CN107412738A - 一种治疗宠物病毒性风寒感冒的营养膏及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及宠物医药领域，特别涉及一种治疗宠物感冒的组合物及营养膏。本发明所述组合物选用板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡与转移因子联用，经试验证明所述组合物对多种病毒和细菌具有显著抑制作用，并能够迅速中和细菌死亡时释放的内毒素，有效缓解机体感冒引起的发烧、咳嗽、流鼻涕等症状，对治疗宠物病毒性感冒表现出良好的协同作用，并显著提高了机体的免疫力。

Description

一种治疗宠物病毒性风寒感冒的营养膏及其制备方法
技术领域
本发明涉及宠物医药技术领域，尤其涉及一种治疗宠物病毒性风寒感冒的营养膏及其制备方法。
背景技术
根据《2016中国宠物行业白皮书》中的数据，中国约有4800万宠物犬和1300万宠物猫，宠物数量合计6000万以上。中国宠物医疗产业市场运行暨产业发展趋势研究报告显示，中国宠物医疗市场潜力巨大，前景广阔，预计到2020年，宠物医疗市场规模将达到122亿元左右。
宠物病毒性感冒即上呼吸道感染，是由多种病毒引起的常见的呼吸道传染病，表现为咳嗽，打喷嚏，流鼻涕，可能有鼻出血，并发低热，呼吸困难，不耐运动，嗜睡，厌食等症状。其病因是多种多样的，如宠物因饲养管理不当、营养不良、长期运输、过度疲劳、受寒、淋雨等。虽然抗生素和抗病毒类的西药能够缓解或治疗宠物感冒症状，但副作用较大，不利于宠物健康。
中草药因其源自天然，具有保健、治疗、康复等综合作用，可有效调节机体抗病能力，抵御治病因素侵犯。现代中药化学研究表明，中草药具有多种有效成分，目前已发现多种中草药有效成分与抗病毒和机体的免疫功能密切相关，主要为多糖类、黄酮类、挥发油、有机酸类和生物碱类等。在作用原理上，它们或作用于病毒的增殖过程、或者影响宿主细胞和宿主屏障、有的则干扰病毒与宿主细胞的相互作用，同时调节人体的免疫系统。具有抗病毒作用或能够提高机体免疫功能的中草药在治疗人与动物的病毒病、细菌病、肿瘤病等方面有广泛的研究价值和开发应用前景。
现有的用于治疗宠物感冒的中药复方组合物有很多，但普遍所含的药味较多，成分比较复杂，如专利CN103191318公开了一种治疗宠物狗感冒的药物组合物，包括金银花、连翘、板蓝根、白芷、蒲公英、马兰、麻黄、鱼腥草、石榴花、穿心莲、大青叶、枇杷叶、田基黄、杏仁、黄岑、党参、芦根和蜂蜜18味药材。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种药味少、成分简单，对治疗宠物病毒性风寒感冒疗效好、见效快的营养膏及其制备方法。
为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供了一种治疗宠物感冒的组合物，包括板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡和转移因子。
转移因子(Transfer Factor，TF)，是免疫系统制造的对抗细菌和感染的一种多核苷酸和多肽小分子物质，可以从健康人外周血白细胞中提取制得，为细胞免疫促进剂。
本发明依照中医理论，首次将蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡五味药材合理配伍后与转移因子联用，能够提高机体的免疫力，加强免疫系统的杀病毒和细菌能力；各中药组分与转移因子联用，多种病毒和细菌具有显著抑制作用，并能够迅速中和细菌死亡时释放的内毒素，有效缓解机体感冒引起的发烧、咳嗽、流鼻涕等症状，对治疗宠物病毒性感冒表现出良好的协同作用，并显著提高了机体的免疫力。
作为优选，以重量份计，本发明所述组合物包括：
本发明还提供了一种治疗宠物感冒的营养膏，由上述所述组合物和食品学上可接受的添加剂制成。
作为优选，本发明提供的治疗宠物感冒的营养膏由包括板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡、转移因子、调味剂、淀粉、葡萄糖浆和食用纤维的原料制成。
在本发明提供的实施例中，以重量份计，本发明所述的营养膏由包括如下重量份的原料制成：
作为优选，本发明提供的治疗宠物感冒的营养膏中，淀粉选自玉米淀粉、绿豆淀粉、木薯淀粉、甘薯淀粉、红薯淀粉、马铃薯淀粉、麦类淀粉、菱角淀粉、藕淀粉中的一种或两种以上，更优选为玉米淀粉或红薯淀粉。
