CN103417961A

CN103417961A - Prdx2和/或prdx6的新用途

Info

Publication number: CN103417961A
Application number: CN2012101623405A
Authority: CN
Inventors: 李建远
Original assignee: 李建远
Current assignee: YANTAI JUJIE BIOLOGICAL ENGINEERING CO., LTD.
Priority date: 2012-05-23
Filing date: 2012-05-23
Publication date: 2013-12-04
Anticipated expiration: 2032-05-23
Also published as: CN103417961B

Abstract

本发明涉及PRDX2和/或PRDX6的新用途。具体地，本发明公开了PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白的新用途，用于制备治疗或预防因活性氧(ROS)增高引起的损伤、衰老或疾病的药物组合物。本发明还提供了一种以PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白为活性成分的药物组合物、食品组合物或化妆品组合物。

Description

PRDX2和/或PRDX6的新用途

技术领域

本发明涉及生物技术和医学领域，具体地，本发明涉及PRDX2和/或PRDX6的新用途，更具体地，涉及PRDX2和/或PRDX6在治疗或预防因ROS增高引起的相关疾病、衰老或损伤中的应用。

背景技术

细胞使用氧气时会产生自由基，如活性氧自由基(reactive oxygenspecies,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)。在我们体内，每一个细胞一天要产生2.5×10¹¹个分子的ROS，人体内每天可产生40×10²¹个分子的自由基。它们不仅为我们提供和传递为维持生命活动的能量，帮助我们消灭细菌和病原体，清除体内的毒素和“垃圾”。它们还是我们体内多种代谢和信号通路的启动者和调节者，如JNK/SAPK、P38MAPK、IKK/NF-KB、P13K、Akt、CD40/CD40L、PKC等；激活和调控各种转录因子(如AP-1、Nrf2、NF-KB、p53、ATF-1、HIF、HSP、SIFT-1、MST/FOXO等)，影响体内各种基因的转录和表达，参与体内炎症、免疫、生殖、发育、代谢、细胞生长、增殖、细胞再生、修复等各种重要生命过程的调节，为我们促进和维护细胞、组织和机体的新陈代谢、维护和保证正常生命活动。

人体自由基的产生有两方面：一是人体内各种代谢反应产生的，二是环境中的高温、辐射、光解、化学物质等导致共价键均裂产生的外源性自由基，如吸烟、喝酒、环境污染、药物、疾病等。

我们体内还有强大的抗氧化系统，如超氧化歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）等等，可以及时快速清除体内过剩的ROS。在正常生理条件下，体内氧化和抗氧化系统保持动态平衡，既保证正常氧化应激反应，又防止ROS对人体的危害。只有在ROS生成过盛，抗氧化酶表达不足，氧化和抗氧化平衡失调，ROS不能及时清除，并在体内大量积蓄，才会引起细胞和组织的损伤（即氧化应激），危害人体的健康。

ROS能直接或间接氧化或损伤DNA、蛋白质和脂质，可诱发基因的突变、蛋白质变性和脂质过氧化，被认为是人体衰老和各种重要疾病最主要的危险因子，如不育、白内障、肿瘤、心脑血管疾病、老年痴呆/神经退行性疾病（如阿尔兹海默症、帕金森病等）、糖尿病、炎症（如骨关节炎、风湿性关节炎、支气管炎等）、感染、心肌缺血再灌注损伤、器官移植、动脉粥样硬化等。

现在“抗氧化”的药物很多，而真正有效的抗氧化和调控氧化/抗氧化平衡的药物却很少。

发明内容

本发明的目的之一是提供PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白在治疗或预防因活性氧(ROS)增高引起的损伤、衰老或疾病方面的新用途。

本发明的目的还在于提供一种以PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白为活性成分的组合物，所述组合物包括药物组合物或化妆品组合物等。

本发明的目的还在于提供了一种改善精子质量或治疗弱精症引起的男性不育的方法。

在本发明第一方面中，提供了一种过氧化物氧化还原酶的用途，用于制备治疗或预防因活性氧(ROS)增高引起的损伤、衰老或疾病的药物组合物，其中，所述过氧化物氧化还原酶包括：PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白。

在另一优选例中，所述的因活性氧(ROS)增高引起的损伤、衰老或疾病，包括选自下组的一种或多种：

(1)由射线或辐射造成的ROS增高引起的损伤、衰老或疾病；

(2)因高血糖(如糖尿病)造成的ROS增高引起的损伤、衰老或疾病；

(3)因吸烟引起的各种组织损伤；

(4)因喝酒引起的各种组织损伤；

(5)因ROS增高诱发的其他疾病，所述疾病为选自下组的疾病：动脉粥样硬化、高血压、癌症、骨关节炎、风湿性关节炎、肺纤维化、癫痫或神经退化性问题(如阿尔兹海默症、帕金森病)；

