CN108813615B - 具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法 - Google Patents
具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,包括以下步骤:步骤一、绿豆原料打粉,得绿豆粉,绿豆粉加水调配得绿豆浆;步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶,在43‑50℃条件下恒温搅拌酶解5‑7h后,离心除渣,得酶解液,其中,中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为0.2‑1:100;步骤三、酶解液灭酶、离心分离、精滤取上清液,上清液真空减压浓缩后进行热灌装,即得绿豆提取液。本发明具有实现绿豆籽粒中蛋白肽和黄酮的共制备,在不破坏提取后剩余残渣的可食用性的基础上提供一种具有良好的抗氧化功效绿豆提取液的有益效果。
Description
技术领域
本发明涉及农产品精深加工利用技术领域。更具体地说,本发明涉及一种具有抗氧化活性、富含绿豆蛋白肽和绿豆黄酮的绿豆提取液的制备方法。
背景技术
绿豆是我国传统食用豆类作物,高蛋白、低脂肪、中淀粉作物,营养丰富,维生素和微量元素含量较高,具有清热解毒、消暑保肝功能,深受人们喜爱。绿豆中蛋白质含量约为21~25%,以球蛋白(>60%)和清蛋白为主,通常球蛋白和清蛋白都属于生理活性较高的蛋白质,营养和功效价值很高,绿豆蛋白经过降解处理后可以生成分子量较小的蛋白肽,这些蛋白肽具有良好生理活性,如提高免疫力,良好的抗氧化、ACE抑制活性、小鼠缺氧耐受性和解酒功能等,对小鼠的自发性高血压心脏收缩压同样具有明显抑制作用等。
目前,关于绿豆蛋白肽制备技术以生物酶法居多,例如,授权公告号为CN101979655 B,名称为“一种酶法生产绿豆肽的方法”的发明专利,授权公告号为CN103290086B,名称为“具有ACE抑制活性的绿豆蛋白肽及其制备方法与应用”的发明专利,授权公告号为CN103409490B,名称为“一种绿豆蛋白肽的酶解制备技术”的发明专利,均是以绿豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶开展酶解加工,但制备过程中均采用酸碱调pH值,同时辅助采用纳滤、膜分离等多种分离手段,制备工艺较为繁琐,大量使用的酸碱试剂不利于后期环保,且破坏提取后剩余残渣可食用性;此外,绿豆中富含黄酮,绿豆黄酮具有良好抗氧化、解毒、抑菌抗菌等功效,广泛用于保健功能食品和化妆品中,关于绿豆中黄酮类化合物的研究,国内还处于起步阶段,黄酮类化合物的提取方法有水煮、超临界CO2流体提取、有机溶解提取等,同样存在制备工艺繁琐,以绿豆全籽粒为原料展开加工,能实现绿豆蛋白肽和绿豆黄酮的共制备,将有力提升产品的营养和功效价值,扩宽产品的应用出路。因此,如何开展绿豆全籽粒中绿豆蛋白肽和绿豆黄酮成分的共提取技术是目前绿豆精深加工的重要研究内容。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,其具有实现绿豆籽粒中蛋白肽和黄酮的共制备,在未破坏提取后剩余残渣的可食用性的基础上使绿豆提取液具有良好的抗氧化功效。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种活具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、绿豆原料打粉,得绿豆粉,绿豆粉加水调配得绿豆浆;
步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶,在43-50℃条件下恒温搅拌酶解5-7h后,离心除渣,得酶解液,其中,中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为0.2-1:100;
步骤三、酶解液灭酶、离心分离、精滤取上清液,上清液真空减压浓缩后进行热灌装,即得绿豆提取液。
优选的是,步骤一中绿豆原料的蛋白质含量≥20%,打粉具体为:选取的绿豆原料,用2-3倍量绿豆原料重量的水冲洗2-3次,沥干后置于打粉机中打粉,过50-70目筛,得绿豆粉。
优选的是,步骤一中绿豆浆调配中绿豆粉和水的质量比为1:6-10,调配方法具体为:调节转速为1500-2000rpm进行剪切分散,分散时间为10-20min。
优选的是,步骤二中酶解搅拌速度为20-40rpm。
优选的是,步骤三中,灭酶具体为:将酶解液升温至85-95℃,保持10-20min;
离心分离具体为:采用碟片离心机,调节转速为7000-8000rpm;
