CN101085037B - 一种兽用中药制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种兽用中药制剂及其制备，包括以下重量百分含量的组分：杨树叶40-70％、葎草30-60％，其制备方法包括以下步骤，先称取重量百分含量为40-70％的杨树叶和重量百分含量为30-60％的葎草，放置在提取浓缩机内，加6-8倍量的水，在低温状态下真空动态提取；浓缩至相对密度达到1.2-1.25的清膏，取清膏加入浓度为75％-95％的乙醇进行醇沉；静置24-48小时，减压回收乙醇，静置24-48小时，过滤，备用得提取液；将所得到的提取液在浓配罐中加入总水量30％的纯化水，在搅拌状态下加入提取液，搅拌均匀，粗滤至稀配罐中，补加纯化水，检测pH值在5-7之间，精滤即可得产品。本制剂疗效独特、无毒副作用、无残留、无公害、不影响动物的生产性能，不产生抗药性，且原料来源丰富、价格低廉，用药成本明显低于化学药物制剂。

Description

一种兽用中药制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种兽用中药制剂，同时还涉及一种该兽用中药制剂的制备方法。

背景技术

大肠杆菌病是仔猪饲养期最为严重的细菌性肠道传染病。它的发病机理是因为大肠杆菌靠其表面的黏附素在仔猪小肠黏膜上皮定植，产生肠毒素，激活腺苷酸环化酶和鸟苷酸环化酶，引起离子平衡失调，从而引起剧烈腹泻，导致机体脱水和酸碱平衡紊乱。在养猪生产过程中，仔猪的黄、白痢发病率有时高达50％左右，病死率达20％左右，如果治疗不及时，往往会导致死亡，而通常得过此病的仔猪，其生长发育会受到很大抑制，多数成为僵猪，严重地制约着养猪业的发展。

目前，国内外用于治疗这类疾病的药，基本上使用痢特灵、土霉素、氟哌酸以及环丙沙星等合成药，虽然在治疗上取得了一定的效果，但长期使用后往往会产生严重的耐药性，大肠杆菌耐药菌株的普遍性造成了许多原来防治本病有效的抗菌制剂在某些猪场已无明显效果，反而使应用剂量不断地加大。并且由于长期不合理的滥用合成抗菌剂、抗生素等，使生产出来的畜产品中药物残留严重超标，既影响了出口，也损害了人类的健康，造成严重的损失。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于治疗畜禽因大肠杆菌、沙门氏菌而引起的腹泻、拉稀等肠道疾病的兽用中药制剂。

同时，本发明的目的还在于提供了一种该兽用中药制剂的制备方法。

为了达到上述目的，本发明的技术方案在于提供了一种兽用中药制剂，包括以下重量百分含量的组分：

杨树叶 40-70％    葎草 30-60％。

所述的杨树叶也可以为杨树花或者为杨树叶与杨树花的组合。

该中药制剂可以为任一剂型。

该中药制剂优选口服液。

同时，本发明的技术方案还在于采用了一种该兽用中药制剂的制备方法，包括以下步骤，先称取重量百分含量为40-70％的杨树叶和重量百分含量为30-60％的葎草，放置在提取浓缩机内，加6-8倍量的水，在低温状态下真空动态提取；浓缩至相对密度达到1.2-1.25的清膏，取清膏加入浓度为75％--95％的乙醇进行醇沉；静置24-48小时，减压回收乙醇，静置24-48小时，过滤，备用得提取液；将所得到的提取液在浓配罐中加入总水量30％的纯化水，在搅拌状态下加入提取液，搅拌均匀，粗滤至稀配罐中，补加纯化水，检测pH值在5-7之间，精滤即可得产品。