(6)细胞冷冻复苏过程引起的损伤；

(7)缺血再灌注损伤；

(8)股骨头无菌性坏死、或褥疮；

(9)由于药物(如化疗药物或有机磷农药等)引起的ROS增高所致的损伤或引起的疾病：

(10)皮肤相关问题(如皱纹、斑痕和烧伤等)；

(11)糖尿病并发症（如足病（坏疽）、眼病、肾病、脑病等）。

在另一优选例中，所述药物组合物用作：

(1)细胞保护剂、器官保护剂、或组织保护剂；

(2)改善弱精症患者精子质量或治疗男性不育的药物；

在另一优选例中，所述的精子为成熟阶段的精子细胞。

(3)抗衰老、修复疤痕、抗皱、去皱、祛斑、美白、防晒、预防皮肤癌的药物或化妆品；

(4)治疗烧烫伤和角膜损伤的药物；

(5)促进伤口(如刀伤、创伤等)愈合的药物；或

(6)用于保护组织细胞的氧化损伤(或抗氧化)的药物或保健品。

在另一优选例中，所述保护剂为冷冻保护剂。

在另一优选例中，所述保护剂可用于制备细胞保存液、器官保存液或组织保存液，优选用于制备器官移植保存液。

在另一优选例中，所述细胞为动物细胞(优选哺乳动物细胞，如人细胞)，其中，所述细胞包括：精子、卵细胞、或各种组织细胞。

在另一优选例中，所述组织为动物(优选哺乳动物，如人)的各个器官或组织。

在另一优选例中，所述的PRDX2蛋白为哺乳动物的PRDX2蛋白或其活性片段或其衍生产物；所述的PRDX6蛋白是哺乳动物的PRDX6蛋白或其活性片段或其衍生产物。

在另一优选例中，所述的PRDX2蛋白为人PRDX2蛋白或其活性片段或其衍生产物；所述的PRDX6蛋白为人PRDX6蛋白或其活性片段或其衍生产物。

在另一优选例中，所述的PRDX2蛋白或PRDX6蛋白是重组蛋白。

在另一优选例中，所述的PRDX2蛋白包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的蛋白或SEQ ID NO:4中第6-164位所示的活性片段，或其与表达标签形成的融合蛋白；

所述的PRDX6蛋白包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的蛋白或SEQ IDNO:2中第5-169位所示的活性片段，或其与表达标签形成的融合蛋白。

在本发明第二方面中，提供了一种组合物，所述的组合物含有：(a)PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白；以及(b)药学上、食品上或化妆品上可接受的载体。

在另一优选例中，所述的PRDX2蛋白或PRDX6蛋白是重组蛋白。

在另一优选例中，所述组合物为药物组合物、食品组合物、保健品组合物或化妆品组合物。

在另一优选例中，所述组合物的剂型包括：注射剂、涂剂、喷雾剂、乳剂、霜剂、膏剂（包括软膏剂）、凝胶剂、滴剂、贴剂或面膜。

在另一优选例中，所述的化妆品的类型为口腔用化妆品（如用于口腔消炎）、喷雾剂、乳液、唇膏、防晒霜、日霜、晚霜、爽肤水、或面膜。

在本发明第三方面中，提供了一种治疗或预防因ROS增高引起的损伤、衰老或疾病的方法，包括步骤：对需要治疗的对象，施用(i)PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白、或(ii)本发明第二方面所述的组合物。

在另一优选例中，所述方法具有以下一种或多种作用：

(i)改善弱精症患者精子质量；

(ii)抗衰老、修复疤痕、抗皱、去皱、祛斑、美白、防晒、或预防皮肤癌；

(iii)治疗烧烫伤和角膜损伤；

(iv)促进伤口(如刀伤或创伤等)愈合；

(v)保护组织细胞的氧化损伤；

(vi)治疗或预防糖尿病并发症，如足病（坏疽）、眼病、肾病、脑病等。

在另一优选例中，所述方法还具有以下作用：

(1)提高弱精症患者的受孕率；或

(2)保护成熟阶段的精子细胞。

在另一优选例中，所述方法还具有以下一种或多种作用：

(1)缓解视疲劳，增进和改善视力或防治进行性视力减退；

(2)对抗光伤害，对抗脂质过氧化性损伤，增加细胞对氧自由基的清除能力，降低色相差，治疗近视、弱视、老花眼、青光眼、飞蚊症等；

(3)遏制玻璃体中自由基产生，加速对自由基的清除与排泄，避免玻璃体中蛋白质的糖化和氧化，保护可溶性蛋白的SH基不受损伤，使不溶性蛋白还原成可溶性蛋白，阻止晶状体混浊化或治疗或预防进行性白内障的形成与进展；

(4)治疗老年性白内障、糖尿病性白内障、外伤性白内障、辐射性白内障、后发性白内障、或治疗未成熟期、膨胀期、成熟期的晶体混浊。

在另一优选例中，所述氧化损伤包括如下一种或多种的损伤：

(1)放疗或化疗造成的损伤；

(2)吸烟或喝酒造成的损伤；

(3)缺血再灌注损伤；

(4)糖尿病的高血糖造成的损伤。

在本发明第四方面中，提供了一种改善精子质量或治疗男性不育的方法，给弱精症患者施用(i)PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白，或(ii)本发明第二方面所述的组合物。

在本发明第五方面中，提供了一种本发明第二方面所述的组合物的制法，将PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白，与药学上、食品中或化妆品上可接受的载体或赋形剂混合，从而制得本发明第二方面所述的组合物。

本发明第六方面中，提供了Prx-6蛋白在制备治疗角膜损伤的药物中的用途。

在另一优选例中，所述的Prx-6蛋白是人Prx-6蛋白。

在另一优选例中，所述的Prx-6蛋白是重组蛋白。

在另一优选例中，所述的Prx-6蛋白包括氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的蛋白或其与表达标签形成的融合蛋白。

