CN103504048A

CN103504048A - 一种高、中、低聚茶褐素及其制备方法

Info

Publication number: CN103504048A
Application number: CN201210222451.0A
Authority: CN
Inventors: 李瑞明; 王玉; 张兰兰; 顾睿; 李长文; 刘顺航; 贾黎晖; 陈庆闯
Original assignee: YUNNAN TASLY DEEPURE BIOLOGICAL TEA GROUP CO Ltd
Current assignee: YUNNAN TASLY DEEPURE BIOLOGICAL TEA GROUP CO Ltd
Priority date: 2012-06-29
Filing date: 2012-06-29
Publication date: 2014-01-15

Abstract

本发明提供一种高、中、低聚茶褐素的制备方法，该方法包括以下步骤：步骤1，普洱熟茶用水提取得到提取液，提取液浓缩后离心得到上清液；步骤2，上清液加入乙醇，得到沉淀物，沉淀物加水溶解，离心得到离心液，干燥后得到茶褐素干粉；步骤3，茶褐素干粉用水溶解，用滤膜过滤法得到不同聚合度的茶褐素。

Description

一种高、中、低聚茶褐素及其制备方法

技术领域

本发明涉及食品领域，具体涉及一种高、中、低聚茶褐素及其制备方法。

背景技术

在普洱茶发酵过程中，普洱茶中的物质发生了很大的变化，特别是色素物质变化很大。茶褐素是普洱茶中主要成分，也是普洱茶区别于其他茶类饮料的重要成分，受到了很大的关注。茶褐素的结构复杂，其极性也很大，不溶于绝大多数有机试剂，关于茶褐素的研究也较少。

目前人们对于茶褐素研究报道中大多使用的是有机溶剂萃取法。普洱茶先磨碎后用水提取，用三氯甲烷或者二氯甲烷萃取除去咖啡因，再用乙酸乙酯与正丁醇除去茶黄素与茶红素，最后得到茶褐素。流程大致如下：茶叶→粉碎→无水乙醇浸泡→过滤→茶渣→热水提取→过滤→减压浓缩→二氯甲烷萃取3次→乙酸乙酯萃取3次→正丁醇萃取3次→水相减压浓缩→茶褐素粗品→无水乙醇洗涤→茶褐素。

普洱茶中茶褐素为特征性成分，普洱茶发酵过程中，随着发酵程度不同茶褐素聚合度逐渐加大，所以区分不同聚合度茶褐素可以评价普洱茶品质，并且可以从不同聚合度茶褐素的比例，判断普洱茶发酵年份。另外不同聚合度茶褐素在体内的吸收分布各不相同，所以结合药理试验筛选不同聚合度茶褐素的药理作用，并且可以作为特殊功效普洱茶的质量控制指标。不同聚合度茶褐素含量可以作为普洱茶品质评价的重要指标。

茶褐素是一种分子量差异大的高聚合物，本发明经过研究发现，根据分子量的不同，茶褐素可以分为高聚合的茶褐素和低聚合的茶褐素，为研究方便，分子量分布小于1万（其中在2000左右和6000左右有集中分布）定义为低聚茶褐素；分子量分布在1~5万（其中在1万和3万左右有比较明确的集中分布）定义为中聚茶褐素；分子量大于5万定义为高聚茶褐素。

现有技术中有制备茶褐素的报道，但没有制备不同聚合度的茶褐素的方法的报道，本发明经过研究，发现一种制备不同聚合度的茶褐素的方法，该方法简单易行，可同时制备不同聚合度的茶褐素。

发明内容：

本发明提供一种不同聚合度的茶褐素的制备方法，该方法包括以下步骤：

步骤1，普洱熟茶用水提取得到提取液，提取液浓缩后离心得到上清液；

步骤2，上清液加入乙醇，得到沉淀物，沉淀物加水溶解，离心得到离心液，干燥后得到茶褐素干粉；

步骤3，茶褐素干粉用水溶解，用滤膜过滤法得到不同聚合度的茶褐素。

其中步骤1所述用水提取是用5-20倍量的水，80-100℃提取2-5次，每次0.5-2小时；合并提取液后，减压浓缩到相对密度1.05~1.10，然后再离心。

其中步骤2中所述加入乙醇是加入90%以上的乙醇，使加入后的乙醇浓度达到70%-80%，加入乙醇后，常温或冷却放置12-36小时，析出沉淀物，分离上清液得到沉淀物，沉淀物用水溶解至比重1.05~1.10，离心收集离心液，干燥后得到茶褐素干粉。

其中步骤3中所述用水溶解是将茶褐素干粉用水溶解到0.5-2g/L，然后用孔径0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤。

