Targets,2003,3,371-376)，其具有指向腺嘌呤结合位点(铰链区)的腺嘌呤环，以及模拟格尔德霉素醌环的氢键接受性质的三甲氧基苯环。(PU3的苯环没有设计成具有与格尔德霉素的醌环完全相同的方向。而是所述三甲氧基苯部分设计成指向相同的一般方向并且与Lys112形成氢键，所述Lys112是与格尔德霉素的醌环形成氢键的氨基酸。)最近获得的Hsp90与PU3的复合体的晶体结构确认嘌呤环占据了一般由ADP/ATP占据的位置，但是苯环指向与预知相反的方向，以形成与Phe138的r-堆积相互作用(r-stacking interaction)。然而，PU3抑制Hsp90(HER-2降解测定，HER-2IC50=40μM)并提供用于进一步优化的有价值的起始点。基于PU3的结构活性研究导致更具有活性的PU24FCl(HER-2IC50=1.7μM)，其随后还与Hsp90共结晶。当PU24FCl在DMSO/EtOH/磷酸缓冲盐水1:1:1中配制并向腹膜内给药于荷有(bearing)MCF-7异种移植肿瘤的小鼠时，它在100-300mg/kg时诱导HER-2和Raf-1的下调(一种与Hsp90抑制一致的药效学响应)，并且在200mg/kg时它显著抑制了肿瘤生长。当口服给药时，需要非常高剂量(500-1000mg/kg)的PU24FCl才能观察到相似的药效学响应，并且没有8-苄基腺嘌呤被报道通过口服途径抑制肿瘤的生长。在我们手中，证实了PU24FCl太难溶以至于不能有效地配制和口服给药。目前为止，尽管大量的SAR研究证明了效力和药学性质，但是当口服施用时，Hsp90抑制剂还是没有在人类癌症的动物模型(异种移植物)中被证明具活性。
8-苄基腺嘌呤的发现导致8-硫烷基腺嘌呤的设计(Kasibhatla等人.WO3037860,2003和Llauger等人,J.Med.Chem.2005,48,2892-2905)，以8-(2-碘-5-甲氧基-苯基硫烷基)-9-戊-4-炔基-9H-嘌呤-6-基胺为例，其在几种基于细胞的测定中显示出色的效能，但是在水中溶解差并且在临床可接受的制剂中没有足够的口服生物利用度。
当抑制HSP90时，其客户被降解，即未折叠的蛋白质被泛素化，随后是蛋白酶体介导的水解。到目前为止，大多数报道的抑制剂结合于N末端结构域(见下文)，但是报道了一些抑制剂与C末端结构域相互作用；HSP90在两个位置都具有ATP结合位点。不完全清楚HSP90的C末端功能，但是化合物与该结构域相互作用明显地损害了HSP90功能并且具有抗癌效应。已发现一些二羟基苯甲酸内酯抑制HSP90，因此天然产物根赤壳菌素和格尔德霉素(分别于P.Delmotte和J.Delmotte-Plaquee,Nature(London),171:344(1953);和C.DeBoer等人,J Antibiot(Tokyo),23:442(1970))被证明抑制表达活化的Src的细胞的转化表型(H.J.Kwon等人,Cancer Research,52:6926(1992);Y.Uehara等人,Virology,164:294(1988))。已报道相关的化合物(例如除莠霉素)具有相似的效应(S.Omura等人,JAntibiot(Tokyo),32:255(1979)。
在这方面研究的其他二羟基苯甲酸内酯(RAL)包括17-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17AAG)(D.B.Solit等人,Clin.Cancer Res.,8:986(2002);L.R.Kelland等人,J.Natl.Cancer Inst.,91:1940(1999))；17DMAG(J.L.Eiseman等人,Cancer Chemother.Pharmacol.,55:21-32(2005))；IPI-504(J.Ge等人,J.Med.Chem.,49:4606(2006)；肟衍生物例如KF25706(S.Soga等人,Cancer Res.,59:2931(1999))和KF55823(S.Soga等人,CancerChemotherapy and Pharmacology),48:435(2001))；以及Danishefsky等人的环丙根赤壳菌素(A.Rivkin等人,同上,44:2838(2005))。结构相关的变体包括具有根赤壳菌素的羧基间苯二酚和格尔德霉素的苯醌的嵌合抑制剂(R.C.Clevenger和B.S.Blagg,Org.Lett.,6:4459(2004);G.Shen和B.S.Blagg,同上,7:2157(2004);G.Shen等人,J.Org.Chem.,71:7618(2006))。
Figure BDA0000381115570000082
基于根赤壳菌素的HSP90抑制剂
HSP90的嵌合抑制剂
已经研究嘌呤(例如PU3)，以便设计适合HSP90的ATP结合位点的小分子(G.Chiosis等人,Chem Biol 8,289-299(2001);G.Chiosis等人,Bioorg.Med.Chem.,10:3555(2002);L.LLauger等人,J.Med.Chem..48:2892(2005);H.He等人,同上,49:381(2006);M.A.Biamonte等人,同上,49:817(2006))。
Figure BDA0000381115570000092
基于嘌呤设计的HSP90抑制剂
最近还报道了吡唑(1-35)(M.G.Rowlands等人,Anal.Biochem.,327:176(2004);B.W.Dymock等人,J.Med.Chem.,48:4212(2005))和苯并噻唑硫-嘌呤(1-36)(L.Zhang等人,J.Med.Chem.,49:5352(2006))作为这些酶的小分子抑制剂。
Figure BDA0000381115570000093
其他类的HSP90抑制剂
根赤壳菌素已具有特别意义。根赤壳菌素(一种14元大环内酯并且也称作单孢菌素(monorden))是HSP90的ATP结合袋的有效的、高竞争性和高选择性的配体。HSP90是ATP酶而不是激酶，并且它的ATP结合袋具有Bergerat折叠(A.Bergerat等人,Nature,386:414(1997);R.Dutta和M.Inouye,Trends Biochem.Sci.,25:24(2000))，其与激酶的ATP结合袋不同(S.M.Roe等人,J.Med.Chem.,42:260(1999))。在最初发现后，出现对根赤壳菌素的药物应用的极大关注。(参见美国专利6,946,456和美国专利申请公布2003-0211469、2004-0102458、2005-0074457、2005-0261263、2005-0267087、2006-0073151、2006-0251574、2006-0269618、2007-0004674和2007-0010432)。
Figure BDA0000381115570000101
引人注目地，已知一些二羟基苯甲酸(resorcylic)大环内酯类(其为根赤壳菌素的相近类似物)抑制激酶，但不抑制HSP90。确实，发现LL-Z1640-2是TAK1激酶的有效和选择性的抑制剂，而根赤壳菌素和其他二羟基苯甲酸酯(resorcylides)对所述TAK1激酶没有活性(J.Ninomiya-Tsuji等人,J.Biol.Chem.,278:18485(2003);P.Rawlins等人,Int.J.Immunopharma.,21:799(1999);K.Takehana等人,Biochem.Biophys.Res.Comm.,257:19(1999);A.Zhao等人,J.Antibiotics,52:1086(1999))。密切相关的LL-783,227(其中一个烯烃被还原)是MEK激酶的有效抑制剂(A.Zhao等人,J.Antibiotics52:1086(1999))。发现化合物F87-2509.04诱导含有AU富集元件(ARE)的mRNA的降解(T.Kastelic等人,Cytokine,8:751(1996))，并且发现寄端霉素(hypothemycin)抑制Ras介导的细胞信号转导(H.Tanaka等人,Jap.J.CancerRes.,90:1139(1999))。最近，我们已经证明aigialomycin D是CDK抑制剂(S.Barluenga等人,Angew.Chem.,Int.Ed.,46(24):3951(2006))。
根赤壳菌素的其他相近类似物确实抑制HSP90。Pochonin D是HSP90的有效抑制剂。(E.Moulin等人,J.Am.Chem.Soc.,127(19):6999(2005))。并且，已报道90nM的pochonin A是HSP90的抑制剂。发现Pochonin C是疱疹的解旋酶-引发酶的抑制剂，所述解旋酶-引发酶是ATP酶而不是激酶(V.Hellwig等人,J.Nat.Prod.,66:829(2003))。虽然根赤壳菌素和pochonin C在结构上非常相似，但它们在溶液中具有非常不同的构象，并且具有不同的生物活性(S.Barluenga等人,Chem.Eur.J.,11:4935(2005)。因此，看来是所述大环的“松弛(floppiness)”在二羟基苯甲酸大环内酯间的抑制差异中起到了重要的作用，并且在任何情况下使得那些效应难以通过理论方法预测。
已知一些二羟基苯甲酸大环内酯是激酶或磷酸酯酶的抑制剂(美国专利5,674,892、5,728,726、5,731,343和5,795,910)，或抑制其他的酶(美国专利5,710,174，抑制纤维蛋白交联的FXIIIa催化)。二羟基苯甲酸大环内酯还用于其他医学适应症(美国专利3,453,367、3,965,275、4,035,504、4,670,249、4,778,821、4,902,711和6,635,671)。
根赤壳菌素和pochonin是天然产物；用于合成它们的一些类似物的中间体可通过发酵获得，然而仅依靠那些天然产物或它们的发酵衍生物严重地限制了化合物的范围。因此，已经合成了许多新的二羟基苯甲酸大环内酯。这些中的许多是玉米赤霉烷和相关的化合物，其中所述大环除了苯环的几个碳之间外，不含有碳-碳双键。(美国专利序列号3,373,038;3,586,701;3,621,036;3,631,179;3,687,982;3,704,249;3,751,431;3,764,614;3,810,918;3,836,544;3,852,307;3,860,616;3,901,921;3,901,922;3,903,115;3,957,825;4,042,602;4,751,239;4,849,447;和2005-0256183)。还报道了具有以下特征的二羟基苯甲酸大环内酯的合成：苯环外的环上的碳之间存在一个双键(美国专利序列号3,196,019;3,551,454;3,758,511;3,887,583;3,925,423;3,954,805;和4,088,658)。那些二羟基苯甲酸大环内酯中大部分是14元大环，但是还报道了12元大环类似物的合成(美国专利序列号5,710,174;6,617,348;和2004-0063778，以及PCT公布WO 02/48135)。
还报道了根赤壳菌素相关的化合物的合成，所述化合物在大环上具有两个非芳香双键和卤化物或1,2-桥氧基(即环氧化物)。(美国专利序列号4,228,079;5,597,846;5,650,430;5,977,165;7,115,651以及日本专利文件号JP6-279279A、JP6-298764A、JP9-202781A、JP10-265381A2和JP2000-236984)。根赤壳菌素相关化合物的肟的合成公开于美国专利序列号5,977,165;6,239,168;6,316,491;6,635,662;2001-0027208;2004-0053990；日本专利文件号JP2003-113183A2；和PCT公布号WO 99/55689。根赤壳菌素的环丙类似物的合成公开于美国专利7,115,651和PCT公布WO05/061481。一些其他二羟基苯甲酸大环内酯类似物的合成公开于美国专利公布2006-0247448和PCT公布WO 02/48135。还合成了根赤壳菌素以及Pochonin A和C(S.Barluenga等人,Angew.Chemie,43(26):3467-3470(2004);S.Barluenga等人,Chemistry-A European Journal,11(17):4935-4952(2005年8月19日);E.Moulin等人等人,Organic Letters,7(25):5637-5639(2005年12月8日)。
尽管有以上描述的进展，但化学生物学家仍就受到敲除特定激酶活性的有限能力的困扰，其中敲除特定激酶活性是为了揭示(deconvolute)特定激酶在复杂信号转导网络中的作用。可渗入细胞的小分子有望解决该问题。且越来越明显的是：激酶的生物功能通常受它们的构象调节，所述构象转而由它们的磷酸化水平并且由分子内和分子间的缔合指示。小分子抑制剂还具有区别给定激酶的不同构象的潜力，因此小分子提供了详细分析那些构象的各自功能的方法。不幸地是，已知激酶抑制剂的资料(portfolio)还不能支持在分析激酶组的不同成员的作用中所要做的全部工作。这不仅是学术追求，因为药物设计的合理性将继续受到困扰，直到了解激酶的机理和它们的选择性。
因此对已经改善效能和选择性的激酶抑制剂和HSP90抑制剂有进一步的需求。此外，这样的抑制剂和抑制剂的靶向库的设计与合成仍然具有挑战性，因此对改善的合成方法有进一步的需求。
发明概述
本发明提供式I、II、III、IV和V的pochonin大环内酯的新的类似物、其互变异构体，其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药和包含所述化合物的用于治疗激酶介导或HSP90介导的病症的药物组合物。本发明还提供使用式I、II、III、IV和V的化合物治疗激酶介导或HSP90介导的病症的方法。本发明的化合物具有作为激酶抑制剂和HSP90抑制剂的活性。此外，本发明提供服从于(amenable to)自动合成技术的制备所述化合物的改良工艺。
在本发明第一个主要的实施方案中，提供式I的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000131
其中：
R1、R2、R3、R4和R5独立地为氢、卤素、硝基、氰基、烷基、取代的烷基、低级烷基、烯基、炔基、烷基芳基、芳烷基、芳基、杂烷基、烷基杂芳基、杂环基、杂芳基、OH、OR、NH2、N(R)2、SR、S(O)R、S(O)2R、-SO2N(R)2、-N(R)SO2R、-N(CO)R、-N(CO)N(R)2、-N(CO)OR、-O(CO)R、-(CO)R、-(CO)OR、-(CO)N(R)2、-O(CO)OR或-O(CO)N(R)2，其中每个R可以相同或不同；
A1和A2一起为-CH2-CH2-、-CH=CH-、-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-、-CH(卤素)-CH(OH)-、1,2-环丙二基(1,2-cyclopropadiyl)或1,2-环氧乙烷；
B1和B2一起为-CH2-CH2-或者B1和B2一起表示共价键，其中每个R可以相同或不同；
X1是氢、卤素、OH、OR、NH2、N(R)2、NH-OR、SR、S(O)R、S(O)2R、-NH-O-(CH2)n-CO2-R、-NH-O-(CH2)n-CON(R)2；或者X1与X2或X3一起表示共价键，其中每个R可以相同或不同；
X4和X5一起为=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R，其中结合至氮的基团-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-构型；或者X4和X5之一是氢且另一个是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、O(CO)N(R)2、-(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2，且n是0、1、2或3；或者X4和X5之一与X6一起表示共价键且X4和X5中的另一个是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、-N(R)2或O(CO)N(R)2，其中每个R可以相同或不同；
X6是氢或X6与X4和X5之一一起表示共价键；且
R是氢、烷基、取代的烷基、低级烷基、酰基、芳基、烷芳基、芳基烷基包括苄基、杂烷基、杂芳基、杂环基、保护基；或者在同一个氮上的两个R与所述氮一起形成5-8元杂环或杂芳基环；且
n是0、1、2或3。
在本发明第二个实施方案中，提供式II的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000141
其中R、R1、R2、R3、R4、R5、A1、A2、X1、X2和X3如上文式I所定义；且
R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R，其中结合至氮的基团-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-构型；且其中R可以相同或不同。
在式II的一个子实施方案中，A1和A2一起是-CH=CH-。
在式II的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在式II的另一子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环氧乙烷。
在本发明第三个实施方案中，提供式III的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000151
其中R1、R2、R3、R4、R5、A1、A2、X1、X2和X3如上文式I所定义；且R是氢、烷基、芳基烷基、酰基或保护基。
在式III的一个子实施方案中，A1和A2一起是-CH=CH-。
在式III的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在式III的另一子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环氧乙烷。
在本发明第四个实施方案中，提供式IV的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000152
其中R、R1、R2、R3、R4、R5、A1和A2如上文式I所定义；且R6是氢、OR或N(R)2。
在式IV的一个子实施方案中，A1和A2一起是-CH=CH-。
在式IV的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在式IV的进一步的子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环氧乙烷。
在本发明第五个实施方案中，提供式V的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
其中R、R1、R2、R3、R4、R5、A1和A2如上文式I所定义；R6是(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2；且
n是0、1、2或3。
在式V的一个子实施方案中，A1和A2一起是-CH=CH-。
在式V的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在式V的第三个子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环氧乙烷。
在另一实施方案中，提供包含有效激酶抑制量的式I、II、III、IV或V的化合物与药学可接受的载体的药物组合物。
在另一实施方案中，提供包含有效HSP90抑制量的式I、II、III、IV或V的化合物与药学可接受的载体的药物组合物。在一些实施方案中，所述载体适于口服、肠胃外、吸入、局部或真皮内给药。
在其他的实施方案中，包含式I、II、III、IV或V的化合物的药物组合物包含平均粒度小于约2微米的颗粒。在其他的实施方案中，将所述组合物掺至可生物降解或不能生物降解的聚合物中。
在一个实施方案中，所述组合物包含选自抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、液体载体、溶质、助悬剂、增稠剂、矫味剂、明胶、甘油、粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂、分散剂、可生物降解的聚合物或它们的任意组合的添加剂。
在另一实施方案中，本发明提供治疗患有疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述疾病的患者给药有效量的式I、II、III、IV或V的化合物，其中所述疾病是自身免疫疾病、炎性疾病、神经疾病或神经变性疾病、癌症、心血管疾病、变态反应、哮喘或激素相关的疾病。
在一个实施方案中，提供治疗癌症患者的方法，其包括向所述患有所述癌症的患者给药有效的癌症治疗量的式I、II、III、IV或V的化合物，其中所述癌症可以是实体瘤、血源性肿瘤(blood borne tumor)、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、尿道癌、食管癌、喉癌、胶质母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓样病症、淋巴样病症、霍奇金氏病、毛细胞(hairy cells)、口腔癌、咽癌(pharynx cancer)、唇癌、舌癌、口癌(mouth cancer)、咽癌(cancer of the pharynx)、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症或白血病。
在另一实施方案中，本发明提供治疗患有与不期望的新血管形成相关的疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述不期望的新血管形成的患者给药有效量的式I、II、III、IV或V的化合物。
与不期望的新血管形成相关的疾病包括眼新生血管性疾病(ocularneovascular disease)、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病、角膜移植物排斥(corneal graft rejection)、新生血管性青光眼和晶状体后纤维增生症(retrolental fibroplasias)、流行性角膜结膜炎、维生素A缺乏病、接触镜超带症(contact lens overwear)、异位性角膜炎、上角膜缘角结膜炎(superiorlimbic keratitis)、翼状胬肉干燥性角膜炎(pterygium keratitis sicca)、干燥综合征(
Figure BDA0000381115570000171
syndrome)、红斑痤疮、小水疱病(phylectenulosis)、梅毒、分枝杆菌感染、脂质变性、化学烧伤、细菌性溃疡、真菌性溃疡、单纯疱疹感染、带状疱疹感染、原虫感染、卡波西肉瘤、莫伦溃疡、Terrien角膜边缘性变性(Terrien's marginal degeneration)、边缘性角质层分离(marginalkeratolysis)、创伤、类风湿性关节炎、系统性狼疮、多动脉炎、韦格内结节病(Wegener’s sarcoidosis)、巩膜炎、多型糜烂性红斑综合征(Steven-Johnson disease)、类天疱疮、放射状角膜切开术或角膜移植排斥(cornealgraph rejection)、镰状细胞贫血、结节病、弹性假黄色瘤、佩吉特病、静脉阻塞、动脉阻塞、颈动脉阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃体炎、莱姆病、系统性红斑狼疮、伊尔斯病、白塞病、引起视网膜炎或脉络膜炎的感染、眼假组织胞浆菌病、贝斯特病、近视、视窝、斯塔加特病(Stargart’sdisease)、睫状体扁平部炎、慢性视网膜脱离、高粘滞综合征、弓形体病或激光后并发症(post-laser complications)。
在另一实施方案中，提供治疗患有炎性疾病的患者的方法，其包括向所述患有所述炎性疾病的患者给药有效量的式I、II、III、IV或V的化合物。
所述炎性疾病可以是内皮细胞的过度或异常刺激、动脉粥样硬化、血管功能障碍、异常的伤口愈合、炎性和免疫病症、白塞病、痛风或痛风性关节炎、伴随异常的血管发生的类风湿性关节炎、皮肤疾病、银屑病、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病、晶状体后纤维增生症、黄斑变性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奥-韦综合征(Osler Webersyndrome)。
发明详述
本发明提供基于二羟基苯甲酸内酯的用作激酶抑制剂和HSP90抑制剂的新的化合物。还提供包含所述化合物的组合物和制备所述化合物的方法。提供所述化合物在抑制激酶和HSP-90中的用途和治疗激酶介导或HSP90介导的疾病的方法，所述方法包括向患有激酶介导或HSP90介导的疾病的患者给药有效的激酶抑制量或有效的HSP90抑制量的式I、II、III、IV或V的化合物。
化合物
在本发明第一个实施方案中，提供式I的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000181
其中：
R1、R2、R3、R4和R5独立地为氢、卤素、硝基、氰基、烷基、取代的烷基、低级烷基、烯基、炔基、烷基芳基、芳烷基、芳基、杂烷基、烷基杂芳基、杂环基、杂芳基、OH、OR、NH2、N(R)2、SR、S(O)R、S(O)2R、-SO2N(R)2、-N(R)SO2R、-N(CO)R、-N(CO)N(R)2、-N(CO)OR、-O(CO)R、-(CO)R、-(CO)OR、-(CO)N(R)2、-O(CO)OR或-O(CO)N(R)2，其中每个R可以相同或不同；
A1和A2一起为-CH2-CH2-、-CH=CH-、-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-、-CH(卤素)-CH(OH)-、1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷；
B1和B2一起为-CH2-CH2-或者B1和B2一起表示共价键，其中每个R可以相同或不同；
X1是氢、卤素、OH、OR、NH2、N(R)2、NH-OR、SR、S(O)R、S(O)2R、-NH-O-(CH2)n-CO2-R、-NH-O-(CH2)n-CON(R)2；或者X1与X2或X3一起表示共价键，其中每个R可以相同或不同；
X2和X3都是氢，或者X2和X3之一是氢且另一个与X1一起表示共价键；
X4和X5一起为=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R，其中结合至氮的基团-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-构型；或者X4和X5之一是氢且另一个是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、O(CO)N(R)2、-(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2，且n是0、1、2或3；或者X4和X5之一与X6一起表示共价键且X4和X5中的另一个是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、-N(R)2或O(CO)N(R)2，其中每个R可以相同或不同；
X6是氢或X6与X4和X5之一一起表示共价键；且
R是氢、烷基、低级烷基、酰基、芳基、烷芳基、芳基烷基包括苄基、杂烷基、杂芳基、杂环基、保护基；或者在同一个氮上的两个R与所述氮一起形成5-8元杂环或杂芳基环；且
n是0、1、2或3。
在化合物I的一个子实施方案中，R1是H、卤素或杂环基。
在化合物I的另一子实施方案中，R5是H、烷基、低级烷基、芳基、杂芳基或芳基烷基。
在化合物I的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH=CH-。
在化合物I的又一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在化合物I的进一步的子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷。
在本发明第二个实施方案中，提供式II的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000201
其中：
R、R1、R2、R3、R4、R5、X1、X2、X3、A1和A2如上文式I所定义；且
R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R，其中结合至氮的基团-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-构型；且其中R可以相同或不同。
在化合物II的一个子实施方案中，R1是H、卤素或杂环基。
在化合物II的另一子实施方案中，R5是H、烷基、低级烷基、芳基、杂芳基或芳基烷基。
在化合物II的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH=CH-。
在化合物II的又一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在化合物II的进一步的子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=O。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2或=N-N-SOR，其中结合至氮的基团-OR、-O-(CH2)nCOOR、-O-(CH2)nCON(R)2、-N(R)2、-N-SOR或-N-SO2R可以是Z-或E-构型。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-或-C(OH)-C(OH)-；
X1是氢、卤素或NH-OR；且
R7是=O。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-或-C(OH)-C(OH)-；
X1是氢、卤素或NH-OR；且
R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2或=N-N-SOR。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=O。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR、=N-N-SO2R。
在化合物II的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基或芳基；
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-；
X1是氢、卤素、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2NH-OR；且
R7是=O、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R。
在化合物II的又一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷或1,2-环丙二基；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=O、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R。
在化合物II的又一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷或1,2-环丙二基；
X1是氢、卤素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2；且
R7是=O、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R。
在化合物II的进一步的子实施方案中：
R1是H或Cl；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢；
A1和A2一起是-CH=CH-；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=O。
在化合物II的进一步的子实施方案中：
R1是H或Cl；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢；
A1和A2一起是-CH=CH-；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR或=N-O-(CH2)nCON(R)2。
在化合物II的再一子实施方案中：
R1是H或Cl；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=O。
在化合物II的再一子实施方案中：
R1是H或Cl；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷；
X1与X2一起表示共价键；且
R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2。
在式II的进一步的子实施方案中：
R1是H或Cl；
R2和R4为OH；
R5是氢；
A1和A2一起是-CH=CH-；
X1与X2一起表示共价键；
R7是=N-O-CH2COOR或=N-O-CH2CON(R)2；且
R是H、低级烷基，或在相同氮上的两个R一起形成六元杂环基环。
在本发明另一实施方案中，提供式III的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000241
其中：
R、R1、R2、R3、R4、R5、X1、X2、X3、A1和A2如上文式I所定义。
在化合物III的一个子实施方案中，X1和X2一起形成双键。
在化合物III的一个子实施方案中，R是氢或酰基。
在化合物III的一个子实施方案中，R1是H、卤素或杂环基。
在化合物III的另一子实施方案中，R5是氢、烷基、低级烷基、芳基、杂芳基或芳基烷基。
在化合物III的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH=CH-。
在化合物III的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或CH(卤素)-CH(OH)-。
在化合物III的进一步的子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷。
在式III的一个子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-；且
X1与X2一起表示共价键。
在式III的另一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-；且
X1是氢、卤素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2。
在式III的再一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-；且
X1与X2一起表示共价键。
在式III的进一步的子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基或芳基；
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-；且
X1是氢、卤素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR或NH-O-(CH2)nCON(R)2。
在式III的又一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基或芳基；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷或1,2-环丙二基；且
X1与X2一起表示共价键。
在式III的另一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷或1,2-环丙二基；且
X1是氢、卤素、NH-OR、NH-O-(CH2)nCOOR、NH-O-(CH2)nCON(R)2。
在本发明的第四个主要实施方案中，提供式IV的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000261
其中：
R、R1、R2、R3、R4、R5、A1和A2如上文式I所定义；且
R6是氢、OR或N(R)2；且其中R可以相同或不同。
在化合物IV的一个子实施方案中，R6是氢。
在化合物IV的另一子实施方案中，R6是O-乙酰基或O-三氟乙酰基。
在化合物IV的另一子实施方案中，R1是H、卤素或杂环基。
在化合物IV的另一子实施方案中，R5是氢、烷基、低级烷基、芳基、杂芳基或芳基烷基。
在化合物IV的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH2-CH2-或-CH=CH-。
在化合物IV的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在化合物IV的进一步的子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷。
在式IV的一个子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
R6是氢或OR；且
A1和A2一起是-CH=CH-。
在化合物IV的另一子实施方案中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
R6是氢或OR；且
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在式IV的又一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
R6是氢或OR；且
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷或1,2-环丙二基。
在本发明的第五个主要实施方案中，提供式V的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000281
其中R、R1、R2、R4、R3、R5、A1和A2如上文式I所定义；且
R6是(CH2)nC(O)OR、-(CH2)nC(O)N(R)2或-(CH2)nC(O)N(R)-OR；其中n是0、1、2或3；且其中R可以相同或不同。
在化合物V的一个子实施方案中，R6是-CH2C(O)N(Me)OMe。
在化合物V的一个子实施方案中，R1是H、卤素或杂环基。
在化合物V的另一子实施方案中，R5是氢、烷基、低级烷基、芳基、杂芳基或芳基烷基。
在化合物V的另一子实施方案中，A1和A2一起是-CH=CH-。
在化合物IV的又一子实施方案中，A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或CH(卤素)-CH(OH)-。
在化合物V的进一步的子实施方案中，A1和A2一起是1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷。
在式V的一个子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；且
A1和A2一起是-CH=CH-或-CH2-CH2-。
在式V的另一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基或芳基；且
A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
在式V的又一子实施方案中，提供了化合物，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；且
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷或1,2-环丙二基。
在本发明的具体实施方案中，提供表1所呈现的化合物、它们的互变异构体，或它们的药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药：
Figure BDA0000381115570000311
Figure BDA0000381115570000321
Figure BDA0000381115570000341
Figure BDA0000381115570000351
Figure BDA0000381115570000371
Figure BDA0000381115570000391
Figure BDA0000381115570000401
Figure BDA0000381115570000421
Figure BDA0000381115570000431
Figure BDA0000381115570000441
Figure BDA0000381115570000471
Figure BDA0000381115570000481
Figure BDA0000381115570000491
Figure BDA0000381115570000501
Figure BDA0000381115570000521
Figure BDA0000381115570000531
Figure BDA0000381115570000541
Figure BDA0000381115570000551
Figure BDA0000381115570000561
Figure BDA0000381115570000571
Figure BDA0000381115570000581
Figure BDA0000381115570000601
Figure BDA0000381115570000611
药学可接受的盐和前药
术语“药学可接受的盐”和“前药”用于整个说明书以描述化合物的任何药学可接受的形式(例如盐、酯、磷酸酯、酯或相关的基团的盐)，当其一旦向患者给药时，就提供本说明书描述的化合物。在其中化合物具有足够的碱性或酸性以形成稳定的无毒性的酸或碱的盐的情况下，给药作为盐的化合物可能是合适的。术语药学可接受的盐或复合物指保留本发明的化合物的预期生物活性并表现出最小的非预期的毒理学效应的盐或复合物。
此类盐的非限制性实例是(a)由无机酸(例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸以及类似的酸)形成的酸加成盐，例如硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐，和由有机酸形成的盐，包括甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐(tartarate)、琥珀酸盐、安息香酸盐、抗坏血酸盐、α-酮戊二酸盐和α-甘油磷酸盐，所述有机酸为例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、抗坏血酸、安息香酸、丹宁酸、扑酸、海藻酸、多聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸（naphthalenedisulfonic acid）和多聚半乳糖醛酸（polygalcturonic acid）；(b)由以下形成的碱加成盐：金属阳离子(例如锌、钙、铋、钡、镁、铝、铜、钴、镍、镉、钠、钾、锂以及类似金属阳离子)或由氨、N,N-二苄基乙二胺、D-葡糖胺、四乙铵或乙二胺形成的阳离子；或者(c)(a)和(b)的组合；例如丹宁酸锌盐或类似盐。所述定义还包括本领域技术人员所知的药学可接受的季盐，其具体包括式-NR+A-的季铵盐，其中R如上文定义且A是反离子，包括氯化物、溴化物、碘化物、-O-烷基、甲苯磺酸盐、甲基磺酸盐、磺酸盐、磷酸盐或羧酸盐(例如苯甲酸盐、琥珀酸盐、乙酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐(cinnamoate)、扁桃酸盐(mandeloate)、苄酸盐(benzyloate)和二苯基乙酸盐)。
使用本领域公知的标准技术可获得药学可接受的盐，例如通过用提供生理学可接受的阴离子的合适的酸与具有足够碱性的化合物(例如胺)反应。
药学可接受的“前药”指在宿主中代谢(例如水解或氧化)以形成本发明的化合物的化合物。前药的典型实例包括在所述活性化合物的官能团(fuctional moiety)上具有生物学不稳定的保护基的化合物。前药包括可以被氧化、还原、氨化、脱氨基化、羟基化、脱羟基化、水解、脱水、烷基化、脱烷基化、酰基化、脱酰基化、磷酸化、脱磷酸化以产生所述活性化合物的化合物。例如，合适的前药可以是被水解以形成酸的羧酸的酯或酰胺。前药的非限制性实例包括但不限于烷基或芳烷基酯或酰胺，包括甲基、乙基、丙基、苄基和取代苄基的酯或酰胺。前药还包括所述化合物的磷酸酯。
立体异构和多晶型
具有手性中心的本发明的化合物可存在旋光和外消旋形式，并以旋光和外消旋形式分离。本发明涵盖任何的外消旋、旋光、非对映异构、多晶型或立体异构形式的本发明的化合物或其混合物，其具有本文描述的有用性质。
在一个实施方案中，通过不对称合成，使用本文描述的方法或本领域技术人员已知的合成转化来制备旋光形式的化合物。
获得旋光材料的方法的实例在本领域已知，并且至少包括下述的：
i)晶体的物理分离——手工分离单个对映异构体的宏观晶体的技术。如果存在不同对映异构体的晶体，即所述材料是混合体(conglomerate)并且所述晶体在视觉上不同，可使用这一技术；
ii)同时结晶——单个对映异构体从外消旋物的溶液中分别结晶的技术，只有在外消旋物是固态的混合体时才可；
iii)酶法拆分——根据对映异构体与酶的不同反应速率来部分或完全分离外消旋物的技术；
iv)酶促不对称合成——合成的至少一个步骤使用酶促反应以获得期望的对映异构体的对映异构纯的或富集的合成前体的合成技术；
v)化学不对称合成——在产生产品的不对称性(即手性)的条件下从非手性前体合成期望的对映异构体的合成技术，其可通过使用手性催化剂或手性助剂实现；
vi)非对映异构体分离——外消旋化合物与对映异构纯的试剂(手性助剂)反应的技术，所述对映异构纯的试剂将单个对映异构体转化为非对映异构体。然后根据它们目前更加不同的结构差异，通过色谱或结晶进行分离得到的非对映异构体，并移除所述手性助剂以获得期望的对映异构体；
vii)一级和二级不对称转化——非对映异构体从外消旋物平衡产生在非对映异构体溶液中占优势的预期的对映异构体的技术，或预期对映异构体的非对映异构体的优先结晶破坏所述平衡以致最终基本上所有所述材料转化为预期对映异构体的结晶非对映异构体的技术。然后从所述非对映异构体中释放预期的对映异构体；
viii)动力学拆分——该技术指在动力学条件下根据所述对映异构体与手性非外消旋的试剂或催化剂的不等反应速率来实现对外消旋物部分或完全拆分(或被部分拆分的化合物的进一步拆分)；
ix)源于非外消旋前体的对映特异性(enantiospecific)合成——从非手性原料获得预期对映异构体并在所述合成过程中没有或仅很少地危及立体化学完整性的合成技术；
x)手性液相色谱法——由于对映异构体与固定相不同的相互作用，在液体流动相中分离外消旋物的对映异构体的技术。所述固定相可由手性材料制成或者所述流动相可含有额外的手性材料以驱使不同的相互作用；
xi)手性气相色谱法——挥发所述外消旋物，并由于在气体流动相中的对映异构体与含有不挥发的非外消旋的手性吸附相的柱的不同相互作用来分离对映异构体的技术；
xii)用手性溶剂萃取——根据一种对映异构体优先溶解在特定手性溶剂来分离所述对映异构体的技术；或者
xiii)跨手性膜转运——将外消旋物与薄膜屏障接触的技术。所述屏障通常分离两种混溶液体，一种含有外消旋物，并且驱动力(例如浓度或压力差)引起跨膜屏障的优先转运。发生分离是由于所述膜的非外消旋手性性质，其只允许外消旋物中的一种对映异构体通过。
定义
无论何时本说明书中的术语被确定为一个范围(即C1-4烷基)，所述范围独立地指所述范围的每个要素。作为非限制性实例，C1-4烷基独立地指C1、C2、C3或C4烷基。相似地，当一个或多个取代基被称为“独立地选自”时，这是指每个取代基可以是该组的任何要素，并且这些组的任何组合可从所述组分离。例如，如果R1和R2可独立地选自X、Y和Z，这分别包括以下组：R1是X且R2是X；R1是X且R2是Y；R1是X且R2是Z；R1是Y且R2是X；R1是Y且R2是Y；R1是Y且R2是Z；R1是Z且R2是X；R1是Z且R2是Y；以及R1是Z且R2是Z。
除非另有说明，如本文所用，术语“烷基”指饱和直链、支链或环状的伯、仲或叔烃，包括但不限于具有C1至C10的基团。
术语“低级烷基”指饱和直链、支链或环状的伯、仲或叔烃，包括具有C1至C4的基团和如果适当的环状烷基(例如环丙基)。
烷基的说明性实例是甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、环丁基、1-甲基丁基、1,1-二甲基丙基、戊基、环戊基、异戊基、新戊基、环戊基、己基、异己基和环己基。除非另有说明，所述烷基可以是未取代的或被选自一个或多个的基团取代，所述基团包括烷基、卤代、卤代烷基、羟基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、硫醇、亚胺、磺酸、硫酸酯、磺酰基、硫烷基、亚硫酰基、氨磺酰基(sulfamonyl)、酯、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷酰基、膦、硫酯、硫醚、卤化酰基、酐、肟、肼(hydrozine)、氨基甲酸酯、膦酸、磷酸酯、膦酸酯或不抑制所述化合物的药理学活性的任何其他可行的功能基团，其可按照需要未被保护或被保护，如本领域技术人员所知，例如Greene等人在Protective Groups in Organic Synthesis中所教导,John Wiley和Sons,第二版,1991。
如本文所用，术语“卤代”或“卤素”包括氯、溴、碘和氟。
如本文所用，术语“手性”包括具有与其镜像不可重叠的性质的化合物。
如本文所用，术语“互变异构体”指在本领域中被认为与描述的结构处于平衡的代替结构。例如下面的烯醇结构是酮结构的互变异构体，并且认为其与所述酮结构处于平衡。
