CN103393702B - 一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,所述药物组合物由活性成分和辅料组成;所述活性成分由牛磺酸、蛋黄卵磷脂、乙酰左旋肉碱和石杉碱甲组成;所述辅料由乳糖、MCC和硬脂酸镁或由乳糖和硬脂酸镁组成。本发明的有益效果为:本发明提供的一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物从为神经细胞提供必需营养素,清除自由基,补充神经递质乙酰胆碱前体以及调节中枢胆碱能系统功能等不同的作用机制出发,综合作用于机体,体现了联合用药的优势,达到改善急进高原人群记忆力的效果。

Description

一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及药品领域,具体涉及一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物及其制备方法。
背景技术
世居平原人群进入高原后常因低气压、低氧导致一系列急性高原反应,包括头晕、心慌、恶心、失眠、记忆力减退等症状,对于未进行高原阶梯习服而直接快速进入高原的人群,上述症状更为明显。
动物模型实验和急进高原人群临床影像学研究均表明,急性低压低氧可导致大脑海马神经元的损伤。在此种病理改变的基础上,急进高原人群可出现认知功能障碍,包括学习障碍、记忆困难、注意力缺陷等,尤其是海拔高于4000m以后,急进高原人群大脑的记忆力会迅速降低,并最终导致职业技能水平的显著下降。
高原阶梯习服结合适应性体格锻炼是促进高原适应的有效措施,但对于低压低氧所致记忆力减退的预防保护作用不明显,特别是对于急进高原人群记忆力的保持效果不显著。此外,针对需要快速进入高原的人群给予口服一些抗高原缺氧药物已被广泛采纳,如CN1985888公开了一种提高缺氧耐受力的药物,主要由党参提取物、丹参提取物、北沙参提取物、当归提取物和西洋参提取物制成;CN1957968公开了一种防治高原反应症的药物组合,主要由红景天、红毛五加、藏红花组成;CN102228501公开了一种抗缺氧的中药组合物,主要由蔷薇红景天、冰片组成。但是上述抗高原缺氧药物对于急性低压低氧造成的记忆力减退的改善作用仍不显著。因此,如何预防或治疗急性低压低氧所致的大脑认知功能障碍是我们必须面临和解决的重大问题。
近年来,随着高原旅游、登山运动、高原救援、高原边防等短期高原活动不断增多,迫切需要一种能够与抗高原缺氧药物互补的药物,此类药物能够在维持或增强记忆力方面发挥作用,起到提高急进高原人群职业技能水平的作用。
发明内容
本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷,提供了一种主要针对急进高原人群在快速进行高原后产生的记忆力减退症状,具有良好的健脑益智、增强记忆力的作用的药物组合物。
为了实现上述目的,本发明提供的技术方案为:一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,所述药物组合物由活性成分和辅料组成;所述活性成分由牛磺酸、蛋黄卵磷脂、乙酰左旋肉碱和石杉碱甲组成;所述辅料由乳糖、微晶纤维素(MCC)和硬脂酸镁或由乳糖和硬脂酸镁组成。
进一步的,上述的一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,所述活性成分按重量份计为牛磺酸20-35份,蛋黄卵磷脂20-35份,乙酰左旋肉碱5-15份,石杉碱甲0.1-0.5份,其余为辅料30-45份。
