CN103372075A - 一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了用于抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物及其制备方法,该组合物由乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草按一定比例配制而成,其制备方法为:选取上述中药分别粉碎、过65目筛,制备单味中药普通粉;把单味中药普通粉按处方比例充分混合得到的复方中药普通粉作超微粉碎处理,使其能全部通过400目筛,分装后密封保存。应用本发明制备的制剂,药物的粒径明显变小,细胞破壁率、有效成分的释出速度显著提高,提高了药物的生物利用度,药效学研究结果表明,采用超微粉碎工艺制备的制剂与传统工艺制备的制剂相比,防治鸡大肠杆菌病的效果显著提高。此外,可以直接用于饮水使用,改变了中药散剂只能拌料不能饮水的服用方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种中兽药组合物,特别是涉及一种防治鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,同时还涉及该复方超微粉组合物的制备方法和应用。
背景技术
大肠埃希氏菌(Escherichia coli,E coli)为肠道内的正常寄生菌,在特定条件下,某些血清型的大肠杆菌能够引起一系列的感染,在鸡表现为呼吸道及软组织的感染,造成败血症、气囊炎、肝周炎、心包炎、脐炎、关节炎、脑炎等,给养禽业造成严重损失。其中大肠杆菌败血症是最常见的类型,常见于鸡和火鸡。传染性或非传染性因素损伤呼吸道粘膜后,大肠杆菌进入血液循环。鸡大肠杆菌病(Chicken Colibacillosis)发病率高,常继发于鸡慢性呼吸道病、新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病、球虫病、支原体,而使死亡率、发病率升高。在集约化养鸡场,大肠杆菌病已成为危害鸡群主要疾病之一,严重阻碍了养禽业的健康发展。
目前药物防治仍是控制鸡大肠杆菌病的主要手段,但由于抗菌药物的滥用及不正确使用使该菌的耐药性越来越严重。大肠杆菌耐药性的逐年增高一方面为该病的防治带来了极大的困难,另一方面为了杀灭耐药菌株,必须加大药物的剂量,药物残留问题越来越突出。
我国应用中药防治人畜的各种疾病已有2000多年的历史,积累了丰富的中医药知识和临床经验。中药属于纯天然物质,与抗生素、化学合成药物相比,具有毒副作用小、不易残留、不污染环境、抗药性不明显等特点,深受广大兽医工作者和养殖户的欢迎。利用先进的超微粉碎技术,在传统经典处方的基础上,根据临床症状筛选并加以改进后,研制开发兽用天然药物超微粉制剂,是对原有中药制剂研制的一次革命。该类制剂与传统中药散剂相比,具有有效成分释放速度快、生物利用率高、临床应用效果显著、单位公斤体重用量少等特点。利用现有的先进技术,大力开展防治鸡大肠杆菌病的中药研究,不仅可以缓解长期困扰畜牧业发展的抗生素残留问题,提高生产率,减少环境的污染,发展绿色畜牧业,而且可以满足人民的食品安全需求,具有重要的经济意义和社会效益。
发明内容
为了解决以上化学药物和抗生素可能引起药物残留、耐药性,传统中药散剂用量大、费用高、不能使药效得到充分发挥的问题,本发明提供了一种天然、无药残、无毒副作用、服用量减少、疗效好的一种防治鸡大肠杆菌病有显著防治效果的中药组合物及其制备方法和应用。
为了实现上述目的,本发明采取如下的技术方案:
本发明的复方中药超微粉组合物,其特征在于它由下述重量份的药物原料制成:乌梅40-60重量份、黄芩30-50重量份、大黄20-30重量份、苦参20-30重量份、大青叶15-25重量份、石榴皮15-20重量份、甘草10-20重量份。
优选地,乌梅50重量份、黄芩40重量份、大黄30重量份、苦参20重量份、大青叶20重量份、石榴皮20重量份、甘草10重量份。
本发明复方中药超微粉组合物的制备方法,包括如下步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取配方量的乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:单味中药普通粉按重量配比混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
