CN103393882A - 一种甘薯茎叶多酚及其制备方法 - Google Patents

一种甘薯茎叶多酚及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种甘薯茎叶多酚及其制备方法。该方法包括如下步骤:(1)采摘新鲜的甘薯茎叶,依次经洗净、干燥和粉碎后得到甘薯茎叶干粉;(2)用乙醇水溶液a对甘薯茎叶干粉进行超声浸提;经离心,收集上清液,去除乙醇得到甘薯茎叶多酚粗提液;(3)调整甘薯茎叶多酚粗提液的总酚浓度和pH值,然后泵入至大孔吸附树脂中;经吸附后,用水清洗所述大孔吸附树脂,然后用乙醇水溶液b对大孔吸附树脂进行解吸,收集解吸液,去除乙醇即得。本发明具有以下优点:该方法所用到的试剂、材料、仪器设备均是常见规格,生产成本低,且无毒环保;该方法所制得的甘薯茎叶多酚,多酚纯度可达80%以上,得率为2~3%,所得甘薯茎叶多酚的抗氧化活性较强,具有较高的商业应用开发价值。

Description

一种甘薯茎叶多酚及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种甘薯茎叶多酚及其制备方法。 
背景技术
甘薯(Ipomoea batatas)是旋花科甘薯属的一个重要栽培品种,原产于南美洲,由于其高产稳产并具有抗干旱、耐瘠薄、适应性强、营养丰富等特点,在我国被大量的种植,产量仅次于水稻、小麦和玉米,占世界甘薯产量的80%以上(约1.0亿吨)。是我国重要的粮食、工业和饲料原料。 
甘薯地上部分的茎叶资源丰富,我国每年产出的甘薯茎叶约1.0×108t。据Hiroshi Ishida等人的研究报道,甘薯茎叶不仅富含蛋白质、脂肪、膳食纤维、矿物质等营养元素,还富含多酚类物质。多酚类物质因R·OH的存在,能形成有抗氧化作用的氢自由基(H·)以消除超氧阴离子和羟自由基等多种自由基,从而保护组织免受氧化作用的损害,具有提高免疫力、抗癌、抗衰老等多种生物活性。有研究指出甘薯茎叶中多酚类物质的含量范围为1.41~17.1g/100g干重,绝大部分含量大于6.00g/100g干重,是常见叶类蔬菜多酚含量的2~3倍。然而,目前在我国,甘薯茎叶除小部分用作饲料和肥料外大都被作为农产废产物而丢弃,造成资源的极大浪费。因此,研究一种简单易行、行之有效、具有一定的实际生产可操作性的甘薯茎叶多酚的制备方法,具有一定的生态和社会效益。 
发明内容
本发明的目的是提供一种甘薯茎叶多酚及其制备方法,本发明利用甘薯茎叶富含多酚类物质的性质,可提高其附加值。 
本发明所提供的甘薯茎叶多酚的制备方法,包括如下步骤: 
(1)采摘新鲜的甘薯茎叶,依次经洗净、干燥和粉碎后得到甘薯茎叶干粉; 
(2)用乙醇水溶液a对所述甘薯茎叶干粉进行超声浸提;经离心,收集上清液,去除乙醇得到甘薯茎叶多酚粗提液; 
(3)调整所述甘薯茎叶多酚粗提液的总酚浓度和pH值,然后泵入至大孔吸附树脂中;经吸附后,用水清洗所述大孔吸附树脂,然后用乙醇水溶液b对所述大孔吸附树脂进行解吸,收集解吸液,去除乙醇即得所述甘薯茎叶多酚。 
上述的制备方法中,所述甘薯茎叶可取自西蒙1号或渝紫7号甘薯的茎叶; 
所述甘薯茎叶可取自甘薯藤蔓顶端10~15cm的部位; 
所述新鲜的甘薯茎叶的采摘时期可为甘薯茎叶生长任一阶段,如薯块收获前期或收获时以降低对薯块产量的影响。 
上述的制备方法中,步骤(1)中,所述干燥的方式可为热风干燥或冷冻干燥; 
所述冷冻干燥的温度为-60~-40℃,时间为36~60小时,如在-40℃或-60℃下干燥48小时。 
上述的制备方法中,所述甘薯茎叶干粉的粒度可为30~50目,可将洗净沥干后的甘薯茎叶切成1~3cm的小段,然后再进行粉碎。 
上述的制备方法中,步骤(2)中,所述乙醇水溶液a的质量浓度可为50~90%,如70%;和/或, 
所述甘薯茎叶干粉与所述乙醇水溶液a的料液比可为:1g:10~40mL,如1g:20mL;和/或, 
