CN103494862B - 从油橄榄加工废液中提取橄榄多酚的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从油橄榄加工废液中提取多酚的方法，属于生物分离技术领域。本发明以油橄榄加工废液为原料，采用乙醇沉淀技术和大孔吸附树脂分离技术，得到高品质橄榄多酚，同时还得到了功能饲料添加剂和橄榄蛋白-多糖复合物，实现了油橄榄加工废液的综合开发利用，并为橄榄多酚的生产提供技术支持，具有良好的经济效果社会效果。

Description

从油橄榄加工废液中提取橄榄多酚的方法

技术领域

本发明属于生物分离技术领域，涉及一种从油橄榄加工废液中提取多酚的方法，特别涉及从油橄榄加工废液中分离提取橄榄多酚的方法。

技术背景

植物多酚是一类广泛存在于植物体内的多元酚类物质，主要存在于植物的皮、根、木、叶、果中，它也是一类具有独特生理活性和药理活性的天然产物。大量研究表明，植物多酚在抗诱变、抗肿瘤、抗病毒、抗微生物、抗衰老、抗氧化等很多方面具有良好的作用，在制药、生化、日化、食品以及精细化工等高科技领域具有广阔的应用前景。近年来，研究较多的多酚产品主要以茶叶多酚和葡萄籽多酚为主。橄榄多酚是从橄榄叶或橄榄中提取的生物活性成分。现代理化分析研究表明，橄榄中所含的主要成分为多酚类化合物，如没食子酸、并没食子酸、短叶苏木酚、金丝桃苷和3,3′-二甲氧基并没食子酸等鞣质类多酚化合物，其中榄之香、檀香、三棱这三种多酚含量最高。现代药理学研究表明，橄榄多酚类物质具有增强免疫、抗氧化、抗病毒、抗菌消炎镇痛、解酒护肝，抑制血糖升高，增加骨密度和骨钙含量，抗乙肝病毒等作用。荷兰DSM公司、德国Burgundy公司和法国La Gardonnenque集团及我国的广东天祥、上海健奥、北京华源禾等企业均有橄榄提取物或橄榄多酚相关产品的开发和销售。

在用油橄榄果实生产加工橄榄油的过程中产生大量的废液，其中含有高浓度的多酚类化合物、蛋白质、多糖和维生素等多种生物活性成分，但是这些废液均未加以开发利用，不仅造成了极大的资源浪费，而且油橄榄加工废液的直接排放造成了环境污染。因此，油橄榄加工废液的开发利用具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种从油橄榄加工废液中提取橄榄多酚的方法。

本发明从油橄榄加工废液中提取多酚的方法，包括以下工艺步骤： 

（1）将油橄榄加工新鲜废液用筛网过滤（过滤所用筛网的目数为80～200目），去除废液中的固体颗粒物，得到滤液A和滤渣A，并将滤液A离心分离得到上清液B和沉淀B；滤渣A与沉淀B混合，干燥，粉碎后作为功能饲料添加剂；

（2）上清液B用乙醇沉淀，离心分离，得到上清液C和沉淀C；上清液C经真空减压浓缩回收乙醇后得到粗多酚浓缩液，粗多酚浓缩液经大孔吸附树脂吸附、解吸，得含橄榄多酚的解吸液，解吸液再经真空浓缩、干燥，得橄榄多酚固体产品。

上清液B用乙醇沉淀的工艺条件为：在上清液B中加入无水乙醇使混合液中乙醇的体积分数为20 %～50 %，在0～15℃下沉淀2～8 h。

橄榄多酚的吸附条件为：将上清液C经真空减压浓缩至浓度为50～200 mg/L的粗多酚浓缩液，再将粗多酚浓缩液与大孔吸附树脂以5:1～15:1的体积/质量比混合，在20～30 ℃下搅拌吸附0.5～3 h达到平衡。搅拌转速为50～200 rpm。

多酚浓缩液的解吸工艺为：以质量百分数50%～80 %的乙醇水溶液为解吸液，将解析液与吸附饱和树脂以5:1～15:1 mL/g比例混合，在35～45℃下搅拌解吸1～4 h。搅拌转速为50～200 rpm。

步骤（1）、（2）中，离心分离的转速为2000～5000rpm，时间为10～30 min；干燥方式为热风干燥或真空干燥。

（3）沉淀C用质量百分数50%～80%的乙醇水溶液洗涤，得到洗涤液D和沉淀D，沉淀D经真空干燥后得橄榄蛋白-多糖复合物。洗涤液D与上清液C混合后经真空减压浓缩回收乙醇后得到粗多酚浓缩液，再经大孔吸附树脂吸附、解吸制备橄榄多酚产品。

