CN103351422B

CN103351422B - 一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法

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Publication number: CN103351422B
Application number: CN201310299329.8A
Authority: CN
Inventors: 赵艳
Original assignee: Zhejiang Gongshang University
Current assignee: Zhejiang Gongshang University
Priority date: 2013-07-16
Filing date: 2013-07-16
Publication date: 2015-04-22
Anticipated expiration: 2033-07-16
Also published as: CN103351422A

Abstract

本发明公开了一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，包括：将糙米或/和米糠经脱脂处理得到脱脂米粉；将脱脂米粉与氯化钠水溶液混合，然后经振荡提取、第一分离收集上清液，即为总盐溶性蛋白溶液；向总盐溶性蛋白溶液加入乙醇，混合均匀，经静置、第二分离后除去沉淀部分，得到生物活性蛋白溶液；将生物活性蛋白溶液经后处理除乙醇、除盐分以及干燥后得到天然生物活性蛋白。本发明方法采用氯化钠和乙醇两种食品级原料，能够从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白，低成本，无污染。本发明方法制备的天然生物活性蛋白，可以用作制备保健食品、作为食品添加剂和应用到化妆品中，具有广阔的应用前景。

Description

一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法

技术领域

本发明涉及生物活性蛋白制备领域，具体涉及一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法。

背景技术

稻米蛋白是一种营养价值极高的食用蛋白，主要是大米蛋白的氨基酸构成合理，其利用率和生物效价高，且具有低过敏性，是唯一可以免于过敏实验的谷物蛋白（王章存等．大米蛋白研究进展．中国粮油学报，2004，19(2)：11-17）。按照Osborne基于溶解性的分类方法，稻米蛋白可粗分为清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。其中，清蛋白和球蛋白是稻米中能用氯化钠溶解提取的蛋白组分，也称为盐溶性蛋白，是主要的生理活性蛋白，已报道的稻米蛋白生理功效包括降血压、降血糖、清除胆固醇、抗癌变等（王良东等．大米蛋白制备研究进展．粮食加工，2007，32(1)：43-47）。Chanput等研究表明，稻米米糠中提取的清蛋白、球蛋白及其酶解产物均具有较高的抗氧化活性，对油脂氧化抑制效果显著高于食品工业常用的抗氧化剂维生素E和BHT（2,6-二叔丁基对甲基苯酚）（Chanput W，Theerakulkait C，NakaiS．Antioxidative properties of partially purified barley hordein,rice bran proteinfractions and their hydrolysates．Journal of Cereal Sience，2009，49(3)：422-428）。

稻米资源丰富，安全性好，稻米抗氧化多肽应用领域前景非常广阔，比如，可作为抗氧化添加剂抑制油脂氧化，减少食品氧化造成的色、香、味与营养价值的劣化。由于抗氧化肽能有效地清除机体内过剩的活性氧自由基，保护细胞和线粒体的正常结构，防止过氧化的发生，因此，稻米抗氧化多肽可作为功能性食品基料开发预防和治疗自由基诱发的疾病如心血管病、白内障、癌症等保健食品。稻米抗氧化多肽还可作为修复型功效成分应用于化妆品，通过清除自由基来达到延缓衰老的目的。

稻米生物活性多肽的制备技术以抗氧化活性肽为目的，如钱俊青等发明了一种利用从大米加工下脚料中提取米蛋白的工艺，采用了硫酸调配的酸性水溶液提取（钱俊青等，一种米蛋白提取工艺，专利公开日2008.01.02，专利公开号CN101095455A)；张敏等发明了一种米糠抗氧化活性肽的制作技术，采用了碱法从米糠中制备蛋白，再利用复合蛋白酶酶解获得具有抗氧化活性的米糠蛋白肽（张敏等，一种米糠抗氧化活性肽蛋白肽的制作，专利公开日2011.06.01，专利公开号CN102080118A）；田蔚等发明了一种米蛋白抗氧化肽的制备方法，其中采用了碱性蛋白酶解法（田蔚等，一种米糠抗氧化肽的制备方法，专利公开日2010.06.23，专利公开号CN101748182A)。

