一种含有表皮生长因子的抗衰老组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于生物技术与日化技术领域,特别涉及一种含有表皮生长因子的抗衰老组合物及其制备方法。
背景技术
研究表明,皮肤衰老的实质是组织细胞功能的衰退。因此,促进细胞的活性,即增殖代谢能力,是延缓皮肤衰老的根本对策。EGF(Epidermal Growth Factor,表皮生长因子),由53个氨基酸组成的多肽,是人体内固有的一种活性物质,广泛存在于人体皮肤细胞内,促进表皮细胞的转换增殖能力。美国科学家Cohen博士通过大量科学实验发现,EGF随着年龄的增长(特别是在35岁后)而逐渐减少,整体的肌肤新陈代谢减缓,因此,其数量的多少直接影响着皮肤的年轻程度。这一发现使Cohen博士荣获了1986年诺贝尔生理及医学奖。研究发现,肌肤对外源性EGF的需求和依赖随年龄增长而相应地增大,补偿外源性EGF,可保持衰老细胞EGF的正常生理水平,阻遏细胞衰老的进程。
皮肤是人体最大的器官,主要具有两方面的屏障作用,保护着人体不受外部刺激或伤害:一方面防止体内水分、电解质及其他物质的丢失;另一方面阻止外界有害物质的侵入。皮肤保持着人体内环境的稳定,在生理上起着重要的保护功能,同时皮肤也参与人体的代谢过程。随着年龄的增长,皮肤受紫外线及空气中的污染物的作用,容易缺乏营养,进而使皮肤失水,破坏皮肤角蛋白,造成皮肤粗糙,失去弹性。皮肤瘙痒、紧绷是干燥皮肤的特征性症状,长期的皮肤干燥甚至会导致皱纹出现和皮肤衰老。随着科技的发展和社会的进步,人类对生活质量的要求日渐提高,拥有年轻健康的皮肤已经成为一种时尚的追求。如果想拥有健康漂亮的肌肤,除了养成健康的生活习惯,还要做好保养工作,尤其对于裸露在外的皮肤,如脸部、颈部、手、臂等,更要悉心呵护。
水是活细胞的主要组成部分,大多数的细胞生化反应都是在水环境中进行的。在活细胞中,水的比例占总重量的70%左右,并且相对恒定。水分子虽然可以以简单渗透扩散方式通过细胞膜,但是扩散速度非常缓慢。水分子如何实现跨膜输运一直是生命科学中非常重要的基本问题。研究证明,水分子跨越细胞膜的快速输运是通过细胞膜上的一种水通道蛋白(aquaporins,AQPs)实现的,与主要依靠脂质双分子层转运水分的生物膜相比,AQPs使细胞浆膜上水的渗透性提高了5~50倍。
AQP3是AQPs家族的一员,主要存在于哺乳动物表皮角质层细胞和红细胞膜上。大量研究证明,AQP3的改变与鼠和人皮肤的干燥有关,如,小鼠AQP3缺失引起皮肤干燥。由于皮肤角质层为保护体内水分提供了有效的屏障,所以角质形成细胞上的水通道对于维持皮肤水合作用具有重要意义,水通道蛋白成为皮肤保湿的潜在的生物学靶标。通过活性物质刺激水通道蛋白AQP3表达的途径成为未来给皮肤补水保养的新策略。
近期研究发现,外源性补充EGF能够通过多种信号途径诱导AQP3在人卵巢癌细胞中高表达,这种表达随着EGF浓度的升高和时间的延长而增加,说明EGF对AQP3的表达发挥着重要作用(Curcumin
attenuates EGF-induced AQP3 up-regulation and cell migration in human ovarian