精滤具体为:采用管式离心机,调节转速为12000-15000rpm。
优选的是,步骤三中,上清液真空减压浓缩后进行热灌装具体为:上清液在温度为55-65℃条件下真空浓缩至原体积1/7-1/10,得浓缩液,将浓缩液升温至85-90℃进行热灌装。
优选的是,步骤一中沥干后的绿豆原料置于打粉机前进行预处理,具体为:取沥干后绿豆原料置于真空干燥箱中,调控温度为40℃,干燥5-6h,取出加入绿豆原料总质量20%的水,密封控制温度为10-15℃搅拌放置3h后置于真空干燥箱中,调控温度为40℃,干燥5-6h,得预处理绿豆原料;
步骤一中绿豆粉加水调配得绿豆浆具体为:向绿豆粉中加入其总质量3倍量的水,搅拌混合均匀后进行一次冷冻超声处理,得一次处理物,向一次处理物加入绿豆粉总质量3倍量的水,搅拌混合均匀后进行二次冷冻超声处理,得二次处理物,向二次处理物加入绿豆粉总质量4倍量的水,搅拌混合均匀后进行三次冷冻超声处理,得绿豆浆;
其中,一次超声冷冻处理具体为:置于-10℃的冰箱中冷冻处理30min后取出升温至室温,调控超声功率为200W,超声5min;一次超声冷冻处理具体为:置于-15℃的冰箱中冷冻处理20min后取出升温至室温,调控超声功率为250W,超声4min;一次超声冷冻处理具体为:置于-20℃的冰箱中冷冻处理10min后取出升温至室温,调控超声功率为 300W,超声3min。
本发明至少包括以下有益效果:
第一、绿豆富含淀粉、蛋白质、黄酮和粗纤维等多种成分,多成分会干扰制备工艺高效运行和最终产品的纯度和品质,为了去除干扰组分,现有制备技术需要采用较为繁琐的制备工艺,如乙醇辅助提取黄酮,采用酸碱法等分离淀粉、提高蛋白纯度等,本发明选择低温酶解技术(45~50℃),避免了提取温度过高导致淀粉糊化影响制备效果,酶解结束后通过离心可有效实现生淀粉和蛋白肽的分离,同时,该技术可实现绿豆籽粒中蛋白肽和黄酮的共制备,产品最终蛋白肽含量为23.7~25.1g/mL,黄酮含量为1.9~2.2mg/mL,淀粉含量仅为5.42%,产品具有良好的总抗氧化活性,铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)和氧自由基清除能力(ORAC)值分别为11.6~13.5Trolox/mL和7.0~8.7Trolox/mL;
第二、本发明生产的绿豆提取液具有良好的抗氧化功效,制备中仅使用水作为提取剂,并采用中性酶进行酶解,避免现有通行技术中必须用酸碱液调节提取液的pH值(碱性蛋白酶)的环节,制备技术清洁、绿色,无污染环保;同时,制备工艺操作简便,提高生产效率,适宜工业化大批量生产,可用作保健食品、普通食品和化妆品的配料,未来具有良好的产业化发展前景;进一步,由于反应条件温和,并未破坏提取后剩余残渣(步骤二中离心除渣的除去没接液后的剩余残渣、及步骤三中离心分离和精滤过程中产生的残渣)的可食用性,提高原料的利用率。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
<实施例1>
具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、选取筛除杂质,去掉破碎粒的蛋白质含量为21.5%,符合国家《绿豆》质量标准(GB 5009.5-2016)要求的绿豆原料100kg,用2倍量绿豆原料重量的水冲洗3次,沥干后置于打粉机中打粉,过60目筛,得绿豆粉,绿豆粉加水调配得绿豆浆,其中,绿豆浆调配中绿豆粉和水的质量比为1:6(用水600kg),调配方法具体为:调节转速为 1500rpm进行剪切分散,分散时间为10min;
步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶43.0g(即中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为0.2:100),在43℃条件下恒温搅拌酶解5h后,采用卧螺离心机进行离心除渣,得酶解液,其中,酶解搅拌速度为20rpm;
步骤三、将酶解液升温至85℃,保持10min,进行灭酶处理,灭酶后采用碟片离心机,调节转速为7000rpm进行离心分离,分离后采用管式离心机,调节转速为1200rpm进行精滤,取上清液(透明液体),上清液在温度为55℃条件下真空浓缩至原体积1/7,得浓缩液,将浓缩液升温至85℃进行热灌装即得绿豆提取液;
其中,上述所用水均为去离子水,步骤二中的中性蛋白酶为诺维信(中国)投资有限公司的中性复合蛋白酶Protamex。
<实施例2>
