CN102668981A - 蜘蛛香繁育方法 - Google Patents

Abstract

一种蜘蛛香繁育方法，其特征在于通过组织培养繁育或种子繁育后移栽大田栽种；组织培养繁育育苗包括：无菌系的建立，采用培养基作愈伤培养、增殖培养和生根培养，炼苗和驯化苗的处理，栽种后苗床及幼苗防病措施；种子繁育育苗包括：种子采集时间、打破休眠期、诱导芽胞分化和苗期防病虫害措施；本发明重点解决了蜘蛛香繁育产业化的问题，为种植提供了可靠保障，有效地保护了濒危物种，特别是在拯救濒危药材领域有显著进步。

Description

蜘蛛香繁育方法

技术领域

本发明涉及一种濒危药材蜘蛛香的繁育方法。

背景技术

蜘蛛香（Valeriana jatamansi Jones)为败酱科，心叶缬草植物的根茎，别名：马蹄香、臭狗药、连香草、养血莲，乌参等，根茎入药。具有：理气止痛、消食化气、健胃止泻、祛风除湿、镇静安神等功效。用于脘腹胀痛、腹泻菌痢、消化不良、风湿痹痛、失眠等，是载入药典的云南地产药材。

主要分布在云南、贵州、广西、四川等省区，生长于海拔1800—2800米的山谷林中及沟边草丛中，喜阴湿肥沃土壤。由于生长环境特殊，产区局限性大，长期无限制采挖，丧失了休养生机，野生资源再生能力急剧下降，从而导致蜘蛛香种群数量逐渐减少，以被列入秦巴山区重点名录和中国高等植物濒危及受威胁物种名录，现已被我国列为国家级重点保护植物。

蜘蛛香生物学特点为：开花少、结果少、而且花落籽落，花开～花落间隔十分短暂，掌握不好时机，很难收集到真正发育成熟的种子。未成熟种子胚仍处于原胚阶段，胚的各部器官尚未分化，不能用作繁育基材。成熟的蜘蛛香种子，种皮比较特殊，细胞层数较多，而且各层细胞的细胞壁木质化程度较高，内侧细胞细小，排列紧密，由于外皮质地坚硬，不经特殊处理，芽胚很难萌发，故此有关蜘蛛香野生转家种繁育技术尚未见报道。

发明内容

本发明目的在于提出一种蜘蛛香繁育方法，本发明重点解决了蜘蛛香繁育产业化的问题，为种植提供了可靠保障，在保障供给的同时，有效地保护了濒危物种，特别是在拯救濒危药材领域有显著进步。本发明的技术方案如下：

一种蜘蛛香繁育方法，其特征在于采用组织培养繁育育苗后移栽大田，步骤如下：

（1）、采集发育良好的蜘蛛香嫩芽茎段或顶芽作外植体；

（2）、将蜘蛛香外植体剥去外皮老叶、冲洗后，放入70%酒精中浸泡30～60秒消毒10分钟，取出后冲洗3～4次；

（3）、在无菌净化工作台上将外植体切成1～3mm小块后接种在装有愈伤组织培养基中培养7天后转接到诱导分化培养基中，所述的愈伤组织培养基由基本培养基MS加入蔗糖3%和琼脂0.6%构成，调节愈伤组织培养基pH6.0，培养室温度25～27℃，光照度2000～3000Lx，每天光照时间10～14h；

     （4）、诱导生长：在基本培养基MS加入6～BA 2.0mg/L、IBA 0.2mg/L和LH800mg/L的诱导分化培养基中，7天芽孢开始萌动，15～20天分化出小芽，待小芽长到1～1.5cm时，切取芽茎段和愈伤组织，无菌环境下，接种到增殖培养基内；

     （5）、增殖及壮苗培养：在基本培养基MS中加入6～BA 1.5mg/L、KT 0.5mg/L、IBA 0.2mg/L构成的增殖壮苗培养基中，10～15天形成芽丛，15～20天分化出芽苗，继代培养一次；