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如本文所用，术语“溶剂合物”或“药学可接受的溶剂合物”是由一个或多个溶剂分子与式I、II、III、IV或V的任何一个化合物或表1中描述的化合物中的一个或多个分子缔合形成的溶剂合物。术语溶剂合物包括水合物(例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、四水合物以及类似的水合物)。
术语“烷硫基”指具有特定碳原子数目的直链或支链烷硫基化物，比如例如C1-4烷硫基、乙硫基、-S-烷基、-S-烯基、-S-炔基等等。
术语“烷基氨基”或“芳基氨基”指分别具有一个或两个烷基或芳基取代基的氨基。除非在本申请中另有具体陈述，当烷基为合适基团时，则它是低级烷基(无论是取代的还是未取代的)。
术语“烷基磺酰基”指具有特定碳原子数目的直链或支链烷基砜（alkylsulfone），例如C1-6烷基磺酰基或甲基磺酰基。
术语“烷氧羰基”指具有特定碳原子数目的羧酸衍生物的直链或支链酯，比如例如甲氧羰基，MeOCO-。
如本文所用，术语“硝基”表示-NO2；术语“巯基”表示-SH；且术语“磺酰基”表示-SO2。
术语“烯基”和“炔基”指其中至少一个饱和C-C键由双键或三键替代的烷基基团，包括取代和未取代的形式。因此C2-6的烯基可以是乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基或5-己烯基。相似地，C2-6炔基可以是乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、4-戊炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、4-己炔基或5-己炔基。
术语“亚烷基”包括式-(CH2)n-的饱和直链的二价烷基，其中“n”可以是从1到10的任何整数。
“烷基”、“烷氧基”、“烯基”、“炔基”等包括直链和支链的基团。然而，提及个别基团例如“丙基”时，仅包括直链基团，而支链异构体例如“异丙基”被这样特别定义。
如本文所用且除非另外指定，术语“芳基”指每个环中至多为8元的任何稳定的单环、双环或三环碳环，其中至少一个环是如休克尔4n+2法则定义的芳环且特别是苯基、联苯基或萘基。该术语包括取代和未取代的基团。所述芳基可被任何描述的基团取代，包括但不限于选自下述一个或多个基团：卤素(氟、氯、溴或碘)、羟基、氨基、叠氮基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯、膦酸、磷酸酯或膦酸酯，它们可按照需要被保护或未被保护，如本领域技术人员所知，例如Greene等人在Protective Groups in Organic Synthesis中所教导,John Wiley &Sons,第三版,1999。
术语“烷芳基”或“烷基芳基”指具有芳基取代基的烷基或通过如本文所定义的芳基连接到分子的烷基。术语“芳烷基”或“芳基烷基”指被烷基取代基取代的芳基或通过以上定义的烷基连接到分子的芳基。
术语“环烷基”包括C3-8的环，包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。
术语“烷氧基”指具有连接的氧基的直链或支链烷基，所述烷基具有特定数目或在该范围内的任意数目的碳原子。例如“-O-烷基”、C1-4烷氧基、甲氧基等。
术语“酰基”包括式C(O)R'的基团，其中R'是直链、支链或环状烷基(包括低级烷基)，氨基酸的羧酸酯残基(carboxylate residue、芳基(包括苯基)、杂芳基、烷芳基、芳烷基(包括苄基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)；或者取代的烷基(包括低级烷基)、芳基(包括被氯、溴、氟、碘、C1至C4烷基或C1至C4烷氧基任选取代的苯基)、磺酸酯(例如烷基或芳烷基磺酰基，包括甲磺酰基)、单、二或三磷酸酯、三苯甲基或单甲氧基-三苯甲基、取代苄基、烷芳基、芳烷基(包括苄基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)。芳基任选地包括苯基。在非限制性实施方案中，酰基包括乙酰基、三氟乙酰基、甲基乙酰基、环丙基乙酰基、环丙基-羧基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、己酰基、庚酰基辛酰基、新庚酰基、苯乙酰基、2-乙酰氧基-2-苯基乙酰基、二苯基乙酰基、α-甲氧基-α-三氟甲基-苯基乙酰基、溴乙酰基、2-硝基-苯乙酰基、4-氯-苯乙酰基、2-氯-2,2-二苯基乙酰基、2-氯-2-苯乙酰基、三甲基乙酰基、氯二氟乙酰基、全氟乙酰基、氟乙酰基、溴二氟乙酰基、甲氧基乙酰基、2-噻吩乙酰基（2-thiopheneacetyl）、氯磺酰基乙酰基、3-甲氧基苯基乙酰基、苯氧基乙酰基、叔丁基乙酰基、三氯乙酰基、单氯-乙酰基、二氯乙酰基、7H-十二氟-庚酰基、全氟-庚酰基、7H-十二-氟庚酰基、7-氯十二氟-庚酰基、7-氯-十二氟-庚酰基、7H-十二氟庚酰基、7H-十二-氟庚酰基、九-氟-3,6-二氧杂-庚酰基、九氟-3,6-二氧杂庚酰基、全氟庚酰基、甲氧基苯甲酰基、甲基3-氨基-5-苯基噻吩-2-羧基、3,6-二氯-2-甲氧基-苯甲酰基、4-(1,1,2,2-四氟-乙氧基)-苯甲酰基、2-溴-丙酰基、ω-氨基辛酰基、癸酰基、正戊癸酰基、硬脂酰、3-环戊基-丙酰基、1-苯-羧基、O-乙酰基扁桃酰基(O-acetylmandelyl)、特戊酰基乙酰基、1-金刚烷-羧基、环己烷-羧基、2,6-吡啶二羧基、环丙烷-羧基、环丁烷-羧基、全氟环己基羧基、4-甲基苯甲酰基、氯甲基异噁唑基羰基、全氟环己基羧基、巴豆酰、1-甲基-1H-吲唑-3-羰基、2-丙烯基、异戊酰基、1-吡咯烷羰基、4-苯基苯甲酰基。
术语“酰基氨基”包括具有“-N(R')-C(=O)-R'”结构的基团，其中每个R'独立地如上文定义。
术语“酯”包括结构“-C(=O)-O-R'”或“-O-C(=O)-R'”的基团，其中R'是直链、支链或环状烷基(包括低级烷基)、氨基酸的羧酸酯残基、芳基(包括苯基)、杂芳基、烷芳基、芳烷基(包括苄基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)；或者取代的烷基(包括低级烷基)、芳基(包括被氯、溴、氟、碘、C1至C4烷基或C1至C4烷氧基任选取代的苯基)、磺酸酯(例如烷基或芳烷基磺酰基，包括甲磺酰基)、单、二或三磷酸酯、三苯甲基或单甲氧基-三苯甲基、取代苄基、烷芳基、芳烷基(包括苄基)、烷氧基烷基(包括甲氧基甲基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)。芳基任选地包括苯基。
术语“杂原子”包括在杂环化合物的结构中碳或氢以外的原子，其非限制性实例是氮、氧、硫、磷或硼。
术语“羰基”或“包括结构“-C(=O)-X-R'”或“X-C(=O)-R'”的基团，其中X是O、S或键，且每个R独立地如上文对“酯”的定义。
如本文所用，术语“杂环”、“杂环基”或“杂环的”包括具有四到十四元(优选五到十)的非芳族环系统，其中一个或多个环碳原子(优选一到四个)各自被杂原子取代。杂环的实例包括3-1H-苯并咪唑-2-酮、(1-取代的)-2-氧代-苯并咪唑-3-基、2-四氢-呋喃基、3-四氢呋喃基、2-四氢吡喃基、3-四氢吡喃基、4-四-氢吡喃基、[1,3]-二氧杂环戊烷基([1,3]-dioxalanyl)、[1,3]-二硫环戊烷基（dithiolanyl）、[1,3]-二噁烷基、2-四-氢-噻吩基、3-四氢噻吩基、2-吗啉基、3-吗啉基、4-吗啉基、2-硫吗啉基、3-硫吗啉基、4-硫吗啉基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、4-噻唑烷基、diazolonyl、N-取代diazolonyl、1-苯并[c]吡咯酮基（1-phthalimidinyl）、苯并噁烷基(benzoxanyl)、苯并吡咯烷基、苯并哌啶基、苯并氧戊环烷基(benzoxolanyl)、苯并硫戊环烷基和苯并噻烷基(benzothianyl)。如本文所用，术语“杂环基”或“杂环的”的范围内还包括其中非芳族的含有杂原子的环稠合至一个或多个芳香或非芳香的环的基团，例如二氢吲哚基、苯并二氢吡喃基、菲啶基或四氢喹啉基，其中连接的基团或点在非芳族的含有杂原子的环上。无论是饱和的还是部分不饱和的，术语“杂环”、“杂环基”或“杂环的”还指被任选取代的环。
单独使用或作为如“杂芳烷基”或“杂芳基烷氧基”的较大基团的部分使用时，术语“杂芳基”指具有五到十四元的杂芳基环基团。杂芳基环的实例包括2-呋喃基、3-呋喃基、3-呋咱基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噁二唑基(2-oxadiazolyl)、5-噁二唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、1-吡唑基、2-吡唑基、3-吡唑基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-哒嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-四唑基、2-三唑基、5-三唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、吲唑基、异吲哚基、吖啶基和苯并异噁唑基。如本文所用，术语“杂芳基”的范围内还包括其中杂原子的环稠合至一个或多个芳族或非芳族的环的基团，其中连接的基团或点在杂芳香的环上。实例包括四氢喹啉基、四氢异喹啉基和吡啶并[3,4-d]嘧啶基。术语“杂芳基”还指被任选取代的环。术语“杂芳基”与术语“杂芳基环”或术语“杂芳族的(heteroaromatic)”可以互换使用。
如本文所用，除非另有说明，术语“氨基”包括由结构“-N(R)2”代表的基团，且包括被烷基、芳基、杂环基和/或磺酰基任选取代的伯、仲和叔胺。因此(R)2可代表两个氢原子、两个烷基基团或一个氢原子和一个烷基基团。
如本文所用，术语“酰氨基”包括氨基取代的羰基，而术语“脒基”指具有结构“-C(=NH)-NH2”的基团。
如本文所用，术语“季胺”包括具有正电荷的氮的季铵盐。它们通过所关注的化合物中的碱性氮原子与合适的季铵化剂(例如碘甲烷或苄基碘)之间的反应形成。伴随着季胺的合适的反离子包括乙酸离子、三氟乙酸离子、氯离子、溴离子和碘离子。
术语“取代的”包括一种或多种指定的取代基的多种程度的取代，所述取代基诸如卤代、羟基、硫代、烷基、烯基、炔基、硝基、氰基、叠氮基、氨基、酰胺基(carboxamido)等。在存在多种取代可能性的情况下，所述化合物由一个或多个公开的或要求保护的取代基取代，其相互独立，且采用一次或多次。
如本文所用且除非另外定义，术语“保护的”指加到氧、氮或磷原子以防止其进一步反应或为了其他目的的基团。许多氧和氮的保护基为有机合成领域的技术人员所知。
如本文所用，术语“保护基”指连接到反应基团(包括杂原子，例如氧或氮)从而防止所述反应基团参与反应的基团。可使用Greene等人,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley和Sons,第二版,1991中教导的任何保护基。合适保护基的实例包括但不限于烷氧基烷基，诸如乙氧基甲基和甲氧基甲基；甲硅烷基保护基，诸如叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)、苯基二甲基甲硅烷基、三甲基甲硅烷基(TMS)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)和2-三甲基甲硅烷基乙基；以及苄基和取代苄基。
要理解，除非另外指定，以上和本文中提及的基团的各种可能立体异构体在单个术语和实例的含义的范围内。作为说明性实例，“1-甲基-丁基”存在(R)和(S)的形式，因此除非另外指定，(R)-1-甲基-丁基和(S)-1-甲基-丁基被术语“1-甲基-丁基”涵盖。
术语“患者”包括人类和兽医学的个体。
“有效量”是当向患者给药所述化合物时达到有益结果的化合物的量或可选地具有预期的体内或体外活性的化合物的量。在增殖性病症的情况下，有益的临床结果包括与疾病或病症相关的症状的程度上的减少或严重性的降低，和/或与缺少所述治疗相比，患者的寿命和/或生活质量的提高。例如，对于患有癌症的个体，“有益的临床结果”包括肿瘤质量的减小、肿瘤生长速率的减少、转移的减少、与癌症相关的症状的严重性的降低和/或与缺少所述治疗相比，个体的寿命的增加。向个体给药的化合物的精确量将依赖于疾病或疾患的类型和严重性以及患者的特征，例如一般健康、年龄、性别、体重和对药物的耐受性。其还会依赖于增殖性病症的程度、严重性和类型。技术人员将能够根据这些和其他因素确定合适的剂量。
如本文所用，术语“激酶抑制量”指与对照相比，抑制激酶的所述化合物的量(按照本文描述的方法测试)。
如本文所用，术语“HSP90-抑制量”指与对照相比，抑制HSP90的所述化合物的量(按照本文描述的方法测试)。
如本文所用，术语“生物样品”包括但不限于细胞培养物或其提取物；适于体外测定的酶制品；获自哺乳动物的活组织检查材料或其提取物；以及血液、唾液、尿、粪便、精液、泪液或其他体液或它们的提取物。
术语“癌症”包括但不限于实体瘤和血源性肿瘤并且包括但不限于以下癌症：乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、胶质母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓样病症、淋巴样病症、霍奇金氏病、毛细胞、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症以及白血病。术语“癌症”包括原发性癌症、治疗继发性癌症和转移癌症。
术语“药学可接受的载体”指可与本发明的化合物一起向患者给药并且不破坏其药理学活性的无毒载体、佐剂或媒介物(vehicle)。
如本文所用，术语“GSK-3介导的疾病”或“GSK-3介导的疾患”表示其中已知GSK-3起作用的任何疾病或其他有害的疾患或状态。此类疾病或疾患包括但不限于糖尿病、阿尔茨海默病、亨廷顿病、帕金森病、AIDS-相关的痴呆、肌萎缩性侧索硬化(AML)、多发性硬化(MS)、精神分裂症、心肌细胞肥大(cardiomycete hypertrophy)、再灌注/缺血和脱发。
如本文所用，术语“CDK-2介导的疾病”或“CDK-2介导的疾患”指其中已知CDK-2起作用的任何疾病或其他有害的疾患。术语“CDK-2介导的疾病”或“CDK-2介导的疾患”还指通过用CDK-2抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。此类疾患包括但不限于癌症、阿尔茨海默病、再狭窄、血管发生、肾小球性肾炎、巨细胞病毒、HIV、疱疹、银屑病、动脉粥样硬化、脱发和自身免疫疾病例如类风湿性关节炎，诸如描述于例如Fischer,P.M.和Lane,D.P.,Current Medicinal Chemistry,7,1213-1245(2000);Mani,S.,Wang,C,Wu,K.,Francis,R.和Pestell,R.,Exp.Opin.Invest.Drugs,9,1849(2000);Fry,D.W.和Garrett,M.D.,Current Opinion in Oncologic,Endocrine&Metabolic Investigational Drugs,2,40-59(2000)。
如本文所用，术语“ERK介导的疾病”或“ERK介导的疾患”指其中ERK可能起作用的任何疾病或其他有害的疾患。术语“ERK-2介导的疾病”或“ERK-2介导的疾患”还指通过用ERK-2抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。此类疾患包括但不限于癌症、中风、糖尿病、肝肿大、心血管疾病(包括心肥大)、阿尔茨海默病、囊性纤维化、病毒性疾病、自身免疫疾病、动脉粥样硬化、再狭窄、银屑病、过敏性病症(包括哮喘)、炎症、神经学的病症和激素相关的疾病。ERK-2蛋白激酶及其在多种疾病中的牵连已被描述于例如Bokemeyer等人，1996,Kidney Int.49,1187;Anderson等人,1990,Nature343,651;Crews等人,1992,Science258,478;Bjorbaek等人,1995,J.Biol.Chem.270,18848;Rouse等人,1994,Cell78,1027;Raingeaud等人,1996,Mol.Cell Biol.16,1247;Raingeaud等人，1996;Chen等人,1993Proc.Natl.Acad.Sci.USA90,10952;Oliver等人，1995，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.210,162;Moodie等人,1993,Science260,1658;Frey和Mulder,1997,Cancer Res.57,628;Sivaraman等人,1997,J Clin.Invest.99,1478;Whelchel等人,1997,Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.16,589。
如本文所用，术语“AKT介导的疾病”或“AKT介导的疾患”指其中已知AKT起作用的任何疾病或其他有害的疾患。术语“AKT介导的疾病”或“AKT介导的疾患”还指通过用AKT抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。AKT介导的疾病或疾患包括但不限于增殖性病症、癌症和神经变性病症。AKT(也称为蛋白激酶B)与多种疾病的关联已被描述于例如Khwaja,A.,Nature,第33-34页,1990;Zang,Q.Y.等人,Oncogene,192000;Kazuhiko,N.等人,The Journal of Neuroscience,202000。
如本文所用，术语“Src介导的疾病”或“Src介导的疾患”指其中已知Src起作用的任何疾病或其他有害的疾患。术语“Src介导的疾病”或“Src介导的疾患”还指通过用Src抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。此类疾患包括但不限于高钙血症、骨质疏松症、骨关节炎、癌症、骨转移的对症治疗和佩吉特病。Src蛋白激酶和其在多种疾病中的牵连已被描述于例如Soriano,Cell,69,551(1992);Soriano等人,Cell,64,693(1991);Takayanagi,J.Clin.Invest.,104,137(1999);Boschelli,Drugs of the Future 2000,25(7),717,(2000);Talamonti,J.Clin.Invest.,91,53(1993);Lutz,Biochem.Biophys.Res.243,503(1998);Rosen,J.Biol.Chem.,261,13754(1986);Bolen,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,84,2251(1987);Masaki,Hepatology,27,1257(1998);Biscardi,Adv.Cancer Res.,76,61(1999);Lynch,Leukemia,7,1416(1993);Wiener,Clin.Cancer Res.,5,2164(1999);Staley,Cell Growth Diff.,8,269(1997)。
如本文所用，术语“Lck介导的疾病”或“Lck介导的疾患”指其中已知Lck起作用的任何疾病状态或其他有害的疾患。术语“Lck介导的疾病”或“Lck介导的疾患”还指通过用Lck抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。Lck介导的疾病或疾患包括但不限于自身免疫疾病例如移植排斥、变态反应、类风湿性关节炎和白血病。Lck与多种疾病的关联已被描述于例如Molina等人,Nature,357,161(1992)。
如本文所用，术语“Abl介导的疾病”或“Abl介导的疾患”指其中已知Abl起作用的任何疾病状态或其他有害的疾患。术语“Abl介导的疾病”或“Abl介导的疾患”还指通过用Abl抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。Abl介导的疾病或疾患包括但不限于白血病，特别是慢性骨髓性白血病。Abl与多种疾病的关联已被描述于例如Druker等人,N.Engl J.Med.2001,344,1038-1042。
如本文所用，术语“cKit介导的疾病”或“cKit介导的疾患”指其中已知cKit起作用的任何疾病状态或其他有害的疾患。术语“cKit介导的疾病”或“cKit介导的疾患”还指通过用cKit抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。cKit介导的疾病或疾患包括但不限于肥大细胞增多症/肥大细胞白血病、胃肠基质瘤、鼻窦自然杀伤细胞/T细胞淋巴瘤、精原细胞瘤/无性细胞瘤、甲状腺癌(throid carcinoma)、小细胞肺癌、恶性黑素瘤、腺样囊性癌、卵巢癌、急性骨髓性白血病、退行性（anaplastic）大细胞淋巴瘤、血管肉瘤、子宫内膜癌、小儿T细胞急性淋巴细胞白血病/淋巴瘤、乳腺癌和前列腺癌。cKit与多种疾病的关联已被描述于例如Heinrich等人,J.ClinicalOncology 2002,20,1692-1703。
如本文所用，术语“Flt3介导的疾病”或“Flt3介导的疾患”指其中已知Flt3起作用的任何疾病状态或其他有害的疾患。术语“Flt3介导的疾病”或“Flt3介导的疾患”还指通过用Flt3抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。Flt3介导的疾病或疾患包括但不限于急性骨髓性白血病、混合谱系白血病和急性淋巴细胞性白血病。Flt3与多种疾病的关联已被描述于例如Sternberg和Licht,Curr.Opin Hematol.2004,12,7-13。
如本文所用，术语“KDR介导的疾病”或“KDR介导的疾患”指其中已知KDR起作用的任何疾病状态或其他有害的疾患。术语“KDR介导的疾病”或“KDR介导的疾患”还指通过用KDR抑制剂治疗而缓解的那些疾病或疾患。KDR介导的疾病或疾患包括但不限于肺癌、乳腺癌、胃肠道癌、肾癌、膀胱癌、卵巢癌和子宫内膜癌、颅内肿瘤包括(包括多形性胶质母细胞瘤(glioblatoma multiforme))、偶发性毛细血管成血管细胞瘤(sporadiccapillary hemangioblastoma)、血液系统恶性肿瘤(hematological malignancies)(包括T细胞淋巴瘤、急性成淋巴细胞性白血病、Burkitt淋巴瘤和早幼粒细胞性白血病)、老年性黄斑变性、疱疹性眼病、类风湿性关节炎、脑缺血和子宫内膜异位。KDR与多种疾病的关联已被描述于例如Ferrara,Endocrine Reviews2004,25,581-611。
如本文所用，术语“HSP90介导的疾病”或“HSP90介导的疾患”指其中已知HSP90起作用的疾患。所述疾患包括但不限于炎性病症、异常细胞增殖、自身免疫病症、局部缺血、纤维发生（fibrogenetic）病症(包括但不限于硬皮病、多肌炎、系统性狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、瘢痕形成、间质性肾炎和肺纤维化)。(Strehlow,WO 02/02123;PCT/US01/20578)。
治疗方法
本文描述的化合物特别用于治疗或预防激酶介导的或HSP90介导的病症。在一个实施方案中，本文描述的化合物用于治疗或预防增殖性病症，包括癌症转移。在另一实施方案中，本文描述的化合物用于治疗或预防与激酶或HSP90有关的炎性病症。
本发明的一个方面涉及用于治疗癌症的化合物和组合物。
本发明的另一方面涉及治疗以下癌症：乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、胶质母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓样病症、淋巴样病症、霍奇金氏病、毛细胞、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症以及白血病。
本发明的另一方面是治疗癌症的方法，其包括向患有癌症的患者给药有效量的本文描述的式I、II、III、IV或V的化合物。
血管发生的特征为内皮细胞增殖从而形成新血管(通常称为新血管形成)。抑制内皮细胞有丝分裂导致抑制血管发生。因此本发明的另一方面涉及抑制不期望的有丝分裂，包括不期望的血管发生。如本文定义，以不期望的细胞有丝分裂为特征的哺乳动物疾病包括但不限于内皮细胞的过度或异常刺激(例如动脉粥样硬化)、实体瘤和肿瘤转移、良性肿瘤(例如血管瘤)、沙眼和化脓性肉芽肿、血管功能障碍、异常的伤口愈合、炎性和免疫病症、白塞病、痛风或痛风性关节炎、伴随异常的血管发生的类风湿性关节炎、皮肤疾病(例如银屑病)、糖尿病性视网膜病变和其他眼部血管发生疾病，例如早产儿视网膜病(晶状体后纤维增生症)、黄斑变性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奥-韦综合征(Osler-Weber-Rendu病)。
其他非预期的血管发生包括包含排卵和囊胚植入的正常过程。以上描述的组合物可用作节育剂，其减少或防止胚胎植入所需的子宫血管形成。因此，以上描述的组合物可用于阻断排卵和囊胚的植入或阻断月经(诱导闭经)。
根据本发明，可治疗与不期望的有丝分裂相关的疾病，包括新血管形成。这样的疾病包括但不限于眼新生血管性疾病、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼和晶状体后纤维增生症、流行性角膜结膜炎、维生素A缺乏病、接触镜超带症、异位性角膜炎、上角膜缘角结膜炎、翼状胬肉干燥性角膜炎、干燥综合征、红斑痤疮、小水疱病、梅毒、分枝杆菌感染、脂质变性、化学烧伤、细菌性溃疡、真菌性溃疡、单纯疱疹感染、带状疱疹感染、原虫感染、卡波西肉瘤、莫伦溃疡、Terrien边缘角膜变性、边缘性角质层分离、创伤、类风湿性关节炎、系统性狼疮、多动脉炎、韦格内结节病、巩膜炎、多型糜烂性红斑综合征、类天疱疮、放射状角膜切开术和角膜移植排斥。
根据本发明，可治疗与不期望的有丝分裂相关的其他疾病，包括新血管形成。这样的疾病包括但不限于镰状细胞贫血、结节病、弹性假黄色瘤、佩吉特病、静脉阻塞、动脉阻塞、颈动脉阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃体炎、莱姆病、系统性红斑狼疮、伊尔斯病、白塞病、引起视网膜炎或脉络膜炎的感染、眼假组织胞浆菌病、贝斯特病、近视、视窝、斯塔加特病、睫状体扁平部炎、慢性视网膜脱离、高粘滞综合征、弓形体病或激光后并发症。其他疾病包括但不限于与发红相关的疾病(虹膜和角的新血管形成)和由纤维血管或纤维组织的异常增殖引起的疾病，包括所有形式的增殖性玻璃体视网膜病，无论是否与糖尿病相关。
本发明的另一方面涉及治疗炎性疾病，包括但不限于内皮细胞的过度的或异常的刺激(例如动脉粥样硬化)、实体瘤和肿瘤转移、良性肿瘤(例如血管瘤、听神经瘤)、沙眼和化脓性肉芽肿、血管功能障碍、异常的伤口愈合、炎性和免疫病症、白塞病、痛风或痛风性关节炎、伴随异常的血管发生的类风湿性关节炎、皮肤疾病(例如银屑病)、糖尿病性视网膜病变和其他眼部血管发生疾病，例如早产儿视网膜病(晶状体后纤维增生症)、黄斑变性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奥-韦综合征(Osler-Weber-Rendu病)。其他不期望的血管发生包括包含排卵和囊胚植入的正常过程。因此，以上描述的组合物可用于阻断排卵和囊胚的植入或阻断月经(诱导闭经)。
本发明的另一方面涉及在患者中抑制HSP90活性的方法，其包括向患者给药有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药学可接受的盐或前药。本发明还提供治疗由HSP90介导的疾病的方法。
本发明的另一方面涉及在患者中抑制Aurora A活性的方法，其包括向患者给药有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药学可接受的盐或前药。
本发明的另一方面涉及用GSK-3抑制剂治疗或预防GSK-3介导的疾病的方法，其包括向患者给药有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药学可接受的盐或前药。
本发明的一个方面涉及在需要其的患者中增强糖原合成和/或降低葡萄糖的血液水平的方法，所述方法包括向所述患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。此方法特别用于糖尿病患者。另一方法涉及抑制过度磷酸化的Tau蛋白的产生，其用于中止或延缓阿尔茨海默病的进程。另一方法涉及抑制β-连环蛋白的磷酸化，其用于治疗精神分裂症。
本发明的另一方面涉及在生物样品中抑制GSK-3的活性，所述方法包括使式I、II、III、IV或V的GSK-3抑制剂接触生物样品。
本发明的另一方面涉及在患者中抑制GSK-3活性的方法，其包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防CDK-2介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制CDK-2活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防ERK-2介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制ERK-2活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防AKT介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制AKT活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防Src介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制Src活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及用Lck抑制剂治疗或预防Lck介导的疾病的方法，所述方法包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制Lck活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及用Abl抑制剂治疗或预防Abl介导的疾病的方法，所述方法包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制Abl活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防cKit介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制cKit活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防Flt3介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制Flt3活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
本发明的另一方面涉及治疗或预防KDR介导的疾病的方法，其包括向需要此类治疗的患者给药治疗有效量的式I、II、III、IV或V的化合物或其药物组合物。
本发明的另一方面涉及在生物样品或患者中抑制KDR活性，所述方法包括向所述患者给药式I、II、III、IV或V的化合物或包含所述化合物的组合物。
有效抑制蛋白激酶的量是当与缺少抑制剂时的酶活性比较时，引起对所述激酶活性可测量的抑制的量。任何方法均可用于确定抑制，例如下文描述的生物测试实施例。
药物组合物
通过吸入、全身、口服、局部或经皮给药含有有效量的本文描述的化合物或其药学可接受的盐、酯或前药(任选地在药学可接受的载体或稀释剂中)的组合物，可治疗受呼吸病症困扰的哺乳动物，且特别是人类。
所述化合物或组合物通常通过口服或吸入给药来给药。可选地，在有效剂量范围可由皮下、静脉内、腹膜内、肌内、肠胃外、口服、粘膜下、通过吸入、经由缓释药贴经皮、或局部给药化合物来治疗目标疾患。
通过使用常规技术并通过观察类似情况下获得的结果，可容易地确定有效剂量。在确定有效剂量时，考虑了许多因素，包括但不限于：患者的物种；其大小、年龄和一般健康；涉及的具体疾病；所述疾病的牵连程度或其严重性；单个患者的响应；所给药的特定化合物；给药方式；所给药的制剂的生物利用度特征；所选的剂量方案；和伴随药物(concomitantmedication)的使用。
在一个单独的实施方案中，本发明的化合物是吸入的剂量形式。在此实施方案中，所述化合物可以是气溶胶悬浮液、干燥粉末或液体颗粒的形式。可将所述化合物制备成鼻喷雾剂递送或可将其制备于吸入器中，例如计量剂量的吸入器。加压的计量剂量的吸入器(“MDI”)通常递送烟雾化(aerosolized)的颗粒，所述颗粒与或不与表面活性剂和合适的桥键形成剂(bridging agent)一起悬浮于含氯氟烃推进剂(例如CFC-11、CFC-12)或非含氯氟烃或替代的推进剂(例如氟烃、HFC-134A或HFC-227)。还可使用干粉吸入器，不论是呼吸启动的或通过空气或气体压力递送的，例如公开于1993年1月7日公布的Schering公司的国际专利申请PCT/US92/05225中的干粉吸入器以及TurbuhalerTM(获自Astra Pharmaceutical Products，Inc.)或RotahalerTM(获自Allen & Hanburys)，其可用于递送烟雾化的颗粒，所述颗粒为单独的大聚集体(aggregates)细微研磨粉末或其与一些药学可接受的载体(例如乳糖)的组合；以及雾化器。
通过使用泵式喷瓶，还可按具体测量量的含水悬浮液的形式给药本发明的化合物。本发明的含水悬浮液组合物可通过将所述化合物与水和其他药学可接受的赋形剂混合来制备。依据本发明的含水悬浮液组合物其中可含有水、辅料和/或一种或多种赋形剂，例如：助悬剂，例如微晶纤维素、羧甲基纤维素纳、羟丙基(hydroxpropyl)-甲基纤维素；湿润剂，例如甘油和丙二醇；调节pH的酸、碱或缓冲物质，例如柠檬酸、柠檬酸钠、磷酸、磷酸钠以及柠檬酸盐和磷酸盐缓冲剂的混合物；表面活性剂，例如聚山梨酯80；和抗微生物的防腐剂，例如苯扎氯胺、苯基乙醇和山梨酸钾。
对于本文描述的所有情况，典型全身剂量的范围是每天0.01mg/kg到1500mg/kg体重，其作为单次日剂量或分开的日剂量。对于描述的情况，优选的剂量范围为每天0.5-1500mg。对于预期的情况，更特别优选的剂量范围为每天5-750mg。典型剂量范围还可以为0.01到1500、0.02到1000、0.2到500、0.02到200、0.05到100、0.05到50、0.075到50、0.1到50、0.5到50、1到50、2到50、5到50、10到50、25到50、25到75、25到100、100到150或150或更多mg/kg/天，其作为单次日剂量或分开的日剂量。在一个实施方案中，以约1至约5、约5至约10、约10至约25或约25至约50mg/kg之间的剂量提供化合物。用于局部应用的典型剂量范围为按活性化合物的重量计从0.001至100%。
所述化合物可以任何合适的剂量形式单位方便地给药，包括但不限于含有每单位剂量形式从约7至3000mg、从约70到1400mg或从约25至1000mg活性成分的剂量形式单位。例如，通常方便的口服剂量从约50至1000mg，包括以50、100、200、250、300、400、500、600、700、800、900或1000mg的一种或多种剂量形式。优选较低的剂量，例如从约10-100或1-50mg。还包含0.1-50mg、0.1-20mg或0.1-10mg的剂量。此外，在通过非口服途径给药(例如通过注射或吸入)的实例中，可应用较低的剂量。
给药所述化合物足够的时间周期以改善与所治疗的疾患相关的不期望的症状和临床体征。
活性化合物以足以在没有严重毒性效应下将体内治疗量的化合物递送给患者的量包含于药学可接受的载体或稀释剂中。可用于这些药物组合物的药学可接受的载体通常为本领域所知。它们包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、溶剂、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸盐)、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、油、聚乙烯-聚氧基丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。药学可接受的媒介物可包含多于一种赋形剂的混合物，其中可选择组分和比率从而优化制剂的预期特征，包括但不限于储存期、稳定性、药物装载、递送部位、溶出度、自乳化、释放速率和释放部位的控制以及代谢。
通过本领域已知的多种技术可制备制剂。制剂技术的实例可参见文献出版物和教科书，例如“Water-insoluble drug formulation”，Rong Liu编辑，2000，Interpharm Press。
如果静脉内给药，载体可以是生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，NJ)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。本发明的无菌可注射形式的组合物可以是水或油的悬浮液。根据本领域已知的技术，使用合适的分散剂或润湿剂和助悬剂可配制这些悬浮液。所述无菌可注射制品还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1,3-丁二醇的溶液。可使用的属于可接受的媒介物和溶剂是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌不挥发油方便地用作溶剂或助悬介质。为此目的，可使用任何温和的不挥发油，包括合成的单酸甘油酯或甘油二酯。脂肪酸(例如油酸)和其甘油酯衍生物用于制备可注射制剂，由于其为天然药学可接受的油，例如橄榄油或蓖麻油，特别是它们的聚氧乙基化的形式。这些油溶液或悬浮液还可包含长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或相似的分散剂，其通常用于药学可接受的剂量形式(包括乳剂和混悬剂)的配制。还可为了制剂而使用其他通常使用的表面活性剂(例如吐温、司盘和其他的表面活性乳化剂)或者通常用于药学可接受的固体、液体或其他剂量形式的制备的生物利用度增强剂。
药物组合物中活性化合物的浓度依赖于药物的吸收、失活和排泄的速率以及本领域技术人员所知的其他因素。应注意，剂量值还将依据待改善的疾患的严重性而变化。应进一步了解，对于任何特定的个体，应根据个体的需要以及管理或监督组合物给药的人的专业判断，随时调整具体的剂量方案，并且本文所述的剂量范围仅为示例并且无意限制要求保护的组合物的范围或实践。所述活性成分可一次给药或可分为多个较小剂量以变化的时间间隔给药。
口服是用于全身递送的给药所述活性化合物的一种模式。口服组合物通常会包括惰性稀释剂或可食用的载体。它们可密封于明胶胶囊剂中或压制成片剂。为了口服治疗给药，可将所述活性化合物与赋形剂掺在一起，并用于片剂、锭剂或胶囊剂的形式。可包含药学相容的粘合剂和/或辅剂材料作为组合物的部分。
片剂、丸剂、胶囊剂、锭剂以及类似剂型可含有任何以下的成分或相似性质的化合物：粘合剂，例如微晶纤维素、黄蓍树胶或明胶；赋形剂，例如淀粉或乳糖；崩解剂，例如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，例如硬脂酸镁或Sterotes；助流剂，例如胶体二氧化硅；甜味剂，例如蔗糖或糖精；或者矫味剂，例如薄荷、水杨酸甲酯或橘子香料(orangeflavoring)。
当剂量单位形式是胶囊剂时，除了以上类型的材料，其还可含有液体载体，例如脂肪油。此外，剂量单位形式可含有改良剂量单位的物理形式的多种其他的材料，例如糖包衣、紫胶或其他的肠溶剂。
所述化合物或其盐可作为酏剂、混悬剂、糖浆剂、糯米纸囊剂(wafer)、口香糖或类似药剂的组分来给药。除所述活性化合物以外，糖浆还可含有作为甜味剂的蔗糖和某些防腐剂、染料和着色剂和矫味剂。
在优选的实施方案中，所述活性化合物与载体一起制备，所述载体会保护所述化合物免于从体内快速消除，例如控释制剂，包括植入剂和微胶囊化递送系统。可使用可生物降解的、生物相容的聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯和聚乳酸。制备这样的制剂的方法对本领域技术人员是明显的。所述材料还可从Alza Corporation和Nova Pharmaceuticals，Inc商购。还优选脂质体悬浮液(包括靶向用病毒抗原的单克隆抗体感染的细胞的脂质体)作为药学可接受的载体。这些可根据本领域技术人员已知的方法制备，例如参见美国专利4,522,811(其通过整体引用在此并入)。例如，脂质体制剂可如下制备：将合适的脂质(例如硬脂酰磷脂酰乙醇胺、硬脂酰磷脂酰胆碱、arachadoyl磷脂酰胆碱(arachadoylphosphatidyl choline)和胆固醇)溶解于无机溶剂，然后蒸发所述无机溶剂，在容器表面上留下干燥脂质的薄膜。然后将所述化合物的水溶液引入容器。然后手动旋转所述容器从而使脂质材料离开所述容器的边缘并且分散脂质聚集体(lipid aggregates)，由此形成脂质体悬浮液。
局部应用的合适的媒介物或载体可通过常规技术制备，例如应用于直肠、阴道、鼻或口腔粘膜的洗剂、混悬剂、软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、酊剂、喷雾剂、散剂、糊剂、缓释透皮药贴、栓剂。除了以上列举的用于全身施用的其他材料外，可使用增稠剂、软化剂和稳定剂制备局部用组合物。增稠剂的实例包括凡士林、蜂蜡、黄原胶或聚乙烯，湿润剂诸如山梨醇、软化剂诸如矿物油、羊毛脂和其衍生物或角鲨烯。
组合治疗
所述化合物还可与不损害预期作用的其他活性材料或与添加预期作用的材料混合。所述活性化合物可与用于治疗由激酶或HSP90介导的病症的其他药物联合(即组合或交替)给药。
所述化合物可与通常用于治疗或预防哮喘的药物(例如某些抗炎药物和支气管扩张剂)组合或交替给药。皮质甾类(吸入的和口服的)、肥大细胞稳定剂和白三烯调节药物通常是对患有哮喘的人有用的抗炎药物。这些药物减少气道的肿胀和粘液产生。支气管扩张剂通常通过松驰紧环气道的肌肉带缓解哮喘的症状。该作用迅速打开气道，使更多的空气进入和离开肺。支气管扩张剂还帮助清除来自肺的粘液。
通常使用的化合物包括吸入的皮质甾类，其预防而不是缓解症状。吸入的皮质甾类包括：Advair(包括皮质甾类(氟替卡松)加上长期作用的支气管扩张药物(在该实例中是β-2肾上腺素能受体激动剂，沙美特罗)的组合药物)、aerobid(氟尼缩松)、曲安奈德(azmacort)(曲安西龙)、flovent(氟替卡松)、甲泼尼龙、强的松、普米克(pulmicort)或施立稳(serevent diskus)(沙美特罗粉末)、茶碱、qvar和xopenex(左旋沙丁胺醇)。吸入的皮质甾类有三种形式：计量剂量的吸入器(MDI)、干粉吸入器(DPI)和喷雾器溶液。系统性类固醇包括：甲泼尼龙(Medrol，Methylpred，Solu-Medrol)、强的松(去氢可的松)和泼尼松龙(Prelone，Pediapred，Orapred)。肥大细胞稳定剂包括色甘酸钠(Intal)和尼多米钠(Tilade)，其通过防止刺激和炎性物质从肥大细胞释放而起作用。白三烯调节剂包括安可来(accolade)和顺尔宁(singular)和安可来(扎鲁司特)、顺尔宁(孟鲁司特)和zyflo(齐留通)。
所述化合物可与非甾类抗炎剂(例如布洛芬、吲哚美辛、非诺洛芬、甲灭酸、氟灭酸、舒林酸)组合给药。所述化合物还可与皮质甾类一起给药。用于组合或交替治疗的本文描述的任何化合物可作为任何前药给药，当向接受者给药时，所述前药能够直接或间接提供所述母体化合物。非限制性实例是药学可接受的盐(可选地称为“生理学可接受的盐”)和在合适位置上烷基化或酰基化的化合物。改性可实现所述化合物的生物活性，在一些情况下增加所述活性使之超越母体化合物。
化合物的制备方法
涉及合成pochonin D和pochonin A的模块化合成方法适合于合成超出天然二羟基苯甲酸酯(resorcylides)范围的二羟基苯甲酸内酯库。开发的合成利用树脂辅助的或固相合成从而最简化并促进中间体和最终产物的分离。首先，提供了涉及天然二羟基苯甲酸(resorsylic acid)内酯合成路线的说明，随后是化合物的库的合成。
本文使用以下缩写。
Ac              乙酰基(CH3C=O)
ADP             二磷酸腺苷
AIBN            偶氮二(异丁腈)
All             烯丙基
ATP             三磷酸腺苷
BER             硼氢化物交换树脂
BBN             硼杂双环壬烷
Bn              苄基
Bz              苯甲酰基
CAN             硝酸高铈铵
CSA             樟脑磺酸
δ              化学位移(NMR)
dba             二亚苄基丙酮
DBU             1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯
DDQ             2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌
DEAD            偶氮二羧酸二乙酯
DIAD            偶氮二羧酸二异丙酯
d.e.            非对映异构体过量
DET             酒石酸二乙酯
DHP             二氢吡喃
DIBAL或Dibal-H  二异丁基氢化铝
DIC             N,N'-二异丙基碳二亚胺
DMAP            4-二甲基氨基吡啶
DMDO            二甲基二环氧乙烷
DMF             二甲基甲酰胺
DMPI            戴斯-马丁试剂(Dess-Martin periodinane)
DMSO            二甲基亚砜
DNA             脱氧核糖核酸
dppe            1,2-双(二苯基膦基)乙烷
EC50            获得50%体内最大效应所需的血浆浓度
EDC             盐酸1-乙基-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺
EDTA            乙二胺四乙酸
e.e.            对映异构体过量
EOM             乙氧甲基(CH3CH2OCH2-)
FDA             食品与药品管理局
Fmoc            9-芴基甲氧羰基
GI50            50%抑制细胞生长所需浓度
Grubbs'II       Grubbs'第二代催化剂：(钌[1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-亚咪唑啉基)二氯(苯基亚甲基)(三环己基磷烷)
                 
Figure BDA0000381115570000861
HFIP            六氟异丙醇
HMDS            六甲基二硅胺(hexamethyldisilazide)
HMPA            六甲基磷酸三酰胺
HOBT            N-羟基苯并三唑
HPLC            高效液相色谱(high performance chromatography)
HRMS            高分辨质谱
HSP90           热休克蛋白90
Hunig碱         二异丙基乙胺
IC50            体外50%抑制所需的药物浓度
imid.           咪唑
Ipc2BH          双-异松樟脑酰基硼烷
J               偶合常数
KHMDS           六甲基二硅基氨基钾(Potassiumhexamethyldisilylamide)
L.C.            液相色谱
LDA             二异丙基氨基锂
LiHMDS         六甲基二硅基氨基锂(LiN(SiMe3)2)
μM            微摩尔浓度(μmol.l-1)
MAP            促分裂原活化蛋白
mCPBA          间氯过氧苯甲酸
MOM            甲氧甲基(CH3OCH2-)
mRNA           信使核糖核酸
M.S.           质谱
NaHMDS         六甲基二硅基氨基钠
NMR            核磁共振
NMM            N-甲基吗啉
NMO            N-甲基吗啉-N-氧化物
NOE(SY)        核奥弗豪泽效应
PCC            氯铬酸吡啶鎓
PDC            重铬酸吡啶鎓
PG             保护基
PMB            对甲氧苄基
PNA            肽核酸
Piv            特戊酰基
PS-            聚合物支持
PS-TBD         (1,5,7)-三氮杂-二环并[4.4.0]十二-5-烯-7-甲基聚苯乙烯
Pyr或Py        吡啶
rac            外消旋
RAL            二羟基苯甲酸内酯
RCM            闭环复分解(metathesis)
RedAl          双(甲氧乙氧基)氢化铝钠
Rf             保留因子
RNA            核糖核酸
RT             室温
SAE            夏普勒斯不对称环氧化反应
SAR            构效关系
SEM            2-三甲基甲硅烷基乙氧甲氧基
TBAF           氟化四正丁铵
TBAI           碘化四正丁铵
TBDPS          叔丁基二苯基甲硅烷基
TBHP           过氧叔丁醇
TBS            叔丁基二甲基甲硅烷基
Teoc           2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基
Tf             三氟甲基磺酸酯(CF3SO3)(triflate)
