CN103430847A - 利用白芨块茎进行快速繁殖育苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供白芨的快速繁殖方法，经过育苗床的处理、外植体的选取与预处理、丛生芽体诱导、白芨苗根系培养、白芨分株培养、后期管理等步骤，获得白芨小苗，该方法非常适合工业化生产，配方效果佳，出芽率高，培养时间短，植株生长旺盛，移栽成活率高，可操作性强，应用价值高等优点，具有投入少，产出高的特点。
Description
技术领域
本发明涉及药用植物育苗工程领域，具体地说是一种充分利用白芨块茎上表皮组织快速诱导出小苗的繁殖育苗方法。
背景技术
我国的传统中草药已有数千年的历史，至今仍在我国和许多国家和地区广为使用。但由于传统的中草药获取方法是以采集和消耗大量的野生植物资源为代价的，当采集和消耗量超过自然资源的再生能力时，必然会导致物种的濒危甚至灭绝。同时随着自然生态环境的日益破坏，也进一步导致药用植物资源的匮乏。
白芨，又名白给、箬兰，为兰科白及属的一种，种拉丁名为Bletil1a striata。多年生草本，假鳞茎块根状，白色，肥厚，有指状分歧。茎粗壮，直立，高30-60厘米。叶3-6枚，披针形或广披针形，先端渐尖，基部鞘状抱茎。总状花序顶生，稀疏，有花3-8朵，花大而美丽，紫红色。花瓣3，唇瓣倒卵长圆形，深3裂，中裂片边缘有波状齿，侧裂片部分包覆蕊柱。萼片3，花瓣状。蒴果，圆柱状，上面，6纵棱突出。种子细小如尘埃。花期4月下旬-5月下旬，果熟期11月中、下旬。有变种白花白芨，花白色，园艺品种尚有蓝、黄、粉红等色。常用分株繁殖。春季新叶萌发前或秋冬地上部枯萎后，掘起老株，分割假鳞茎进行分植，每株可分3-5株，每株须带顶芽。亦可采用播种繁殖，但因种子细小，发育不全，需用培养基无菌接种，操作复杂，故罕用。
主要应用于咳血吐血，外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂。肺结核咳血，溃疡病出血。其球茎含白及胶质、淀粉、挥发油等。药用，有收效、补肺止血、消肿等作用，外敷治创伤出血、痈肿、烫伤、疔疮等。花美丽，栽培供观赏。从文献资料来看，目前主要以用白芨球茎繁殖，栽种在排水良好、肥沃的砂质壤土和腐植质壤土，需温暖较阴湿的环境。
公开号为CN101940158A的中国专利介绍了一种利用白芨种子快速繁殖小苗的方法，采用碘伏溶液浸泡消毒白芨种子，在智能气候箱中诱导丛生芽阶段，采用改良培养基，并合理调整发育温度，光照经过35-50天培育成的幼苗植入盛有基质的不锈钢盘或瓷盘中，再放入20-26℃室内炼苗，白芨幼苗生长3-4个月进入大田栽植。缩短幼苗成苗周期，提高了白芨幼苗在大田中的成活率，避免了原技术用氯化汞溶液消毒白芨种子时对人体造成危害。但是很多白芨种子发育不完全，基本上白芨种子不发芽，经济效益得不到有效提高，难以大规模推广该技术。
公开号为CN102283115A的中国专利介绍了一种快速繁殖白芨苗的方法：选择白芨成熟种子作为外植体。2)种子消毒后接种至萌发培养基，7天左右种子萌发，14天左右形成原球茎，切割原球茎，转接至原球茎增殖培养基。3)原球茎转接至丛生芽诱导及增殖培养基。4)切割丛生芽使其大量繁殖，等丛生芽长成高约3cm的小苗后转接至生根壮苗培养基，待苗长成高约7～10cm时移栽。解决了目前白芨无性繁殖存在的种苗携带病毒、品种退化、有效产量低等问题。本发明可在人工控制条件下获得大量有性繁殖的无病毒苗，与传统繁殖方式相比，产量提高约30％，对缓解白芨的市场供需矛盾有积极意义。采用该法能使白芨形成种植规模，但是其种植管理较难，种植时间也加长，并且组培苗的本身成本高，农民经济效益并不能得到有效提高，也难以大规模推广该技术。
公开号为CN102577814A的中国专利介绍了一种金银花与白芨高效套栽方法：将白芨套种在金银花等药材下面，用腐熟牲畜粪草覆盖白芨，通过施肥、除草、杀虫等工序的管理，经五年左右种植后收获。本生产方法利用同一块地同时生产出两种药材，提高了复种指数。节约用工成本，生产成本降低，产出增高，经济效益成倍提高。但由于树形金银花对白芨的采光有一定的影响，直接影响白芨对肥料和水分的利用。金银花采摘与白芨鳞球茎膨大期不同步，也会影响白芨鳞球茎膨大，直接影响药农的经济效益。