进一步的,上述的一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,所述辅料按重量份计为乳糖70份,MCC25份和硬脂酸镁5份或乳糖95份和硬脂酸镁5份。
本发明的第二个目的是提供了一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物的制备方法,是将上述的活性成分和部分辅料混合均匀,以水润湿后过筛并干燥,再次过筛后加入其余辅料混合均匀制得;所述部分辅料为乳糖和MCC或乳糖,所述其余辅料为硬脂酸镁。
进一步的,上述的一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物的制备方法,所述过筛目数为80-100目,所述部分辅料中,按重量份计乳糖70份和MCC25份或乳糖95份,其余辅料中,硬脂酸镁5份。
本发明的有益效果为:本发明提供的一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物由牛磺酸、卵磷脂、乙酰左旋肉碱、石杉碱甲组成,它从为神经细胞提供必需营养素,清除自由基,补充神经递质乙酰胆碱前体以及调节中枢胆碱能系统功能等不同的作用机制出发,综合作用于机体,体现了联合用药的优势,达到改善急进高原人群记忆力的效果。
牛磺酸在体内以游离状态存在,不参与体内蛋白的生物合成,但它却与胱氨酸、半胱氨酸的代谢密切相关。人体合成牛磺酸的半胱氨酸亚硫酸羧酶活性较低,主要依靠摄取食物中的牛磺酸来满足机体需要。牛磺酸可提高神经传导速度,对大脑的学习与记忆能力具有明显的促进作用,适量补充牛磺酸可提高大脑学习记忆的速度和准确性。
卵磷脂含有神经传递物质“乙酰胆碱”的前体“胆碱”,人体大脑乙酰胆碱含量增加能使大脑神经细胞信息传递迅速,有助于提高大脑细胞的活性化程度。卵磷脂及胆碱可穿过血脑障壁,适量补充卵磷脂,可提高记忆与智力水平。
乙酰左旋肉碱在细胞呼吸中能够传递脂肪酸进入粒线体产生能量体ATP,还具有对抗细胞氧化应激、清除氧自由基的作用,并且是神经传递物质“乙酰胆碱”的前体,可穿过血脑障壁。适量补充乙酰左旋肉碱有助于提高大脑记忆力水平。
石杉碱甲是一种选择性胆碱酯酶抑制剂,易透过血脑屏障,能与乙酰胆碱酯酶可逆性的结合而抑制其活性,达到使神经传递物质乙酰胆碱在突触处的积累,延长并增加了乙酰胆碱的作用。临床上用于治疗重症肌无力和老年性痴呆。
具体实施方式
实施例1:
一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,包括,活性成分牛磺酸,蛋黄卵磷脂,乙酰左旋肉碱和石杉碱甲共计300mg;辅料乳糖124mg,MCC46mg,硬脂酸镁8mg,将活性成分、乳糖、MCC混合均匀,用水润湿,润湿后的混合物过筛并干燥,过筛,加入硬脂酸镁,混合均匀,压片。
每单位剂型含有效成分:牛磺酸128mg;蛋黄卵磷脂128mg;乙酰左旋肉碱44mg;石杉碱甲0.8mg。
以下通过药效学试验证明本发明药物的有益效果:
(一)材料与方法
一、药物:
实施例1所配制药物组合物;
红景天苷,纯度>90%(HPLC)。
二、实验动物筛选及分组:
健康雄性Sprague-Dawley大鼠,清洁级,体重280±25g。用Morris水迷宫对大鼠进行筛选,从隐藏平台对侧将大鼠面向池壁放入水中,如果大鼠在120s内未找到隐藏平台则淘汰。将筛选出的60只大鼠随机分为6组,包括常氧对照组(生理盐水)、低压低氧组(生理盐水)、低压低氧+阳性对照组(红景天苷50mg/kg)、低压低氧+实施例1组合物低剂量组(25mg/kg)、低压低氧+实施例1组合物高剂量组(50mg/kg)、常氧+实施例1组合物高剂量对照组(50mg/kg)。