所述超声浸提的时间可为20~60min,如30min;和/或, 
所述离心的转数可为3000~7000r,如7000r,时间可为10~30min,如10min。 
上述的制备方法中,步骤(2)中,所述方法还包括对所述离心后的残渣进行浸提1~3次的步骤。 
上述的制备方法中,步骤(3)中,所述甘薯茎叶多酚粗提液的总酚浓度可为1.50~3.00mg CGA/mL,如2.00mg CGA/mL,其中,CGA表示绿原酸;和/或, 
所述甘薯茎叶多酚粗提液的pH值可为2.0~4.0,如3.0。 
上述的制备方法中,步骤(3)中,所述大孔吸附树脂的型号可为AB-8、NKA-2、NKA-9、D101、S-8或LX-18;和/或, 
所述甘薯茎叶多酚粗提液的进样流速可为1.0~2.0mL/min,如1.0mL/min;和/或, 
所述乙醇水溶液b的质量浓度可为60~90%,如70%,所述乙醇水溶液b进行解吸时的流速可为1.0~2.0mL/min,如1.0mL/min。 
上述的制备方法中,步骤(3)中,所述大孔吸附树脂的柱床体积与所述甘薯茎叶多酚粗提液的比可为1:3~5,如1:5; 
所述大孔吸附树脂的柱床体积与所述乙醇水溶液b的体积比可为1:3~5,如1:3。 
本发明具有以下优点: 
(1)该方法操作简单,可实现规模化批量生产; 
(2)该方法所用到的试剂、材料、仪器设备均是常见规格,生产成本低,且无毒环保; 
(3)该方法所制得的甘薯茎叶多酚,多酚纯度可达80%以上,得率为2~3%,所得甘薯茎叶多酚的抗氧化活性较强,具有较高的商业应用开发价值。 
附图说明
图1为绿原酸标准曲线。 
图2为实施例1中多酚粗提液pH值对AB-8大孔吸附树脂吸附量的影响曲线。 
图3为实施例2中多酚粗提液中总酚浓度对AB-8大孔吸附树脂吸附量的影响曲线。 
乙醇解吸液质量浓度对AB-8大孔吸附树脂解吸率的影响。 
图4为实施例4和实施例5中进样流速和洗脱流速对AB-8大孔吸附树脂吸附量和解吸率的影响曲线。 
图5为本发明实施例8和9制备的甘薯茎叶多酚。 
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。 
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。 
下述实施例中总酚含量的测定方法如下: 
采用Folin-Ciocalteu比色法测定样品溶液中总酚含量:0.5mL的待测液,加入1.0mL稀释了10倍的Folin-Ciocalteu试剂,30℃反应30min,加入10%(w/v)的碳酸钠溶液,30℃反应30min,在736nm下测定吸光光度值。 
以绿原酸标准品在0-0.1mg/mL范围内建立标准曲线,如图1所示,得回归方程为Y=8.7671X+0.0068,R2=0.9994。 
根据该标准曲线,由样品溶液在736nm下测定吸光光度值,得到样品溶液总酚含量,单位为mg CGA/mL,表示为绿原酸的当量浓度。 
实施例1、多酚粗提液pH值对AB-8大孔吸附树脂吸附量的影响 
(1)原料的采集及预处理:于7月下旬采摘甘薯茎叶,采摘部位为藤蔓顶端10cm部位。将新鲜的甘薯茎叶洗净、沥干后,切成1cm的小段,放入托盘中于-40℃冰箱里预冻24h,取出放入冷冻干燥机,干燥处理48小时后,采用万能粉碎机粉碎,过40目筛,制得甘薯茎叶干粉,作为以下实验原料; 
(2)多酚的粗提取:称取步骤(1)中的甘薯茎叶干粉0.5g,按照料液比1:20加入70%的乙醇溶液10mL,混匀,于超声波清洗机中超声浸提30min,提取后7000r离心10min,收集上清液,残渣重复提取两次,合并上清液,旋转蒸发去除乙醇后,得甘薯茎叶多酚粗提液; 