TFA            三氟乙酸
TFAA           三氟乙酸乙酸酐
THF            四氢呋喃
THP            四氢吡喃
TLC            薄层色谱
TMS            三甲基甲硅烷基
Ts             甲苯磺酰基(p-CH3C6H4SO2)
p-TSOH         对甲苯磺酸
I.Pochonin D的合成
初步研究
描述合成策略的pochonin D(2-85)的逆合成分割(retrosyntheticdisconnection)如下所示。三信酯化(Mitsunobu esterification)、酰化和闭环复分解显示为主要的分割，其使用三个结构单元：酸2-87、醇(S)-2-27和Weinreb酰胺2-88。
基于根赤壳菌素和pochonin C合成的pochonin D的逆合成分析
Weinreb酰胺部分2-88按路线1所示合成。因此，用5-碘-1-戊烯将中间体2-7烷基化从苯硫酚两步产生Weinreb酰胺2-88。
Figure BDA0000381115570000891
最佳条件：X=I，-78℃LDA30分钟，-78℃HMPA30分钟，o.n.室温
路线1：第一代Weinreb酰胺的合成
a)苯硫酚(1.0当量)，K2CO3(1.0当量)，DMF，23℃；2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.0当量)，23℃，4h，95%；b)LDA(2.0当量)，HMPA(2.0当量)，5-碘-1-戊烯(2.0当量)，-78→23℃，13h，30%。
同时，开发了替代的合成路线，其起始于可商购的顺式-6-壬烯-1-醇(路线2)。
Figure BDA0000381115570000892
路线2：第二代Weinreb酰胺的合成
a)PDC(2.0当量)，DMF，23℃，12h，定量；b)iPr2NH(2.6当量)，nBuLi(2.2当量)，HMPA，CCl4(5.0当量)，THF，-78→0℃，3h，c)盐酸N,O-二甲基羟胺(2.0当量)，DMAP(催化剂)，EDC(2.0当量)，CH2Cl2，23℃，4h，88%(2步)；d)iPr2NEt(0.9当量)，苯硫酚(0.9当量)，DMF，80℃，12h，84%；e)H2O2(2.0当量)，HFIP，23℃，3h；f)甲苯，80℃，8h，2步后75%。
随后是经典氧化过程(PDC在DMF中)，然后通过使用LDA形成烯醇化物和随后使用四氯化碳的氯加成来α-氯化酸2-89(Snider，B.B.&Kulkarni，Y.S.，J Org Chem1987，52，307-310)。处理(work-up)后，获得黑色油状的化合物2-90，但根据1H NMR其为纯化合物。纯化这一酸的努力证明令人失望，并且直接将它用于下一步骤。此后使用N,O-二甲基羟胺和EDC形成酰胺并且用苯硫酚置换氯原子产生化合物2-92，按顺式-6-壬烯-1-醇计总收率74%。经由氧化/消除反应，硫醚Weinreb酰胺2-92可转化为其密切相关的衍生物2-93。
由于可商购的2,4-二羟基-6-甲基苯甲酸价格昂贵，因此开发了允许合成2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛的技术，所述2,4-二羟基-6-甲基苯甲醛使用多种保护基可进一步衍生化为相应的酸(路线3)。起始于苔黑酚并按照维尔斯迈尔-哈克过程(Vilsmeier-Haack procedure)，获得醛2-94a，收率45%(基于回收的S.M.为72%)。如实验部分所描述，所述醛在pH=7时沉淀并且回收时具有良好的纯度(按照1H NMR判断，>95%)。
Figure BDA0000381115570000901
路线3:由苔黑酚合成二羟基苯甲酸
a)POCl3(4.0当量)，DMF，0→23→80℃，3h，45%；b)通用步骤:PGCl，iPr2NEt，CH2Cl2，23℃，1h，参见每个PG的实验部分；c)参见下表。
然后化合物2-94a用不同的基团保护从而产生醛2-94c-k，其随后被氧化从而提供相应的酸2-95a-k，收率良好(路线3，表2)。通过变化氧化条件，发现在一锅工序(one pot sequence)(氧化/氯化)中，可以氯化环上合成pochonin D所需的位置。
表2：产生各种保护的二羟基苯甲酸的氧化条件
Figure BDA0000381115570000911
a A:H2O/THF/DMSO(20:10:1)或B:H2O/THF(2:1)或C:DMSO，b当进行超过1小时时，所述反应缓慢地加热至室温，c在这种情况下，使用仅2当量的酸从而避免过度氯化，d所述化合物先前指定为化合物2-66。
根据保护基，使用两种不同的酸性缓冲剂(NH2SO3H或NaH2PO4)和多种溶剂系统(表2)。为了避免任何的氯化反应，小百分比的DMSO与THF/H2O的混合物与氨基磺酸一起((a)Lindgren，B.O.&Nilsson，ActaChem.Scand.27，888-890(1973)，(b)Colombo，L等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，136-140(1980))证明基本上并且十分有效地终止HOCl的反应(第a、c、j项)(Dalcanale，E.& Montanari，F.Selective oxidation ofaldehydes to carboxylic acids with sodium chlorite-hydrogen peroxide.(用亚氯酸钠-过氧化氢将醛选择性氧化为羧酸)J Org Chem51，567-569(1986))。在缺少DMSO时进行一锅氧化/氯化工序，并且需要较长时间完成(第b、d、f、h项)。由于EOM保护基的酸易感性，使用NaH2PO4代替氨基磺酸并且在纯DMSO中进行氧化。双保护的化合物选择性地脱保护从而提供化合物2-95g的氯化类似物，其经过两步，收率77%(见下文)。在用于合成所述pochonin的第一个工序中，使用单MOM保护的酸2-96。标准条件(DIAD，PPh3)下所述酸2-96和外消旋醇2-27之间的三信酯化提供预期的酯2-97，其进一步被转化为双保护的酯2-98(路线4)。
Figure BDA0000381115570000921
路线4：MOM保护的Monocillin II(2-102)的合成
a)2-27(1.0当量)，P(mClPh)3(2.0当量)，DIAD(2.0当量)，甲苯，23℃，3h，59%；b)MOMCl(4.0当量)，EtiPr2N(4.0当量)，TBAI(催化剂)，DMF，80℃，3h，78%；c)LDA(2.0当量)，THF，-78℃；2-88(1.0当量)，10分钟，50%；d)H2O2(2.0当量)，HFIP，23℃，3h；e)甲苯，80℃，4h，68%两步(路线A)，48%两步(路线B)；f)Grubbs'II(5%mol)，甲苯(2mM)，回流，15分钟，63%(路线A，反式/顺式4:1)，定量，(路线B，反式/顺式7:1)。
使用先前优化的条件(2当量的LDA，-78℃)酰化允许形成无环前体2-99和一些未反应的原料。设想了产生化合物2-102的两种不同的工序(氧化/消除随后是闭环复分解(路线A)或反之亦然(路线B))。两种路线证明是相似的(相同的总收率)，尽管当按照路线B时在复分解反应中具有较高的选择性(顺式/反式比7:1对路线A的4:1)。计划对化合物2-102脱保护MOM和进行芳香环的氯化从而形成pochonin D(2-85，路线5)。
Figure BDA0000381115570000922
路线5：外消旋Monocillin II(2-103)的合成
a)浓HCl(在二噁烷中2.5%)，0→23℃，1h，79%；b)SO2Cl2、Et2O或CH2Cl2，0℃或Ca(OCl)2，丙酮，H2O/AcOH，0℃。
按照公知的程序脱保护MOM基团允许容易地产生外消旋monocillinII(2-103)，但形成pochonin D的氯化证明有问题。
作为代替，以酸2-96的氯化类似物为原料并且按照为MOM保护的Monocillin II而开发的两步工序(路线4)，获得高质量的化合物2-104(路线6)。尽管使用Weinreb酰胺2-7的酰化反应获得收率为37%的分离的化合物2-103，但当使用Weinreb酰胺2-88时没有观察到反应。作为代替，直接使用α,β-共轭类似物2-93。
Figure BDA0000381115570000931
路线6：多种Weinreb酰胺的酰化试验
a)LDA(2.0当量)，THF，-78℃；2-7或2-88或2-93(1.0当量)，10分钟，37%(2-105)，40%(2-107)。
事实上，酯2-104的甲苯甲酸阴离子(toluic anion)和Weinreb酰胺2-93之间的酰化反应获得收率40%的分离的无环化合物2-107和一些未反应的原料。完成对氯化甲苯甲酸酯的酰化反应的可能性使pochonin D合成的完成成为可能。
pochonin D的全合成
选择EOM保护基用于苯酚的保护。使用以上描述的化学来合成甲苯甲酸，由甲酰化苔黑酚2-94a经三步合成单EOM氯化的酸2-108(路线7)。使用在THF/MeOH混合物中的特定浓度的TFA(THF/TFA/MeOH7:1.5:1(体积))完成对邻苯酚的选择性脱保护，且没有任何的双脱保护。此外，使用标准方案(DIAD，PPh3，甲苯)对邻苯酚三信酯化并且对其再保护允许由酸2-108形成化合物2-110，收率51%。
Figure BDA0000381115570000941
路线7：pochonin D的第一种全合成
a)EOMCl(4.0当量)，iPr2NEt(4.0当量)，CH2Cl2，23℃，1h，81%；b)NaH2PO4(5.0当量)，NaClO2(5.0当量)，H2O/THF2:1，0→23℃，12h，89%；c)THF/TFA/MeOH7:1.5:1，23℃，45分钟，80%；d)(S)-2-27(1.0当量)，PPh3(2.0当量)，DIAD(2.0当量)，甲苯，23℃，3h，72%；e)EOMCl(2.0当量)，EtiPr2N(2.0当量)，TBAI(催化剂)，DMF，80℃，3h，70%；f)LDA(2.0当量)，THF，-78℃；2-93(1.0当量)，10分钟，52%；g)Grubbs'II(10%mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，94%；h)TFA(20%)，CH2Cl2，23℃，2h，72%。
甲苯甲酸酯2-110去质子化，随后添加Weinreb酰胺2-93获得预期的复分解前体2-111(收率52%)和一些未反应的原料。用Grubbs'第二代催化剂((a)Chatterjee，A.K.，Morgan，J.P.，Scholl，M.& Grubbs，R.H.，JAm Chem Soc122，3783-3784(2000)，(b)Scholl，M.，Ding，S.，Lee，C.W.&Grubbs，R.H.，Org Lett1，953-956(1999))在120℃下处理三烯2-11115分钟以出色的收率产生预期的环化产物2-112，尽管是顺式/反式烯烃1:4的不可分的混合物。在热力学控制下，80℃过夜的复分解反应(Lee，C.W.&Grubbs，R.H.Stereoselectivity of Macrocyclic Ring-Closing OlefinMetathesis.(大环闭环烯烃复分解的立体选择性)Org Lett2，2145-2147(2000))将平衡移至反式中间体2-112，其具有>95%的选择性(由1H NMR判断)和94%的收率。应注意，这一反应可在毫摩尔浓度下进行，且没有任何可检测量的二聚或寡聚。重要地，没有观察到10元大环。此外，使用TFA在二氯甲烷中脱保护EOM允许第一次全合成pochonin D，发现其具有与天然产物相同的NMR谱。
为了多样性导向的合成并且因为硫醚键的存在导致在芳香环上不可能具有氯原子，所以开发了用聚合物支持的(polymer-supported)试剂更加简洁地合成pochonin D((a)Ley，S.V.& Baxendale，I.R.，Nat Rev Drug Discov1，573-86(2002)，(b)Ley，S.V.等人，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.123，3815-4195(2000))。设想直接使用2,4-二羟基-6-甲基苯甲酸的三信反应产生pochonin D的更加简洁的路线。由于(S)-4-戊烯-2-醇((S)-2-27)是可商购的，因此进行对产生脂族Weinreb酰胺2-93的工序的改良。开发了使用固体载体的方案从而将纯化中间体和最终产物的需求降至最小。可商购的2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(路线8)使用3-巯基苯酚和一当量的碱选择性地S-烷基化，然后通过连续添加第二个当量的K2CO3、树脂，将其装入相同一锅反应中的Merrifield树脂，并将温度升至50℃。
Figure BDA0000381115570000951
路线8：Weinreb酰胺2-114的固相合成
a)3-巯基苯酚(1.0当量)，K2CO3(1.0当量)，DMF，23℃；8小时后，K2CO3(1.7当量)，Merrifield树脂，TBAI(催化剂)，12h，50℃，98%；b)H2O2(2.0当量)，HFIP/CH2Cl21:1，12h；c)tBuOK(1.0当量)，5-碘-1-戊烯(1.0当量)，DMSO，23℃，3h；d)甲苯，80℃，8h，77%。
这一方法一步形成聚合物结合的Weinreb酰胺2-49。使用先前提及的涉及在HFIP/CH2Cl2中的H2O2的程序将硫醚2-49氧化为相应的亚砜2-113(Ravikumar，K.S.，Begue，J.-P.& Bonnet-Delpon，D.A selectiveconversion of sulfide to sulfoxide in hexafluoro-2-propanol.(在六氟-2-丙醇中将硫化物选择性转化为亚砜)Tetrahedron Letters39，3141-3144(1998))。发现这一氧化程序是实用和可靠的，且没有过度氧化为砜，并且由于所述反应在固相上进行，所以容易重复利用氟化溶剂。然后酰氨基亚砜99用tBuOK去质子化，并且产生的烯醇化物用5-碘-1-戊烯终止反应。使用DMSO避免了亚砜消除，并且所述反应可加热至60℃。消除后，在甲苯中再悬浮所述树脂并加热至80℃释放预期的片段2-114，其具有77%的收率和95%的纯度(通过1H NMR判断)。就结构单元2-114的收率和纯度而言，发现这一固体载体的方法十分实用，因为其不需要柱色谱。
根据在溶液中开发的化学(路线7)，使用聚合物结合的DEAD用(S)-4-戊烯-2-醇((S)-2-27)选择性地三信酯化2,4-二羟基-6-甲基苯甲酸(2-95a)产生酯2-116(路线9)。发现使用(mClPh)3P对于抑制任何与对苯酚竞争成醚是关键的。用EOM基团保护两个苯酚产生未氯化的酯2-117，其可用于后续烷基化而不用进一步纯化。
Figure BDA0000381115570000961
路线9：使用聚合物结合试剂合成中间体2-110和2-117
a)NaClO2(5.0当量)，NH2SO3H(5.0当量)，CH3CHO(1.0当量)，THF/H2O5:1，0℃，0.5h，92%；b)PS-DEAD(2.5当量，1.3mmol.g-1)，(S)-4-戊烯-2-醇(1.0当量)，P(mClPh)3(2.0当量)，CH2Cl2，23℃，0.5h，2-117为68%并且2-110为65%；c)iPr2EtN(4.0当量)，EOMCl(4.0当量)，TBAI(催化剂)，DMF，80℃，5h，95%。
酯化前，使用HClO导入氯，所述HClO通过用NaClO2/氨基磺酸氧化乙醛就地产生。酸2-95b获自其未氯化的母体2-95a，收率92%，且未发现任何过氯化。与2-95a相同的条件下酯化所述产物产生化合物2-115。然后，用EOM基团双保护产生酯2-110，其不用任何纯化也可用于后续反应。对甲苯甲酸酯2-110和2-117去质子化，随后添加Weinreb酰胺2-114产生预期的复分解前体2-118和2-119，其可直接用于后续步骤(路线10)。当对未氯化的酯2-117进行酰化反应时，获得20%的对Weinreb酰胺1,4-共轭加成产生的产物。
Figure BDA0000381115570000971
路线10：使用支持试剂合成pochonin D(2-85)和monocillin II(2-103)
a)LDA(2.0当量)，THF，-78℃；2-114(1.0当量)，10分钟，安柏莱特(Amberlite)IRC-50(20.0eq，10.0mmol.g-1)；b)Grubbs'II(10%mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，两步后2-120为40%并且2-112为44%；c)PS-TsOH(10当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，4h，2-85为90%并且2-103为92%。
热力学控制下，80℃用Grubbs'第二代催化剂处理粗制的三烯2-118和2-119，过夜，专有地(超过95%的选择性)产生反式大环2-112和2-120。然后，使用通过硅胶途径的简单过滤移除所有的催化剂和其副产物，获得化合物2-112，经两步收率44%。而对纯化的三烯2-118进行的复分解反应几乎是定量的，发现从化合物2-95a起进行全合成工序更加实用，不用任何纯化，由此产生保护的pochonin D2-112，经五步收率25%。柱色谱纯化分离了12元大环2-121和2-120。使用磺酸树脂在MeOH中移除大环2-112和2-120的EOM基团，允许合成pochonin D(2-85)和monocillin II(2-103)，收率分别为90%和92%。如为酰化反应所示，芳香环上是否存在氯原子似乎影响共轭烯烃的反应性。确实，用HCl(2.5%，在二噁烷中)对化合物2-120脱保护产生氯离子的共轭加成，而用HCl对化合物2-112脱保护获得pochonin D(2-85)。使用聚合物支持试剂的这一合成允许分别以六步(收率23%)和五步(收率24%)获得pochonin D和monocillin II。起始于可商购的结构单元，所有合成路线仅需要一次最终化合物的色谱纯化，并且这一方法可用于合成库。在竞争测定中用格尔德霉素评估HSP90亲和力表明pochonin D是HSP90的良好配体，具有80nM的IC50，相比之下根赤壳菌素为20nM(见下文)。
II pochonin A的合成
获得了pochonin D(2-85)，然后制备pochonin A(2-122)，不仅确定其结构还要与pochonin D和根赤壳菌素对比其生物活性。
Figure BDA0000381115570000981
使用DMDO环氧化pochonin D允许形成pochonin A，其为1:1的非对映异构体的混合物，可通过柱色谱分离。一个替代路线描述于路线11。环氧化双EOM保护的pochonin D(2-112)也获得为非对映异构体混合物的环氧化物。
Figure BDA0000381115570000982
路线11：双EOM的pochonin D(2-112)的直接转化
a)DMDO(1.0当量)，CH3CN，0℃→23℃，1.5h，79%；b)PS-TsOH(10.0当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，1h。
调研了基于甲硅烷基的保护基获得这一类型的分子的合适性。因此当用醇(R)-27酯化时，全硅烷化苯甲酸81b(路线12)，随后将甲硅烷基酯“无酸”转化为相应的酰氯产生关键中间体112(Wisnner，A.&Grudzinskas，C.V.，J Org Chem43，3972-3974(1978))。
Figure BDA0000381115570000991
路线12：使用TBS保护基的Pochonin A合成
a)iPr2EtN(6.0当量)，TBSCl(3.0当量)，CH2Cl2，23℃，3h；b)草酰氯(1.0当量)，DMF(催化剂)，CH2Cl20→23℃，1h；c)Et3N(2.26当量)，R-(-)-戊烯-2-醇(3.0当量)，DMAP，0→23℃，12h，经3步收率29%；d)LDA(2.0当量)，THF，-78℃，Weinreib酰胺100(1.0当量)，10分钟，35%；e)Grubbs'II(10%mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，79%；f)CF3COCH3，NaHCO3(7.0当量)，过硫酸氢钾制剂(Oxone)(4.7当量)，Na2·EDTA(4x10-4M)，CH3CN/二甲氧基甲烷，0℃，2h，83%；g)TBAF(2.2当量)，THF，23℃，20分钟，80%，3:1非对映异构体的混合物。
对甲苯甲酸酯2-126去质子化，随后与Weinreb酰胺2-114反应产生复分解前体2-127。在先前提及的热力学条件(80℃，过夜)下使用Grubbs’第二代催化剂闭环复分解产生良好收率和出色的顺式/反式比率(<5%顺式)的大环2-128。当用就地产生的甲基(三氟甲基)-二环氧乙烷在0℃下进行非共轭烯烃的环氧化时是最佳的(Yang，D.等人，J.Org.Chem.,60，3887-3889(1995))，其产生TBS保护的pochonin A(2-129)，其具有出色的收率，为不可分离的3:1的非对应异构体混合物。使用经典甲硅烷基脱保护条件(TBAF于THF中)对化合物2-129脱保护产生可分离的非对映异构体混合物并且确定主要产物的确是预期的pochonin A(2-122)。
评估替代保护基从而提高酯化和酰化反应的收率。根据它们对碱性条件的稳定性以及它们对TBAF的易感性，考虑SEM保护基。按照对聚合物辅助合成pochonin D所描述的程序，使用聚合物结合的DEAD的苯甲酸2-95b和手性醇(S)-2-27之间的选择性三信反应和随后的用SEM-Cl保护产生酯2-130，收率72%(路线13)。
路线13：使用SEM保护基的Pochonin A合成
a)PS-DEAD(2.5当量，1.3mmol.g-1)，S-(-)-4-戊烯-2-醇(2.0当量)，P(mClPh)3(2.0当量)，甲苯，23℃，10分钟；b)NaH60%(4.0当量)，SEMCl(4.0当量)，THF，0℃，2h，经2步收率72%；c)LDA(2.0当量)，THF，-78℃，Weinreib酰胺2-114(1.0当量)，10分钟，60%；d)Grubbs'II(10%mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，87%；e)DMDO(1.0当量)，CH3CN，0→23℃，1.5h，83%，1:1非对应异构体混合物；f)MgBr2·Et2O(8.0当量)，CH2Cl2，23℃，1h，70%。
使用Weinreb酰胺2-114酰化甲苯甲酸酯2-130产生分离的无环前体2-131，收率60%。在热力学条件(80℃，过夜)下用Grubbs’第二代催化剂处理三烯2-131产生相应的大环2-132，收率87%(<5%顺式烯烃)，其在与TBS保护的化合物2-128相同的条件下[甲基(三氟甲基)-二环氧乙烷]环氧化，产生化合物2-133，收率83%，尽管是1:1的非对应异构体的比率(不可分离)。用8.0当量的MgBr2·Et2O完成2-133的脱保护，产生预期的pochonin A(2-122)和其非对映异构体(2-122b)的可分离混合物。发现Pochonin A是HSP90的良好配体，具有90nM的IC50(见下文)。
III.Pochonin类似物的多样性导向的合成
为了扩大所述化合物的多样性从而有望找到新的ATP酶和激酶抑制剂，制备了pochonin类似物的库并评估其生物活性。预想这一库源自二羟基苯甲酸大环内酯骨架的五点多样性：修饰对苯酚(R1，许多天然二羟基苯甲酸酯在这一位置带有甲基)、C17上的基团(R2，两种立体化学均存在于天然二羟基苯甲酸酯；然而，只有甲基取代基)、C14-C15烯烃(R3)、C9羰基(R4)、烯烃C10-C11和芳环的间位(R5，许多天然二羟基苯甲酸酯在这一位置带有氯)。为了将常规的色谱法降至最少，所述合成用聚合物结合试剂实施。大环的装配取决于为合成pochonin D而开发的使用聚合物结合试剂化学(路线9和路线10)。
Figure BDA0000381115570001011
所述库的一般结构和逆合成分析
制备了在R2上带有多种取代基的多种高烯丙醇2-134。非可商购的高烯丙醇2-134可通过任何合适的方法获得。在一个实施方案中，通过对外消旋的醇酶法拆分(H.E.Master等人，Tet.Lett.，37:9253(1996)；S.Singh等人，Tet.Asymm.，13:2679(2002)或经由Brown烯丙基化相应的醛(H.C.Brown和P.K.Jadhav J.Am.Chem.Soc.，105:2092(1983)获得最高对映异构体形式的高烯丙醇2-134。通过酶法拆分制备苯基(2-134a)、吡啶基(2-134b)和呋喃基(2-134c)醇(路线14)。在将可商购的烯丙基溴化镁(allylmagnesiumbromide)Grignard加成至它们的相应的醛2-134a-c后，获得外消旋醇2-134a-c。
路线14：使用酶法拆分合成手性醇2-134a-c
a)烯丙基溴化镁(1.5当量)，THF，0.5h，0℃，71%(2-134a)，41%(2-134b)，74%(2-134c)；b)R 2 =Ph:醋酸乙烯酯(32.5当量)，Amano脂肪酶PS-C II(50mg/mmol的2-134)，23℃，30h(由1H NMR监测)，R 2 =Pyr,Fur:醋酸乙烯酯(10.0当量)，Amano脂肪酶PS-C II(50mg/mmol的2-134)，THF，23℃，5-30h(由1H NMR监测)；c)K2CO3(0.8当量)，MeOH，23℃，98%((R)-2-134a)，92%((R)-2-134b)，84%((R)-2-134c)。
使用高效Amano脂肪酶(洋葱假单胞菌(Pseudomonas cepacia)的固定形式)实现动力学酶法拆分外消旋醇2-134a-c。所述酶催化用作为酰基供体的醋酸乙烯酯选择性反式酯化醇(R)-2-134a-c，所分离的(S)醇2-134a-c具有出色的收率和良好的对映异构体过量(表3)。
表3：用脂肪酶反式酯化来对映异构体选择性酰化醇外消旋-2-134a-c
Figure BDA0000381115570001021
这一方法获得的对映异构体过量都在88%以上。然后，乙酰化的醇(R)-2-137水解为相应的醇(R)-2-134a-c，收率出色。此外，开发了基于Brown烯丙基化的用于合成异丙基(2-134d)、丙基(2-134e)和苄基(2-134f)醇的第二种方法(路线15)。
Figure BDA0000381115570001022
路线15：使用Brown烯丙基化合成手性醇120d-f
a)(-)-α-蒎烯(2.4当量)，BH3·Me2S(1.0当量)，THF，23℃持续1h然后4℃持续12h，76%；b)MeOH(1.2当量)，Et2O，0℃，2h，94%；c)烯丙基溴化镁(0.95当量)，Et2O，0→23℃，1h，92%；d)122d-f(1.05当量)，Et2O，-100℃，0.5h；3N NaOH，H2O235%，回流，3h，77-93%。用3,5-二硝基苯甲酰氯酰化后，通过手性HPLC分析确定醇的对映异构体过量。
(-)-B-烯丙基二异松蒎基硼烷(2-139，(-)-Ipc2B烯丙基)由(-)-α-蒎烯经三步工序合成，包括硼氢化反应、相应MeO-硼酸酯(borinic ester)2-138的形成以及用格氏试剂处理它。此后，对醛2-134d-f缩合，随后用碱性过氧化氢氧化产生的硼酸酯允许形成良好对映异构体过量的手性高烯丙醇2-134d-f。
pochonin D合成后，依照模型进行大环的装配(E.Moulin，V.Zoete，S.Barluenga，M.Karplus，N.Winssinger，J.Am.Chem.Soc.，127:6999(2005))。因此，如路线16所示，使用聚合物支持的DEAD用多种高烯丙醇酯化可商购的苯甲酸2-95a和其氯化的类似物2-95b(酯化前使用HClO将氯原子导入酸2-95a，所述HClO通过用NaClO2/氨基磺酸氧化乙醛就地产生)从而产生出色纯度的酯2-115a-g和2-116a-g(E.Moulin等人，J.Am.Chem.Soc.，127:6999(2005))。然后产物2-115a-g和2-116a-g在存在Hunig碱时用乙氧亚甲基氯(EOM-Cl)保护从而获得相应保护的甲苯甲酸酯2-110a-g和2-117a-g，其可用于后续碳酰基化反应，且不用进一步纯化。
Figure BDA0000381115570001031
路线16：大环前体2-112a-g、2-120a-g和2-121a-g的合成
a)NaClO2(5.0当量)，NH2SO3H(5.0当量)，CH3CHO(1.0当量)，THF/H2O5:1，0℃，0.5h，92%；b)PS-DEAD(2.5当量，1.3mmol.g-1)，(R)-2-134a-g或(S)-2-134a-g(1.0当量)，P(mClPh)3(2.0当量)，CH2Cl2，23℃，0.5h，60-80%；c)iPr2EtN(4.0当量)，EOMCl(4.0当量)，TBAI(催化剂)，DMF，80℃，5h，80-90%；d)LDA(2.0当量)，THF，-78℃，2-114(1.0当量)，10分钟，安柏莱特IRC-50(20.0当量，10.0mmol.g- 1)；e)Grubbs'II(10%mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，两步后收率38-70%。
使用两当量的LDA对甲苯甲酸酯2-110a-g和2-117a-g去质子化，随后加入经由固相化学制备的α,β-不饱和Weinreb酰胺(E.Moulin等人，J.Am.Chem.Soc.，127:6999(2005))获得酰化产物2-118a-g和2-119a-g。所述反应用聚合物结合的酸终止，所述酸还掩蔽(sequestered)所有的二异丙基胺。这一反应可产生一定水平的1,4-共轭加成产物(S.Barluenga等人，Chem.Eur.J.，11:4935(2005))。尽管存在于pochonin D中的大量的氯抑制这一反应，但缺少芳基氯的化合物产生20%的共轭加成产物2-140a-g。然而，这些反应的粗混合物用于后续的环化步骤。然后，在热力学条件下(C.W.Lee和R.H.Grubbs，Org.Lett.，2:2145(2000))，使用Grubbs’第二代催化剂(A.K.Chatterjee等人，J.Am.Chem.Soc.，122:3783(2000)；M.Scholl等人，Org.Lett.，1:953(1999))进行三烯的闭环复分解，产生预期的14元大环。在用2-118a-g、2-119a-g和2-140a-g的混合物进行复分解反应的情况下，除了2-112a-g和2-120a-g之外，还获得相应的12元环产物2-121a-g，为可分离的混合物。所有成功的反应工序通过标准色谱法纯化，分别产生大环2-112a-g和2-120a-g和2-121a-g，从2-95起的总收率为30-60%和8-10%。
然后为了进一步的多样化，使用大环2-112a-g和2-120a-g作为起点。使用磺酸树脂对2-112a-g和2-120a-g脱保护EOM基团产生化合物2-103a-g和2-85a-g，其经简单过滤树脂并蒸发掉溶剂后为纯的形式并且产率出色(路线17)。12元环产物2-121a-g脱保护非常顺利(未显示)。用还原剂处理2-112a-g和2-120a-g导致使用二异丁基氢化铝(Dibal)的羰基还原物或羰基和使用NaBH4的1,4-还原物的混合物。已知使用硼氢化物的非配位相反离子可促进羰基还原(H.W.Gibson和F.C.Baily，J.Chem.Soc.Chem.Commun.，1977:815；A.Kirschning，J.Prakt.Chem.，2000:342)。使用聚合物支持的季铵硼氢化物(称为硼氢化物交换树脂，BER)，最方便地完成所述还原。因此，使用BER-树脂可还原酮2-112a-g和2-120a-g从而获得2-141a-g的两种非对映异构体，收率～60%。在常规条件下用磺酸树脂脱保护EOM产生化合物2-142a-g。使用PS-NMM/Ac2O乙酰化还原的中间体2-141a-g产生化合物2-143a-g，当脱保护时，其产生消除从而产生为烯烃几何混合物的三烯2-144。
Figure BDA0000381115570001051
路线17：还原的酮类似物的脱保护和合成
a)PS-TsOH(10.0当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，4h，>90%；b)BER树脂(1.0当量，2.5mmol.g-1)，MeOH，0℃，12h，～60%；c)Ac2O(1.2当量)，PS-NMM(1.2当量，3.20mmol.g-1)，DMAP(0.05当量)，DMF，23℃，0.5h，～80%。BER树脂=硼氢化物交换树脂，PS-TsOH=磺酸树脂MP，DIBAL=二异丁基氢化铝，DMAP=二甲基氨基吡啶，DMF=二甲基甲酰胺，PS-NMM=吗啉代甲基聚苯乙烯。
发现在存在磺酸树脂时将二羟基苯甲酸酯2-112a-g和2-120a-g长时间暴露于甲醇产生共轭加成；利用这一发现以驱动所述反应彻底完成。因此，15小时内，苯酚2-85a-g定量地转化为产物2-145a-g(路线18)。在相同的条件下，这一产物可明显地可从2-120a-g直接获得。
Figure BDA0000381115570001052
路线18：通过共轭加成合成类似物2-145
a)PS-TsOH(10.0当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，15h，80%。
为了进一步的多样化，化合物2-103a-g和2-85a-g也用作起点(路线19)。因此，用聚合物结合的氰基硼氢化物处理2-103a-g和2-85a-g产生1,4-还原产物2-146，收率适中。2-103a-g和2-85a-g的酸性更强的对羟基经使用聚合物结合的DEAD的三信反应或使用聚合物结合的碱的烷基化被取代，从而分别产生具有一般结构2-147和2-148的化合物。用OsO4氧化产生二羟基化产物2-149(其为异构体的混合物)以及相当于二羟基化共轭烯烃的产物(产物未显示)。用新鲜制备的二甲基二环氧乙烷处理2-103a-g和2-85a-g引起选择性环氧化非共轭烯烃，其为pochonin A类似物2-150的非对映异构体混合物。尽管如果用TBS保护苯酚可获得对pochonin A的较高非对映异构体选择性(E.Moulin等人，Org.Lett.，7:5637(2005))，但是这里不需要保护。
Figure BDA0000381115570001061
路线19：化合物2-85a-g和2-103a-g的衍生化
a)PS-TMABH3CN(2.0当量，3.5mmol.g-1)，CH2Cl2/AcOH10:1，23℃，4h，～50%；b)PPh3(2.0当量)，R2OH(2.0当量)，PS-DEAD(2.0当量，1.3mmol.g-1)，CH2Cl2，23℃，8h，～60%；c)R3X(0.9当量)，PS-TBD(2.0当量，2.9mmol.g-1)，CH2Cl2，23℃，3h，～90%；d)OsO4(0.1当量)，NMO(1.0当量)，丙酮/H2O10:1，23℃，1h，>70%；e)DMDO(1.2当量，0.04M于丙酮中)，CH3CN，0℃，30分钟，>90%.AllOH=烯丙醇，DMDO=二甲基二环氧乙烷，NMO=4-甲基吗啉N-氧化物，PS-DEAD=乙氧羰基偶氮羧甲基聚苯乙烯，PS-TBD=TBD-甲基聚苯乙烯，PS-TMABH3CN=氰基硼氢化(聚苯乙烯基(polystiryl)甲基)三甲基铵。
有趣地注意到，共轭的烯烃已证明根据芳环上氯原子存在与否而具有不同的反应性。而化合物2-120(其中X=Cl并且R=Me)脱保护EOM可用HCl在二噁烷中进行，用相同的条件处理相应的化合物2-112(其中X=H并且R=Me)引起脱保护期间氯离子的共轭加成，产生化合物2-151(路线20)。存在聚合物结合的碱时，能够彻底地消除β-氯，从而回收共轭化合物2-103a-g。
Figure BDA0000381115570001071
路线20：大环2-120和2-120a-g的衍生化
a)HCl(2.5%的二噁烷溶液)，23℃，3h，>75%；b)PS-TBD(0.5当量，2.6mmol.g- 1)，CH2Cl2，23℃，8h，～90%；c)PS-TsOH(1.0当量，3.2mmol.g-1)，DHP(1.0当量)，CH2Cl2，23℃，5h，～80%；d)R2ONH2.HCl(5.0当量)，Pyr/AcOH5:1，40℃，12h，～90%；e)PS-TsOH(10.0当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，4h，～80%f)PS-TsOH(催化剂，3.2mmol.g-1)，DHP(1.0当量)，CH2Cl2，23℃，5h，～70%；g)TFA(20%)，CH2Cl2，23℃，2h。DHP=二氢吡喃，PS-TBD=TBD-甲基聚苯乙烯，PS-TsOH=磺酸树脂。
当评估苯酚的保护基时，注意到当存在强酸(例如磺酸)时，二氢吡喃引起亲电芳香取代而不是苯酚保护(参见T.Kometani等人，Synthesis，1988:1005)。向化合物2-103应用这些条件(路线20)产生2-153，其为非对应异构体的可分离混合物。
用EOM基团保护的化合物2-120(X=H，路线20)经历与九种不同的羟胺顺利地形成肟从而获得化合物2-154，其为具有变化比率的E/Z混合物。在甲醇中用磺酸树脂对2-154脱保护EOM，随后在存在二氢吡喃下在DCM中用磺酸树脂处理形成在芳香环上带有吡喃取代的肟2-155，其为非对映异构体的混合物。在侧链含有酸(R2X=OCH2COOH)的情况下，在甲醇中用磺酸树脂脱保护EOM伴随着羧酸(carboxylate)的酯化。用三氟乙酸处理化合物2-120a和2-112a引起形成三氟乙酸酯2-152。在具有或没有EOM保护基的氯化类似物中形成肟主要产生相应的羟胺1,4-加成(路线21)。令人惊讶地，当pochonin D用TBS基团保护时(2-128a-g，路线21)，在相同反应条件下，形成的预期的肟2-157a-g是观察到的唯一产物。然后，使用TBAF完成脱保护TBS基团从而获得肟2-158a-g。用羟胺处理pochonin D引起形成1,4-加成产物2-156。
Figure BDA0000381115570001081
路线21：用化合物2-85形成肟
a)TBSCl(5.0当量)，咪唑(5.0当量)，DMF，23℃，3h，～90%；b)RONH2.HCl(5.0当量)，Pyr/AcOH5:1，40℃，12h，～90%；c)TBAF(2.5当量)，THF，23℃，2h，～80%.DMF=二甲基甲酰胺，Imid.=咪唑，TBAF=氟化四丁铵，TBS-Cl=叔丁基二甲基甲硅烷基氯化物。
在另一实施方案中，制备双甲基化的化合物2-164(路线22)。酸2-108和醇2-159用于标准三信酯化。将化合物2-160保护为邻苯酚，随后进行用Weinreb酰胺2-114的酰化反应从而产生无环前体2-162。闭环复分解随后使用磺酸树脂移除化合物2-163上的EOM保护基提供双甲基化的类似物2-164。
Figure BDA0000381115570001091
路线22：pochonin D的双甲基取代类似物(2-164)的合成
a)乙烯基溴化镁(2.0当量)，CuI(0.3当量)，Et2O，-30→23℃，12h，65%；b)2-159(1.0当量)，PPh3(2.0当量)，DIAD(2.0当量)，甲苯，23℃，3h，23%；c)EOMCl(2.0当量)，NaH60%(2.0当量)，THF，0℃，2h，66%；d)LDA(2.0当量)，THF，-78℃；2-114(1.0当量)，10分钟，57%；e)Grubbs’II(10%mol)，甲苯(2mM)，80℃，12h，57%；f)PS-TsOH(10当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，2.5h，40%。
此外，从大环2-163合成肟衍生物2-165和2-167，其为与1,4-加成产物的可分离混合物(路线23)。然后酯化肟2-167的羧酸部分从而形成相应的哌啶酰胺肟2-168。使用磺酸树脂移除EOM基团分别允许将肟2-166和2-167与2-165和2-168分离。
路线23：化合物2-164的肟衍生物的合成
a)BnONH2.HCl或NH2OCH2CO2H(5.0当量)，Pyr/AcOH5:1，40℃，24h，20-35%；b)PS-TsOH(10.0当量，3.2mmol.g-1)，MeOH，40℃，2.5h，77-80%；c)哌啶(1.1当量)，EDC(1.1当量)，HOBt(1.1当量)，DMF，23℃，2h，75-80%。
在另一实施方案中，由如路线24所示的预先形成的肟环化制备pochonin肟。例如，使用N,N’-二异丙基碳二亚胺和二甲基氨基吡啶将保护的预先形成的肟1结合于王氏树脂(Wang resin)。移除烯丙基保护基并且在三信条件下使苯酚官能化。随后对羧酸脱保护并且用R3OH酯化。使用如前所述的Grubbs II催化剂实现闭环，从而提供树脂结合的肟5。用三氟乙酸脱保护并从树脂移除从而提供肟6。羧酸可与多种基团R4XH反应从而提供肟7，其中X是氧、硫、氨基或取代的氨基。通常获得的肟7为E:Z异构体1:1的混合物，其可通过色谱分离。
Figure BDA0000381115570001101
路线24
在另一实施方案中，通过利用三信酯化构建大环的替代方法制备pochonin肟。路线25表示经由三信酯化形成大环2-a1的非限制性实例。用磷酰氯再DMF中氧化苔黑酚(化合物8)以提供醛9，其被保护为双乙氧甲醚并经受用NaClO2氧化性氯化从而产生羧酸10。将羧酸保护为三甲基甲硅烷基乙酯并且用LDA和Weinreb酰胺12处理(路线26)从而提供α,β-不饱和酮13。40℃下，酮13与羧甲氧基胺半盐酸盐在吡啶中反应以产生相应的肟，其为E和Z异构体的混合物。通过用EDC和哌啶处理，将肟转化为预期的酰胺14，其为E和Z异构体的混合物。在三信条件下，通过将DIAD缓慢地加入化合物14和PhP3的甲苯溶液将前体14大环化为保护的化合物15。40℃下，通过用磺酸树脂处理将苯酚基团脱保护从而产生2a-1，其为E和Z异构体的混合物。分离E和Z异构体的混合物从而获得纯E和Z异构体2a-1。
Figure BDA0000381115570001111
路线25：三信条件下的环化
根据路线26所示的方法制备二烯Weireb酰胺12。将反式-3-己烯二酸二甲酯16用氢化铝锂还原为相应的二醇。将所述二醇单保护为叔丁基二苯基甲硅烷基醚17，并且将游离的醇经由腈19三步转化为醛20。然后用Weireb酰胺叶立德21处理醛20从而产生二烯Weireb酰胺12，其用于制备化合物13(路线24)。
Figure BDA0000381115570001121
路线26
获得了E-异构体2a-1和相关的E-肟2a-13(其在芳环上缺少氯取代基)的晶体结构。所述晶体结构如图1和2所示。
确定化合物2a-1和2a-13的溶解性。确定两种化合物在DMSO和DMA中高度可溶(>5g/mL)。化合物在DMSO和DMA中的良好溶解性使用于静脉内或腹膜内给药的制剂成为可能。在一个非限制性实例中，制备了在DMSO/吐温20/0.9%NaCl(10/5/85)中的肟制剂。
生物活性
测试pochonin类似物库的代表性子集(84个化合物)10μM时对一组24激酶(AKT1、ARK5、Aurora-A、Aurora-B、B-RAF-VE、CDK2/CycA、CDK4/CycD1、CK2-α1、FAK、EPHB4、ERB2、EGF-R、IGF1-R、SRC、VEGF-R2、VEGF-R3、FLT3、INS-R、MET、PDGFR-β、PLK1、SAK、TIE2、COT)的抑制。测定方法和结果的描述显示于实施例24。
明显地，十二个化合物表现出超过50%的抑制，其代表对激酶的命中率a>14%。令人惊讶地，尽管pochonin D、pochonin A和根赤壳菌素已经表现为HSP90的强效抑制剂，但是它们对这组激酶没有表现出显著的活性。选择九种化合物计算其对24个激酶的每一个的IC50(表4)。在这一更加详细的分析中，根赤壳菌素显示仅对VGFR-R2具有非常弱的活性，对其他二十三个激酶没有抑制。几种pochonin类似物显示针对治疗相关的酶(例如Src(对A2为8μM)、Aurora A(对A3为12μM)、IGF1-R(对A5为11μM))有明确模式的活性。重要地，证明是激酶抑制剂的化合物不是HSP90的抑制剂并且不是无差别的ATP替代物。
通过测量竞争测定中直接的相互作用和测量细胞测定中HSP90客户蛋白的减少，测试所述库的另一子集对HSP90的抑制。HSP90的ATP酶袋具有特定的折叠，其存在于超家族中，所述超家族包括功能多样的蛋白质，例如DNA拓扑异构酶II、解旋酶、MutL和组氨酸激酶(Bergerat折叠)(A.Bergerat等人，Nature，386:414(1997)；R.Dutta和M.Inouye，TrendsBiochem.Sci.，25:24(2000))。事实上，已表明根赤壳菌素的确抑制这一家族的其他成员，尽管其具有较低的亲和力(D.Gadelle等人，Nucleic AcidsRes.，33:2310(2005)；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62:289(2002)。但明显地，相对于激酶组，本发明的最佳HSP90抑制剂对HSP90有选择性。发现十六种化合物具有IC50<1μM。
Figure BDA0000381115570001131
选择用于IC50确定的Pochonin类似物
表4：在一组24个激酶的测定中所选的pochonin类似物的抑制活性(IC50:μM)(空白代表IC50>50μM)。
Figure BDA0000381115570001141
根赤壳菌素和pochonin D所靶向的HSP90的ATP-结合袋具有特定的折叠，其存在于超家族中，所述超家族包括功能多样的蛋白质，例如DNA拓扑异构酶II、解旋酶、MutL和组氨酸激酶(R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，24:24(2000))。事实上，已表明根赤壳菌素的确抑制这一家族的其他成员，尽管其具有较低的亲和力(D.Gadelle等人，NucleicAcids Res.，33:2310(2005)；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62:289(2002))。尽管以上描述的pochonin库确定地含有一些这样的化合物——所述化合物是带有Bergerat折叠的酶的良好抑制剂，但是我们希望评估pochonin骨架附近的修饰是否可将这些化合物的选择性从HSP90抑制剂调整为激酶抑制剂。超过百分之十四的化合物显示在10mM时激酶抑制超过50%的事实清楚地支持RAL是激酶抑制的良好骨架的假说。
在竞争测定中筛选库的HSP90亲和力导致关于构效关系的下述一般趋势(根据式A编号和命名)：虽然R1上大型取代基很好地耐受激酶的活性，但是一般发现甲基或氢具有较好的HSP90亲和力；R2上的取代通常导致HSP90亲和力的降低；C14-15(AB)上的烯烃的HSP90亲和力活性一般与相应的环氧化物相当，然而相应的二醇一般具有较低的活性，并且反式烯烃好于顺式烯烃；一般发现在C10-11(CD)上存在烯烃的HSP90亲和力超过相应的烷烃或在C11上取代的产物；C9羰基的还原一般导致较低的HSP90亲和力，而一些羟胺的取代增加HSP90亲和力；一般发现在R4处被小基团(例如氯)取代改善HSP90活性，除了在R1和R3处的一些取代置换(其中氢优于氯)之外；苯酚的取代耐受激酶亲和力的增加，但是一般减少对HSP90的亲和力。
值得注意的是，一般来说，表现出对HSP90的有效亲和力的化合物不是激酶的良好抑制剂，这强烈提示该骨架不是无区别的嘌呤激动剂。
Figure BDA0000381115570001151
式A
抗肿瘤活性
在小鼠中评估本发明的化合物的抗肿瘤活性。在健康的CB17/SCID小鼠中通过将HCC1954细胞注射于70只小鼠的右翼(right flank)，腹膜内诱导肿瘤。一旦所述诱导肿瘤的平均大小为80mm，就用25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg的化合物a2-1治疗小鼠。利用单独的媒介物和10mg/kg的
Figure BDA0000381115570001152
的对照。观察到用化合物2a-1治疗的小鼠的肿瘤大小的剂量依赖性减小。该结果优于那些在用
Figure BDA0000381115570001153
治疗的小鼠中获得的结果，甚至是25mg/kg的剂量持续三星期。重要地，最后治疗后，三到七天内没有出现肿瘤的再生，这表明每周一至三次的给药时间表应该是有效的。
实施例26显示所选pochonin类似物针对HCC1954和SK-BR-3肿瘤细胞的抗肿瘤活性。表现出显著细胞毒性的化合物进一步检验其诱导已知HSP90客户蛋白(例如在SK-BR3中的ErbB2)降解的能力。因此，用化合物处理18小时后，获得全部细胞蛋白溶解产物，将蛋白质浓度标准化并且通过蛋白质印迹法量化ErbB2的浓度(C.Chavany等人J.Biol.Chem.271:4974—4977(1996))。在这一测定中，化合物2a-1具有的EC50为26nM并且化合物2a-13具有的EC50为12nM，而根赤壳菌素具有的IC50为289nM。值得注意地，一个肟异构体比其他的更具有全身活性。对于2a-11和2a-13，E-异构体的活性比Z-异构体多5至10倍。
最大耐受剂量
连续五天，每天一次用25mg/kg、50mg/kg和100mg/kg的化合物2a-1处理三只健康的CB17/SCID小鼠。以25mg/kg浓度处理的小鼠没有表现出任何体重减少。以50mg/kg和100mg/kg剂量水平处理的小鼠表现出轻微的但是可接受的体重减少。
实施例
通用技术。除非另有说明，所有反应在氮气氛中，在无水条件下用干燥(无水)溶剂进行。通过使溶剂经过可商购的氧化铝柱(InnovativeTechnology,
Figure BDA0000381115570001161
VA)来获得无水溶剂。所有取代的聚苯乙烯树脂(100-200目,1%DVB)购自
Figure BDA0000381115570001162
或
Figure BDA0000381115570001163
Grubbs’II催化剂购自Materia
Figure BDA0000381115570001164
固相反应在210或圆底烧瓶中进行，并在多孔漏斗(frittedfunnel)中过滤。通过薄层色谱法(TLC)监测反应，所述薄层色谱在0.25mmE.