本发明第七方面中，提供了一种用于治疗角膜损伤的药物组合物，所述的药物组合物含有Prx-6蛋白以及药学上可接受的载体，并且所述的药物组合物为眼用制剂。

在另一优选例中，所述的Prx-6蛋白是人Prx-6蛋白。

在另一优选例中，所述的Prx-6蛋白是重组蛋白。

在另一优选例中，所述的眼用制剂是滴眼液、眼用凝胶或眼膏。

在本发明第八方面中，提供了一种治疗角膜损伤的方法，包括步骤：对需要治疗的对象，将Prx-6蛋白或本发明第七方面所述的药物组合物滴入或涂入结膜囊内。

在另一优选例中，所述的治疗包括：抑制角膜新生血管的生成；修复受损的角膜上皮细胞；减轻角膜水肿，恢复角膜透明度及视力；清除自由基抗氧化，促进炎症病变组织恢复。

发明人从初期细胞实验到动物实验，证明了PRDX蛋白在清除活性氧和调节活性氧依赖的信号传导方面起着主要作用，PRDX蛋白是一种极有发展前途、有效的抗氧化药物成分，对于因ROS增高引起的疾病或不利变化具有治疗或预防作用。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了Prx-6基因PCR扩增结果。泳道1：空白对照；泳道2：Prx-6；M：分子量标准。

图2显示了Prx-6蛋白亲和纯化色谱图。峰1：杂蛋白；峰2：Prx-6目的蛋白。

图3显示了PRDX6蛋白纯化电泳图(12%SDS-PAGE)。泳道1：蛋白分子量标准品(Fermentas)；泳道2：亲和层析纯化并脱盐后的PRDX6蛋白；泳道3：峰1；泳道4：上样穿出蛋白；泳道5：破菌上清(上样的样品)。

图4显示了重组PRDX6蛋白对HEF细胞的抗氧化保护作用(P<0.05)。

图5显示了PRDX2(即HEL-S-2a)蛋白保护弱精的作用。

图6显示了PRDX6(即HEL-S-128m)蛋白保护弱精的作用。

其中，上述各图中，有相同字母的两组间经统计学分析无显著性差异，如A和AB之间无显著性差异；无相同字母的两组间经统计学分析有显著性差异，如A和B之间、A和D之间的差异是有显著性的。

图7显示了用裂隙灯显微镜观察重组Prx-6蛋白治疗大鼠角膜损伤的结果。图中，各图片从左至右依次为：对照组(2只)；Prx-6组(2只)。从上至下依次为：紫外线照射前；紫外线照射后；治疗4天；治疗8天；治疗12天。

具体实施方式

本发明人通过长期而深入的研究，意外地发现PRDX6蛋白和PRDX2蛋白可用于制备治疗或预防因ROS增高引起的相关疾病的药物组合物。所述以PRDX6蛋白和/或PRDX2为活性成分的药物，不仅可用于保护HEF等细胞，还可用于治疗和预防因ROS增高引起的多种疾病，或缓解因ROS增高引起的症状。在此基础上，发明人完成了本发明。

PRDX6蛋白

如本文所用，术语“PRDX6蛋白”、“Prx-6蛋白”、“HEL-S-128m”等可互换使用，都指具有人PRDX6氨基酸序列的蛋白或多肽。它们可含有或不含起始的甲硫氨酸。应理解，这些术语既包括人(源)的蛋白，也包括在其他哺乳动物(如狗、牛、羊、猴、啮齿动物(如小鼠))中的具有同种功能的同系物或同源蛋白。此外，该术语包括野生型和突变型PRDX6蛋白。

人PRDX6基因的cDNA序列的GenBank登录号为：NM 004905.2，如SEQID NO:1所示。人PRDX6蛋白的氨基酸序列的GenBank登录号为：NP 004896.1，如SEQ ID NO:2所示。

应理解，由于人等哺乳动物的PRDX6蛋白的核酸序列和氨基酸序列都是已知的，可以用本领域常规的DNA重组技术而获得其蛋白。

一类特别优选的蛋白是PRDX6蛋白类似物，即在其他哺乳动物(如牛、羊、兔、狗、猴、鼠等)中PRDX6的同源蛋白。这些其他物种的同源蛋白的编码序列，可根据PRDX6的序列，通过杂交或扩增的方法而获得，进而通过常规重组方法获得这些同源蛋白。

本发明的蛋白可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括人PRDX6蛋白的活性片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“活性片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然人PRDX6蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列，或与抗原IgG片段的形成的融合蛋白)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

在本发明中，术语“人PRDX6多肽”指具有人PRDX6蛋白活性的SEQ IDNO:2序列的多肽。该术语还包括具有与人PRDX6蛋白相同功能的、SEQ IDNO:2序列的变异形式。这些变异形式包括(但并不限于)：若干个(通常为1-50个，较佳地1-30个，更佳地1-20个，最佳地1-10个)氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一个或数个(通常为20个以内，较佳地为10个以内，更佳地为5个以内)氨基酸。例如，在本领域中，用性能相近或相似的氨基酸进行取代时，通常不会改变蛋白质的功能。又比如，在C末端和/或N末端添加一个或数个氨基酸通常也不会改变蛋白质的功能。该术语还包括人PRDX6蛋白的活性片段和活性衍生物。一种优选的活性片段是氨基酸序列如SEQ ID NO:2中第5-169位所示的多肽。

PRDX2蛋白

如本文所用，术语“PRDX2蛋白”、“Prx-2蛋白”、“HEL-S-2a”等可互换使用，都指具有人PRDX2氨基酸序列的蛋白或多肽。它们可含有或不含起始的甲硫氨酸。应理解，这些术语既包括人(源)的蛋白，也包括在其他哺乳动物(如狗、牛、羊、猴、啮齿动物(如小鼠))中的具有同种功能的同系物或同源蛋白。此外，该术语包括野生型和突变型PRDX2蛋白。

