CN103327971A - 提高难溶性化合物的溶解度的方法以及制备和使用这类化合物制剂的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包括类黄酮及其产品的平面环状结构的有机化合物的新型溶解方式。本发明还包括将平面环状结构的有机化合物的这些新型制剂用于制备制剂和产品。本发明还涉及本发明制剂的各种广泛的用途。本发明包括类黄酮的新型溶解方式和各种制剂。进一步说来，本发明包括制备所述类黄酮制剂的新方法。本发明还涉及类黄酮制剂的各种广泛的用途。

Description

提高难溶性化合物的溶解度的方法以及制备和使用这类化合物制剂的方法

本申请是2011年4月22日提交的美国申请13/064,882的继续申请，其为2010年10月22日提交的已要求2009年10月22日提交的美国申请61/253,857的优先权的PCT/US2010/002821的部分继续申请。本申请也是2010年10月22日提交的已要求2009年10月22日提交的美国申请61/253,857的优先权的PCT/US2010/002821的部分继续申请。所有这些申请的全部内容都通过引用的方式包含于本申请中。

技术领域

题述发明涉及新型的可溶形式的包括类黄酮及其制剂的平面环状结构的有机化合物。本发明还包括这些新颖的平面环状结构的有机化合物制剂在制备制剂和产品中的应用。本发明还涉及到本发明的制剂的各种应用。

背景技术

类黄酮

被认为可以预防癌症的植物本源的药剂有类黄酮和膳食纤维(Patel,D,等人,Apigenin and cancer chemoprevention: Progress, potential, and promise, Int1. JOncology 2007 Jan; 30(1):233-45)。化学预防是肿瘤学的一个方面，其侧重于通过自然存在的或合成的药剂来预防癌症。

类黄酮已被证实可以起到自由基清除剂、抗氧化剂、超氧化物阴离子、紫外线（UV）吸收剂，及脂质过氧化物自由基的作用。类黄酮化合物也已知能有效地强化胶原蛋白结构。此外，类黄酮已被证明可展示出抗诱变、抗炎和抗病毒的作用。

所有类黄酮都具有相同的基本化学结构，即三环分子。同类的各种类黄酮因取代基（羟基、甲氧基或糖类基团）的数量和位置而各不相同。类黄酮具有以下平面芳香环状结构的通式：

类黄酮包括大约5,000种天然存在的化合物。大量其他替代物可以合成制得，从而产生许多类型的类黄酮。

很多类黄酮几乎不溶于水和几乎所有的适合于制药、保健品（促进强化食品和膳食补充剂）、药用化妆品和医疗食品的用途的溶剂。因此，需要有一种可以通过利用可接受的成分和方法来提高包括黄酮和其它平面环状结构的有机化合物的这些类黄酮的溶解度和生物利用度的方法。

活性剂的增溶

活性剂是具有生物活性的组合物中的物质。溶解度是溶液中的活性剂实现引发药理学反应所需的浓度的重要参数之一。溶解度在药物处置中起着至关重要的作用，因为只有在溶液中的药剂才能够扩散通过生物基质，或被动地输送穿过生物膜。药物吸收的最大速率是产品的渗透性和溶解度之积。药效严重受限于较差的水溶性。在制药工业中公认有平均40%以上的新发现的候选药物的水溶性差。药物的溶解性差导致给药部位处的无效吸收；其已被认定为是由于较差的药代动力学而导致高临床失败率的一个重要因素(Liu, R., Introduction, In: Liu, R., (Ed.),Water-Insoluble Drug Formulation, 2nd ed., 2008, CRS press, New York)。

有许多技术已经被用来提高活性剂的溶解度。其包括使用络合剂，诸如通过将其包埋到环糊精分子的疏水性斗形腔体内来提高难溶性活性剂的水溶性的环糊精；将活性剂纳米化为纳米级晶体；使用盐式活性剂（其与原活性剂相比易于呈现出改进的水溶性和溶解性能）；改变活性剂微环境的pH值；等等。

在配制外用药物产品时，通常是将活性药物成分添加到溶剂或溶剂混合物中，以搅拌混合或匀浆的方式来溶解或分散药物成分。已经使用了通常在35-70℃范围内的加热来熔化制剂中的低熔点赋形剂，以促进搅拌混合。加热保持在最低限度，以防止在达到浊点时的分解、离析，或由于任何赋形剂或活性成分的蒸发而损失。

在形成乳状液时，可以将活性剂添加到制剂的水相或脂相中（一般是对活性剂具有最高溶解度的相）。可以在两相混合之前或在混合过程中，将两相中的一相或两相加热到如上所述的相同的温度范围内来制备乳状液。

二甲亚砜（DMSO）作为用于包括芹菜素的许多不溶于水的化合物的溶剂已被广泛用于在体外和体内研究中。然而，由于关系到毒性和“味道”的原因，在外用制剂被考虑人类应用时，二甲亚砜还没有作为溶剂广被泛使用。由于芹菜素在水（<0.005毫克每毫升（毫克/毫升））和其它水溶剂中的溶解度差，所以几乎所有的用于抗皮肤癌的局部治疗的芹菜素的动物研究中都利用二甲亚砜（DMSO）作为溶剂的选择。(Li 等人, Evaluation of Apigenin and [G-3H], Apigenin andanalytical method development, J. of Pharmaceutical Sciences. Vol. 86, No. 6, June1991)。

皮肤癌

皮肤癌的发展是一项主要的全球性公众健康威胁。紫外线(UV)如太阳紫外线B(UVB)和太阳紫外线A(UVA)的辐射是皮肤癌的主要诱因。尽管有含高SPF 成分的防晒剂的出现和使用，基底细胞癌、鳞状细胞癌和黑色素瘤的发病率仍持续上升。早期诊断和治疗对于提高存活率是必要的，然而皮肤癌很大程度上是可预防的癌症。目前的防晒制剂已证实不足以使人体完全免受UV 辐射的DNA损伤作用。当个体过度暴露于阳光下时，防晒剂的使用可能有时会产生安全的错觉。

研究表明，黄酮具有抗氧化、抗诱变、抗癌、抗炎症、抗增殖和抗恶化的特性(Patel D等人, Apigenin and cancer chemoprevention: Progress, potential,andpromise, Intl. J Oncology 2007 Jan; 30(1): 233-45)。此外，Birt 及其同事用活体小鼠模型证明了在UVB 照射前外用涂敷芹菜素可将皮肤癌的发病率显著地减少高达90%（Birt等人, Anti-mutagenesis and anti-promotion by apigenin, robinetinand indole-3-carbinol, Carcinogenesis, June 1986; 7: 959-963）。其他研究组已证明了芹菜素的保护小鼠免患结肠癌的能力（Wang等人，Cell cycle arrest at G2/M andgrowth inhibition by apigenin in human cell colon carcinoma cell lines, MolecularCarcinogenesis, 28: 102-110 (2000)）。

G1/S和/或G2/M细胞周期检测点控制的丧失会导致转化和癌症发展。整个细胞周期的启动和发展主要通过促使细胞增殖的原癌基因和起到减缓或中断细胞生长作用的肿瘤抑制基因来控制。原癌基因和/或肿瘤抑制基因中的突变会通过缩短G1或G2/M所占的时间长度而易使细胞产生受损的G1/S检测点。

研究者已发现，芹菜素在细胞周期的G1和G2/M阶段可诱导可逆的细胞周期阻滞。还发现芹菜素可通过多种机制在细胞周期中介导抑制，包括对有丝分裂激酶p34cdc2的直接和间接抑制，以及以依赖于p53的方式对细胞周期抑制剂p21WAF1的诱导。理论上讲，该净效果可以在细胞分裂前使得UV造成的DNA突变被恰当的修复。（Lepley DM等人，The chemopreventative flavonoid apigenininduces G2/M arrest in keratinocytes, Carcinogenesis, 17, 2367-75 (1996)）。

其他皮肤病

Kang, Ecklund, Liu和Datta, (Arthritis Research&Therapy 2009, Vol.11) 教导了提高源于食用植物的COX-2 和NF-κB抑制剂（诸如芹菜素等）的生物利用率对于抑制狼疮中的炎症和诸如银屑病等的其他Th17介导的疾病很有价值。作为非诱变性食用类黄酮，芹菜素通过抑制自身抗原呈递来抑制狼疮的自身反应性Th1和Th17细胞的扩展。

其他疾病

作为酚类化合物的典型特征，类黄酮可以起到强效抗氧化剂和金属螯合剂的作用。它们也在很久之前就已被公认为具有抗炎、抗过敏、保肝、抗血栓、抗病毒和抗癌的活性。

黄酮和儿茶酚是用于保护人体不受活性氧簇(ROS)侵害的非常有效的类黄酮。人体细胞和组织不断地受到由自由基和ROS引起的损伤的威胁，所述自由基和ROS在正常的氧代谢中产生，或者由外源损伤所诱发。类黄酮在许多动物模型中的抗炎活性已被报导。黄酮/黄酮醇如芹菜素、木犀草素、山萘酚、槲皮素、杨梅酮、非瑟酮已被报导具有脂肪氧合酶(LO)和环加氧酶(COX)的抑制活性(JachakSM. Natural products: Potential source of COX inhibitors. CRIPS 2001; 2(1): 12-15)。