辩证施治是中兽医学的最基本特点之一。中兽医学的“征候”是疾病发生、发展和转归过程中,机体在各种致病性或非致病性因素、环境因素、生物学因素及气候变化因素等各个因素相互作用的产物。鸡大肠杆菌病是湿热壅积肠道的里热症,由疫毒内侵、肺胃热盛、血淤气滞引起,大肠杆菌侵入机体后,产生毒素,造成肝脏等脏器损伤,临诊严重下痢。治疗应侧重于清血分热,以清热生津,燥湿解毒为主。本发明的复方中药超微粉组合物以乌梅、黄芩等具有较好抗菌作用的中药为主,又以具有清热解毒,燥湿止痢,凉血止血作用的中药为辅,石榴皮具有涩肠止血的功效以及甘草具有补中消食、促进消化的功能亦为辅药,同时甘草又能调和诸药,缓急止痛,故又为使药。
本发明与现有技术相比,具有以下优点和效果:
(1)提高中药有效成分的生物吸收与利用率。中药材细胞经超微粉碎破壁后,破壁细胞中的内容物可直接接触溶媒,其有效成分可直接进入溶媒,而一般粉碎颗粒中多数细胞是完整的,其粒子由数个、数十个甚至更多的细胞组成。细胞中有效药用成分的溶出需穿过数个或数十个细胞壁才能进入溶媒中,而后被机体吸收。因此,中药超微粉有效成分释出量与释出速度,单位时间内机体吸收药物有效成分的量均会比中药普通粉高。药物起效时间会显著缩短,药物对机体的作用更全面,从而明显提高中药的生物利用度。
(2)提高复方制剂的均匀度。现行生产工艺一般是由粉碎与搅拌混合两道工序完成,得到的制剂均匀度较难控制,从而使产品质量受到影响。应用超微粉碎技术,可使粉碎和混合同步完成,而且粉碎细度一般可达10μm以下,粒径均匀,无过大过小现象,产品均匀度极大提高
(3)改善兽用中药的品质及添加范围。中药经过超微粉碎时,与细胞尺度相当的虫卵也会被杀死,从而减轻了虫害对中药材的污染与损害。超微粉碎加工是纯物理过程,不会混入其它杂质,使得加工后的中药具有纯天然性。中药经超微粉碎后,颗粒很细,既可直接溶于动物饮水中,也可作为饲料添加剂使用。
(4)节省药材,提高药材利用率。药材经超微粉碎后,可用较小的剂量获得原处方的疗效。根据药材性质和粉碎程度不同,一般可节省药材30%~70%。因此服用剂量减少,降低了成本,节省了药材资源。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步的说明,但并不局限于此,本领域技术人员在不脱离本发明的基本技术思想前提下,所作出的修改、替换、变更均落入本发明的保护范围。
实施例1
一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,原料药的重量配比如下:
乌梅50重量份、黄芩40重量份、大黄30重量份、苦参20重量份、大青叶20重量份、石榴皮20重量份、甘草10重量份。
本发明散剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取配方量的乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:单味中药普通粉按重量配比混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
实施例2
一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,原料药的重量配比如下:
乌梅40重量份、黄芩30重量份、大黄30重量份、苦参25重量份、大青叶25重量份、石榴皮20重量份、甘草20重量份。
本发明散剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取配方量的乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:单味中药普通粉按重量配比混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
实施例3
一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,原料药的重量配比如下:
乌梅60重量份、黄芩40重量份、大黄25重量份、苦参20重量份、大青叶15重量份、石榴皮20重量份、甘草10重量份。
本发明散剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取配方量的乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:单味中药普通粉按重量配比混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
实施例4
一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,原料药的重量配比如下:
乌梅50重量份、黄芩35重量份、大黄30重量份、苦参30重量份、大青叶20重量份、石榴皮15重量份、甘草10重量份。
本发明散剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取配方量的乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:单味中药普通粉按重量配比混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