(3)用蒸馏水调整步骤(2)所得多酚粗提液至50mL(控制总酚浓度一定,为 1mg/mL),分别调节pH值为2.0、3.0、5.0、6.0、7.0和8.0,各加入预处理好的AB-8的大孔吸附树脂2g,于恒温震荡器中,25℃、130r/min震摇24h,进行静态吸附,3h后测定吸附剩余液总酚浓度,根据下式计算树脂吸附量,确定多酚粗提液最佳pH值。 
A ( mg / g ) = V 0 ( C 0 - C 1 ) M - - - ( 1 )
式中:A为树脂吸附量即单位质量树脂吸附的多酚的量,mg CGA/g; 
C0为吸附前样品溶液总酚浓度,mg CGA/mL; 
C1为吸附后溶液中总酚浓度,mg CGA/mL; 
M为树脂质量,g; 
V0为吸附样液的体积,mL; 
结果如图2和表1所示,由结果可知,样品溶液的初始pH≤3.0时,树脂的吸附量较大,随着溶液初始pH值的增大,树脂的吸附量不断减少,这是因为多酚类物质具有一定的极性和酸性,在酸性体系中,多酚类物质呈分子状态,利于大孔树脂的吸附,在碱性条件下为离子状态,不利于吸附。另外,样品溶液初始pH值为2.0和3.0时,树脂吸附量没有显著性差异,因此确定样品溶液的最佳初始pH值为3.0,此时树脂的吸附量为24.67mg/g。 
表1甘薯茎叶多酚粗提液pH值对树脂吸附量的影响 
Figure DEST_PATH_GDA0000368567400000042
实施例2、多酚粗提总酚浓度对AB-8大孔吸附树脂吸附量的影响 
按照实施例1中(1)、(2)步骤,用蒸馏水调节各溶液总酚浓度分别为0.02、0.50、1.00、1.50、2.00和2.50mg CGA/mL,并将各溶液pH值固定为3,按照实施例1步骤(3)的方式进行吸附,考察粗提液不同总酚浓度对树脂吸附量的影响。 
结果如图3和表2所示,可知,多酚粗提液总酚浓度低于2.00mg CGA/mL时,树脂吸附量随着样品浓度的增加而增加,样品浓度为2.00mg CGA/mL时树脂达到最大吸附量27.38mg CGA/g,而当样品浓度继续增加时,树脂的吸附量不再增加,反而有下降趋势,这可能是因为当样品浓度较低时,树脂未达到吸附平衡,随着样品浓度的增加吸附量也增加,当样品浓度达到一定值时,树脂吸附达到饱和,继续增加样品浓度,越来越多的杂质吸附在树脂上,不利于多酚的吸附。因此确定多酚粗提液最佳总酚浓度为2.00mg CGA/mL。 
表2甘薯茎叶多酚粗提液总酚浓度对树脂吸附量的影响 
Figure DEST_PATH_GDA0000368567400000043
实施例3、乙醇解吸液质量浓度对AB-8大孔吸附树脂解吸率的影响 
按照实施例1中(1)、(2)步骤制得甘薯茎叶多酚粗提液,调节溶液的pH值至3.0、总酚浓度为2.00mg/mL备用。按照实施例1步骤(3)的方式进行吸附,吸附饱和后,用适量蒸馏水洗去杂质,分别加入50mL浓度为30、50、70、90、100%的乙醇解吸液,于恒温震荡器中,25℃、130r/min震摇24h对各树脂进行解吸,测定解吸液中总酚浓度,按下式计算解吸率。考察不同乙醇解吸液浓度对树脂解吸率的影响。 
D ( % ) = C 2 V 2 V 0 ( C 0 - C 1 ) - - - ( 2 )
式中:D为解吸率,%; 
C0为吸附前样品溶液总酚浓度,mg CGA/mL; 
C1为吸附后溶液中总酚浓度,mg CGA/mL; 
V0为吸附样液的体积,mL; 
C2为解吸后溶液总酚浓度,mg CGA/mL; 
V2为解吸液体积,mL。 
结果如表3所示,可知,随着乙醇浓度增加,从30%到70%,树脂解吸率不断增加,乙醇浓度为70%时解吸率最大,为90.15%。乙醇浓度继续增加,树脂解吸率没有显著性差异,并有下降的趋势。这可能是因为乙醇浓度过低,多酚类物质无法充分溶出,解吸不充分,乙醇浓度过高,溶液极性过强,而多酚类物质是弱极性物质,根据相似相溶原理,多酚类物质无法在高浓度的乙醇溶液充分溶出,所以乙醇解吸液的最佳浓度为70%。 
表3乙醇机解吸液质量浓度对树脂解吸率的影响 