Figure BDA0000381115570001166
硅胶板(60F-254)上进行，使用紫外光作为显色剂(visualizing agent)和用10%乙醇磷钼酸或香草醛溶液并加热作为展开剂。E.
Figure BDA0000381115570001167
硅胶(60,粒度0.040-0.063mm)用于急骤柱色谱法。在0.25mm E.
Figure BDA0000381115570001168
硅胶板上进行PTLC(制备薄层色谱法)。在Bruker
Figure BDA0000381115570001169
仪器上记录NMR波谱，并通过使用残留的未氘代溶剂作为内标进行校准。下述缩写用于解释多重性：s=单峰,d=双峰,t=三重峰,q=四重峰,m=多重峰,b=宽峰。在Perkin-Elmer1600系列FT-IR分光计上记录IR光谱。使用Agilent
Figure BDA00003811155700011610
HPLC和
Figure BDA00003811155700011611
micro-TOF仪器(ESI)记录LC-MS。除非另有说明，使用
Figure BDA00003811155700011612
C8(5cm x4.6mm,5μm颗粒)柱，在13分钟内按线性洗脱梯度以流速0.5ml/min从100%H2O(0.5%HCO2H)到100%MeCN进行。除非另有说明，通过在-78℃用正丁基锂(1.0当量)处理在THF中的二异丙胺(1.0当量)的溶液来制备浓度为0.566M的LDA并在使用前于该温度搅拌30分钟。
实施例1：合成化合物2-110的通用步骤
如在路线16中所描述，将酸2-95A或2-95b（1.0当量）、高烯丙醇（1.0当量）和三-(3-氯苯基)膦（2.0当量）的无水甲苯(0.05M)溶液在室温下用PS-DEAD（2.5当量，1.3mmol g-1）处理。搅拌10分钟后，将反应混合物在二氧化硅上过滤并用己烷/EtOAc（10/1，100mL）和己烷/EtOAc（3/1，100mL）洗涤。将3/1混合物减压浓缩以生成化合物2-115（60%-80%）。未经进一步纯化，将化合物2-115（1.0当量）和碘化四丁基铵（催化量）溶于DMF（0.15M），并用二异丙基乙胺（4.0当量）和(氯甲基)乙基醚（4.0当量）处理。在80℃搅拌过夜后，将反应混合物用EtOAc稀释并用饱和NH4Cl溶液洗涤若干次。将有机相经MgSO4干燥并减压浓缩以生成化合物2-110（80%-90%）。使用这种方法，制备多种化合物2-110。
Figure BDA0000381115570001171
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.04(s,1H),5.89(ddt,J=17.0,10.5,7.0Hz,1H),5.31(s,2H),5.21(s,2H),5.22-5.06(m,3H),3.79(q,J=7.0Hz,2H),3.72(q,J=7.0Hz,2H),2.48-2.44(m,2H),2.36(s,3H),2.01(qd,J=12.4,7.0Hz,1H),1.25(t,J=7.0Hz,3H),1.23(t,J=7.0Hz,3H),1.02(d,J=6.4Hz,3H),1.01(d,J=7.0Hz,3H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ167.3,154.0,152.9,134.8,,134.1,120.4,117.5,117.1,101.5,93.9,93.4,79.0,64.6,64.3,35.6,30.8,18.4,17.6,17.5,15.0(x2);HRMS(ESI-TOF)m/z437.1574([M+Na+],C21H31O6ClNa理论值437.1701)。
制备化合物2-217的下述非限制性实例。
Figure BDA0000381115570001181
实施例2：用于合成化合物2-118，2-119和2-140的通用步骤
如在路线16中所描述，在-78℃将化合物2-110或2-117（1.0当量）的无水THF（0.2M）溶液用新鲜制备的LDA（2.0当量）处理。之后立即将α,β-不饱和的Weinreb酰胺(N-甲氧基-N-甲基-3-[(4-氯-3-甲基-5-异噁唑基)-磺酰胺基]-2-噻吩甲酰胺)（S.V.Ley和I.R.Baxendale，Nat.Rev.DrugDiscov.，1:573(2002)）加入到此冷却的溶液中（1.0当量）。接着将所得到的混合物在-78℃搅拌10分钟并通过加入
Figure BDA0000381115570001182
树脂（20当量）终止反应。一旦暖至室温就将反应物在二氧化硅垫上过滤并用EtOAc洗涤。减压浓缩以获得期望的化合物2-118或2-119。未经任何进一步纯化，该化合物被直接用于复分解反应。当X=H时，观察到20%的相应1,4-加成化合物并纯化一部分混合物用于化合物2-118/2-119和2-140的表征（SiO2，0-20%EtOAc/环己烷梯度）。化合物2-118/2-119和2-140的说明性实例如下；它们的表征分别在每张图下面的正文中。
说明性化合物2-119
Figure BDA0000381115570001191
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ6.91(dt,J=15.8,6.7Hz,1H),6.87(d,J=1.8Hz,1H),6.53(d,J=1.8Hz,1H),6.19(d,J=15.8Hz,1H),5.91-5.77(m,2H),5.23(s,2H),5.22(s,2H),5.15-5.00(m,5H),3.87(s,2H),3.73(q,J=7.0Hz,4H),2.45-2.40(m,2H),2.35-2.29(m,2H),2.25-2.20(m,2H),2.00-1.92(m,1H),1.24(t,J=7.0Hz,6H),1.00(d,J=2.3Hz,3H),0.98(d,J=3.0Hz,3H);13CNMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ196.3,167.6,159.0,156.2,147.1,137.0,135.0,134.4,129.5,118.7,117.2,115.5,111.0,102.3,93.3,93.0,78.8,64.4,64.3,45.4,35.8,32.0,31.7,30.8,18.5,17.4,15.0(x2);HRMS(ESI-TOF)m/z511.2521([M+Na+],C28H40O7Na理论值511.2666)。
说明性化合物2-140
Figure BDA0000381115570001192
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ6.72(s,1H),6.57(s,1H),5.89-5.71(m,2H),5.20-5.16(m,4H),5.12-4.90(m,4H),4.33(t,J=6.8Hz,2H),3.69(2x q,J=7.0Hz,4H),3.57(s,3H),3.13(s,3H),2.69-2.64(m,1H),2.53-2.45(m,4H),2.32(m,2H),2.08-2.03(m,2H),1.19(t,J=6.8Hz,6H),1.01(t,J=6.5Hz,2H);HRMS(ESI-TOF)m/z508.2873([M+H+],C27H42O8N理论值508.2905)。
使用上面的步骤，制备下文所示的化合物2-118/2-119的下述非限制性实例。
化合物2-140的下述非限制实例可以根据此处所描述的步骤制备。
Figure BDA0000381115570001211
实施例3：复分解反应的通用步骤
如在路线16中所描述，将粗制的2-118或2-119（或当X=Cl时，2-118/2-119和2-140的混合物）的无水甲苯（2mM）溶液用Grubbs第二代催化剂（0.10当量）处理并在80℃加热12小时。将反应物冷却至室温并将混合物通过SiO2垫过滤，用CH2Cl2及随后的EtOAc/环己烷1/1混合物洗涤，并减压浓缩。通过急骤色谱法纯化（SiO2，0-25%EtOAc/环己烷梯度），获得化合物2-112或2-120或2-140（60%-85%，经两步），化合物2-112或2-120和2-140的说明性实例如下；它们的表征分别在每张图下面的正文中。
说明性化合物2-112/2-120:
Figure BDA0000381115570001221
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.14(s,1H),6.72-6.66(m,1H),5.88(d,J=15.2Hz,1H),5.33-5.17(m,6H),4.92-4.88(m,1H),4.21(d,J=17.0Hz,1H),3.92(d,J=17.0Hz,1H),3.79-3.67(m,4H),2.33-2.17(m,5H),2.07-1.96(m,2H),1.23(t,J=7.0Hz,3H),1.21(t,J=7.0Hz,3H),1.00(d,J=5.8Hz,6H);13CNMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ195.7,167.1,154.7,154.4,147.4,133.7,131.2,128.8,128.4,119.7,118.0,102.7,93.9,93.5,80.0,64.8,64.5,44.1,32.3,31.2,30.7,30.6,18.3,17.2,15.0,14.9;HRMS(ESI)m/z517.1844([M+Na+],C26H35O7ClNa理论值517.1964);[α]25 D+21.3(c1.00,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001222
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.49-7.47(m,2H),7.40-7.29(m,3H),7.10(s,1H),6.84-6.77(m,1H),5.98(d,J=15.2Hz,1H),5.78(d,J=8.8Hz,1H),5.44-5.30(m,4H),5.15(d,J=7.0Hz,1H),5.05(d,J=6.8Hz,1H),4.07(d,J=17.0Hz,1H),3.90(d,J=17.0Hz,1H),3.80(d,J=7.0Hz,2H),3.60-3.51(m,2H),2.68-2.62(m,1H),2.50-2.47(m,1H),2.38-2.29(m,2H),2.14-2.02(m,2H),1.25(t,J=7.0Hz,3H),1.17(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ195.7,166.7,154.8,154.2,147.3,140.7,133.3,132.1,128.5,128.3(x2),128.2,127.9,127.7,126.7(x2),120.1,118.1,102.9,93.9,93.4,77.4,64.8,64.4,44.5,40.5,30.7,15.0,14.9;HRMS(ESI)m/z551.1807([M+Na+],C29H33O7ClNa理论值551.1680);[α]25 D-40.4(c0.79,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001231
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.39-7.33(m,4H),7.31-7.27(m,1H),6.82(s,1H),6.82-6.75(m,1H),6.63(s,1H),6.02(d,J=16.4Hz,1H),5.35-5.29(m,2H),5.27-5.20(m,5H),4.16(d,J=14.6Hz,1H),3.79-3.70(m,4H),3.52(d,J=14.6Hz,1H),3.37(dd,J=13.4,4.1Hz,1H),2.78(dd,J=13.5,9.4Hz,1H),2.37-2.12(m,5H),2.06-2.02(m,1H),1.26(t,J=7.0Hz,3H),1.24(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ197.6,167.8,159.2,156.5,149.0,137.3,135.5,131.8,129.9,129.5(x2),128.6(x2),128.4,126.7,118.1,109.9,102.3,93.5,93.1,75.8,64.6,64.4,44.4,41.0,36.2,31.0,30.6,15.0(x2);HRMS(ESl)m/z531.2350([M+Na+],C30H36O7Na理论值531.2359);[α]25 D-24.1(c0.33,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001232
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.56-7.54(m,2H),7.41-7.29(m,3H),6.89-6.82(m,1H),6.78(d,J=2.3Hz,1H),6.61(d,J=1.8Hz,1H),6.06(d,J=16.4Hz,1H),5.98(dd,J=11.7,2.4Hz,1H),5.53-5.51(m,2H),5.20(d,J=7.0Hz,1H),5.17(d,J=6.4Hz,1H),5.07(d,J=7.0Hz,1H),4.96(d,J=7.0Hz,1H),4.20(d,J=14.6Hz,1H),3.73-3.68(m,2H),3.54-3.45(m,3H),2.71-2.66(m,1H),2.55-2.51(m,1H),2.38-2.32(m,2H),2.23-2.06(m,2H),1.22(t,J=7.0Hz,3H),1.14(t,J==7.0Hz,3H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ197.6,167.4,159.3,156.6,149.0,140.8,135.6,132.2,129.9,128.5,128.2(x2),127.9,126.9(x2),117.9,109.9,102.3,93.2,93.0,76.6,64.4,64.3,44.4,40.5,31.0,30.6,15.0,14.9;HRMS(ESI)m/z517.2062([M+Na],C29H34O7Na理论值517.2197)。[α]25 D-108.3(c1.00,CHCl3)。
说明性化合物2-121:
Figure BDA0000381115570001241
4种非对映异构体的混合物：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ6.77(s,1H),6.52(s,0.5H),6.46(s,0.5H),5.59-5.37(m,2H),5.21-5.18(m,4H),5.09-4.92(m,1H),3.75-3.70(m,4H),3.53-3.48(m,3H),3.38-3.34(m,1H),3.19-3.10(m,3H),2.65-2.47(m,3H),2.29-2.04(m,6H),1.89-1.72(m,2H),1.31-1.20(m,6H),1.06-0.96(m,6H);HRMS(ESI-TOF)m/z544.2907([M+Na+],C28H43O8NNa理论值544.2881)。
Figure BDA0000381115570001242
4种非对映异构体的混合物：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.51-7.42(m,2H),7.38-7.31(m,3H),6.73-6.70(m,1H),6.60-6.49(m,1H),6.45-6.31(m,1H),5.73-5.39(m,2H),5.23-5.00(m,4H),3.75-3.69(m,2H),3.56-3.34(m,6H),3.19-3.09(m,3H),2.66-2.08(m,8H),1.31-1.19(m,5H),1.10-1.04(m,3H);HRMS(ESI-TOF)m/z578.2715([M+Na+],C31H41O8NNa理论值578.2724)。
实施例4：用于EOM脱保护以生成化合物脱保护的-2-121和2-85的通用步骤。
如在用于化合物2-103/2-85的路线17中所描述，向相应的化合物2-120/2-112或2-121(1.0当量)的MeOH（0.03M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol/g）并将悬浮液在40℃振摇1至4小时。将反应混合物过滤并将甲醇溶液减压浓缩。用急骤色谱法纯化（SiO2，0-20%EtOAc/环己烷梯度），获得相应的化合物脱保护的-2-121或化合物2-103/2-85。（＞90%）。化合物脱保护的-2-121和2-103/2-85的说明性实例如下；它们的表征分别在每张图下面的正文中。
说明性化合物脱保护的-2-121:
Figure BDA0000381115570001251
4种非对映异构体的混合物：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ11.54(s,1H),6.33(d,J=2.3Hz,1H),6.25(s,1H),5.53-5.51(m,1H),5.44-5.41(m,1H),5.11-5.08(m,1H),4.01(d,J=11.7Hz,2H),3.45(s,3H),3.11(s,3H),2.83-2.73(m,1H),2.68-2.59(m,1H),2.27-2.20(m,1H),2.10-1.87(m,6H),1.82-1.72(m,1H),1.01-0.94(m,6H);HRMS(ESI-TOF)m/z428.2109([M+Na+],C22H31O6NNa理论值428.2044)。
说明性化合物2-103/2-85:
Figure BDA0000381115570001252
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ12.31(s,1H),6.83(s,1H),6.74-6.67(m,1H),5.84(bs,1H),5.82(d,J=15.8Hz,1H),5.03-4.95(m,1H),4.88-4.86(m,1H),4.76-4.70(m,1H),4.40(d,J=17.6Hz,1H),4.15(d,J=17.5Hz,1H),2.40-2.34(m,1H),2.22-2.18(m,1H),1.87-1.65(m,4H),1.53-1.48(m,1H),0.92(d,J=6.4Hz,3H),0.66(d,J=7.0Hz,3H);13C NMR(C6D6,100MHz,25℃)δ193.7,164.2,156.8,145.8,137.2,131.8,129.3,126.3,115.3,107.9,103.6,82.1,46.4,33.3,30.9,30.7,28.8,20.1,18.5,18.3;HRMS(ESI-TOF)m/z401.1170([M+Na+],C20H23ClO5Na理论值401.1126);[α]25 D-35.6(c0.52,CHCl3)。
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ12.0(bs,1H),7.32-7.29(m,3H),7.19-7.15(m,2H),6.86-6.79(m,1H),6.51(d,J=2.4Hz,1H),6.27-6.25(m,1H),6.11(d,J=2.4Hz,1H),6.02(d,J==15.8Hz,1H),5.49(s,1H),5.17-5.10(m,1H),4.97-4.90(m,1H),4.40(d,J=16.4Hz,1H),3.97(d,J=17.2Hz,1H),2.83-2.76(m,1H),2.45-2.38(m,1H),1.89-1.78(m,2H),1.67-1.58(m,2H);13C NMR(C6D6,100MHz,25℃)δ196.5,169.6,166.1,161.3,146.0,140.5,138.8,132.1,130.0,128.6(x2),127.3,126.6(x2),126.3,112.2,105.9,103.0,77.1,48.6,38.4,30.9,30.3;HRMS(ESI)m/z401.1271([M+Na+],C23H22O5Na理论值401.1359);[α]25 D-10.3(c0.25,CHCl3)。
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ12.43(s,1H),6.74(d,J=1.7Hz,1H),6.73-6.65(m,1H),6.48(d,J=1.7Hz,1H),5.92(d,J=15.8Hz,1H),5.12-5.00(m,2H),4.91-4.80(m,1H),4.19(d,J=17.0Hz,1H),3.84(d,J=16.4Hz,1H),2.77(m,1H),2.64-2.57(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.89-1.70(m,3H),1.61-1.56(m,2H),1.30-1.21(m,2H),0.90(t,J=6.7Hz,3H);3C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ197.5,169.9,165.6,160.6,147.5,140.2,131.9,129.5,127.0,112.8,106.1,102.9,76.2,48.7,35.7,34.3,31.1,29.7,19.4,13.8;HRMS(ESI-TOF)m/z367.1330([M+Na+],C20H24O5Na理论值367.1521);[α]25 D+21.6(c0.36,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001271
1H NMR(CD3OD，400MHz，25℃)δ6.78-6.71(m，1H)，6.29(d，J=2.4Hz，1H)，6.22(d，J=2.0Hz，1H)，5.87(d，J=15.5Hz，1H)，5.37-5.23(m，3H)，4.01(d，J=17.2Hz，1H)，3.92(d，J=17.0Hz，1H)，2.67-2.61(m，1H)，2.29-2.15(m，5H)，1.31(d，J=6.4Hz，3H);13C NMR(CD3OD，100MHz，25℃)δ198.5，169.8，164.2，162.3，148.4，139.1，131.6，129.6，127.3，111.7，101.7，72.0，47.7，36.8，30.8，30.7，17.4，(1个季碳不可见);HRMS(ESI)m/z339.1141([M+Na]，C18H20O5Na理论值339.1203)。[α]25 D-45.1(c0.27，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001272
1H NMR(CD3OD,400MHz,25℃)δ6.74-6.68(m,1H),6.48(s,1H),5.86(d,J=15.2Hz,1H),5.31-5.25(m,2H),4.39(t,J=5.3Hz,2H),4.27(s,2H),2.43-2.40(m,2H),2.25(m,4H);13C NMR(CD3OD,100MHz,25℃)δ196.9,170.1,161.9,158.1,147.8,135.9,130.9,130.2,129.9,115.2,107.3,102.4,65.9,46.2,31.3,30.9,30.5;HRMS(ESI)m/z337.0797([M+H+],C17H18O5Cl理论值337.0837)。
实施例5：合成化合物2-141的通用步骤。
如在路线17中所描述，在0℃，向相应的化合物2-120/2-112(1.0当量)的MeOH（0.03M）溶液中加入BER-树脂（
Figure BDA0000381115570001273
上的硼氢化物，1.0当量，2.5mmol g-1）并搅拌反应物12小时以上。接着，过滤反应物并减压浓缩。通过急骤色谱法纯化（SiO2，0-20%EtOAc/环己烷梯度），获得两种非对映异构体的混合物（1：1）2-141（～60%）。化合物2-141的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-141:
1H NMR(CD3Cl,400MHz,25℃)δ7.05(s,1H),6.99(s,1H),5.64-5.57(m,2H),5.54-5.53(m,2H),5.49-5.35(m,6H),5.31-5.28(m,4H),5.24-5.16(m,4H),5.13-5.08(m,1H,35’),4.68(m,1H,35’),4.56(m,1H,35),3.81-3.69(m,8H),3.25(dd,J=13.9,8.0Hz,1H,35),3.19(dd,J=13.7,4.8Hz,1H,35’),3.11(dd,J=13.5,10.1Hz,1H,35’),2.90(dd,J=13.9,5.12Hz,1H,35),2.35(m,9H),2.09-1.95(m,1H),1.80-1.70(m,2H),1.39(d,J=2.9Hz,3H,35),1.37(d,J=3.2Hz,3H,35’),1.24(2x q,J=6.9和5.0Hz,12H,35+35’);HRMS(ESI)m/z491.1729([M+Na+],C24H33ClO7Na理论值491.1807)。
实施例6：合成化合物2-142的通用步骤。
如在路线17中所描述，向相应的化合物2-141(1.0当量)的MeOH（0.02M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol g-1）并将悬浮液在40℃振摇4小时。接着将反应混合物过滤并减压浓缩甲醇溶液。通过制备TLC纯化（SiO2，25%EtOAc/环己烷），获得2-142（～90%），为两种非对映异构体的混合物（1：1）。化合物2-142的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-142:
Figure BDA0000381115570001282
1H NMR((CD3)2CO,400MHz)δ12.30(s,2H),11.43(s,2H),6.75(s,2H),6.00(bdd,J=6.4,6.2Hz,1H),5.97(bdd,J==6.4,6.2Hz,1H),5.97(bd,J=6.7Hz,1H),5.77(bd,J=6.7Hz,1H),5.57-5.48(m,4H),5.18-5.14(m,2H),3.38-3.28(m,3H),3.02(dd,J=16.1,10.5Hz,1H),2.41-2.09(m,12H),1.11(d,J=6.2Hz,6H);HRMS(ESI)m/z375.1029([M+Na+],C18H21ClO5Na理论值375.0970)。
实施例7：合成化合物2-143的通用步骤。
如在路线17中所描述，在23℃，向相应的化合物2-141(1.0当量)的DMF（0.02M）溶液中加入Ac2O（1.2当量）、吗啉甲基聚苯乙烯（1.2当量，3.2mmol g-1）和DMAP(0.05当量)，并将混合物搅拌30分钟，随后通过TLC直到原料被消耗。接着将树脂过滤并减压浓缩有机相。通过PTLC纯化（SiO2，20%EtOAc/环己烷），获得作为两种非对映异构体混合物（1：1）的相应的2-143（～80%）。化合物2-143的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-143:
Figure BDA0000381115570001291
1H NMR(CD3Cl,400MHz)δ7.04(s,1H),7.01(s,1H),5.86(dd,J=15.0,6.9Hz,1H),5.67(dd,J=12.4,6.2Hz,1H),5.60-5.54(m,4H),5.48(dd,J=7.2,7.2Hz,1H),5.41-5.34(m,3H),5.32-5.30(m,4H),5.28-5.23(m,2H),5.21(dd,J=11.0,6.7Hz,2H),5.17(dd,J=11.8,6.9Hz,2H),3.81-3.69(m,8H),3.43(dd,J=14.2,7.5Hz,1H),3.23-3.15(m,2H),2.85(dd,J=13.9,5.4Hz,1H),2.30-2.17(m,8H),2.12(s,3H),2.06(s,3H),1.95-2.00(m,4H),1.39(2x d,J=5.6Hz,6H),1.24(m,12H);HRMS(ESI)m/z533.1864([M+Na+],C26H35ClO8Na理论值533.1913)。
实施例8：合成化合物2-144的通用步骤。
如在路线17中所描述，向相应的化合物2-143(1.0当量)的MeOH（0.02M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol/g）并将悬浮液在40℃振摇4小时。将反应混合物过滤并减压浓缩甲醇溶液。通过TPLC纯化（SiO2，20%EtOAc/环己烷），获得化合物2-144（～60%收率）。化合物2-144的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-144:
Figure BDA0000381115570001301
非对映异构体2:1的混合物：1H NMR(CD3Cl,400MHz)δ12.6(s,1H),12.12(s,0.5H),6.93(d,J=8.7Hz,0.5H),6.66(s,1H),6.64(s,0.5H),6.62-6.60(m,1H),6.10-6.05(m,3H),5.47-5.33(m,4.5H),2.60-2.53(m,1.5H),2.26-2.02(m,7.5H),1.44(d,J=6.2Hz,1.5H),1.43(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z357.0898([M+Na+],C18H19ClO4Na理论值357.0864)。
实施例9：合成化合物2-145的通用步骤。
如在路线18中所描述，向相应的化合物2-85(1.0当量)的甲醇（0.03M）溶液中加入氨基磺酸树脂（10.0当量）并将悬浮液在40℃搅拌15小时。接着将反应物过滤，并用CH2Cl2洗涤树脂若干次。减压浓缩，接着在PTCL上纯化（己烷/EtOAc：1/1），获得期望的化合物2-145，为非对映异构体混合物（2：1）。化合物2-145的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-145:
Figure BDA0000381115570001302
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ12.28(s,0.4H),11.91(s,0.6H),7.21-7.11(m,5H),6.62(s,1H),6.03-6.01(m,1H),5.58(bs,1H),5.38-5.33(m,1H),5.27-5.20(m,1H),4.76(d,J=17.5Hz,0.6H),4.02(d,J=17.0Hz,0.4H),4.18(d,J=18.1Hz,0.6H),4.09(d,J=17.0Hz,0.4H),3.87(bs,0.4H),3.81(bs,0.6H),3.15(s,1.8H),3.12(s,1.2H),2.83-2.78(m,1H),2.45-2.30(m,2H),2.18-2.16(m,1H),2.02-1.97(m,2H),1.79-1.72(m,2H);HRMS(ESI-TOF)m/z467.1366([M+Na+],C24H25O6ClNa理论值467.1232)。
实施例10：合成化合物2-146的通用步骤。
如在路线19中所描述，23℃下，向相应的化合物2-103/2-85(1.0当量)的CH2Cl2/AcOH10/1（0.08M）溶液中加入氰基硼氢化(聚苯乙烯基甲基)三甲基铵（2.0当量，3.5mmol g-1），并通过TLC监测反应物直到原料被消耗（4小时）。接着将树脂过滤并减压浓缩有机相。通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷），获得化合物2-146（50%-60%）。化合物2-146的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物15：
Figure BDA0000381115570001311
1H NMR(CD3Cl,400MHz)δ11.75(s,1H),6.65(s,1H),5.48(m,2H),5.49(ddt,J=6.1,3.5,2.9Hz,1H),4.53(d,J=17.5Hz,1H),4.04(d,J=17.7Hz,1H),2.61-2.54(m,2H),2.48-2.28(m,3H),2.19-2.14(m,1H),2.08-1.99(m,1H),1.72-1.61(m,3H),1.41(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z375.1050([M+Na+],C18H21ClO5Na理论值375.0970)。
实施例11：合成化合物2-147的通用步骤。
如在路线19中所描述，向相应的化合物2-103/2-85(1.0当量)的THF（0.05M）溶液中顺序加入相应的醇（2.0当量）、三苯基膦（2.0当量）和乙氧基羰基偶氮羧甲基聚苯乙烯（2.0当量，1.3mmol g-1）。将反应混合物在室温下振摇8小时，并接着过滤树脂，滤液直接通过PTLC纯化（SiO2，10%EtOAc/环己烷）以获得伴有双烯丙基化产物的化合物2-147的混合物（78%）。化合物2-147的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-147:
含有相应的双烯丙基化的化合物的混合物（1：1）：1H NMR(CD3Cl,400MHz)δ11.83(s,1H),6.82(ddd,J=15.7,8.2,4.6Hz,1H),6.72-6.65(m,1H),6.46(s,1H),6.41(s,1H),6.09-5.98(m,3H),5.82(d,J=15.7Hz,1H),5.46-5.16(m,8H),4.57-4.54(m,3H),4.51-4.49(m,3H),4.19(d,J=17.5Hz,1H),4.11(d,J=14.6Hz,1H),3.78(d,J=17.0Hz,1H),3.51(d,J=14.2Hz,1H),2.76-2.69(m,1H),2.38-2.05(m,11H),1.42(d,J=6.2Hz,3H),1.35(d,J=6.3Hz,3H);单烯丙基化的化合物HRMS(ESI)m/z413.1103([M+Na+],C21H23ClO5Na理论值413.1132);双烯丙基化的化合物HRMS(ESI)m/z453.1422([M+Na+],C24H27ClO5Na理论值453.1449)。
实施例12：合成化合物2-148的通用步骤。
如在路线19中所描述，23℃下，向相应的化合物2-103/2-85(1.0当量)的CH2Cl2（0.05M）溶液中加入TBD-甲基聚苯乙烯（2.0当量，2.9mmolg-1）和相应的烷基溴或烷基氯（BrCH2COOtBu，EOMCl）（0.9当量）并将混合物振摇3小时。接着过滤树脂并减压浓缩滤液。通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷），获得相应的化合物2-148（＞90%）。化合物2-148的说明性实例如下；它们的表征数据分别显示每张图下的正文中。
说明性化合物2-148:
Figure BDA0000381115570001322
1H NMR(CD3Cl,400MHz,)δ11.84(s,1H),6.69(m,1H),6.41(s,1H),5.76(d,J=15.0Hz,1H),5.43(m,1H),5,26(ddd,J=15.0,9.1,4.8Hz,1H),5.18-5.11(m,1H),4.65(s,2H),4.33(d,J=17.7Hz,1H),4.16(d,J=17.5Hz,1H),2.65-2.58(m,1H),2.37-2.34(m,2H),2.25-2.21(m,1H),2.12-2.01(m,2H),1.53(s,9H),1.34(d,J=6.5Hz,3H);HRMS(ESI)m/z487.1498([M+Na+],C24H29ClO7Na理论值487.1494)。
Figure BDA0000381115570001331
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.76(s,1H),6.86(s,1H),6.70(dt,J=14.9,7.3Hz,1H),5.77(d,J=15.8Hz,1H),5.46-5.42(m,1H),5.37(s,2H),5.30-5.19(m,2H),4.34(d,J=17.6Hz,1H),4.16(d,J=18.1Hz,1H),3.80(q,J=7.0Hz,2H),2.66-2.59(m,1H),2.37-2.34(m,2H),2.26-2.21(m,1H),2.13-2.06(m,2H),1.34(d,J=6.4Hz,3H),1.27(t,J=7.0Hz,3H);HRMS(ESI)m/z([M+Na],C21H25O6ClNa理论值431.1237)。
实施例13：合成化合物2-149的通用步骤。
如在路线19中所描述，23℃下，向化合物2-103/2-85(1.0当量)的丙酮/H2O10/1（0.05M）溶液中加入OsO4（0.1当量），之后加入NMO（1.0当量），并将混合物搅拌1小时。将粗制混合物通过硅胶短柱过滤，浓缩并通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷），以获得化合物2-149（＞70%），为两种非对映异构体的混合物。化合物2-149的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-149:
Figure BDA0000381115570001332
1H NMR(CD3OD,400MHz)δ7.19(m,1H),6.89-6.81(m,1H),6.52(s,1H),6.47(s,1H),6.20(d,J=16.1Hz,1H),6.04(d,J=15.6Hz,1H),5.54-5.49(m,1H),5.43-5.36(m,1H),4.50(d,J=17.7Hz,1H),4.46(d,J=17.7Hz,1H),4.39(d,J=17.2Hz,1H),4.07(d,J=17.2Hz,1H),3.80-3.64(m,2H),3.51-3.46(m,2H),2.62-2.58(m,2H),2.39-2.30(m,2H),2.27-2.18(m,2H),2.08-2.98(m,2H),2.00-1.85(m，4H)，1.44(d，J=6.4Hz，6H);HRMS(ESI)m/z407.1031([M+Na+]，C18H21ClO7Na理论值407.0868)。
实施例14：合成化合物2-150的通用步骤。
如在路线19中所描述，0℃下，向化合物2-103/2-85(1.0当量)的CH3CN（0.03M）溶液中加入新鲜制备的DMDO（1.2当量，0.04M，在丙酮中）并将混合物搅拌30分钟。在减压蒸发溶剂后，通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷），获得环氧化物2-150（＞90%），为两种非对映异构体的混合物。化合物2-150的说明性实例如下；它们的表征数据分别显示在每张图下的正文中。
说明性化合物2-150:
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ11.84(s,2H),6.94-6.82(m,2H),6.69(s,1H),6.66(s,1H),6.23(d,J=17.1Hz,1H),6.11(dd,J=13.2,1.6Hz,1H),5.39(tdd,J=7.5,3.2,2.7Hz,1H),5.32(m,1H),4.53(d,J=17.7Hz,2H),4.27(d,J=17.7Hz,2H),2.79-2.76(m,1H),2.74-2.69(m,1H),2.58(m,1H),2.56(m,1H),2.47-2.24(m,8H),2.13-2.08(m,1H),2.05-2.03(m,1H),1.91(dd,J=4.3,4.3Hz,1H),1.87(dd,J=4.3,4.3Hz,1H),1.51(d,J=6.4Hz,3H),1.35(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z389.0724([M+Na+],C18H19ClO6Na理论值389.0762)。
Figure BDA0000381115570001342
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.56(2x s,2H),6.92-6.82(m,2H),6.71(s,1H),6.67(s,1H),6.20(m,3H),6.06(d,J=15.8Hz,1H),5.11(bs,1H),5.94(m,1H),4.46(2x d,J=18.1Hz,2H),4.20(2x d,J=18.1Hz,2H),2.72-2.70(m,2H),2.53-2.48(m,4H),2.38-2.35(m,3H),2.25-2.13(m,5H),1.84-1.77(m,2H),1.05-1.01(m,6H),0.91-0.88(m,3H),0.86-0.84(m,3H);HRMS(ESI)m/z417.1128([M+Na+],C20H23O6ClNa理论值417.1075)。
Figure BDA0000381115570001351
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.80(2x s,2H),7.43-7.18(m,10H),7.03-6.95(m,2H),6.69(s,1H),6.61(s,1H),6.30(d,J=16.4Hz,1H),6.21(d,J=15.8Hz,1H),6.15-6.10(m,1H),6.03(d,J=11.1Hz,1H),4.84(2x d,J=18.1Hz,2H),4.41(2x d,J=17.6Hz,2H),2.68-2.60(m,4H),2.41-2.27(m,8H),1.83-1.76(m,4H);HRMS(ESI)m/z451.1028([M+Na],C23H21O6ClNa理论值451.0919)。
Figure BDA0000381115570001352
主要异构体： 1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.94(s,1H),7.36-7.28(m,5H),6.95-6.88(m,1H),6.42(s,1H),6.22(s,1H),6.11(d,J=15.8Hz,1H),5.47(m,1H),5.41(bs,1H),4.43(d,J=17.5Hz,1H),3.56(d,J=17.6Hz,1H),3.19(dd,J=13.7,6.0Hz,1H),3.03(dd,J=13.7,7.9Hz,1H),2.87(bs,1H),2.70-2.28(m,4H),2.03-1.93(m,2H);HRMS(ESI)m/z431.1578([M+Na],C24H24O6Na理论值431.1465)。
Figure BDA0000381115570001353
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.98(s,1H),6.91-6.83(m,1H),6.43(d,J=2.3Hz,1H),6.24(d,J=2.4Hz,1H),6.11(d,J=15.8Hz,1H),5.35(bs,1H),5.29(m,1H),4.52(d,J=17.5Hz,1H),3.63(d,J=17.5Hz,1H),2.77(m,2H),2.57-2.52(m,2H),2.46-2.27(m,2H),2.14-2.10(m,1H),1.93-1.88(m,1H),1.48(d,J=6.4Hz,3H);其他异构体:1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.67(s,1H),6.89-6.83(m,1H),6.40(d,J=2.4Hz,1H),6.24(d,J=2.9Hz,1H),6.21(d,J=16.4Hz,1H),5.37(bs,1H),5.22(m,1H),4.20(d,J=17.0Hz,1H),4,06(d,J=17.0Hz,1H),2.74(m,2H),2.57-2.20(m,4H),1.80-1.76(m,1H),1.68-1.60(m,1H),1.37(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z355.1249([M+Na],C18H20O6Na理论值355.1152)。
实施例15：合成化合物2-151的通用步骤。
如在路线20中所描述，23℃下，向化合物2-120(1.0当量)的二噁烷（0.05M）溶液中加入浓HCl（20当量），并将混合物搅拌3小时。之后通过硅胶短柱过滤反应物，减压蒸发溶剂，并通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷）以获得化合物2-151（＞75%），为两种非对映异构体的混合物。化合物2-151的说明性实例如下；它们的表征数据分别显示在每张图下的正文中。
说明性化合物2-151:
Figure BDA0000381115570001361
1NMR(CDCl3,400MHz)δ12.11(s,1H),11.78(s,1H),6.51(s,1H),6.43(s,1H),6.41(d,J=2.4Hz,1H),6.37(d,J=2.7Hz,1H),6.21(d,J=2.4Hz,1H),6.11(d,J=2.4Hz,1H),5.59-5.51(m,3H),5.40-5.32(m,3H),4.54(d,J=17.2Hz,1H),4.42(d,J=17.2Hz,1H),3.60(d,J=17.2Hz,1H),3.45(d,J=17.0Hz,1H),3.28(dd,J=18.5,9.4Hz,1H),3.11(dd,J=13.7,6.2Hz,1H),3.07(dd,J=13.4,4.6Hz,1H),2.76(dd,J=19.0,6.2Hz,1H),2.62(ddd,J=15.5,8.8,4.0Hz,1H),2.54(ddd,J=15.3,6.2,3.2Hz,1H),2.40-2.26(m,4H),2.25-2.13(m,4H),2.03-1.91(m,2H),1.42(d,J=6.4Hz,3H),1.40(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z375.0928([M+Na+],C18H21ClO5Na理论值375.0970)。
Figure BDA0000381115570001371
1H NMR(C6D6,400MHz,25℃)δ11.76(s,0.5H),11.36(s,0.5H),7.40-7.29(m,5H),6.65(s,0.5H),6.62(s,0.5H),6.18(t,J=5.8Hz,1H),6.14(s,0.5H),6.12(s,0.5H),5.67-5.62(m,1H),5.55-5.49(m,1H),4.93(d,J=18.1Hz,0.5H),4.80(d,J=17.1Hz,0.5H),4.58-4.56(m,1H),4.38(d,J=18.1Hz,0.5H),4.18(d,J=17.1Hz,0.5H),3.33-3.27(m,1H),3.10(dd,J=18.4,3.8Hz,0.5H),2.84-2.68(m,2.5H),2.42-2.32(m,2H),2.23-2.17(m,1H),2.13-2.04(m,1H);HRMS(ESI-TOF)m/z471.0754([M+Na+],C23H22O5Cl2Na理论值471.0737)。
实施例16：从化合物2-151消除β-Cl的通用步骤。
如在路线20中所描述，23℃下，向化合物2-151(95mg，270μmol)的CH2Cl2（5mL）溶液中加入PS-TBD（51mg，2.6mmol/g），并将混合物搅拌8小时。之后过滤反应物，减压蒸发溶剂，并用急骤色谱法纯化（SiO2，0-30%EtOAc/环己烷梯度），获得2-103（X=Cl，R=Me）（84mg，98%）。
实施例17：合成化合物2-153的通用步骤。
如在路线20中所描述，23℃下，向化合物2-103（X=Cl，R=Me）（12.9mg，40.8μmol）的CH2Cl2（1ml）溶液中加入DHP（3.7μL，40.8μmol）和PS-TsOH（12.7mg，40.8μmol，3.2mmol/g），并将混合物搅拌5小时。之后过滤反应物并减压蒸发溶剂。通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷），获得2-153（13.8mg，85%），为两种非对映异构体的混合物。化合物2-153的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-153:
Figure BDA0000381115570001381