人PRDX2基因的cDNA序列的GenBank登录号为：NM 005809.4，如SEQID NO:3所示。人PRDX2蛋白的氨基酸序列的GenBank登录号为：NP 005800.3，如SEQ ID NO:4所示。

应理解，由于人等哺乳动物的PRDX2蛋白的核酸序列和氨基酸序列都是已知的，可以用本领域常规的DNA重组技术而获得其蛋白。

一类特别优选的蛋白是PRDX2蛋白类似物，即在其他哺乳动物(如牛、羊、兔、狗、猴、鼠等)中PRDX2的同源蛋白。这些其他物种的同源蛋白的编码序列，可根据PRDX2的序列，通过杂交或扩增的方法而获得，进而通过常规重组方法获得这些同源蛋白。

本发明还包括人PRDX2蛋白的活性片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“活性片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然人PRDX2蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列，或与抗原IgG片段的形成的融合蛋白)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

在本发明中，术语“人PRDX2多肽”指具有人PRDX2蛋白活性的SEQ IDNO:4序列的多肽。该术语还包括具有与人PRDX2蛋白相同功能的、SEQ IDNO:4序列的变异形式。这些变异形式包括(但并不限于)：若干个(通常为1-50个，较佳地1-30个，更佳地1-20个，最佳地1-10个)氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一个或数个(通常为20个以内，较佳地为10个以内，更佳地为5个以内)氨基酸。例如，在本领域中，用性能相近或相似的氨基酸进行取代时，通常不会改变蛋白质的功能。又比如，在C末端和/或N末端添加一个或数个氨基酸通常也不会改变蛋白质的功能。该术语还包括人PRDX2蛋白的活性片段和活性衍生物。一种优选的活性片段是氨基酸序列如SEQ ID NO:4中第6-164位所示的多肽。

因活性氧(Reactive oxygen species，ROS)增高引起的损伤、衰老或疾病

本发明所述的PRDX2和/或PRDX6可用于治疗和预防因ROS增高引起的损伤、衰老或疾病，本发明所述的因ROS增高引起的损伤、衰老或疾病可以是已知的各种由于活性氧增高而引起的损伤、衰老或疾病，优选包括(但不限于)：1.如各种射线或辐射(包括宇宙射线、地球放射性元素产生的辐射、紫外线、X射线、由电焊、电脑、电视、手机等电器辐射源或肿瘤放射治疗所产生的辐射)造成的ROS增高引起的损伤、衰老或疾病，例如角膜损伤、皮肤损伤、组织损伤(包括各种组织)；2.如高血糖(如糖尿病)造成的ROS增高引起的损伤、衰老或疾病，例如胰岛素抵抗、胰岛β细胞损伤、肾脏损伤等；3.如吸烟引起的各种组织损伤，例如肺部损伤(如支气管炎、胰腺损伤、肝脏损伤)；4.如喝酒引起的各种组织损伤，如酒精性肝病、胰腺损伤；5.由ROS增高诱发的其他疾病，例如动脉粥样硬化、高血压、癌症、骨关节炎、风湿性关节炎、肺纤维化、癫痫以及神经退化性问题如阿尔兹海默症、帕金森病；6.如细胞(包括人或动物的精子、卵细胞、任何组织细胞)冷冻复苏过程的损伤；7.缺血再灌注损伤，例如(但不限于)：器官移植时的缺血再灌注损伤，休克时微循环的疏通、冠状动脉痉挛的缓解、心脏骤停后心脑肺复苏、动脉搭桥术、PTCA、溶栓疗法等血管再通术后，心脏外科体外循环术、器官移植及断肢再植等；8.股骨头无菌性坏死；9.长期卧床引起的褥疮；10.因使用药物而引起的ROS增高所导致的的疾病，如化疗、有机磷农药中毒，自杀服用有毒药物造成过氧化损伤等；11.皮肤相关问题，例如(但不限于)：皱纹、斑痕和烧伤等；12.糖尿病并发症，如足病（坏疽）、眼病、肾病、脑病等。

药物组合物和施用方法

本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的PRDX6蛋白和/或PRDX2蛋白及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：蛋白的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有0.1ng-2000mg PRDX6蛋白和/或PRDX2蛋白/剂，更佳地，含有1-200mg PRDX6蛋白和/或PRDX2蛋白/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊、药片或一瓶滴眼液。

“药学上可以接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的蛋白以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温

)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

PRDX6蛋白和/或PRDX2蛋白或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药(如贴剂等)。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性成分与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其组合。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性成分也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性成分外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。

除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、娇味剂和香料。

除了活性成分外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

用于局部给药的PRDX6蛋白和/或PRDX2蛋白的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂、栓剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。

本发明蛋白可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物或蛋白等联合给药。

使用药物组合物时，是将安全有效量的活性成分适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为0.5ng～2000mg，优选2～50mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

本发明优选提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明PRDX6蛋白和/或PRDX2蛋白，以及药学上、可接受的载体或赋形剂。这类载体或赋形剂包括(但并不限于)：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、泊洛沙姆、卡波姆、或其组合。例如，可将本发明蛋白配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的水性载体介质中，其中pH通常约为5-8，较佳地pH约为6-8，最佳地pH约为6.8-7.6，尽管pH值可随被配制物质的性质以及待治疗的病症而有所变化。

