蜘蛛香繁育方法
技术领域
本发明涉及一种濒危药材蜘蛛香的繁育方法。
背景技术
蜘蛛香(Valeriana jatamansi Jones)为败酱科,心叶缬草植物的根茎,别名:马蹄香、臭狗药、连香草、养血莲,乌参等,根茎入药。具有:理气止痛、消食化气、健胃止泻、祛风除湿、镇静安神等功效。用于脘腹胀痛、腹泻菌痢、消化不良、风湿痹痛、失眠等,是载入药典的云南地产药材。
主要分布在云南、贵州、广西、四川等省区,生长于海拔1800—2800米的山谷林中及沟边草丛中,喜阴湿肥沃土壤。由于生长环境特殊,产区局限性大,长期无限制采挖,丧失了休养生机,野生资源再生能力急剧下降,从而导致蜘蛛香种群数量逐渐减少,以被列入秦巴山区重点名录和中国高等植物濒危及受威胁物种名录,现已被我国列为国家级重点保护植物。
蜘蛛香生物学特点为:开花少、结果少、而且花落籽落,花开~花落间隔十分短暂,掌握不好时机,很难收集到真正发育成熟的种子。未成熟种子胚仍处于原胚阶段,胚的各部器官尚未分化,不能用作繁育基材。成熟的蜘蛛香种子,种皮比较特殊,细胞层数较多,而且各层细胞的细胞壁木质化程度较高,内侧细胞细小,排列紧密,由于外皮质地坚硬,不经特殊处理,芽胚很难萌发,故此有关蜘蛛香野生转家种繁育技术尚未见报道。
发明内容
本发明目的在于提出一种蜘蛛香繁育方法,本发明重点解决了蜘蛛香繁育产业化的问题,为种植提供了可靠保障,在保障供给的同时,有效地保护了濒危物种,特别是在拯救濒危药材领域有显著进步。本发明的技术方案如下:
一种蜘蛛香繁育方法,其特征在于采用组织培养繁育育苗后移栽大田,步骤如下:
(1)、采集发育良好的蜘蛛香嫩芽茎段或顶芽作外植体;
(2)、将蜘蛛香外植体剥去外皮老叶、冲洗后,放入70%酒精中浸泡30~60秒消毒10分钟,取出后冲洗3~4次;
(3)、在无菌净化工作台上将外植体切成1~3mm小块后接种在装有愈伤组织培养基中培养7天后转接到诱导分化培养基中,所述的愈伤组织培养基由基本培养基MS加入蔗糖3%和琼脂0.6%构成,调节愈伤组织培养基pH6.0,培养室温度25~27℃,光照度2000~3000Lx,每天光照时间10~14h;
(4)、诱导生长:在基本培养基MS加入6~BA 2.0mg/L、IBA 0.2mg/L和LH800mg/L的诱导分化培养基中,7天芽孢开始萌动,15~20天分化出小芽,待小芽长到1~1.5cm时,切取芽茎段和愈伤组织,无菌环境下,接种到增殖培养基内;
(5)、增殖及壮苗培养:在基本培养基MS中加入6~BA 1.5mg/L、KT 0.5mg/L、IBA 0.2mg/L构成的增殖壮苗培养基中,10~15天形成芽丛,15~20天分化出芽苗,继代培养一次;
(6)、生根培养与驯化:取1/2基本培养基加入MS+2mg/L NAA为生根培养基,将芽苗转接到生根培养基中,30~35天之后产生数条根丛,打开瓶盖,炼苗3~4天之后取出洗净培养基即是组培苗;驯化是将组培苗放在50%多菌灵1000倍溶液中浸泡10分钟,于18~22℃温度下移栽入沙和腐殖土按1:1重量比例配制的育苗床上,浇透水后用50%多菌灵1000倍溶液喷施杀菌,隔日再喷施一次,15~20天长出新叶及新根;
(7)、栽种:取蜘蛛香的组培苗,5月中旬~6月上旬根据幼苗生长情况进行移栽,株距5~8cm,行距15~20cm,栽植深度3~5cm,定植后覆土加压,每亩栽种1~1.2万株,苗期6月及8月及时除草,生长期用腐熟粪水浇灌1-2次,栽种2年,在当年12~次年1月采收。
一种蜘蛛香繁育方法,其特征在于采用蜘蛛香种子繁育育苗后移栽大田,步骤如下:
(1)、种子采集:3月下旬到4月下旬每日上午收集落花后的花序,连同花序一并剪下,晒至七成干收集籽种得蜘蛛香种子;
(2)、种子处理:取上一步骤取得的当年鲜种,用0.5mg/L赤霉酸GA3浸泡4~8小时,浸泡后,过滤,稍加晾晒至松散,按1:10重量比例拌入细沙;
(3)、将处理好的种子,均匀撒播在苗床上,覆盖0.5cm细土,喷淋透水,保持大棚内湿度大于60%,温度控制在20~25℃之间;
(4)、播种:播种后7~10天开始发芽出苗,保持湿度和温度,出苗后,喷施自配叶面肥和50%多菌灵1000倍溶液:每隔10天喷施一次,共喷2~3次,所述的叶面肥中N、P、K按1:0.5:0.3重量比例配制;经45~50天,当苗高3~4cm,移栽至大田。
具体实施方式
蜘蛛香繁育方法,通过组织培养繁育或种子繁育后移栽大田栽种。
1、蜘蛛香组织培养繁育育苗包括:无菌系的建立,采用培养基作愈伤培养、增殖培养和生根培养,炼苗和驯化苗的处理,栽种后苗床及幼苗防病措施。具体步骤如下:
1.1、外植体的采集:取发育良好的蜘蛛香嫩芽茎段或顶芽作外植体。
1.2、消毒:取蜘蛛香外植体,经流水冲洗剥去外皮老叶、小心割取幼芽,蒸馏水冲洗后立即放入消毒器皿中,在70%酒精中浸泡30~60秒,再将材料移入0.1%升汞水中消毒10分钟,取出后用无菌水冲洗3~4次,完成蜘蛛香培养基材的消毒。
1.3、接种:在无菌的超净化工作台上将外植体材料上的水分吸干之后,用经消毒的接种刀片切成1~3mm小块,然后接种在装有愈伤组织培养基的250mL三角烧瓶中,每瓶接种10~15个外植体,用消毒后菌种膜塞口,在无菌室中培养7天。基本培养基为MS,愈伤组织培养基:MS+蔗糖3%和琼脂0.6%,pH6.0,培养室温度(26±1)℃,光照度2000~3000Lx,每天光照时间10~14h。
1.4、诱导生长:外植体材料置于基本培养基MS加入6~BA 2.0mg/L、IBA 0.2mg/L和LH800mg/L构成的诱导分化培养基中,7天芽孢开始萌动,随着生长,茎基部膨大,逐渐分化出3~4个小芽,15~20天形成疏松的愈伤组织,分化出小芽,待小芽长到1~1.5cm时,切取芽茎段和愈伤组织,无菌环境下,接种到增殖壮苗培养基内。
1.5、增殖及壮苗培养:小芽在基本培养基MS中加入6~BA 1.5mg/L、KT 0.5mg/L、IBA 0.2mg/L构成的增殖壮苗培养基中,10~15天左右形成丛芽,15~20天分化出芽苗,继代培养一次。
1.6、生根培养与驯化:取1/2基本培养基加入MS+2mg/L NAA为生根培养基,将培养的芽苗转接到生根培养基中,30~35天之后产生数条根丛,株高达2.5~3cm,阴凉通风处打开瓶盖,炼苗3~4天之后取出洗净培养基即组培苗,驯化是将组培苗放在50%多菌灵1000倍溶液中浸泡10分钟,于18~22℃温度下移入沙和腐殖土按1:1重量比例配制的育苗床上,浇透水后喷施50%多菌灵1000倍溶液,隔日再喷一次以利杀菌,保持湿度±75%,15~20天当长出新叶及新根,可进行大田移栽,成活率80~85%。
2、蜘蛛香种子繁育育苗包括:种子采集时间、打破休眠期、诱导芽胞分化和苗期防病虫害措施。步骤如下:
2.1、种子采集:3月下旬到4月下旬每日上午10点钟以前、选择开败花的花序(花序茎梗变暗),连同花序一并剪下,以免种子随风飘散。将剪下的花序置避风处晾干,去除花梗等杂质后,趁鲜摘除枝干,晒至七成干,收集子种及时育苗。
2.2、种子处理:蜘蛛香种子,暴晒或隔年的极易失活,降低发芽率;因而应取当年鲜种装入纱布袋内,用0.5mg/L赤霉酸GA3,浸泡4~8小时,以利于打破休眠期,促进细胞分裂,诱导芽的分化,促进侧芽萌发生长,延缓衰老。浸泡后,过滤出水,稍加晾晒至松散,按1:10重量比例拌入细沙。
2.3、苗圃地整理:大棚内,深翻、耙细,每亩施100kg复合肥加100kg腐熟基肥,二次深翻,耙平,作育苗床。
2.4、播种:将处理好的种子,均匀撒播在苗床上,覆盖0.5cm细土,喷淋透水,保持大棚内湿度大于60%,温度控制在20~25℃之间。
2.5、管理:播种后7~10天开始发芽出苗,保持湿度和温度,随时清除杂草,出苗后,喷施自配叶面肥和50%多菌灵1000倍液。每隔10天喷施一次,共喷2~3次;叶面肥中N、P、K按1:0.5:0.3重量比例配制,经45~50天,当苗高3~4cm,即可移栽至大田。
3、蜘蛛香栽培:
3.1、选地,整地:蜘蛛香喜湿润肥沃土壤,为较丛根性植物,根系十分发达。因此,选取避荫、背风的缓坡或者平地,选择土层肥沃、疏松、排灌方便和富含腐殖质的山地夹沙土壤,每亩施腐熟农家肥2000kg和普钙100kg,深翻、耙细,打成1.5m宽墒,挖好排水沟。
3.2、栽种:取蜘蛛香的组培苗或有性繁育苗,5月中旬~6月上旬根据幼苗生长情况进行移栽,株距5~8cm,行距15~20cm,栽植深度3-5cm左右,定植后覆细土加压,每亩栽种1~1.2万株,苗期加强水肥管理。6月及8月及时除草,生长期用腐熟粪水浇灌1-2次,栽种2年,12月~1月采收。
3.3、病虫害防治:菌核病、根腐病、地老虎和蛴螬等,是幼苗期常见的病虫害,其防治方法分别为:①菌核病的防治方法:及时挖去病株,松土,提高土壤通气,采用50%多菌灵1000倍液喷雾,每10天1次,连续2~3次;②地老虎、蛴螬的防治方法:铲除周边杂草,用自配生物农药,每亩1~2.5Kg配水喷施,或者用25g氯丹乳油拌炒香的麦麸5kg,加适量水配成毒饵,于傍晚撒于田间或洼面诱杀。
3.4、采收加工:人工栽培的蜘蛛香在当年12~次年1月采收质量好,产量高,采挖后,去净泥土,须根与根茎分开,晾晒至干;或者每10株为一小捆,用绳扭结成辫或小捆,挂在通风处晒干,忌水洗。