三、给药方案:
将药物配制成生理盐水混悬液(10mg/ml),模拟急性低压低氧损伤前1d,按照实验分组剂量灌胃给药,每日一次,直至实验大鼠被处死。常氧对照组、低压低氧组灌胃给予生理盐水。低压低氧饲养期间减压至3000m海拔后给药,随后立即恢复至6000m海拔。
四、急性低压低氧所致大鼠学习记忆障碍模型的建立:
将低压低氧组、低压低氧+阳性对照组、低压低氧+实施例1组合物低剂量组、低压低氧+实施例1组合物高剂量组大鼠置于高原环境模拟舱内,以40m/s的速度急进升至海拔6000m,自然24h昼夜交替,并不间断的以20m3/h的速度注入新鲜空气以提供饲养动物所需的氧气同时排出二氧化碳,舱内温度维持在24±2℃,湿度40%~50%,大鼠可以自由取食水。模拟急进高原饲养5d后,所有实验组大鼠进行Morris水迷宫实验。
五、Morris水迷宫实验:
实验在一屏蔽实验室内进行。定位导航测试:用于测量大鼠对水迷宫学习记忆的获取能力。每天训练4次,分别从四个不同的入水点将大鼠面向池壁放入水中,平台总位于对侧象限,如果大鼠在60s内未找到平台(逃避潜伏期记为60s),需将其引至平台,大鼠站立于平台10s后,将大鼠从平台上取下来休息60s,按序由下一象限入水进行下一次试验。观察并记录5d训练期间大鼠每次寻找平台所需的逃避潜伏期(s)及游泳总路程(cm)。空间探索试验:用于测量大鼠学会寻找平台后,对平台空间位置记忆的保持能力。第5d定位导航测试完毕后,撤除平台,选择第3象限池壁中点作为入水点,将大鼠面向池壁放入水中,测其在60s内跨过目标象限平台,即原平台相应位置的次数(次)和原平台所在象限滞留时间(s)。
六、海马组织氧化应激指标检测:
水迷宫实验完成后,各实验组大鼠迅速断头剥脑取大脑海马组织,称重后将组织放入匀浆器中,按1ml/0.1g的比例加入冰冷的0.9%生理盐水(或试剂盒要求的组织裂解液),上下移动匀浆棒至匀浆液均一(冰上操作),将匀浆液放入离心机中4℃、4000g离心15min,取上清液备用,-80℃冻存。
采用荧光比色技术检测海马组织匀浆上清中活性氧(ROS)的水平,酶比色法检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活力,操作过程严格按照试剂盒说明书进行(组织匀浆中总蛋白含量测定采用BCA蛋白定量法)。
七、海马组织胆碱能指标检测:
上述海马组织匀浆上清继续用于海马组织胆碱能指标检测。采用荧光比色法检测海马组织匀浆上清中乙酰胆碱(ACh)的水平和酶比色法检测胆碱酯酶(AChE)和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)的活性,操作过程严格按照试剂盒说明书进行。
八、统计分析:
采用SPSS13.0统计软件进行处理,数据以±s表示,多组间数据采用单向方差分析(one-wayANOVA),组间多重比较采用LSD法,P<0.05为差异有统计学意义。
(二)实验结果:
一、Morris水迷宫实验结果:
如表1急性低压低氧对大鼠Morris水迷宫定位导航实验结果的影响(±s,n=10)所示,在定位导航测试中,随训练时间延长各组大鼠的逃避潜伏期逐渐缩短,低压低氧组大鼠的平均逃避潜伏期和平均游泳总路程均较长于对照组(P<0.01),即需要花费更长时间与路程才能找到平台,表明急进高原导致大鼠的学习能力下降。低压低氧+阳性对照组(红景天苷)平均逃避潜伏期和平均游泳总路程与低压低氧组相比没有统计学差异(P>0.05),表明抗急性高原反应药物红景天苷未能显著缓解急性低压低氧所致的学习能力下降。低压低氧+实施例1组合物高剂量组平均逃避潜伏期和平均游泳总路程与低压低氧组相比具有统计学差异(P<0.01),而低压低氧+实施例1组合物低剂量组差异不显著(P>0.05),表明实施例1组合物(50mg/kg)可有效缓解急性低压低氧所致的学习能力下降。