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ12.33(s,1H),12.11(s,1H),9.45(s,1H),9.40(s,1H),6.67(m,2H),6.28(2x s,2H),5.83(d,J=13.2Hz,1H),5.79(d,J=12.9Hz,1H),5.35-5.30(m,3H),5.27-5.22(m,3H),5.06(bd,J=8.2Hz,2H),4.10(d,J=17.5Hz,2H),3.90-3.85(m,1H),3.80-3.76(m,1H),3.65(d,J=17.7Hz,2H),3.57-3.52(m,2H),3.46-3.41(m,2H),2.77-2.71(m,3H),2.53-2.49(m,3H),2.36-2.29(m,4H),2.24-1.56(m,12H),1.31(d,J=6.4Hz,3H),1.28(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z423.1778([M+Na+],C23H28O6Na理论值423.1778。
实施例18：合成化合物2-154的通用步骤。
如在路线20中所描述，向相应的化合物2-120(1.0当量）的吡啶/AcOH（5/1，0.03M）溶液中加入相应的羟胺（5.0当量）并将混合物加热至40℃。搅拌过夜后，伴有SiO2减压蒸发溶剂。用30%的EtOAc/环己烷混合物在SiO2短程上洗脱化合物，在蒸发之后获得为两种非对映异构体混合物（顺式/反式）的2-154（～99%）。化合物2-154的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-154:
Figure BDA0000381115570001382
1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.50-7.25(m,10H),6.82(s,1H),6.75(s,1H),6.66(s,1H),6.48(s,1H),6.24-6.11(m,2H),6.11-6.05(m,2H),5.45-5.38(m,4H),5.34-5.31(m,14H),4.50(d,J=17.2Hz,1H),3.38-3.65(m,8H),3.60(d,J=17.1Hz,1H),3.54(d,J=17.1Hz,1H),3.24(d,J=17.2Hz,1H),2.48-2.36(m,4H),2.17-2.21(m,2H),2.04-2.11(m,2H),1.95-1.83(m,2H),1.62-1.51(m,2H),1.49(d,J=6.4Hz,6H),1.20-1.32(m,12H);13C NMR(CDCl3,100MHz)δ168.02,167.85,159.08,158.83,157.23,155.55,155.36,154.19,140.75,138.23,138.19,137.75,136.93,136.74,132.32,132.28,128.34(x2),128.31(x2),128.18,128.09(x2),127.99(x2),127.71,127.63,125.50,118.82,118.56,118.34,108.84,108.50,101.72,101.68,93.49,93.44,93.12(x2),77.21,76.02,75.88,71.18,70.99,64.47,64.45,64.33,64.31,39.99,39.96,34.87,32.42,32.31,31.63,31.09,28.86,20.25,20.19,15.04(x2),14.98(x2);HRMS(ESI)m/z560.2627([M+Na+],C31H39NO7Na理论值560.2619。
实施例19：合成化合物2-155的通用步骤。
如在路线20中所描述，向化合物2-154(1.0当量）的MeOH（0.02M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol/g）并将悬浮液在40℃下振摇4小时。过滤反应混合物并减压浓缩甲醇溶液。获得的粗产物未经进一步纯化而用于下一步骤。然后，23℃下，向该粗制品的CH2Cl2（0.02M）溶液中加入DHP（1.0当量）和PS-TsOH（催化剂，3.2mmol/g），并将混合物搅拌5小时。之后过滤混合物，减压蒸发溶剂，并通过PTLC纯化（SiO2，30%EtOAc/环己烷），获得2-155的两种不同的非对映异构体1：1（～65%）。化合物2-155的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-155:
Figure BDA0000381115570001391
较小极性的非对映异构体：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ9.25(s,1H),9.24(s,1H),7.46-7.33(m,10H),6.29(s,1H),6.26(s,1H),6.07-6.02(m,2H),5.75(d,J=15.8Hz,1H),5.69(d,J=15.8Hz,1H),5.44-5.38(m,6H),5.23(s,4H),5.03(d,J=8.8Hz,2H),4.34-4.13(m,6H),3.69-3.63(m,2H),2.70-2.67(m,2H),2.30-2.16(m,6H),2.08-1.94(m,8H),1.73-1.65(m,8H),1.42(t,J=6.4Hz,3H),1.39(t,J=7.0Hz,3H);HRMS(ESI)m/z528.2562([M+Na+],C30H35NO6Na理论值528.2357。
较大极性的非对映异构体：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ11.61(s,1H),9.27(s,1H),7.41-7.33(m,5H),6.62(d,J=16.4Hz,1H),6.47(s,1H),6.15-6.07(m,1H),5.50-5.38(m,3H),5.16(s,2H),5.04(d,J=10.5Hz,1H),4.30(d,J=15.2Hz,1H),4.24(d,J=10.5Hz,1H),3.84(d,J=15.2Hz,1H),3.66(t,J=11.4Hz,1H),2.71-2.65(m,1H),2.28-2.08(m,6H),1.73-1.64(m,5H),1.38(t,J=7.0Hz,3H);HRMS(ESI)m/z528.2494([M+Na+],C30H35NO6Na理论值528.2357。
实施例20：合成化合物2-128的通用步骤。
如在路线21中所描述，向pochonin D（2-85，X=Cl且R=Me）(25mg，71.2μmol）的DMF（5mL）溶液中加入TBSCl（53.6mg，356μmol）和咪唑（23.6mg，356μmol）并将混合物在室温搅拌3小时。用柱色谱法纯化（SiO2，0-30%EtOAc/环己烷梯度），在蒸发后获得2-128（40mg，98%）。化合物2-128的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-128:
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ6.71(dt,J=15.3,7.3Hz,1H),6.45(s,1H),5.81(d,J=15.3Hz,1H),5.25(s,2H),5.04-5.03(m,1H),3.89(d,J=17.4Hz,1H),3.57(d,J=17.4Hz,1H),2.31-2.04(m,6H),1.35(d,J=6.4Hz,3H),1.03(s,9H),0.99(s,9H),0.28-0.24(m,12H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ195.8,166.8,152.9,151.7,146.5,132.7,131.9,128.6,126.8,122.8,119.7,110.7,71.9,45.6,38.5,30.9,25.7(x4),25.6(x4),18.7,18.3,-4.1(x2),-4.4(x2);HRMS(ESI)m/z601.2568([M+Na],C30H47ClO5Si2Na理论值601.2543)。
实施例21：合成化合物2-157的通用步骤。
如在路线21中所描述，向化合物2-128（1.0当量）的吡啶/AcOH（5/1，250μl）溶液中加入相应的羟胺（5.0当量）并将混合物加热至40℃。搅拌过夜后，减压蒸发溶剂，并用30%的EtOAc/环己烷混合物在SiO2上过滤，在蒸发后获得2-157的两种异构体（～90%）。化合物2-157的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-157:
Figure BDA0000381115570001411
顺式肟1H NMR(CDCl3,400MHz,)δ7.42(bd,J=6.4Hz,2H),7.36(bdd,J=7.5,6.9Hz,2H),7.34-7.32(m,1H),6.52(d,J=16.1Hz,1H),6.38(s,1H),6.18-6.10(m,1H),5.36-5.32(m,2H),5.16(bs,2H),4.99-4.95(m,1H),3.79-3.76(m,2H),2.40-1.99(m,6H),1.45(d,J=6.2Hz,3H),1.03(s,9H),0.99(s,9H),0.28(s,3H),0.26(s,3H),0.20(s,6H);反式肟1H NMR(CDCl3,400MHz,)δ7.44(bd,J=6.5Hz,2H),7.37(bdd,J=7.6,6.9Hz,2H),7.33-7.31(m,1H),6.41(s,1H),6.04-5.97(m,1H),5.48(bd,J=15.0Hz,1H),5.29-5.27(m,1H),5.22(bs,2H),5.00-4.95(m,1H),3.98-3.89(m,2H),2.39-2.02(m,6H),1.37(d,J=5.9Hz,3H),1.04(s,9H),0.99(s,9H),0.28(s,3H),0.27(s,3H),0.23(s,3H),0.22(s,3H)。
实施例22：合成化合物2-158的通用步骤。
如在路线21中所描述，向相应的化合物2-157（1.0当量）的THF溶液中加入TBAF（2.5当量，1M的THF溶液）并将混合物在室温搅拌2小时。接着减压蒸发溶剂，并用30%的EtOAc/环己烷混合物在SiO2上过滤，在蒸发后得到＞85%收率的化合物2-158。化合物2-158的说明性实例如下；它的表征数据在图下的正文中。
说明性化合物2-158:
Figure BDA0000381115570001421
顺式：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ11.52(s,1H),7.45-7.34(m,5H),6.64(s,1H),6.09-6.02(m,2H),5.34-5.25(m,4H),5.18-5.08(m,2H),4.33(d,J=17.0Hz,1H),4.15(d,J=17.6Hz,1H),2.65-2.59(m,1H),2.27-2.14(m,3H),2.04-2.00(m,1H),1.88-1.83(m,1H),1.30(t,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z478.1372([M+Na+],C25H26ClNO5Na理论值478.1392)。
反式：1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ11.73(s,1H),7.32-7.26(m,5H),6.64(s,1H),6.50(d,J=16.4Hz,1H),6.06-5.98(m,2H),5.43-5.24(m,3H),4.91(s,2H),4.22(s,2H),2.61-2.55(m,1H),2.46-2.33(m,2H),2.20-2.02(m,3H),0.98(t,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI)m/z478.1522([M+Na+],C25H26ClNO5Na理论值478.1392)。
实施例23：经由三信环化(Mitsunobu cyclization)合成化合物2a-1的通用步骤。
如在路线25中所描述，由可商购的苔黑酚8开始制备化合物2a-1。以下的说明并非意在限制，且可以用相同的通用步骤制备可替换的类似物。
苔黑酚的甲酰化，醛9的合成。0℃下，向装有DMF（100mL）的烧瓶中缓慢加入POCl3（54.9mL，600mmol，2.0当量）。接着向该混合物中加入作为在DMF（100mL）中的溶液的苔黑酚（42.65g，300mmol，1.0当量）溶液，并使反应物暖至23℃并搅拌过夜。接着将反应物冷却至0℃并加入200mL冰水。通过加入10%的NaOH将混合物的pH值调节至6和7之间。将混合物静置30分钟，并接着过滤沉淀以获得期望的醛9（29.2g，64%），为白色固体，其被用于随后的步骤而未经进一步纯化：Rf=0.31(己烷/EtOAc3/1);1H NMR((CD3)2CO,400MHz,25℃)δ12.48(s,1H),10.10(s,1H),9.53(s,1H),6.30(d,J=2.4Hz,1H),6.17(d,J=2.0Hz,1H),2.54(s,3H);13C NMR((CD3)2CO,100MHz,25℃)δ194.3,167.3,166.2,146.1,113.8,111.5,101.4,18.2;HRMS(MALDI-TOF)m/z175.0373([M+Na+],C8H8O3Na理论值175.0371)。
Figure BDA0000381115570001431
双-EOM-保护，醛9b的合成。0℃下，向双-苯酚（bis-phenol）9（29.2g，191.9mmol）的DMF（400mL）溶液中依次加入iPr2NEt（95.2mL，575.7mmol，3.0当量）和EOMCl（52.3mL，575.7mmol，3.0当量）。将反应物暖至23℃并搅拌过夜。随后用饱和NH4Cl水溶液（100mL）终止反应，再用CH2Cl2（400mL）稀释。将有机层分离，用饱和NH4Cl水溶液（100mL×2）、盐水（100mL×2）洗涤，经无水Na2SO4（5.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc8/1）获得为无色油的被保护的醛9b（46.5g，90%）：Rf=0.51(己烷/EtOAc3/1);1HNMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ10.48(s,1H),6.71(d,J=2Hz,1H),6.49(d,J=2Hz,1H),5.27(s,2H),5.22(s,2H),3.72(q,J=6.9Hz,2H),3.69(q,J=6.9Hz,2H),2.54(s,3H),1.20(t,J=7.0Hz,3H),1.19(t,J=7.0Hz,3H);13CNMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ190.6,163.0,162.1,144.2,118.6,112.3,100.6,93.6,92.8,64.8,64.7,22.2,15.1(x2);HRMS(MALDI-TOF)m/z291.1224([M+Na+],C14H20O5Na理论值291.1209)。
Figure BDA0000381115570001432
氧化-氯化反应，酸10的合成。向醛9b（46.5g，173mmol）的THF（200mL）溶液中加入NaH2PO4（67.5g，433mmol，2.5当量）的H2O（200mL）溶液，并将混合物冷却至0℃。随后，向反应物中缓慢加入NaClO2（48.9g，85%，433mmol，2.5当量）的H2O（200mL）溶液。搅拌过夜后将混合物用EtOAc（500mL）稀释，用盐水（200mL×3）洗涤并经Na2SO4（5.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，获得为白色固体的酸10(49.6g，90%)，其被用于下一步骤而未经进一步纯化：Rf=0.66(CH2Cl2/MeOH9/1);1H NMR((CD3)2CO,400MHz,25℃)δ7.08(s,1H),5.34(s,2H),5.25(s,2H),3.75(q,J=7.1Hz,2H),3.71(q,J=7.1Hz,2H),2.34(s,3H),1.19(t,J=7.1Hz,3H),1.17(t,J=7.1Hz,3H);13C NMR((CD3)2CO,100MHz,25℃)δ168.1,154.9,153.9,135.1,121.8,117.3,102.8,94.7,94.6,65.2,65.0,17.6,15.4,15.4;HRMS(MALDI-TOF)m/z341.0713([M+Na+],C14H19ClO6Na理论值341.0768)。
Figure BDA0000381115570001441
三信酯化，酯11的合成。0℃下，向酸10（23.5g，73.7mmol）的甲苯（300mL）溶液中依次加入三甲基甲硅烷基乙醇(trimethylsilylethanol)（12.7mL，88.5mmol，1.2当量）、PPh3（28.9g，110.5mmol，1.25当量）和DIAD（21.7ml，110.5mmol，1.25当量）。允许将反应物暖至23℃并搅拌3小时。减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc20/1和10/1）获得为白色固体的酯11（24.7g，80%）：Rf=0.60(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ6.98(s,1H),5.28(s,2H),5.18(s,2H),4.41-4.36(m,2H),3.75(q,J=6.9Hz,2H),3.70(q,J=6.9Hz,2H),2.32(s,3H),1,21(t,J=7.1Hz,3H),1,20(t,J=7.1Hz,3H),1.12-1.07(m,2H),0.06(s,3H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ167.7,154.2,153.1,135.0,120.5,117.3,102.0,94.0,93.9,64.7,64.5,63.8,17.6,15.1(x2),-1.41(x3);HRMS(MALDI-TOF)m/z441.1487([M+Na+],C19H31ClO6SiNa理论值441.1476)。
Figure BDA0000381115570001442
二酯16的还原，二醇17a的合成。0℃下，向LiAlH4（15.2g，400mmol，4当量）的THF（300mL）悬浮液中滴加反式-3-己烯二酸二甲酯（17.2g，100mmol）的THF（100mL）溶液。将反应物搅拌2小时。之后通过加入H2O（15.2mL）、15%的NaOH（15.2mL）、以及再次加入H2O（45.6mL）终止反应。接着，将混合物倾至Et2O（150mL）中，搅拌30分钟，并经Na2SO4（5g）过滤。减压蒸发溶剂得到二醇17a(11.0g，95%)，其未经进一步纯化而使用：Rf=0.53(CH2Cl2/MeOH9/1);1HNMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ5.55-5.52(m,2H),3.66(dt,J=5.6,5.2Hz,2H),2.33-2.28(m,4H),OH不明显；13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ129.8(x2),62.0(x2),36.16(x2);HRMS(MALDI-TOF)m/z139.0734([M+Na+],C6H12O2Na理论值139.0735)。
17a的TBOPS-单保护反应，醇17的合成。0℃下，向NaH（1.90g，47.4mmol，1.0当量）的THF（100mL）悬浮液中加入二醇17a（5.5g，47.4mmol，1.0当量）的THF（20mL）溶液。搅拌45分钟之后，加入TBDPSCl（12.4mL，47.4mmol，1.0当量）。将反应混合物暖至23℃并搅拌1小时。随后用饱和NH4Cl水溶液（200mL）终止反应并用EtOAc（150mL×3）萃取，用盐水（200mL×2）洗涤合并的有机层并经Na2SO4（10g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后通过急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc20/1、10/1和5/1）获得期望的为无色油的醇17（11.5g，68%）：Rf=0.46(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.68-7.65(m,4H),7.43-7.36(m,6H),5.56(dt,J=15.2,6.4Hz,1H),5.44(dt,J=15.2,6.8Hz,1H),3.69(t,J=6.4Hz,2H),3.62(t,J=6.3Hz,2H),2.31-2.24(m,4H),1.05(s,9H),OH不可见;HRMS(MALDI-TOF)m/z377.1927([M+Na+),C22H30O2SiNa理论值377.1913)。
Figure BDA0000381115570001452
腈19的合成。0℃下，向醇17（11.5g，32.4mmol）的CH2Cl2（150mL）溶液中加入咪唑（4.30g，47.0mmol，1.45当量）、三苯基膦（9.35g，35.7mmol，1.1当量）和碘（9.06g，35.7mmol，1.1当量），并将所得溶液在0℃搅拌6小时。随后将混合物用Et2O/己烷1/1(300mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液（150mL×2）、饱和Na2S2O5水溶液（150mL）、盐水（150mL）洗涤，并经Na2SO4（5.0g）干燥。蒸发溶剂并将所得的油状固体用己烷（200mL×2）研磨。过滤并蒸发己烷，获得相应的无色油状的烷基碘18，其直接用于下一步骤而未经进一步纯化：Rf=0.46(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.70-7.67(m,4H),7.45-7.36(m,6H),5.58(dt,J=15.2,6.8Hz,1H),5.44-5.37(dt,J=15.2,6.4Hz,1H),3.69(t,J=6.4Hz,2H),3.11(t,J=7.2Hz,2H),2.54(dt,J=7.2,6.8Hz,2H),2.26(dt,J=6.4,6.4Hz,2H),1.05(s,9H);HRMS(MALDI-TOF)m/z487.0923([M+H+],C22H29IOSiH理论值487.0930)。
向粗制的烷基碘18的DMSO（200mL）溶液中加入KCN（21.0g，324mmol，1.0当量）。将所得混合物在60℃搅拌2小时，随后将反应混合物冷却至23℃，用EtOAc（200mL）稀释，用水（200mL）、盐水（100mL）洗涤，并用Na2SO4（5.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后通过急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc20/1和10/1）获得期望的为无色油的腈19（10.6g，90%）：Rf=0.46(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.71-7.69(m,4H),7.45-7.39(m,6H),5.60(dt,J=15.2,6.4Hz,1H),5.52-545(m,1H),3.73(t,J=6.4Hz,2H),2.36-2.28(m,6H),1.08(s,9H);13CNMR(CDCl3,100MHz,25℃)135.7(x4),134.0(x2),130.5,129.7(x2),127.8,127.7(x4),119.4,63.6,35.9,28.6,27.0(x3),19.3,17.6;HRMS(MALDI-TOF）m/z386.1962([M+Na+],C23H29OSiNNa理论值386.1916)。
叶立德21的合成。0℃下，向N-甲氧基-N-甲基羟胺盐酸盐（48.52g，500mmol，1.0当量）的CH2Cl2（1.0L）溶液中加入吡啶（80.63mL，1.0mol）和氯乙酸酐（85.14g，500mmol，1.0当量）。将所得混合物在0℃搅拌15分钟，接着暖至23℃并搅拌过夜。随后将反应混合物小心地倒入饱和NaHCO3水溶液（1.0L）中并搅拌1小时，之后分离各层，用CH2Cl2（400mL）萃取水相，并将合并的有机层用1N HCl（200mL×2）、盐水（200mL×2）洗涤，经Na2SO4（10g）干燥并过滤。减压蒸发溶剂获得相应的为绿色油的乙酰胺（N-甲氧基-N-甲基乙酰胺-2-氯化物），其用于下一步骤而未经进一步纯化。向该乙酰胺的CH3CN（800mL）溶液中加入Ph3P（107.98g，411.7mmol，0.82当量），并将所得混合物回流18小时。随后在真空下去除溶剂，并将所得粘性油溶于CH2Cl2（1.0L），用2NKOH（400mL×2）、盐水（400mL）洗涤并经Na2SO4（10.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，获得为粘稠油的叶立德21，其通过静置固化（146.5g，80%经两步）。该化合物用于下一步骤而未经进一步纯化:Rf=0.85(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.71-7.65(m,6H),7.55-7.50(m,3H),7.48-7.42(m,6H),3.74(s,3H),3.08(s,3H),1.86(s,1H);13CNMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ133.3(x3),133,2(x3),131.9(x3),128.9(x3),128.8(x3),127.9,61.3,35.9。
Figure BDA0000381115570001471
Weinreb酰胺12的合成。-78℃下，向腈19（22.94g，63.0mmol，1.0当量）的CH2Cl2（250mL）溶液中加入DIBAL（66.3mL，1M，在甲苯中，1.05当量）并将反应物搅拌30分钟。为了终止反应，加入饱和K/Na(酒石酸盐)水溶液（300mL）并搅拌两相混合物直至其成为澄清的两相系统（经2小时）。分离两相并将水相用CH2Cl2（200mL×3）进一步萃取。随后将合并的有机层用盐水（200mL）洗涤并经Na2SO4（10g）干燥。过滤并随后减压蒸发溶剂获得相应的醛20，其用于下一步骤而未经进一步纯化。然后，在23℃，将粗制的醛20溶于CH2Cl2（200mL）并加入叶立德21（30g，81.9mmol，1.3当量）。随后将反应物搅拌过夜。减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc20/1、10/1和3/1）获得期望的无色油状的Weinreb酰胺12（14.5g，61%经两步）:Rf=0.30(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.69-7.67(m,4H),7.43-7.36(m,6H),6.98(dt,J=15.3,7.1Hz,1H),6.40(d,J=15.3Hz,1H),5.48-5.46(m,2H),3.68(t,J=6.6Hz,2H),3.67(s,3H),3.24(s,3H),2.32-2.24(m,4H),2.19-2.14(m,2H),1.06(s,9H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)167.1,147.2,135.7(x4),134.1,131.0(x2),129.6(x2),127.8(x4),127.7,119.0,64.0,61.7,36.1,32.6,32.5,31.5,27.0(x3),19.3;HRMS(MALDI-TOF)m/z474.2432([M+Na+],C27H37NO3SiNa理论值474.2440)。
Figure BDA0000381115570001481
甲苯甲酸酯11和Weinreb酰胺12的偶联，酮13的合成。-78℃下，将化合物11（8.38g，20.0mmol，1.0当量）的无水THF（120mL）溶液用经由套管加入的新鲜制备的LDA（71.4mL，0.56M，40.0mmol，2.0当量）处理。之后立即经由套管加入-78℃的Weinreb酰胺12（8.13g，18mmol，0.9当量）的THF（15mL）溶液。随后将所得混合物搅拌15分钟并通过加入饱和NH4Cl水溶液（20mL）终止反应。一旦暖至23℃，就用EtOAc（200mL×2）萃取反应混合物，接着将合并的有机层用盐水（100mL）洗涤并经Na2SO4（5.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc20/1、10/1和5/1）获得期望的酮13（20.7g，65%）：Rf=0.48(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.70-7.68(m,4H),7.42-7.38(m,6H),7.10(s,1H),6.94(dt,J=15.8,6.7Hz,1H),6.19(d,J=15.8Hz,1H),5.49-5.46(m,2H),5.30(s,2H),5.22(s,2H),4.36-4.32(m,2H),4.06(s,2H),3.79-3.68(m,6H),2.30-2.25(m,4H),2.18-2.13(m,2H),1.23(t x2,J=7.1Hz,6H),1.07(s,9H),1.08-1.03(m,2H),0,06(s,9H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ194.5,167.0,154.6,153.9,147.1,135.5(x4),133.9(x2),132.8,130.5,129.5(x2),129.1,127.9,127.6(x4),120.3,117.7,103.1,93.9,93.8,64.6,64.4,63.8,63.6,60.3,59.9,43.0,35.9,32.4,31.1,26.8(x3),22.6,22.0,19.2,17.4,15.0,14.2,14.1,-1.40(x3);HRMS(MALDT-TOF)m/z831.3380([M+Na+],C44H61ClO8Si2Na理论值831.3491)。
肟14a的合成。40℃下，向酮13（18.6g，25.5mmol）的吡啶（50mL）溶液中加入羧甲氧基胺半盐酸盐（13.98g，127.5mmol）并将反应物在此温度下搅拌24小时。蒸发吡啶后，将残留物溶于CH2Cl2（200mL），用饱和NH4Cl水溶液（50mL×2）、盐水（50mL×2）洗涤，并经无水Na2SO4（2.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc5/1和1/1）获得比率为1/1的E/Z异构体的混合物的期望的肟14a（10.1g，50%）：Rf=0.51(CH2Cl2/MeOH19/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.69-7.65(m,8H),7.42-7.35(m,12H),7.07(s,1H),7.05(s,1H),6.74(d,J=15.8Hz,1H),6.36(dt,J=15.8,6.8Hz,1H),6.07(dt,J=15.8,6.8Hz,1H),5.79(d,J=15.8Hz,1H),5.48-5.43(m,2H),5.39-5.34(m,2H),5.30(s,2H),5.28(s,2H),5.21(s,2H),5.19(s,2H),4.63(s,2H),4.46(s,2H),4.35-4.29(m,4H),4.03(s,2H),3.88(s,2H),3.80-3.60(m,12H),2.31-2.25(m,6H),2.17-2.15(m,2H),2.10-2.06(m,2H),2.00-1.97(m,2H),1.27-1.21(m,12H),1.08(s,9H),1.07(s,9H),1.07-1.05(m,4H),0.09(s,9H),0.08(s,9H),来自酸的OH不可见；13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ172.0,171.9,167.9,167.3,157.0,155.6,154.6,154.5,153.7,153.7,141.4,137.8,135.7(x8),134.6,131.4(x4),133.7,131.2,130.8,129.7(x4),127.9,127.7(x8),127.5,124.2(x2),120.4,119.1,117.5,117.4,103.2,102.8,94.1,94.0,93.9,93.8,71.1,70.5,64.9,64.9,64.7,64.6,64.5,64.0,64.0,63.9,36.1(x2),33.5,33.1,32.9,31.9,31.9,29.4,27.0(x6),19.3(x2),17.5,17.3,15.1(x4),-1.4(x6)。
酰胺14的合成。0℃下，向酸14a（10.0g，11.33mmol，1.0当量）的CH2Cl2（60mL）溶液中加入EDC.HCl（2.6g，13.6mmol，1.2当量），随后加入哌啶（1.34mL，13.6mmol，1.2当量）的CH2Cl2（10mL）溶液。将反应物暖至23℃，并搅拌3小时。随后将反应混合物用CH2Cl2（200mL）稀释，用饱和NH4Cl水溶液（100mL）、盐水（100mL）洗涤，并经无水Na2SO4（5g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后通过急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc2/1和1/1）获得比率为1/1的两种异构体的混合物的期望的酰胺14a（6.60g，63%）：Rf=0.31(己烷/EtOAc3/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.68-7.64(m,8H),7.41-7.33(m,12H),7.04(s x2,2H),6.71(d,J=16.0Hz,1H),6.21(dt,J=16.0,6.7Hz,1H),6.07(dt,J=16.0,6.7Hz,1H),5.73(d,J=16.0Hz,1H),5.45-5.39(m,2H),5.37-5.32(m,2H),5.28(s,2H),5.25(s,2H),5.19(s,4H),4.73(s,2H),4.60(s,2H),4.37-4.27（m,4H),3.95(s,2H),3.87(s,2H),3.80-3.60(m,12H),3.55-3.52(m,2H),3.51-3.48（m,2H),3.38-3.35（m,2H),3.32-3.29（m,2H),2.26-2.16(m,6H),2.09-2.06(m,2H),2.01-1.98(m,2H),1.95-1.91(m,2H),1.61-1.46(m,12H),1.28-1.17(m,12H),1.05-1.01(m,4H),1.04(s,9H),1.03(s,9H),0.05(s,9H),0.04(s,9H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ167.1,167.0(x2),166.8,155.6,154.3,154.2,153.5,153.4,153.1,139.2,136.5,135.6(x8),134.7,134.6,134.1(x4),131.4,131.1,129.6(x4),127.6(x8),127.6,127.1,124.1,121.0,120.9,119.5,117.9,117.7,103.1,102.9,94.1,94.0,93.9,73.1,73.0,64.8,64.7,64.6,64.5,64.0,63.9,63.9,63.6,60.4,53.5,46.4,46.2,43.0,42.9,36.1,33.4,33.0,32.9,32.0,31.9,30.0,26.9(x6),26.6,26.5,25.6,24.6,19.3(x2),17.4,17.3,15.1(x6),-1.42(x6)。
Figure BDA0000381115570001501
甲硅烷基脱保护，大环化前体14b的合成。23℃下，向酯14（6.60g，6.9mmol，1.0当量）的THF（70mL）溶液中滴加TBAF（17.3mL，1M，在THF中，2.5当量）并将所得混合物搅拌3小时。随后，向反应物中加入EtOAc（100mL），并将所得混合物用1M HCl（60mL×3）、盐水（60mL）洗涤，并经Na2SO4（1.0g）干燥。过滤并减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2、EtOAc和EtOAc/MeOH4/1）获得比率为1/1的两种异构体混合物的期望的酸14b（3.78g，89%）：Rf=0.35(CH2Cl2/MeOH9/1);1HNMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.03(s,1H),6.99(s,1H),6.62(d,J=16.1Hz,1H),6.23(dt,J=16.1,6.9Hz,1H),6.11(dt,J=16.1,6.9Hz,1H),5.95(d,J=16.1Hz,1H),5.55-5.30(m,4H),5.26(s x2,4H),5.21(s,2H),5.20(s,2H),4.72(s,2H),4.63(s,2H),4.05(s,2H),4.00(s,2H),3.81-3.66(m,8H),3.65-3.57(m,4H),3.54(t,J=5.4Hz,2H),3.44(t,J=5.4Hz,2H),3.31(t,J=5.4Hz,2H),3.24(t,J=5.4Hz,2H),2.23(dt,J=6.5,6.5Hz,4H),2.18-2.04(m,8H),1.67-1.49(m,10H),1.42-1.40(m,2H),1.25-1.16(m,12H),来自醇和酸的OH不可见；13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ168.73,168.03,156.47,154.19,152.99,152.94,140.23,136.77,134.37,134.18,132.45,132.11,127.53,127.23,125.91,122.46,119.28,116.76,102.91,102.80,94.16,94.02,93.96,71.51,71.25,64.92,64.82,64.54,64.46,62.11,46.24,45.60,43.39,43.27,36.06,35.98,33.08,32.80,32.09,31.86,31.61,29.20,26.26,26.18,25.38,25.30,24.41,24.30,15.28,15.16;HRMS(MALDI-TOF)m/z633.2562([M+Na+]C30H43ClN2O9Na理论值633.2555)。
14b的大环化反应，化合物15的合成。0℃下，向酸14b（3.78g，6.18mmol）的甲苯（200mL）溶液中，加入PPh3（2.43g，9.27mmol），随后缓慢加入DIAD（1.83mL，9.3mmol）。将反应物暖至23℃并搅拌5小时。减压蒸发溶剂，随后用急骤色谱法（SiO2，己烷/EtOAc4/1和1/1）获得比率为1/1的两种异构体混合物的期望的大环15（2.09g，60%）：Rf=0.50(己烷/EtOAc1/1);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ7.05(s,1H),7.03(s,1H),6.51(d,J=16.0Hz,1H),6.16(dt,J=15.8,6.5Hz,1H),6.00(dt,J=15.8,7.7Hz,1H),5.44(d,J=16.0Hz,1H),5.32(m,4H),5.28(s,2H),5.26(s,2H),5.21(s,2H),5.20(s,2H),4.80(s,2H),4.71(s,2H),4.23(t,J=5.1Hz,2H),4.18(t,J=5.1Hz,2H),3.91(bs,2H),3.80-3.66(m,10H),3.60-3.51(m,4H),3.48-3.46(m,2H),3.41-3.38(m,2H),2.40-2.32(m,4H),2.19-2.16(m,1H),2.11-2.00(m,7H),1.67-1.51(m,12H),1.23-1.19(12H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ167.5,166.9,154.8,154.6,154.4,153.2,141.0,136.6,134.1,132.6,128.5,127.6;124.6,121.6,119.5,117.5,102.94(x2),94.1(x2),93.8(x2),73.4,73.2,72.8,72.7,64.9,64.8,64.7(x2),64.3(x2),46.5,46.3,43.1(x2),35.7,35.6,32.5,32.4,32.2,32.1,31.9,31.7,30.2(x2),26.7(x2),26.6(x2),25.7(x2),24.7(x4),15.2(x2),15.1(x2);HRMS(MALDI-TOF)m/z615.2438([M+Na+],C30H41ClN2O8Na理论值615.2450)。
Figure BDA0000381115570001521
脱保护，作为E/Z混合物的2a-1的合成，E异构体的分离和Z异构体的异构化。40℃下，向大环15（2.8g，4.72mmol）的MeOH（60mL）溶液中加入磺酸树脂（7.87g，3.0mmol/g，23.6mmol）并将悬浮液搅拌2小时。混合物用CH2Cl2（60mL）稀释、过滤，并将树脂用CH2Cl2（20mL×2）清洗一次。除去溶剂后，将残留物再溶于MeOH（50mL）中并进行超声处理。沉淀开始形成，将溶液静置12小时。过滤溶液并用MeOH（30mL）清洗，蒸发合并的溶液获得2a-1（1.13g，经LCMS分辨E：Z为9：1）。23℃下，将剩余的固体（纯Z-异构体，900mg）溶于CH2Cl2（180mL）并用TFA（1.4mL，18.8mmol）处理。将混合物搅拌12小时，之后加入甲苯（50mL）并蒸发溶剂（该粗制品的LCMS指示1：1的E/Z异构体混合物）。将获得的残留物重新溶于CH2Cl2（30mL）中。过滤不溶的沉淀并用MeOH（20mL）清洗。蒸发合并的溶液，再次获得更多有利于期望的E异构体的为9：1的混合物的化合物2a-1（450mg）。再使剩余的固体（Z-异构体，450mg）经受两次或多次同样的异构化条件。接着用急骤色谱法将合并的8批次纯化（70g的C18、CH3CN/H2O35/65和0.01%TFA，50mL/分钟）以获得为白色粉末的纯E异构体（1.10g，51%总收率）;Rf=0.44(己烷/EtOAc1/2);1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ11.64(s,1H),6.64(s,1H),6.01(td,J=15.57.5Hz,1H),5.11(d,J=15.5Hz,1H),5.10-5.03(m,2H),4.85(s,2H),4.37(t,J=4.8Hz,2H),4.17(s,2H),3.60(t,J=5.0Hz,2H),3.46(t,J=5.0Hz,2H),2.34(q,J=5.4Hz,2H),2.10-2.02(m,2H),1.99-1.92(m,2H),1.70-1.54(m,6H);13C NMR(CDCl3,100MHz,25℃)δ170.27,167.42,163.21,157.38,155.18,138.21,135.62,131.82,129.13,124.76,115.55,107.60,103.47,72.63,65.03,46.38,43.31,33.21,32.76,31.94,31.84,26.65,25.64,24.57;HRMS(MALDI-TOF)m/z499.1638([M+H+],C24H29ClN2O6H理论值499.1612)。
化合物a2-13：
Figure BDA0000381115570001531
1H NMR(CDCl3,400MHz,25℃)δ11.65(s,1H),6.86(d,J=1.8Hz,1H),6.33(d,J=1.8Hz,1H),6.14(td,J=15.8,7.6Hz,1H),5.82(d,J=15.7Hz,1H),5.33(bs,2H),4.85(s,2H),4.53(bs,2H),4.33(s,2H),3.57(t,J=5.0Hz,2H),3.39(t,J=5.0Hz,2H),2.50(bs,2H),2.11-2.06(m,4H),1.66-1.58(m,6H);13CNMR(DMSO-d6,100MHz,25℃)δ168.5,166.3,159.3,157.1,156.2,137.6,136.0,131.5,129.5,124.9,113.1,105.9,100.9,71.9,63.7,45.2,42.1,32.3,31.8,30.5,28.1,26.0,25.3,24.0;HRMS(MALDI-TOF)m/z465.2054([M+Na+]C24H30N2O6H理论值465.2002)。
实施例24：示例性化合物的激酶抑制
使用下述操作，测试Pochonin类似物库（84个化合物）中的代表性子集在10μM对于一组24种激酶（AKT1、ARK5、Aurora-A(有丝分裂酶A)、Aurora-B(有丝分裂酶B)、B-RAF-VE、CDK2/CycA、CDK4/CycD1、CK2-α1、FAK、EPHB4、ERB2、EGF-R、IGF1-R、SRC、VEGF-R2、VEGF-R3、FLT3、INS-R、MET、PDGFR-β、PLK1、SAK、TIE2、COT）中的抑制。
所有的蛋白激酶都是作为人类重组GST-融合蛋白或His-标记的蛋白质通过杆状病毒表达系统在Sf9昆虫细胞中表达。使用GSH-琼脂糖（Sigma）或Ni-NTH-琼脂糖（Qiagen）通过亲和色谱法纯化激酶。通过SDS-PAGE/银染检验每种激酶的纯度并通过使用激酶特异性抗体的蛋白质印迹分析或通过质谱法来检验每种激酶的同一性(identity)。
蛋白激酶分析
使用放射测量的蛋白激酶分析（
Figure BDA0000381115570001541
活性分析）来测量24种蛋白激酶的激酶活性。所有的激酶分析都以50μl的反应体积在来自PerkinElmer（波士顿，MA，USA）的96孔FlashPlateTM中进行。按下述顺序以4步移液反应混合液(cocktail)：
·20μl分析缓冲液
·5μl ATP溶液（在水中）
·5μl测试化合物（在10%DMSO中）
·10μl底物/10μl酶溶液（预混合的）
对所有酶的测定都含有60mM HEPES-NaOH，在pH7.5，3mMMgCl2、3mM MnCl2、3μM原钒酸钠、1.2mM DTT、50μg/ml PEG20000、1μM[γ-33P]-ATP（约每孔5×1005cpm）。
对于24种激酶测定，每孔使用下述量的酶和底物：
Figure BDA0000381115570001551
反应混合液在30℃温育80分钟，用50μl2%（v/v）的H3PO4终止反应，吸出（aspirate）板中液体并用200μl0.9%（w/v）的NaCl或者200μlH2O洗涤两次。用微板闪烁计数器（Microbeta Trilux，Wallac）测定33Pi的结合。
所有的分析都采用BeckmanCoulter/Sagian机器人系统进行。
原始数据评估
每块测定板的第1列（n=8）中的计数的中值(median)被定义为“低对照”，该值反映了在没有蛋白激酶存在但是有底物存在时放射性对板的非特异结合。每块测定板的第7列（n=8）中的计数的中值被作为“高对照”，即，没有任何抑制剂存在时的完全活性。高对照和低对照之间的差值被作为100%活性。
作为数据评估的一部分，特定板的低对照值被从相应板的高对照值以及所有80个“化合物值”中减去。使用如下公式计算特定板的每个孔的残留活性（以%表示）：
残留活性(%)=100×[(化合物的cpm-低对照)/(高对照-低对照)]
使用Quattro Workflow V2.1.0.0（Quattro Research GmbH，慕尼黑，德国；www.quattro-research.com）计算每种浓度的残留活性和化合物IC50值。所使用的模型是具有确定在100%的参数“最高值”和在0%的“最低值”的“Sigmoidal响应曲线（可变的斜率）”。
值得注意的是，十二种化合物表现出超过50%的抑制作用，其代表了对于激酶＞14%的命中率。出人意料的是，尽管已证明pochonin D、pochoninA和根赤壳菌素为HSP90的强抑制剂，但是却没有对这组激酶显示显著活性。挑选出九种化合物来计算它们对24种激酶中每种的IC50（表4）。在此更详细的分析中，根赤壳菌素只对VGFR-R2显示非常轻微的活性而对其他23种激酶没有抑制。几种pochonin类似物显示出对治疗相关的酶例如Src（对于A2为8μM）、Aurora（对于A3为12μM）、IGF1-R（对于A5为11μM）的活性的清晰明确。重要的是，已证明是激酶抑制剂的化合物不是HSP90的抑制剂并且不是无差别的ATP-替代物。
