CN103439424A - 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法 - Google Patents

一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103439424A
CN103439424A CN2013103778937A CN201310377893A CN103439424A CN 103439424 A CN103439424 A CN 103439424A CN 2013103778937 A CN2013103778937 A CN 2013103778937A CN 201310377893 A CN201310377893 A CN 201310377893A CN 103439424 A CN103439424 A CN 103439424A
Authority
CN
China
Prior art keywords
nitro
methylene
plant
type
acetonitrile
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013103778937A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103439424B (zh
Inventor
叶庆富
张键波
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University ZJU
Original Assignee
Zhejiang University ZJU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University ZJU filed Critical Zhejiang University ZJU
Priority to CN201310377893.7A priority Critical patent/CN103439424B/zh
Publication of CN103439424A publication Critical patent/CN103439424A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103439424B publication Critical patent/CN103439424B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明公开一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法。该方法是在植物样品中加入乙腈-水混合液混合均匀后，提取、离心，取上清液浓缩，得到浓缩液；将浓缩液过固相萃取柱，用甲醇-水混合液淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到杀虫剂的提取液。本发明方法可应用于提取净化土壤、果实类、根类作物、叶类作物、谷类与饲料作物及豆类与油籽类作物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂。本发明使用石墨化碳黑作为吸附剂，克服了传统纯化方法的缺陷，柱子平衡、上样、淋洗、洗脱时间短，且能够最大限度地去除干扰物，使后期的检测结果更为准确。本发明用超声提取、固相萃取柱分离纯化，具有提取时间短、效率高、净化效果好、回收率高等特点。