综上所述，采用白芨种子育苗时发芽率低很难大规模发展和降低种子苗的成本，而采用白芨进行组培，大大提升了组培苗的成本，很难使种植户接爱，并且很难实现提高农民的经济效益。也是文献资料报道过利用带芽白芨块茎进行分繁，将带有芽头的白芨块茎分开，而没有芽头的白芨小块茎跟随有芽头的白芨块茎，造成种植过程中其种子成本较高，而且没有芽头的白芨小块茎所占比例很大，并且在种植过程中很有可能死亡而浪费，但是每年采用这种方式只能使育苗提高6-8倍，会造成白芨不带芽块茎的浪费。因此，为了满足日益增大的药用需求，充分利用白芨各个小块茎，针对各个小块茎快速诱导出白芨芽体，有效提高繁殖系数，降低育苗的价格，避免了利用白芨种子繁殖出苗率极低，种子培育过程烦琐，生长速度慢，利用快繁技术，实现人工栽培是最好的解决方法。
迄今为止，在国内外尚未见关于针对白芨块茎进行药物诱导形成多个芽头的报道。我们通过大量试验，终于摸索出一套成熟的方法，成功实现了白芨的快速繁殖，可以快速培育出大量幼苗，为实现工业化人工栽培白芨提供可能。白芨块茎快繁技术方法的成功建立，可以为大规模人工栽培药用植物白芨提供种苗，为现代科技农业提供了一种切实可行的开发项目。
发明内容
本发明的目的是提供白芨的快速繁殖方法，该方法非常适合工业化生产，配方效果佳，出芽率高，培养时间短，植株生长旺盛，可操作性强，应用价值高等优点。具有投入少，产出高的特点。
本发明所述利用白芨块根进行快速繁殖育苗方法，其具体操作步骤如下：
(1)育苗床的处理：将泥沙土放在最低层，泥沙层高度为2-6cm，喷洒1％的多菌灵，在泥沙土上放入营养土，营养土层高度为5-8cm；
(2)外植体的选取与预处理：选用白芨的假鳞茎上芽体作为培养材料，将白芨块根去掉根须，再将白芨小块茎分别，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗10-30分钟后，置于75％酒精中处理10-30秒，切去外植体变色的部分后备用；
(3)丛生芽体诱导：将白芨小块茎在一面用刀划二到三下，深度达到1-3.5cm，加入育苗诱导液中处理1-10min，将白芨小块茎平放在育苗床上，用刀划过的地方朝上，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1000LX-1500LX，湿度控制在70-85％，培养15-35天；
(4)白芨苗根系培养：喷洒育苗培养液一周二次，每亩喷洒100kg，培养温度23-27℃，每天光照12-13小时，光照强度900LX-1300LX，湿度控制在70-85％，培养15-25天；
(5)白芨分株培养：将白芨小块茎取出，用刀将各个芽分开，放入草木灰中混合20-30min，移栽到富养土中，培养温度23-27℃，每天光照8-12小时，光照强度700-1000LX，湿度控制在55-80％，移栽20-30天，移栽成活率达到90％以上；
(6)后期管理：每年4月份左右移植大田后，6-9月份用两层遮阳网进行覆盖，并采用滴管方式进行补水，进入11月份后用地膜进行保温保水，到第二年3月份左右去除地膜，采用以上方式进行白芨栽培管理；若发生黑斑病，用70％甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒；若发生根结线虫病危害，用3％呋喃丹颗粒剂灌施盆土；若缺肥时在花后至8月中旬施1次磷肥。
在一个具体实施方案中，步骤(3)中所述的育苗诱导液含有0.1％-0.8％GA(赤霉素)、0.5％多菌灵、0.1％-2.5％6-苄氨基腺嘌呤。
在一个具体实施方案中，步骤(4)中所述的育苗培养液含有0.1％-1.5％NAA(奈乙酸)、0.5％多菌灵。
在另一个具体实施方案中，步骤(6)中大田湿度控制在40-70％；温度控制在10-30℃。
技术效果：
(1)直接以白芨块茎为培养材料，使得外植体取材较容易，一年四季均可取材，而且数量多，采用块茎为培养材料，既保证了遗传稳定性，同时避免了组织培养过程中培养代数的增加，分化出来的苗易出现变异的现象。
(2)本发明方法利用白芨块茎建立快速繁殖，增芽生根同步化这一技术路线，仅需50天左右形成完整植株，4-6个月内事获得大量完整植株，实现白芨的大规模工厂化育苗。
(3)本发明方法获得的白芨苗方法简单，而且大大降低了育苗成本。本培养方法出芽快，增殖率高，方法简单，不需要增加组培设备，生产成本低，可批量生产，应用价值高。
(4)白芨的生产可以在人为控制条件下进行，不受季节、气候条件与土壤等因素的制约，可排除病虫害的侵袭和农药残留的影响，严格控制白芨的质量。