Figure DEST_PATH_GDA0000368567400000052
实施例4、进样流速对树脂吸附量的影响 
按照实施例1中(1)、(2)步骤制得甘薯茎叶多酚粗提液,调节溶液的pH值至3.0、总酚浓度为2.00mg/mL备用。将10g预处理好的AB-8大孔树脂采用湿法填装法装入15mL(1×10cm)树脂柱中(BV=10mL)。采用数显恒流泵控制进样流速分别为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL/min将50mL多酚粗提液注入树脂柱中,测定流出液总酚浓度,根据公式(1)计算不同进样流速对树脂吸附量的影响,如图4所示。 
结果如表4所示,可知进样流速较低时,树脂的吸附量较高,随着进样流速的增大,树脂的吸附量降低。这是因为,流速过快树脂尚未及时吸附,甘薯茎叶多酚既已随溶液流出;但若进样流速过低,生产周期长,影响生产效率,且进样流速为0.5和1.0mL/min,树脂的吸附量并无显著差异,故选择1.0mL/min为最佳进样流速。 
表4进样流速对树脂吸附量的影响 
Figure DEST_PATH_GDA0000368567400000061
实施例5、洗脱流速对AB-8大孔吸附树脂吸附量和解吸率的影响 
按照实施例1中(1)、(2)步骤制得甘薯茎叶多酚粗提液,按照实施例4中将制备好的多酚粗提液50mL,以流速1.0mL/min注入树脂柱中,吸附后,测定流出液总酚浓度,将30mL蒸馏水以1.0mL/min的流速注入树脂柱中,洗去杂质,重复清洗1次。将50mL70%的乙醇解吸液分别以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL/min的流速解吸各吸附饱和树脂,测定流出液总酚浓度,按照公式(2)计算不同洗脱流速下树脂的解吸率,如图4所示。 
结果见表5,可知较低的洗脱流速可以使树脂解吸较完全,树脂解吸率随着洗脱流速的增加而降低。这是因为,较低的洗脱流速可以延长乙醇溶液在柱床中的停留时间,使其充分浸入树脂微孔中,将树脂吸附的甘薯茎叶多酚洗脱下来。但流速过低影响生产效率,且洗脱流速分别为0.5、1.0、1.5mL/min时,树脂的解吸率没有显著差别, 
考虑到工艺的连续性,因此选择与进样流速相配套的1.0mL/min为最佳洗脱流速。 
表5洗脱流速对树脂解吸率的影响 
Figure DEST_PATH_GDA0000368567400000062
实施例6、最佳工艺条件下AB-8树脂的处理量 
按照实施例1中(1)、(2)步骤制得甘薯茎叶多酚粗提液,调节总酚浓度为2.0mg CGA/mL,pH值为3.0。将预处理好的AB-8大孔吸附树脂湿法填装法装入树脂柱中,柱床体积为10mL。以1mL/min的流速将多酚粗提液注入树脂柱中,进行吸附。每5mL收集一次流出液,测定流出液中总酚浓度,当流出液总酚浓度为初始溶液浓度的1/10时,认为甘薯茎叶多酚已透过,即树脂达到吸附平衡。 
结果见表6,可知,进样量达到5BV时,流出液总酚浓度为0.2mg CGA/mL,为吸附前溶液总酚浓度的1/10,达到吸附平衡。AB-8大孔树脂可动态处理约5BV的甘薯茎叶多酚粗提液。 
表6AB-8大孔吸附树脂的动态吸附性能 
实施例7、达到解吸平衡所需乙醇解吸液的量 
按照实施例1中(1)、(2)步骤制得甘薯茎叶多酚粗提液,调节总酚浓度为2.0mg  CGA/mL,pH值为3.0。将5BV甘薯该溶液以1.0mL/min的流速注入填装AB-8大孔吸附树脂的树脂柱中,吸附后用3BV的蒸馏水清洗树脂柱2次,再用70%的乙醇解吸液以1.0mL/min流速充分解吸,每5mL收集一次流出液,测定流出液中总酚浓度,确定达到解吸平衡时乙醇解吸液的用量。 
结果见表7,可知被解吸的多酚主要集中在0~2.0BV解吸液中,可得少量的解吸液既可将吸附在AB-8大孔树脂的大部分甘薯茎叶多酚解吸下来,解吸液用量为3BV时,达到解吸平衡。 