Description

一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法
技术领域
     本发明属于农药残留分析技术领域，具体涉及一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法。
背景技术
     自上世纪80年代第一个新烟碱类杀虫剂上市以来，新烟碱类杀虫剂得到迅速发展。然而，随着长时间的施药，以吡虫啉为代表的新烟碱类杀虫剂田间抗性不断增加，开发新型新烟碱类杀虫剂显得十分必要。硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂是我国自主创制的一种新烟碱类手性杀虫剂，主要用于防治同翅目害虫，对稻飞虱和蔬菜蚜虫具有良好的防治效果（如哌虫啶对其防效均达90﹪以上)。在当今吡虫啉抗性不断增加的情况下，新型硝基亚甲基类新建杀虫剂是一类具有广阔市场潜力的新农药。
    根据我国农药登记相关规定，必须提供农药在环境中，尤其是施药对象（如蔬菜）中的残留情况。欧盟、美国等国家进一步要求必须提供农药在施药对象（如蔬菜）中代谢降解相关数据。我国在这方面起步较晚，但农业部已经就相关规定进行研究讨论，农药登记需提供农药在植物中的残留及代谢相关数据将成为必然趋势。
    为此，植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的提取、净化方法显得十分迫切。目前国内外鲜见提取植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的文献。且现有其他新烟碱类农药的方法都没有经过固相萃取分离纯化，会导致样品杂质过多，影响仪器使用寿命及检测结果的准确性。有的方法采用的填料去除杂质效果不明显，影响实验效率。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种操作简单、用时较少、且能有效去除干扰物质的植物中硝基亚甲基新烟碱杀虫剂的提取净化方法。
本发明方法是：
在植物样品中加入乙腈-水混合液混合均匀后，提取、离心，取上清液浓缩，得到浓缩液；将浓缩液过固相萃取柱，用甲醇-水混合液淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到杀虫剂的提取液。
所述的植物样品为在液氮下将植物研磨成粉末状的植物组织。
所述的植物样品与乙腈-水混合液的体积比为4：1～1：4。
所述的乙腈-水混合液中乙腈与水的体积比为1：3～5，优选为2:8。
所述的甲醇-水混合液中甲醇与水的体积比为1：19～3：17，优选为1:9。
所述的提取可以选用振荡或超声等方法，本发明优选选用超声提取15min，离心为8000r/min离心10分钟，提取、离心步骤重复两次。
所述的过固相萃取柱前需依次用甲醇和水预淋洗萃取柱，可活化固相萃取柱。
所述的洗脱液浓缩后转移至棕色刻度定量浓缩瓶中，在氮吹仪下用氮气吹干，用乙腈定容至1mL。
所述的固相萃取柱内填充有400～500mg的石墨化碳黑，优选石墨化碳黑的填充量为500mg；该石墨化碳黑作为吸附剂。
     本发明方法可应用于提取净化土壤、果实类、根类作物、叶类作物、谷类与饲料作物及豆类与油籽类作物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂。 
     现有的提取方法中，有用玻璃层析柱进行过柱分离的，所用玻璃层析柱中吸附剂为大孔吸附树脂。大孔吸附树脂过滤效果较好，但其平衡、上样、淋洗、洗脱时间长，且填充不方便。有用C18作为吸附剂的，但C18对于极性较大的新烟碱类杀虫剂保留效果不好。本发明使用石墨化碳黑作为吸附剂，克服了上述缺陷，柱子平衡、上样、淋洗、洗脱时间短，且能够最大限度地去除干扰物，使后期的检测结果更为准确。
    本发明用超声提取、固相萃取柱分离纯化，具有提取时间短、效率高、净化效果好、回收率高等特点。
附图说明
图1为实施例2中第一组未经固相萃取柱纯化的液相检测图；
图2为实施例2中第二组经过固相萃取柱纯化的液相检测图；
图3为实施例2中第三组经过固相萃取柱纯化的液相检测图。
具体实施方式
    以下通过具体实施方式进一步解释本发明，实施例中如无特殊说明均为本领域常规实验手段。
实施例1.小白菜中哌虫啶的提取测定
 1. 植物样品制备
将小白菜种子在30℃下催芽，将催芽后的种子种在土壤中，在植株长至3叶期施药，长至5叶期收获，冷冻，液氮下磨碎，备用。
2. 超声、离心提取
称取约10.00g植物样品（约20mL）至80mL离心管中，加入20mL乙腈-水提取液（乙腈与水的体积比为2:8），超声提取15min，于8000r/min离心10min，转移上清液至圆底烧瓶中，植物残渣再次重复超声提取、离心一次，将离心后得到的上清液在真空旋转蒸发仪浓缩至5mL。
3. 固相萃取柱净化
取6mL/500mg固相萃取柱（内填充有500mg石墨化碳黑）一支，先用甲醇预淋洗萃取柱。再将步骤2中的浓缩液上样至固相萃取柱，然后用甲醇-水混合液(甲醇与水的体积比为1：9)淋洗萃取柱，最后用甲醇洗脱，收集洗脱液。
4. 浓缩定容
将步骤3中的洗脱液转移至棕色刻度定量浓缩瓶（1.0mL）中，在氮吹仪下用高纯氮气吹干，用乙腈定容至1mL，得到哌虫啶的提取液，待测定。
5. 液相色谱进行测定
采用液相色谱仪对所获得的哌虫啶的提取液进行测定，具体的液相色谱-质谱仪器分析条件如下：
沃特世Alliance 2695-LTQ Obitrap
色谱柱：Dikma Diamonsil C18 column
流速：1.0mL/min
柱温：30oC
检测器：DAD
喷雾电压：25 V
毛细管温度：285oC
6. 检测结果
小白菜中哌虫啶的检测含量为8.61 ng/mL。
实施例2.
    1.在液氮下将植物研磨成粉末状，得到植物样品。
2.在1mL植物样品中加入1mL乙腈-水混合液(乙腈与水的体积比为1：3)混合均匀后，振荡提取15min，8000r/min离心10分钟，取上清液浓缩，得到浓缩液；
3.过固相萃取柱（内填充有400mg石墨化碳黑）前需先用甲醇预淋洗萃取柱，可活化固相萃取柱。将浓缩液过固相萃取柱，用甲醇-水混合液(甲醇与水的体积比为1：19)淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，在氮吹仪下用氮气吹干，用乙腈定容至1mL，得到哌虫啶的提取液。
实施例3.
     1.在液氮下将植物研磨成粉末状，得到植物样品。
     2.在1mL植物样品中加入2mL乙腈-水混合液(乙腈与水的体积比为1：5)混合均匀后，超声提取15min，8000r/min离心10分钟，转移上清液至圆底烧瓶中，植物残渣再次重复超声提取、离心一次，取上清液浓缩，得到浓缩液；
    3.过固相萃取柱（内填充有500mg石墨化碳黑）前需先用甲醇预淋洗萃取柱，可去除干扰物和无机盐。将浓缩液过固相萃取柱，用甲醇-水混合液(甲醇与水的体积比为3：17)淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，在氮吹仪下用氮气吹干，用乙腈定容至1mL，得到哌虫啶的提取液。
实施例4.固相萃取柱净化效果
    设置一下实验组：
第一组：植物加标，在不含哌虫啶的植物中加入哌虫啶，哌虫啶的浓度为10μg/g； 
第二组：植物空白，取不含哌虫啶的植物做空白对照；
第三组：植物加标，在不含哌虫啶的植物中加入哌虫啶，哌虫啶的浓度为10μg/g；
    以上各组中，第一组按常规方法提取但不进行固相萃取柱纯化；第二、三组按照实施例1中步骤1～5进行试验，检测结果如图：图1表示第一组未经固相萃取柱纯化的液相检测图，图2表示第二组经过固相萃取柱纯化的液相检测图，图3表示第三组经过固相萃取柱纯化的液相检测图。由图3可以看出哌虫啶的保留时间为22.6min，而在图1，由于样品的杂质很多，无法在22.6min检测到鉴别出哌虫啶，图2显示了固相萃取柱很好的去除了样品中的杂质，在哌虫啶的保留时间附近没有干扰物。综上所述，样品中哌虫啶的干扰物得到很好的去除，哌虫啶得到有效检测。