配制好的组合物可通过常规途径进行给予所述组合物，其中包括(但并不限于)：局部给予、口服、肌内、静脉内、结膜下注射等等。

药物制剂应与给药方式相匹配，本发明的药物组合物：(1)可以被制成针剂形式，例如用生理盐水或含有葡萄糖和其他辅剂的水溶液通过常规方法进行制备。(2)诸如膏剂、滴剂、喷雾剂、片剂和胶囊之类的药物组合物，可通过常规方法进行制备。(3)药物组合物如针剂、溶液、片剂和胶囊宜在无菌条件下制造。(4)制成栓剂，具体工艺如下：1.将β-CD加适量乙醇搅拌均匀为糊状，加PRDX6、PRDX2蛋白研磨包合45分钟备用。2.将36型半合成脂肪酸酶加热溶解后保温38℃，加主药的包合物，充分混合均匀保温。3.将混合均匀的保温物灌膜冷却成形。4.制备好的栓剂，在房事前置于女性生殖道中即可，能提高弱精症患者的受孕成功率。

活性成分的给予量是指治疗有效量，例如每天约1微克/千克体重-约10毫克/千克体重。本发明的药物组合物还可以被制成滴眼液、眼用凝胶或眼膏的形式，宜在无菌条件下制造。活性成分的给药量是治疗有效量，例如每天约10微克/千克体重-约10毫克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

本发明所述的细胞冷冻保护剂

在一优选例中，本发明提供了精子冷冻保护剂的配方，它含有0.1mg/ml-100mg/ml的PRDX2重组蛋白和PRDX6重组蛋白；以及一些常用的精子冷冻保护剂成分，如氯化钾、氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、葡萄糖、蛋黄、白蛋白、甘氨酸、蔗糖、甘油。

此外，PRDX2、PRDX6蛋白可以单独使用，也可以联合使用。另外，本发明的蛋白还可与其他精子冷冻保护剂一起使用。

治疗弱精症

在一优选例中，本发明提供了治疗弱精症的药物组合物，该药物包含：含有1-100mg活性成分：PRDX2重组蛋白和PRDX6重组蛋白；和药学上可接受的载体或赋形剂。这类载体包括(但并不限于)：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、吐温80、β-CD及其组合。

此外，PRDX2蛋白和PRDX6蛋白可以单独使用，也可以两者一起使用，或者和其他药物联合使用。另外，本发明的蛋白还可与治疗弱精症的其他治疗剂一起使用。

例如，本发明的药物组合物具有的作用包括(但并不限于)：(1)提高弱精症患者的受孕率；(2)保护各成熟阶段的精子细胞。

治疗角膜损伤

在一优选例中，本发明提供了治疗角膜损伤的药物组合物，可将本发明蛋白按0.05-0.2mg/次的用量直接滴入或涂入结膜囊内。此外，PRDX2蛋白和PRDX6蛋白可以单独使用，也可以联合使用。此外，本发明的蛋白还可与治疗角膜损伤的其他治疗剂一起使用。

具体地，所述药物组合物还具有以下作用：(1)缓解视疲劳，增进和改善视力，防治进行性视力减退；或(2)对抗光伤害，对抗脂质过氧化性损伤，增加细胞对氧自由基的清除能力，降低色相差，有效治疗近视、弱视、老花眼、青光眼、飞蚊症等；(3)遏制玻璃体中自由基产生，加速对自由基的清除与排泄，避免玻璃体中蛋白质的糖化和氧化，保护可溶性蛋白的SH基不受损伤，使不溶性蛋白还原成可溶性蛋白，可阻止晶状体混浊化，控制进行性白内障的形成与进展，从而有效治疗老年性白内障、糖尿病性白内障、外伤性白内障、辐射性白内障和后发性白内障以及未成熟期、膨胀期、成熟期的晶体混浊。

治疗烧烫伤

在一优选例中，本发明提供了治疗烧烫伤的配方，可将本发明蛋白按0.1-0.5mg/cm²创面的用量直接施涂或喷涂在烧烫伤的创面。此外，PRDX2蛋白和PRDX6蛋白可以单独使用，也可以联合使用。此外，本发明的蛋白还可与治疗烧烫伤的其他治疗剂一起使用。

化妆品组合物

本发明提供了一种以PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白为活性成分的化妆品组合物，所述组合物可以含有有效量的PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白，以及化妆品上可接受的载体或赋形剂。

本发明所述的以PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白为活性成分的化妆品组合物可以含有任意量的适用于化妆品制剂的PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白，通常，PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白的含量为化妆品组合物总重量的0.1～30%，较佳地为1～15%，最佳地为3～8%。

本发明用于制备化妆品制剂的多种载体和赋形剂可以是本领域技术人员所熟悉或常用的载体或赋形剂。具体载体或赋形剂的选择，应取决于所要制备的化妆品的类型。

本发明所述的化妆品组合物可以通过本领域技术人员所熟知的方法制备得到。例如PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白可以通过所属领域技术人员熟知的方法掺混在任何(水包油和/或油包水)膏类化妆品(如雪花膏、润肤霜、蜜类、冷霜、粉底)，美容化妆品(如唇膏、胭脂、眉笔、眼影粉、睫毛膏、眼线液、指甲油、面膜等)，香粉类化妆品(如香粉、粉饼、爽身粉)，香水类化妆品(如香水、古龙水、花露水、奎宁水、润发水、化妆水、须后水等)，疗效型美容化妆品(如皮肤病汉疗护肤剂、抗粉刺化妆品、祛斑化妆品，防皱抗衰老化妆品、减肥化妆品、增白化妆品)，防晒化妆品，剃须膏等。