滤出的溶液再经过截流分子量为5万的纳滤膜过滤，过滤采用自然压力；其中，没有滤出的溶液称为膜上溶液，收集该膜上溶液并进行干燥得到高聚合度的茶褐素。

滤出的溶液再截流分子量为1万的纳滤膜过滤采用自然压力；其中,没有滤出的溶液称为膜上溶液，收集该膜上溶液并进行干燥得到中聚合度的茶褐素，收集滤出的溶液并进行干燥得到低聚合度的茶褐素。

本发明优选的制备方法如下：

茶褐素制备工艺

取普洱熟茶适量，加10倍量水加热80℃提取2次，每次1小时，过滤，茶渣加8倍量水，加热80℃提取0.5小时，过滤，茶渣弃去，合并提取液，过300目滤布，滤液70℃减压真空浓缩至相对密度1.05-1.10，管式离心，得离心上清液，加95%乙醇醇沉至含醇量80%，静置过夜，离心，得醇沉沉淀，加热水复溶至比重1.05-1.10，管式离心，得上清液，喷雾干燥，得茶褐素干粉。

不同聚合度茶褐素制备工艺

取茶褐素干粉水复溶(5g→5L)，依次过0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，滤过液先用截流分子量为5万的纳滤膜过滤，膜上截流溶液减压浓缩至比重1.10~1.15，冻干得高聚茶褐素；5万膜透过液再用截流分子量为1万的纳滤膜进行膜截流，膜上未通过溶液检验浓缩至1.10~1.15，冻干得中聚茶褐素；1万膜下透过液浓缩后冻干得低聚茶褐素。

本发明得到的茶褐素经过检测得到其分子量分布，检测方法如下：

GPC方法：分析采用凝胶渗透色谱法在十八角激光光散射仪和示差检测器联用。以0.1mol/L硝酸钠溶液加0.2%叠氮化钠为流动相，柱温40℃；示差折光检测器；温度40℃；激光检测波长658nm；流速为0.5mL/min；进样体积：200μL。

试验处理样品：

取茶褐素样品适量，分别配置成5mg/ml的溶液，溶液过0.45μm微孔滤膜过滤，进样检测，结果如下表：

从上表可以看出茶褐素中分子量的几个集中分布区间：分子量分布小于1万（其中在2000左右和6000左右有集中分布）定义为低聚茶褐素；分子量分布在1~5万（其中在1万和3万左右有比较明确的集中分布）定义为中聚茶褐素；分子量大于5万定义为高聚茶褐素。

本发明的有益效果在于：

本发明制备出不同聚合度的茶褐素，可作为对照品用于普洱茶的质量控制，如通过检测普洱茶中不同聚合度的茶褐素的含量判断普洱茶的品质，色泽口感等指标。

当检测一种未知的普洱茶是否为某一品种的普洱茶时，可从中提取分离高、中、低聚茶褐素，测定它们的含量，然后和已知的普洱茶高、中、低聚茶褐素的含量相比较，如果相同或相似，可以认为是同一种普洱茶。

本发明用简单的方法制备得到不同聚合度的茶褐素，并提供它们的分布比例，对进一步研究高、中、低聚茶褐素的用途提供有力的支持。

附图说明：

图1茶褐素提取工艺流程图1

图2茶褐素提取工艺流程图2

图3不同聚合度茶褐素制备工艺流程图

具体实施方式：

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

实施例1

取普洱熟茶适量，加10倍量水加热80℃提取2次，每次1小时，过滤，茶渣加8倍量水，加热80℃提取0.5小时，过滤，茶渣弃去，合并提取液，过300目滤布，滤液70℃减压真空浓缩至相对密度1.05-1.10，管式离心，得离心上清液，加95%乙醇醇沉至含醇量80%，常温静置过夜，离心，得醇沉沉淀，加热水复溶至比重1.05-1.10，管式离心，得上清液，喷雾干燥，得干粉A，上述流程图中干粉A为茶褐素干粉。

不同聚合度茶褐素制备工艺

取茶褐素干粉水复溶（5g→5L），依次过0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，滤过液先用截流分子量为5万的纳滤膜过滤，膜上截流溶液减压浓缩至比重1.10~1.15冻干得高聚茶褐素；5万膜透过液再用截流分子量为1万的纳滤膜进行膜截流，膜上未通过溶液检验浓缩至1.10~1.15，冻干得中聚茶褐素；1万膜下透过液浓缩后冻干得低聚茶褐素。

实施例2

取普洱熟茶适量，加5倍量水加热90℃提取1次，2小时，提取液过300目滤布，滤液70℃减压真空浓缩至相对密度1.05-1.10，管式离心，得离心上清液，加90%乙醇醇沉至含醇量70%，冷却静置12小时，离心，得醇沉沉淀，加热水复溶至比重1.05-1.10，管式离心，得上清液，喷雾干燥，得干粉A，上述流程图中干粉A为茶褐素干粉。