通过测量在竞争性测定中的直接相互作用以及测量在细胞测定中的HSP90底物蛋白(client protein)的消耗，测试了库中的另一个子集对HSP90的抑制。HSP90的腺苷三磷酸酶袋具有一种特殊的折叠，这种折叠存在于超家族中，所述超家族包括功能多样化的蛋白质诸如DNA拓扑异构酶II、解旋酶、MutL和组氨酸激酶（Bergerat折叠）。（A.Bergerat等人，Nature，386：414（1997）；R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，25：24（2000））。事实上，已证明尽管根赤壳菌素具有较低的亲和力，但其确实抑制了该家族的其他成员（D.Gadelle等人，Nucleic Acids Res.，33：2310（2005）；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62：289（2002））。然而值得注意的是，相对于该组激酶，本发明中最好的HSP90抑制剂对HSP90是选择性的。已发现十六种化合物具有IC50＜1μM。
Figure BDA0000381115570001571
被选择用于IC50测定的Pochonin类似物
表4：所选择的pochonin类似物在一组24种激酶分析中的抑制活性（IC50：μM）（空白代表IC50＞50μM）。
Figure BDA0000381115570001581
在此详细分析中，根赤壳菌素显示仅对VGFR-R2有非常弱的活性且对其他23种激酶没有抑制。几种pochonin类似物显示出对治疗相关的酶例如Src（对于A2为8μM）、Aurora（对于A3为12μM）和IGF1-R（对于A5为11μM）的活性的明确模式。重要的是，已发现为激酶抑制剂的化合物不是HSP90的抑制剂（数据未显示）并且不是无差别的ATP-替代物。根赤壳菌素和pochonin所靶定的HSP90的ATP-结合袋具有特殊的折叠，该折叠存在于超家族中，所述超家族包括功能多样化的蛋白质诸如DNA拓扑异构酶II、解旋酶、MutL和组氨酸激酶（R.Dutta和M.Inouye，Trends Biochem.Sci.，24：24（2000））。事实上，已证明尽管根赤壳菌素具有较低的亲和力，但其确实抑制这一家族的其他成员（D.Gadelle等人，Nucleic Acids Res.，33：2310（2005）；P.G.Besant等人，Mol.Pharmacol.，62：289（2002））。尽管上文所描述的pochonin库会必定包含一些化合物，这些化合物是具有Bergerat折叠的酶的良好抑制剂，我们希望评估pochonin骨架周围的修饰是否能够将这些化合物的选择性从HSP90抑制剂重新调整为激酶抑制剂。超过百分之十四的化合物在10mM显示出大于50%的激酶抑制的事实清楚地支持了RAL是激酶抑制的良好骨架的假说。
实施例25：对库中示例性化合物的HSP90抑制测试。
用先前描述过的方法（V.Zhou等人，Anal.Biochem.，331，349（2004）），首先评估了用格尔德霉素的竞争测定中根赤壳菌素（2-1）、pochpnin D（2-85）和pochonin A（2-122）及其一些密切相关的类似物例如monocillin II（2-103）或者pochonin A的二醇类似物（2-125）对HSP90的亲和力。结果在下面显示。
根赤壳菌素类似物的结构和对HSP90的亲和力
Figure BDA0000381115570001591
如前所述，同根赤壳菌素的20nM相比，pochonin D（2-85）已发现为具有IC50为80nM的HSP90的良好的配体。该活性差异小于一个数量级，但是不受理论的限制，其被对pochonin D的分子模型研究合理化。由Pearl及合作者报道的HSP90-根赤壳菌素的共结晶结构显示紧固结合的水分子在邻苯酚、酯和Asp79间形成氢键桥，且第二个水分子在对苯酚和Leu34间形成桥（S.M.Roe等人，J.Med.Chem.，42：260（1999））。同该假说一致，具有受保护的酚的化合物2-112和2-120没有显示对HSP的亲和力。比较pochonin D（2-85，80nM）和monocillin II（2-103，＞50μM）可知，氯原子的重要性也是明显的。体积大的氯不仅进入Phe124的范德华接触（van der wasls contact）的范围内而且填充了疏水袋。值得注意地，pochonin A（2-122）是良好的配体（90nM），而类似物2-111是无活性的。根赤壳菌素、pochpnin D和pochonin A间的比较证实了环氧部分对于HSP90抑制是必需的而且确定了γ,δ-共轭烯烃并不是效力的前提。这些天然产物（2-1、2-85、2-122）对抗HSP90的N-末端结构域中的ATP的能力以及抑制腺苷三磷酸酶活性的能力可能同它们的HSV（单纯疱疹病毒）解旋酶抑制作用有关。类似地，评价相应于双甲基化类似物的化合物2-164，2-166和2-169的HSP90抑制。
实施例26：库中示例性化合物抗HCC1954和SK-BR-3肿瘤细胞的细胞毒性。
37℃下，肿瘤细胞在潮湿大气（5%CO2，95%空气）中以粘附的单层细胞生长。培养基是含有2mM L-谷氨酰胺（参考BE12-702F，Cambrex，韦尔维耶，比利时）并添加10%胎牛血清（参考DE14-801E，Cambrex）的RPMI1640。为了试验使用，通过用胰蛋白酶-乙二胺四乙酸（参考02-007E，Cambrex）处理5分钟将粘附的肿瘤细胞从培养瓶上分离，用不含钙或镁的Hanks培养基（Hanks’medium）（参考BE10-543F，Cambrex）稀释并通过加入完全培养基(complete culture medium)中和。使用前，采用血球计数器对细胞计数并用25%的台盼蓝拒染（trypan blueexclusion）评估它们的存活力。按照制造商的说明书使用
Figure BDA0000381115570001601
支原体检测试剂盒（参考LT07-318，Cambrex）进行支原体检测。
Figure BDA0000381115570001602
测定是利用支原体酶活性的选择性的生物化学测试。有活力的支原体属被溶解，且酶与催化ADP转化为ATP的底物作用。通过测量在加入
Figure BDA0000381115570001604
底物之前和之后的样品中的ATP水平，可以获得指示支原体属存在或者不存在的比率。从该细胞系的培养基上清液重复测定支原体属测试并与阴性对照和阳性对照（
Figure BDA0000381115570001605
测定对照组（Assay ControlSet），参考LT07-518，Cambrex）（Internal Standard Operating Procedure NoTEC-007/002）比较。将HCC1954和SK-BR-3肿瘤细胞（每孔5000个细胞）铺在96孔平底微量滴定板上（参考167008，Nunc，Dutscher，Brumath，法国）并在37℃温育24小时，之后在190μl添加10%FBS的无药培养基中处理。将HCC1954和SK-BR-3肿瘤细胞系用在1/4稀释步骤（1/4dilution steps）中将要测试的测试底物（从10-6到10-11M的范围）以及紫杉醇（从10-7到10-12M的范围）用5种浓度温育72小时。在37℃、在5%CO2下，细胞（190μl）在添加含有测试底物的10%FBS的最终体积为200μl的培养基中温育。进行一次实验，由四组重复产生每个浓度的结果。用相应的赋形剂单独处理对照细胞。在处理的最后，用MTS测定评价细胞毒性。使用四唑鎓化合物（MTS，3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑鎓）和命名为PMS（吩嗪硫酸甲酯）的电子偶联试剂由MTS测定来揭示测试底物的体外细胞毒性。类似于MTT，通过细胞将MTT生物还原为一种甲臜产物，该产物不同于MTT，在培养基中无需加工直接溶解。
在细胞处理的最后，在每个孔中加入用0.22μm过滤的在杜伯科磷酸缓冲盐溶液（DPBS，参考17-513F，Cambrex）中的MTS(20mL，2mg/ml，参考G1111A，Promega，
Figure BDA0000381115570001611
法国)和PMS（1ml，0.92mg/ml，参考P9625，Sigma）的新鲜混合的溶液40μl。在37℃温育培养板2小时。用VICTOR3TM1420多标记计数器（multilabeled counter）（Wallac，PerkinElmer，Courtaboeuf，法国）在每个孔中测量在490nm的吸光度（OD）。
表5：所选择的pochonin类似物的抗HCC1954和SK-BR-3肿瘤细胞的细胞毒性
Figure BDA0000381115570001621
Figure BDA0000381115570001631
Figure BDA0000381115570001641
Figure BDA0000381115570001651
示例性化合物的实验步骤和表征数据如下。下述化合物和数据被理解为非限制性的。
Figure BDA0000381115570001652
使用溶剂体系A氧化的通用步骤：0℃下，依次用氨基磺酸（3.5当量）和亚氯酸钠（3.25当量）的水溶液处理醛2-94（1.0当量）的H2O/THF/DMSO(20:10:1，0.03M)溶液。在此温度下搅拌0.5-1小时后，将反应混合物用Et2O稀释，用饱和NH4Cl水溶液洗涤并经MgSO4干燥。减压浓缩获得相应的酸2-95，其用于下一步骤而未经任何进一步纯化。
2-95c:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=6.48(d,J=2.2Hz,1H),6.45(d,J=2.2Hz,1H),3.84(s,3H),3.83(s,3H),2.33(s,3H)。
2-94j:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=7.58(d,J=7.0Hz,4H),7.47-7.35(m,10H),7.31-7.21(m,6H),6.31(s,1H),5.89(s,1H),2.35(s,3H),1.05(s,9H),0.93(s,9H)。
Figure BDA0000381115570001653
使用溶剂体系B氧化的通用步骤：0℃下，依次用氨基磺酸（3.5当量）和亚氯酸钠（3.25当量）的水溶液处理醛2-94（1.0当量）的H2O/THF(20:10，0.03M)溶液。室温下搅拌12小时后，将反应混合物用Et2O稀释，用饱和NH4Cl水溶液洗涤并经MgSO4干燥。减压浓缩获得相应的酸2-95，其用于下一步骤而未经任何进一步纯化。对于2-95b，2.0当量的氨基磺酸对于避免过度氯化是必需的。对于2-95i和2-95k，0℃下，30分钟后完成反应。
2-95b:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=6.48(s,1H),2.70(s,3H)。
2-95d:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=6.77(s,1H),3.97(s,3H),3.89(s,3H),2.35(s,3H)。
2-95h:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=6.71(s,1H),5.43(s,2H),3.85(t,J=8.2Hz,2H),2.71(s,3H),1.00(t,J=8.2Hz,2H),0.04(s,9H)。
2-95i:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=7.82-7.80(m,4H),7.55-7.48(m,6H),6.02(s,1H),2.74(s,3H),1.17(s,9H)。
2-95k:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=7.48-7.34(m,12H),7.23-7.16(m,8H),5.93(s,1H),2.54(s,3H),1.05(s,9H),1.02(s,9H)。
使用溶剂体系C氧化的通用步骤：0℃下，向醛2-94（1.0当量）的DMSO(0.4M)溶液中依次缓慢加入溶于H2O（3M）的NaH2PO4·H2O（5.0当量）和溶于H2O（3M）NaClO2（5.0当量）。搅拌12小时后，将反应物用Et2O稀释，用饱和NH4Cl水溶液洗涤并经MgSO4干燥。减压浓缩得到相应的酸2-95，其用于下一步骤而未经进一步纯化。
2-95e:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=6.76(d,J=1.9Hz,1H),6.60(d,J=1.6Hz,1H),5.25(s,4H),3.75-3.69(m,4H),2.31(s,3H),1.18(t,J=7.0Hz,6H)。
2-95g:1H NMR(400MHz,(CD3)2CO,25℃)：δ=12.13(bs,1H),6.46(s,2H),5.30(s,2H),3.73(q,J=7.0Hz,4H),2.58(s,3H),1.19(t,J=7.0Hz,3H)。
Figure BDA0000381115570001671
1-氯-2,4-双-乙氧基甲氧基-7-甲基-7,8,11,12-四氢-16H-6-氧杂-苯并环十四烯-5m15-二酮（2-112）：用10%mol的催化剂Grubbs’II（30mg，0.038mmol）处理2mM的化合物2-111（200mg，0.38mmol）的无水甲苯（190mL）溶液并在80℃加热过夜。随后将反应混合物通过二氧化硅垫，用CH2Cl2洗涤所述二氧化硅垫。减压浓缩合并的滤液。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-25%EtOAc/己烷梯度）获得纯的大环2-112（167mg，94%）。1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=7.27(s,1H),6.85(dt,J=15.2,7.6Hz,1H),6.15(d,J=15.8Hz,1H),5.16-4.94(m,7H),4.41(d,J=17.0Hz,1H),4.13(d,J=17.0Hz,1H),3.61-3.45(m,4H),2.18-2.07(m,2H),1.86-1.62(m,4H),1.38(d,J=5.8Hz,3H),1.11(t,J=7.0Hz,3H),1.04(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=193.5,166.4,155.0,154.1,146.0,133.7,131.5,128.8,127.7,121.2,118.1,102.9,93.7,93.6,71.6,64.4,64.4,45.0,39.2,30.7,30.4,19.3,14.9,14.8;I.R.(薄膜):νmax=2917,1720,1690,1622,1591,1320,1255,1120,1037cm-1;HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H31O7C1Na的计算值:489.1651，测定值489.1737[M+Na+]。(-)-(2R):[α]25 D=-24.0(c0.59,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001672
Pochonin D（2-85）：将化合物2-112（50mg，0.1mmol）在CH2Cl2/TFA的5：1混合物（3mL）中搅拌2小时。减压浓缩，随后用急骤色谱法（硅胶，0-33%EtOAc/己烷梯度）获得合成的pochonin D2-85（25mg，72%）。已发现合成的pochonin D具有与天然pochonin D完全一致的1HNMR。pochonin D.1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.42(s,1H),6.89(s,1H),6.67-6.62(m,1H),5.82(d,J=15.6Hz,1H),5.17-5.12(m,1H),5.00-4.92(m,1H),4.76-4.69(m,1H),4.28(d,J=17.2Hz,1H),4.18(d,J=17.7Hz,1H),2.54-2.47(m,1H),1.93-1.77(m,5H),0.98(d,J=6.4Hz,3H);1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.73(s,1H),6.76-6.69(m+s,2H),6.19(s,1H),5.82（d,J=15.2Hz,1H),5.46-5.40(m,1H),5.31-5.15(m,2H),4.37(d,J=17.6Hz,1H),4.09(d,J=17.0Hz,1H),2.68-2.61(m,1H),2.39-2.03(m,5H),1.34(d,J=7.0Hz,3H);1H NMR(400MHz,CD3OD,25℃)：δ=6.74(dt,J=15.5,7.6Hz,1H),6.51(s,1H),5.83(d,J=15.5Hz,1H),5.36-5.22(m,3H),4.25(d,J=17.7Hz,1H),4.13(d,J=17.7Hz,1H),2.54-2.47(ddd,J=14.5,8.0,4.0Hz,1H),2.31-2.15(m,5H),1.31(d,J=6.6Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=194.2,169.9,164.3,157.3,146.1,137.1,131.9,128.1,126.2,115.5,107.5,103.6,72.4,45.0,36.4,31.0,30.8,17.2;I.R.(KBr):νmax=2936,1654,1603,1347,1313,1239cm-1;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H19O5ClNa的计算值:373.0813，测定值373.0903[M+Na+]。(+)-(2R):[α]25 D=+11.1(c0.72,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001681
庚-2,6-二烯酸甲氧基-甲基-酰胺（2-114）：23℃下，向2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺（6.0g，48.8mmol）的无水DMF（20mL）溶液中加入3-巯基苯酚（4.44mL，48.8mmol）和K2CO3（6.7g，48.8mmol）。所得的悬浮液在23℃下搅拌过夜。在该时间段后，向混合物中加入Merrifield树脂（24g，＜2mmol.g-1，＜48.8mmol），之后加入K2CO3（11.4g，83.0mmol）和TBAI(催化量)，并将悬浮液加热至50℃。在此温度12小时后，将树脂过滤并洗涤若干次：用HCl水溶液（50mL）、MeOH（50mL）、CH2Cl2（50 mL）和Et2O（50 mL）洗涤。在减压下干燥树脂至恒定质量29.2g。最终的增重(mass gain)（5.2g，27.3mmol）指示0.81mmol.g- 1的估测的负载（loading）。树脂2-49（10g，0.81mmol.g-1）被悬浮于HFIP/CH2Cl21：1的混合物（50mL）中。23℃下，向此悬浮液中加入H2O2(3mL，16.0mmol)并将所得混合物振摇12小时。随后将树脂2-113过滤，用MeOH（50mL）、CH2Cl2（50mL）和Et2O（50mL）洗涤并在随后的使用之前在减压下干燥至恒定质量。将树脂2-113（4.0g，＜0.81mmol.g-1）悬浮于DMSO（40mL）中，随后加入tBuOK（336mg，3.0mmol）。室温下振摇反应物1小时后，向悬浮液中加入5-碘-1-戊烯（588mg，3.0mmol）并将混合物振摇3小时。如前面的方法将树脂过滤，洗涤并干燥。随后，将其悬浮于甲苯中并加热至80℃。在此温度8小时之后，将树脂过滤并用更多的甲苯洗涤若干次。蒸发合并的甲苯溶液获得经NMR鉴定为纯度95%的无色油状的纯化合物2-114（321mg，77%）。1HNMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.94(dt,J=15.7,6.7Hz,1H),6.39(d,J=15.2Hz,1H),5.84-5.74(m,1H),5.02(dd,J=17.4,1.7Hz,1H),4.97(d,J=10.1Hz,1H),3.67(s,3H),3.21(s,3H),2.34-2.29(m,2H),2.23-2.18(m,2H)；13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=166.8,146.7,137.3,119.1,115.3,61.6,32.3,31.7,（有一个碳未检测到）;I.R.(薄膜):νmax=2934,1681,1638,1378,1179cm-1。
Figure BDA0000381115570001691
2,4-双-乙氧基甲氧基-7-甲基-7,8,11,12-四氢-16H-6-氧杂-苯并环十四烯-5,15-二酮（2-120）。用10%mol的催化剂Grubbs’II（139mg，0.15mmol）处理2mM的粗制2-119（1.5mmol）在无水甲苯（750mL）中的溶液，并在80℃加热过夜。接着，将粗制的反应混合物通过二氧化硅垫，用CH2Cl2洗涤所述二氧化硅垫。减压浓缩合并的滤液。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-25%EtOAc/环己烷梯度），获得纯的2-120（260mg，40%经两步）。1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=7.08(d,J=2.2Hz,1H),7.01(d,J=2.2Hz,1H),6.93-6.86(m,1H),6.17(d,J=16.1Hz,1H),5.34-4.90(m,7H),4.41（d,J=14.5Hz,1H),3.75(d,J=14.5Hz,1H),3.59-3.45(m,4H),2.27-2.12(m,2H),1.95-1.61(m,4H),1.45(d,J=6.2Hz,3H),1.07(t,J=7.0Hz,3H),1.07(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=196.0,167.2,159.5,156.6,147.6,135.8,131.5,130.2,128.5,119.1,109.7,102.3,93.3,92.9,71.0,64.2,64.0,44.5,39.6,30.9,30.2,20.1,14.8,14.8;I.R.(薄膜):νmax=2976,1717,1602,1438,1284,1155,1110,1036,1018cm-1;HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H32O7Na的计算值:455.2040，测定值455.2135[M+Na+]。(-)-(2R):[α]25 D=-50.3(c1.00,CHCl3)。
使用聚合物结合的试剂（polymer-bound reagent）的pochonin D（2-85）：向化合物2-112（50mg，0.1mmol）的MeOH（3mL）溶液中加入PS-TsOH（300mg，3.2mmol.g-1），并将悬浮液在40℃下振摇4小时。随后将反应混合物过滤并减压浓缩甲醇溶液。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-20%EtOAc/环己烷梯度）获得合成的pochonin D2-85（32mg，90%）。
Figure BDA0000381115570001702
使用聚合物结合的试剂的monocillin II（2-103）：向化合物2-120（20mg，0.05mmol）MeOH（1.5mL）溶液中加入PS-TsOH（145mg，3.2mmol.g-1），并将悬浮液在40℃下振摇4小时。随后将反应混合物过滤并减压浓缩甲醇溶液。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-20%EtOAc/环己烷梯度）获得合成的monocillin II2-103（14mg，92%）。1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.49(s,1H),6.70-6.62(m,1H),6.49(d,J=2.9Hz,1H),6.09(d,J=2.4Hz,1H),5.86(d,J=15.2Hz,1H),5.08-4.95(m,2H),4.82-4.75(m,1H),4.14(d,J=16.8Hz,1H),3.71(d,J=17.0Hz,1H),2.64-2.57(m,1H),1.83-1.76(m,3H),1.74-1.66（m,2H),0.97(d,J=6.4Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=195.7,170.3,166.5,161.3,146.1,140.5,131.7,129.9,126.5,112.4,102.8,72.2,49.1,36.6,31.0,30.6,17.5,(有一个碳未检测到);I.R.(KBr):νmax=2936,1654,1603,1347,1313,1239cm-1;HRMS(ESI-TOF)：m/z:对C18H21O5计算理论值317.3980，测定值317.3978[M+H+]。(+)-(2R):[α]25 D=+40.6(c0.18,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001711
大环2-122：0℃下，向化合物2-112（50mg，0.11mmol）的CH3CN（5mL）溶液中加入新制备的DMDO（275μL，0.11mmol，0.04M，在丙酮中）并将混合物搅拌1.5小时。减压蒸发溶剂后，用急骤色谱法纯化（硅胶，0-70%Et2O/己烷梯度）获得两种非对映异构体混合物（1：1）的化合物2-122（41mg，79%）。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.12(s,1H),7.11（s,1H),6.90-6.76(m,2H),6.11(d,J=15.6Hz,1H),6.05(d,J=15.8Hz,1H),5.37-5.27(m,6H),5.26-5.21(m,4H),4.14(d,J=16.9Hz,1H),4.12(d,J=17.4Hz,1H),4.04(d,J=17.2Hz,1H),3.82-3.70(m,9H),2.81-2.78(m,1H),2.74-2.72(m,1H),2.67-2.62(m,2H),2.38-2.11(m,8H),2.05-2.03(m,1H),2.03-2.00(m,1H),1.74-1.60(m,2H),1.41(d,J=7.2Hz,3H),1.39(d,J=6.2Hz,3H),1.27-1.22(m,12H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.1(x2),166.7,166.3,154.9,154.8,154.0,153.5,147.8,147.4,132.9,132.4,129.1,129.0,119.7(x2),118.0,117.9,102.9,102.8,93.9(x2),93.6(x2),71.1,70.4,64.8(x2),64.6(x2),58.4,57.6,56.9,55.1,43.4(x2),39.0,37.9,29.9,29.7,27.9(x2),18.4,18.0,15.0(x4);HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H32ClO8的计算值:483.1780，测定值483.1814[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001712
大环2-124和2-125：向化合物2-123（41mg，85μmol）的MeOH（3mL）溶液中加入PS-TsOH（264mg，3.2mmol.g-1）并在40℃下振摇悬浮液直到所有的原料消耗（～1小时）。过滤反应混合物并减压浓缩甲醇溶液，粗制混合物的L.C./M.S.分析显示出对应于共轭烯烃上的甲醇加成（2-124）和环氧打开为二醇（2-125）的两个清晰的峰。
2-125:1H NMR(400MHz,CD3OD,25℃)：δ=7.19(m,1H),6.89-6.81(m,1H),6.52(s,1H),6.47(s,1H),6.20(d,J=16.1Hz,1H),6.04(d,J=15.6Hz,1H),5.54-5.49(m,1H),5.43-5.36(m,1H),4.50(d,J=17.7Hz,1H),4.46(d,J=17.7Hz,1H),4.39(d,J=17.2Hz,1H),4.07(d,J=17.2Hz,1H),3.80-3.64(m,2H),3.51-3.46(m,2H),2.62-2.58(m,1H),2.39-2.30(m,2H),2.27-2.18(m,1H),2.08-2.00(m,2H),2.00-1.85(m,4H),1.44(d,J=6.4Hz,6H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H22ClO7的计算值:385.1054，测定值385.0944[M+H+]。
2-124：化合物2-124表征为基于NMR中松散的(loose)烯烃质子的α,β-共轭体系的甲醇加成。（由于2-124代表四种化合物的混合物，不可能详细指认）。HRMS(ESI-TOF):m/z:C19H24ClO7的计算值:399.1211，测定值399.1030[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001721
大环2-128：用10%mol的催化剂Grubbs’II（18.4mg，0.023mmol）处理2mM的化合物2-127（140mg，0.23mmol）的无水甲苯（115mL）溶液并加热至80℃达12小时。随后，将反应混合物通过二氧化硅垫，用CH2Cl2洗涤所述二氧化硅垫。减压浓缩合并的滤液。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-25%EtOAc/己烷梯度）获得大环2-128（116mg，87%）。1HNMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.71(dt,J=15.3,7.3Hz,1H),6.45(s,1H),5.81(d,J=15.3Hz,1H),5.25(s,2H),5.04-5.03(m,1H),3.89(d,J=17.4Hz,1H),3.57(d,J=17.4Hz,1H),2.31-2.04(m,6H),1.35(d,J=6.4Hz,3H),1.03(s,9H),0.99(s,9H),0.28-0.24(m,12H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.8,166.8,152.9,151.7,146.5,132.7,131.9,128.6,126.8,122.8,119.7,110.7,71.9,45.6,38.5,30.9,25.7(x4),25.6(x4),18.7,18.3,-4.1(x2),-4.4(x2);HRMS(ESI-TOF):m/z:C30H47ClO5Si2Na的计算值:601.2543，测定值601.2568[M+Na+]。
大环2-129：向化合物2-128（80mg，0.14mmol）溶于二甲氧基甲烷/乙腈的2：1混合物（2.1mL）的溶液中加入Na2·EDTA水溶液(700μL，4×10-4M)。将所得混合物冷却至0℃并用经由预冷的注射器加入的三氟丙酮（150μL）来处理。在约1小时的时间段内将碳酸氢钠（88mg，1.05mmol）和过硫酸氢钾制剂(Oxone)（430mg，0.70mmol）的混合物分批加至该均相溶液。接着对反应物使通过TLC并发现反应在2小时内完成。然后将反应混合物倒入水（10mL）中，用CH2Cl2（20mL）萃取并用Na2SO4干燥。在减压下除去溶剂，获得2种非对映异构体的混合物（比率为3：1）的纯的化合物2-129（66mg,93%）。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.90-6.77(m,1.33H),6.45(s,1.33H),6.06（d,J=15.8Hz,1.33H),5.31-5.29(m,1H),5.29-5.21(m,0.33H),4.03(d,J=18.1Hz,1.33H),3.63(d,J=17.6Hz,1H),2.82-2.80(m,1.33H),2.74-2.71(m,1.33H),2.62-2.60(m,1.33H),2.41-2.11(m,4.6H),2.02-1.95(m,0.33H),1.80-1.78(m;1H),1.78-1.68(m,0.7H),1.41(d,J=6.4Hz,3.9H),1.05(s,12H),0.97(s,12H),0.26(s,16H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.4,195.1,167.0,166.2,153.1(x2),152.1,151.5,147.8,146.9,132.9,132.2,129.0,128.3,122.2,121.4,120.0,119.7,110.6,110.3,71.3,70.1,58.2,57.9,56.6,55.2,44.7,43.9,38.7,37.6,30.1,29.4,28.3,27.5,25.7(x4),25.6(x4),25.5(x4),25.4(x4),20.8,17.8,-3.9,-4.0,-4.3(x3),-4.4(x3);HRMS(ESI-TOF):m/z:C30H48O6ClSi2的计算值:595.2672，测定值595.2698[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001732
Figure BDA0000381115570001741
Pochonin A(2-122)：向化合物2-129（66mg，0.11mmol）的THF（2mL）溶液中加入TBAF（244μL，溶于己烷的1M溶液，0.24mmol）并将混合物在室温下搅拌20分钟。接着用饱和NH4Cl水溶液（8mL）终止反应物的反应，用EtOAc（10mL）萃取若干次并用Na2SO4干燥。减压浓缩，随后用急骤色谱法纯化（硅胶，0-70%Et2O/己烷梯度），获得两种不同的非对映异构体pochonin A（2-122）和它的非对映异构体2-122b的3:1的混合物（80%的收率）。通过制备TLC用Et2O/己烷的3：1混合物将异构体分离。1H NMR(400MHz,[D6]DMSO,25℃)：δ=10.81(s,1H),10.74(s,1H),6.97-6.89(m,1H),6.53(s,1H),6.08(d,J=15.8Hz,1H),5.15-5.13(m,1H),4.19(d,J=17.5Hz,1H),4.09(d,J=17.5Hz,1H),2.81(s,1H),2.60(m,1H),2.44-2.40(m,2H),2.30-2.22(m,2H),1.80-1.78(m,2H),1.32(d,J=6.4Hz,3H);1HNMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.85(s,1H),6.94-6.87(m,1H),6.70(s,1H),6.14(s,1H),6.12（d,J=16.4Hz,1H),5.32-5.31(m,1H),4.53(d,J=18.1Hz,1H),4.27(d,J=18.1Hz,1H),2.77(s,1H),2.58-2.56(m,2H),2.47-2.43(m,1H),2.35-2.28(m,1H),2.11-2.07(m,1H),1.93-1.86(m,1H),1.51(d,J=6.4Hz,3H),0.94-0.90(m,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.0,170.0,164.1,156.4,147.5,135.7,129.9,115.0,107.3,103.8,72.2,57.0,55.5,45.1,36.3,30.9,29.1,17.9;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H19ClO6Na的计算值:389.0762，测定值389.0724[M+Na+]。(-)-(2R,4R,5R):[α]25 D=-7.0(c0.11,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001742
化合物2-122b:1H NMR(400MHz,[D6]DMSO,25℃)：δ=10.74(s,1H),10.39(s,1H),6.94-6.89(m,1H),6.52(s,1H),6.02(d,J=16.4Hz,1H),5.18(m,1H),4.32(d,J=17.5Hz,1H),3.96(d,J=17.5Hz,1H),2.82(s,1H),2.68(s,1H),2.34-2.26(m,3H),1.86-1.83(m,1H),1.70-1.63(m,1H),1.22(d,J=5.8Hz,3H),1H被溶剂峰掩盖;1H NMR（400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.37(s,1H),6.90-6.83(m,1H),6.67(s,1H),6.24(d,J=16.4Hz,1H),6.08(s,1H),5.39-5.37(m,1H),4.52-4.36(m,2H),2.72-2.62(m,2H),2.56-2.52(m,1H),2.45-2.40(m,1H),2.40-2.37(m,1H),2.08-2.04(m,1H),1.91-1.86(m,1H),1.35(d,J=6.4Hz,3H),1H被溶剂峰掩盖;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H19ClO6Na的计算值:389.0762;测定值389.0796[M+Na+]。(+)-(2R,4S,5S):[α]25 D=+13.8(c0.13,CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001751
大环2-132：用10%mol的Grubbs’II（20.8mg，0.026mmol）处理2mM的化合物2-131（166mg，0.26mmol）的无水甲苯（130mL）溶液并加热至80℃达12小时。随后，将反应混合物通过二氧化硅垫，用CH2Cl2洗涤所述二氧化硅垫。减压浓缩合并的滤液。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-25%EtOAc/己烷梯度）获得大环2-132（136mg，87%）。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.08（s,1H）,6.77-6.71(m,1H),5.89(d,J=15.2Hz,1H),5.35-5.24(m,6H),5.09-5.05(m,1H),4.02(d,J=17.0Hz,1H),3.85-3.78(m,5H),2.37-2.08(m,6H),1.39(d,J=5.8Hz,3H),1.02-0.97(m,4H),0.04(s,18H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.7,166.8,154.6,153.9,147.0,132.8,131.7,128.6,127.5,120.6,117.8,102.7,93.7,93.3,71.9,66.9,66.6,44.7,39.2,30.8(x2),19.5,18.0,17.9,-1.4(x6);HRMS(ESI-TOF):m/z:C30H47O7ClSi2H2O的计算值:628.2649，测定值628.2870[M+H2O]。(-)-(2R):[α]25 D=-16.3(c0.85，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001752
大环2-133：向化合物2-132（40mg，65μmol）溶于二甲氧基甲烷/乙腈2：1的混合物（1.1mL）的溶液中加入Na2·EDTA水溶液（350μL，4×10-4M）。将所得的溶液冷却至0℃并经由预冷的注射器加入三氟丙酮（75μL）处理。随后，在约1小时的时间段内将碳酸氢钠（44mg，0.5mmol）和过硫酸氢钾制剂（215mg，0.35mmol）的混合物分批加入到该均相溶液。接着对反应物使通过TLC并发现反应在2小时内完成。然后将反应混合物倒入水（5mL）中，用CH2Cl2（10mL）萃取并用Na2SO4干燥。在减压下去除溶剂获得纯的2种非对映异构体的1：1混合物的化合物2-133（34mg，82%）。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.11(s,1H),7.09(s,1H),6.91-6.76(m,2H),6.12(d,J=15.8Hz,1H),6.06(d,J=15.8Hz,1H),5.36-5.31(m,6H),5.23-5.22(m,4H),4.15(d,J=16.9Hz,1H),4.13(d,J=16.0Hz,1H),4.05(d,J=17.5Hz,1H),3.85-3.75(m,9H),2.81-2.79(m,1H),2.75-2.73(m,1H),2.68-2.62(m,2H),2.42-2.29(m,10H),1.72-1.60(m,2H),1.41(d,J=7.6Hz,3H),1.39(d,J=6.4Hz,3H),1.02-0.96(m,8H),0.03(s,36H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.1(x2),166.8,166.3,154.9(x2),154.2,153.7,147.8,147.4,132.9,132.4,129.1,129.0,119.8,119.6,117.9,117.8,102.8,102.7,93.7(x2),93.4(x2),71.1,70.3,66.9,66.8,66.6,66.5,58.4,57.6,56.9,55.1,43.5(x2),38.9,37.9,29.9,29.7,27.9(x2),20.7(x2),18.4,18.0,17.9(x2),-1.40(x12);HRMS（ESI-TOF):m/z:C30H48O8ClSi2的计算值:627.2571，测定值627.2551[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001761
来自大环2-133的Pochonin A（2-122）：室温下，用MgBr2·Et2O（69mg，0.27mmol）处理化合物2-133（21mg，33μmol）的CH2Cl2（2.5mL）溶液。随后对反应物使用L.C./M.S.直到溴代（bromohydrine）开始出现（～1小时）。接着将反应物用EtOAc（5mL）稀释，用饱和NH4Cl水溶液(5mL)洗涤并经MgSO4干燥。减压浓缩后，用急骤色谱法纯化（硅胶，0-70%Et2O/己烷梯度）获得非对映异构体的1：1混合物的pochonin A（2-122）（8.6mg，70%）。
合成化合物2-110a-g和2-117a-g的通用步骤：在室温下，将酸2-95a或2-95b（1.0当量）、高烯丙醇（R）-120a-g或者（S）-120a-g（1.0当量）和三-（3-氯苯基）膦（2.0当量）的无水甲苯(0.05M)溶液用PS-DEAD（2.5当量，1.3mmol.g-1）处理。搅拌30分钟后，将反应混合物在二氧化硅上过滤并用己烷/EtOAc（10：1，100mL）和己烷/EtOAc（3：1，100mL）洗涤。将3：1混合物减压浓缩，产出化合物2-115a-g或者2-116a-g（60%-80%）。未经进一步纯化，将化合物2-115a-g或者2-116a-g（1.0当量）和TBAI（催化量）溶于DMF（0.15M）中，并用二异丙基乙胺（4.0当量）和氯甲基乙基醚（4.0当量）处理。在80℃搅拌过夜后，将反应混合物用EtOAc稀释并用饱和NH4Cl水溶液洗涤若干次。将有机相经MgSO4干燥并减压浓缩以产出化合物2-110a-g和2-117a-g（80%-90%）。合成化合物2-119a-g和2-140a-g的通用步骤：将在-78℃冷却的化合物2-110a-g或2-117a-g（1.0当量）的无水THF（0.2M）溶液用新制备的LDA（2.0当量）处理。之后立即将α，β-不饱和Weinreb酰胺2-114加入到冷却的溶液（1.0当量）中。接着将所得混合物在-78℃搅拌10分钟并通过加入Amberlite树脂（20当量）来终止反应。一旦暖至室温，就将反应物在二氧化硅垫上过滤并用EtOAc洗涤。减压浓缩获得期望的化合物2-118a-g或2-119a-g。该化合物被直接用于复分解反应而未经任何进一步纯化。当X=H时，观察到20%的相应1,4-加成化合物,该混合物的一小部分被纯化用于表征化合物2-119a-g和2-140a-g（硅胶，0-20%EtOAc/己烷梯度）。
复分解反应的通用步骤：将粗制的2-118a-g或2-119a-g（或当X=H时，2-119a-g和2-140a-g的混合物）的无水甲苯（2mM）溶液用Grubbs’II（0.10当量）处理并在80℃加热12小时。将反应物冷却至室温并将混合物通过硅胶垫过滤，用CH2Cl2洗涤，随后用EtOAc/环己烷1:1的混合物洗涤，并减压浓缩。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-25%EtOAc/环己烷梯度），获得化合物2-112a-g或2-120a-g（和2-121a-g）（38%-70%，经两步）。
Figure BDA0000381115570001771
化合物(S)-2-112:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.10(s,1H),6.75-6.71(m,1H),5.88(d,J=15.8Hz,1H),5.32(s,2H),5.27-5.20(m,2H),5.25(s,2H),5.08-5.04(m,1H),4.01(d,J=17.0Hz,1H),3.82-3.73(m,5H),2.36-2.32(m,2H),2.26-2.20(m,3H),2.12-2.05(m,2H),1.38(d,J=5.8Hz,3H),1.25(t,J=7.0Hz,3H),1.24(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.5,166.7,154.6,153.8,147.1,132.8,131.6,128.6,127.5,120.7,117.8,103.0,94.0,93.7,72.0,64.8,64.6,44.7,39.1,30.8,19.4,15.0,2C消失;HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H31O7ClNa的计算值:489.1551，测定值489.1651[M+Na+]。(+)-(2S):[α]25 D=+25.0(c1.00，CHCl3)。
化合物(R)-2-112a:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.49-7.47(m,2H),7.40-7.29(m,3H),7.10(s,1H),6.84-6.77(m,1H),5.98(d,J=15.2Hz,1H),5.78(d,J=8.8Hz,1H),5.44-5.30(m,4H),5.15(d,J=7.0Hz,1H),5.05(d,J=6.8Hz,1H),4.07(d,J=17.0Hz,1H),3.90(d,J=17.0Hz,1H),3.80(d,J=7.0Hz,2H),3.60-3.51(m,2H),2.68-2.62(m,1H),2.50-2.47(m,1H),2.38-2.29(m,2H),2.14-2.02(m,2H),1.25(t,J=7.0Hz,3H),1.17(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.7,166.7,154.8,154.2,147.3,140.7,133.3,132.1,128.5,128.3(x2),128.2,127.9,127.7,126.7(x2),120.1,118.1,102.9,93.9,93.4,77.4,64.8,64.4,44.5,40.5,30.7,15.0,14.9;HRMS(ESI-TOF):m/z:C29H33O7ClNa的计算值:551.1680，测定值551.1807[M+Na+]。[α]25 D=-40.4(c0.79，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001782