如表2急性低压低氧对大鼠Morris水迷宫空间探索试验结果的影响(±s,n=10)所示,在空间探索试验中,与对照组相比,低压低氧组大鼠在60s内穿越平台次数明显减少(P<0.05),目标象限滞留时间明显减少(P<0.05),表明急性低压低氧导致大鼠的空间记忆能力下降。低压低氧+阳性对照组(红景天苷)60s内穿越平台次数和目标象限滞留时间与低压低氧组相比没有统计学差异(P>0.05),表明抗急性高原反应药物红景天苷未能显著缓解急性低压低氧所致的空间记忆能力下降。低压低氧+实施例1组合物高剂量组60s内穿越平台次数和目标象限滞留时间与低压低氧组相比具有统计学差异(P<0.01),低压低氧+实施例1组合物低剂量组目标象限滞留时间具有统计学差异(P<0.05),表明实施例1组合物(50mg/kg)可有效缓解急性低压低氧所致的空间记忆能力下降。
其中,** P<0.01vs低压低氧组;## P<0.01vs常氧对照组。
其中,* P<0.05vs低压低氧组,** P<0.01vs低压低氧组;## P<0.01vs常氧对照组。
二、氧化应激指标检测结果:
如表3急性低压低氧对大鼠海马组织氧化应激指标的影响(±s,n=10)所示,与对照组相比,低压低氧组大鼠海马组织中ROS、MDA含量明显增加(P<0.01),GSH含量、SOD活力均明显降低(P<0.01),表明急性低压低氧可造成大鼠海马神经元氧化应激损伤。低压低氧+阳性对照组(红景天苷)ROS、MDA含量与低压低氧组相比显著降低(P<0.05),GSH含量、SOD活力显著升高(P<0.05),表明抗急进高原反应药物红景天苷可缓解急性低压低氧所致的大鼠海马神经元氧化应激损伤。低压低氧+实施例1组合物低剂量组大鼠海马组织中ROS、MDA含量与低压低氧组相比明显降低(P<0.05),GSH含量、SOD活力均明显升高(P<0.05),低压低氧+实施例1组合物高剂量组大鼠海马组织中ROS、MDA含量与低压低氧组相比明显降低(P<0.01),GSH含量、SOD活力均明显升高(P<0.01),表明实施例1组合物(25、50mg/kg)可有效缓解急性低压低氧造成的大鼠海马神经元氧化应激损伤。
其中,* P<0.05vs低压低氧组,** P<0.01vs低压低氧组;## P<0.01vs常氧对照组。
三、胆碱能指标检测结果:
如表4急性低压低氧对大鼠海马组织胆碱能指标的影响(±s,n=10)所示,与常氧对照组相比,低压低氧组大鼠海马组织中ACh含量与ChAT活力明显降低、AChE活力明显升高(P<0.01),表明急性低压低氧可造成大鼠大脑海马胆碱能系统功能低下。与低压低氧组比较,低压低氧+阳性对照组(红景天苷)ACh含量、ChAT活力、AChE活力与低压低氧组相比无统计学差异(P>0.05),表明抗急性高原反应药物红景天苷未能改善急性低压低氧所致的大鼠大脑海马胆碱能系统功能低下。低压低氧+实施例1组合物低剂量组大鼠海马组织中ACh含量、ChAT活力与低压低氧组相比均显著升高(P<0.05),AChE活力显著降低(P<0.05),低压低氧+实施例1组合物高剂量组大鼠海马组织中ACh含量、ChAT活力与低压低氧组相比均显著升高(P<0.01),AChE活力显著降低(P<0.01),表明实施例1组合物(25、50mg/kg)可有效改善急性低压低氧所致的大鼠大脑海马胆碱能系统功能低下。
(三)实验结论:
上述实验结果显示,急性低压低氧可造成实验大鼠大脑认知功能障碍,具体表现为学习寻找隐藏平台的能力降低,对于隐藏平台所在空间位置的记忆能力减退。急性低压低氧可造成实验大鼠大脑海马神经元乙酰胆碱水平降低、胆碱能系统失衡,这可能是急性低压低氧应激损害所致短暂认知功能障碍的主要原因。低压低氧后期实验大鼠大脑海马组织氧自由基水平显著升高,导致氧化应激损伤,加速神经元凋亡,这可能是低压低氧所致认知功能障碍的病理基础。
红景天苷具有抗缺氧、抗疲劳等抗高原反应作用,但是低压低氧给药组(红景天苷)对于急性低压低氧所致的认知功能障碍改善不显著。进一步的实验结果显示,红景天苷可改善急性低压低氧所致的海马神经元氧化应激损伤,而对于海马神经元乙酰胆碱水平下降没有显著的改善作用,这可能是解释红景天苷改善急性低压低氧所致认知障碍效果不显著的原因。
低压低氧给药组(实施例1组合物,50mg/kg)对于急性低压低氧所致的认知功能障碍具有显著的改善作用,可改善急性低压低氧所致的海马神经元氧化应激损伤和胆碱能功能紊乱,这可能是实施例1组合物改善急性低压低氧所致认知功能障碍的药效机制。
参照上述实验结果进行综合分析,实施例1组合物中的牛磺酸可提高神经传导速度,乙酰左旋肉碱具有对抗细胞氧化应激、清除氧自由基的作用,卵磷脂、乙酰左旋肉碱是乙酰胆碱合成的前体物质,有效保证乙酰胆碱的充足合成,石杉碱甲选择性抑制胆碱酯酶,延长并促进乙酰胆碱合成,因此,通过合理配制组合药物,充分利用四种成分的协同作用,最终达到辅助改善急性低压低氧所致认知功能障碍的功效。
以下通过临床试验证明本发明药物的有益效果:
(一)材料与方法
1、试验对象:
入选标准:
a)排除世居高原人群,以及从高原移居平原居住人群;
b)排除曾进入过3500米海拔高原者;
c)排除有急性或中重度高原反应史对象;
d)性别:男女均可;
e)年龄:一般要求18~25岁;
f)文化程度相近;
g)体重:与标准体重相差±10%以内;
h)身体健康,无心、肝、肾、消化道、代谢异常、神经系统疾病史,并进行健康检查应无异常;
i)无过敏史,无体位性低血压史;
j)一月前至试验期间不服用其他任何药物,试验期间禁烟、酒及含咖啡因的饮料;
受试对象共14人,为参照上述标准入选的自平原进驻海拔4555m7d的某部男性官兵,年龄18~22岁,文化程度均为高中,上高原前经体检确认健康。已将本试验的目的向受试者进行一对一的详细解释,采用自愿原则,签署知情同意书。
2、实验方法:依据随机数字表将受试者分为对照组、实施例1组合物组,每组7人,上高原前经测试两组间韦氏记忆量表分(Wechslermemoryscale,WMS)无显著性差异。本试验方法为自身对照研究。
3、急进高原方式:受试者从平原乘坐飞机2小时快速进入4555米高原。
4、给药方式:采用随机单盲法给药,实施例1组合物组服用本发明药物(本试验采用实施例1组合物片剂),对照组服用与实施例1组合物药物剂型、外观、包装完全相同的安慰剂。用法均为每日2次,早晚各一次,每次1片,在上高原前3天服用,疗程5天。此外,上高原前,除本试验药物外,不得给予任何预防高原反应药物。急进高原后,如发生急性高原病,该受试者自动退出本试验。
5、测试内容:受试者抵达高原6小时后,立刻开展测试。采用龚耀先等修订的韦氏成人记忆量表(WechslerMemoryScale,WMS),分为甲、乙两式,治疗前后检测分别采用WMS甲式及乙式。主要包括长时记忆测试、短时记忆测试、瞬时记忆测试。所有的测试有受过训练的神经科医生完成。
同时,受试者在高原逗留的7d内,如果出现药物不适反应,建立了随时可以联系的方式,并予以详细记录。
6、统计学方法:采用自身对照以及安慰剂对照进行分析,所有的数据均以自身配对t检验分析。
(二)结果
完成试验者14人,未发现有药物不适反应。