cancer cells,Ji C,Cao C,Lu S,et al. Cancer Chemother Pharmacol,2008,62(5):857-65.)。皮肤水合功能是皮肤美容的基础,同时也是一个复杂多样的生物学现象。因此,发明人拟将人寡肽-1(又称重组人表皮生长因子,rhEGF)应用于护肤组合物中,以期从根本上解决皮肤保湿问题,达到深层润泽、紧致肌肤的目的。rhEGF能够加速皮肤与黏膜创面肉芽组织生成和上皮细胞新生,从而缩短创面的愈合时间。rhEGF帮助表皮细胞逆分化为表皮干细胞,促进胶原蛋白、纤维连结蛋白的合成,增加真皮组织胶原纤维含量,增强皮肤弹性,恢复皮肤生机与活力。同时,rhEGF能够诱导AQP3高表达,从根本上达到深层润泽、紧致肌肤的目的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含有表皮生长因子的抗衰老组合物及其制备方法。
本发明所采取的技术方案是:
一种含有表皮生长因子的抗衰老组合物,按重量百分数计,由以下组份组成:
A相物料:
去离子水 余量,
甘油
10.0-20.0%,
甘露糖醇
5.0-10.0%,
B相物料:
聚谷氨酸
0.05-2.0%,
酵母提取物 1.0-10.0%,
α-葡聚糖寡糖 0.5-4.5%,
乳酸杆菌发酵产物 5.0-10.0%,
硫代牛磺酸 2.0-5.0%,
依克多因 0.5-2%,
透明质酸钠 0.05-0.5%,
C相物料:
人寡肽-1
0.02-0.05%,
明串球菌/萝卜根发酵产物滤液 2.0-2.5%。
优选的,按重量百分数计,该组合物由以下组份组成:
A相物料:
去离子水 余量,
甘油
12.0-19.0%,
甘露糖醇 6.5-9.0%,
B相物料:
聚谷氨酸 1.0-2.0%,
酵母提取物 3.5-7.5%,
α-葡聚糖寡糖 1.5-4.0%,
乳酸杆菌发酵产物 6.5-9.0%,
硫代牛磺酸 2.0-3.5%,
依克多因 1.0-2.0
%,
透明质酸钠 0.2-0.4%,
C相物料:
人寡肽-1
0.02-0.05%,
明串球菌/萝卜根发酵产物滤液 2.0-2.5%。
优选的,按重量百分数计,该组合物由以下组份组成:
A相物料:
去离子水 51.46%,
甘油
16.0%,
甘露糖醇 7.0%,
B相物料:
聚谷氨酸 1.5%,
酵母提取物 6.0%,
α-葡聚糖寡糖 3.0%,
乳酸杆菌发酵产物 8.0%,
硫代牛磺酸 3.0%,
依克多因 1.5%,
透明质酸钠 0.3%,
C相物料:
人寡肽-1 0.04%,
明串球菌/萝卜根发酵产物滤液 2.2%。
优选的,酵母提取物来源于酿酒酵母。
优选的,α-葡聚糖寡糖的聚合度为2-5。
一种含有表皮生长因子的抗衰老组合物的制备方法,包括以下步骤:
1)
将A相物料混合搅匀后加入水相锅中,加热至81℃-84℃,保温灭菌;
2)
待A相物料冷却至36℃-40℃,与B相物料混匀,加入到乳化锅中,搅拌均匀;
3)
待乳化锅中物料温度降至28℃-32℃,加入C相物料,搅拌均匀后出料。
优选的,步骤1)保温25-35分钟灭菌。
本发明的有益效果是:
本发明以人寡肽-1、聚谷氨酸、乳酸杆菌发酵产物、依克多因等为活性成分,与功能组份配伍制备组合物,各组份发挥协同增效作用,高效保湿,回复肌肤莹润光泽,改善干燥粗糙、暗沉、老化、毛孔粗大等皮肤状况,令肌肤健康平滑。大量试验证明,本发明组合物相对于其他护肤产品,具有突出的保湿、延缓皮肤衰老的功效。
本发明组合物的制备方法简单易行,通过合理控制反应步骤和混合温度,最大程度的保持了各功能组份的活性成份。
具体实施方式
本发明提供了一种含有表皮生长因子的抗衰老组合物,该组合物包括活性成分:人寡肽-1(rhEGF)、聚谷氨酸(γ-PGA)、乳酸杆菌发酵产物(组织呼吸因子)、依克多因。