化合物(S)-2-112a:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.53-7.51(m,2H),7.44-7.33(m,3H),7.14(s,1H),6.88-6.81(m,1H),6.02(d,J=15.2Hz,1H),5.78(dd,J=10.5,1.8Hz,1H),5.46-5.33(m,4H),5.19(d,J=7.0Hz,1H),5.09(d,J=7.6Hz,1H),4.10(d,J=17.0Hz,1H),3.94(d,J=17.5Hz,1H),3.83(d,J=7.0Hz,2H),3.64-3.55(m,2H),2.70-2.64(m,1H),2.54-2.50(m,1H),2.37-2.33(m,2H),2.15-2.08(m,2H),1.29(t,J=7.3Hz,3H),1.21(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.7,166.7,154.8,154.2,147.3,140.7,133.2,132.1,128.5,128.2,127.9,127.7,126.7,120.1,118.0,102.8,93.9,93.5,77.4,64.8,64.4,44.5,40.5,30.7,15.0,14.9,(有一个碳未检测到);HRMS(ESI-TOF):m/z:C29H33O7ClNa的计算值:551.1680，测定值551.1704[M+Na+]。[α]25 D=+48.8(c1.00，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001791
化合物(R)-2-112d:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.14(s,1H),6.72-6.66(m,1H),5.88(d,J=15.2Hz,1H),5.33-5.17(m,6H),4.92-4.88(m,1H),4.21(d,J=17.0Hz,1H),3.92(d,J=17.0Hz,1H),3.79-3.67(m,4H),2.33-2.17(m,5H),2.07-1.96(m,2H),1.23(t,J=7.0Hz,3H),1.21(t,J=7.0Hz,3H),1.00(d,J=5.8Hz,6H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.7,167.1,154.7,154.4,147.4,133.7,131.2,128.8,128.4,119.7,118.0,102.7,93.9,93.5,80.0,64.8,64.5,44.1,32.3,31.2,30.7,30.6,18.3,17.2,15.0,14.9;HRMS(ESI-TOF):m/z:C26H35O7ClNa的计算值:517.1964，测定值517.1844[M+Na+]。[α]25 D=+21.3(c1.00，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001792
化合物2-112g:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.12(s,1H),6.76-6.70(m,1H),5.87(d,J=15.0Hz,1H),5.33(s,2H),5.26(s,2H),5.24-5.16(m,2H),4.25(t,J=5.1Hz,2H),3.82-3.73(m,6H),2.40-2.36(m,2H),2.16-2.13(m,4H),1.27-1.23(m,6H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.2,167.2,154.6,153.4,146.8,132.3,131.3,128.9,128.5,121.0,117.8,103.0,94.0,93.7,64.8,64.7,64.6,45.4,31.9,31.0,30.7,15.0,15.0;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H30O7Cl的计算值:453.1675，测定值453.1672[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001801
化合物(S)-2-120:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.81-6.72(m,1H),6.74(d,J=1.8Hz,1H),6.56(d,J=1.8Hz,1H),5.98(d,J=15.8Hz,1H),5.38-5.33(m,2H),5.22-5.13(m,5H),4.06(d,J=14.6Hz,1H),3.75-3.65(m,4H),3.46(d,J=14.6Hz,1H),2.37-2.22(m,4H),2.18-2.02(m,2H),1.39(d,J=5.8Hz,3H),1.22(t,J=7.0Hz,3H),1.18(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.4,167.7,159.0,156.1,148.9,135.0,131.7,129.8,128.5,118.5,109.7,102.2,93.4,93.0,71.5,64.5,64.4,44.3,39.5,30.9,30.6,20.2,15.0(x2);HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H32O7Na的计算值：455.2040，测定值455.1901[M+Na+]。(+)-(2S):[α]25 D=+59.5(c1.00，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001802
化合物(R)-2-120a:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.56-7.54(m,2H),7.41-7.29(m,3H),6.89-6.82(m,1H),6.78(d,J=2.3Hz,1H),6.61(d,J=1.8Hz,1H),6.06(d,J=16.4Hz,1H),5.98(dd,J=11.7,2.4Hz,1H),5.53-5.51(m,2H),5.20(d,J=7.0Hz,1H),5.17(d,J=6.4Hz,1H),5.07(d,J=7.0Hz,1H),4.96(d,J=7.0Hz,1H),4.20(d,J=14.6Hz,1H),3.73-3.68(m,2H),3.54-3.45(m,3H),2.71-2.66(m,1H),2.55-2.51(m,1H),2.38-2.32(m,2H),2.23-2.06(m,2H),1.22(t,J=7.0Hz,3H),1.14(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.6,167.4,159.3,156.6,149.0,140.8,135.6,132.2,129.9,128.5,128.2(x2),127.9,126.9(x2),117.9,109.9,102.3,93.2,93.0,76.6,64.4,64.3,44.4,40.5,31.0,30.6,15.0,14.9;HRMS(ESI-TOF)：m/z:C29H34O7Na的计算值:517.2197，测定值517.2062[M+Na+]。[α]25 D=-108.3(c1.00，CHCl3)。
化合物(S)-2-120a:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.56-7.54(m,2H),7.41-7.29(m,3H),6.90-6.82(m,1H),6.78(d,J=2.4Hz,1H),6.61(d,J=1.8Hz,1H),6.07(d,J=16.4Hz,1H),5.98(dd,J=11.4,2.0Hz,1H),5.53-5.51(m,2H),5.20(d,J=7.0Hz,1H),5.18(d,J=7.0Hz,1H),5.07(d,J=7.0Hz,1H),4.97(d,J=7.0Hz,1H),4.20(d,J=14.6Hz,1H),3.74-3.69(m,2H),3.55-3.46(m,3H),2.71-2.66(m,1H),2.55-2.52(m,1H),2.38-2.33(m,2H),2.23-2.09(m,2H),1.22(t,J=7.0Hz,3H),1.15(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.6,167.5,159.3,156.6,149.0,140.8,135.6,132.2,129.9,128.5,128.2(x2),127.9,126.9(x2),117.9,110.0,102.3,93.2,93.0,76.6,64.4,64.3,44.4,40.5,31.0,30.6,15.0,14.9;HRMS(ESI-TOF):m/z:C29H34O7Na的计算值:517.2197，测定值517.2049[M+Na+]。[α]25 D=+81.6(c1.00，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001812
化合物(R)-2-120d:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.83(d,J=1.7Hz,1H),6.79-6.72(m,1H),6.61(d,J=1.2Hz,1H),6.00(d,J=16.4Hz,1H),5.38-5.36(m,2H),5.26-5.09(m,5H),4.30(d,J=14.6Hz,1H),3.74-3.67(m,4H),3.46(d,J=14.6Hz,1H),2.33-2.26(m,4H),2.18-2.14(m,2H),2.06-2.01(m,1H),1.23(t,J=7.0Hz,3H),1.21(t,J=7.0Hz,3H),1.06(d,J=6.6Hz,3H),1.05(d,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.9,167.6,159.2,156.9,149.2,136.4,131.5,129.9,129.2,117.4,109.8,102.0,93.3,93.0,78.9,64.4(x2),44.2,33.0,32.0,31.0,30.4,18.3,17.2,15.0(x2);HRMS(ESI-TOF):m/z:C26H36O7Na的计算值:483.2353，测定值483.2215[M+Na+]。[α]25 D=+52.8(c1.00，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001821
化合物(R)-2-120e:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.77(d,J=1.8Hz,1H),6.77-6.70(m,1H),6.57(d,J=1.7Hz,1H),5.97(d,J=16.4Hz,1H),5.37-5.32(m,2H),5.21-5.14(m,5H),4.17(d,J=14.6Hz,1H),3.73-3.65(m,4H),3.45(d,J=14.6Hz,1H),2.39-2.20(m,4H),2.17-2.00(m,2H),1.78-1.72(m,1H),1.69-1.60(m,1H),1.54-1.44(m,2H),1.22(t,J=7.0Hz,3H),1.18(t,J=7.0Hz,3H),0.97(d,J=7.3Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.7,167.6,159.1,156.6,149.0,135.8,131.5,129.9,128.7,117.9,109.8,102.1,93.3,93.0,74.5,64.4,64.3,44.2,37.3,37.0,31.0,30.5,18.2,15.0,14.9,14.2。[[α]25 D=-1.3(c1.00，CHCl3)。
化合物(R)-2-120f:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.39-7.33(m,4H),7.31-7.27(m,1H),6.82(s,1H),6.82-6.75(m,1H),6.63(s,1H),6.02(d,J=16.4Hz,1H),5.35-5.29(m,2H),5.27-5.20(m,5H),4.16(d,J=14.6Hz,1H),3.79-3.70(m,4H),3.52(d,J=14.6Hz,1H),3.37(dd,J=13.4,4.1Hz,1H),2.78(dd,J=13.5,9.4Hz,1H),2.37-2.12(m,5H),2.06-2.02(m,1H),1.26(t,J=7.0Hz,3H),1.24(t,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.6,167.8,159.2,156.5,149.0,137.3,135.5,131.8,129.9,129.5(x2),128.6(x2),128.4,126.7,118.1,109.9,102.3,93.5,93.1,75.8,64.6,64.4,44.4,41.0,36.2,31.0,30.6,15.0(x2);HRMS(ESI-TOF):m/z:C30H36O7Na的计算值:531.2359，测定值531.2350[M+Na+]。[α]25 D=-24.1(c0.33，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001831
化合物2-120g:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.85-6.78(m+s,2H),6.56(d,J=2.1Hz,1H),6.00(d,J=16.1Hz,1H),5.38-5.34(m,2H),5.23(s,2H),5.19(s,2H),4.33(t,J=5.4Hz,2H),3.75-3.70(m,6H),2.45-2.41(m,2H),2.19(bs,4H),1.27-1.20(m,6H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.2,168.1,159.1,155.8,148.6,134.5,131.7,129.8,129.1,118.9,109.9,102.4,93.6,93.1,64.5,64.5,64.4,45.4,31.9,31.1,30.8,15.0,15.0;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H30O7Na的计算值:441.1884，测定值441.1888[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001832
化合物(S)-2-121:四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.77-6.72(m,1H),6.57-6.47(m,1H),5.62-5.35(m,3H),5.24-5.16(m,4H),3.77-3.70(m,4H),3.62-3.60(m,1.5H),3.53-3.49(m,1.5H),3.17-3.11(m,3H),3.04-2.97(m,1H),2.57-2.44(m,2H),2.36-1.99(m,6H),1.37-1.33(m,3H),1.28-1.21(m,8H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C26H39O8NNa的计算值:516.2568，测定值516.2596[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001833
化合物(R)-2-121a:四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.51-7.42(m,2H),7.38-7.31(m,3H),6.73-6.70(m,1H),6.60-6.49(m,1H),6.45-6.31(m,1H),5.73-5.39(m,2H),5.23-5.00(m,4H),3.75-3.69(m,2H),3.56-3.34(m,6H),3.19-3.09(m,3H),2.66-2.08(m,8H),1.31-1.19(m,5H),1.10-1.04(m,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C31H41O8NNa的计算值:578.2724，测定值578.2715[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001841
化合物(S)-2-121a:四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.51-7.42(m,2H),7.38-7.29(m,3H),6.73-6.70(m,1H),6.60-6.49(m,1H),6.45-6.31(m,1H),5.73-5.42(m,2H),5.25-5.01(m,4H),3.76-3.69(m,2H),3.62-3.34(m,6H),3.20-3.09(m,3H),2.66-2.50(m,2H),2.22-2.12(m,4H),1.72-1.66(m,2H),1.31-1.19(m,5H),1.10-1.04(m,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C31H41O8NNa的计算值:578.2724，测定值578.2720[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001842
化合物(R)-2-121d:四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.77(s,1H),6.52(s,0.5H),6.46(s,0.5H),5.59-5.37(m,2H),5.21-5.18(m,4H),5.09-4.92(m,1H),3.75-3.70(m,4H),3.53-3.48(m,3H),3.38-3.34(m,1H),3.19-3.10(m,3H),2.65-2.47(m,3H),2.29-2.04(m,6H),1.89-1.72(m,2H),1.31-1.20(m,6H),1.06-0.96(m,6H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C28H43O8NNa的计算值:544.2881，测定值544.2907[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001851
化合物2-121g:两种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=6.74-6.72(m,1H),6.54(d,J=1.8Hz,0.6H),6.50(d,J=1.7Hz,0.4H),5.52-5.41(m,2H),5.21(s,2H),5.19(s,2H),4.69-4.65(m,1H),4.58-4.47(m,1H),3.74-3.68(m,4H),3.55(s,3H),3.13(s,3H),2.97-2.94(m,1H),2.52-2.40(m,2H),2.26-1.98(m,6H),1.72-1.58(m,2H),1.24-1.20(m,6H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C25H38O8N的计算值:480.2567，测定值480.2592[M+H+]。
用于EOM脱保护以生成化合物脱保护的-2-121a-g、2-85a-g和2-103a-g的通用步骤：向相应的化合物2-121a-g或2-112a-g或2-120a-g(1.0当量)的MeOH（0.03M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol.g-1）并将所得的悬浮液在40℃振摇1至4小时。在此之后，将反应混合物过滤并在减压下将甲醇溶液浓缩。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-33%EtOAc/环己烷梯度），获得相应的化合物脱保护的-2-121a-g或2-85a-g或2-103a-g（＞90%）。
脱保护的化合物（S）-2-121：四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.90(s,0.5H),12.83(s,0.5H),12.12(s,0.5H),12.02(s,0.5H),6.92(s,0.5H),6.84(s,0.5H),6.83(s,1H),6.79(s,0.5H),6.60(s,1H),6.54(s,0.5H),5.60-5.29(m,4H),5.17-4.99(m,2H),4.14-3.99(m,2H),2.98-2.72(m,12H),2.60-1.92(m,16H),1.31(d,J=6.4Hz,1.5H),1.22(d,J=8.7Hz,1.5H),1.13-1.02(m,7H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H27O6NNa的计算值:400.1851，测定值400.1731[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001861
脱保护的化合物（R）-2-121a：四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.90(s,0.25H),11.08(s,0.5H),10.98(s,0.25H),7.38-7.29(m,5H),6.39(s,0.25H),6.33(s,0.25H),6.29(s,1.25H),6.26(s,0.25H),6.05-5.95(m,1H),5.70-5.52(m,2H),4.18-4.03(m,1H),3.51-3.49(m,3H),3.16-3.14(m,3H),2.75-2.62(m,2H),2.36-2.29(m,2H),2.12-1.96(m,4H),1.81-1.73(m,2H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C25H30O6N的计算值:440.2068，测定值440.2103[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001862
脱保护的化合物（S）-2-121a：四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.90(s,0.25H),11.08(s,0.5H),10.98(s,0.25H),7.38-7.31(m,5H),6.38(s,0.25H),6.33(s,0.25H),6.29(s,1.25H),6.26(s,0.25H),6.05-5.95(m,1H),5.71-5.54(m,2H),4.13-4.04(m,1H),3.53-3.50(m,3H),3.19-3.14(m,3H),2.78-2.63(m,2H),2.33-2.29(m,2H),2.16-2.04(m,4H),1.81-1.68(m,2H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C25H29O6NNa的计算值:462.1887，测定值462.2080[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001871
脱保护的化合物（R）-2-121d：四种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.54(s,1H),6.33(d,J=2.3Hz,1H),6.25(s,1H),5.53-5.51(m,1H),5.44-5.41(m,1H),5.11-5.08(m,1H),4.01(d,J=11.7Hz,2H),3.45(s,3H),3.11(s,3H),2.83-2.73(m,1H),2.68-2.59(m,1H),2.27-2.20(m,1H),2.10-1.87(m,6H),1.82-1.72(m,1H),1.01-0.94(m,6H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C22H31O6NNa的计算值:428.2044，测定值428.2109[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001872
脱保护的化合物2-121g：两种非对映异构体的混合物;1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.33(s,0.5H),11.85(s,0.5H),6.34-6.32(m,1H),6.25-6.22(m,1H),5.62-5.45(m,2H),4.54-4.37(m,1H),4.29-4.21(m,1H),3.53-3.49(m,3H),3.15-3.12(m,3.5H),2.95-2.86(m,0.5H),2.67-2.52(m,2H),2.39-1.96(m,8H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C19H26O6N的计算值:364.1755，测定值364.1715[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001873
化合物(S)-2-85:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.40(s,1H),6.83(s,1H),6.66-6.61(m,1H),5.96(bs,1H),5.80(d,J=15.2Hz,1H),5.16-5.12(m,1H),4.99-4.91(m,1H),4.75-4.68(m,1H),4.26(d,J=17.5Hz,1H),4.13(d,J=17.5Hz,1H),2.52-2.45(m,1H),1.86-1.79(m,3H),1.75-1.67(m,1H),1.54-1.49(m,1H),0.97(d,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=193.8,169.8,164.3,156.8,146.0,137.1,131.9,128.1,126.2,115.2,107.6,103.6,72.4,46.2,36.3,31.0,30.8,17.2。(-)-(2S):[α]25 D=-21.9(c0.62，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001881
化合物(R)-2-85a:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.25(bs,1H),7.32-7.29(m,2H),7.19-7.15(m,3H),6.80(s,1H),6.81-6.75(m,1H),6.29-6.26(m,1H),5.92(d,J=15.8Hz,1H),5.80(s,1H),5.05-4.99(m,1H),4.81-4.75(m,1H),4.56(d,J=17.6Hz,1H),4.12(d,J=17.5Ha,1H),2.73-2.66(m,1H),2.39-2.35(m,1H),1.86-1.76(m,2H),1.64-1.49(m,2H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=194.2,169.8,164.4,156.8,145.5,138.3,137.0,132.9,129.9(x2),128.6,127.3,126.6(x2),125.8,115.2,107.5,103.6,77.6,46.6,38.3,31.0,30.6;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H21O5ClNa的计算值:435.0970，测定值435.0914[M+Na+]。[α]25D=-12.0(c0.55，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001882
化合物(S)-2-85a:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.20(bs,1H),7.15-7.09(m,3H),6.75(s,1H),6.77-6.71(m,1H),6.25-6.22(m,1H),5.88(d,J=15.2Hz,1H),5.72(s,1H),5.00-4.95(m,1H),4.77-4.73(m,1H),4.52(d,J=17.6Hz,1H),4.08(d,J=17.5Hz,1H),2.68-2.62(m,1H),2.35-2.31(m,1H),1.81-1.78(m,2H),1.56-1.49(m,2H),2H被溶剂峰掩盖;13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=194.2,169.8,164.4,156.8,145.5,138.3,137.0,132.2,129.9(x2),128.5,127.3,126.5(x2),125.8,115.2,107.5,103.6,77.5,46.6,38.2,31.0,30.6;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H21O5ClNa的计算值:435.0970，测定值435.0885[M+Na+]。[α]25 D=+11.6(c0.51，CHCl3)。
化合物(R)-2-85d:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.31(s,1H),6.83(s,1H),6.74-6.67(m,1H),5.84(bs,1H),5.82(d,J=15.8Hz,1H),5.03-4.95(m,1H),4.88-4.86(m,1H),4.76-4.70(m,1H),4.40(d,J=17.6Hz,1H),4.15(d,J=17.5Hz,1H),2.40-2.34(m,1H),2.22-2.18(m,1H),1.87-1.65(m,4H),1.53-1.48(m,1H),0.92(d,J=6.4Hz,3H),0.66(d,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=193.7,164.2,156.8,145.8,137.2,131.8,129.3,126.3,115.3,107.9,103.6,82.1,46.4,33.3,30.9,30.7,28.8,20.1,18.5,18.3;HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H23ClO5Na的计算值:401.1126，测定值401.1170[M+Na+]。[α]25 D=-35.6(c0.52，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001892
化合物2-85g:1H NMR(400MHz,CD3OD,25℃)：δ=6.74-6.68(m,1H),6.48(s,1H),5.86(d,J=15.2Hz,1H),5.31-5.25(m,2H),4.39(t,J=5.3Hz,2H),4.27(s,2H),2.43-2.40(m,2H),2.25(m,4H),未检测到酚;13C NMR(100MHz,CD3OD,25℃)：δ=196.9,170.1,161.9,158.1,147.8,135.9,130.9,130.2,129.9,115.2,107.3,102.4,65.9,46.2,31.3,30.9,30.5;HRMS(ESI-TOF):m/z:C17H18O5Cl的计算值:337.0837，测定值337.0797[M+H+]。
Figure BDA0000381115570001901
化合物(S)-2-103:1H NMR(400MHz,CD3OD,25℃)：δ=6.78-6.71(m,1H),6.29(d,J=2.4Hz,1H),6.22(d,J=2.0Hz,1H),5.87(d,J=15.5Hz,1H),5.37-5.23(m,3H),4.01(d,J=17.2Hz,1H),3.92(d,J=17.0Hz,1H),2.67-2.61(m,1H),2.29-2.15(m,5H),1.31(d,J=6.4Hz,3H),酚未检测;13C NMR(100MHz,CD3OD,25℃)：δ=198.5,169.8,164.2,162.3,148.4,139.1,131.6,129.6,127.3,111.7,101.7,72.0,47.7,36.8,30.8,30.7,17.4,(有一个季碳未检测到);HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H20O5Na的计算值:339.1203，测定值339.1141[M+Na+]。(-)-(2S):[α]25 D=-45.1(c0.27，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001902
化合物(R)-2-103a:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.0(bs,1H),7.32-7.29(m,3H),7.19-7.15(m,2H),6.86-6.79(m,1H),6.51(d,J=2.4Hz,1H),6.27-6.25(m,1H),6.11(d,J=2.4Hz,1H),6.02(d,J=15.8Hz,1H),5.49(s,1H),5.17-5.10(m,1H),4.97-4.90(m,1H),4.40(d,J=16.4Hz,1H),3.97(d,J=17.2Hz,1H),2.83-2.76(m,1H),2.45-2.38(m,1H),1.89-1.78(m,2H),1.67-1.58(m,2H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=196.5,169.6,166.1,161.3,146.0,140.5,138.8,132.1,130.0,128.6(x2),127.3,126.6(x2),126.3,112.2,105.9,103.0,77.1,48.6,38.4,30.9,30.3;HRMS（ESI-TOF):m/z:C23H22O5Na的计算值:401.1359，测定值401.1271[M+Na+]。[α]25 D=-10.3(c0.25，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001911
化合物(S)-2-103a:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.0(bs,1H),7.27-7.21(m,3H),7.17-7.13(m,2H),6.87-6.79(m,1H),6.55(d,J=2.3Hz,1H),6.29-6.26(m,1H),6.16(d,J=2.3Hz,1H),6.03(d,J=15.8Hz,1H),5.74(s,1H),5.18-5.12(m,1H),4.98-4.91(m,1H),4.41(d,J=15.8Hz,1H),3.99(d,J=16.9Hz,1H),2.84-2.77(m,1H),2.46-2.43(m,1H),1.85-1.79(m,2H),1.70-1.58(m,2H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=196.9,169.6,166.2,161.5,146.3,140.5,138.9,132.1,130.0,128.6(x2),127.3,126.6(x2),126.3,112.2,105.8,103.0,77.1,48.6,38.4,30.9,30.4;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H22O5Na的计算值:401.1359，测定值401.1264[M+Na+]。[α]25 D=+11.9(c0.51，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001912
化合物(R)-2-103d:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.10(s,1H),6.79(dt,J=15.2,7.6Hz,1H),6.59(d,J=2.4Hz,1H),6.22(d,J=2.3Hz,1H),5.96(d,J=15.8Hz,1H),5.88(bs,1H),5.13-5.05(m,1H),4.92-4.85(m,2H),4.27(d,J=15.8Hz,1H),4.03(d,J=15.8Hz,1H),2.50-2.44(m,1H),2.24-2.20(m,1H),1.96-1.71(m,4H),1.63-1.56(m,1H),0.91(d,J=6.3Hz,3H),0.71(d,J=6.4Hz,3H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=196.5,169.7,166.0,161.4,146.8,140.8,131.7,129.5,126.9,112.3,106.0,103.0,81.3,48.5,33.7,30.9,30.4,29.6,19.7,18.4;HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H24O5Na的计算值:367.1516，测定值367.1424[M+Na+]。[α]25 D=-31.9(c0.50，CHCl3)。
化合物(R)-2-103e:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.43(s,1H),6.74(d,J=1.7Hz,1H),6.73-6.65(m,1H),6.48(d,J=1.7Hz,1H),5.92(d,J=15.8Hz,1H),5.12-5.00(m,2H),4.91-4.80(m,1H),4.19(d,J=17.0Hz,1H),3.84(d,J=16.4Hz,1H),2.77(m,1H),2.64-2.57(m,1H),2.01-1.97(m,1H),1.89-1.70(m,3H),1.61-1.56(m,2H),1.30-1.21(m,2H),0.90(t,J=6.7Hz,3H),未检测到对苯酚;13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.5,169.9,165.6,160.6,147.5,140.2,131.9,129.5,127.0,112.8,106.1,102.9,76.2,48.7,35.7,34.3,31.1,29.7,19.4,13.8;HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H25O5的计算值:345.1697，测定值345.1739[M+H+]。[α]25 D=+21.6(c0.36，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001922
化合物(R)-2-103f:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.31(s,1H),7.19-7.13(m,5H),6.80-6.72(m,1H),6.53(d,J==1.8Hz,1H),6.05(s,1H),5.89(d,J=15.8Hz,1H),5.47-5.44(m,1H),5.11-5.05(m,1H),4.85-4.81(m,1H),4.10(d,J=17.0Hz,1H),3.62(d,J=17.0Hz,1H),2.89-2.84(m,1H),2.67-2.60(m,2H),2.08-2.04(m,1H),1.90-1.69(m,3H),1.52-1.44(m,1H),未检测到对苯酚;13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=197.7,169.9,165.7,160.7,147.4,140.2,137.2,132.2,129.5,128.8(x2),128.7(x3),126.8,112.4,105.9,102.9,48.9,38.5,35.3,31.1(x2),29.7;HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H25O5的计算值:393.1697，测定值393.1765[M+H+]。[α]25 D=+25.4(c0.41，CHCl3)。
Figure BDA0000381115570001931
化合物2-103g:1H NMR(400MHz,CD3OD,25℃)：δ=6.75-6.69(m,1H),6.29(s,1H),6.29(d,J=2.3Hz,1H),5.90(d,J=15.8Hz,1H),5.30-5.28(m,2H),4.39(t,J=5.2Hz,2H),4.02(s,2H),2.45-2.41(m,2H),2.28-2.24(m,4H),未检测到酚;13C NMR(100MHz,CD3OD,25℃)：δ=198.4,170.6,164.9,162.5,148.1,139.2,130.7,130.6,130.2,112.2,105.0,101.6,65.7,47.7,31.4,30.9,30.5;HRMS(ESI-TOF):m/z:C17H19O5的计算值:303.1227，测定值303.1179[M+H+]。
合成化合物2-141的通用步骤：0℃下，向相应的化合物2-112a-g或2-120a-g(1.0当量)的MeOH（0.03M）溶液中加入BER-树脂（Amberlite上的硼氢化物，1.0当量，2.5mmol.g-1）并搅拌反应物12小时。接着，将反应混合物过滤并减压浓缩。用急骤色谱法纯化（硅胶，0-20%EtOAc/环己烷梯度），获得两种非对映异构体1：1的混合物的2-141（～60%的收率）。
Figure BDA0000381115570001932
化合物2-141的选择实例：1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.05(s,1H),6.99(s,1H),5.64-5.57(m,2H),5.54-5.53(m,2H),5.49-5.35(m,7H),5.31-5.28(m,4H),5.24-5.16(m,4H),5.13-5.08(m,1H),4.68(m,1H),4.56(m,1H),3.81-3.69(m,8H),3.25(dd,J=13.9,8.0Hz,1H),3.19(dd,J=13.7,4.8Hz,1H),3.11(dd,J=13.5,10.1Hz,1H),2.90(dd,J=13.9,5.1Hz,1H),2.35(m,9H),2.09-1.95(m,1H),1.80-1.70(m,2H),1.39(d,J=2.9Hz,3H),1.37(d,J=3.2Hz,3H,),1.24(2x q,J=6.9,5.0Hz,12H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H33ClO7Na的计算值:491.1807，测定值491.1729[M+Na+]。
合成化合物2-142的通用步骤：向相应的化合物2-141(1.0当量)的MeOH（0.02M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol.g-1）并将悬浮液在40℃振摇4小时。接着将反应混合物过滤并在减压下将甲醇溶液浓缩。用制备TLC纯化（硅胶，25%EtOAc/环己烷），获得两种非对映异构体1：1的混合物的2-142（～90%的收率）。
Figure BDA0000381115570001941
化合物2-142的选择实例：1H NMR(400MHz,（CD3）2CO,25℃)：δ=12.30(s,2H),11.43(s,2H),6.75(s,2H),6.00(bdd,J=6.4,6.2Hz,1H),5.97(bdd,J=6.4,6.2Hz,1H),5.97（bd,J=6.7Hz,1H）5.77(bd,J=6.7Hz,1H),5.57-5.48(m,4H),5.18-5.14(m,2H）,3.38-3.28(m,3H),3.02(dd,J=16.1,10.5Hz,1H),2.41-2.09(m,12H),1.11(d,J=6.2Hz,6H)，未检测到醇；HRMS（ESI-TOF):m/z:C18H21ClO5Na的计算值:375.0970，测定值375.1029[M+Na+]。
合成化合物2-143的通用步骤：23℃下，向相应的化合物2-141(1.0当量)的DMF（0.02M）溶液中加入Ac2O（1.2当量）、吗啉甲基聚苯乙烯（1.2当量，3.2mmol.g-1）和DMAP（0.05当量），并将混合物搅拌30分钟，随后使通过TLC直到原料消耗。接着将树脂过滤并在减压下将有机相浓缩。用制备TLC纯化（硅胶，20%EtOAc/环己烷）获得两种非对映异构体1：1的混合物的相应的化合物2-143（～80%的收率）。
Figure BDA0000381115570001942
化合物2-143的选择实例:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.04(s,1H),7.01(s,1H),5.86(dd,J=15.0,6.9Hz,1H),5.67(dd,J=12.4,6.2Hz,1H),5.60-5.54(m,4H),5.48(dd,J=7.2,7.2Hz,1H),5.41-5.34(m,3H),5.32-5.30(m,4H),5.28-5.23(m,2H),5.21(dd,J=11.0,6.7Hz,2H),5.17(dd,J=11.8,6.9Hz,2H),3.81-3.69(m,8H),3.43(dd,J=14.2,7.5Hz,1H),3.23-3.15(m,2H),2.85(dd,J=13.9,5.4Hz,1H),2.30-2.17(m,8H),2.12(s,3H),2.06(s,3H),2.00-1.95(m,4H),1.39(2x d,J=5.6Hz,6H),1.24(m,12H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C26H35ClO8Na的计算值:533.1913，测定值533.1864[M+Na+]。
合成化合物2-144的通用步骤：向相应化合物2-143(1.0当量)的MeOH（0.02M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol.g-1）并将悬浮液在40℃振摇4小时。在此之后，将反应混合物过滤并在减压下将甲醇溶液浓缩。用制备TLC纯化（硅胶，20%EtOAc/环己烷）获得化合物2-144（～60%的收率）。
Figure BDA0000381115570001951
化合物2-144的选择实例:非对映异构体2：1的混合物；1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.60(s,1H),12.12(s,0.5H),6.93(d,J=8.7Hz,0.5H),6.66(s,1H),6.64(s,0.5H),6.62-6.60(m,1H),6.10-6.05(m,3H),5.47-5.33(m,6H),2.60-2.53(m,1.5H),2.26-2.02(m,7.5H),1.44(d,J=6.2Hz,1.5H),1.43(d,J=6.4Hz,3H)，未检测到对苯酚;HRMS（ESI-TOF):m/z:C18H19ClO4Na的计算值:357.0864，测定值357.0898[M+Na+]。
制备化合物2-145的通用步骤：向相应化合物2-85a-g(1.0当量)的甲醇（0.03M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量）并将悬浮液在40℃搅拌15小时。接着将反应物过滤，并用CH2Cl2洗涤树脂若干次。减压浓缩，接着用制备TLC纯化（硅胶，50%的己烷/EtOAc），获得非对映异构体2：1的混合物的期望的化合物2-145。
化合物2-145的选择实例:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=12.28(s,0.4H),11.91(s,0.6H),7.21-7.11(m,5H),6.62(s,1H),6.03-6.01(m,1H),5.58(bs,1H),5.38-5.33(m,1H),5.27-5.20(m,1H),4.76(d,J=17.5Hz,0.6H),4.02(d,J=17.0Hz,0.4H),4.18(d,J=18.1Hz,0.6H),4.09(d,J=17.0Hz,0.4H),3.87(bs,0.4H),3.81(bs,0.6H),3.15(s,1.8H),3.12(s,1.2H),2.83-2.78(m,1H),2.45-2.30(m,2H),2.18-2.16(m,1H),2.02-1.97(m,2H),1.79-1.72(m，2H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H25O6ClNa的计算值:467.1232，测定值467.1366[M+Na+]。