Claims (9)

1. 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于该方法是：在植物样品中加入乙腈-水混合液混合均匀后，提取、离心，取上清液浓缩，得到浓缩液；植物样品与乙腈-水混合液的体积比为1：1～2；将浓缩液过固相萃取柱，用甲醇-水混合液淋洗，甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到杀虫剂的提取液。
2.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于所述的植物样品为在液氮下将植物研磨成粉末状的植物组织。
3.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于所述的乙腈-水混合液中乙腈与水的体积比为1：3～5，甲醇-水混合液中甲醇与水的体积比为1：19～3：17。
4.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于所述的乙腈-水混合液中乙腈与水的体积比为2:8，甲醇-水混合液中甲醇与水的体积比为1:9。
5.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于超声、离心步骤具体是超声提取15min，离心为8000r/min离心10分钟，提取、离心步骤重复两次。
6.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于所述的过固相萃取柱前需依次甲醇和水预淋洗萃取柱，可活化固相萃取柱。
7.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于所述的洗脱液浓缩后转移至棕色刻度定量浓缩瓶中，在氮吹仪下用氮气吹干，用乙腈定容至1mL。
8.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于所述的固相萃取柱内填充有400～500mg的石墨化碳黑，该石墨化碳黑作为吸附剂。
9.如权利要求1所述的一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法，其特征在于本发明方法可应用于提取净化土壤、果实类、根类作物、叶类作物、谷类与饲料作物及豆类与油籽类作物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂。
CN201310377893.7A 2013-08-27 2013-08-27 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法 Active CN103439424B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310377893.7A CN103439424B (zh) 2013-08-27 2013-08-27 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310377893.7A CN103439424B (zh) 2013-08-27 2013-08-27 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103439424A true CN103439424A (zh) 2013-12-11
CN103439424B CN103439424B (zh) 2015-08-26