rhEGF能够加速皮肤与黏膜创面肉芽组织生成和上皮细胞新生,从而缩短创面的愈合时间。rhEGF帮助表皮细胞逆分化为表皮干细胞,促进胶原蛋白、纤维连结蛋白的合成,增加真皮组织胶原纤维含量,增强皮肤弹性,恢复皮肤生机与活力。同时,rhEGF能够诱导AQP3高表达,从根本上达到深层润泽、紧致肌肤的目的。
γ-PGA是源自于纳豆粘性胶体的发酵产物,特殊的分子微网状结构使其具有超强的保湿能力,并支持具有渗透能力的活性成分rhEGF的缓释和透皮吸收。
乳酸杆菌发酵产物是运用生物发酵和超滤技术,从牛乳益生菌中分离提出,能在rhEGF促进细胞再生和修复过程中为细胞增加供氧量,增强细胞生物能ATP的合成,促进胶原蛋白的产生,并舒缓肌肤,因此,将乳酸杆菌发酵产物称为组织呼吸因子。
皮肤具有自属的保护和修补机制,在外部压力,例如UV辐射或热和其它物理化学压力下,人体的皮肤细胞能够产生热休克蛋白(HSP,细胞保护和修复变性蛋白的重要工具),帮助皮肤细胞防御外界压力因子的摧残。当防御功能启动的越快,细胞便能够将这些压力因子应付的更好。为了达到积极对抗肌肤老化的功效,本发明通过在组合物中添加依克多因(RonaCare® Ectoin)加速该防御功能的启动,从而激发肌肤细胞的天然防御能力与自我修复能力,让肌肤免受伤害。
该组合物还包含皮肤益生元——α-葡聚糖寡糖,益生元是各种益生菌的最佳天然培养基,可选择性的刺激非致病性皮肤常驻菌的增殖,同时不刺激病原菌生长。α-葡聚糖寡糖的聚合度优选为2~5,最优选为3。
该组合物还包括酵母提取物,是酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的粉末状物质。其中氨基酸含量30%以上,总蛋白50%以上。氨基酸是皮肤角质层中自然保湿因子(NMF)的主要成分,易被皮肤吸收,使老化的表皮恢复弹性,延缓皮肤衰老。此外,产品中少量的维生素和矿物质等营养元素还可以为皮肤提供充足的营养。其中,酵母优选为酿酒酵母。
本发明组合物将上述活性成分和其他功能组份合理配伍,供给肌肤细胞新生动力,提升皮肤呼吸能力,回复肌肤莹润光泽,改善干燥粗糙、暗沉、老化、毛孔粗大等皮肤状况,同时提高皮肤对环境的亲和力,改善肤质,令肌肤健康平滑。
本组合物的使用方法为:清洁肌肤后,均匀涂抹于肌肤,早晚各一次。本产品与人体具有高的亲和性,安全性好,可长期使用。
本发明组合物特别适用于面部皮肤的日常保养。当然,也可用于颈、躯干、手、臂、腿等其它部位以改善皮肤状况。
下面结合实施例,进一步阐述本发明内容。
实施例中所用原料如表1所示,值得注意的是,本发明内容的实现并不受下述原料来源及所述具体实施例的限制。
表1实施例所用原料来源
甘油 |
科宁化工(中国)有限公司 |
甘露糖醇 |
北京华美互利生物化工有限公司 |
聚谷氨酸 |
南京赛泰斯生物科技有限公司 |
酵母精华提取物(E100) |
安琪酵母股份有限公司 |
α-葡聚糖寡糖 |
北京华美互利生物化工有限公司 |
乳酸杆菌发酵产物 |
北京华美互利生物化工有限公司 |
硫代牛磺酸 |
荆沙万隆制药有限公司 |
依克多因 |
默克集团 |
透明质酸钠 |
华熙福瑞达生物医药有限公司 |
人寡肽-1(
rhEGF) |
深圳市华生元基因工程发展有限公司 |
明串球菌/萝卜根发酵产物滤液 |
Active
Concepts LLC |
实施例
表2本发明组合物配方(重量百分比,共计100%)