合成化合物2-146的通用步骤：23℃下，向相应的化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0当量)的CH2Cl2/AcOH10：1（0.08M）的溶液中加入氰基硼氢化(聚苯乙烯基甲基)三甲基铵（2.0当量，3.5mmol.g-1），并通过TLC监测反应物直到原料被消耗（4小时）。接着将树脂过滤并减压浓缩有机相。用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）获得化合物2-146（50%-60%的收率）。
Figure BDA0000381115570001961
化合物2-146的选择实例:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.75(s,1H),6.65(s,1H),5.48(m,2H),5.49(ddt,J=6.1,3.5,2.9Hz,1H),4.53(d,J=17.5Hz,1H),4.04(d,J=17.7Hz,1H),2.61-2.54(m,2H),2.48-2.28(m,3H),2.19-2.14(m,1H),2.08-1.99(m,1H),1.72-1.61(m,3H),1.41(d,J=6.4Hz,3H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H21ClO5Na的计算值:375.0970，测定值375.1050[M+Na+]。
合成化合物2-147的通用步骤：向相应的化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0当量)的THF（0.05M）溶液中依次加入相应的醇R2OH（2.0当量）、三苯基膦（2.0当量）和PS-DEAD（2.0当量，1.3mmol.g-1）。将反应混合物在室温下振摇8小时，并接着将树脂过滤，滤液直接用制备TLC纯化（硅胶，10%EtOAc/环己烷）以获得化合物2-147连同双烷基化产物的混合物。（78%的收率）
Figure BDA0000381115570001962
化合物2-147的选择实例:与相应的双烯丙基化化合物的1：1的混合物；1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.83(s,1H),6.82(ddd,J=15.7,8.2,4.6Hz,1H),6.72-6.65(m,1H),6.46(s,1H),6.41(s,1H),6.09-5.98(m,3H),5.82(d,J=15.7Hz,1H),5.46-5.16(m,8H),4.57-4.54(m,3H),4.51-4.49(m,3H),4.19(d,J=17.5Hz,1H),4.11(d,J=14.6Hz,1H),3.78(d,J=17.0Hz,1H),3.51(d,J=14.2Hz,1H),2.76-2.69(m,1H),2.38-2.05(m,11H),1.42(d,J=6.2Hz,3H),1.35(d,J=6.3Hz,3H);单烯丙基化的化合物:HRMS(ESI-TOF):m/z:C21H23ClO5Na的计算值:413.1132，测定值413.1103[M+Na+]；双烯丙基化的化合物:HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H27ClO5Na的计算值:453.1449，测定值453.1422[M+Na+]。
合成化合物2-148的通用步骤：23℃下，向相应的化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0当量)的CH2Cl2（0.05M）溶液中加入TBD-甲基聚苯乙烯（2.0当量，2.9mmol.g-1）和相应的烷基溴或烷基氯（BrCH2COOtBu、EOMCl，0.9当量）并将混合物振摇3小时。接着将树脂过滤并减压浓缩滤液。用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）获得相应的化合物2-148（＞90%的收率）。
Figure BDA0000381115570001971
化合物2-148的选择实例:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.84(s,1H),6.69(m,1H),6.41(s,1H),5.76(d,J=15.0Hz,1H),5.43(m,1H),5.26(ddd,J=15.0,9.1,4.8Hz,1H),5.18-5.11(m,1H),4.65(s,2H),4.33(d,J=17.7Hz,1H),4.16(d,J=17.5Hz,1H),2.65-2.58(m,1H),2.37-2.34(m,2H),2.25-2.21(m,1H),2.12-2.01(m,2H),1.53(s,9H),1.34(d,J=6.5Hz,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H29ClO7Na的计算值:487.1494，测定值487.1498[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001972
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.76(s,1H),6.86(s,1H),6.70(dt,J=14.9,7.3Hz,1H),5.77(d,J=15.8Hz,1H),5.46-5.42(m,1H),5.37(s,2H),5.30-5.19(m,2H),4.34(d,J=17.6Hz,1H),4.16(d,J=18.1Hz,1H),3.80(q,J=7.0Hz,2H),2.66-2.59(m,1H),2.37-2.34(m,2H),2.26-2.21(m,1H),2.13-2.06(m,2H),1.34(d,J=6.4Hz,3H),1.27(t,J=7.0Hz,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C21H25O6ClNa的计算值:431.1237，测定值431.1257[M+Na+]。
合成化合物2-149的通用步骤：23℃下，向化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0当量)的丙酮/H2O10：1（0.05M）的溶液中加入OsO4（0.1当量）和NMO（1.0当量），并将混合物搅拌1小时。将粗制混合物通过二氧化硅垫过滤，浓缩并用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）以获得两种非对映异构体1：1的混合物的2-149（＞70%的收率）。
Figure BDA0000381115570001981
化合物2-149的选择实例:1H NMR(400MHz,CD3OD,25℃)：δ=7.19(m,1H),6.89-6.81(m,1H),6.52(s,1H),6.47(s,1H),6.20(d,J=16.1Hz,1H),6.04(d,J=15.6Hz,1H),5.54-5.49(m,1H),5.43-5.36(m,1H),4.50(d,J=17.7Hz,1H),4.46(d,J=17.7Hz,1H),4.39(d,J=17.2Hz,1H),4.07(d,J=17.2Hz,1H),3.80-3.64(m,2H),3.51-3.46(m,2H),2.62-2.58(m,2H),2.39-2.30(m,2H),2.27-2.18(m,2H),2.08-1.98(m,2H),2.00-1.85(m,4H),1.44(d,J=6.4Hz,6H)，未检测到酚和醇;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H21ClO7Na的计算值:407.0868，测定值407.1031[M+Na+]。
合成化合物2-150的通用步骤：0℃下，向化合物2-85a-g或2-103a-g(1.0当量)的CH3CN（0.03M）溶液中加入新制备的DMDO（1.2当量，0.04M（溶于丙酮））并将混合物搅拌30分钟。减压蒸发溶剂之后，用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）获得两种非对映异构体混合物(1:1至3：1)的环氧化物2-150（＞90%的收率）。
Figure BDA0000381115570001982
化合物2-150的选择实例:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.85(s,1H),6.94-6.87(m,2H),6.69(s,1H),6.65(s,1H),6.24(bd,J=15.2Hz,2H),6.12(d,J=15.8Hz,1H),5.41-5.37(m,1H),5.33-5.30(m,1H),4.54(bd,J=18.1Hz,2H),4.52-4.48(m,1H),4.40-4.34(m,1H),4.27(d,J=17.5Hz,1H),2.78-2.72(m,2H),2.58-2.55(m,4H),2.47-2.28(m,5H),2.07(m,2H),1.92-1.86(m,3H),1.51(d,J=6.4Hz,3H),1.35(d,J=6.4Hz,3H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H19O6ClNa的计算值:389.0762，测定值389.0844[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001991
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.80(2x s,2H),7.43-7.18(m,10H),7.03-6.95(m,2H),6.69(s,1H),6.61(s,1H),6.30(d,J=16.4Hz,1H),6.21(d,J=15.8Hz,1H),6.15-6.10(m,1H),6.03(d,J=11.1Hz,1H),4.84(2x d,J=18.1Hz,2H),4.41(2x d,J=17.6Hz,2H),2.68-2.60(m,4H),2.41-2.27(m,8H),1.83-1.76(m,4H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H21O6ClNa的计算值:451.0919，测定值451.1028[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570001992
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.56(2x s,2H),6.92-6.82(m,2H),6.71(s,1H),6.67(s,1H),6.20(m,3H),6.06(d,J=15.8Hz,1H),5.11(bs,1H),5.94(m,1H),4.46(2x d,J=18.1Hz,2H),4.20(2x d,J=18.1Hz,2H),2.72-2.70(m,2H),2.53-2.48(m,4H),2.38-2.35(m,3H),2.25-2.13(m,5H),1.84-1.77(m,2H),1.05-1.01(m,6H),0.91-0.88(m,3H),0.86-0.84(m,3H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H23O6ClNa的计算值:417.1075，测定值417.1128[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570002001
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.98(s,1H),6.91-6.83(m,1H),6.43(d,J=2.3Hz,1H),6.24(d,J=2.4Hz,1H),6.11(d,J=15.8Hz,1H),5.35(bs,1H),5.29(m,1H),4.52(d,J=17.5Hz,1H),3.63(d,J=17.5Hz,1H),2.77(m,2H),2.57-2.52(m,2H),2.46-2.27(m,2H),2.14-2.10(m,1H),1.93-1.88(m,1H),1.48(d,J=6.4Hz,3H);其他异构体:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.67(s,1H),6.89-6.83(m,1H),6.40(d,J=2.4Hz,1H),6.24(d,J=2.9Hz,1H),6.21(d,J=16.4Hz,1H),5.37(bs,1H),5.22(m,1H),4.20(d,J=17.0Hz,1H),4.06(d,J=17.0Hz,1H),2.74(m,2H),2.57-2.20(m,4H),1.80-1.76(m,1H),1.68-1.60(m,1H),1.37(d,J=6.4Hz,3H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H20O6Na的计算值:355.1152，测定值355.1249[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570002002
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.98(s,1H),6.91-6.83(m,1H),6.43(d,J=2.3Hz,1H),6.24(d,J=2.4Hz,1H),6.11(d,J=15.8Hz,1H),5.35(bs,1H),5.29(m,1H),4.52(d,J=17.5Hz,1H),3.63(d,J=17.5Hz,1H),2.77(bs,1H),2.57-2.52(m,2H),2.46-2.27(m,2H),2.14-2.10(m,1H),1.93-1.88(m,1H),1.48(d,J=6.4Hz,3H)。
Figure BDA0000381115570002003
主要异构体:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.90(s,1H),7.41-7.23(m,5H),6.95-6.89(m,1H),6.42(d,J=2.8Hz,1H),6.27(d,J=2.9Hz,1H),6.20(d,J=15.8Hz,1H),6.13(d,J=4.1Hz,1H),5.51(m,1H),4.79(d,J=17.5Hz,1H),3.79(d,J=17.0Hz,1H),2.68-2.55(m,3H),2.44-2.25(m,4H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H22O6Na的计算值:417.1309，测定值417.1399[M+Na+]。
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.77(s,1H),6.92-6.82(m,1H),6.44(d,J=2.3Hz,1H),6.28(d,J=2.4Hz,1H),6.09(d,J=15.8Hz,1H),5.40(bs,1H),4.92(m,1H),4.50(d,J=17.5Hz,1H),3.61(d,J=17.5Hz,1H),2.72-2.70(m,1H),2.56-2.45(m,2H),2.38-2.15(m,4H),1.91-1.85(m,1H),1.05-1.01(m,6H),未检测到对苯酚;其他异构体:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.55(s,1H),6.86-6.79(m,1H),6.42(s,1H),6.29(s,1H),6.20(d,J=15.8Hz,1H),5.40(m,1H),5.16(m,1H),4.14(s,1H),4.12(s,1H),2.72-2.70(m,1H),2.53-2.37(m,4H),2.18-2.10(m,2H),1.92-1.86(m,1H),0.91-0.85(m,6H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H24O6Na的计算值:383.1465，测定值383.1574[M+Na+]。
1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.87(s,1H),6.90-6.82(m,1H),6.43(s,1H),6.26(s,1H),6.10(d,J=15.2Hz,1H),5.31(bs,1H),5.18(bs,1H),4.46(d,J=17.5Hz,1H),3.60(d,J=17.6Hz,1H),2.74(bs,1H),2.57-2.38(m,3H),2.32-2.22(m,1H),2.08-1.82(m,2H),1.73-1.67(m,1H),1.42-1.37(m,2H),1.33-1.28(m,2H),1.01(t,J=7.3Hz,3H);其他异构体:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.72(s,1H),6.86-6.80(m,1H),6.41(s,1H),6.27(s,1H),6.21(d,J=16.4Hz,1H),5.37(m,1H),5.22(m,1H),4.25(d,J=16.4Hz,1H),3.96(d,J=16.4Hz,1H),2.74(bs,1H),2.60-2.37(m,4H),1.87-1.78(m,2H),1.70-1.58(m,3H),1.38-1.22(m,2H),0.95(t,J=7.3Hz,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C20H24O6Na的计算值:383.1465，测定值383.1492[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570002021
主要异构体:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.94(s,1H),7.36-7.28(m,5H),6.95-6.88(m,1H),6.42(s,1H),6.22(s,1H),6.11(d,J=15.8Hz,1H),5.47(m,1H),5.41(bs,1H),4.43(d,J=17.5Hz,1H),3.56(d,J=17.6Hz,1H),3.19(dd,J=13.7,6.0Hz,1H),3.03(dd,J=13.7,7.9Hz,1H),2.87(bs,1H),2.70-2.28(m,4H),2.03-1.93(m,2H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C24H24O6Na的计算值:431.1465，测定值431.1578[M+Na+]。
制备化合物2-151的通用步骤：23℃下，向化合物2-120(1.0当量)的二噁烷（0.05M）溶液中加入浓HCl（20.0当量），并将混合物搅拌3小时。在此之后通过二氧化硅垫将反应物过滤，减压蒸发溶剂，并用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）获得两种非对映异构体1：1的混合物的化合物2-151（＞75%的收率）。
Figure BDA0000381115570002022
化合物2-151的选择实例:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.11(s,1H),11.78(s,1H),6.51(s,1H),6.43(s,1H),6.41(d,J=2.4Hz,1H),6.37(d,J=2.7Hz,1H),6.21(d,J=2.4Hz,1H),6.11(d,J=2.4Hz,1H),5.59-5.51(m,3H),5.40-5.32(m,3H),4.54(d,J=17.2Hz,1H),4.42(d,J=17.2Hz,1H),3.60(d,J=17.2Hz,1H),3.45(d,J=17.0Hz,1H),3.28(dd,J=18.5,9.4Hz,1H),3.11(dd,J=13.7,6.2Hz,1H),3.07(dd,J=13.4,4.6Hz,1H),2.76(dd,J=19.0,6.2Hz,1H),2.62(ddd,J=15.5,8.8,4.0Hz,1H),2.54(ddd,J=15.3,6.2,3.2Hz,1H),2.40-2.26(m,4H),2.25-2.13(m,4H),2.03-1.91(m,2H),1.42(d,J=6.4Hz,3H),1.40(d,J=6.4Hz,3H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C18H21ClO5Na的计算值:375.0970，测定值375.0928[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570002031
1H NMR(400MHz，C6D6，25℃)：δ=11.76(s，0.5H)，11.36(s，0.5H)，7.40-7.29(m，5H)，6.65(s，0.5H)，6.62(s，0.5H)，6.18(t，J=5.8Hz，1H)，6.14(s，0.5H)，6.12(s，0.5H)，5.67-5.62(m，1H)，5.55-5.49(m，1H)，4.93(d，J=18.1Hz，0.5H)，4.80(d，J=17.1Hz，0.5H)，4.58-4.56(m，1H)，4.38(d，J=18.1Hz，0.5H)，4.18(d，J=17.1Hz，0.5H)，3.33-3.27(m，1H)，3.10(dd，J=18.4，3.8Hz，0.5H)，2.84-2.68(m，2.5H)，2.42-2.32(m，2H)，2.23-2.17(m，1H)，2.13-2.04(m，1H)，未检测到对苯酚;HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H22O5Cl2Na的计算值:471.0737，测定值471.0754[M+Na+]。
从化合物2-151消除β-Cl：23℃下，向化合物2-151(95mg，270μmol)的CH2Cl2（5mL）溶液中加入PS-TBD（51mg，2.6mmol.g-1），并将混合物搅拌8小时。在此之后将反应物过滤，减压蒸发溶剂，并将剩余的残留物用急骤色谱法纯化（硅胶，0-30%EtOAc/环己烷梯度）以获得2-103（84mg，98%）。
合成化合物2-152的通用步骤：将化合物2-120a或2-112a（1.0当量）溶于TFA/CH2Cl2的1：5的混合物中，并在室温下搅拌2小时。蒸发溶剂；随后用急骤色谱法（硅胶，0-50%Et2O/己烷），获得化合物2-152（～70%的收率）。
Figure BDA0000381115570002032
化合物2-152的选择实例:1H NMR(400MHz,C6D6,25℃)：δ=11.74(s,1H),7.22-7.14(m,5H),6.52(s,1H),6.46(dt,J=15.2,7.3Hz,1H),6.28(s,1H),5.89(t,J=7.0Hz,1H),5.76(s,1H),5.59(d,J=15.2Hz,1H),5.37(ddd,J=15.2,6.9,6.9Hz,1H),5.24(ddd,J=15.2,7.3,7.0Hz,1H),2.56-2.49(m,1H),2.44-2.39(m,1H),2.01-1.92(m,4H);13C NMR(100MHz,C6D6,25℃)：δ=164.8,162.8,158.7,153.1,137.6,136.9,136.1,133.9,128.7(x2),126.5(x2),124.2,122.0,102.4,100.8,79.9,39.0,32.3,31.4，未检测到四个季碳;HRMS(ESI-TOF):m/z:C25H20ClF3O6Na的计算值:531.0793，测定值531.0992[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570002041
大环2-153：23℃下，向化合物2-103（12.9mg，40.8μmol）的CH2Cl2（1mL）溶液中加入DHP（3.7μL，40.8μmol）和PS-TsOH（12.7mg，40.8μmol，3.2mmol.g-1），并将混合物搅拌5小时。在此之后将反应物过滤并减压蒸发溶剂。用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）获得两种非对映异构体混合物的2-153（13.8mg，85%）。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=12.33(s,1H),12.11(s,1H),9.45(s,1H),9.40(s,1H),6.67,(m,2H),6.28(2x s,2H),5.83(d,J=13.2Hz,1H),5.79(d,J=12.9Hz,1H),5.35-5.30(m,3H),5.27-5.22(m,3H),5.06(bd,J=8.2Hz,2H),4.10(d,J=17.5Hz,2H),3.90-3.85(m,1H),3.80-3.76(m,1H),3.65(d,J=17.7Hz,2H),3.57-3.52(m,2H),3.46-3.41(m,2H),2.77-2.71(m,3H),2.53-2.49(m,3H),2.36-2.29(m,4H),2.24-1.56(m,12H),1.31(d,J=6.4Hz,3H),1.28(d,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C23H28O6Na的计算值:423.1778，测定值423.1778[M+Na+]。
合成化合物2-154的通用步骤：向化合物2-120(1.0当量）的吡啶/AcOH（5：10.03M）溶液中加入羟胺R2ONH2（5.0当量）并将混合物加热至40℃。搅拌过夜后，在有硅胶的情况下在减压下用蒸发溶剂。用30%的EtOAc/环己烷混合物通过一小段硅胶垫上来纯化，获得两种非对映异构体（顺式/反式）混合物的化合物2-154（～99%）。
Figure BDA0000381115570002051
化合物2-154的选择实例:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.50-7.25(m,10H),6.82(s,1H),6.75(s,1H),6.66(s,1H),6.48(s,1H),6.24-6.11(m,2H),6.11-6.05(m,2H),5.45-5.38(m,4H),5.34-5.31(m,14H),4.50(d,J=17.2Hz,1H),3.65-3.38(m,8H),3.60(d,J=17.1Hz,1H),3.54(d,J=17.1Hz,1H),3.24(d,J=17.2Hz,1H),2.48-2.36(m,4H),2.21-2.17(m,2H),2.11-2.04(m,2H),1.95-1.83(m,2H),1.62-1.51(m,2H),1.49(d,J=6.4Hz,6H),1.32-1.20(m,12H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=168.1,167.9,159.1,158.8,157.2,155.6,155.4,154.2,140.8,138.2,138.2,137.8,136.9,136.7,132.3,132.3,128.3(x2),128.3(x2),128.2,128.1(x2),128.0(x2),127.7,127.6,125.5,118.8,118.6,118.3,108.8,108.5,101.7,101.7,93.5,93.4,93.1(x2),77.2,76.0,75.9,71.2,71.0,64.5,64.5,64.3,64.3,40.0,40.0,34.9,32.4,32.3,31.6,31.1,28.9,20.3,20.2,15.0(x2),15.0(x2);HRMS(ESI-TOF):m/z:C31H39NO7Na的计算值:560.2619，测定值560.2627[M+Na+]。
合成化合物2-155的通用步骤：向化合物2-154(1.0当量）的MeOH（0.02M）溶液中加入PS-TsOH（10.0当量，3.2mmol.g-1）并将悬浮液在40℃下振摇4小时。在此之后，将反应混合物过滤并减压浓缩甲醇溶液。所得粗产品用于下一步骤而未经进一步纯化。接着，23℃下，向此粗产品的CH2Cl2（0.02M）溶液中加入DHP（1.0当量）和PS-TsOH（催化量，3.2mmol.g-1），并将混合物搅拌5小时。在此之后，将混合物过滤，减压蒸发溶剂，并将剩余的残留物用制备TLC纯化（硅胶，30%EtOAc/环己烷）以获得2-155的1：1的两种不同的非对映异构体（～65%的收率）。
Figure BDA0000381115570002061
化合物2-155的选择实例:极性较小的非对映异构体:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=9.25(s,1H),9.24(s,1H),7.46-7.33(m,10H),6.29(s,1H),6.26(s,1H),6.07-6.02(m,2H),5.75(d,J=15.8Hz,1H),5.69(d,J=15.8Hz,1H),5.44-5.38(m,6H),5.23(s,4H),5.03(d,J=8.8Hz,2H),4.34-4.13(m,6H),3.69-3.63(m,2H),2.70-2.67(m,2H),2.30-2.16(m,6H),2.08-1.94(m,8H),1.73-1.65(m,8H),1.42(t,J=6.4Hz,3H),1.39(t,J=7.0Hz，3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C30H35NO6Na的计算值:528.2357，测定值528.2562[M+Na+]。
极性较大的非对映异构体:1H NMR(400MHz，CDCl3，25℃)：δ=11.61(s，1H)，9.27(s，1H)，7.41-7.33(m，5H)，6.62(d，J=16.4Hz，1H)，6.47(s，1H)，6.15-6.07(m，1H)，5.50-5.38(m，3H)，5.16(s，2H)，5.04(d，J=10.5Hz，1H)，4.30(d，J=15.2Hz，1H)，4.24(d，J=10.5Hz，1H)，3.84(d，J=15.2Hz，1H)，3.66(t，J=11.4Hz，1H)，2.71-2.65(m，1H)，2.28-2.08(m，6H)，1.73-1.64(m，5H)，1.38(t，J=7.0Hz，3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C30H35NO6Na的计算值:528.2357，测定值528.2494[M+Na+]。
源自pochonin D（2-85）的大环2-128：向pochonin D（2-85，25mg，71.2μmol）的DMF（5mL）溶液中加入TBSCl（53.6mg，356μmol）和咪唑（23.6mg，356μmol）并将混合物在室温搅拌3小时。用柱色谱法纯化（硅胶，0-30%EtOAc/环己烷梯度）获得化合物2-128（40mg，98%）。
合成化合物2-157的通用步骤：向化合物2-128(1.0当量）的吡啶/AcOH（5：1，250μL）的溶液中加入羟胺RONH2（5.0当量）并将混合物加热至40℃。搅拌过夜后，减压蒸发溶剂，并用30%的EtOAc/环己烷混合物在硅胶上过滤，获得2-157的两种异构体（～90%的收率）。
Figure BDA0000381115570002071
化合物2-157的选择实例:顺式肟:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.42(bd,J=6.4Hz,2H),7.36(bdd,J=7.5,6.9Hz,2H),7.34-7.32(m,1H),6.52(d,J=16.1Hz,1H),6.38(s,1H),6.18-6.10(m,1H),5.36-5.32(m,2H),5.16(bs,2H),4.99-4.95(m,1H),3.79-3.76(m,2H),2.40-1.99(m,6H),1.45(d,J=6.2Hz,3H),1.03(s,9H),0.99(s,9H),0.28(s,3H),0.26(s,3H),0.20(s,6H);反式肟:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ:S=7.44(bd,J=6.5Hz,2H),7.37(bdd,J=7.6,6.9Hz,2H),7.33-7.31(m,1H),6.41(s,1H),6.04-5.97(m,1H),5.48(bd,J=15.0Hz,1H),5.29-5.27(m,1H),5.22(bs,2H),5.00-4.95(m,1H),3.98-3.89(m,2H),2.39-2.02(m,6H),1.37(d,J=5.9Hz,3H),1.04(s,9H),0.99(s,9H),0.28(s,3H),0.27(s,3H),0.23(s,3H),0.22(s,3H)。
合成化合物2-158的通用步骤：向相应的化合物2-157(1.0当量）的THF溶液中加入TBAF（2.5当量，溶于THF的1M溶液）并将混合物在室温搅拌2小时。接着减压蒸发溶剂，并用30%的EtOAc/环己烷混合物在硅胶上过滤，获得收率＞85%的化合物2-158。
化合物2-158的选择实例:顺式肟:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.52(s,1H),7.45-7.34（m,5H）,6.64(s,1H),6.09-6.02(m,2H),5.34-5.25(m,4H),5.18-5.08(m,2H),4.33(d,J=17.0Hz,1H),4.15(d,J=17.6Hz,1H),2.65-2.59(m,1H),2.27-2.14(m,3H),2.04-2.00(m,1H),1.88-1.83(m,1H),1.30(t,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C25H26ClNO5Na的计算值:478.1392，测定值478.1372[M+Na+]。
反式肟:1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.73(s,1H),7.32-7.26(m,5H),6.64(s,1H),6.50(d,J=16.4Hz,1H),6.06-5.98(m,2H),5.43-5.24(m,3H),4.91(s,2H),4.22(s,2H),2.61-2.55(m,1H),2.46-2.33(m,2H),2.20-2.02(m,3H),0.98(t,J=6.4Hz,3H);HRMS(ESI-TOF):m/z:C25H26ClNO5Na的计算值:478.1392，测定值478.1522[M+Na+]。
Figure BDA0000381115570002081
化合物（±）-2-159：将顺式-丁烯氧化物（1.75mL，20mmol）的Et2O（10mL）溶液冷却至-30℃。向该溶液中加入碘化亚铜（11.4g，6mmol），并随后在1小时的时间段内滴加乙烯基溴化镁（40mL，溶于THF的1M溶液，40mmol）。接着将混合物暖至室温12小时以上，反应物变黑。用饱和NH4Cl水溶液（20mL）缓慢终止反应混合物的反应，搅拌2小时，用Et2O（20mL）萃取并经MgSO4干燥。减压浓缩获得化合物（±）-2-159（1.3g，65%）。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=5.81-5.72(m,1H),5.15(d,J=13.2Hz,2H),3.59(m,1H),2.23-2.10(m,1H),1.21(d,J=6.4Hz,3H),1.05(d,J=7.0Hz,3H)。
Figure BDA0000381115570002082
化合物（±）-2-163：以与对化合物2-112所描述的方法类似的方式，以57%的收率从（±）-2-162制备了化合物（±）-2-163。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=7.10(s,1H),6.76-6.71(m,1H),5.87(d,J=15.8Hz,1H),5.32(s,2H),5.25-5.18(s+m,4H),4.87-4.80(m,1H),3.99(d,J=16.9Hz,1H),3.80-3.71(m,5H),2.32-2.26(m,2H),2.20-2.11(m,3H),1.36(d,J=6.4Hz,3H),1.25(t,J=7.0Hz,6H),1.04(d,J=7.0Hz,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3,25℃)：δ=195.7,166.6,154.6,153.8,147.1,133.3,132.8,120.7,117.7,102.9,93.9,93.6,76.2,64.8,64.6,45.1,41.6,30.7,30.7,18.2,16.9,15.0,15.0。
化合物（±）-2-164：以与对化合物2-85所描述的类似方式，使用PS-TsOH，以40%的收率从（±）-2-163制备化合物（±）-2-164。1H NMR(400MHz,CDCl3,25℃)：δ=11.52(s,1H),6.78-6.69(m,1H),6.67(s,1H),6.05(s,1H),5.93(d,J=16.4Hz,1H),5.47-5.45(m,1H),5.37-5.33(m,1H),5.16(dd,J=15.8,7.0Hz,1H),4.48(bs,1H),4.35(d,J=17.6Hz,1H),2.45-2.26(m,5H),1.27(d,J=6.4Hz,3H),1.10(d,J=7.0Hz,3H);ESI:m/z:C18H21ClO5的计算值:365.12，测定值365.22[M+H+]。
本文所提供的描述和实施例仅是说明性的，且本发明并不受此限制。本领域普通技术人员会想到这些化合物，步骤和应用的许多变化、置换和演化，并且这些变化、置换和演化涵盖在本发明的范围内。

Claims (31)

1.式I的化合物、其互变异构体，或其药学可接受的盐、溶剂合物、酯或前药在制备用于治疗患有疾病的患者的药物中的用途：
其中：
R1、R2、R3、R4和R5独立地为氢、卤素、硝基、氰基、烷基、低级烷基、取代的烷基、烯基、炔基、烷基芳基、芳烷基、芳基、杂烷基、烷基杂芳基、杂环基、杂芳基、OH、OR、NH2、N(R)2、SR、S(O)R、S(O)2R、-SO2N(R)2、-N(R)SO2R、-N(CO)R、-N(CO)N(R)2、-N(CO)OR、-O(CO)R、-(CO)R、-(CO)OR、-(CO)N(R)2、-O(CO)OR或-O(CO)N(R)2，其中每个R可以相同或不同；
A1和A2一起为-CH2-CH2-、-CH=CH-、-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-、-CH(卤素)-CH(OH)-、1,2-环丙二基或1,2-环氧乙烷；
B1和B2一起为-CH2-CH2-或者B1和B2一起表示共价键；
X1是氢、卤素、OH、OR、NH2、N(R)2、NH-OR、SR、S(O)R、S(O)2R、-NH-O-(CH2)n-CO2-R、-NH-O-(CH2)n-CON(R)2；或者X1与X2或X3一起表示共价键，其中每个R可以相同或不同；
X2和X3都是氢，或者X2和X3之一是氢且另一个与X1一起表示共价键；
X4和X5一起为=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R；或者X4和X5之一是氢且另一个是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、O(CO)N(R)2、-(CH2)nC(O)OR或-(CH2)nC(O)N(R)2，且n是0、1、2或3；或者X4和X5之一与X6一起表示共价键且X4和X5中的另一个是OH、OR、O(CO)R、O(CO)OR、-N(R)2或O(CO)N(R)2，其中每个R可以相同或不同；
X6是氢或X6与X4和X5之一一起表示共价键；且
R是氢、烷基、低级烷基、酰基、芳基、烷芳基、芳基烷基包括苄基、杂烷基、杂芳基、杂环基、保护基；或者在同一个氮上的两个R与所述氮一起形成5-8元杂环或杂芳基环；且
n是0、1、2或3；
其中所述疾病是自身免疫疾病、炎性疾病、神经疾病或神经变性疾病、癌症、心血管疾病、变态反应、哮喘或激素相关的疾病。
2.如权利要求1所述的用途，其中所述式I的化合物具有式II的结构：
Figure FDA0000381115560000021
其中，R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR或=N-N-SO2R；且其中每个R可以相同或不同。
3.如权利要求2所述的用途，其中R1是H、卤素或杂环基。
4.如权利要求2所述的用途，其中R5是氢、烷基、低级烷基、芳基、杂芳基或芳基烷基。
5.如权利要求2所述的用途，其中A1和A2一起是-CH=CH-。
6.如权利要求2所述的用途，其中A1和A2一起是-CH(OH)-CH(OH)-、-CH(OH)-CH(卤素)-或-CH(卤素)-CH(OH)-。
7.如权利要求2所述的用途，其中A1和A2一起是1,2-环氧乙烷。
8.如权利要求2所述的用途，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-或-C(OH)-C(OH)-；
X1是氢、卤素或NH-OR；且
R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR、=N-N-SO2R。
9.如权利要求2所述的用途，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷；
X1是氢、卤素或NH-OR；且
R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR、=N-N-SO2R。
10.如权利要求2所述的用途，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是-CH=CH-或-C(OH)-C(OH)-；
X1与X2一起表示键；且
R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR、=N-N-SO2R。
11.如权利要求2所述的用途，其中：
R1是H、Cl或杂环基；
R2和R4独立地为OH或OR；
R5是氢、烷基、芳基或芳烷基；
A1和A2一起是1,2-环氧乙烷；
X1与X2一起表示键；且
R7是=O、=S、=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR、=N-O-(CH2)nCON(R)2、=N-N(R)2、=N-N-SOR、=N-N-SO2R。
12.如权利要求10所述的用途，其中：
R1是H或Cl；
R5是氢、甲基、丙基、异丙基或苯基；且
R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR或=N-O-(CH2)nCON(R)2。
13.如权利要求12所述的用途，其中R1是Cl且R5是氢。
14.如权利要求12所述的用途，其中R7是=N-O-(CH2)nCOOR或=N-O-(CH2)nCON(R)2；且n是1。
15.如权利要求12所述的用途，其中R5是氢且R7是=N-O-(CH2)nCOOR或=N-O-(CH2)nCON(R)2。
16.如权利要求12所述的用途，其中R5是氢且R7是=N-OR。
17.如权利要求8所述的用途，其中R7是=O。
18.如权利要求8所述的用途，其中R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR或=N-O-(CH2)nCON(R)2。
19.如权利要求11所述的用途，其中R7是=O。
20.如权利要求11所述的用途，其中R7是=N-OR、=N-O-(CH2)nCOOR或=N-O-(CH2)nCON(R)2。
21.如权利要求1所述的用途，其中所述化合物选自：
Figure FDA0000381115560000051
Figure FDA0000381115560000061
Figure FDA0000381115560000071
Figure FDA0000381115560000081
Figure FDA0000381115560000091
Figure FDA0000381115560000101
Figure FDA0000381115560000111
Figure FDA0000381115560000131
Figure FDA0000381115560000141
Figure FDA0000381115560000151
Figure FDA0000381115560000161
Figure FDA0000381115560000171
Figure FDA0000381115560000181
Figure FDA0000381115560000191
Figure FDA0000381115560000201
Figure FDA0000381115560000211
Figure FDA0000381115560000221
Figure FDA0000381115560000231
Figure FDA0000381115560000241
Figure FDA0000381115560000251
Figure FDA0000381115560000271
Figure FDA0000381115560000281
Figure FDA0000381115560000301
22.如权利要求1所述的用途，其中所述疾病是癌症。
23.如权利要求22所述的用途，其中所述癌症是实体瘤、血源性肿瘤、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、胶质母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和胆道癌、肾癌、骨髓样病症、淋巴样病症、霍奇金氏病、毛细胞、口腔癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症或白血病。
24.如权利要求22所述的用途，其中所述癌症是乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿生殖道癌、食管癌、喉癌、胃癌、皮肤癌、肺癌、血癌、骨癌、结肠癌、胰腺癌、甲状腺癌、肉瘤、膀胱癌、肝癌、肾癌、骨髓样病症、淋巴样病症、霍奇金氏病、毛细胞、口腔癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症或白血病。
25.如权利要求22所述的用途，其中所述癌症是乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肾癌、前列腺癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、胃癌、血癌、黑素瘤或胶质母细胞瘤。
26.如权利要求1所述的用途，其中所述疾病是神经变性疾病。
27.如权利要求26所述的用途，其中所述神经变性疾病选自阿尔茨海默病、亨廷顿病、帕金森病和肌萎缩性侧索硬化。
28.如权利要求1所述的用途，其中所述疾病是与不期望的新血管形成相关的疾病。
29.如权利要求28所述的用途，其中所述与不期望的新血管形成相关的疾病包括眼新生血管性疾病、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼和晶状体后纤维增生症、流行性角膜结膜炎、维生素A缺乏病、接触镜超带症、异位性角膜炎、上角膜缘角结膜炎、翼状胬肉干燥性角膜炎、干燥综合征、红斑痤疮、小水疱病、梅毒、分枝杆菌感染、脂质变性、化学烧伤、细菌性溃疡、真菌性溃疡、单纯疱疹感染、带状疱疹感染、原虫感染、卡波西肉瘤、莫伦溃疡、Terrien角膜边缘性变性、边缘性角质层分离、创伤、类风湿性关节炎、系统性狼疮、多动脉炎、韦格内结节病、巩膜炎、多型糜烂性红斑综合征、类天疱疮、放射状角膜切开术或角膜移植排斥、镰状细胞贫血、结节病、弹性假黄色瘤、佩吉特病、静脉阻塞、动脉阻塞、颈动脉阻塞性疾病、慢性葡萄膜炎/玻璃体炎、莱姆病、系统性红斑狼疮、伊尔斯病、白塞病、引起视网膜炎或脉络膜炎的感染、眼假组织胞浆菌病、贝斯特病、近视、视窝、斯塔加特病、睫状体扁平部炎、慢性视网膜脱离、高粘滞综合征、弓形体病或激光后并发症。
30.如权利要求1所述的用途，其中所述疾病是与炎症相关的炎性疾病。
31.如权利要求30所述的用途，其中所述炎性疾病是内皮细胞的过度或异常刺激、动脉粥样硬化、血管功能障碍、异常的伤口愈合、炎性和免疫病症、白塞病、痛风或痛风性关节炎、伴随异常的血管发生的类风湿性关节炎、皮肤疾病、银屑病、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病、晶状体后纤维增生症、黄斑变性、角膜移植物排斥、新生血管性青光眼或奥-韦综合征。
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