Doseff的PCT/US2006/020905公开了用芹菜素或其衍生物来治疗炎症的方法。

Hammerstone的美国专利申请US 2008/0227829公开了用包括芹菜素的治疗神经性疾病的化合物来治疗患者的方法。

Park等人的美国专利申请US2007/0154540公开了使用芹菜素作为软骨再生剂来治疗骨关节炎。

Bing-Hua等人的美国专利申请US2007/0189680公开了芹菜素与治疗试剂相结合用于化学预防和化学治疗。

Lintnera等人的美国专利申请US2006/0067905公开了使用芹菜素作为血管扩张剂以用于治疗脱发。

研究已经证实，芹菜素在减缓哮喘发病的过程中起关键的作用。近来的流行病学研究报道了在类黄酮高摄入量的人群中，明显观察到哮喘的低发病率。

透明质酸(HA)

透明质酸(HA)是广泛分布于结缔组织、上皮组织和神经组织中的阴离子的、非硫酸化糖胺聚糖。它在糖胺聚糖类中是独特的，因为它是非硫酸化的，在质膜中而不是在高尔基体中形成，并且它可以非常大，分子量通常可达到数百万。作为细胞外基质的主要成分中的一种，透明质酸可显著地促进细胞增殖和迁移。

诸如HA的多糖是相对复杂的糖类。多糖是由许多单糖通过糖苷键结合起来而构成的聚合物。因此，多糖很大，通常为分枝状的大分子。多糖在化妆品和医药应用中很有用处。例如，HA在皮肤应用中被用作结构稳定化填充剂。芹菜素具有抗透明质酸酶活性；从而可以抑制透明质酸分解。(Kuppusamy等人,Structure-activity studies of flavonoids as inhibitors of hyaluronoidase, BiochemPharmacol, 40, 397-401 (1990)。

Gervasio-Nugent等人的美国专利申请2005/0271692公开了含有类黄酮和透明质酸的外用化妆品组合物。

Morariu的美国专利申请2006/021625公开了用于改善老化皮肤的外观的外用制剂及其使用方法。优选的组分包括诸如芹菜素和透明质酸等的类黄酮。

聚山梨醇酯表面活性剂

聚山梨醇酯（商业上也称为吐温）是衍生于聚乙氧基山梨聚糖和脂肪酸的非离子表面活性剂和乳化剂。它们通常用于食品和化妆品中，以使精油在水基产品中增溶。聚山梨醇酯是粘性的、水溶性的淡黄色液体。聚山梨醇酯还可通过减少待乳化物质的表面张力来促进形成乳状液。聚山梨醇酯被公认具有这样的能力，即促进一些成分溶解在它们通常情况下不能溶解的溶剂中。聚山梨醇酯用于将油分散于水中而不是将水分散于油中。

通过将多元醇、山梨醇与环氧乙烷反应来制备聚山梨醇酯。聚氧乙烯山梨聚糖随后与从诸如硬脂酸、月桂酸和油酸等的植物油脂中获得的脂肪酸进行反应。作为纯（非PEG化的）山梨聚糖与脂肪酸形成的酯的表面活性剂通常被称为司盘。

Gupta的美国专利7329797公开了抗衰老化妆品输送系统，其包括使用包括芹菜素的类黄酮作为抗炎药剂，并使用聚山梨醇酯表面活性剂作为乳化剂。

Higuchi等人的美国专利申请2006/0229262公开了用于治疗具有耐药菌的传染病的药物组合物，其含有作为活性成分的包括芹菜素的类黄酮和作为乳化剂的聚山梨醇酯。

Behnam的美国专利6048566公开了非酒精性饮料及其制备方法。该专利公开了将辅酶Q10和聚山梨醇酯增溶剂进行混合。

聚乙二醇

聚（乙二醇）（PEG）也称为聚（氧乙烯）或聚（环氧乙烷）（PEO），是一种具有常见分子量（MW）范围的合成聚醚。MW <100,000的材料通常被称为PEG，而较高分子量的聚合物被归类为PEO。这些聚合物是两性分子，易溶于水和许多有机溶剂。低分子量的PEG（MW <1,000）是粘性的无色液体，而较高分子量的PEG为具有与其分子量成比例的上限熔点约为67℃的蜡状白色固体。已经发现PEG是无毒的，并被FDA批准可用作各种药物制剂、食品和化妆品中的表面活性剂或载体。MW>1,000的大多数PEG可以迅速从主体中除去而没有变化，其清除率与聚合物的分子量成反比。此特性与具有广泛的最终功能的聚乙二醇的有效性结合，有助于PEG在生物医学研究中的广泛应用：药物输送、组织工程支架、表面功能化和许多其他应用。

鉴于上述，非常希望改善包括类黄酮的溶解性差的化合物的溶解性。也很希望将诸如黄酮、芹菜素和木犀草素等的类黄酮作为外用制剂的一部分以帮助预防和/或治疗由阳光暴晒作用导致的皮肤损伤或皮肤癌，并且还提供可用于治疗各种皮肤病症状的皮肤治疗组合物。

发明内容

本发明涉及一种组合物，包括：i）一种平面环状结构的有机化合物，和ii）一种热稳定性增溶化合物，其中，所述平面环状结构的有机化合物的浓度大于所述热稳定性增溶化合物中的平面环状结构的有机化合物的饱和浓度，并且所述组合物不是过饱和的。所述热稳定性增溶化合物是一种典型的非离子型表面活性剂，如聚山梨醇酯等。所述组合物通常还包括一种载体。

本发明涉及如下的组合物，其包括平面环状结构的有机化合物、如类黄酮，以及诸如表面活性剂的热稳定性增溶化合物，其中所述组合物是将平面环状结构的有机化合物和增溶的化合物相混合且升温到平面环状结构的有机化合物溶解在所述增溶化合物中的温度下（通常为>100℃）而形成。当将溶解后的混合物冷却至环境温度时，所述平面环状结构的有机化合物仍保持溶解，即使在浓度超过环境温度下的饱和浓度水平。

所述组合物任选地包括选自由乙醇、短链醇（诸如异丙基和苄基醇等）、乙氧基二甘醇（二乙二醇单乙醚或Transcutol）、丙二醇、己二醇、丁二醇，二丙二醇、丙三醇、水、盐溶液、DMSO、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、低粘度表面活性剂、二甲基异山梨醇酯构成的组中的醇。

在一个优选的实施方式中，所述组合物是药物组合物，并且所述载体是药学上可接受的载体。所述组合物可以包括透明质酸和/或渗透促进剂。在一个实施方式中，所述组合物是乳状液或微乳液的形式。所述组合物例如可以是药物组合物、营养食品（强化食品或膳食补充品）、药用化妆品、食品增补剂或医疗食品。

本发明的另一个实施方式是一种用于诸如类黄酮等的平面环状结构的有机化合物的经皮给药的贴剂，其包括：具有两个面的基底，第一面具有本发明的组合物和黏合剂（具有释放衬里），第二面具有第一面上的组合物和黏合剂不能透过的材料。在另一个实施方式中，所述贴剂包括具有两个面的基底，第一面具有含本发明的组合物和半透膜的贮液器以及贴在半透膜底面的粘合层（具有防粘衬里），第二面具有第一面上的组合物和粘合剂不能透过的材料。

本发明的另一个实施方式是一种制备增溶的平面环状结构的有机化合物、如类黄酮组合物的方法，包括：将平面环状结构的有机化合物、如类黄酮颗粒与热稳定性增溶化合物、如表面活性剂混合以形成混合物，将所述混合物加热至平面环状结构的有机化合物可溶解的温度下，以及将溶液冷却。在一个优选实施方式中，热稳定性增溶化合物是非离子型表面活性剂。通常情况下，搅拌并同时加热所述混合物，并且加入最高达10%（重量）的平面环状结构的有机化合物，如类黄酮化合物。在一个优选实施方式中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯。在加热或冷却步骤之后是将所述溶液加入到经皮、口服、注射、牙周、皮肤贴剂或气雾剂载体中的步骤。可将选自由乙醇、异丙醇、苄醇、乙氧基二甘醇和二甲基异山梨醇构成的组中的短链醇添加到所述溶液中。

本发明还涉及提高难溶性平面环状结构的有机化合物的组合物的溶解度的方法，其包括：i）将平面环状结构的有机化合物与热稳定性增溶化合物混合以形成混合物，ii）将该混合物加热至平面环状结构的有机化合物颗粒会溶解以形成溶液的温度，以及iii）将所述溶液冷却。