实施例5
一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,原料药的重量配比如下:
乌梅40重量份、黄芩50重量份、大黄20重量份、苦参25重量份、大青叶20重量份、石榴皮20重量份、甘草15重量份。
本发明散剂的制备方法,包括如下步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取配方量的乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:单味中药普通粉按重量配比混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
下面以实施例1制备的复方中药超微粉为例,通过试验进一步说明本发明所述防治鸡大肠杆菌病的复方中药超微粉制的药理作用。
试验一:复方中药的体外抑菌试验
1试验材料与方法
1.1药液制备
分别准确称取25g各味中药或复方中药,加入300ml的去离子水,浸泡30min后煎煮,沸腾后文火煎煮30min,4层纱布过滤,药渣再加入100ml去离子水煎煮30min,过滤取药液,重复2次。合并3次药液再过滤,加热浓缩至25ml,使其最终浓度为1g/ml。
1.2细菌的接种与培养
将大肠杆菌O5、O78分别接种至营养肉汤培养基中,置于37℃培养箱中培养18~24h。将培养的大肠杆菌用营养肉汤稀释后,用于涂菌。
1.3培养基的制备
取制备好的营养琼脂平板依次编号,采用灭菌棉签蘸取稀释好的菌液均匀地涂抹于培养基表面。另取一个琼脂平板不涂菌,作为空白对照。
1.3打孔、加药、培养
用直径为1cm的打孔器在涂抹菌液的培养基上快速而均匀地打孔,等距离打孔12个。打好孔的琼脂平板底部在酒精灯火焰上略微加热,使底部培养基熔化,再重新凝固而与平皿底壁紧密结合,防止加入的药液从底部的缝隙流出,以保证实验结果的准确性。另取一块琼脂平板作阳性对照。每孔加满1g/ml中药提取液,加药时注意将平板平放以防止药液溢出而影响准确性。加满药液的琼脂平板置于37℃恒温培养箱中培养24h。分别观察并测量抑菌圈直径大小,每种药液在不同的平板上重复3次,取其平均值(取整数)。以11~15mm为中度敏感;16mm以上为高度敏感。
2试验结果
试验结果表明,乌梅、黄芩提取液对鸡O5型大肠杆菌均有较好的抑菌效果,大黄、苦参、石榴皮也有一定的抑菌效果;乌梅、大黄提取液对鸡O78型大肠杆菌均有较好的抑菌效果,黄芩、石榴皮也有一定的抑菌效果。以清除病原微生物、清热解毒、增强机体免疫力为原则进行组方的复方中药也具有较好的抑菌效果。具体见表1。
表1不同中药对鸡大肠杆菌O5、O78型的抑菌圈直径(mm)
注:“-”表示无抑菌圈
试验二:复方中药超微粉混饲给药对人工诱发鸡大肠杆菌病的药效试验
1试验材料与方法
1.1动物分组与处理
随机选择180只2周龄岭南黄快大型鸡,分组与处理见表2。
表2复方中药超微粉混饲给药试验鸡的分组与处理
注:*以平均值±标准差表示
1.2人工发病
将大肠杆菌接种于肉汤培养基中,37℃培养24h。除健康对照组不接种外,每只试验鸡肌肉注射接种大肠杆菌培养物0.5ml(2倍的半数致死量,约含5.0×108cfu)。
13给药方法
攻毒后按表3.1同时在饲料中添加不同剂量的药物,供鸡只自由采食,连续用药5天。感染对照组与健康对照组不投药。观察期为接种后10天。
1.4观察内容
观察试验前后鸡只的精神状态、食欲、粪便等情况。对死鸡进行病理解剖、病原分离鉴定,并确定死因。每只鸡试验前后进行称量。
1.5药效评价标准
死亡率:在试验期间,出现鸡大肠杆菌的典型症状并死亡,尸体剖检有典型的病变特征,并从肝、脾及心脏中分离培养出大肠杆菌者判定为感染死亡。根据死亡鸡数计算各组的死亡率。
治愈率:在试验期间,经给药后精神状态、食欲恢复正常,不再出现拉稀粪等临床症状均属治愈。分别计算各组的治愈率。
有效率:经给药后,每组存活的鸡包括完全治愈的鸡和没有死亡但有临床症状表现的鸡均为有效。试验结束时,存活鸡数与试验鸡数的百分比即为有效率。
增重:根据试验开始及结束时每只鸡的体重,计算每只鸡的增重量,然后计算每组试验鸡的平均增重和标准差。相对增重率是按各试验组与健康对照组的平均增重之比计算,其中健康对照组设为100.0%。
1.6数据的分析与处理
用生物统计进行数据的显著性检查。其中死亡率、有效率及治愈率用x2检验,增重采用SAS 9.0软件进行统计分析。
2试验结果
2.1临床症状及剖检