     （6）、生根培养与驯化：取1/2基本培养基加入MS+2mg/L NAA为生根培养基，将芽苗转接到生根培养基中，30～35天之后产生数条根丛，打开瓶盖，炼苗3～4天之后取出洗净培养基即是组培苗；驯化是将组培苗放在50%多菌灵1000倍溶液中浸泡10分钟，于18～22℃温度下移栽入沙和腐殖土按1:1重量比例配制的育苗床上，浇透水后用50%多菌灵1000倍溶液喷施杀菌，隔日再喷施一次，15～20天长出新叶及新根；

    （7）、栽种：取蜘蛛香的组培苗，5月中旬～6月上旬根据幼苗生长情况进行移栽，株距5～8cm，行距15～20cm，栽植深度3～5cm，定植后覆土加压，每亩栽种1～1.2万株，苗期6月及8月及时除草，生长期用腐熟粪水浇灌1-2次，栽种2年，在当年12～次年1月采收。

一种蜘蛛香繁育方法，其特征在于采用蜘蛛香种子繁育育苗后移栽大田，步骤如下：

     （1）、种子采集：3月下旬到4月下旬每日上午收集落花后的花序，连同花序一并剪下，晒至七成干收集籽种得蜘蛛香种子；

     （2）、种子处理：取上一步骤取得的当年鲜种，用0.5mg/L赤霉酸GA3浸泡4～8小时，浸泡后，过滤，稍加晾晒至松散，按1:10重量比例拌入细沙；

    （3）、将处理好的种子，均匀撒播在苗床上，覆盖0.5cm细土，喷淋透水，保持大棚内湿度大于60%，温度控制在20～25℃之间；

（4）、播种：播种后7～10天开始发芽出苗，保持湿度和温度，出苗后，喷施自配叶面肥和50%多菌灵1000倍溶液：每隔10天喷施一次，共喷2～3次，所述的叶面肥中N、P、K按1:0.5:0.3重量比例配制；经45～50天，当苗高3～4cm，移栽至大田。

具体实施方式

蜘蛛香繁育方法，通过组织培养繁育或种子繁育后移栽大田栽种。

1、蜘蛛香组织培养繁育育苗包括：无菌系的建立，采用培养基作愈伤培养、增殖培养和生根培养，炼苗和驯化苗的处理，栽种后苗床及幼苗防病措施。具体步骤如下：

     1.1、外植体的采集：取发育良好的蜘蛛香嫩芽茎段或顶芽作外植体。

 1.2、消毒：取蜘蛛香外植体，经流水冲洗剥去外皮老叶、小心割取幼芽，蒸馏水冲洗后立即放入消毒器皿中，在70%酒精中浸泡30～60秒，再将材料移入0.1%升汞水中消毒10分钟，取出后用无菌水冲洗3～4次，完成蜘蛛香培养基材的消毒。

 1.3、接种：在无菌的超净化工作台上将外植体材料上的水分吸干之后，用经消毒的接种刀片切成1～3mm小块，然后接种在装有愈伤组织培养基的250mL三角烧瓶中，每瓶接种10～15个外植体，用消毒后菌种膜塞口，在无菌室中培养7天。基本培养基为MS，愈伤组织培养基：MS+蔗糖3%和琼脂0.6%，pH6.0，培养室温度（26±1）℃，光照度2000～3000Lx，每天光照时间10～14h。

  1.4、诱导生长：外植体材料置于基本培养基MS加入6～BA 2.0mg/L、IBA 0.2mg/L和LH800mg/L构成的诱导分化培养基中，7天芽孢开始萌动，随着生长，茎基部膨大，逐渐分化出3～4个小芽，15～20天形成疏松的愈伤组织，分化出小芽，待小芽长到1～1.5cm时，切取芽茎段和愈伤组织，无菌环境下，接种到增殖壮苗培养基内。