本发明还涉及一种减少和/或预防的日光照射的影响的方法，包括将治疗有效剂量的防晒制剂涂覆于皮肤，所述防晒制剂包括增溶后的平面环状结构的有机化合物（如类黄酮）以及可以将平面环状结构的有机化合物（如类黄酮）输送到基底层和表皮的载体。在另一个实施方式中，所述制剂另外还包括矿物氧化物，以提供额外的紫外线日光照射的保护。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗日光照射影响的方法，包括将治疗有效剂量的制剂涂覆在日光灼伤的皮肤，所述制剂包括溶解的平面环状结构的有机化合物（如类黄酮）和可以将类黄酮输送到基底层和表皮的载体。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种降低或治疗哺乳动物癌症的可能性的方法，其包括将预防剂量或治疗有效剂量的本发明的制剂施与需要这种治疗的哺乳动物。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗哺乳动物体内的炎症的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效剂量的本发明的制剂。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种恢复哺乳动物的正常皮肤屏障功能的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效剂量的本发明的制剂，如类黄酮制剂。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗哺乳动物的皮肤疾病或失调如痤疮、脱发、皮肤致敏和刺激、皮肤干燥（干燥症、鱼鳞癣）、真菌感染、红斑痤疮、接触性皮肤病的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效剂量的本发明的制剂。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗哺乳动物的自身免疫性疾病如牛皮癣、狼疮和关节炎的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效剂量的本发明的制剂。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗过敏、哮喘、特应性皮炎/湿疹的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效剂量的本发明的制剂。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗哺乳动物的肿瘤坏死因子（TNFα）相关的疾病或降低其患病可能性的方法，其包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效剂量的或预防量的本发明的类黄酮制剂。

在另一个实施方式中，本发明涉及一种治疗或减少哺乳动物中的IL-Ιβ的相关疾病或减少其患病可能性的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物中的治疗有效剂量或预防量的本发明的类黄酮制剂。

附图说明

图1示出根据前缀分类的表面活性剂：非离子型、阴离子型、阳离子型和两性。

图2是表示未处理的聚山梨醇酯80的对照样品和热处理后的聚山梨醇酯80样品之间无显著化学成分差异的质谱分析图。

图3是表示出几个施用了含有不同芹菜素浓度的外用制剂的人体组织的表皮、真皮和接收液部分内所沉积的芹菜素含量的示意图。

具体实施方式

本发明涉及具有平面环状结构的有机化合物、如类黄酮的新制剂。包括含这种制剂的药物组合物、保健食品、药用化妆品、食品补充剂、医疗食品，以及用于制造和使用该制剂的方法。

溶解度是难溶性平面环状结构的有机化合物如类黄酮的外用和口服生物利用度的一个重要参数。药物的溶出度是难溶于水的药物的口服吸收和外用吸收的速率控制步骤。药物的溶解度也是所述制剂和开发药物所要形成的溶液的不同剂型的基本要求。由于与多种平面环状结构的有机化合物如类黄酮的溶解度问题相关，其生物利用度是有限的，因此溶解度提高的成为必要的。本公开中所教导的难溶性平面环状结构的有机化合物的新的可溶形式的制造和使用的方法可以改善难溶性环状结构的有机化合物。

本发明涉及将平面环状结构的有机化合物如类黄酮加入到热稳定性表面活性剂中，然后将该混合物加热升温到不超过活性剂（例如类黄酮）或热稳定性增溶剂（例如表面活性剂）的沸点或分解点的温度（通常>100℃），然后将该混合物冷却。意外地观察到，这个方法可以提高溶出度，可以使平面环状结构的有机化合物在含有表面活性剂的溶液中达到明显较高的浓度。并且，所制得的溶液“浓缩物”不是过饱和的。活性剂与增溶剂的摩尔比通常为1:2到1:5，有时要大得多，例如根据活性剂/表面活性剂的结合为1:2到1:20。虽然不希望被理论所束缚，然而可以认为，促进溶解所必需的热量是克服平面环状结构的有机化合物的限制其溶解度的与自缔合堆叠相关的结合力所需要的。在平面环状结构的有机化合物在热稳定性增溶剂中加热溶解后，增溶分子将这些平面化合物包覆或形成三明治（结构），即热稳定性增溶剂与平面化合物“缔合”或形成“复合物”。在冷却至室温时，浓缩物不是过饱和溶液，即使化合物的浓度大于在环境条件-室温下（其低于克服平面环状结构的有机化合物的自缔合堆叠力所需的温度）其饱和浓度。所述浓缩物是稳定的，所述化合物（或活性剂）存在于溶液中一段足以由浓缩物形成制剂的时间。

这些平面环状结构的有机化合物浓缩物可以用来配制组合物，使其溶液中的所述化合物的浓度大于其不使用浓缩物所能达到的浓度。也就是说，通过a）使用标准的制剂制备技术，或b）将平面环状结构的有机化合物与表面活性剂和赋形剂混合在一起，然后在加热到较高温度，这些浓缩物可以被用于制备溶液中平面环状结构的有机化合物的浓度大于其所能达到的浓度的制剂。

I－本发明的化合物

本发明涉及可以产生堆叠排列的至少一个环状结构的平面的分子。所述环状结构可以是芳族结构。形成典型堆叠的那些分子具有较高的熔点，并显示出较差的溶解性。溶解性差的特征通常会限制这些化合物在外用产品和药物制剂中的实际应用。本文所用术语“溶解性差”是指在水或油中的溶解度小于1mg/ml，特别是小于0.1毫克/毫升。

溶解性差的平面环状结构的有机化合物的例子包括以下几个重要类型的活性剂：

第1类.喜树碱类似物被用作抗肿瘤药剂，其微溶于水。本发明的方法可以用于增溶这些药剂。包括喜树碱、拓扑替康、伊立替康，以及具有其他取代基R10、R9和R7的化合物

第2类.胍核苷用作抗病毒药物，特别是抗疱疹治疗。这些药剂具有有限的水溶性。包括阿昔洛韦（acyclovir，羟乙氧甲鸟嘌呤）、喷昔洛韦（penciclovir，9-[4-羟基-3-(羟甲基)-丁基]-鸟嘌呤）、更昔洛韦（ganciclovir，丙氧鸟苷），以及具有其他取代基R1的化合物。

第3类.苯二氮卓为用于治疗抑郁症和焦虑的中枢神经系统（CNS）活性药物。这些三环药剂微溶于水，并且可以使用本发明方法增溶。这类化合物包括阿普唑仑（alprazolam）、去甲羟基安定，以及具有所述通式的所有相关药剂。

第4类.叔胺三环类抗抑郁药通过采用无机酸处理以及成为酸式盐的方式可以制成可溶性的。本发明方法无需使用酸就可以增溶这些药剂。这些化合物包括阿米曲替林（amitriptyline）、氯丙咪嗪（clomipramine）、多虑平（doxepin）及所有相关的化合物，如马普替林（maprotiline）和普罗替林（protriptyline）

第5类.三环吩噻嗪可以作为抗精神病药物使用，并可以采用本发明方法增溶而无需使用强酸。这种化合物包括氯丙嗪、氯普硫蒽及相关的三环类药物

第6类.三环亚胺二苯乙烯类可以被用作抗惊厥药，并可采用本发明方法增溶。这种化合物为卡马西平、奥卡西平以及所有相关的三环亚胺二苯乙烯类药物。

第7类.本发明方法也可以应用到非稠环体系。这些化合物包括苯妥英钠和二氨基甲酸酯、非尔氨酯和左乙拉西坦，它们都是极不溶于水的抗癫痫药物。其它相关的化合物也包括在内。

第8类.许多二氢叶酸类似物微溶于水。本发明方法可以应用于这种类型药剂，包括用于牛皮癣和自身免疫性疾病的甲氨蝶呤和三甲曲沙。相关的化合物也包括在内。

第9类.磺胺类抗菌药物可以通过本发明方法增溶。这种化合物包括磺胺甲恶唑、磺胺多辛以及所有相关的磺胺类抗菌化合物。

第10类.几种磺胺药也是碳酸酐酶抑制剂，可用于治疗青光眼、溃疡以及作为利尿剂。这些化合物具有很差的水溶性，可以采用本发明方法增溶。这类化合物包括乙氧苯唑胺、乙酰唑胺和抗惊厥药舒噻嗪。

第11类.蒽环类抗癌药剂是具有很差水溶性的四环素。这些化合物包括多柔比星（阿霉素）、柔红霉素、表柔比星、伊达比星以及所有相关的化合物。

第12类.表鬼臼毒素可用作抗癌药剂。本发明方法可用于增溶这类化合物。这类药剂包括依托泊苷、替尼泊苷和所有相关的化合物。

第13类.若干嘧啶核苷类似物是难溶于水的，并且作为抗肿瘤药剂是很有用的，可以用于治疗牛皮癣或抑制DNA病毒的生长。

这类化合物有5-氟尿嘧啶（5-FU）、氟尿苷、吉西他滨（gemcitabine）、齐多夫定、司他夫定和所有相关的化合物。

第14类.与嘧啶核苷类似，可用于对抗DNA病毒的化疗的腺嘌呤和胍如果不与强酸结合也微溶于水。本发明方法可以将这些药物增溶于水中，而无需使用强酸。包含在这个类中的化合物包括去羟肌苷和阿巴卡韦和所有相关的化合物。

第15类.某些选择性雌激素受体调节剂已发现可用于治疗乳腺癌、骨质疏松症和避孕。如果不与强酸结合，许多这些聚苯基药剂在水中溶解度都很低。本发明方法用于在不使用酸的情况下提高其水溶性。这类药物包括他莫昔芬、氯米芬、拉索昔芬和所有相关的药剂。

第16类.还有一些选择性雌激素受体调节剂属于另一种结构类型。一种这样药剂是对于治疗骨质疏松症和其他雌激素相关疾病非常有用的雷洛昔芬。在没有强酸存在或不在非常低的pH情况下，雷洛昔芬微溶于水。本发明方法可以提高这种药剂以及相关药剂的溶解度。

第17类.孕酮是影响女性生殖周期的一类甾体激素和药剂。这类药剂包括醋酸甲地孕酮和安宫黄体酮和所有相关药物，可以用于人类和动物健康的许多领域。这个类中的所有的化合物都微溶于水。通过应用本发明方法能够提高在水中的溶解度。

第18类.雌激素是一类影响女性的生殖周期、发育和成熟的类固醇激素。这些化合物包括雌二醇、戊酸雌二醇、炔雌醇甲醚、雌酮和所有相关的类似物。这个类中的所有的化合物均微溶于水。应用本发明方法可以改善其溶解性。

第19类.睾丸激素和去甲睾酮影响人类的生殖周期的类固醇激素，其也影响生长、发育和成熟以及相关过程。合成代谢类固醇也属于这一类。这类药物包括甲睾酮、氧雄龙、达那唑和该类中的许多相关的化合物。与大多数类固醇相同，这些化合物微溶于水，并且可以通过本发明方法增溶。

第20类.皮质类固醇类药物对于治疗炎症、糖类和脂质代谢综合症以及其他疾病病症是有用的。这些化合物包括氢化可的松、氟氢可的松、地塞米松以及所有相关药剂。这些皮质类固醇类药物微溶于水，但是可以通过使用本发明方法而制成较为易溶的。

第21类.格列酮类（Glitazones）是一类用于治疗高血糖症和胰岛素抵抗的化合物。这些化合物包括罗西格列酮、吡格列酮、曲格列酮（troglitazone）和所有相关的类似物。这些化合物仅微溶于水，但通过应用本发明方法，其溶解度可以得到改善。

第22类.醌类药剂，其中包括用作抗原虫药物的阿托伐醌、布帕伐醌和帕伐醌。这些药剂和它们的所有类似物往往是微溶于水。他们可以应用本发明方法增溶。

第23类.包括甲氟喹、伯氨喹、氯喹（cloroquine）和所有相关类似物的喹啉类药剂可以用作抗疟药物。这些药剂在强酸中或作为其酸式盐是可溶的。本发明方法可以增大这些药物在水中的溶解，而无需使用强酸。

第24类.吡罗昔康、美洛昔康及其相关类似物可用于治疗疼痛、肿胀以及其他相关症状。这些药剂微溶于水。这些药剂及所有相关的类似物可以通过应用本发明来增溶。

第25类.丙酸盐是一类可用于治疗疼痛、发烧和炎症的药剂。这个类别的成员包括布洛芬、萘普生、非诺洛芬、萘丁美酮和许多相关的类似物。这些化合物是弱酸性的，微溶于水。它们在强碱和高pH条件下是可溶的。本发明方法无需强碱和高pH就可增溶这些药剂。

第26类.多环抗炎症药剂诸如吲哚美辛、舒林酸及其所有类似物等如果不加入强碱或不在高pH值的情况下微溶于水。使用本发明方法，可以不使用碱或高pH值即可增溶这些药剂。

第27类.包括昂丹司琼、多拉司琼、格拉司琼及其所有的相关类似物的吲哚基止吐药是5-HT3受体拮抗剂。这些药剂往往是微溶于水。他们及其相关的类似物可以通过应用本发明方法增溶。

第28类.吡咯类抗真菌药是一种重要的治疗类药物，包括克霉唑、咪康唑、硫康唑、酮康唑及其所有相关的类似物。这些药剂往往微溶于水。其可通过应用本发明方法增溶。

第29类.苯并咪唑奥美拉唑、兰索拉唑和相关类似物可作为质子泵抑制剂使用。这些药剂微溶于水，但是可以通过应用本发明方法增溶。

第30类.缺乏强酸或强碱增溶位点的各种芳香环的化合物可以通过应用本发明方法增溶。可以被增溶的这类药剂的例子有：

第31类.喹诺酮类抗菌化合物如环丙沙星、莫西沙星、氧氟沙星等微溶于水。这些化合物具有含碱性氮的杂环侧链，其可以与强酸形成盐。该盐的溶解度会增加，但即使该盐有时也会比预期的难溶。本发明方法无需使用强酸就可以提高这些化合物在水中的溶解度。对于没有碱性氮或只有弱碱性的氮的情况下，本发明方法仍将增溶这些药剂。一个这样的例子是WCK771。适用于这种方法的化合物如通式结构所示。

第32类.诸如苯佐卡因、甲哌卡因、利多卡因和相关结构等的作为局部麻醉剂的某些化合物在不加入强酸或非低pH值的情况下微溶于水。应用本发明方法，无需使用强酸或低pH值即可提高这种化合物的溶解度。

第33类.辣椒素及其相关化合物对于治疗疼痛或损伤很有用。辣椒素微溶于冷水。应用本发明方法可以增溶辣椒素和相关的化合物。

第34类.诸如托美丁、酮咯酸、双氯芬酸及其相关结构等的芳基乙酸可用作抗炎症药剂，并可用于治疗疼痛。它们微溶于水。在高pH值或与用碱处理的情况下其溶解度可以得到改善。本发明方法不使用碱或高pH值就可以提高这些药剂及其类似物在水中的溶解度

第35类.一些抗炎症和疼痛的药剂属于二苯基杂环大类，诸如罗非昔布、塞来昔布、磺吡酮、保泰松和相关化合物等等。这些化合物微溶于水。应用本发明方法可以提高这些及其相关化合物在水中的溶解度。

第36类.他汀类药物是一种众所周知的可用于治疗高血脂症和相关疾病的药剂。这一类化合物包括洛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀和所有相关结构的药剂。这些化合物微溶于水，甚至一些酸式盐也不能自由溶解。应用本发明方法可以增加这些药物及这类中的这些化合物在水中的溶解度。

第37类.诸如非诺贝特等的贝特类药物是难溶性化合物。应用本发明方法可以提高这些化合物在水中的溶解度。

下面是其他一些难溶的平面环状结构的有机化合物的化学结构和化学/物理特性：

表I一些平面活性药剂的特性

活性药剂	用途	CAS#	MW	MP℃
					甲芬那酸	镇痛/非甾体抗炎药	61-68-7	241	230
双氯芬酸钠	镇痛/非甾体抗炎药	15307-86-5	318	283
					(1)双氯芬酸	镇痛/非甾体抗炎药	15307-86-6	296	～(2)177

注：（1）从双氯芬酸钠中合成-详见双氯芬酸部分

（2）J Pharmaceut Sci,6(3):352-359,2003

包括类黄酮的多酚类

下面列出了一些常见植物平面环状结构的类黄酮的化学结构。

表Ⅱ一些常见的植物类黄酮的化学结构

类黄酮包括黄酮类（例如，芹菜素、木犀草素）、黄酮醇类（例如，槲皮素、杨梅酮）、二氢黄酮类（例如，柚皮素、橙皮甙）、黄酮醇类（或儿茶素类）（例如，表儿茶素，没食子儿茶素）、花色素类（例如，花青素（cyanidin）、花葵素）、异黄酮（例如，染料木黄铜、大豆黄素（daidezin））。

芹菜素是黄酮结构类的成员，化学名称为4',5,7-三羟基黄酮。芹菜素具有以下结构式：

木犀草素是黄酮结构类的成员，化学名称为3'，4'，5，7-四羟基黄酮。木犀草素具有以下结构式：

芹菜素和木犀草素二者都几乎都不溶于（即，溶解度小于1毫克/毫升）的水和几乎所有的适用于制药、化妆品和食品添加剂制剂的溶剂。

在一个实施方式中，本发明包括平面环状结构的有机化合物，条件是平面环状结构的有机化合物不是多酚、类黄酮和/或辅酶Q10。

本发明方法适用于在水中的溶解度小于1mg/ml、特别是小于0.1毫克/毫升的难溶性的类黄酮类。

Ⅱ-制备本发明的化合物的制剂的方法

本发明包括多种方法来配制可以具有各种各样的用途的平面环状结构的有机化合物。本发明公开了用于大幅度提高相对不溶于水的以及相对不溶于油的化合物在热稳定性增溶化合物中的溶解度以提高浓度水平（例如，在环境温度下高达约10%或20%（重量））的方法。增溶后的化合物可以被添加到可接受的外用、皮下、口服、腹膜、牙周、气溶胶载体中来制备制剂。

本发明涉及用于通过诸如非离子表面活性剂化合物等的热稳定性无毒增溶化合物（包括聚山梨酸酯）来大幅度提高难溶性平面环状结构的有机化合物、如类黄酮等的溶解浓度的方法，其包括以下步骤：

a）将平面环状结构的有机化合物如类黄酮在热稳定性增溶化合物中混合以形成混合物，

b）在搅拌的同时将该混合物加热到平面环状结构的有机化合物粒料被增溶并且所形成混合物（所述“浓缩物”）成为透明溶液的温度，以及

c）冷却浓缩物，并且

可选地加入一种载体。

该混合物被加热到大于例如100℃、120℃、150℃、或170℃的高温。该温度选择为可以使得平面分子成为溶液。将混合物加热至不超过平面化合物或增溶化合物的沸点或分解点的温度。加热步骤优选只对于平面的化合物和增溶化合物进行。所述载体优选地在混合或加热期间不存在。在许多实施方式中，平面分子与增溶化合物的摩尔比接近1:2。平面分子与增溶化合物的比接近1摩尔的平面化合物与2摩尔的增溶化合物（例如，对于某些组合物来说为表面活性剂）的比。对于某些活性剂/表面活性剂的组合物而言，要求表面活性剂显著大于1摩尔的活性剂与2摩尔的表面活性剂的比，例如1摩尔活性剂：20摩尔表面活性剂。

表Ⅲ–经过热处理过程的表面活性剂/溶剂中各种类黄酮的溶解度

对于制备药物组合物、营养食品、膳食补充剂、药用化妆品、食品补充剂或医疗食品来说，在步骤b）或c）之后还有将增溶后的化合物的混合物加入到皮肤科、口服、注射、皮肤贴剂或气溶胶载体中的步骤。

在另一个实施方式中，在步骤b）或c）之后是将醇如乙醇加入到浓缩物中以形成粘度降低了的可溶性化合物溶液的步骤。能够降低增溶后的化合物的混合物的粘度水平的其它优选材料包括：短链醇（如异丙基和苄基醇）、乙氧基二甘醇（二乙二醇单乙醚或Transcutol）、丙二醇、己二醇、丁二醇、二丙二醇、甘油、水、盐溶液、DMSO、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、低粘度表面活性剂、异山梨醇酐二甲醚。

本发明方法对于提高溶解性差的或者以现在这样的方式（例如，作为盐）使得某些用途无法实现或难以实现的化合物的溶解度来说是有用的。

芹菜素/聚山梨醇酯80制剂可以如下地制备：

·芹菜素粉末和粘稠液体聚山梨醇酯80按照约5-10%（重量）的芹菜素与95～90%（重量）的聚山梨醇酯80的比例进行混合。可任选地加入少量（5～10%（重量））的去离子水以及可任选的丙酮和/或乙醇，以促进该混合物的混合。

·充分搅拌该混合物以形成粘稠的糊状混合物。

·然后在搅拌的同时将混合物缓慢加热到相对较高的温度（约100-150℃）。加热过程中伴随着水的挥发，并且挥发性组分存在于聚山梨醇酯80中。

·当去除挥发物并加热到超过约200-300℃的温度时，产生深棕色透明液体，使所有的固体芹菜素在聚山梨醇酯80混合物中被增溶。

·当冷却到环境温度时，产生粘稠的棕色液体。芹菜素的含量越高，产生颜色越深。

·基于粘性芹菜素聚山梨醇酯80液体中浓度为4.05%的芹菜素，芹菜素的含量为40.5毫克/毫升或40,500ppm。

出人意料的是，高温度水平是使芹菜素和其它相对不溶于水的类黄酮产生高溶解度水平所必须的。

以醇溶液的方式使用芹菜素/聚山梨醇酯80，可以将芹菜素和其他相对不溶性的类黄酮输送到所需的目标位置。本发明包括将具有极性特征适当平衡的热稳定的化合物（如表面活性剂）与其他类黄酮相结合来实现该其他类黄酮的较高浓度水平的方法。实施例2和3显示出具有其他类黄酮和聚山梨醇酯的制剂。

Ⅲ平面环化合物制剂和组合物

本发明涉及包括平面环状结构的有机化合物（如类黄酮）和热稳定性增溶化合物（如表面活性剂）的组合物，其中所述组合物是由平面化合物和增溶化合物混合并升温到所述平面化合物会溶解于所述增溶化合物中的温度（通常＞大于100℃）下制得。当溶解后的混合物冷却至环境温度时，所述溶解后的平面化合物保持溶解，即使在浓度超过环境温度下的饱和浓度水平时也是如此。组合物中的平面化合物或活性剂的浓度大于所述热稳定性增溶化合物中的活性剂在环境温度和压力下的饱和浓度，并且所述组合物不是过饱和溶液。组合物“浓缩物”至少可以稳定一段时间，直到从浓缩物制成制剂。

如本文所用的用语“热稳定性增溶化合物”是一种至少能够稳定到要被增溶的平面环状结构的有机化合物熔化的化合物。在热处理（加热）的条件下，热稳定性增溶化合物在与平面环状结构的有机化合物如类黄酮混合时可以增溶平面环状结构的有机化合物，并在冷却至环境温度时继续增溶该平面环状结构的有机化合物。将混合物加热至不超过平面化合物或增溶化合物的沸点或分解点的温度。对于药物、营养保健食品和化妆品的应用来说，热稳定性增溶化合物必须在所使用的（浓度）水平下是无毒的。

有利的是，平面环状结构的有机化合物的增溶化合物能够在环境温度下的一段延长的持续时间内继续增溶平面环状结构的有机化合物，例如1或2个月，优选为1或2年，但至少是长达用于将浓缩物添加到载剂中以制成制剂所需的时间。

如本文所用的用语“过饱和溶液”是含有大于饱和浓度的溶质的溶液；轻微的扰动或加入晶核均会导致过量的溶质结晶。

可以采用本发明所公开的高温方法来提高平面环状化合物的溶解浓度水平的热稳定性增溶化合物包括表面活性剂。

表面活性剂

表面活性剂分类如下（见图1）：

根据组合物所具有的尾基分类的表面活性剂

表面活性剂的尾基可以是：

·烃链：芳香烃（芳烃）、烷烃（烷基）、烯烃、环烷烃、炔基；

·烷基醚链：

○乙氧基化表面活性剂：插入聚环氧乙烷以提高表面活性剂的亲水性；

○丙氧基化表面活性剂：插入聚环氧丙烷以提高表面活性剂的亲脂性；

·碳氟链：含氟表面活性剂；

·硅氧烷链：硅氧烷表面活性剂

一种表面活性剂可以有一个或两个尾基，被称为双链。

根据组合物所具有的头基分类的表面活性剂

根据组合物的头基分类的表面活性剂：非离子、阴离子、阳离子、两性的。

表面活性剂通过在其头基中存在的表面带电荷的基团进行分类。非离子型表面活性剂在其头基中没有带电荷基团。离子表面活性剂的头基带有净电荷。如果电荷是负的，则该表面活性剂被更明确地称为阴离子型，如果电荷是正的，则其被称为阳离子型。如果表面活性剂头基包含有两个带相反电荷的基团，则其被称为两性离子型。

各类型中一些常见的表面活性剂包括：

·离子型

○阴离子型：基于永久性阴离子（硫酸盐、磺酸盐、磷酸盐）或pH依赖型阴离子（羧酸盐）：

■硫酸盐类:

·烷基硫酸盐：十二烷基硫酸铵、月桂基硫酸钠（SDS，十二烷基硫酸钠，化合物的别名）；

·烷基醚硫酸盐：十二烷基醚硫酸钠、也称为月桂基醚硫酸钠（SLES），肉豆蔻醇聚醚硫酸钠；

■磺酸盐类：

·多库酯盐：磺琥辛酯钠；

·全氟磺酸盐表面活性剂：全氟辛烷磺酸盐（PFOS），全氟己烷磺酸盐；

·烷基苯磺酸盐

■磷酸盐类：

·烷基芳醚磷酸盐

·烷基醚磷酸盐

■羧酸盐类：

·烷基羧酸盐：脂肪酸盐（皂）：硬脂酸钠；

·月桂酰肌氨酸钠；

·全氟羧酸盐表面活性剂：全氟壬酸盐，全氟辛酸铵（PFOA或PFO）

○阳离子型：基于：

■pH依赖型的伯胺、仲胺或叔胺：伯胺在pH<10的条件下成为带正电荷的，仲胺在pH<4的条件下成为带电荷的：

·奥替尼啶二盐酸盐；

■永久性带电荷的季铵阳离子型：

·烷基三甲基铵盐类：溴化十六烷基三甲铵（CTAB）、又名十六烷基三甲基溴化铵，氯化十六烷基三甲铵（TAC）；

·氯化十六烷基吡啶（CPC）；

·聚乙氧基牛脂胺（POEA）；

·苯扎氯铵（BAC）；

·苄索氯铵(BZT)；

·5-溴-5-硝基-1,3-二恶烷；

·双十八烷基二甲基氯化铵

·双十八烷基二甲基溴化铵（DODAB）

○两性离子（两性型）型：基于伯胺、仲胺或叔胺或季铵阳离子，含：

■磺酸盐类：

·CHAPS（3-[（3-胆酰胺丙基）二甲氨基]-1-丙磺酸内盐）；

·磺基甜菜碱：椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱；

■羧酸盐类：

·氨基酸类

·亚氨基酸

·甜菜碱类：椰油酰胺丙基甜菜碱；

■磷酸盐类：卵磷脂

·非离子型

○脂肪醇：

■鲸蜡醇，

■硬脂醇，

■鲸蜡硬脂醇（主要由鲸蜡基和硬脂基醇组成），

■油醇；

○聚氧乙二醇烷基醚（Brij类）：CH₃-(CH₂)_10-16-(O-C₂H₄)_1-25-OH：

■八乙二醇单十二烷基醚，

■五甘醇单十二烷基醚；

○聚氧丙二醇烷基醚：CH₃-(CH₂)_10-16-(O-C₃H₆)_1-25-OH

○葡糖苷烷基醚：CH₃-(CH₂)_10-16-(O-糖苷)_1-3-OH

■癸基葡糖苷，

■十二烷基葡糖苷，

■辛基葡糖苷；

○聚氧乙二醇辛基酚醚:C₈H₁₇-(C₆H₄)-(O-C₂H₄)_1-25-OH:

■曲通X-100；

○聚氧乙二醇烷基酚醚：C₉H₁₉-(C₆H₄)-(O-C₂H₄)_1-25-OH：

■壬苯醇醚-9；

○甘油烷基酯：

■甘油月桂酸酯；

○聚氧乙二醇山梨糖醇酐烷基酯：聚山梨醇酯；

○山梨糖醇酐烷基酯：司盘类；

○椰油酰胺MEA，椰油酰胺DEA；

○十二烷基二甲基氧化胺；

○聚乙二醇和聚丙二醇的嵌段共聚物：泊洛沙姆类

根据组合物所具有的其抗衡离子进行分类的表面活性剂

对于离子型表面活性剂，抗衡离子可以是：

·单原子/无机：

○阳离子类：金属类：碱金属、碱土金属、过渡金属；

○阴离子类：卤化物类：氯化物（Cl^-），溴化物（Br^-），碘化物（I^-）；

·多原子/有机：

○阳离子类：铵、吡啶、三乙醇胺（TEA）

○阴离子类：甲苯磺酰基类、三氟甲烷磺酸酯类、硫酸二甲酯

优选的表面活性剂如下：

·两性表面活性剂

烷基磺酸铵

甜菜碱

两性表面活性剂-2

两性表面活性剂-9

椰油酰(两性)基二乙酸二钠

磷脂

·用途/功能：清洁剂、增溶剂，乳化剂

·给药途径：外用，IV（输注）

·阴离子表面活性剂

烷基芳基磺酸钠

十二烷基硫酸铵

壬基苯酚聚醚-4硫酸铵

月桂醇聚醚磺基琥珀酸二钠

多库酯钠/苯甲酸钠

硬脂酸甘油酯SE

十二烷基硫酸盐

十六十八烷基硫酸钠

十二烷基苯磺酸钠

十一烯磺基琥珀酸钠（SULFOSUCCINATED UNDECYCLENIC）

单烷醇酰胺

十二烷基硫酸三乙醇胺

·用途/功能：清洁剂、润湿剂，增溶剂

·给药途径：外用、口服、呼吸道（吸入）、舌下

·阳离子表面活性剂

硬脂酸铝

杏仁油PEG-6酯类

山嵛醇聚醚-10

·用途/功能：乳化剂，增溶剂，防腐剂

·给药途径：外用、口服、眼用、鼻用，肌注，耳用

·非离子型表面活性剂

苯扎氯铵

鲸蜡硬脂醇聚醚-12、-15、-30

鲸蜡硬脂醇/鲸蜡硬脂醇聚醚-20

鲸蜡醇聚醚-2、-10、-20

硬脂酸甘油酯-月桂醇聚醚-23

硬脂酸甘油酯/ PEG硬脂酸酯

硬脂酸甘油酯/PEG-100硬脂酸酯

硬脂酸甘油酯/PEG-40硬脂酸酯

羊毛脂非离子衍生物

羊毛脂，乙氧基

月桂醇聚醚-2、-4、-23

月桂酰聚氧甘油酯

辛基酚聚醚-9、-40

PEG植物油

PEG-120甲基葡糖二油酸酯

PEG-150二硬脂酸酯

PEG-22甲基醚/十二烷基乙二醇共聚物

PEG-25丙二醇硬脂酸酯

PEG-75羊毛脂

PEG-8辛酸/辛酸/癸酸甘油酯类

PEG-8月桂酸酯

聚乙二醇-5-油酸酯

聚乙二醇7硬脂酸酯

泊洛沙姆124、-181、-182、-188、-237、-331、-338、-407

聚甘油-10-油酸酯

聚甘油10萘满油酸酯

聚甘油-3油酸酯、-4油酸酯

聚烃氧基100硬脂酸甘油酯

聚烃氧基12月桂酸甘油酯

聚烃氧基2硬脂酸酯

聚烃氧基20十六十八烷基醚

聚烃氧基20硬脂酸酯

聚烃氧基35蓖麻油

聚烃氧基4月桂酸酯

聚烃氧基40蓖麻油

聚烃氧基40氢化蓖麻油

聚烃氧基40硬脂酸酯、-50硬脂酸酯、-400硬脂酸酯

聚烃氧基6和聚烃氧基32棕榈酸硬脂酸酯

聚烃氧基6异硬脂酸酯

聚烃氧基60蓖麻油

聚烃氧基60氢化蓖麻油

聚烃氧基8硬脂酸酯

聚烃氧基硬脂酸甘油酯

聚烃氧基羊毛脂、棕榈酸酯、-硬脂酸酯

聚山梨醇酯20、-40、-60、-65、-80

PPG-15硬脂醚

单硬脂酸丙二醇酯

脱水山梨醇单月桂酸

山梨糖醇酐单棕榈酸酯

索布MONOSTEARATE的

索布三油酸酯

STEARAMIDOETHYL二乙胺

STEAR TH-2，-10，-20，-21，-40，-100

蔗糖棕榈酸酯

蔗糖硬脂酸酯

蜡，乳化

·给药途径：外用、口服、肌注、局部注射、耳部（OTIC）、眼部、经皮、皮下、静脉注射（输注）、鼻部、牙周、阴道

·用途/功能：乳化剂、增溶剂、湿润剂、胶凝剂

基于硅酮的表面活性剂类

也被称为有机硅类，因其优越的扩散能力越来越受欢迎。这个类包含聚硅氧烷链。其中的一些是非离子型表面活性剂（NIS）和硅酮的混合物，而另一些则完全是硅酮。

非离子型表面活性剂类

山梨糖醇脂肪酸酯（通常被称为司盘类）及其乙氧基化衍生物（通常被称为聚山梨醇酯类）可能是最常用的非离子型表面活性剂。它们可以单独或组合使用（例如，聚山梨醇酯80和司盘80），以形成混合胶束。山梨糖醇酯不溶于水，但可溶于大多数有机溶剂（亲水-亲油平衡（HLB）值低的表面活性剂）。乙氧基化的产品通常可溶于水并具有相对较高的HLB值。这些非离子型表面活性剂可以单独使用，也适合于组合使用，以形成具有所需的HLB值的混合胶束。脱水山梨糖醇酯及其乙氧基化衍生物的主要优点之一是其被许可作为食品添加剂。它们也可以用在化妆品和药物制剂中。

对于（采用本发明的热处理方法）提高在水中的溶解度小于1毫克/毫升水的类黄酮类的溶解浓度水平很有用的非离子型表面活性剂化合物包括：乙氧基脂族醇、聚氧乙烯表面活性剂、羧酸酯、聚乙二醇酯；脱水山梨醇酯及其乙氧基化衍生物，脂肪酸乙二醇酯，脂肪胺聚氧乙烯基化物。

最常用的非离子型表面活性剂是基于乙烯氧化物的，它们称为乙氧基化表面活性剂。可分为几类：醇乙氧基化物、烷基酚乙氧基化物、脂肪酸乙氧基化物、单烷基醇酰胺乙氧基化物、山梨糖醇酯及其乙氧基化衍生物、乙氧基化物、脂肪胺乙氧基化物，以及乙烯氧化物-丙烯氧化物共聚物（有时称为聚合物表面活性剂）。另一类重要的非离子型表面活性剂是多羟基产品，例如乙二醇酯、丙三醇酯（以及聚丙三醇）、葡糖苷（以及聚葡糖苷）及蔗糖酯。胺氧化物和亚磺酰表面活性剂代表具有小头基的非离子型表面活性剂。（M.J.Schick(ed):NonionicSurfactants:Physical Chemistry,Marcel Dekker,New York,1987）。

HLB值是表面活性剂中的亲水性（“嗜水”）和疏水性的（“憎水”）基团之间的关系的经验表达。HLB值越高，表面活性剂的水溶性越好。最常见的乳状液类型水包油型（o/w型）往往需要较高的HLB值的表面活性剂，优选为12-16，而油包水型乳状液（W/O型）要求低HLB的表面活性剂，优选7-11。HLB值<10的表面活性剂是油溶性的，而那些HLB值>10的是水溶性的。

司盘20非常适用于油包水型外用制剂，而聚山梨醇酯80非常适用于增溶水包油型外用制剂中的化合物。具有高HLB值的表面活性剂如聚山梨醇酯80也适用于制备打算用于制备亲水性的水基制剂并进入到乳状液的水相中的“浓缩物”。然而，具有低HLB值的表面活性剂如司盘20也适用于制备打算用于制备亲脂性非水基制剂并进入到乳状液的非水相或油相中的“浓缩物”。

聚山梨醇酯表面活性剂

聚山梨醇酯类（商业上也称为吐温）是从聚乙氧基化的山梨糖醇和脂肪酸衍生的非离子型表面活性剂类和乳化剂类。它们通常用在食品和化妆品中以增溶精油制成水基产品。聚山梨醇酯是粘性的、微溶于水的淡黄色液体。聚山梨醇酯类还可以通过降低要被乳化的物质的表面张力来促进形成乳状液。聚山梨醇酯类已确认具有促进组分溶解在其通常不会溶解的溶剂中。与水分散于油中相反，聚山梨醇酯的作用是将油分散于水中。

聚山梨醇酯由多羟基化合物、山梨糖醇与乙烯氧化物反应制得。然后，聚氧乙烯山梨糖醇再与来自植物脂肪和油的脂肪酸如硬脂酸、月桂酸和油酸等反应。属于含有脂肪酸的单（非-PEG-基化）山梨糖醇表面活性剂通常冠名以司盘。

聚山梨醇酯由聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯组成，其结构通常是以如下所示的化学同系物聚山梨醇酯来表示。虽然每个位置处的重复环氧乙烷亚基的数量的不同，但是对于每个聚山梨醇酯而言（例如，20、40、60、80），它们的总数（w+x+y+z）是恒定的。

聚山梨醇酯是在一些药物或食品的制备中所使用的一类乳化剂。它们经常用于化妆品，以将精油增溶于水基产品之中。聚山梨醇酯是衍生于经脂肪酸酯化的PEG基化山梨糖醇（山梨醇的衍生物）的油质液体。作为含脂肪酸的单（非PEG基化的）山梨糖醇的酯的表面活性剂通常称为司盘。

·聚山梨醇酯20（聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯）

·聚山梨醇酯40（聚氧乙烯(20)山梨醇酐单棕榈酸酯）

·聚山梨醇酯60（聚氧乙烯(20)山梨醇酐单硬脂酸酯）

·聚山梨醇酯80（聚氧乙烯(20)山梨醇酐单油酸酯）

在聚氧乙烯部分后面的数字20是指在该分子中所发现的氧乙烯-(CH₂CH₂O)-基团的总数。在聚山梨醇酯部分后面的数字与和该分子的聚氧乙烯山梨醇酐部分缔合的脂肪酸的类型有关。单月桂酸酯用20表示，单棕榈酸酯用40表示，单硬脂酸酯用60表示，单油酸酯用80表示。在其司盘等同物的后面附随相同的数字（司盘20、司盘40、司盘60和司盘80）。

本发明包括用聚山梨醇酯来提高难溶性化合物的溶解性浓度的方法。如前所述，许多类黄酮类、尤其是芹菜素是难溶于水溶液的，由此严重限制了它们在外用的、药物的和保健品的应用中的生物利用率。

本发明包括通过使用表面活性剂化合物、尤其是聚山梨醇酯80、60、40和20来提高多酚的水相溶解度水平的方法。应该指出的是，在该例子中，聚山梨醇酯20、40和60代表含不同饱和脂肪酸的聚山梨醇酯的同源系列。脂肪酸链中的碳的数量从12（聚山梨醇酯20）增加到18（聚山梨醇酯60）。聚山梨醇酯80表示具有18个碳链长度的不饱和脂肪酸（油酸酯）。这些例子并不全面，本领域的技术人员应意识到带有任何其他脂肪酸的这类非离子型表面活性剂，以及诸如脂肪酸的聚氧乙烯烷基醚等的其他种类的其他非离子型表面活性剂的有用性。

PEG

聚（乙二醇）（PEG）也被称为聚（氧乙烯）或聚（乙撑氧）（PEO），是一种分子量（MW）范围很常见的合成聚醚。分子量<100,000的材料通常被称为PEG，而较高分子量的聚合物则被归类为PEO。这些聚合物是两性分子，易溶于水和许多有机溶剂。低分子量（MW<1,000）的PEG是粘性的无色液体，而较高分子量的PEG为蜡状白色固体，与其分子量成比例的熔点的上限约为67℃。PEG或PEO具有以下结构，

HO-CH₂-(CH₂-O-CH₂-)n-CH₂-OH

通常包含在PEG的名称中的数字表示其平均分子量，例如，包含有n=9的PEG具有约400道尔顿的平均分子量，并被标记为PEG400。

阴离子型和阳离子型表面活性剂

还应当注意的是，在本发明的制剂中，无论是诸如多库酯钠或月桂基硫酸钠的阴离子型表面活性剂，还是诸如溴棕三甲胺或苄索氯铵等的阳离子表面活性剂都既可以单独使用，也可以与非离子型表面活性剂结合使用。对于几种相对不溶于水的多酚类而言，其水相改善已经明显超过两个以上的数量级。

具有高平面化合物浓度的新制剂可以通过口服、吸入、外用、腹膜、牙周和栓剂制剂的方式利用。它们在医药、药用化妆品和保健品的应用中是有用的（见下文）。

如本文所用术语“药物组合物”或“药物制剂”意指一种组合物，其中所述组合物或制剂的组分为医药级。所述组合物或制剂可以方便地以单位剂量的形式存在，并可以通过药学领域中已知的方法来制备。该制剂可以是立即或缓慢或控制释放的扩散增强型化合物。一种持续释放系统（也被称为延迟释放、控释等）的优点是与其他的同类药物制剂相比施药频率可以降低，且体内药物浓度在一段较长的时间内较为稳定。本发明的组合物中的合适的剂量将取决于给定的化合物的给药方式、代谢机制，以及所治疗病症的严重程度。

本发明包括多种方法来配制如类黄酮类等的平面化合物，使其具备广泛的用途。本发明的化合物、组合物和制剂在预防和治疗下文中讨论的病症和疾病的是有用的。如本文所用“治疗有效剂量”是达到所要求效果所必须的剂量。例如，对于斑状银屑病而言，治疗有效剂量是减少斑点或斑块的大小或严重程度的剂量。“预防剂量”是防止或降低病症或疾病发生的可能性的剂量。

表IV列出了可以用作输送题述制剂的方式的各种药剂的类型和剂型。

A.外部给药

增溶后的化合物的外部给药一般是以贴剂、乳液、膏霜、凝胶、溶液、喷剂、液体和浆液、泡沫或软膏的形式施行。上文所述的用于提高类黄酮类或其他难溶性平面化合物在表面活性剂中的溶解度水平的方法可以使得能够配制这样的乳液、膏霜、凝胶、溶液、喷剂、泡沫或软膏类外用产品，其中在不使用这些方法的情况下，无法实现所述相对不溶性的平面化合物在溶液中的物态。

透皮输送

用于提高平面化合物在表面活性剂中的溶解度水平的所述方法实现了通过可控速率的渗透而进入体循环的透皮输送。本发明的制剂通过解决有关皮肤所固有的低渗透性的问题而提供了非侵入式的给药路径。皮肤对于药物渗透而言是良好的屏障。渗透促进剂的掺入可通过改变角质层的屏障特性而促进药物的吸收。在外用的、口服的和腹膜的应用中，诸如聚山梨醇酯80的多种非离子型表面活性剂被认为是药理学上惰性的、无毒的、无刺激性的、无过敏性的、无臭的，可与多数药物和赋形剂相容，并具有良好的溶剂特性。

渗透促进剂

在过去的二十年中已开发了包括醇类和多羟基化合物类（乙醇、丙三醇（glycerol）、丙二醇）、表面活性剂（吐温、司盘）、脂肪酸类（油酸）、胺类和酰胺类（氮酮、N-甲基吡咯烷酮）、萜烯（柠檬烯）、亚砜类（二甲基亚砜-DMSO）、酯类（十四酸异丙酯）的不同种类的渗透促进剂(French E,Potton C,Walters K.Pharmaceutical skin penetration enhancement.In:Walters K,Hadgraft J,editors.NewYork:Marcel Dekker;1993.p.113-44)。

