CN103512976B

CN103512976B - 一种薁磺酸异构体及其盐的分析检测方法

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Publication number: CN103512976B
Application number: CN201310424387.9A
Authority: CN
Inventors: 赵凯; 苑洪忠; 张书彬
Original assignee: HEBEI KAISHENG MEDICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: HEBEI KAISHENG MEDICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2013-09-18
Filing date: 2013-09-18
Publication date: 2017-08-25
Anticipated expiration: 2033-09-18
Also published as: CN103512976A

Abstract

本发明涉及一种薁磺酸异构体及其盐的分析检测方法，将配制含薁磺酸异构体及其盐1～150μg/ml（按薁磺酸异构体计）的溶液注入以烷基键合硅胶为填充剂的高效液相色谱柱中，用含有离子对试剂的无机或有机盐水溶液与色谱纯有机溶剂组成的流动相冲洗分离，再用波长为280～310nm的紫外光分析检测。本发明的方法可用于分析检测薁磺酸异构体及其盐、或含杂质薁磺酸异构体及其盐的药物及其制剂，通过计算分析检测结果，准确得到薁磺酸异构体及其盐的含量，该方法分离度符合要求、灵敏度高、准确性佳。

Description

一种薁磺酸异构体及其盐的分析检测方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种使用HPLC法分析检测薁磺酸异构体及其盐的分析方法，更具体地说，涉及一种分析检测薁磺酸异构体及其盐、或含薁磺酸异构体及其盐杂质的药物或其制剂的方法。

背景技术

复方谷氨酰胺颗粒，即薁磺酸钠与谷氨酰胺制成的颗粒剂，已广泛临床用于胃炎、胃溃疡、和十二指溃疡的治疗，该制剂由寿制药株式会社(日本)研制，于2003年批准该药在我国上市销售。在制备薁磺酸钠(结构式1；化学名1,4-二甲基-7-异丙基薁-3-磺酸钠)的过程中，我们发现容易生成2-薁磺酸钠即薁磺酸钠异构体(结构式2；化学名1,4-二甲基-7-异丙基薁-2-磺酸钠)，且为主要杂质。其含量多少直接影响了薁磺酸钠或其制剂的质量，也影响了药品的保质期长短。然而，现有的薁磺酸钠及其制剂的药品质量标准中没有明确收录有关该杂质的定量和定性分析检测方法，文献中也未见报道能准确分析检测该杂质的方法。

结构式1 结构式2

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何准确地分析检测含薁磺酸异构体杂质及其盐的药物或其制剂中的杂质薁磺酸异构体及其盐。本发明为解决上述技术问题，提供了一种薁磺酸异构体及其盐的分析检测方法，用于分析检测含薁磺酸异构体杂质及其盐的药物或其制剂中的杂质薁磺酸异构体及其盐，本方法特别适合分析检测薁磺酸钠或其制剂、复方谷氨酰胺（薁磺酸钠谷氨酰胺）制剂，也适合分析检测薁磺酸钠异构体及其盐。

本发明提供的技术方案是：

一种薁磺酸异构体及其盐的分析方法，包括：

a.取含薁磺酸异构体及其盐的药物或其制剂，用水、与水混溶的有机溶剂或流动相溶解，配成含薁磺酸异构体1～150μg/ml（按薁磺酸异构体计）的溶液

b. 取上述溶液适量注入到高效液相色谱柱中，用流动相进行冲洗，所述高效液相色谱柱的填充剂为硅烷键合硅胶；

c.使用波长为280～300nm的紫外光检测。

所述薁磺酸异构体盐选自薁磺酸金属盐（钾盐、钠盐、镁盐等）和薁磺酸铵盐；优选薁磺酸钠。

所述含薁磺酸异构体及其盐的药物或其制剂，优选薁磺酸钠或其制剂、薁磺酸钠谷氨酰胺复方制剂，例如薁磺酸钠以及复方谷氨酰胺颗粒、胶囊和片剂等。

上述薁磺酸异构体及其盐溶液的配制可使用水、与水混溶的溶剂或流动相，优选用水或流动相作为溶剂；配制的含薁磺酸异构体的浓度优选1～150μg/ml（按薁磺酸异构体计）

上述与水混溶的有机溶剂选自醇类、腈类、或含氧杂环类有机溶剂，优选甲醇、乙腈或四氢呋喃，更优选甲醇或乙腈。

所述流动相由无机盐水溶液与色谱纯有机溶剂组成，所述无机盐水溶液含离子对试剂优选0.001～0.1mol/L、含无机盐优选0.001～0.1mol/L，无机盐水溶液与色谱纯有机溶剂的体积比优选为65︰35～80︰20。

所述离子对试剂选自烷基磺酸盐、烷基卤化铵、烷基磷酸铵和烷基硫酸铵；所述无机盐选自钾和钠的磷酸盐、碳酸盐、枸橼酸盐、C₂-C₆羧酸盐、马来酸盐和富马酸盐；所述色谱纯有机溶剂选自醇类或腈类有机溶剂。