本发明相对现有技术具有以下优点：

1、本发明采用乙醇沉淀技术和大孔吸附树脂分离技术从油橄榄加工废液中提纯得到了高品质橄榄多酚，同时还得到了橄榄蛋白-多糖复合物，实现了油橄榄加工废液中有效成分的集成提取分离，为油橄榄加工废弃物的综合开发利用和橄榄多酚的生产提供技术支持；

2、本发明可橄榄多酚、橄榄蛋白-多糖复合物，提取分离效率高，产品的纯度高，

3、本发明提取工艺绿色环保剂，安全可靠，具有良好的工业化应用潜力。

附图说明

图1 为本发明提取工艺的流程图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的提取工艺作进一步说明。

实施例1

取新鲜油橄榄加工废液1000 mL（多酚含量为4.6 g/L），用80目滤布过滤，得滤渣A和滤液A，滤液A经2000 rpm离心30 min后得上清液B和沉淀B，混合滤渣A和沉淀B，经热风干燥、粉碎后得功能型饲料添加剂。

在上清液B中加入无水乙醇使混合液中乙醇的体积百分数为20 %，充分搅拌后在0℃下沉淀2 h，混合物经2000 rpm离心30 min后得上清液C和沉淀C；沉淀C用50 %乙醇溶液洗涤至洗涤液无色，收集洗涤液D和沉淀D，沉淀D经真空干燥或冷冻干燥后得橄榄多糖-蛋白复合物。

合并上清液C和洗涤液D，经真空减压浓缩后回收乙醇，得到浓度为50 mg/L的粗多酚浓缩液，将粗多酚浓缩液样品与经预处理的AB-8树脂按5（mL）:1（g）比例混合，在20 ℃、50 rpm转速下搅拌吸附3 h；吸附平衡后用50 %的乙醇水溶液作为解吸液，按解吸液与饱和树脂比例5（mL）:1（g），在35℃、50 rpm转速下搅拌解吸4 h，解吸液经真空减压浓缩、真空冷冻干燥后得橄榄多酚样品5.2 g，固体样品中多酚含量为65 %，多酚总收率为73.5 %。

实施例2

取新鲜油橄榄加工废液800 mL（多酚含量为4.2 g/L），用100目滤布过滤，得滤渣A和滤液A，滤液A经3000 rpm离心20 min后得上清液B和沉淀B，混合滤渣A和沉淀B，经热风干燥、粉碎后得功能型饲料添加剂。

在上清液B中加入无水乙醇使混合液中乙醇的体积分数为30 %，充分搅拌后在5 ℃下沉淀4 h，混合物经3000 rpm离心20 min后得上清液C和沉淀C，沉淀C用60 %乙醇水溶液洗涤至洗涤液无色，收集洗涤液D和沉淀D，沉淀D经真空干燥或冷冻干燥后得橄榄多糖-蛋白复合物。

合并上清液C和洗涤液D，经真空减压浓缩回收乙醇后得到浓度为100 mg/L的橄榄粗多酚浓缩液，将粗多酚浓缩液与经预处理的AB-8树脂按10（mL）:1（g）比例混合，在25 ℃、100 rpm转速下搅拌吸附2 h；吸附平衡后用60 %的乙醇水溶液作为解吸液，按解吸液与饱和树脂比例10（mL）:1（g），在40℃、100 rpm转速下搅拌解吸3 h，解吸液经真空减压浓缩、真空冷冻干燥后得橄榄多酚样品3.6 g，固体样品中多酚含量为71.6 %，多酚总收率为76.7 %。

实施例3

取新鲜油橄榄加工废液600 mL（多酚含量为2.9 g/L），用150目滤布过滤，得滤渣A和滤液A，滤液A经4000 rpm离心15 min后得上清液B和沉淀B，混合滤渣A和沉淀B，经热风干燥、粉碎后得功能型饲料添加剂。

在上清液B中加入无水乙醇使混合液中乙醇的体积分数为40 %，充分搅拌后在10 ℃下沉淀6 h，混合物经4000 rpm离心15 min后得上清液C和沉淀C，沉淀C用70 %乙醇水溶液洗涤至洗涤液无色，收集洗涤液D和沉淀D，沉淀D经真空干燥或冷冻干燥后得橄榄多糖-蛋白复合物。