如上所述，现有米活性肽的工艺技术的主要缺陷在于：一是稻米蛋白的制备大多数涉及酸、碱处理，由此产生的废水可能对环境造成污染，工艺不够清洁；二是大米生物活性肽的获得均采用酶解步骤，成本高，工艺复杂；三是所制备的活性多肽不是天然存在于稻米中的，而是经过酶解米蛋白获得，组分复杂不确定。

发明内容

本发明提供了一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，采用氯化钠和乙醇两种食品级原料，能够从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白，低成本，无污染。

一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，包括以下步骤：

1）将糙米或/和米糠经脱脂处理得到脱脂米粉；

2）将步骤1）中的脱脂米粉与氯化钠水溶液混合，然后经振荡提取、第一分离收集上清液，即为总盐溶性蛋白溶液；

3）向步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液加入乙醇，混合均匀，经静置、第二分离后除去沉淀部分，得到生物活性蛋白溶液；

4）将步骤3）中的生物活性蛋白溶液经后处理除乙醇、除盐分以及干燥后得到天然生物活性蛋白。

本发明中，采用氯化钠水溶液对米总盐溶性蛋白提取，得到总盐溶性蛋白溶液，采用乙醇对总盐溶性蛋白溶液中的除天然生物活性蛋白以外的杂蛋白进行沉淀除杂，从而经过后处理后得到纯度较高的天然生物活性蛋白。

步骤1）中，脱脂米粉可采用市售产品也可自行制备，作为优选，所述的脱脂处理包括：将糙米或/和米糠粉碎后过30～80目（进一步优选40～50目）筛得到米粉原料，向米粉原料中加入丙酮脱脂，经振荡、分离、干燥后得到脱脂米粉。经过上述粒径大小的筛选并经丙酮脱脂得到的脱脂米粉，有利于从脱脂米粉提取天然生物活性蛋白。进一步优选，所述的米粉原料的质量与丙酮的体积比为1：2～4g/mL，即米粉原料与丙酮的固液比1：2～4g/mL，进一步优选，为1：3g/mL，采用上述质量的丙酮，有利于后续天然生物活性蛋白的提取。

步骤2）中，采用氯化钠水溶液对脱脂米粉总盐溶性蛋白提取，作为优选，所述的氯化钠水溶液的浓度为0.5mol/L～1.5mol/L，蛋白质在水中溶解度取决于蛋白质分子上离子基团周围的水分子数目，即取决于蛋白质的水合程度。采用不同浓度的中性盐溶液可以控制稻米蛋白的水合程度，也就是控制稻米蛋白质的溶解度。当水中加入少量盐时，盐离子与水分子对蛋白质分子的极性基团的影响，使蛋白质在水中溶解度增大，此即盐溶现象；但盐浓度增加一定程度时，水的活度降低，蛋白质表面的电荷大量被中和，水化膜被破坏，于是蛋白质相互聚集而沉淀析出，这就是盐析。本发明选用的中性盐为氯化钠，水溶液中合适的氯化钠浓度是影响稻米总盐溶性蛋白提取率的关键，0.5mol/L～1.5mol/L浓度的氯化钠水溶液有利于盐溶性蛋白提取，稻米总盐溶性蛋白得率较高。

所述的脱脂米粉的质量(g)与氯化钠水溶液的体积(mL)比为1：5～12g/mL，即脱脂米粉与氯化钠水溶液的固液比1：5～12g/mL，固液比是指脱脂米粉的质量(g)和氯化钠水溶液的体积(mL)的比值。当固液比较小的情况下，少量的NaCl溶液不利于蛋白的充分溶解；过高的固液比（高于1:12）不利于后续的浓缩、干燥，并使能耗增加。固液比1：5～12g/mL下，稻米总盐溶性蛋白得率较高。

作为优选，所述的振荡提取的条件为：在20～40℃振荡提取2～4小时，该振荡温度可提高蛋白溶解速率，并且提取2～4小时，使得稻米总盐溶性蛋白得率较高。

作为优选，所述的第一分离的条件为：在5000～8000rpm离心10～30min，第一分离的目的是将溶解于氯化钠水溶液的总盐溶性蛋白提取液与不溶性糙米粉残渣分开，离心力与离心时间会影响残渣沉淀的效果，离心转速过低或时间过短，残渣沉淀不完全，导致提取液浑浊不利于后期分离，离心转速过高时间过长，使能耗增加并导致离心产热引起蛋白变性甚至淀粉糊化，在5000～8000rpm离心10～30min能保证最佳分离效果。

