CN103503695A - 一种杏鲍菇液体菌种的培养方法 - Google Patents

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王涛
李正鹏
李玉
周峰
谭琦
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SHANGHAI CO-ELITE AGRICULTURAL SCI-TECH (GROUP) CO LTD
Shanghai Guosen Biotechnology Co ltd
Shanghai Academy of Agricultural Sciences
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SHANGHAI CO-ELITE AGRICULTURAL SCI-TECH (GROUP) CO LTD
Shanghai Guosen Biotechnology Co ltd
Shanghai Academy of Agricultural Sciences
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Abstract

本发明公开了一种杏鲍菇液体菌种的培养方法，其是通过先制备液体母种，然后发酵罐培养液体菌种，制备得到的液体菌种最后可以通过接种机接入栽培瓶或栽培袋进行培养。

Description

一种杏鲍菇液体菌种的培养方法
技术领域
本发明属于食用菌工厂化栽培技术领域，具体的说涉及一种杏鲍菇液体菌种的培养方法。
背景技术
杏鲍菇液体菌种相对于固体菌种具有生产周期段、菌龄一致、出菇齐、便于管理、菌种成本低、接种方便且快速等优点。而且它还有利于食用菌生产的规模化、工厂化。
目前国内杏鲍菇生产方式主要是固体菌种栽培，其生产周期长、出菇不整齐，耗能高。杏鲍菇栽培产业要有所发展，应用液体菌种及其相应的栽培工艺是一条理想的捷径。之前也有报道的其他液体菌种方法，如马铃薯做碳源，麸皮做氮源，但这种方法在实际工厂化生产过程操作较为繁琐，耗费原料。
发明内容
本发明的目的在于提供一种杏鲍菇液体菌种的培养方法，该方法包括如下步骤：
（1）、制备液体母种：培养液灭菌后接入试管斜面原种，将其放入21-25℃、转速为120-160转/分摇床中培养6-10天；
其中培养液组成为：白糖10-30g/L、豆粕粉2-5g/L、MgSO40.2-1.0g/L、KH2PO40.2-1.2g/L，加水定容；
（2）、发酵罐培养液体菌种：将培养液倒入发酵罐，121℃灭菌60-120分钟，灭菌后水淋冷却并通入无菌空气；接种入培养好的液体母种，接种量为1-2‰，发酵罐培养温度为21-26℃，通气压力为0.5-1.5兆帕，培养7-10天；
其中发酵罐中培养液的组成为：白糖10-30g/L，豆粕粉2-5g/L，MgSO40.2-1.0g/L，KH2PO40.2-1.2g/L，乳化硅油2-5ml/100L，加水定容。
其中发酵罐中培养液是按照如下方法配制的：
将白糖、MgSO4和KH2PO4加水溶解；
加入经过100-140目筛子过滤的豆粕粉，搅拌均匀；
将上述液体通过50-100目尼龙布过滤，加入乳化硅油，最后加水定容。
其中步骤（2）中冷却是指的冷却到25度以下；
其中步骤（2）中所用的无菌空气，是由最小孔径为0.01ppm的过滤器所过滤的空气，并由冷冻式干燥机、吸附式干燥机除油除水。
本发明的方法具有以下优点：
1、培养液配方简单，碳源只需白糖，氮源只需豆粕粉。
2、液体菌种制备过程简单，操作简便。
3、可以缩短了杏鲍菇的生产周期。
应用本发明的培养基培养杏鲍菇液体菌种，发菌时间只需20-25天，比固体菌种缩短30%到50%。与马铃薯等为碳源的液体培养方法相比，此方法操作更为简便。因为马铃薯需要经过切割为特殊小块，且工厂化生产培养液一般在500L以上，马铃薯量至少15%，及75kg，并且煮沸后再经多层纱布过滤，在大规模生产中操作比较困难。
具体实施方式
实施例一
1.材料与方法：
供试菌种，杏鲍菇（Pleurotus eryngii Quel.）母种为上海国森生物科技有限公司国森一号。
母种摇瓶培养基包括：白糖20g/L、豆粕粉3g/L、MgSO40.6g/L、KH2PO40.6/L，其余为水。并放入磁力搅拌器转子1枚，规格为长35mm，宽8mm。1L刻度三角瓶装液量为400ml。灭菌后接入3至5块1㎝2左右试管斜面原种，将其放入21℃、转速为120-转/分摇床中培养8天。
发酵罐中培养液的组成见表1。
表1培养液的部分配方组成
①、将白糖放入容器中加10L水，搅拌使其溶解；
②、加入MgSO4和KH2PO4并使其溶解；
③、将豆粨粉经过120目筛子过滤，然后加入上述溶液中，使其充分分散在水中；
④、将上述液体通过50-100目尼龙布过滤，倒入发酵罐，加入乳化硅油50ml；加水定容。
将配制好的培养基倒入发酵罐中，121℃高压蒸汽灭菌90分钟，待其温度冷却至85℃以下时，将发酵罐推出，通入无菌空气，压力为0.5-0.1兆帕，并在罐体上放置一水淋以迅速冷却罐体，当罐体温度冷却至25℃以下时即可接液体母种。
发酵罐培养温度为21℃，通气压力为0.5兆帕。培养7天后测量菌丝生物量、菌球密度与直径。
生物量的测定方法：发酵结束后去少量菌液使用80目的尼龙布过滤，烘干至衡重。
菌球密度与直径的测定方法：吸取1ml菌液至培养皿，放入菌落计数器中读出菌球个数与直径，结果见表2。
表2液体菌种培养结果
Figure BDA0000395625320000032

Claims (1)

1.一种杏鲍菇液体菌种的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）、制备液体母种：培养液灭菌后接入试管斜面原种，将其放入21-25℃、转速为120-160转/分摇床中培养6-10天；
其中培养液组成为：白糖10-30g/L、豆粕粉2-5g/L、MgSO40.2-1.0g/L、KH2PO40.2-1.2g/L，加水定容；
（2）、发酵罐培养液体菌种：将培养液倒入发酵罐，121℃灭菌60-120分钟，灭菌后水淋冷却并通入无菌空气；接种入培养好的液体母种，接种量为1-2‰，发酵罐培养温度为21-26℃，通气压力为0.5-1.5兆帕，培养7-10天，即可通过接种机接入栽培瓶或栽培袋；
其中发酵罐中培养液的组成为：白糖10-30g/L，豆粕粉2-5g/L，MgSO40.2-1.0g/L，KH2PO40.2-1.2g/L，乳化硅油2-5ml/100L，加水定容。
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