作为优选，本发明提供的营养膏中，食用纤维选自果胶、纤维素、寡糖、木质素、胶质中的一种或两种以上，更优选为果胶或纤维素。
作为优选，本发明提供的营养膏中，调味剂选自鸡肝粉、鸡肉粉、猪肉粉、牛肉粉、鱼肉粉中的一种或两种以上，更优选为鸡肝粉或猪肉粉。
本发明还提供了所述营养膏的制备方法，包括以下步骤:
步骤1：取板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡混合，清洗后经水熬煮得到中药提取液；
步骤2：将步骤1获得的中药提取液与葡萄糖浆、淀粉、食用纤维混合均匀，开启均质乳化机的加热和搅拌开关，边加热边搅拌至温度达到40℃-60℃进行均质乳化，得到第一混合液；
步骤3：在步骤2所述的第一混合液中依次加入转移因子和调味剂，混匀后进行均质乳化，得到第二混合液；关乳化，继续搅拌，灭菌，得到所述营养膏。
作为优选，步骤2中所述均质乳化的压力为-0.05～-0.07MPa，均质乳化的时间为30～45min；步骤3中所述均质乳化的压力为-0.05～-0.07MPa，均质乳化的时间为10～15min。
在本发明提供的具体实施例中，步骤2中所述均质乳化的压力为-0.06MPa，均质乳化的时间为45min；步骤3中所述均质乳化的压力为-0.05MPa，均质乳化的时间为15min。
作为优选，步骤1具体为：
取板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡原料药混合，经水清洗，加入10～12倍原料药总重量的水，沸水大火熬煮10～15min，过滤，弃头煎药汁，收集药渣，再用沸水小火熬煮30～60min，过滤，弃滤渣，收集二煎药汁，得到所述中药提取液。
在本发明提供的具体实施例中，步骤1具体为：
取板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡原料药混合，经水清洗，加入10倍原料药总重量的水，沸水大火熬煮10min，过滤，弃头煎药汁，收集药渣，再用沸水小火熬煮45min，过滤，弃滤渣，收集二煎药汁，得到中药提取液。
本发明步骤3中，所述灭菌优选为：65℃-70℃条件下灭菌15min-20min。更优选为65℃条件下灭菌15min。
本发明提供的营养膏的制备方法中，在所述灭菌后还包括：降温至30～40℃，在3000风量的空气动态消毒机中进行灌装、封尾。
临床疗效试验结果表明，在25例确诊患有感冒的宠物狗柯基中，服用本发明所述营养膏治疗7天，症状完全缓解12例，部分缓解10例，有效率为88％，治疗有效率明显优于对照组的抗感冒口服液或营养膏。
以上结果表明，本发明所述营养膏中，板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡与转移因子联用表现出了良好的配伍及协同作用，对多种病毒和细菌具有显著抑制作用，并迅速中和细菌死亡时释放的内毒素，能够有效缓解机体感冒引起的发烧、咳嗽、流鼻涕等症状，对宠物病毒性风寒感冒具有显著疗效，同时显著提高了机体的免疫力。
具体实施方式
本发明公开了一种治疗宠物感冒的组合物及营养膏，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
对所公开的实施例的说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1本发明所述组合物
由下述重量份的原料制成：
板蓝根0.7Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.65Kg、甘草0.75Kg、柴胡1.2Kg，转移因子0.005Kg。
制备方法：取板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡混合，经水清洗，加入10倍原料药总重量的水，沸水大火熬煮10min，过滤，弃头煎药汁，收集药渣，再用沸水小火熬煮45min，过滤，弃滤渣，收集二煎药汁，加入转移因子，得到所述组合物。
实施例2本发明所述组合物
由下述重量份的原料制成：
板蓝根0.8Kg、金银花0.7Kg、黄芩0.6Kg、甘草0.8Kg、柴胡1.3Kg、转移因子0.003Kg。
制备方法同实施例1。
实施例3本发明所述组合物
由下述重量份的原料制成：
板蓝根1.0Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.7Kg、甘草0.9Kg、柴胡1.3Kg、转移因子0.004Kg。