所述的杨树叶也可以为杨树花或者为杨树叶与杨树花的组合。

所述的制备方法中的低温状态是指温度在20--75℃之间。

本发明原料中的杨树叶：味苦、性寒，含有黄酮甙对革兰氏阴性菌有明显的抑制作用，如痢疾杆菌、大肠杆菌，具有较强的清热解毒，化湿止痢之功效，可治五脏风热毒，解毒通便，杨树叶含粗蛋白质6.1％、粗脂肪6.8％、粗纤维23.9％、无氮浸出物47％，在每千克杨树叶粉中，含叶绿素824毫克、胡萝卜素27毫克、维生素C842毫克，另外还含有丰富的维生素A、维生素B、维生素E及钾、钙、镁等无机营养元素据试验，在蛋鸡配合饲料中，添加4％～7％杨树叶粉，可节约部分谷物饲料，并使产蛋率提高5％～9％。原料中的葎草，又名拉拉秧，拉丁名，药材Herba Humuli Scandentis原植物Humulusscandens(Lour.)Merr.为桑科植物；葎草含有葎草酮和蛇麻酮对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌有明显的抗菌作用；具有清热，利尿，消瘀，解毒之功效，主治：小便不利，腹泻，痢痰，肺结核，肺脓疡，肺炎，癞疮，性甘、寒、苦，无毒；全草中主成分为黄酮类化合物，全草含木犀草素、葡萄糖甙、胆碱及天门冬酰胺，其他尚有挥发油、鞣质及树脂。挥发油中主成分为β-葎草烯(β-humulene)、石竹烯(caryophyllene)、α-古巴烯(α-copaene)、α-，β-芹子烯(α-，β-selinene)、γ-毕澄茄烯(γ-cadinene)以及苯甲醇、苯乙醇等。本发明是将具有清热燥湿、化湿止痢并对大肠杆菌有明显抑制作用的杨叶、葎草进行合理组方并优化生产工艺制备成方便兽医临床用药的兽用中药，并进行了该制剂的稳定性试验与临床实验，通过相关实验证实：该制剂对大肠杆菌病的治愈率达88％以上，且本制剂符合《中华人民共和国兽药典》附录中合剂项下有关各项规定。本发明的中药取抗菌消炎，祛邪扶正为组方原则，具有消炎止痢、清热解毒，健胃助消化，同时具有抑菌、杀菌、抗病毒等作用，而且能够调节机体免疫功能，具有显著的保健、治病、防病、促生长作用。本制剂疗效独特、无毒副作用、无残留、无公害、不影响动物的生产性能，不产生抗药性，且原料来源丰富、价格低廉，用药成本明显低于化学药物制剂。

实践证明，使用本发明的兽用中药制剂可以预防和治疗禽大肠杆菌病、禽白痢、仔猪黄白痢以及由细菌和病毒混合感染所引起的猪传染性胃肠炎、流行性腹泻等症。

具体实施方式

实施例1

先称取重量百分含量为50％的杨树叶和重量百分含量为50％的葎草，放置在提取浓缩机内，加6倍量的水，在低温状态下真空动态提取；浓缩至相对密度达到1.2的清膏，取清膏加入浓度为75％的乙醇进行醇沉；静置24小时，减压回收乙醇，静置24小时，过滤，备用得提取液；将所得到的提取液在浓配罐中加入总水量30％的纯化水，在搅拌状态下加入提取液，搅拌均匀，粗滤至稀配罐中，补加纯化水，检测pH值为5，精滤即可得产品。

实施例2

先称取重量百分含量为60％的杨树叶和重量百分含量为40％的葎草，放置在提取浓缩机内，加7倍量的水，在低温状态下真空动态提取；浓缩至相对密度达到1.2的清膏，取清膏加入浓度为75％的乙醇进行醇沉；静置36小时，减压回收乙醇，静置36小时，过滤，备用得提取液；将所得到的提取液在浓配罐中加入总水量30％的纯化水，在搅拌状态下加入提取液，搅拌均匀，粗滤至稀配罐中，补加纯化水，检测pH值为6，精滤即可得产品。

实施例3

先称取重量百分含量为70％的杨树叶和重量百分含量为30％的葎草，放置在提取浓缩机内，加8倍量的水，在低温状态下真空动态提取；浓缩至相对密度达到1.25的清膏，取清膏加入浓度为85％的乙醇进行醇沉；静置48小时，减压回收乙醇，静置48小时，过滤，备用得提取液；将所得到的提取液在浓配罐中加入总水量30％的纯化水，在搅拌状态下加入提取液，搅拌均匀，粗滤至稀配罐中，补加纯化水，检测pH值为7，精滤即可得产品。

稳定性试验

1、原料药：

葎草、杨树叶

2、制剂稳定性试验

制剂的稳定性是衡量药物质量的一个重要指标，根据《兽药稳定性试验技术规范(试行)》，对本发明的兽用中药制剂的三批样品进行加速试验和长期试验，试验过程及结果如下：

加速试验

试验仪器：FR-SP人工气候箱

试验方法

将三批试验样品分别置于温度40±2℃，相对湿度75±5％的FR-SP人工气候箱内放置六个月，试验期间每一个月取样一次，按稳定性重点考察项目检测样品性状、鉴别、PH值等项目，检验结果与0月的结果进行比较，