步骤3）中，采用乙醇对总盐溶性蛋白溶液除天然生物活性蛋白以外的杂蛋白进行沉淀除杂，作为优选，所述的总盐溶性蛋白溶液与乙醇的体积比为1：1～3。乙醇引起蛋白质沉淀的原因：一方面是由于乙醇加入水中使溶剂介电常数降低，增加了相反电荷的吸引力；另一方面是因为乙醇是强亲水试剂，争夺蛋白质分子表面的水化水，破坏蛋白质胶体分子表面的水化层而使分子聚集沉淀，选用乙醇进行杂蛋白的沉淀能保证分离蛋白的食用和应用安全性。一般来说乙醇的浓度多少，与能沉淀的杂蛋白的分子量有关。当总盐溶性蛋白溶液与乙醇的体积比为1：1～3时，稻米总盐溶性蛋白提取液中20kDa以上的杂蛋白沉淀越来越完全，而具有生物活性的10～18kDa低分子量盐溶蛋白亚组分保留在溶液上清中，纯度较高。总盐溶性蛋白溶液与乙醇的体积比1：1～3的范围能保证不同糙米或/和米糠原料中低分子量生物活性蛋白亚组分的提取效果。

作为优选，所述的静置的条件为：1～10℃静置0.5～1.5h，使得杂蛋白形成沉淀，有利于后续的过程中除去。温度降低使杂蛋白的溶解性降低更容易沉淀去除，同时利于保持目标蛋白的生物活性；静置时间越长，杂蛋白沉淀效果越好，在1～10℃静置0.5～1.5h，能保证稻米中20kDa以上的杂蛋白沉淀有效去除。

作为优选，所述的第二分离的条件为：在7000～9000rpm离心10～30min，第二分离的目的是将上述乙醇沉淀的20kDa以上的杂蛋白与溶解在上清中的稻米低分子量生物活性蛋白（即所要提取的天然生物活性蛋白）分开，离心力与离心时间会影响沉淀的效果，离心转速过低或时间过短，沉淀与上清不能完全分开，导致部分杂蛋白残留在上清中，降低目标蛋白纯度。离心转速过高时间过长，使能耗增加，工艺延长，在5000～8000rpm离心10～30min能使杂蛋白沉淀与上清液更好的分离，保证天然生物活性蛋白的提取纯度。

步骤4）中，所述的后处理除乙醇、除盐分以及干燥包括：离心真空浓缩法去除乙醇、透析除去盐分以及冷冻干燥。经后处理得到的天然生物活性蛋白，为低分子量生物活性蛋白干粉，方便储存、运输和使用。

本发明方法制备的天然生物活性蛋白，为低分子量生物活性蛋白干粉，呈白色或黄白色，无味，经SDS（十二烷基硫酸钠）-聚丙烯凝胶电泳分析检测蛋白分子量范围为10kDa～18kDa（10000道尔顿～18000道尔顿），在水、乙醇、生理盐水等溶剂中溶解性好，具有清除自由基、抑制脂质过氧化、抗细菌和真菌、抑制病毒DNA合成等生物活性，可以用作制备保健食品、作为食品添加剂和应用到化妆品中。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

本发明从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，采用氯化钠和乙醇两种食品级原料，用氯化钠水溶液对米总盐溶性蛋白提取，得到盐溶性蛋白溶液，采用乙醇对总盐溶性蛋白溶液除天然生物活性蛋白以外的杂蛋白进行沉淀除杂，从而经过后处理后得到纯度较高的天然生物活性蛋白。本发明方法制备成本低，制备过程无污染，具有良好的经济效益和环境效益，易于工业化大规模生产。

本发明方法制备的天然生物活性蛋白，为低分子量10kDa～18kDa，干粉，呈白色或黄白色，无味，在水、乙醇、生理盐水等溶剂中溶解性好，具有清除自由基、抑制脂质过氧化、抗细菌和真菌、抑制病毒DNA合成等生物活性，可以用作制备保健食品、作为食品添加剂和应用到化妆品中，有利于市场化大规模推广利用，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