表7AB-8大孔吸附树脂动态解吸性能 
实施例8、西蒙1号甘薯茎叶多酚的制备 
(1)原料的采集:于7月下旬采摘西蒙1号甘薯茎叶,采摘部位为藤蔓顶端15cm部位; 
(2)预处理:将新鲜的西蒙1号甘薯茎叶洗净、沥干后,切成1cm的小段,放入托盘中于-40℃冰箱里预冻24h,取出放入冷冻干燥机,于-40℃下干燥处理48小时后,采用万能粉碎机粉碎,过40目筛,制得甘薯茎叶干粉; 
(3)多酚的粗提取:称取步骤(2)中的甘薯茎叶干粉,按照料液比1:20加入70%的乙醇溶液,混匀,于超声波清洗机中超声浸提30min,提取后7000r离心10min,收集上清液,残渣重复提取2两次,合并上清液,旋转蒸发去除乙醇后既得甘薯茎叶多酚粗提液; 
(4)采用蒸馏水调节步骤(3)所得的甘薯茎叶多酚粗提液体积,使溶液总酚浓度为2.00mg CGA/mL,用1mol/L的HCl溶液和1mol/L的NaOH溶液调节粗提液的pH值为3.0,采用数显恒流泵控制流速为1.0mL/min,将5倍于树脂柱床体积的多酚粗提液泵入填装预处理好的AB-8大孔吸附树脂的树脂柱中,进行吸附;吸附后用3倍于柱床体积的蒸馏水洗去树脂柱的杂质,共清洗2次;采用数显恒流泵控制流速为1.0mL/min,将3倍于柱床体积的70%的乙醇解吸液泵入树脂柱中,进行解吸,收集解吸流出液,50℃旋转蒸发去除乙醇后,-40℃预冻处理24h,再进行冷冻干燥处理48h,得到西蒙1号甘薯茎叶多酚纯品,如图5(a)所示。 
实施例9、渝紫7号甘薯茎叶多酚的制备 
(1)原料的采集:于7月下旬采摘渝紫7号甘薯茎叶,采摘部位为藤蔓顶端15cm部位; 
(2)预处理:将新鲜的渝紫7号甘薯茎叶洗净、沥干后,切成1cm的小段,放 入托盘中于-40℃冰箱里预冻24h,取出放入冷冻干燥机,于-60℃下干燥处理48小时后,采用万能粉碎机粉碎,过40目筛,制得甘薯茎叶干粉; 
(3)多酚的粗提取:称取步骤(2)中的甘薯茎叶干粉,按照料液比1:20加入70%的乙醇溶液,混匀,于超声波清洗机中超声浸提30min,提取后7000r离心10min,收集上清液,残渣重复提取2两次,合并上清液,旋转蒸发去除乙醇后既得甘薯茎叶多酚粗提液; 
(4)采用蒸馏水调节步骤(3)所得的甘薯茎叶多酚粗提液体积,使溶液总酚浓度为2.00mg CGA/mL,用1mol/L的HCl溶液和1mol/L的NaOH溶液调节粗提液的pH值为3.0,采用数显恒流泵控制流速为1.0mL/min,将5倍于树脂柱床体积的多酚粗提液泵入填装预处理好的AB-8大孔吸附树脂的树脂柱中,进行吸附;吸附后用3倍于柱床体积的蒸馏水洗去树脂柱的杂质,共清洗2次;采用数显恒流泵控制流速为1.0mL/min,将3倍于柱床体积的70%的乙醇解吸液泵入树脂柱中,进行解吸,收集解吸流出液,50℃旋转蒸发去除乙醇后,-40℃预冻处理24h,再进行冷冻干燥处理48h,得到渝紫7号甘薯茎叶多酚纯品,如图5(b)所示。 
对上述实施例8中制备所得的产品的对多酚纯度、得率、抗氧化活性进行测定,结果如表8、9、10所示。 
具体方法如下: 
(1)制备所得样品中多酚纯度和得率按下式计算: 
P ( % ) = CV 10 M × 100 %
式中:M为称取所制备样品的质量,g; 
V为Mg样品溶解后溶液的体积,mL; 
C为Mg样品配制成V体积溶液的总酚浓度,mg CGA/mL。 
甘薯茎叶多酚得率按下式计算: 
Y ( % ) = PM 1 M 0 × 100 %
式中:Y为多酚得率,%; 
M0为甘薯茎叶干粉质量,g; 
M1为M0g甘薯茎叶干粉经提取纯化后所得样品的质量,g; 
P为所得样品的多酚纯度,%。 
(2)抗氧化活性测定方法 
1)DPPH自由基清除力 
用蒸馏水将制备所得样品配制成不同质量浓度的溶液,取一定量溶液加入等体积2×10-4M DPPH-乙醇溶液,室温避光反应30min后,于517nm处测定溶液的吸光值。 