本发明所述的化妆品组合物具有抗衰老、修复疤痕、抗皱、去皱、祛斑、美白、防晒、或预防皮肤癌的作用。本发明还涉及这些组合物在一般性皮肤调理中和特别是在皱纹、斑痕和烧伤的美容处理中的应用。

本发明主要优点在于：本发明所述的人PRDX2蛋白和/或人PRDX6蛋白具有以下作用：(1)在精子冷冻复苏过程中具有保护精子的作用。如在传统的精子冷冻保护剂中添加重组人PRDX2蛋白和PRDX6蛋白后，在精子的冷冻复苏过程中，能显著提高前向运动精子复苏率及穿卵率(SPA)；(2)能够改善弱精症患者的精子质量。如在辅助生殖技术的精液体外处理过程中，添加本发明的重组人PRDX2蛋白和PRDX6蛋白，能够提高处理后活动精子总数，明显改善处理后的精子质量，提高妊娠率；(3)抗衰老、修复疤痕、抗皱、去皱、祛斑、美白、防晒、预防皮肤癌的作用；(4)治疗烧烫伤和角膜损伤的作用；(5)促进刀伤或创伤等伤口愈合；(6)保护组织细胞的氧化损伤的作用。

下面结合具体实施，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。本发明所用原料或试剂均市售可得。

实施例1pET32b(+)/PRDX6和pET32b(+)/PRDX2表达载体构建

1.1pET32b(+)/PRDX6表达载体构建

根据编码PRDX6成熟蛋白的基因序列设计并合成了一对特异引物，

上游引物：5’-tatccatatgcccggaggtctgcttc–3’(如SEQ ID NO:5所示)；

下游引物：5’-ttactcgagaggctggggtgtgtagcg–3’(如SEQ ID NO:6所示)；

酶切位点分别为NdeI及XhoI，

以常规方法抽提的人附睾mRNA(或实验室制备的人附睾cDNA文库)为模板，进行RT-PCR扩增。结果见图1，检测到与理论值相符的688bp的扩增片段。

分离扩增片段(用胶回收试剂盒从琼脂糖凝胶中回收目的片段)，用NdeI及XhoI进行双酶切。然后，将经过双酶切的片段连接到已用NdeI和XhoI切成线性的pET32b(+)表达载体(购自Novagen)中，转化常规的大肠杆菌TOP10F’(购自Invitrogen)。通过菌落PCR的方法筛选阳性克隆，并测序进一步证实序列及表达阅读框的正确性，得到重组表达质粒pET32b(+)/PRDX6。

该表达载体所表达的PRDX6蛋白为PRDX6-His融合蛋白，在C端附加8个氨基酸LEHHHHHH，以便于分离纯化。

1.2pET32b(+)/PRDX2表达载体构建

构建方法同1.1，不同点在于，使用如下一对引物：

上游引物：5’-TATCCATATGGCCTCCGGTAACGCGC–3’(如SEQ ID NO:7所示)；下游引物：5’-TTACTCGAGATTGTGTTTGGAGAAATATTC3’(如SEQ ID NO:8所示)；酶切位点分别为NdeI及XhoI。得到重组表达质粒pET32b(+)/PRDX2。

实施例2PRDX6蛋白和PRDX2蛋白的表达

2.1PRDX6蛋白的表达

将质粒pET32b(+)/PRDX6转化大肠杆菌Origami B(DE3)(购自Novagen)，将阳性克隆接种于含100ug/ml氨苄青霉素的LB培养基中，37度摇床培养过夜。

次日按1：100转接于含100ug/ml氨苄青霉素的LB培养基中，37度摇床培养至菌密度OD600=0.6～0.8后，加入IPTG至终浓度0.4mM以诱导目的蛋白PRDX6的表达，3-4h后离心收集菌体。

2.2PRDX2蛋白的表达

完成PRDX2蛋白的表达，表达方法同2.1，不同点在于用PRDX2蛋白代替PRDX6蛋白。

实施例3PRDX6蛋白和PRDX2蛋白的纯化

3.1PRDX6蛋白的纯化

将离心收集的菌体重悬于缓冲液A中(20mM磷酸盐缓冲液，150mM氯化钠，pH7.2)，冰浴中超声破碎，20000g低温(4度)离心15min取上清为待纯化的样品。

使用缓冲液A平衡镍亲和层析柱后，将样品上柱，然后用含50mM咪唑的缓冲液A冲洗柱子去除杂蛋白(峰1)(见图2)，用含300mM咪唑的缓冲液A将目的蛋白洗脱下来(峰2)(见图2)。

最后用G-25脱盐柱将洗脱的蛋白置换于缓冲液A中以去除咪唑，SDS-PAGE电泳检测。

经分析，获得了纯度在95%以上PRDX6蛋白，分子量约26.1kD。(见图3)。

3.2PRDX2蛋白的纯化

完成PRDX2蛋白的纯化，纯化方法同3.1，不同之处在于用PRDX2蛋白代替PRDX6蛋白。

实施例4PRDX6蛋白的抗氧化活性(HEF细胞氧化损伤实验)