通过以下具体实施例对本发明做进一步的具体说明，但应该理解本发明并不受这些内容所限制。

实施例1：

1）采用市售的北大荒绿色食品配送有限公司的北大荒绿野有机糙米为原料，粉碎后过40目筛，得到米粉原料，选用丙酮对米粉原料进行脱脂，米粉原料（g)与丙酮(mL)固液比1:3g/mL，振荡2h后6000rpm离心20min收集沉淀，置于通风橱自然风干即可得到脱脂米粉。

2）米总盐溶性蛋白提取：称取脱脂米粉15g加入1.0mol/L NaCl水溶液120mL，充分混匀后，40℃振荡提取2h，6000rpm离心20min收集上清液，重复步骤2）一次，合并上清液，得到总盐溶性蛋白溶液；

3）乙醇沉淀除杂：向步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液加入无水乙醇，总盐溶性蛋白溶液与无水乙醇的体积比为1：2，同时用磁力搅拌器搅拌混匀，放置4℃条件下沉淀1h，8000rpm离心20min，去除沉淀部分，收集上清即得到生物活性蛋白溶液；

4）后处理除乙醇、除盐分以及干燥：上述步骤3）中获得的生物活性蛋白溶液采用离心真空浓缩法除去溶液中的乙醇，再将已除去乙醇的溶液装入透析袋对蒸馏水透析3小时除去盐分，最后经冷冻干燥得到天然生物活性蛋白，为黄白色的干粉。天然生物活性蛋白的得率为1.5mg/g脱脂米粉。

实施例2：

1）采用市售的北大荒绿色食品配送有限公司的北大荒绿野有机糙米为原料，粉碎后过50目筛，得到米粉原料，选用丙酮对米粉原料进行脱脂，米粉原料（g)与丙酮(mL)固液比1:3g/mL，振荡2h后6000rpm离心20min收集沉淀，置于通风橱自然风干即可得到脱脂米粉；

2）米总盐溶性蛋白提取：称15g脱脂米粉加入1.0mol/L NaCl水溶液150mL，充分混匀后，30℃振荡提取2h，6000rpm离心20min收集上清液，重复步骤2）一次，合并上清液，得到总盐溶性蛋白溶液；

4）后处理除乙醇、除盐分以及干燥：上述步骤3）中获得的生物活性蛋白溶液采用离心真空浓缩法除去溶液中的乙醇，再将已除去乙醇的溶液装入透析袋对蒸馏水透析2小时除去盐分，最后经冷冻干燥得到天然生物活性蛋白，为黄白色的干粉。天然生物活性蛋白的得率为1.8mg/g脱脂米粉。

实施例3：

1）采用市售的江西省天玉油脂有限公司生产的精细脱脂米糠粉为原料，作为脱脂米粉；

2）米总盐溶性蛋白提取：准确称取15g脱脂米粉加入1.0mol/L NaCl水溶液150mL，充分混匀后，30℃振荡提取2h，6000rpm离心20min收集上清液，重复步骤2）一次，合并上清液，得到总盐溶性蛋白溶液；

3）乙醇沉淀除杂：向步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液加入无水乙醇，总盐溶性蛋白溶液与无水乙醇的体积比为1：2.5，同时用磁力搅拌器搅拌混匀，放置4℃条件下沉淀1h，8000rpm离心20min，去除沉淀部分，收集上清即得到生物活性蛋白溶液；

4）后处理除乙醇、除盐分以及干燥：上述步骤3）中获得的生物活性蛋白溶液采用离心真空浓缩法除去溶液中的乙醇，再将已除去乙醇的溶液装入透析袋对蒸馏水透析3小时除去盐分，最后经冷冻干燥得到天然生物活性蛋白，为黄白色的干粉。天然生物活性蛋白的得率为6.2mg/g脱脂米粉（即精细脱脂米糠粉）。

实施例4：

2）米总盐溶性蛋白提取：准确称取15g脱脂米粉加入0.5mol/L NaCl水溶液75mL，充分混匀后，20℃振荡提取4h，5000rpm离心30min收集上清液，重复步骤2）一次，合并上清液，得到总盐溶性蛋白溶液；