 1.5、增殖及壮苗培养：小芽在基本培养基MS中加入6～BA 1.5mg/L、KT 0.5mg/L、IBA 0.2mg/L构成的增殖壮苗培养基中，10～15天左右形成丛芽，15～20天分化出芽苗，继代培养一次。

  1.6、生根培养与驯化：取1/2基本培养基加入MS+2mg/L NAA为生根培养基，将培养的芽苗转接到生根培养基中，30～35天之后产生数条根丛，株高达2.5～3cm，阴凉通风处打开瓶盖，炼苗3～4天之后取出洗净培养基即组培苗，驯化是将组培苗放在50%多菌灵1000倍溶液中浸泡10分钟，于18～22℃温度下移入沙和腐殖土按1:1重量比例配制的育苗床上，浇透水后喷施50%多菌灵1000倍溶液，隔日再喷一次以利杀菌，保持湿度±75%，15～20天当长出新叶及新根,可进行大田移栽，成活率80～85%。

2、蜘蛛香种子繁育育苗包括：种子采集时间、打破休眠期、诱导芽胞分化和苗期防病虫害措施。步骤如下：

     2.1、种子采集：3月下旬到4月下旬每日上午10点钟以前、选择开败花的花序（花序茎梗变暗），连同花序一并剪下，以免种子随风飘散。将剪下的花序置避风处晾干，去除花梗等杂质后，趁鲜摘除枝干，晒至七成干，收集子种及时育苗。

  2.2、种子处理：蜘蛛香种子，暴晒或隔年的极易失活，降低发芽率；因而应取当年鲜种装入纱布袋内，用0.5mg/L赤霉酸GA3，浸泡4～8小时，以利于打破休眠期，促进细胞分裂，诱导芽的分化，促进侧芽萌发生长，延缓衰老。浸泡后，过滤出水，稍加晾晒至松散，按1:10重量比例拌入细沙。

  2.3、苗圃地整理：大棚内，深翻、耙细，每亩施100kg复合肥加100kg腐熟基肥，二次深翻，耙平，作育苗床。

  2.4、播种：将处理好的种子，均匀撒播在苗床上，覆盖0.5cm细土，喷淋透水，保持大棚内湿度大于60%，温度控制在20～25℃之间。

  2.5、管理：播种后7～10天开始发芽出苗，保持湿度和温度，随时清除杂草，出苗后，喷施自配叶面肥和50%多菌灵1000倍液。每隔10天喷施一次，共喷2～3次；叶面肥中N、P、K按1:0.5:0.3重量比例配制，经45～50天，当苗高3～4cm，即可移栽至大田。

3、蜘蛛香栽培：

     3.1、选地，整地：蜘蛛香喜湿润肥沃土壤，为较丛根性植物，根系十分发达。因此，选取避荫、背风的缓坡或者平地，选择土层肥沃、疏松、排灌方便和富含腐殖质的山地夹沙土壤，每亩施腐熟农家肥2000kg和普钙100kg，深翻、耙细，打成1.5m宽墒，挖好排水沟。

 3.2、栽种：取蜘蛛香的组培苗或有性繁育苗，5月中旬～6月上旬根据幼苗生长情况进行移栽，株距5～8cm，行距15～20cm，栽植深度3-5cm左右，定植后覆细土加压，每亩栽种1～1.2万株，苗期加强水肥管理。6月及8月及时除草，生长期用腐熟粪水浇灌1-2次，栽种2年，12月～1月采收。

 3.3、病虫害防治:菌核病、根腐病、地老虎和蛴螬等，是幼苗期常见的病虫害，其防治方法分别为：①菌核病的防治方法：及时挖去病株，松土，提高土壤通气，采用50%多菌灵1000倍液喷雾，每10天1次，连续2～3次；②地老虎、蛴螬的防治方法：铲除周边杂草，用自配生物农药，每亩1～2.5Kg配水喷施，或者用25g氯丹乳油拌炒香的麦麸5kg，加适量水配成毒饵，于傍晚撒于田间或洼面诱杀。