HEF细胞为常用的人胚胎成纤维细胞(Zavada等.,Nature New Biology,240:124-125(1972)；或US 7,811,817)。

用培养基(高糖DMEM+5%FBS，购自Invitrogen)复苏细胞，培养48h。

待细胞长至90%汇合后，按照下面实验方法先将实施例3中获得的PRDX6蛋白(PRDX6-His融合蛋白)加入培养体系中，再加入H₂O₂，作用30min后，MTT方法检测细胞存活率。

实验设计：

因素1：H₂O₂水平(1mM、0.5mM、0.25mM、0.125mM、0mM)

因素2：PRDX6-His水平(0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0mg/ml)

各实验组的H₂O₂和PRDX6-His浓度如表1所示。

表1

结果如表1和图4所示：

H₂O₂组(0.125mM)：H₂O₂对细胞有很强的毒性作用，当其浓度为0.125mM时，细胞存活率仅2.47%。随着H₂O₂浓度上升，造成的损伤也越大。

缓冲液(20mM磷酸盐缓冲液，150mM氯化钠，pH7.2，含0.5mg/ml的表达标签6×His)组：当只有所述缓冲液存在时，细胞活率与PRDX6-His蛋白组(0.5mg/ml)相比显著降低。

H₂O₂＋PRDX6-His组：以H₂O₂浓度为0.125mM的各组为例，添加了0.25mg/ml、0.5mg/ml PRDX6蛋白，其中，0.25mg/ml的蛋白能使HEF细胞在一定程度上抵御0.125mM浓度的H₂O₂损伤；0.5mg/ml PRDX6可使得存活率从约2.5%大幅上升到65%。

H₂O₂＋缓冲液（缓冲液同上）组：表明用含有表达标签6×His的缓冲液不能起到保护作用。

上述结果表明：当体系中同时有PRDX6-His蛋白存在时细胞存活率显著增加。PRDX6-His蛋白对H₂O₂的过氧化损伤有抵抗作用。

实施例5PRDX2、PRDX6蛋白对弱精症患者精子的保护

步骤：

1、取精子样本，液化后，测前向运动精子(PR)%，选取(PR)%<32%的精子样本(即弱精)。

2、于BWW培养液中上浮1h。

3、用BWW培养液洗涤精子3次。

4、将上述精子分为3组：

空白对照组(精子稀释在BWW+缓冲液（20mM磷酸盐缓冲液，150mM氯化钠，pH7.2）中)；

BSA组(精子稀释在BWW+300ug/ml牛血清蛋白（BSA，购自Amresco）中)；

蛋白组(精子稀释在BWW+300ug/ml蛋白中)

5、分别于孵育2h和4h后检测精子各项运动参数。

结果：

(1)对于前向运动精子(PR)%<32%的精子样本，在孵育2h后，HEL-S-2a蛋白（即PRDX2蛋白）组精子的活动率、前向运动精子百分率、平均路径速率、直线速率和曲线速率显著高于空白对照组。HEL-S-2a蛋白组精子的活动率、前向运动精子百分率和直线速率显著高于BSA组。结果统计分析见图5。

(2)对于前向运动精子(PR)%<32%的精子样本，在孵育2h后，HEL-S-128m蛋白（即PRDX6蛋白）组精子的活动率、前向运动精子百分率、平均路径速率、直线速率和曲线速率显著高于空白对照组。HEL-S-128m蛋白组精子的活动率、前向运动精子百分率、平均路径速率和直线速率显著高于BSA组。结果统计分析见图6。

在辅助生殖技术的精液体外处理过程中，添加本发明的重组人PRDX2蛋白和PRDX6蛋白，能够提高处理后活动精子总数，明显改善处理后的精子质量，提高妊娠率。

实施例6用于治疗不育症的栓剂处方及制备工艺

表2制备栓剂用材料和用量

组分	用量
		PRDX2蛋白	5mg
PRDX6蛋白	5mg
		β-CD	10mg
吐温80	2mg
		36型半合成脂肪酸酶	40mg

栓剂制备工艺，添加材料及其相应添加量如表2所示：

1.将β-CD加适量乙醇搅拌均匀为糊状，加蛋白研磨包合45分钟备用。

2.将36型半合成脂肪酸酶加热溶解后保温38℃，加主药的包合物，充分混合均匀保温。

3.将混合均匀的保温物灌膜冷却成形。

实施例7精子冷冻保护剂处方及保护效果

7.1精子冷冻保护剂处方

每100ml精子冷冻保护剂中含：

PRDX6蛋白500mg，PRDX2蛋白500mg，KCl 0.54mmol/L，

NaCl 10.0mmol/L，MgSO₄ 0.05mmol/L，NaH₂PO₄ 0.03mmol/L，

NaHCO₃ 10mmol/L，葡萄糖205.4mmol/L，甘氨酸13.0mmol/L，

蔗糖5.0mmol/L，HEPES 2.5mmol/L，甘油14%(v/v)。

基本配方用双蒸水配制。

调pH至7.4，0.22um无菌滤器过滤除菌。

7.2比较本发明的精子冷冻保护剂与商品化产品的保护效果

7.2.1材料

精液标本来自健康、已婚、已育的20名30～35岁志愿献精者,经泌尿外科及精液常规检测正常后进入本研究。

7.2.2方法

每位志愿献精者取精液2ml以上，分为3份。

其中1份进行冻前精液常规检查及SPA测定；

剩余2份分别采用本发明实施例7所述的冷冻保护剂和商品化的产品进行冷冻，6个月后复温，分别进行精液常规检查及SPA的测定。

7.2.3结果如表3所示：

表3

与商品化保护剂相比，本发明的精子冷冻保护剂在精子复苏率和穿卵率(SPA)方面有显著提高(P<0.01)。

实施例8活性片段的治疗作用

重复实施例5和7，不同点在于：用SEQ ID NO.:2中第5-169位所示的Prx-6活性片段替代SEQ ID NO.:2所示的全长Prx-6蛋白。用SEQ ID NO.:4中第6-164位所示的Prx-2活性片段替代SEQ ID NO.:4所示的全长Prx-2蛋白。