清除率计算公式如下: 
清除率(%)=[1-(A1-A2)/A0]×100% 
式中:A0为等体积蒸馏水和DPPH-乙醇溶液的吸光值; 
A1为等体积样品溶液与DPPH-乙醇溶液的吸光值; 
A2为等体积样品溶液与蒸馏水的吸光值。 
2)三价铁离子还原力 
150μL不同浓度的甘薯茎叶多酚溶液,加入2850μL FRAP溶液,室温下避光反应30min,593nm下测定各溶液吸光值。FRAP溶液的配制为:300mM的醋酸缓冲溶液(pH=3.6)、10mM TPTZ溶液、20mM的FeCl3溶液体积比为10:1:1混合,37℃水浴反应30min。以FeSO4在0.2-1.0mmol/L的浓度范围内建立标准曲线。样品溶液的抗氧化活性表示为mmol FeSO4/mL。 
表8两种甘薯茎叶多酚纯度、得率 

Claims (10)

1.一种甘薯茎叶多酚的制备方法,包括如下步骤:
(1)采摘新鲜的甘薯茎叶,依次经洗净、干燥和粉碎后得到甘薯茎叶干粉;
(2)用乙醇水溶液a对所述甘薯茎叶干粉进行超声浸提;经离心,收集上清液,去除乙醇得到甘薯茎叶多酚粗提液;
(3)调整所述甘薯茎叶多酚粗提液的总酚浓度和pH值,然后泵入至大孔吸附树脂中;经吸附后,用水清洗所述大孔吸附树脂,然后用乙醇水溶液b对所述大孔吸附树脂进行解吸,收集解吸液,去除乙醇即得所述甘薯茎叶多酚。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述甘薯茎叶取自西蒙1号或渝紫7号甘薯的茎叶;
所述甘薯茎叶取自甘薯藤蔓顶端10~15cm的部位。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述干燥的方式为热风干燥或冷冻干燥;
所述冷冻干燥的温度为-60~-40℃,所述冷冻干燥的时间为36~60小时。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其特征在于:所述甘薯茎叶干粉的粒度为30~50目。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述乙醇水溶液a的质量浓度为50~90%;和/或,
所述甘薯茎叶干粉与所述乙醇水溶液a的料液比为:1g:10~40mL;和/或,
所述超声浸提的时间为20~60min;和/或,
所述离心的转数为3000~7000r,时间为10~30min。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法,其特征在于:步骤(2)中,所述方法还包括对所述离心后的残渣进行浸提1~3次的步骤。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述甘薯茎叶多酚粗提液的总酚浓度为1.50~3.00mg CGA/mL,其中,CGA表示绿原酸;和/或,
所述甘薯茎叶多酚粗提液的pH值为2.0~4.0。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述大孔吸附树脂的型号为AB-8、NKA-2、NKA-9、D101、S-8或LX-18;和/或,
所述甘薯茎叶多酚粗提液的进样流速为1.0~2.0mL/min;和/或,
所述乙醇水溶液b的质量浓度为60~90%,所述乙醇水溶液b进行解吸时的流速为1.0~2.0mL/min。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述大孔吸附树脂的柱床体积与所述甘薯茎叶多酚粗提液的比为1:3~5;
所述大孔吸附树脂的柱床体积与所述乙醇水溶液b的体积比为1:3~5。
10.权利要求1-9中任一项所述方法制备的甘薯茎叶多酚。
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