1、对照组受试者急进高原前后各分测量表分和记忆商量(MQ)比较(见表1)。除1→100顺数、100→1倒数、数字积累、触觉记忆等测试未见明显差异外,其余各分测验量表分以及记忆商量(MQ)均显著性降低,表明急进高原人群的记忆力显著下降。
其中,* P<0.05vs急进高原前。
2、实施例1组合物组受试者急进高原前后各分测验量表分和记忆商量(MQ)比较(见表2)。受试者急进高原前后各分测量表分以及记忆商量(MQ)均无显著性差异,表明本发明药物组合对于急进高原人群的记忆能力具有预防保护作用。
3、表3显示急进高原后实施例1组合物组与对照组受试者各分测验量表分差别和记忆商量(MQ)差别。经统计学分析,实施例1组合物组受试者较对照组受试者在大多数分测验量分以及记忆商量(MQ)增值之间比较有显著性差异,表明本发明药物组合对于急进高原人群的短时以及瞬时记忆具有明显改善作用。
其中,* P<0.05vs对照组,** P<0.01vs对照组。
(三)实验结论:
韦氏记忆量表(WMS)为国际上经典的认知测试评价工具,表信度、效度比较满意,在临床工作中得到了广泛地应用,试验结果可信度高。
本发明是一种药物组合物复方制剂,有效成分包括牛磺酸、蛋黄卵磷脂、乙酰左旋肉碱和石杉碱甲,由于各个成分已有可靠的并且经过证实的机理,其中牛磺酸可提高神经传导速度,乙酰左旋肉碱具有对抗细胞氧化应激、清除氧自由基的作用,卵磷脂、乙酰左旋肉碱是乙酰胆碱合成的前体物质,有效保证乙酰胆碱的充足合成,石杉碱甲选择性抑制胆碱酯酶,延长并促进乙酰胆碱合成。通过以上临床试验结果表明,在人体试验水平,实施例1组合物能够显著地改善认知,提高记忆力,并且安全性高,未见不良反应。
因此,本发明在临床水平证实通过合理配制,针对多个环节,充分利用四种有效成分的协同作用,最终达到预防改善急进高原所致认知功能障碍的功效。
实施例2:
一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,包括,活性成分牛磺酸,蛋黄卵磷脂,乙酰左旋肉碱和石杉碱甲共计300mg;辅料乳糖87mg,硬脂酸镁5mg,将活性成分、乳糖混合均匀,用水润湿,润湿后的混合物过筛并干燥,过筛,加入硬脂酸镁,混合均匀,装入胶囊。
每单位剂型含有效成分:牛磺酸128mg;蛋黄卵磷脂128mg;乙酰左旋肉碱44mg;石杉碱甲0.8mg。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物由活性成分和辅料组成;所述活性成分由牛磺酸、蛋黄卵磷脂、乙酰左旋肉碱和石杉碱甲组成;所述辅料由乳糖、微晶纤维素(MCC)和硬脂酸镁或由乳糖和硬脂酸镁组成;所述活性成分按重量份计为牛磺酸20-35份,蛋黄卵磷脂20-35份,乙酰左旋肉碱5-15份,石杉碱甲0.1-0.5份,其余为辅料30-45份;所述辅料按重量份计为乳糖70份,MCC25份和硬脂酸镁5份或乳糖95份和硬脂酸镁5份。
2.一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物的制备方法,其特征在于,是将权利要求1所述的活性成分和部分辅料混合均匀,以水润湿后过筛并干燥,再次过筛后加入其余辅料混合均匀制得;所述部分辅料为乳糖和MCC或乳糖,所述其余辅料为硬脂酸镁。
3.根据权利要求2所述的一种增强急进高原人群记忆力的药物组合物的制备方法,其特征在于,所述过筛目数为80-100目,所述部分辅料中,按重量份计乳糖70份和MCC25份或乳糖95份,其余辅料中,硬脂酸镁5份。
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