3）乙醇沉淀除杂：向步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液加入无水乙醇，总盐溶性蛋白溶液与无水乙醇的体积比为1：1，同时用磁力搅拌器搅拌混匀，放置1℃条件下沉淀0.5h，7000rpm离心30min，去除沉淀部分，收集上清即得到生物活性蛋白溶液；

4）后处理除乙醇、除盐分以及干燥：上述步骤3）中获得的生物活性蛋白溶液采用离心真空浓缩法除去溶液中的乙醇，再将已除去乙醇的溶液装入透析袋对蒸馏水透析3小时除去盐分，最后经冷冻干燥得到天然生物活性蛋白，为黄白色的干粉。天然生物活性蛋白的得率为4.1mg/g脱脂米粉（即精细脱脂米糠粉）。

实施例5：

2）米总盐溶性蛋白提取：准确称取15g脱脂米粉加入0.5mol/L NaCl水溶液180mL，充分混匀后，40℃振荡提取2h，8000rpm离心10min收集上清液，重复步骤2）一次，合并上清液，得到总盐溶性蛋白溶液；

3）乙醇沉淀除杂：向步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液加入无水乙醇，总盐溶性蛋白溶液与无水乙醇的体积比为1：3，同时用磁力搅拌器搅拌混匀，放置10℃条件下沉淀1.5h，9000rpm离心10min，去除沉淀部分，收集上清即得到生物活性蛋白溶液；

4）后处理除乙醇、除盐分以及干燥：上述步骤3）中获得的生物活性蛋白溶液采用离心真空浓缩法除去溶液中的乙醇，再将已除去乙醇的溶液装入透析袋对蒸馏水透析3小时除去盐分，最后经冷冻干燥得到天然生物活性蛋白，为黄白色的干粉。天然生物活性蛋白的得率为4.7mg/g脱脂米粉（即精细脱脂米糠粉）。

分子量范围确定：

采用蛋白质分子量测定的常规方法即十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE)法，操作参照江绍玫等的文献（江绍玫，朱速松，刘世家，等．水稻谷蛋白突变体的筛选及遗传分析．遗传学报，2003，30(7)：641-645）所列的方法，对实施例所制备的天然生物活性蛋白进行分子量分析。其中，未特别说明，百分数均为质量百分数。

SDS-PAGE凝胶浓度：分离胶15%，浓缩胶5%；

样品制备：取按照本发明实施例所制备的天然生物活性蛋白溶入蒸馏水制成蛋白含量为0.5μg/μL的溶液，取100μL蛋白溶液（蛋白含量为50μg）与25μL蛋白上样混合液[由5μL质量浓度为5%的β-巯基乙醇水溶液、5μL质量浓度为0.5%的溴酚蓝水溶液、5μL质量浓度为10%的SDS水溶液、5μL质量浓度为50%的甘油水溶液以及5μL浓度为250mmol/L Tris-HCl缓冲液（pH6.8）混合得到]混匀，煮沸5min后15000rpm离心15min，取20μL上清加样于凝胶上进行电泳，同时将蛋白质标准分子量溶液、实施例中步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液以及步骤3）生物活性蛋白溶液分别加样电泳，每个样品孔中加入的蛋白量为50μg。

电泳条件：恒压150V，电泳1.5～2小时；

凝胶染色和脱色：电泳后的凝胶用考马斯亮蓝R-250染色液（称取0.6g考马斯亮蓝R-250溶解于含25%无水乙醇、8%乙酸的脱色液中配成染色液，经滤纸过滤后使用）染色4小时，再用脱色液（25%无水乙醇、8%乙酸）脱色过夜，并观察凝胶电泳图。

根据其凝胶电泳图可知，通过与蛋白质标准分子量对比，可到本发明实施例1～5得到的天然生物活性蛋白在13kDa～16kDa，其中，在步骤2）中的总盐溶性蛋白溶液中，其除天然生物活性蛋白还有高于16kDa分子量的杂蛋白，步骤3）生物活性蛋白溶液，主要就是分子量在13kDa～16kDa的天然生物活性蛋白。