制备方法同实施例1。
实施例4本发明所述组合物
由下述重量份的原料制成：
板蓝根0.6Kg、金银花0.7Kg、黄芩0.5Kg、甘草1.0Kg、柴胡1.4Kg、转移因子0.002Kg。
制备方法同实施例1。
实施例5本发明所述组合物
由下述重量份的原料制成：
板蓝根1.2Kg、金银花0.3Kg、黄芩0.8Kg、甘草0.5Kg、柴胡1.5Kg、转移因子0.002Kg。
制备方法同实施例1。
实施例6本发明所述营养膏
配方组成：实施例1所述的组合物(板蓝根0.7Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.65Kg、甘草0.75Kg、柴胡1.2Kg，转移因子0.005Kg)、玉米淀粉1.0Kg、葡萄糖浆2.5Kg、果胶1.5Kg、鸡肝粉0.5Kg。
制备方法：
(1)取板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡混合，经水清洗，加入10倍原料药总重量的水，沸水大火熬煮10min，过滤，弃头煎药汁，收集药渣，再用沸水小火熬煮45min，过滤，弃滤渣，收集二煎药汁，得到所述中药提取液。
(2)将中药提取液与葡萄糖浆、淀粉、食用纤维混合均匀，开启均质乳化机的加热和搅拌开关，边加热边搅拌至温度达到50℃，进行均质乳化(均质乳化压力为-0.06MPa，均质乳化时间为45min)，得到第一混合液；
(3)在第一混合液中依次加入转移因子和调味剂，混匀后进行均质乳化(均质乳化压力为-0.05MPa，均质乳化时间为15min)，得到第二混合液；关乳化，继续搅拌，65℃条件下灭菌15min，降温至30～40℃，在3000风量的空气动态消毒机中进行灌装、封尾，得到所述营养膏。
实施例7本发明所述营养膏
配方组成：实施例2所述的组合物(板蓝根0.8Kg、金银花0.7Kg、黄芩0.6Kg、甘草0.8Kg、柴胡1.3Kg、转移因子0.003Kg)、玉米淀粉1.5Kg、葡萄糖浆3.0Kg；果胶2.0Kg、鸡肝粉1.0Kg。
制备方法同实施例6。
实施例8本发明所述营养膏
配方组成：实施例3所述的组合物(板蓝根1.0Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.7Kg、甘草0.9Kg、柴胡1.3Kg、转移因子0.004Kg)、玉米淀粉2.0Kg、葡萄糖浆3.0Kg、果胶2.5Kg、鸡肝粉2.0Kg。
制备方法同实施例6。
实施例9本发明所述营养膏
配方组成：实施例4所述的组合物(板蓝根0.6Kg、金银花0.7Kg、黄芩0.5Kg、甘草1.0Kg、柴胡1.4Kg、转移因子0.002Kg)玉米淀粉2.0Kg、葡萄糖浆3.5Kg、果胶2.5Kg、鸡肝粉2.0Kg。
制备方法同实施例6。
实施例10本发明所述营养膏
配方组成：实施例5所述的组合物(板蓝根1.2Kg、金银花0.3Kg、黄芩0.8Kg、甘草0.5Kg、柴胡1.5Kg、转移因子0.002Kg)、玉米淀粉1.0Kg、葡萄糖浆2.6Kg、果胶1.5Kg、鸡肝粉1.5Kg。
制备方法同实施例6。
实施例11体外抗病毒试验
(1)本发明包含中药提取液和转移因子的中药混合液对CPIV的抑制作用实验分组：试验组、空白对照组、病毒阴性对照组、中药提取液对照组、转移因子对照组。
试验组：实施例1的组合物(每毫升相当于中药原生药0.002g，转移因子0.005mg)；
中药提取液对照组：实施例1的中药原料(板蓝根0.7Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.65Kg、甘草0.75Kg、柴胡1.2Kg，转移因子0.02Kg)按照实施例1方法提取得到的中药提取液；
转移因子对照组：0.02Kg转移因子加入到与实施例1组合物等体积的水中得到转移因子溶液(每毫升相当于转移因子0.005mg)；
阴性对照组：CPIV+生理盐水；
空白对照组：生理盐水。
细胞的培养及接毒条件：用RPMI1640培养液加10％胎牛血清作为MDCK细胞(犬肾脏细胞)的培养液，至37℃，5％CO2培养箱中培养；细胞传代时用0.25％胰蛋白酶消化细胞，分瓶并接种犬副流感病毒(Canine Parainfluenza Virus,CPIV)，按照500TCID50(Tissueculture infective dose,半数组织培养感染剂量)接种MDCK细胞。