(5)使用本发明提供的快繁技术得到白芨幼苗，进行人工栽培，移栽成活率比组培苗要高，更能快速适应自然环境。
(6)可以保存白芨的种质资源，同时有利于保护白芨野生资源，减少对自然资源的破坏。
具体实施方式
下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。
实施例1
(1)育苗床的处理：将泥沙放在最低层，泥沙层高度为4cm，喷酒1％的多菌灵，，在泥沙土上放入营养土，营养土层高度为6cm。
(2)外植体的选取与预处理：选用白芨的假鳞茎上芽体作为培养材料，将白芨块根去掉根须，再将白芨小块茎分别，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗20分钟后，置于75％酒精中处理30秒，切去外植体变色的部分后备用。
(3)丛生芽体诱导：将白芨小块茎在一面用刀划二到三下，深度达到1-3.5cm，加入育苗诱导液中处理8min，其中含有0.4％赤霉素、0.5％多菌灵、0.8％6-苄氨基腺嘌呤。将白芨小块茎平放在育苗床上，用刀划过的地方朝上，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1200LX，湿度控制在70-85％，培养20天。
(4)白芨苗根系培养：喷洒育苗培养液，其中含有1.0％NAA(奈乙酸)、0.5％多菌灵，一周喷洒二次，每亩喷洒100kg，培养温度23-27℃，每天光照12小时，光照强度1000LX，湿度控制在70-85％，培养18天。
(5)白芨分株培养：将白芨小块茎取出，用刀将各个芽分开，但不损伤与芽相联的根系，放入草木灰中混合20min，移栽到富养土中，培养温度23-27℃，每天光照8-12小时，光照强度900LX，湿度控制在70％，移栽25天，移栽成活率达到90％以上。
(6)后期管理：每年4月份左右移植大田后，6-9月份用两层遮阳网进行覆盖，并采用滴管方式进行补水，进入11月份后用地膜进行保温保水，大田湿度控制在60％；温度控制在25℃。到第二年3月份左右去除地膜，采用以上方式进行白芨栽培管理；若发生黑斑病，用70％甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒；若发生根结线虫病危害，用3％呋喃丹颗粒剂灌施盆土；若缺肥时在花后至8月中旬施1次磷肥。
实施例2
(1)育苗床的处理：将泥沙放在最低层，泥沙层高度为6cm，喷酒1％的多菌灵，，在泥沙土上放入营养土，营养土层高度为8cm。
(2)外植体的选取与预处理：选用白芨的假鳞茎上芽体作为培养材料，将白芨块根去掉根须，再将白芨小块茎分别，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗30分钟后，置于75％酒精中处理30秒，切去外植体变色的部分后备用。
(3)丛生芽体诱导：将白芨小块茎在一面用刀划二到三下，深度达到1-3.5cm，加入育苗诱导液中处理10min，其中含有0.5％赤霉素、0.5％多菌灵、1.5％6-苄氨基腺嘌呤。将白芨小块茎平放在育苗床上，用刀划过的地方朝上，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1200LX，湿度控制在70-85％，培养25天。
(4)白芨苗根系培养：喷洒育苗培养液，其中含有1.5％奈乙酸、0.5％多菌灵，一周喷洒二次，每亩喷洒100kg，培养温度23-27℃，每天光照12-13小时，光照强度1200LX，湿度控制在75％，培养15天。
(5)白芨分株培养：将白芨小块茎取出，用刀将各个芽分开，但不损伤与芽相联的根系，放入草木灰中混合30min，移栽到富养土中，培养温度23-27℃，每天光照12小时，光照虽度1000LX，湿度控制在55-80％，移栽30天，移栽成活率达到90％以上。
(6)后期管理：每年4月份左右移植大田后，6-9月份用两层遮阳网进行覆盖，并采用滴管方式进行补水，进入11月份后用地膜进行保温保水，大田湿度控制在40-70％；温度控制在20℃。到第二年3月份左右去除地膜，采用以上方式进行白芨栽培管理；若发生黑斑病，用70％甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒；若发生根结线虫病危害，用3％呋喃丹颗粒剂灌施盆土；若缺肥时在花后至8月中旬施1次磷肥。