清除自由基活性测定：

二苯代苦味酞自由基(DPPH·)是一种人工合成的稳定自由基，DPPH·测定法是一种灵敏、简便、实用且重现性好的自由基清除能力的测定方法，常用于天然有机化合物和植物提取物的抗氧化研究。测定原理：DPPH·是一种比较稳定的有机自由基，在517nm附近有强吸收(显深紫色)。当自由基清除剂存在时，其孤电子被配对，吸收消失或减弱，通过517nm处测定吸收减弱的程度，可评价自由基清除剂提供质子的能力。其反应模式为：

该反应虽为可逆反应，但DPPH·的浓度较大时，溶液中的抗氧化剂AH将完全被消耗。不同的抗氧化剂由于提供质子的能力不同，会表现出不同的反应速度和自由基清除活性。

测定方法：将被测蛋白样品稀释成2.00、1.50、1.00、0.75、0.50、0.25、0.10mg/mL等浓度的溶液备用；另配制0.2mmol/L的DPPH·乙醇溶液。以总球蛋白为对照，按表1将上述反应液添加到具塞试管中，摇匀，于室温25℃下避光放置30min后，在波长517nm处测定吸光度。同时以V_C作为阳性对照。被测蛋白样品的DPPH自由基清除率(Scavenging Activity SA%)用公式（2）计算：

{SA %}_{(DPPH \cdot)} = (1 - \frac{A_{i} - A_{j}}{A_{c}}) \times 100 - - - (2)

式中：A_c为DPPH·与无水乙醇混合后的吸光度；

A_i为DPPH·与样品溶液反应后的吸光度；

A_j为样品溶液与无水乙醇混合后的吸光度。

表1清除DPPH·试验加样表

吸光度	反应液
		A_c	1.0mL DPPH·＋2.0mL无水乙醇
A_i	1.0mL DPPH·＋2.0mL样品溶液
		A_j	1.0mL无水乙醇＋2.0mL样品溶液

上述实施例1～5得到的稻米天然生物活性蛋白清除DPPH·自由基的半数抑制浓度（Inhibition Concentration,IC50)浓度和自由基清除率如表2所示。

表2稻米天然生物活性蛋白清除DPPH·自由基的IC50

	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5
						IC50（mg/mL）	0.35	0.32	0.28	0.34	0.33

自由基清除率

73%

78%

82%

74%

75%

由表2可知，本发明方法制备的天然生物活性蛋白具有清除自由基生物活性，可以用于制备保健食品、作为食品添加剂和应用到化妆品中。

Claims

1.一种从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将糙米或/和米糠经脱脂处理得到脱脂米粉；

2)将步骤1)中的脱脂米粉与氯化钠水溶液混合，然后经振荡提取、第一分离收集上清液，即为总盐溶性蛋白溶液；

所述的氯化钠水溶液的浓度为0.5mol/L～1.5mol/L；

所述的脱脂米粉的质量与氯化钠水溶液的体积比为1：5～12g/mL；

所述的振荡提取的条件为：在20～40℃振荡提取2～4小时；

所述的第一分离的条件为：在5000～8000rpm离心10～30min；

3)向步骤2)中的总盐溶性蛋白溶液加入乙醇，混合均匀，经静置、第二分离后除去沉淀部分，得到生物活性蛋白溶液；

所述的总盐溶性蛋白溶液与乙醇的体积比为1：1～3；

所述的静置的条件为：1～10℃静置0.5～1.5h；

所述的第二分离的条件为：在7000～9000rpm离心10～30min；

4)将步骤3)中的生物活性蛋白溶液经后处理除乙醇、除盐分以及干燥后得到天然生物活性蛋白。

2.根据权利要求1所述的从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，其特征在于，步骤1)中，所述的脱脂处理包括：将糙米或/和米糠粉碎后过30～80目筛得到米粉原料，向米粉原料中加入丙酮脱脂，经振荡、分离、干燥后得到脱脂米粉。

3.根据权利要求2所述的从糙米或/和米糠中提取天然生物活性蛋白的方法，其特征在于，所述的米粉原料的质量与丙酮的体积比为1：2～4g/mL。