试验结果见下表

加速试验结果表明：本品在加速试验条件下放置6个月，各项质量指标均符合规定，说明本品的稳定性良好，包装材料能很好的保护产品质量不受外界影响。

光加速试验

试验仪器：光橱

试验药品：本发明的兽用中药制剂，无色玻璃瓶装，规格：100ml/瓶，批号：20050501，20050502，20050503。

试验方法：将试验样品(20050501 20050502 20050503)三批放置在光橱内，于照度4500±500LX的条件下放置10天，于5、10天定时取样，按稳定性重点考察项目检测样品的性状、鉴别、PH值等项目，并于0天的检测结果进行对比，试验结果如下表：

光加速试验试验结果表明：本品在光加速试验条件下放置10天，溶液的色泽逐渐变深，其它质量指标无明显变化，且均符合规定，说明本品对光有一定的敏感性，应避光保存。

临床实验

(一)本发明的中药对实验性仔猪大肠杆菌病的临床治疗试验报告

依据农业部1992年《实验临床试验技术规范》的要求，用本发明的中药对实验性仔猪大肠杆菌病进行临床治疗试验。采用人工接种大肠杆菌的方法，复制仔猪大肠杆菌病，按口服液的临床给药途径给药，给药后观察动物的生理状况与发病情况，记录死亡数，分治愈、显效、有效、无效等指标对试验组结果进行统计并评价。试验结果表明：本发明的中药按每1L水1.0ml混饮，连用4天，能显著提高有效率，对仔猪大肠杆菌病有良好的治疗效果。

葎草、杨叶对大肠杆菌等肠道菌有不同的抑制作用，并具有解热、保肝作用，将具有较强的清热燥湿、化湿止痢并对大肠杆菌有明显抑制作用的葎草、杨叶进行合理组方并优化生产工艺制备成方便兽医临床用药的兽用口服液。为科学、客观地的评价本发明的中药对仔猪大肠杆菌病的临床疗效，验证本发明的中药的临床效果特进行本试验。

1、材料与方法

1.1供试药品

本发明的中药：规格100ml：100g(原生药)。

1.2试剂

盐酸、氢氧化钠、氯化钠、磷酸二氢钾等为国产分析纯；

琼脂、蛋白胨、营养肉汤等为国产生化试剂。

1.3受试动物：

35日龄的长白商品仔猪60头，体重13.4kg±0.8kg，偃师首阳山肥肥养猪厂提供，未使用任何抗菌药物。

1.4菌种

猪大肠杆菌O₁₄₉，源自中国兽医药品监察所。

1.5人工发病

先将保存的强毒菌种接种于普通营养平板，培养24小时，挑取典型菌落接种于普通肉汤，37℃培养18小时取出。用平板计数法测定菌液的浓度为6×10⁹CFU/ml。经预试，攻毒剂量为每头猪肌肉注射菌液5ml。

接种后观察试验仔猪的精神、采食、饮水、粪便、呼吸等临床情况；对病死仔猪立即进行病理剖检，从肝脏中分离细菌进行培养。

1.6试验性治疗

仔猪接种大肠杆菌36小时后，表现为腹泻、排出灰白、白色粥状粪便、畏寒、食欲减退等典型临床症状。随后试验随机分为6组，每组10头，如表1所示，并按表1剂量用药，连用4天。

治疗开始两周内观察猪的临床症状变化，对死猪进行剖检和细菌分离。

表1试验猪分组及处理

1.7疗效评价指标

治愈：经用药治疗后临床症状完全消失精神及饮食欲恢复正常为治愈，统计治愈数计算治愈率；

显效：经用药治疗后临床症状明显减轻精神及饮食欲好转者为治疗显效，统计显效数计算显效率；

有效：为治愈率与显效率之和；

无效：经用药治疗后症状未消失病情未好转以及治疗期间因本病死亡者均视为无效，统计无效数，计算无效率；

平均增重：根据给药前及试验结束时每头猪的体重，计算每头猪的增重量，据此计算每组平均增重；

相对增重率：相对增重率是各用药组与空白对照组的平均增重之比。

1.8数据的统计处理

用生物统计进行数据的显著性检验，其中有效率用卡方(X²)检验；增重用t检验。

2、结果

2.1仔猪大肠杆菌病的治疗情况及试验结果

仔猪接种大肠杆菌36小时后，表现为腹泻、排出灰白、白色粥状粪便、畏寒、食欲减退等典型临床症状。阳性对照组10头仔猪，死亡7头，死亡时间在接种后1-5天。剖检病死猪的主要特征性病变是肠道的急性卡他性炎症，其中以十二指肠最为严重，肠管充气，肠壁薄而透明，从病死猪肝脏中可分离到猪大肠杆菌。各给药组用药后，临床症状逐渐减轻，用药开始两周内，试验各项指标见表2。