具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、选取筛除杂质,去掉破碎粒的蛋白质含量为22.1%,符合国家《绿豆》质量标准(GB 5009.5-2016)要求的绿豆原料150kg,用2.5倍量绿豆原料重量的水冲洗3次,沥干后置于打粉机中打粉,过60目筛,得绿豆粉,绿豆粉加水调配得绿豆浆,其中,绿豆浆调配中绿豆粉和水的质量比为1:8(水1200kg),调配方法具体为:调节转速为1800rpm 进行剪切分散,分散时间为15min;
步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶199g(即中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为0.6:100),在46℃条件下恒温搅拌酶解6h后,采用卧螺离心机进行离心除渣,得酶解液,其中,酶解搅拌速度为30rpm;
步骤三、将酶解液升温至90℃,保持15min,进行灭酶处理,灭酶后采用碟片离心机,调节转速为7500rpm进行离心分离,分离后采用管式离心机,调节转速为13000rpm进行精滤,取上清液,上清液在温度为60℃条件下真空浓缩至原体积1/8,得浓缩液,将浓缩液升温至88℃进行热灌装即得绿豆提取液;
其中,上述所用水均为去离子水,步骤二中的中性蛋白酶为诺维信(中国)投资有限公司的中性复合蛋白酶Protamex。
<实施例3>
具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、选取筛除杂质,去掉破碎粒的蛋白质含量为22.5%,符合国家《绿豆》质量标准(GB 5009.5-2016)要求的绿豆原料50kg,用3倍量绿豆原料重量的水冲洗2次,沥干后置于打粉机中打粉,过60目筛,得绿豆粉,绿豆粉加水调配得绿豆浆,其中,绿豆浆调配中绿豆粉和水的质量比为1:10(用水500kg),调配方法具体为:调节转速为2000rpm 进行剪切分散,分散时间为20min;
步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶112.5g(即中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为1:100),在50℃条件下恒温搅拌酶解7h后,采用卧螺离心机进行离心除渣,得酶解液,其中,酶解搅拌速度为40rpm;
步骤三、将酶解液升温至95℃,保持20min,进行灭酶处理,灭酶后采用碟片离心机,调节转速为8000rpm进行离心分离,分离后采用管式离心机,调节转速为15000rpm进行精滤,取上清液,上清液在温度为65℃条件下真空浓缩至原体积1/10,得浓缩液,将浓缩液升温至85-90℃进行热灌装即得绿豆提取液;
其中,上述所用水均为去离子水,步骤二中的中性蛋白酶为诺维信(中国)投资有限公司的中性复合蛋白酶Protamex。
<实施例4>
具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,包括以下步骤:
步骤一、选取筛除杂质,去掉破碎粒的蛋白质含量为22.3%,符合国家《绿豆》质量标准(GB 5009.5-2016)要求的绿豆原料50kg,用3倍量绿豆原料重量的水冲洗2次,沥干后置于真空干燥箱中,调控温度为40℃,干燥5h,取出加入绿豆原料总质量20%的水,密封控制温度为10-15℃范围内搅拌放置3h后置于真空干燥箱中,调控温度为40℃,干燥6h,得预处理绿豆原料,将预处理绿豆原料置于打粉机中打粉,过60目筛,得绿豆粉,向绿豆粉中加入其总质量3倍量的水(用水150kg),搅拌混合均匀后进行一次冷冻超声处理,得一次处理物,向一次处理物加入绿豆粉总质量3倍量的水(用水150kg),搅拌混合均匀后进行二次冷冻超声处理,得二次处理物,向二次处理物加入绿豆粉总质量4倍量的水(用水200kg),搅拌混合均匀后进行三次冷冻超声处理,得绿豆浆;
其中,一次超声冷冻处理具体为:置于-10℃的冰箱中冷冻处理30min后取出升温至室温,调控超声功率为200W,超声5min;一次超声冷冻处理具体为:置于-15℃的冰箱中冷冻处理20min后取出升温至室温,调控超声功率为250W,超声4min;一次超声冷冻处理具体为:置于-20℃的冰箱中冷冻处理10min后取出升温至室温,调控超声功率为 300W,超声3min;
步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶112.5g(即中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为1:100),在50℃条件下恒温搅拌酶解7h后,采用卧螺离心机进行离心除渣,得酶解液,其中,酶解搅拌速度为40rpm;