测定方法：将MDCK细胞稀释成105个细胞/ml，铺96孔板，每孔200uL。除空白对照组外均接种犬副流感病毒CPIV(按照每毫升500TCID50)。将试验组实施例1的组合物和对照组中药提取液分别按照10倍、25倍、50倍、100倍、500倍、1000倍、5000倍和10000倍稀释，每孔添加0.2ml的稀释液，每个稀释倍数设置4个重复。空白对照和阴性对照组各设置4个重复，每孔加入0.2ml生理盐水。37℃，5％CO2培养箱中培养96h后记录细胞病变。其判定标准为：1、细胞病变法：出现细胞皱缩、细胞间隙变大、胞质粗糙、不透明、部分细胞脱落、细胞内有较多颗粒等形态改变记录为细胞病变(+)；细胞形态正常，无药物毒性反应，未出现细胞形态改变的记录为无细胞病变(-)；2、MTT法：培养72h后，每孔加入MTT溶液(5mg/ml)30ul，继续孵育4h，弃上清，每孔加入150ul二甲基亚砜，震荡10min，使结晶充分溶解。用酶标仪在570nm波长处测定吸光(OD)值，用SPSS软件统计分析不同浓度细胞的OD值，计算细胞存活率。细胞病变率＝1-细胞存活率％＝1-(处理组的OD值/空白对照组的OD值)*100％
出现75％以上细胞病变记为+++，50％以上病变记为++，25％以上病变记为+，无病变记为-。实验结果如表1所示。
表1对CPIV的抑制作用
由表1可知，试验组10～100倍稀释的组合物能够有效抑制CPIV对细胞的致病变作用，抑制作用明显优于单独给予中药提取液对照组和转移因子对照组，结果表明，本发明将板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡，与转移因子联用对CPIV病毒具有协同抑制作用。
(2)对MDCK细胞生长的影响
将本发明实施例1的组合物按照10倍、50倍、100倍、500倍、1000倍、5000倍和10000倍进行稀释，然后添加到96孔板中，0.2ml/孔，每个处理做4个重复。37℃培养92h后，每孔中添加30uL的MTT(5mg/ml)溶液，继续培养4h，甩去孔内培养液，每孔加入150ul二甲基亚砜，室温震荡10分钟后，用酶标仪在570nm波长处测定吸光(OD)值，用SPSS软件统计分析不同浓度细胞的OD值。结果如表2所示。
表2不同稀释倍数对MDCK细胞的生长影响
稀释倍数 细胞OD570值
10× 0.613±0.147
50× 0.855±0.192
100× 0.872±0.235
500× 0.891±0.231
1000× 0.929±0.382
5000× 0.918±0.179
10000× 0.936±0.211
1640培养基 0.925±0.103
由表2可以看出，本发明实施例1的组合物在50倍以上时，不会引起MDCK细胞明显损伤，对细胞无毒副作用。
取实施例2～5所述的组合物进行上述试验，结果与实施例1的效果相同或相近，无显著差异(P＞0.05)。
实施例12临床疗效试验
选择被确诊患有感冒的12～24月龄宠物狗柯基200只，根据体重及性别比例相近的原则，随机分为8组：每组25只。
试验分组：
试验组：饲喂本实施例6的营养膏。
对照组1：饲喂市售的一种抗感冒口服液(配方组成为：麻黄、桂枝、辛细、防风)。
对照组2：饲喂的营养膏在实施例6的基础上不添加转移因子，配方为：板蓝根0.7Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.65Kg、甘草0.75Kg、柴胡1.205Kg、玉米淀粉1.0Kg、葡萄糖浆2.5Kg、果胶1.5Kg、鸡肝粉0.5Kg。
对照组3：饲喂的营养膏在实施例6的基础上不添加中药组分，配方为：玉米淀粉1.0Kg、葡萄糖浆2.5Kg、果胶1.5Kg、鸡肝粉0.5Kg。
对照组4：饲喂的营养膏在实施例6的基础上不添加柴胡，配方为：板蓝根1.7Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.85Kg、甘草0.75Kg、转移因子0.005Kg、玉米淀粉1.0Kg、葡萄糖浆2.5Kg、果胶1.5Kg、鸡肝粉0.5Kg。
对照组5：饲喂的营养膏在实施例6的基础上添加干姜，配方为：板蓝根0.7Kg、金银花0.5Kg、黄芩0.65Kg、甘草0.75Kg、柴胡1.2Kg、干姜0.5Kg转移因子0.005Kg、玉米淀粉1.0Kg、葡萄糖浆2.5Kg、果胶1.5Kg、鸡肝粉0.5Kg。