感染对照组的30只鸡全部发病,主要临床症状如下:精神沉郁,食欲下降或废绝,羽毛松乱,两翼下垂,缩头缩颈,闭眼昏睡,不愿走动,离群呆立,拉稀粪,严重者卧地不起。对病死鸡进行剖检,主要特征是:肝脏充血、肿大易碎、肝浆膜增厚,有大量渗出物;脾肿大;心脏呈心包炎,有大量纤维素渗出物。从肝、脾、心脏中分离出大量的大肠杆菌。其它试验组的症状和剖检与对照组相似,但程度有些不同。
2.2药效试验
x2检验表明,超微粉高、中剂量组的死亡率均极显著低于感染对照组(P<0.01),超微粉低剂量组、普通粉对照组的死亡率低于感染对照组,但无显著性差异(P>0.05);超微粉高剂量组死亡率显著低于普通粉对照组(P<0.05),而其治愈率、有效率则显著高于普通粉对照组(P<0.05);超微粉中、低剂量组、普通粉对照组之间的死亡率、治愈率和有效率均无显著性差异(P>0.05)。增重数据统计分析表明,超微粉高、中剂量组、普通粉对照组的平均增重均极显著高于感染对照组(P<0.01)。具体见表3。
表3复方中药超微粉混饲给药对人工诱发鸡大肠杆菌病的药效试验
注:**表示与感染对照组相比差异极显著(P<0.01);(1)表示与普通粉对照组相比差异显著(P<0.05)。
试验三:中西复方超微粉饮水给药对人工诱发鸡大肠杆菌病的药效试验
1试验材料与方法
1.1动物分组与处理
随机选择240只2周龄岭南黄快大型鸡,分组与处理见表4。
表4中西复方超微粉饮水给药试验鸡的分组与处理
1.2给药方法
攻毒后按表4同时在饮水中添加不同剂量的药物,供鸡只自由饮用,连续用药5天。第1、2、3组用含盐酸环丙沙星0.4%的中药超微粉分别按1.0%、0.5%、0.25%的比例加入饮水中,混匀投药。第4组用含盐酸环丙沙星0.4%的复方中药口服液按5.0ml/L比例加入饮水中,混匀投药。第5组用盐酸环丙沙星按20μg/ml浓度饮水投药。第6组为纯中药对照组,按0.5%的比例加入饮水中,混匀投药。第7、8组不投药。观察期为接种后10天。
1.3人工发病、观察内容、药效评价标准、数据的分析与处理
参照试验二的相关方法。
2试验结果
临床症状及剖检同试验二。x2检验表明,中西复方超微粉高(H)、中(M)、低(L)剂量组及中西复方口服液对照组(K)的死亡率均极显著低于感染对照组(A)(P<0.01),盐酸环丙沙星对照组(Y)的死亡率显著低于感染对照组(A)(P<0.05);中西复方超微粉高剂量组(H)的死亡率极显著低于盐酸环丙沙星组(Y)(P<0.01),而其治愈率和有效率均极显著高于盐酸环丙沙星组(Y)(P<0.01);中西复方超微粉中剂量组(M)、中西复方口服液对照组(K)的死亡率均显著低于盐酸环丙沙星组(Y)(P<0.05),而其有效率均显著高于盐酸环丙沙星组(Y)(P<0.05);中西复方超微粉中剂量组(M)死亡率极显著低于复方超微粉对照组(纯中药、F)(P<0.01),而其治愈率与有效率均极显著高于复方超微粉对照组(F)(P<0.01);中西复方超微粉中剂量组(M)的死亡率、治愈率、有效率与中西复方口服液对照组(K)无显著性差异(P>0.05)。具体见表5。
表5中西复方超微粉饮水给药对人工诱发鸡大肠杆菌病的药效试验
注:**表示与感染对照组(A)相比差异极显著(P<0.01);*表示与感染对照组(A)相比差异显著(P<0.05);(1)表示与盐酸环丙沙星组(Y)相比差异极显著(P<0.01);(2)表示与盐酸环丙沙星组(Y)相比差异显著(P<0.05);(3)表示与复方超微粉对照组(F)相比差异极显著(P<0.01);(4)表示与中西复方口服液对照组(K)无显著性差异(P>0.05)。
Claims (5)
1.一种抗鸡大肠杆菌病的中药超微粉组合物,其特征在于它由下述重量份的药物原料制成:乌梅20-30重量份、黄芩15-25重量份、大黄10-15重量份、苦参5-15重量份、大青叶5-15重量份、石榴皮5-15重量份、甘草3-8重量份。
2.根据权利要求1所述的中药超微粉制剂,其特征在于粒径≤50μm。
3.根据权利要求1所述的中药超微粉制剂,其特征在于粒径为10-25μm的微颗粒所占比例不低于50%。
4.一种权利要求1-3中任一项所述的复方中药超微粉制剂的制备方法,其特征在于包括下列步骤:
(1)单味中药普通粉的制备:选取乌梅、黄芩、大黄、苦参、大青叶、石榴皮、甘草,经复核无误后,分别粉碎成普通粉,过65目筛,装入洁净的塑料袋中备用。
(2)复方中药普通粉的制备:按权利要求1所述百分比例用单味中药普通粉混合配制而成。
(3)复方中药超微粉的制备:取配制的复方中药普通粉,放入超微粉碎机中,调节研磨压力及转速,粉碎后的超微粉用400目国家标准检验筛检测。检测合格后,分装密封保存。
5.如权利要求1所述的复方中药超微粉在制备用于预防大肠杆菌病的药物中的应用。其特征在于本品为纯天然物质,无毒、无残留、组方合理、工艺简单、质量可控。
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