表2.本发明的中药对仔猪大肠杆菌病的疗效

2.2统计学分析

本发明的中药的高、中剂量组对人工感染诱发大肠杆菌病猪的有效率与阳性对照组比较差异极显著(P＜0.01)；本发明的中药低剂量组对人工感染诱发大肠杆菌病猪的有效率与阳性对照组比较差异显著(0.01＜P＜0.05)；本发明的中药高、中剂量组的有效率显著高于杨树花口服液组(0.01＜P＜0.05)；本发明的中药低剂量组的有效率与杨树花口服液组相比较差异不显著(P＞0.05)；本发明的中药高、中剂量组的有效率显著高于低剂量组(0.01＜P＜0.05)。

本发明的中药高、中剂量组对人工感染诱发大肠杆菌病猪的相对增重率与阳性对照组比较差异极显著(P＜0.01)；本发明的中药高、中剂量组的相对增重率显著高于杨树花口服液组(0.01＜P＜0.05)，与空白对照组相比较差异不显著(P＞0.05)；本发明的中药低剂量组的相对增重率与杨树花口服液组相比较差异不显著(P＞0.05)，与空白对照组相比较差异显著(0.01＜P＜0.05)；本发明的中药高、中剂量组的相对增重率显著高于低剂量组(0.01＜P＜0.05)。

3、结论

3.1本发明的中药高、中剂量组混饮对仔猪大肠杆菌病有良好的治疗效果，与其他用药组相比能显著提高有效率，且在增重方面明显优于其他用药组及阳性对照组。

3.2根据本试验结果，说明本发明的中药按每1L水1.0ml混饮，连用4天，对仔猪大肠杆菌病可取得良好的治疗效果。

(二)本发明的中药对猪的安全性试验

为评价本发明的中药对靶动物猪的安全性，特进行本试验，以供临床应用时参考。

1、材料

1.1试验动物

35日龄的长白商品仔猪150头，体重13.4kg±0.8kg偃师首阳山肥肥养猪厂提供(不含任何药物的全价饲料、预饲一周后进入试验)。

1.2受试药物

本发明的中药：规格100ml：100g(原生药)。

2、试验方法

试验动物随机分为四组，每组10头，第1组用饮用水作为空白对照组，第2、3、4组分别以每1L水1.0ml、3.0ml、5.0ml的不同剂量进行混饮，连用4天，每天观察猪只反应情况(采食、饮水、精神、呼吸、粪便)和死亡情况等，连续观察6天，实验结束后，每组随机扑杀2头作病理剖检。

3、试验结果

试验结果如下表，参试仔猪在增加用药量后，仔猪的生理状态，精神状态与对照组比较，无异常现象发生。剖检各个内脏器官均未见明显病变。

本发明的中药对猪的安全性观察

4、结论：

本发明的中药对猪安全性大，以推荐用量5倍量使用，未观察到明显的毒副作用。故临床按每1L水1.0ml混饮，连用4天，对仔猪的安全性良好。

Claims (2)

1.一种治疗细菌性肠道疾病的兽用中药制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，先称取重量百分含量为40-70％的杨树叶和重量百分含量为30-60％的葎草，放置在提取浓缩机内，加6-8倍量的水，在低温状态20-75℃下真空动态提取；浓缩至相对密度达到1.2-1.25的清膏，取清膏加入浓度为75％-95％的乙醇进行醇沉；静置24-48小时，减压回收乙醇，静置24-48小时，过滤，备用得提取液：将所得到的提取液在浓配罐中加入总水量30％的纯化水，在搅拌状态下加入提取液，搅拌均匀，粗滤至稀配罐中，补加纯化水，检测pH值在5-7之间，精滤即可得产品。

2.根据权利要求1所述的兽用中药制剂的制备方法，其特征在于：所述的杨树叶用杨树花或者杨树叶与杨树花的组合代替。