对照组6：营养膏的配方为：板蓝根1.3Kg、金银花0.2Kg、黄芩0.4Kg、甘草1.1Kg、柴胡1.0Kg，转移因子0.001Kg、玉米淀粉2.2Kg、葡萄糖浆2.3Kg、果胶3.0Kg、鸡肝粉2.4Kg。
对照组7：饲喂专利CN103191318实施例1的药物组合物。
饲喂本实施例1以及对照组1～5的营养膏，饲喂频率为2次/天，剂量为5g/Kg体重，饲喂期：1周。
供试柯基犬采用室内笼养式饲养，每只柯基所占面积为2m2，室内保持良好通风。定时饲喂基础日粮，分早、中、晚三次饲喂，自由饮水。
检测与观察标准：
完全缓解：感冒、发烧、咳嗽、流鼻涕等症状全部消失，食欲明显增加；部分缓解：感冒、发烧、咳嗽、流鼻涕等症状部分消失，症状明显减轻，食欲有所增加。无缓解：症状无变化，食欲无变化。并观察柯基犬的精神和食欲状况来判断病情的严重程度。实验结果如表3所示：
表3营养膏的疗效评价
组别 完全缓解(只) 部分缓解(只) 无缓解(只) 有效率(％)
试验组 12 10 3 88
对照组1 8 9 8 68
对照组2 9 10 6 76
对照组3 7 8 10 60
对照组4 8 10 7 72
对照组5 10 9 6 76
对照组6 9 9 7 72
对照组7 6 13 6 76
由以上结果可知，与对照组相比，试验组88％柯基犬的症状均具有明显的改善，而对照组1(市售的一种抗感口服液)仅有68％柯基犬的毛球症具有明显的改善，说明本发明专利中的加健营养膏的疗效远好于对照组1。而且，单独使用转移因子和单独使用中药组分的对照组2和对照组3，缺少一味中药的对照组4，多一味干姜中药的对照组5，各组分配比与本申请不同的对照组6以及现有专利公开的组合物(对照组7)的疗效均明显不如试验组，表明，本发明提供的营养膏中特定种类和配比的中药组分和转移因子在治疗宠物病毒性感冒中产生了协同增效的作用。
取实施例7～10制得的营养膏进行上述试验，结果与实施例1的效果相同或相近，有效率在85～88％之间，无显著差异(P＞0.05)。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种治疗宠物病毒性风寒感冒的组合物，其特征在于，包括板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡和转移因子。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，以重量份计，包括：
3.一种治疗宠物病毒性风寒感冒的营养膏，其特征在于，由权利要求1或2所述的组合物和食品学上可接受的添加剂制成。
4.根据权利要求3所述的营养膏，其特征在于，由包括板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡、转移因子、调味剂、淀粉、葡萄糖浆和食用纤维的原料制成。
5.根据权利要求4所述的营养膏，其特征在于，由包括如下重量份的原料制成：
6.根据权利要求4或5所述的营养膏，其特征在于，所述淀粉选自玉米淀粉、绿豆淀粉、木薯淀粉、甘薯淀粉、红薯淀粉、马铃薯淀粉、麦类淀粉、菱角淀粉、藕淀粉中的一种或两种以上。
7.根据权利要求4至6任一项所述的营养膏，其特征在于，所述食用纤维选自果胶、纤维素、寡糖、木质素、胶质中的一种或两种以上。
8.根据权利要求4至7任一项所述的营养膏，其特征在于，所述调味剂选自鸡肝粉、鸡肉粉、猪肉粉、牛肉粉、鱼肉粉中的一种或两种以上。
9.权利要求4至8任一项所述营养膏的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:
步骤1：取板蓝根、金银花、黄芩、甘草、柴胡混合，清洗后经水提得到中药提取液；
步骤2：将步骤1获得的中药提取液与葡萄糖浆、淀粉、食用纤维混合均匀，开启均质乳化机的加热和搅拌开关，边加热边搅拌至温度达到40℃-60℃进行均质乳化，得到第一混合液；
步骤3：在步骤2所述的第一混合液中依次加入转移因子和调味剂，混匀后进行均质乳化，得到第二混合液；关乳化，继续搅拌，灭菌，得到所述营养膏。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤2中所述均质乳化的压力为-0.05MPa～-0.07MPa，均质乳化的时间为30～45min；步骤3中所述均质乳化的压力为-0.05MPa～-0.07MPa，均质乳化的时间为10～15min。
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