步骤三、将酶解液升温至95℃,保持20min,进行灭酶处理,灭酶后采用碟片离心机,调节转速为8000rpm进行离心分离,分离后采用管式离心机,调节转速为15000rpm进行精滤,取上清液,上清液在温度为65℃条件下真空浓缩至原体积1/10,得浓缩液,将浓缩液升温至85-90℃进行热灌装即得绿豆提取液;
其中,上述所用水均为去离子水,步骤二中的中性蛋白酶为诺维信(中国)投资有限公司的中性复合蛋白酶Protamex。
鉴定实验
1、采用国标GB/T 22492-2008(附录B)测定实施例1-4样品中蛋白肽含量,具体见表1;
2、测定实施例1-4样品中黄酮含量,具体方法如下:
S1、配置质量浓度为0.416g/mL的芦丁标准溶液:精密称取干燥至恒重的芦丁标准样品0.0416g,加适量的体积分数为30%的乙醇溶液,加热溶解,冷却后定容至100mL;
S2、绘制标准曲线:
S20、精确量取芦丁标准溶液7份,7份体积分别为1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.0mL,甲醇溶液定容至10mL,得7份不同浓度的芦丁标准溶液,取该7份浓度芦丁标准溶液各1.0mL,分别加入双蒸水1.5mL、质量浓度为 52.36mg/mL的NaNO2溶液0.15mL,避光反应5min,再加入质量浓度为111.11mg/mL 的六水氯化铝溶液0.15mL,避光反应5min,最后加入质量浓度为40mg/mLNaOH 溶液1mL,避光反应15min,得7份待测液;
S21、按照S20的方法不添加六水氯化铝溶液配制空白液,415nm波长下测定 7份待测液及空白液的吸光值,绘制吸光值-浓度的标准曲线;
S3、黄酮含量测定:取实施例1-4的样品各1mL,分别按照步骤S20的方法处理后,测定在415nm波长下的吸光值,根据标准曲线推测实施例1-4的样品中黄酮含量(μg/mL)。
3、测定实施例1-4样品的抗氧化活性,包括铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)和氧自由基清除能力(ORAC),具体方法如下:
3.1铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定:
H1、配置不同浓度的Trolox溶液,并在593nm下,使用酶标仪测定吸光值,以trolox溶液浓度(μmol/mL)为横坐标,以吸光度值(A)为纵坐标绘制吸光值-Trolox溶液浓度的标准曲线;
H2、按照体积比为10:1:1,取300mmol/L醋酸盐缓冲液、10mmol/L TPTZ盐酸溶液(用40mmol/L盐酸溶液溶解一定量的TPTZ,得到浓度为10mmol/L的TPTZ盐酸溶液)、及20mmol/L FeCl3·6H2O溶液,混合均匀,得FRAP试剂,其中,;
H3、在96孔板中分别加入实施例1-4样品20μL,每份样品中加入260μL FRAP试剂,避光反应30min后在593nm下,使用酶标仪测定吸光值,其中,吸光值大小与样品抗氧化能力成正比,根据标准曲线得出实施例1-4样品的铁离子还原能力(以μmol Trolox/mL样品表示),其中,FRAP试剂使用之前加热至37℃。
3.2氧自由基清除能力(ORAC)测定(具体参考Benzie(1996)和Lei Liu等(2016)的方法并稍作修改):
在黑色96孔板中分别加入实施例1-4的20μL样品、及Trolox标准样品(范围: 0-60μmol/mL,每隔5μmol/mL取一浓度值)20μL各两组,每份样品中加入260μL荧光素钠盐溶液(0.0868nmol/L),然后将黑色96孔板放入多功能酶标仪中在37℃条件下孵育 20min,然后在相同样品的其中一组中迅速加入20μL偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH)溶液(153nmol/L),振荡摇匀,立即在激发波长485nm,发射波长525nm下对每份样品进行测定,初始荧光强度值记为f0,每隔2min自动测定荧光强度,连续测定2h,各样品不同时间点的绝对荧光强度值与对应不添加AAPH样品组荧光强度相比,折算成相对荧光强度Fi,采用近似积分法计算荧光衰减曲线面积;
Fi=fi(+AAPH)/fi(-AAPH),其中,fi(+AAPH)代表添加AAPH的样品的荧光强度;fi(-AAPH)代表不添加AAPH的样品的荧光强度;
AUC=2×(F0+F1+﹒﹒﹒+Fn)-F1-Fn,其中,Fi代表第i个测定时间点的相对荧光强度值;
net AUC=AUCsample–AUCblank
其中,AUCsample为添加AAPH组荧光衰减曲线下面积;AUCblank为对应不添加AAPH 组荧光衰减曲线下面积,首先以trolox标准样品建立在0-60μmol/mL浓度范围内的标准曲线,以trolox溶液浓度为横坐标,以net AUC为纵坐标绘制标准曲线,实施例1-3样品的氧自由基吸收能力表示为trolox的质量当量,即μmol trolox/mL样品。