|
组合物1 |
组合物2 |
组合物3 |
组合物4 |
组合物5 |
组合物6 |
组合物7 |
A相物料 |
|
|
|
|
|
|
|
去离子水 |
余量 |
余量 |
余量 |
余量 |
余量 |
余量 |
余量 |
甘油 |
12.0 |
19.0 |
10.0 |
20.0 |
15.0 |
16.0 |
18.0 |
甘露糖醇 |
6.5 |
10.0 |
5.0 |
10.0 |
8.0 |
7.0 |
6.5 |
B相物料 |
|
|
|
|
|
|
|
聚谷氨酸 |
2.0 |
2.0 |
0.05 |
0.5 |
1.0 |
1.5 |
1.2 |
酿酒酵母提取物 |
7.5 |
10 |
3.5 |
1.0 |
5.0 |
6.0 |
7.0 |
α-葡聚糖寡糖 |
1.5 |
4.0 |
4.5 |
0.5 |
2.5 |
3.0 |
3.0 |
乳酸杆菌发酵产物 |
5.0 |
10.0 |
6.5 |
9.0 |
7.5 |
8.0 |
7.0 |
硫代牛磺酸 |
2.0 |
5.0 |
3.5 |
2.0 |
3.0 |
3.0 |
3.0 |
依克多因 |
0.5 |
2.0 |
1.5 |
1.0 |
1.2 |
1.5 |
1.5 |
透明质酸钠 |
0.1 |
0.4 |
0.5 |
0.05 |
0.2 |
0.3 |
0.3 |
C相物料 |
|
|
|
|
|
|
|
人寡肽-1 |
0.02 |
0.05 |
0.05 |
0.04 |
0.03 |
0.04 |
0.04 |
明串球菌/萝卜根发酵产物滤液 |
2.0 |
2.5 |
2.2 |
2.0 |
2.2 |
2.2 |
2.2 |
其中:组合物1中α-葡聚糖寡糖聚合度为2;组合物2中α-葡聚糖寡糖聚合度为5;组合物3中α-葡聚糖寡糖聚合度为4;组合物4-7中α-葡聚糖寡糖聚合度为3。
按照表2所示配方制备组合物1~7,制备方法如下:
1)
将A相物料混合搅匀后加入水相锅中,加热至81℃-84℃,保温25-35分钟灭菌;
2)
待A相物料冷却至36℃-40℃,与B相物料混匀,加入到乳化锅中,搅拌均匀;
3)
待乳化锅中物料温度降至28℃-32℃,加入C相物料,搅拌均匀后出料。
对比例
表3 对比例组合物配方(重量百分比,共计100%)
|
组合物a |
组合物b |
组合物c |
A相物料 |
|
|
|
去离子水 |
余量 |
余量 |
余量 |
甘油 |
15.0 |
16.0 |
18.0 |
甘露糖醇 |
8.0 |
7.0 |
6.5 |
B相物料 |
|
|
|
聚谷氨酸 |
1.0 |
1.5 |
1.2 |
酿酒酵母提取物 |
5.0 |
6.0 |
7.0 |
α-葡聚糖寡糖 |
2.5 |
3.0 |
3.0 |
乳酸杆菌发酵产物 |
7.5 |
8.0 |
—— |
硫代牛磺酸 |
3.0 |
3.0 |
3.0 |
依克多因 |
1.2 |
—— |
1.5 |
透明质酸钠 |
0.2 |
0.3 |
0.3 |
C相物料 |
|
|
|
人寡肽-1(rhEGF) |
—— |
0.04 |
0.04 |
明串球菌/萝卜根发酵产物滤液 |
2.2 |
2.2 |
2.2 |
按照表3所示配方制备组合物a、b、c,制备方法同上述实施例。
试验例