上述流动相中：无机盐水溶液优选含离子对试剂0.005～0.02 mol/L，更优选0.01mol/L；无机盐水溶液优选含无机盐0.005～0.02 mol/L，更优选0.01 mol/L；无机盐水溶液与色谱纯有机溶剂的体积比优选为70︰30～75︰25。

所述离子对试剂优选苄基三乙基氯化铵、辛烷磺酸钠，更优选苄基三乙基氯化铵。

所述的无机盐优选磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、枸橼酸钠、乙酸钠、马来酸钠和富马酸钠，更优选乙酸钠。

所述色谱纯有机溶剂优选甲醇或乙腈，更优选乙腈。

本发明还提供以下优选的流动相：

由乙酸钠水溶液与乙腈组成，乙酸钠水溶液与乙腈的体积比为65︰35～80︰20，优选70︰30～75︰25；乙酸钠水溶液含苄基三乙基氯化铵0.005～0.02 mol/L，更优选0.01mol/L；乙酸钠水溶液中含乙酸钠0.005～0.02 mol/L，更优选0.01 mol/L。

本发明提供的薁磺酸异构体及其盐的分析方法中，步骤b所述的高效液相色谱柱的填充剂优选C₂～C₁₈烷基硅烷键合硅胶、氰基硅烷键合硅胶或氨基硅烷键合硅胶；优选C₈或C₁₈烷基硅烷键合硅胶，最优选C₁₈烷基硅烷键合硅胶。

本发明提供的薁磺酸异构体及其盐的分析方法中，步骤C所使用紫外光的检测波长优选280nm～3003nm，更优选290nm～29nm。

本发明的薁磺酸异构体及其盐的分析检测方法，能用于不同的检测目的，可用于检测薁磺酸异构体及其盐的纯度，更适用于分析检测含杂质薁磺酸异构体及其盐的药物或其制剂，特别是薁磺酸钠及其制剂和复方谷氨酰胺（薁磺酸钠与谷氨酰胺）制剂，根据分析检测结果，能够精确计算出薁磺酸钠异构体的含量，如采用对照法，自身对照法或面积归一法等方法分析检测相应的药物或制剂，对分析检测结果进行相应的处理后即可得出杂质薁磺酸钠异构体的含量。

本发明还提供了一种薁磺酸钠或其复方谷氨酰胺(薁磺酸钠与谷氨酰胺)制剂杂质薁磺酸异构体的分析检测方法，步骤包括：

a. 取薁磺酸异构体及其盐、或含有薁磺酸异构体的药物或其制剂，用水或流动相溶解，配成含薁磺酸异构体1～150μg/ml（按薁磺酸异构体计）的溶液；

b. 取上述溶液适量注入到高效液相色谱柱中，用流动相进行冲洗，所述高效液相色谱柱的填充剂为C₁₈烷基硅烷键合硅胶；

c.使用波长为290～293nm的紫外光检测；

流动相由乙酸钠水溶液与乙腈组成，乙酸钠水溶液与乙腈的体积比为65︰35～80︰20，乙酸钠水溶液含苄基三乙基氯化铵0.005～0.02 mol/L，乙酸钠水溶液中含乙酸钠0.005～0.02 mol/L。

本发明的薁磺酸异构体及其盐杂质的分析方法操作简便、灵敏度高、准确性佳，用作杂质分析检测，具有良好的分离度和低的检测限。用于分析检测薁磺酸钠原料药或其制剂的杂质时，薁磺酸钠异构体最低检测限约为0.2ng,定量限约为0.6ng;在薁磺酸钠异构体含量1～200μl的范围内有良好的线性关系，相关系数r=0.999。

附图说明

附图1为实施2薁磺酸异构体钠盐（结构式2）的HPLC分析图。

附图2为实施3薁磺酸钠（结构式1）的HPLC分析图。

附图3为实施4薁磺酸钠原料药的HPLC分析图。

附图4为实施5复方谷氨酰胺颗粒剂的HPLC分析图。

具体实施方式

为便于理解发明内容，下面结合具体实施例进一步描述本发明的技术方案，但不以任何方式限制本发明。

实施例1 薁磺酸异构体钠盐(结构式2)的制备

在反应瓶中加入发烟硫酸5ml，滴加5g愈创薁溶液（溶于25ml二氯甲烷），室温反应24小时后，向反应体系中加入适量水，分层，水层用碳酸钠调节pH，过滤，洗涤，重结晶得1,4-二甲基-7-异丙基薁-2-磺酸钠。

实施例2

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：以乙腈-0.01mol/L醋酸钠溶液（内含0.01moL/L苄基三乙基氯化铵）（28：72）为流动相；检测波长为290nm 。理论塔板数按薁磺酸异构体钠盐不低于5000，色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C₁₈150mm×4.6mm，5μm；柱温40℃，进样量10μl