合并上清液C和洗涤液D，经真空减压浓缩回收乙醇后得到浓度为150 mg/L的橄榄粗多酚浓缩液，将粗多酚浓缩液与经预处理的X-5树脂按15（mL）:1（g）比例混合，在30 ℃、150 rpm转速下搅拌吸附1 h；吸附平衡后用70 %的乙醇水溶液作为解吸液，按解吸液与饱和树脂比例15（mL）:1（g），在45℃、150 rpm转速下搅拌解吸2 h，解吸液经真空减压浓缩、真空冷冻干燥后得橄榄多酚样品2.0 g，固体样品中多酚含量为57.8 %，多酚总收率为66.4 %。

实施例4

取新鲜油橄榄加工废液400 mL（多酚含量为2.1 g/L），用200目滤布过滤，得滤渣A和滤液A，滤液A经5000 rpm离心10 min后得上清液B和沉淀B，混合滤渣A和沉淀B，经热风干燥、粉碎后得功能型饲料添加剂。

在上清液B中加入无水乙醇使混合液中乙醇的体积分数为50 %，充分搅拌后在15 ℃下沉淀8 h，混合物经5000 rpm离心10 min后得上清液C和沉淀C，沉淀C用80 %乙醇水溶液洗涤至洗涤液无色，收集洗涤液D和沉淀D，沉淀D经真空干燥或冷冻干燥后得橄榄多糖-蛋白复合物。

合并上清液C和洗涤液D，经真空减压浓缩回收乙醇后得到浓度为200 mg/L的橄榄粗多酚浓缩液，将粗多酚浓缩液与经预处理的NKA-9树脂按15（mL）:1（g）比例混合，在20 ℃、200 rpm转速下搅拌吸附0.5 h；吸附平衡后用80 %的乙醇水溶液作为解吸液，按解吸液与饱和树脂比例15（mL）:1（g），在45℃、200 rpm转速下搅拌解吸1 h，解吸液经真空减压浓缩、真空冷冻干燥后得橄榄多酚样品0.9 g，固体样品中多酚含量为76.5 %，多酚总收率为82 %。

Claims (3)

1.一种从油橄榄加工废液中提取橄榄多酚的方法，包括以下工艺步骤： 

（1）将油橄榄加工新鲜废液用筛网过滤，去除废液中的固体颗粒物，得到滤液A和滤渣A，并将滤液A离心分离得到上清液B和沉淀B；滤渣A与沉淀B混合，干燥，粉碎后作为功能饲料添加剂；离心分离的转速为2000～5000rpm，时间为10～30 min；所述油橄榄加工新鲜废液是用油橄榄果实生产加工橄榄油的过程中产生的废液；

（2）上清液B用无水乙醇沉淀，离心分离，得到上清液C和沉淀C；上清液C经真空减压浓缩回收乙醇后得到粗多酚浓缩液，多酚浓缩液经大孔吸附树脂吸附、解吸，得含橄榄多酚的解吸液，解吸液再经真空浓缩、干燥，得橄榄多酚固体产品；

所述离心分离的转速为2000～5000rpm，时间为10～30 min；

所述上清液B用乙醇沉淀的工艺条件为：在上清液B中加入无水乙醇使混合液中乙醇的体积分数为20 %～50 %，在0～15℃下沉淀2～8 h；

所述橄榄多酚的吸附条件为：将上清液C经真空减压浓缩至浓度为50～200 mg/L的粗多酚浓缩液，再将粗多酚浓缩液与大孔吸附树脂以5:1～15:1的体积/质量比混合，在20～30 ℃下搅拌吸附0.5～3 h达到平衡；

所述多酚浓缩液的解吸工艺为：以质量百分数50%～80 %的乙醇水溶液为解吸液，将解析液与吸附饱和树脂以5:1～15:1 mL/g比例混合，在35～45℃下搅拌解吸1～4 h；

所述吸附、解析的搅拌转速为50～200 rpm；

（3）沉淀C用质量百分数50%～80%的乙醇水溶液洗涤，得到洗涤液D和沉淀D，洗涤液D与上清液C混合后经真空减压浓缩回收乙醇后得到粗多酚浓缩液，沉淀D经真空干燥后得橄榄蛋白-多糖复合物。

2.如权利要求 1所述从油橄榄加工废液中提取橄榄多酚的方法，其特征在于：步骤（1）中，过滤所用筛网的目数为80～200目。

3.如权利要求 1所述从油橄榄加工废液中提取橄榄多酚的方法，其特征在于：步骤（1）、（2）中，所述干燥方式为热风干燥或真空干燥。