实施例3
(1)育苗床的处理：将泥沙放在最低层，泥沙层高度为4cm，喷酒1％的多菌灵，，在泥沙土上放入营养土，营养土层高度为7cm。
(2)外植体的选取与预处理：选用白芨的假鳞茎上芽体作为培养材料，将白芨块根去掉根须，再将白芨小块茎分别，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗15分钟后，置于75％酒精中处理25秒，切去外植体变色的部分后备用。
(3)丛生芽体诱导：将白芨小块茎在一面用刀划二到三下，深度达到1-3.5cm，加入育苗诱导液中处理10min，其中含有0.5％GA(赤霉素)、0.5％多菌灵、1.2％6-苄氨基腺嘌呤。将白芨小块茎平放在育苗床上，用刀划过的地方朝上，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1300LX，湿度控制在85％，培养20天。
(4)白芨苗根系培养：喷洒育苗培养液，其中含有1.5％NAA(奈乙酸)、0.5％多菌灵，一周喷洒二次，每亩喷洒100kg，培养温度23-27℃，每天光照12小时，光照强度1000LX，湿度控制在70-85％，培养25天。
(5)白芨分株培养：将白芨小块茎取出，用刀将各个芽分开，但不损伤与芽相联的根系，放入草木灰中混合30min，移栽到富养土中，培养温度23-27℃，每天光照12小时，光照强度1000LX，湿度控制在80％，移栽30天，移栽成活率达到90％以上。
(6)后期管理：每年4月份左右移植大田后，6-9月份用两层遮阳网进行覆盖，并采用滴管方式进行补水，进入11月份后用地膜进行保温保水，大田湿度控制在40-70％；温度控制在10-30℃。到第二年3月份左右去除地膜，采用以上方式进行白芨栽培管理；若发生黑斑病，用70％甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒；若发生根结线虫病危害，用3％呋喃丹颗粒剂灌施盆土；若缺肥时在花后至8月中旬施1次磷肥。
Claims (4)
1.本发明所述利用白芨块根进行快速繁殖育苗方法，其具体操作步骤如下：
(1)育苗床的处理：将泥沙土放在最低层，泥沙层高度为2-6cm，喷酒1％的多菌灵，在泥沙土上放入营养土，营养土层高度为5-8cm；
(2)外植体的选取与预处理：选用白芨的假鳞茎上芽体作为培养材料，将白芨块根去掉根须，再将白芨小块茎分别，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗10-30分钟后，置于75％酒精中处理10-30秒，切去外植体变色的部分后备用；
(3)丛生芽体诱导：将白芨小块茎在一面用刀划二到三下，深度达到1-3.5cm，加入育苗诱导液中处理1-10min，将白芨小块茎平放在育苗床上，用刀划过的地方朝上，培养温度23-27℃，每天光照16小时，光照强度1000LX-1500LX，湿度控制在70-85％，培养15-35天；
(4)白芨苗根系培养：喷洒育苗培养液一周二次，每亩喷洒100kg，培养温度23-27℃，每天光照12-13小时，光照强度900LX-1300LX，湿度控制在70-85％，培养15-25天；
(5)白芨分株培养：将白芨小块茎取出，用刀将各个芽分开，放入草木灰中混合20-30min，移栽到富养土中，培养温度23-27℃，每天光照8-12小时，光照强度700-1000LX，湿度控制在55-80％，移栽20-30天，移栽成活率达到90％以上；
(6)后期管理：每年4月份左右移植大田后，6-9月份用两层遮阳网进行覆盖，并采用滴管方式进行补水，进入11月份后用地膜进行保温保水，到第二年3月份左右去除地膜，采用以上方式进行白芨苗栽培管理；若发生黑斑病，用70％甲基托布津湿性粉剂1000倍液喷洒；若发生根结线虫病危害，用3％呋喃丹颗粒剂灌施盆土；若缺肥时在花后至8月中旬施1次磷肥。
2.根据权利要求1的方法，步骤(3)中所述的育苗诱导液含有0.1％-0.8％赤霉素、0.5％多菌灵、0.1％-2.5％6-苄氨基腺嘌呤。
3.根据权利要求1的方法，步骤(4)中所述的育苗培养液含有0.1％-1.5％奈乙酸、0.5％多菌灵。
4.根据权利要求1的方法，步骤(6)中大田湿度控制在4070％；温度控制在10-30℃。
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