Family

ID=49693127

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310377893.7A Active CN103439424B (zh) 2013-08-27 2013-08-27 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103439424B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110609099A (zh) * 2019-09-23 2019-12-24 福建省国鼎检测技术有限公司 一种桑叶中氯噻啉残留量的检测方法
CN111151222A (zh) * 2020-03-06 2020-05-15 福州海关技术中心 一种磁性复合吸附材料的制备及在茶叶多农残检测中的应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007001192A1 (en) * 2005-06-28 2007-01-04 Matthews, John, Brodie Method of determining biocides within wood
JP2007155657A (ja) * 2005-12-08 2007-06-21 Nippon Flour Mills Co Ltd 液体クロマトグラフィータンデム質量分析法（ｌｃ―ｍｓ／ｍｓ）を使用した農薬の分析方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007001192A1 (en) * 2005-06-28 2007-01-04 Matthews, John, Brodie Method of determining biocides within wood
JP2007155657A (ja) * 2005-12-08 2007-06-21 Nippon Flour Mills Co Ltd 液体クロマトグラフィータンデム質量分析法（ｌｃ―ｍｓ／ｍｓ）を使用した農薬の分析方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
许秀莹等: "气相色谱-质谱联用测定大米中6种烟碱类农药残留", 《质谱学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110609099A (zh) * 2019-09-23 2019-12-24 福建省国鼎检测技术有限公司 一种桑叶中氯噻啉残留量的检测方法
CN111151222A (zh) * 2020-03-06 2020-05-15 福州海关技术中心 一种磁性复合吸附材料的制备及在茶叶多农残检测中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN103439424B (zh) 2015-08-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101598707B (zh) 一种含油食品中多种农药残留的检测方法
CN105372353B (zh) 一种食品中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留量的测定方法
CN104458948A (zh) 一种秸秆酚酸类化合物的检测方法
CN108760935B (zh) 一种植物中磺胺类抗生素提取与测定的方法
CN104237402B (zh) 一种树皮、树叶中全氟化合物提取及测定方法
CN104374849A (zh) 拟除虫菊酯类农药残留土壤环境样品测定前的处理方法
CN102121928A (zh) 一种含有几种农药残留的洋葱样品测定前的处理方法
CN103439424B (zh) 一种高效净化植物中硝基亚甲基类新烟碱杀虫剂的方法
Díaz-Galiano et al. Presence of anthraquinone in coffee and tea samples. An improved methodology based on mass spectrometry and a pilot monitoring programme
CN113030331B (zh) 一种植物中氯虫苯甲酰胺的检测方法
Laganà et al. Determination of aryloxyphenoxypropionic acid herbicides in water using different solid-phase extraction procedures and liquid chromatography–diode array detection
Qin et al. Multi-residue method for determination of selected neonicotinoid insecticides in traditional Chinese medicine using modified dispersive solid-phase extraction combined with ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry
CN103257195B (zh) 同时分析卷烟主流烟气中苯并[a]蒽、屈和苯并[a]芘的GC-MS/MS方法
CN106404507A (zh) 一种叶菜赤霉素残留检测样品前处理方法及检测方法
CN103558299B (zh) 利用凝胶渗透色谱处理生物检材的拟除虫菊酯类农药检验方法
CN103163265A (zh) 采用spe-gc/ecd测定烟草中腈菌唑残留量的方法
Albero et al. Determination of thiabendazole in orange juice and rind by liquid chromatography with fluorescence detection and confirmation by gas chromatography/mass spectrometry after extraction by matrix solid-phase dispersion
Zhao et al. Supercritical fluid extraction for the separation of organochlorine pesticides residue in Angelica sinensis
CN105181870A (zh) 一种测定蔬菜水果中噁霉灵残留物的方法
CN106841498B (zh) 一种测定烟草及烟草制品冷杉醇的方法
CN102621254A (zh) 一种干果蔬中啶虫脒检测的前处理方法
CN110028531B (zh) 一种从土壤中提取分离黄酮类物质的方法
CN109142589B (zh) 一种利用高效液相色谱仪测定土壤中四霉素残留量的方法
CN103558300B (zh) 利用凝胶渗透色谱处理生物检材的安眠镇静类药物检验方法
CN107655990B (zh) 基于气质联用技术检测农田环境中西玛津残留量的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant