CN103340399A - 一种制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法 - Google Patents
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Abstract
一种制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法，涉及一种乳酸菌口服液的制备方法。所述方法步骤如下：骨胶原蛋白液中加入脱脂乳清粉、腌制玫瑰花瓣的蜜汁，搅拌溶解并升温，至90-98℃时，保持30-40分钟杀菌；冷却至45℃±2时，投入菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶解2-4小时后，冷却至37℃±2时，投入混合菌种进行发酵，发酵温度为37℃±2；当乳酸菌群浓度达到5×109cfu/ml以上时，发酵结束；降温至20-25℃或室温，无菌灌装。本发明制备的乳酸菌口服液中含有乳酸菌和易吸收的小分子骨胶原蛋白多肽、玫瑰蜜汁，具有调节肠道微生态平衡和滋润骨骼筋腱腹膜以及美容养颜肌肤的功效。
Description
技术领域
本发明涉及一种乳酸菌玫瑰口服液的制备方法，具体涉及一种以骨胶原蛋白液为发酵底物制备乳酸菌玫瑰口服液的方法。
背景技术
乳酸菌制剂的制备工艺是发酵的方法，由于发酵要达到的目的不同，有以要活菌数为目的、有通过发酵分解底物为目的。所以在乳酸菌可以生长的前提下，根据需求配置发酵底物。其中:需求乳酸菌高活性时，配置相应的培养基，使乳酸菌快速复壮并繁殖;需求发酵底物分解的彻底，而底物蛋白含量高时，选择与乳酸菌不但没有拮抗，而且有辅助作用，在酸奶生产中研究应用比较多的菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶分解蛋白质并添加乳酸菌生长必须的乳糖含量高的脱脂乳清粉。
发明内容
本发明提供一种制备骨胶原蛋白乳酸菌口服液的方法。
本发明的以骨胶原蛋白混合液为发酵底物，添加脱脂乳清粉和腌制玫瑰花瓣的蜜汁制备乳酸菌瑰口服液的方法，步骤如下:
(1)按照脱脂后骨胶原蛋白混合液重量的4-10%加入脱脂乳清粉，然后加入占脱脂后骨胶原蛋白液重量5-15%的腌制玫瑰花瓣的蜜汁，搅拌溶解并升温，至90-98℃时，保持30-40分钟杀菌;
(2)杀菌后冷却至45℃±2时，投入占底物总重量0.1-0.3%的菠萝蛋白酶、占底物总重量0.1-0.3%的木瓜蛋白酶，酶解2-4小时后，降温;
(3)降温至37℃±2时，投入占底物总重量0.2-0.5%的混合乳酸菌种进行发酵，发酵温度为37℃±2;
(4)当乳酸菌群浓度达到5×109cfu/ml以上时，发酵结束;
(5)降温至20-25℃或室温，无菌灌装，得到骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液。
本发明采用肠道益生菌酸乳菌分解骨胶原蛋白液，同时加入乳酸菌繁殖必须的乳糖含量高的脱脂乳清粉、腌制玫瑰花瓣的蜜汁。为了蛋白质分解得快和彻底，在发酵前先用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶降解。通过生产实践，收到很好效果。本发明制备的乳酸菌口服液中含有乳酸菌和易吸收的小分子骨胶原蛋白多肽、玫瑰蜜汁，具有调节肠道微生态平衡和滋润骨骼筋腱腹膜以及美容养颜肌肤的功效。
附图说明
图1为低温截留脂肪装置的结构示意图;
图2为脂肪截留槽的俯视图;
图3为脂肪截留槽的左视图;
图4为脂肪截留槽的右视图。
具体实施方式
下面结合实施方式对本发明的技术方案作进一步解释说明，但并不限定本发明的保护范围，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。
具体实施方式一:本实施方式按照如下步骤制备以骨胶原蛋白液为发酵底物的乳酸菌玫瑰口服液:
1、从提取车间洁净不锈钢管道输送到发酵罐的经过脂肪截留工艺脱脂的骨胶原蛋白液，测得浓度为固形物含量11-16%(w/w)，蛋白含量占固形物含量的45-88%(w/w)。
2、按照骨胶原蛋白混合液重量的4-10%加入脱脂乳清粉，然后加入占脱脂后骨胶原蛋白液重量5-15%的腌制玫瑰花瓣的蜜汁，搅拌溶解并升温，至90-98℃时，保持30-40分钟杀菌;该蜜汁为天然蜂蜜腌制新鲜玫瑰花瓣形成的自然物质。
3、杀菌后冷却至45℃±2时，投入占底物总重量0.1-0.3%的菠萝蛋白酶、占底物总重量0.1-0.3%木的瓜蛋白酶，酶解2-4小时后，降温;酶制剂均由广西南宁庞博生物工程有限公司生产，酶活力均为70×104u/g。
4、降温至37℃±2时，投入占底物总重量0.2-0.5%的混合乳酸菌种进行发酵，发酵温度为37℃±2;所述混合菌种由嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混合而成。其中，嗜酸乳杆菌占菌种重量的30-70%，嗜热链球菌占菌种重量的30-70%，其菌活均为109-1010cfu/m，菌种来源于中国农业微生物菌种保藏管理中心ACCC10637\ACCC11073。
5、恒温控制发酵温度37℃±2。打开发酵罐顶部带过滤装置的呼吸口。
6、发酵期间，每隔4小时取样菌检一次。
7、酶解发酵期间，相隔2小时搅拌一次15分钟，转数每分钟10转。
8、发酵时间48小时以上时，取样测试。当乳酸菌群浓度达到5X109cfu/ml以上时，发酵结束;
9、降温至20-25℃或室温，开始每瓶20ml量无菌灌装、锁盖、贴标、装盒、抽检、塑封、装箱。得到富含小分子骨胶原蛋白多肽的乳酸菌玫瑰口服液。送入4℃恒温冷藏库。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一不同的是，本实施方式提供一种利用真空负压法抽提屠宰分割鲜骨中骨胶原蛋白液的工艺，步骤如下:
(1)将屠宰猪、牛、羊、驴、马、鸡、鸭、鹅或袋鼠分割肉剔除的畜禽动物鲜骨浸泡、漂洗、切块、冷冻后，装入提取罐中并密封;
(2)启动真空泵，打开连接缓冲罐阀门，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭真空泵;
(3)开启提取罐内套蒸汽阀门，升温至表示温度为20-50℃、罐内压力为0.01-0.1MPA时关闭进气阀;
(4)逐渐打开缓冲罐连接提取罐阀门，将从骨中融出的血水抽入缓冲罐，当缓冲罐压力归0时，打开底部阀门，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(5)重复数次步骤(2)-(4)，使血水在没凝固前随压泄出;
(6)打开提取罐休顶部的喷淋阀门1-5分钟，冲洗骨表面附着的血融出留下的血沫，启动真空泵，打开连接缓冲罐阀门，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭真空泵，逐渐打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，利用缓冲罐内负压将其抽至缓冲罐，当压力归0时，打开缓冲罐底部阀门，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(7)启动提取罐内套蒸汽阀门和真空泵，至提取罐内套表示温度40-60℃、罐内压力0.01-0.1MPa时关闭进气阀;缓冲罐真空度14-75mmhg时关闭真空泵;
(8)缓慢打开提取罐与缓冲罐之间的阀门，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中观察，当抽出的物料颜色由褐色逐渐变黄白色时，预示血水抽提结束;当缓冲罐负压归0时，打开缓冲罐底部阀门放净缓冲罐中的以血水为主的物料至有机肥车间备用，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(9)将提取罐夹套和内套蒸汽阀门同时启动升温升压，当内套表示温度升至60-100℃、表示压力升至0.1-0.13Mpa时关闭夹内套进气阀;
(10)启动真空泵，打开连接缓冲罐阀门，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭;
(11)缓慢打开缓冲罐与提取罐之间阀门，将以脂肪为主的混合液抽入缓冲罐，直到缓冲罐至负压归0，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门；
(12)重复步骤(9)-(11)，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中观察，当抽出的物料颜色变黄白色并逐渐乳白时，鲜骨中的脂肪脱除步骤结束，排空缓冲罐内以脂肪为主的物料，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(13)开启提取罐内套和夹套蒸汽阀门，当提取罐内套表示温度90-121℃、罐内压力0.1-0.15MPa时关闭夹内套进气阀;启动真空泵，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭;缓慢打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，将骨胶原蛋白液抽入缓冲罐，直到缓冲罐至负压归0，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门；
(14)重复步骤(13)3-6次，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中可以观察到，当抽出物乳白，即得骨胶原蛋白液。当抽出物浓度逐渐下降，物料颜色由浓浓的乳白逐渐变得稀薄时，预示提取即将结束。将骨胶原蛋白液抽入缓冲罐以后，缓冲罐负压归0时，打开底部放料阀门，排空缓冲罐中的骨胶原蛋白液至暂储罐。
(15)将上述骨胶原蛋白液冷却至15-25℃，静止2-8小时，吸走浮油，然后利用脂肪截留装置，在温度控制在10-20℃，脱除混合液中的脂肪，至含量0.1-1%以下，得到脱脂骨胶原蛋白混合液。
如图1-4所示，本发明的低温截留脂肪装置包括脂肪截留槽1、缓冲罐2、过滤网3、发酵罐11和储料罐12，脂肪截留槽1的上端设置有进料口4，进料口4经管线与储料罐12相连，脂肪截留槽1的下端设置有出料口5，出料口5经管线与缓冲罐2的进口相连。缓冲罐2有两个出料口，其中一个出料口与储料罐12相连，另一个出料口与发酵罐11相连。缓冲罐2底部最低点分别设置扬程泵9和放料泵10，若脂肪含量检测合格即通过放料泵10放料进入发酵罐11进行下道工序;不合格则经扬程泵9连接管线进入储料罐12中重新进行过滤截留。所述脂肪截留槽1为上高下低的倾斜式槽体，脂肪截留槽1的内壁1-1和外壁1-2之间形成中空半圆形夹套，脂肪截留槽1的内壁1-1上设置有若干个过滤网3，外壁1-2上设置有进水口7和出水口8，用于通冷水冷却物料，其中进水口7设置在进料口一侧、外壁1-2前端的上部，出水口8设置在出料口一侧、外壁1-2下端的底部。
上述装置中，所述脂肪截留槽1的倾角α为25-45度，物料自行向下流动。
上述装置中，所述脂肪截留槽1的槽体全长30-50m。
上述装置中，所述过滤网3为筛孔式过滤网，过滤网3与过滤网3之间的间距为50cm，其材质为不锈钢。当物料过滤行至截流槽尾部时，可视情况在筛孔式过滤网上设置一层绢网，过滤效果会更好一些。
上述装置中，所述脂肪截留槽1的横截面为半圆形，内径为30-80cm，上部敞开。
上述装置中，所述脂肪截留槽1的内壁1-1与外壁1-2之间的通水间距为1-15cm。
上述装置中，所述脂肪截留槽1的内壁1-1上设置有若干个焊接挡板6，过滤网3固定在焊接挡板6内，抽拉方便，形成多层过滤截留。
上述装置中，所述过滤网3至少由两组不同孔径的过滤网组成，孔径大的过滤网位于脂肪截留槽1的上段，孔径小的过滤网位于脂肪截留槽1的下段。
上述装置中，所述出料口缓冲罐2为卧式。
具体实施方式四:本实施方式按照如下步骤制备以骨胶原蛋白液为发酵底物的乳酸菌玫瑰口服液:
一、前处理工艺:采取真空负压抽提法脱除鲜骨中血水:提取罐在正压、缓冲罐在负压真空转换的条件下脱除鲜骨中血水。即:在提取罐与真空泵之间连接一个缓冲罐，在提取罐正压、缓冲罐负压真空条件下，当提取罐仪表显示温度20-60℃时，反复升压泄压，使血水在60℃以下没凝固前随压泄出，具体步骤如下:
(1)取鲜骨1000kg浸泡20小时后，漂洗并切块5-10cm，-30℃冷冻8小时后，装入提取罐中并密封;
(2)启动真空泵，打开连接缓冲罐阀门，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭真空泵;
(3)开启提取罐内套蒸汽阀门，升温至表示温度为20-50℃、罐内压力为0.01-0.1MPA时关闭进气阀;
(4)逐渐打开缓冲罐连接提取罐阀门，将从骨中融出的血水抽入缓冲罐，当压力归0时，打开缓冲罐底部阀门，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(5)重复数次步骤(2)-(4)，使血水在没凝固前随压泄出;
(6)打开提取罐体顶部的喷淋阀门1-5分钟冲洗骨表面附着的血融出留下的血沫。利用缓冲罐内负压真空度14-75mmhg，将其抽至缓冲罐，当压力归0时，打开缓冲罐底部阀门，排空缓冲罐;然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(7)启动提取罐内套蒸汽阀门和真空泵，至提取罐内温度40-60℃、罐内压力0.01-0.1MPA时关闭进气阀;缓冲罐真空度14-75mmhg时关闭真空泵;
(8)缓慢打开提取罐与缓冲罐之间的泄压阀，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中观察，当抽出的物料颜色从褐色逐渐变黄白色时，预示血水抽提结束。当缓冲罐负压归0时，打开阀门放净缓冲罐中的以血水为主的物料至有机肥车间备用。提取罐内物料待进入下一步脱除脂肪和提取骨胶原蛋白工序。
二、胶原蛋白混合液抽提工艺:脱除血水后，再用同样的方法抽提骨胶原蛋白混合液，具体步骤如下:
(9)开启提取罐内套和夹套蒸汽阀门升温至内套表示温度60-100℃、表示压力升至0.1-0.13Mpa时关闭夹内套进气阀;启动真空泵，打开连接缓冲罐阀门，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭;
(10)缓慢打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，将以脂肪为主的混合液抽入缓冲罐，直到缓冲罐至负压归0，排空物料，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(11)重复步骤(9)-(10)，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中观察，当抽出的物料颜色变黄白色并逐渐乳白时，鲜骨中的脂肪脱除步骤结束，排空缓冲罐内以脂肪为主的物料，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(12)开启提取罐内套和夹套蒸汽阀门，当提取罐内套表示温度90-121℃、罐内压力0.1-015MPa时关闭夹内套进气阀;启动真空泵，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭;缓慢打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，将骨胶原蛋白液抽入缓冲罐，直到缓冲罐至负压归0，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(13)重复步骤(12)3-6次，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中可以观察到，当抽出物洁乳白，即得骨胶原蛋白液。当抽出物浓度逐渐下降，变得逐渐稀薄时，预示提取即将结束。
(14)将得到的骨胶原蛋白液物料泵入暂储罐，冷却至15-25℃，静止2-8小时，吸走浮油。然后利用脂肪截留装置，脱除骨胶原蛋白液中的脂肪，温度控制在10-20℃，当测得脂肪含量0.1-1%以下，再送至发酵罐备用。
三、制备乳酸菌玫瑰口服液:
(15)从提取车间洁净不锈钢管道输送到发酵罐的经过脂肪截留工艺脱脂的骨胶原蛋白混合液，测得浓度为固形物含量11-16%，蛋白含量占固形物含量的45-88%。
(16)按照脱脂后骨胶原蛋白液重量的4-10%加入脱脂乳清粉、5-15%加入腌制玫瑰花瓣的蜜汁，搅拌溶解并升温，至90-98℃时，保持30-40分钟杀菌;
(17)杀菌后冷却至45℃±2时，投入占底物总重量0.1-0.3%的菠萝蛋白酶、占底物总重量0.1-0.3%木的瓜蛋白酶，酶解2-4小时后，降温。
(18)降温至37℃±2时，投入占底物总重量0.2-0.5%的混合乳酸菌种进行发酵，发酵温度为37℃±2;所述混合菌种由嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混合而成。其中，嗜酸乳杆菌占菌种重量的30-70%，嗜热链球菌占菌种重量的30-70%。
(19)恒温控制发酵温度37℃±2。打开发酵罐顶部带过滤装置的呼吸口。
(20)发酵期间，每隔4小时取样菌检一次。
(21)酶解发酵期间，相隔2小时搅拌一次15分钟，转数每分钟10转。
(22)发酵时间48小时以上时，取样测试。当乳酸菌群浓度达到5×109cfu/ml以上时，发酵结束;
(23)降温至20-25℃或室温开始每瓶20ml量无菌灌装、锁盖、贴标、装盒、抽检、塑封、装箱。得到富含小分子骨胶原蛋白多肽的乳酸菌玫瑰口服液。送入4℃恒温冷藏库。
Claims (7)
1.一种制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法，其特征在于所述方法步骤如下:
(1)按照脱脂后骨胶原蛋白液重量的4-10%加入脱脂乳清粉，然后加入占脱脂后骨胶原蛋白液重量5-15%的腌制玫瑰花瓣的蜜汁，搅拌溶解并升温，至90-98℃时，保持30-40分钟杀菌;
(2)杀菌后冷却至45℃±2时，投入占底物总重量0.1-0.3%的菠萝蛋白酶、占底物总重量0.1-0.3%的木瓜蛋白酶，酶解2-4小时后，降温;
(3)降温至37℃±2时，投入占底物总重量0.2-0.5%的混合乳酸菌种进行发酵，发酵温度为37℃±2;
(4)当乳酸菌群浓度达到5×109cfu/ml以上时，发酵结束;
(5)降温至20-25℃或室温，无菌灌装，得到骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液。
2.根据权利要求1所述的制备骨胶原蛋白乳酸菌政瑰口服液的方法，其特征在于所述混合菌种由嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌混合而成，其中，嗜酸乳杆菌占菌种重量的30-70%，嗜热链球菌占菌种重量的30-70%。
3.根据权利要求1所述的制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法，其特征在于所述骨胶原蛋白液按照如下步骤制备:
(1)将装有脱除血水后的屠宰分割鲜骨的提取罐夹套和内套蒸汽阀门同时启动升温升压，当内套表示温度升至60-100℃、表示压力升至0.1-0.13Mpa时关闭夹内套进气阀;
(2)启动真空泵，使缓冲罐负压，真空废14-75mmhg时关闭;
(3)缓慢打开缓冲罐与提取罐之间阀门，将以脂肪为主的混合液抽入缓冲罐，直到缓冲罐至负压归0，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(4)重复步骤(1)-(3)，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中观察，当抽出的物料颜色变黄白色并逐渐乳白时，鲜骨中的脂肪脱除步骤结束，排空缓冲罐内以脂肪为主的物料，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(5)开启提取罐内套和夹套蒸汽阀门，当提取罐内套表示温度90-121℃、罐内压力0.1-0.15MPa时关闭夹内套迸气阀;启动真空泵，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭;缓慢打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，将骨胶原蛋白液抽入缓冲罐，直到缓冲罐至负压归0，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(6)重复步骤(5)3-6次，在提取罐与缓冲罐之间的管道视镜中观察到物料颜色由浓浓的乳白逐渐变得稀薄时，预示提取骨胶原蛋白液结束。
4.根据权利要求3所述的制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法，其特征在于所述步骤(1)中，按照如下步骤脱除屠宰分割鲜骨中的血水:
(1)将鲜骨浸泡、漂洗、切块、冷冻后，装入提取罐中并密封;
(2)启动真空泵，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭真空泵;
(3)开启提取罐内套蒸汽阀门，升温至内套表示温度为20-50℃、罐内压力为0.01-0.1MPa时关闭迸气阀;
(4)逐渐打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，将从骨中融出的血水抽入缓冲罐，当缓冲罐压力归0时，打开底部阀门，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(5)重复数次步骤(2)-(4)，使血水在没凝固前随压泄出;
(6)打开提取罐体顶部的喷淋阀门1-5分钟，冲洗骨表面附着的血融出留下的血沫，启动真空泵，打开连接缓冲罐阀门，使缓冲罐负压，真空度14-75mmhg时关闭真空泵，逐渐打开缓冲罐与提取罐之间的阀门，利用缓冲罐内负压将其抽至缓冲罐，当压力归0时，打开缓冲罐底部阀门，排空缓冲罐，然后关闭缓冲罐与提取罐之间的阀门、缓冲罐底部阀门;
(7)启动提取罐内套蒸汽阀门和真空泵，至提取罐内套表示温度40-60℃、罐内压力0.01-0.1MPa时关闭进气阀;缓冲罐真空度14-75mmhg时关闭真空泵;
(8)缓慢打开提取罐与缓冲罐之间的阀门，在提取罐与缓冲罐中间的管道视镜中观察，当抽出的物料颜色由褐色逐渐变黄白色时，预示血水抽提结束。
5.根据权利要求3或4所述的制备骨胶原蛋白乳酸菌政瑰口服液的方法，其特征在于所述鲜骨为畜禽鲜骨。
6.根据权利要求5所述的制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法，其特征在于所述鲜骨为屠宰猪、牛、羊、驴、马、鸡、鸭、鹅或袋鼠分割肉剔除的畜禽动物鲜骨。
7.根据权利要求1所述的制备骨胶原蛋白乳酸菌玫瑰口服液的方法，其特征在于所述骨胶原蛋白液脱脂方法为:将骨胶原蛋白液冷却至15-25℃，静止2-8小时，吸走浮油，然后利用脂肪截留装置脱除骨胶原蛋白液中的脂肪，脱除后骨胶原蛋白液中脂肪含量0.1-1%以下，即为合格，截留温度控制在10-20℃。
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