3.4、采收加工：人工栽培的蜘蛛香在当年12～次年1月采收质量好，产量高，采挖后，去净泥土，须根与根茎分开，晾晒至干；或者每10株为一小捆，用绳扭结成辫或小捆，挂在通风处晒干，忌水洗。

Claims (2)

1.一种蜘蛛香繁育方法，其特征在于采用组织培养繁育育苗后移栽大田，步骤如下：

（1）、采集发育良好的蜘蛛香嫩芽茎段或顶芽作外植体；

（2）、将蜘蛛香外植体剥去外皮老叶、冲洗后，放入70%酒精中浸泡30～60秒消毒10分钟，取出后冲洗3～4次；

（3）、在无菌净化工作台上将外植体切成1～3mm小块后接种在装有愈伤组织培养基中培养7天后转接到诱导分化培养基中，所述的愈伤组织培养基由基本培养基MS加入蔗糖3%和琼脂0.6%构成，调节愈伤组织培养基pH6.0，培养室温度25～27℃，光照度2000～3000Lx，每天光照时间10～14h；

（4）、诱导生长：在基本培养基MS加入6～BA 2.0mg/L、IBA 0.2mg/L和LH800mg/L的诱导分化培养基中，7天芽孢开始萌动，15～20天分化出小芽，待小芽长到1～1.5cm时，切取芽茎段和愈伤组织，无菌环境下，接种到增殖培养基内；

 （5）、增殖及壮苗培养：在基本培养基MS中加入6～BA 1.5mg/L、KT 0.5mg/L、IBA 0.2mg/L构成的增殖壮苗培养基中，10～15天形成芽丛，15～20天分化出芽苗，继代培养一次；

 （6）、生根培养与驯化：取1/2基本培养基加入MS+2mg/L NAA为生根培养基，将芽苗转接到生根培养基中，30～35天之后产生数条根丛，打开瓶盖，炼苗3～4天之后取出洗净培养基即是组培苗；驯化是将组培苗放在50%多菌灵1000倍溶液中浸泡10分钟，于18～22℃温度下移栽入沙和腐殖土按1:1重量比例配制的育苗床上，浇透水后用50%多菌灵1000倍溶液喷施杀菌，隔日再喷施一次，15～20天长出新叶及新根；

 （7）、栽种：取蜘蛛香的组培苗，5月中旬～6月上旬根据幼苗生长情况进行移栽，株距5～8cm，行距15～20cm，栽植深度3～5cm，定植后覆土加压，每亩栽种1～1.2万株，苗期6月及8月及时除草，生长期用腐熟粪水浇灌1-2次，栽种2年，在当年12～次年1月采收。

2.一种蜘蛛香繁育方法，其特征在于采用蜘蛛香种子繁育育苗后移栽大田，步骤如下：

     （1）、种子采集：3月下旬到4月下旬每日上午收集落花后的花序，连同花序一并剪下，晒至七成干收集籽种得蜘蛛香种子；

     （2）、种子处理：取上一步骤取得的当年鲜种，用0.5mg/L赤霉酸GA3浸泡4～8小时，浸泡后，过滤，稍加晾晒至松散，按1:10重量比例拌入细沙；

    （3）、将处理好的种子，均匀撒播在苗床上，覆盖0.5cm细土，喷淋透水，保持大棚内湿度大于60%，温度控制在20～25℃之间；

（4）、播种：播种后7～10天开始发芽出苗，保持湿度和温度，出苗后，喷施自配叶面肥和50%多菌灵1000倍溶液：每隔10天喷施一次，共喷2～3次，所述的叶面肥中N、P、K按1:0.5:0.3重量比例配制；经45～50天，当苗高3～4cm，移栽至大田。