1、试验方法:(1)根据皮肤衰老标准(皮肤干燥、粗糙、脱屑、细纹、面黄、不规则色素改变、皮肤弹性降低、敏感性增加等)选择受试者320例,男147例,女173例,年龄25-56岁,平均年龄35.2岁,要求受试者不伴有面部皮肤糜烂、水疱等破损症状。(2)将受试者随机分为6组,各组受试者每日早晚各洁面一次,洁面后涂附组合物。试验周期为30天,试验期间,受试者停用其他化妆品,并保持正常作息和清淡饮食。试验结束后,观察各组受试者的皮肤状况和回访受试者的用后体验。(3)A组使用组合物5,a组使用组合物a;B组使用组合物6,b组只用组合物b;C组使用组合物8,c组使用组合物c;D组使用市售某品牌乳液。其中D组20人,其他受试组各50人。(4)试验结束后,由专人对受试者试验前后的皮肤状况进行考核,并参考受试者的用后体验。
2、评分标准:
(1)干燥:面颊、额部、口周部位皮肤均光滑记为0分;面颊、额部、口周有一处部位皮肤触之不光滑记为1分;以面颊、额部、口周有两处部位皮肤触之不光滑或一处部位触之碍手伴脱屑记为2 分;以面颊、额部、口周处部位皮肤触之均不光滑或大于一处部位皮肤触之碍手伴脱屑记为3 分。
(2)细纹:眼角有浅细的鱼尾纹,额部浅显皱纹者记为1分;眼角处、额部、面颊部粗尾纹者记为2分;眼角处、额部、面颊部、口周处以及颈部有明显皱纹者记为3分。
(3)面色萎黄:面色萎黄有光泽记为1分,面色苍黄无光泽记为2分,面色暗黄毫无光泽记为3 分。
(4)皮肤弹性:按压后能迅速恢复但按压部位周围产生较多皮纹记为1分;皮肤弹性欠佳,按压后1-2s能恢复记为2分;皮肤弹性差,按压后超过2s能恢复者记为3分。
以上计分,具体情况可取中间非整数值。
3、疗效评定标准:
改善率=(试验前症状积分-试验后症状积分)/试验前症状积分×100%。
显效:改善率≥75%;有效:改善率≥60%;无效:改善率<60%,症状未见明显改善或反见恶化。
表4 试验前后评分结果比较(人均积分)
组别 |
人数 |
试验前 |
试验后 |
差值 |
A |
50 |
11.13 |
5.26 |
5.87 |
a |
50 |
10.98 |
6.85 |
4.13 |
B |
50 |
11.35 |
5.61 |
5.74 |
b |
50 |
11.20 |
6.78 |
4.42 |
C |
50 |
11.41 |
5.71 |
5.70 |
c |
50 |
11.33 |
7.03 |
4.30 |
D |
20 |
10.85 |
6.99 |
3.86 |
表5 各组疗效比较
组别 |
人数 |
显效 |
显效率 |
有效 |
总有效率 |
无效 |
A |
50 |
34 |
68% |
12 |
92% |
4 |
a |
50 |
29 |
58% |
13 |
84% |
8 |
B |
50 |
35 |
70% |
9 |
92% |
6 |
b |
50 |
29 |
58% |
12 |
82% |
9 |
C |
50 |
32 |
64% |
15 |
94% |
3 |
c |
50 |
25 |
50% |
16 |
82% |
9 |
D |
20 |
8 |
40% |
7 |
75% |
5 |
由上述试验结果可看出:本发明组合物与普通市售护肤品相比较,对皮肤保湿和延缓皮肤衰老均有显著的改善作用,其中,活性成分人寡肽-1、乳酸杆菌发酵产物、依克多因
发挥了重要的护肤作用。
试用30天后,各组受试者面部均未见皮肤干燥、刺痛感、发炎等副作用,受试者评价使用本发明组合物后,有效改善了干燥粗糙、暗沉、毛孔粗大等皮肤状况,肌肤莹润光泽,柔软且光滑。