结果表明，上述活性片段具有对弱精症患者精子的保护作用，明显改善处理后的精子质量，提高妊娠率，其治疗效果与全长Prx-6或Prx-2相当。上述活性片段同样可作为精子冷冻保护剂，显著提高精子复苏率和穿卵率。

实施例9Prx-6蛋白对角膜损伤的治疗作用

9.1动物来源：6周龄SD大鼠，烟台毓璜顶医院实验动物中心。

9.2药物：实验组：实施例3中制备的Prx-6蛋白；对照组：生理盐水。

9.3角膜损伤模型制备

5%水合氯醛（7ml/kg体重）腹腔内注射，麻醉后选择双星明和新福林眼液作为散瞳剂，每2min 1次，1滴/次，20min后，瞳孔散大后用棉签小心吸除角结膜的散瞳剂，置于300nm紫外线灯下，固定大鼠与紫外线灯的相对位置高度，并用紫外照射计测定辐射照度，控制在1×10³Uw/cm²，每天累计辐射剂量9KJ/m²，连续3天，造成大鼠角膜损伤模型，用裂隙灯显微镜观察。

9.4治疗方法

实验包括：对照组(滴生理盐水)、Prx-6蛋白治疗组(滴2mg/ml Prx-6蛋白)。角膜损伤后2天开始用药，每天用药4次，每次将2滴（约30μl）药品滴入大鼠眼内。

9.5实验结果

紫外线照射后2天，大鼠角膜发生水肿，透明度明显降低。治疗第4天，对照组的角膜有较多新生血管生成，炎症反应严重，而Prx-6蛋白治疗组仅有少量新生血管生成，并且水肿明显减轻；治疗第8天，对照组角膜的水肿稍减轻，透明度部分恢复，Prx-6蛋白治疗组角膜透明度大部分恢复；治疗第12天，对照组角膜透明度仍未完全恢复，Prx-6蛋白治疗组大鼠角膜基本恢复，水肿消除(图7)。(注：图中从左至右依次为：对照组(2只)；Prx-6治疗组(2只))。

实施例10PRDX2、PRDX6活性测定方法

过氧化氢在240nm波长下有强烈的吸收，且与浓度成正比（A240nm×22.94=过氧化氢浓度mM），PRDX6、PRDX2均能够分解过氧化氢，使反应溶液的吸光度（A240nm）随反应时间而降低。

实验方案：用缓冲液（20mM磷酸盐缓冲液，150mM氯化钠，pH7.2）配制10mM的过氧化氢，取500ul，加入10ul的蛋白（BCA法定量），在室温25℃下反应20min，通过测定反应前后的吸光度差值，计算消耗掉的过氧化氢的量，从而计算出每ug蛋白在1min内能消耗掉的过氧化氢的量（nmol），即nmol/min/ug，以此来评价PRDX6或PRDX2的活性。

PRDX6的实验结果如表4所示，结果表明本发明所述PRDX6的活性能达到1nmol/min/ug以上。PRDX2的实验结果也表明PRDX2的活性能达到1nmol/min/ug以上。

表4

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims

1.一种过氧化物氧化还原酶的用途，其特征在于，用于制备治疗或预防因活性氧(ROS)增高引起的损伤、衰老或疾病的药物组合物，其中，所述过氧化物氧化还原酶包括：PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物组合物用作：

(1)细胞保护剂、器官保护剂、或组织保护剂；

(2)改善弱精症患者精子质量或治疗男性不育的药物；

(4)治疗烧烫伤和角膜损伤的药物；

(5)促进伤口愈合的药物；或

(6)用于保护组织细胞的氧化损伤的药物或保健品。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的PRDX2蛋白为哺乳动物的PRDX2蛋白或其活性片段或其衍生产物；所述的PRDX6蛋白是哺乳动物的PRDX6蛋白或其活性片段或其衍生产物。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的PRDX2蛋白包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的蛋白或SEQ ID NO:4中第6-164位所示的活性片段，或其与表达标签形成的融合蛋白；

5.一种组合物，其特征在于，所述的组合物含有：

(a)PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白；以及

(b)药学上、食品上或化妆品上可接受的载体。

6.如权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述的PRDX2蛋白为哺乳动物的PRDX2蛋白或其活性片段或其衍生产物；所述的PRDX6蛋白是哺乳动物的PRDX6蛋白或其活性片段或其衍生产物。

7.如权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述组合物为药物组合物、食品组合物、保健品组合物或化妆品组合物。

8.一种治疗或预防因ROS增高引起的损伤、衰老或疾病的方法，其特征在于，包括步骤：对需要治疗的对象，施用(i)PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白、或(ii)权利要求5所述的组合物。

9.一种改善精子质量或治疗男性不育的方法，其特征在于，给弱精症患者施用(i)PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白，或(ii)权利要求5所述的组合物。

10.一种如权利要求5所述的组合物的制法，其特征在于，将PRDX2蛋白和/或PRDX6蛋白，与药学上、食品中或化妆品上可接受的载体或赋形剂混合，从而制得权利要求5所述的组合物。