实验结果
1、实施例1-4样品中黄酮和蛋白肽含量
表1实施例1-4样品中蛋白肽和黄酮含量
样品 | 蛋白肽(mg/mL) | 黄酮(mg/mL) |
实施例1 | 25.1±1.33 | 2.0±0.08 |
实施例2 | 24.4±1.06 | 2.2±0.04 |
实施例3 | 23.7±0.87 | 1.9±0.10 |
实施例4 | 24.71±0.93 | 2.3±0.06 |
由表1可知实施例1-4得到的绿豆提取液中富含蛋白肽和黄酮类物质,其含量分别约为25mg/mL和2.0mg/mL左右,不同实施案例样品含量差异不显著,其中,实施例4的黄酮含量相较于实施例3高,其主要原因在于实施例4对绿豆原料打粉前进行预处理,控制温度不高于40℃反复收缩膨胀,在不影响蛋白活性的同时促进植物细胞的收缩膨胀,利于绿豆中黄酮析出,绿豆粉加水调配得绿豆浆中通过三次冷冻超声处理,通过调控不同浓度下的冷冻超声,改变冷冻过程中冰晶对于绿豆粉的作用力,且配合超声提取,增大物质分子运动频率和速度、增加溶剂穿透力、提高黄酮溶出度,大能量的超声波作用在液体里,在振动处于稀疏状态时,液体会被撕裂成很多的小空穴,进一步促进黄酮溶出,并有利于后期蛋白质的提取,且有效避免常规水煮法提取黄酮杂质较多,淀粉糊化导致的淀粉含量过高问题,且常规水煮法提取黄酮,由于温度过高其并不利于与蛋白共提取的实现。
2、实施例1-3样品的抗氧化能力
表2实施例1-3样品的抗氧化能力
采用FRAP和ORAC两种方式进行功效评价,由表2可知实施例1-4得到的绿豆提取液的FRAP和ORAC值分别为12.0μmol Trolox/mL和8.5μmol Trolox/mL左右,不同实施案例样品含量差异不显著,ORAC值越高,表明清除自由基能力越强。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (4)
1.具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、绿豆原料打粉,得绿豆粉,绿豆粉加水调配得绿豆浆,其中,沥干后的绿豆原料置于打粉机前进行预处理,具体为:取沥干后绿豆原料置于真空干燥箱中,调控温度为40℃,干燥5-6h,取出加入绿豆原料总质量20%的水,密封控制温度为10-15℃搅拌放置3h后置于真空干燥箱中,调控温度为40℃,干燥5-6h,得预处理绿豆原料;
绿豆粉加水调配得绿豆浆具体为:向绿豆粉中加入其总质量3倍量的水,搅拌混合均匀后进行一次冷冻超声处理,得一次处理物,向一次处理物加入绿豆粉总质量3倍量的水,搅拌混合均匀后进行二次冷冻超声处理,得二次处理物,向二次处理物加入绿豆粉总质量4倍量的水,搅拌混合均匀后进行三次冷冻超声处理,得绿豆浆;
其中,一次超声冷冻处理具体为:置于-10℃的冰箱中冷冻处理30min后取出升温至室温,调控超声功率为200W,超声5min;二次超声冷冻处理具体为:置于-15℃的冰箱中冷冻处理20min后取出升温至室温,调控超声功率为250W,超声4min;三次超声冷冻处理具体为:置于-20℃的冰箱中冷冻处理10min后取出升温至室温,调控超声功率为300W,超声3min;
步骤二、向绿豆浆中加入中性蛋白酶,在43-50℃条件下恒温搅拌酶解5-7h后,离心除渣,得酶解液,其中,中性蛋白酶与绿豆原料中蛋白质总量的质量比为0.2-1:100;
步骤三、酶解液灭酶、离心分离、精滤取上清液,上清液真空减压浓缩后进行热灌装,即得绿豆提取液;
步骤三中,灭酶具体为:将酶解液升温至85-95℃,保持10-20min;
离心分离具体为:采用碟片离心机,调节转速为7000-8000rpm;
精滤具体为:采用管式离心机,调节转速为12000-15000rpm。
2.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,其特征在于,步骤一中绿豆原料的蛋白质含量≥20%,打粉具体为:选取的绿豆原料,用2-3倍量绿豆原料重量的水冲洗2-3次,沥干后置于打粉机中打粉,过50-70目筛,得绿豆粉。
3.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,其特征在于,步骤二中酶解搅拌速度为20-40rpm。
4.如权利要求1所述的具有抗氧化活性的绿豆提取液的制备方法,其特征在于,步骤三中,上清液真空减压浓缩后进行热灌装具体为:上清液在温度为55-65℃条件下真空浓缩至原体积1/7-1/10,得浓缩液,将浓缩液升温至85-90℃进行热灌装。
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