不同聚合度茶褐素制备工艺

取茶褐素干粉水复溶（2.5g→5L），依次过0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，滤过液先用截流分子量为5万的纳滤膜过滤，膜上截流溶液减压浓缩至比重1.10~1.15冻干得高聚茶褐素；5万膜滤过液再用截流分子量为1万的纳滤膜进行膜截流，膜上未通过溶液检验浓缩至1.10~1.15，冻干得中聚茶褐素；1万膜下透过液浓缩后冻干得低聚茶褐素。

实施例3

取普洱熟茶适量，加20倍量水加热100℃提取3次，每次0.5小时，过滤，合并提取液，过300目滤布，滤液70℃减压真空浓缩至相对密度1.05-1.10，管式离心，得离心上清液，加100%乙醇醇沉至含醇量75%，常温静置24小时，离心，得醇沉沉淀，加热水复溶至比重1.05-1.10，管式离心，得上清液，喷雾干燥，得干粉A，上述流程图中干粉A为茶褐素干粉。

不同聚合度茶褐素制备工艺

取茶褐素干粉水复溶（10g→5L），依次过0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，滤过液先用截流分子量为5万的纳滤膜过滤，膜上截流溶液减压浓缩至比重1.10~1.15冻干得高聚茶褐素；5万膜透过液再用截流分子量为1万的纳滤膜进行膜截流，膜上未通过溶液检验浓缩至1.10~1.15，冻干得中聚茶褐素；1万膜下透过液浓缩后冻干得低聚茶褐素。

实施例4

取普洱熟茶适量，加15倍量水加热85℃提取3次，每次1.5小时，过滤，合并提取液，过300目滤布，滤液70℃减压真空浓缩至相对密度1.05-1.10，管式离心，得离心上清液，加100%乙醇醇沉至含醇量80%，常温静置36小时，离心，得醇沉沉淀，加热水复溶至比重1.05-1.10，管式离心，得上清液，喷雾干燥，得干粉A，上述流程图中干粉A为茶褐素干粉。

不同聚合度茶褐素制备工艺

取茶褐素干粉水复溶（7.5g→5L），依次过0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，滤过液先用截流分子量为5万的纳滤膜过滤，膜上截流溶液减压浓缩至比重1.10~1.15冻干得高聚茶褐素；5万膜透过液再用截流分子量为1万的纳滤膜进行膜截流，膜上未通过溶液检验浓缩至1.10~1.15，冻干得中聚茶褐素；1万膜下透过液浓缩后冻干得低聚茶褐素。

Claims

1.一种不同聚合度的茶褐素的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，其中步骤1所述用水提取是用5-20倍量的水，80-100℃提取2-5次，每次0.5-2小时；合并提取液后，减压浓缩到相对密度1.05~1.10，然后再离心。

3.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，其中步骤2中所述加入乙醇是加入90%以上的乙醇，使加入后的乙醇浓度达到70%-80%，加入乙醇后，常温或冷却放置12-36小时，析出沉淀物，分离上清液得到沉淀物，沉淀物用水溶解至比重1.05~1.10，离心收集离心液，干燥后得到茶褐素干粉；

4.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，其中步骤3中所述用水溶解是将茶褐素干粉用水溶解成0.5-2g/L，然后用孔径0.45μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，滤出的溶液再经过截流分子量为5万的纳滤膜过滤，其中，没有滤过的溶液称为膜上溶液，收集该膜上溶液并进行干燥得到高聚茶褐素，滤出的溶液再经截流分子量为1万的纳滤膜过滤，收集没有滤过的溶液，并进行干燥得到中聚茶褐素，收集滤出的溶液并进行干燥得到低聚茶褐素。

5.根据权利要求1的制备方法，其特征在于，步骤如下：

取普洱熟茶适量，加10倍量水加热80℃提取2次，每次1小时，过滤，茶渣加8倍量水，加热80℃提取0.5小时，过滤，茶渣弃去，合并提取液，过300目滤布，滤液70℃减压真空浓缩至相对密度1.05-1.10，管式离心，得离心上清液，加95%乙醇醇沉至含醇量80%，静置过夜，离心，得醇沉沉淀，加热水复溶至比重1.05-1.10，管式离心，得上清液，喷雾干燥，得干粉A；取茶褐素干粉A用水复溶，依次过0.45μm和0.22μm的微孔滤膜，滤过液先用截流分子量为5万的纳滤膜过滤，膜上截流溶液减压浓缩至比重1.10~1.15冻干得高聚茶褐素；5万膜透过液再用截流分子量为1万的纳滤膜进行膜截流，膜上未通过溶液减压浓缩至比重1.10~1.15，冻干得中聚茶褐素；分子量截流膜1万的纳滤膜透过液浓缩后冻干得低聚茶褐素。

6.用权利要求1的方法制备的茶褐素，其特征在于，其中分子量分布小于1万为低聚茶褐素；分子量分布在1~5万为中聚茶褐素；分子量大于5万为高聚茶褐素。