溶液制备：取薁磺酸异构体钠盐10.03mg, 精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。

取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，见附图1，保留时间17.227min为薁磺酸异构体钠盐吸收峰。

实施例3

色谱条件：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：以乙腈-0.01mol/L醋酸钠溶液（内含0.01moL/L苄基三乙基氯化铵）（28：72）为流动相；检测波长为290nm 。理论塔板数按薁磺酸钠不低于3000，色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C₁₈150mm×4.6mm，5μm；柱温40℃，进样量10μl。

溶液制备：

取薁磺酸钠10.03mg, 精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。

取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，见附图2，保留时间15.685min 为薁磺酸钠吸收峰。

实施例4

色谱条件：

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：以乙腈-0.01mol/L醋酸钠溶液（内含0.01moL/L苄基三乙基氯化铵）（28：72）为流动相；检测波长为290nm 。理论塔板数按薁磺酸钠异构体峰计算不低于5000，色谱柱：Agilent Eclipse XDB-C₁₈150mm×4.6mm，5μm；柱温40℃，进样量10μl。

供试品溶液制备：

取薁磺酸钠原料药20.02 mg，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为薁磺酸钠原料药的样品溶液。

对照品溶液制备：

取薁磺酸异构体钠盐20.03mg, 精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取1.0mL置100ml量瓶中，加水稀释至刻度。

各取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按面积外标法计算。

薁磺酸钠原料药中薁磺酸钠异构体含量为：0.08%，理论塔板数：8000 ，与薁磺酸钠的分离度为2.20，薁磺酸钠原料药的HPLC分析图见附图3所示，其中保留时间15.688min为薁磺酸钠吸收峰，17.057为薁磺酸异构体钠盐吸收峰。

实施例5

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：以乙腈-0.01moL/L醋酸钠溶液（内含0.01moL/L苄基三乙基氯化铵）（28：72）为流动相；检测波长为290nm 。理论塔板数按薁磺酸钠异构体峰计算不低于5000，色谱柱：Agilent Eclipse XDB- C₁₈150mm×4.6mm,5μm；柱温40℃，进样量10μl。

供试品溶液的制备

取复方谷氨酰胺颗粒（按薁磺酸钠计2.0mg）加水配成含薁磺酸钠0.2mg/ml的溶液，作为复方谷氨酰胺颗粒剂样品溶液。

对照品溶液的制备：

取薁磺酸钠异构体20.03mg, 精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取1.0mL置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

各取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按面积以外标法计算。

复方谷氨酰胺颗粒中薁磺酸钠异构体含量为：0.052%（以薁磺酸钠含量为100%），理论塔板数：8000，与薁磺酸钠的分离度为2.10，复方谷氨酰胺颗粒中薁磺酸钠和薁磺酸钠异构体的HPLC分析图见附图4所示，其中保留时间15.570min 为薁磺酸钠吸收峰，17.094为薁磺酸异构体钠盐吸收峰。

Claims

1.一种薁磺酸异构体及其盐的分析方法，包括以下步骤：

a.取薁磺酸异构体或其盐、或含薁磺酸异构体及其盐的药物或其制剂，用水溶解，以薁磺酸异构体计，配成含薁磺酸异构体或其盐1～150μg/ml的溶液；

b. 取上述溶液适量，注入到高效液相色谱柱中，用流动相进行冲洗，所述高效液相色谱柱以硅烷键合硅胶为填充剂；

c.使用波长为280～310nm的紫外光检测；

其特征在于：上述（a）的薁磺酸异构体盐选自薁磺酸异构体金属盐和铵盐，

上述（b）的流动相为内含0.01mol/L苄基三乙基氯化铵的乙腈-0.01mol/L醋酸钠溶液，二者体积比为28：72，

上述（b）的硅烷键合硅胶选自十八烷基硅烷键合硅胶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤C使用波长为280～300nm的紫外光检测。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于步骤C使用波长为290nm～293nm的紫外光检测。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的薁磺酸异构体盐选自薁磺酸异构体钾盐、薁磺酸异构体钠盐或薁磺酸异构体铵盐。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的含薁磺酸异构体及其盐的药物或其制剂为薁磺酸钠、薁磺酸钾、薁磺酸钙、薁磺酸铵、薁磺酸钠片剂、薁磺酸钠颗粒剂、薁磺酸钠胶囊剂、薁磺酸钾片剂、薁磺酸钾颗粒剂、薁磺酸钾胶囊剂、薁磺酸钠谷氨酰胺片剂、薁磺酸钠谷氨酰胺颗粒剂、薁磺酸钠谷氨酰胺胶囊剂、薁磺酸钾谷氨酰胺片剂、薁磺酸钾谷氨酰胺颗粒剂或薁磺酸钾谷氨酰胺胶囊剂。