微乳液

旨在促进皮肤渗透的另外一种制剂方案是制备微乳液。微乳液由水、油和表面活性剂组成，产生透明的、热力学稳定的液体。微乳液的特性包括光学透明性、热力学稳定性，以及疏水性成分和亲水性成分的溶解性。微乳液是含有油、水和表面活性剂以及还常常结合有助表面活性剂的清澈的、稳定的、均质的液体混合物。水相可含有盐和/或其他成分，而“油”实际上是不同的烃类和烯烃类的复合物。与普通的乳状液相比，微乳液经过组分的简单混合而形成，不需要通常用于形成普通乳状液的高剪切条件。微乳液的两种基本类型是正相型（油分散在水中，O/W）和反向型（水分散在油中，W/O）。

来自微乳液的渗透增强可归因于药物浓度的增加，其提供了从运载体到皮肤的大的浓度梯度。含有提高的类黄酮浓度的非离子型表面活性剂溶剂（如本发明所述）十分适合用于透皮的、口服的和腹膜的应用的微乳液的制备。

在一个实施方式中，将含有芹菜素的微乳液溶解在聚山梨醇酯80、水和作为助表面活性剂的乙醇以及十四酸异丙酯(IPM)的油相中。该实施方式有外部施用（这是由于皮肤的渗透特性），还有口服、注射和鼻部喷入法施用。

本发明所公开的制剂实现了用于类黄酮类的增强的透皮药物输送的方法。特别令人关注的是所公开的增溶于非离子型表面活性剂混合物中的包括芹菜素的相对不溶于水的类黄酮类的制剂。用人类皮肤和老鼠皮肤进行体外皮肤渗透试验证明了出乎意料地多的芹菜素沉积于表皮和真皮层内，这是由于使用了所公开的非离子型表面活性剂混合物。参见实施例15。

透皮贴剂

有助于难溶性平面化合物的透皮活性药剂输送的是使用含有在用诸如相对易挥发的乙醇等醇所稀释的增溶剂中（如表面活性剂）的增溶后的化合物的透皮贴剂。当用于皮肤时，所述贴剂的外侧无孔屏障用于减少相对易挥发性醇的蒸发，从而使得活性药剂的渗透和输送得以提高。当应用于皮肤表面或者包含在透皮贴剂中时，用于化妆品和食品应用中的其他溶剂稀释剂如醇类（即乙醇、二醇类、乙氧基二甘醇等）、酯类（二甲基异山梨醇等）可以用于减小相对粘性的非离子型表面活性剂的粘度，从而提高皮肤渗透的速率和深度。特别地，对皮肤贴剂和透皮贴剂有用的是使用活性药剂的微乳液制剂。该制剂由水包油和油包水型的微乳液组成。

透皮贴剂可分为两种类型的输送系统：储库型和骨架型。两者的组成相似，只是在储库系统中使用半透膜来控制扩散。所用薄膜的例子包括聚丙烯、低密度聚乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物等。在骨架型制剂中，药物可以分散/溶解在粘合剂中。两种常用的粘合剂种类包括丙烯酸酯和硅酮基材料。压力敏感型丙烯酸酯粘合剂的例子包括但不限于

系列（Henkel公司，美国）。压力敏感型硅酮粘合剂包括但不限于

系列（Dow Corning公司，美国）。

表V汇总了关于一些具体的丙烯酸酯和硅酮基压力敏感型粘合剂的附加信息。

表Ⅴ丙烯酸酯和硅酮基压力敏感型粘合剂总汇

该组合物中还可以包含本领域技术人员知道的溶剂和渗透促进剂。潜在的溶剂/促进剂可包括但不限于脂肪酸类（油酸）、酯类（十四酸异丙酯）、醇类（乙醇和异丙醇）和二醇类（丙二醇、己二醇）。其他组分可包括抗氧化剂（例如BHT和BHA）或螯合剂（例如柠檬酸）。

在实施例15中，本发明所述的制剂将大量芹菜素浓聚物供给表皮和真皮这二个皮肤层。

B.口服给药

本发明的制剂也可以通过口服给药。对于口服给药，本发明中所公开的组合物例如可以是液态胶囊或溶液的形式。对于口服给药，所公开的组合物可以是任何口服上可接受的剂型，包括但不限于乳状液类、微乳液类和水溶液类、液态胶囊类。

在制备所述化合物用于口服给药时，通常将其与药物学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂相结合，以形成药物制剂或单位剂型。为了口服给药，化合物可以以溶液、悬浮液、乳状液的形式存在，或者存在于天然的或合成的聚合物或树脂中，以便从口香糖中摄取活性成分。

口服给药的化合物也可以配制成缓释的，例如可将类黄酮类涂布、装入微胶囊中或置于缓释装置中。这种制剂中总活性成分占制剂重量的0.01-10%。

药物制剂可通过本领域已知的程序、使用公知的并可容易获得的成分来制备。例如，类黄酮类可采用常见的赋形剂、稀释剂或载体配制，并形成例如胶囊、溶液、悬浮液、气雾剂等剂型。所有这些剂型均可用于快速释放、延时释放或肠溶包衣。这些还可以用于经口或舌下或口腔输送。适用于这种制剂的赋形剂、稀释剂和载体的例子包括填充剂和增量剂，例如淀粉、纤维素、糖类、甘露醇和硅衍生物类等。也可以包括粘合剂，例如羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素和其他纤维素衍生物、海藻酸盐、明胶，以及聚乙烯吡咯烷酮等。可以包括增湿剂如丙三醇、崩解剂如碳酸钙和碳酸氢钠等。还可包括延缓分解的药剂，例如石蜡等。还可以包含例如季铵化合物等的吸收促进剂。可包含诸如鲸蜡醇和丙三醇单硬脂酸酯等的表面活性剂。可加入诸如高岭土和膨润土等的吸附载体。也可包含例如滑石、硬脂酸钙和硬脂酸镁以及固体聚乙二醇类等的润滑剂。

本发明的组合物还可以含有诸如纤维素和/或纤维素衍生物类等的增稠剂。它们还可以含有树胶，例如黄原胶、瓜尔豆胶或阿拉伯胶，或者作为备选的聚乙二醇、膨润土等等。

含有诸如类黄酮类的软胶囊可以包含诸如明胶、微晶纤维素、甘油、月桂基硫酸钠、淀粉、滑石和二氧化钛等等以及诸如聚乙二醇（PEG）和植物油等的液体载体的非活性成分。此外，被设计用来抵御在胃内崩解和溶解在十二指肠的更接近于中性至碱性环境中的含有类黄酮类或其它化合物的肠溶胶囊通常包覆有醋酸纤维素衍生物类。

平面化合物也可以配制成方便口服给药的酏剂或溶液。类黄酮类的药物制剂也可采用含水或无水溶液或分散体系的形式，或者备选地采用乳状液或悬浮液的形式。

C.胃肠外给药

本发明的制剂还可以不经肠胃地给药。对于肠胃外给药，本发明所公开的组合物可以是可注射溶液或悬浮液、例如盐溶液等的形式。本发明所使用的术语“肠胃外”包括静脉内的、皮下的、肌肉的、滑膜内的、胸骨内的、病灶内的和颅内的注射或灌注技术。典型的制剂包括乳状液和微乳液。包括乳状液的可注射制剂通常由用于注射的纯化水、有机助溶剂、表面活性剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂和pH调节剂的混合物构成。每一个类别的成分的例子如下所述但不限于此：

助溶剂

丙二醇、乙醇、甘油、聚二醇、苯甲醇（苄基醇）、植物油、大豆油、红花油、棉籽油、玉米油、花生油、向日葵油、花生属植物油、蓖麻油、橄榄油、含诸如甘油单酯、甘油二酯或甘油三酯等的中等链或长链脂肪酸的酯、油酸乙酯、十四酸异丙酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油、磷脂，及其组合物。

表面活性剂

聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物、磷脂和聚山梨醇酯通常被用作合成的非离子型表面活性剂。

悬浮剂

聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、羧甲基纤维素钠和右旋糖酐。

防腐剂

乙二胺四乙酸二钠、苯甲酸钠、苯扎氯铵、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯。

抗氧化剂

抗坏血酸、丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、硫代硫酸钠。

pH值调节剂

氢氧化钠、氨基丁三醇、柠檬酸钠、磷酸氢二钠和磷酸氢二钠和磷酸氢钠、醋酸钠、柠檬酸、磷酸、醋酸和磷酸。

C.吸入给药

本发明的制剂也可以通过吸入的方式给药。对于吸入给药，本发明所公开的组合物可以是气雾剂的形式，所述气雾剂将类黄酮类成分以气体中的细微液滴悬浮的形式向口部或鼻道输送。喷雾器和吸入装置可方便类黄酮成分的输送。

所述组合物可对呼吸道给药。所述组合物可以以单位剂量的形式存在于例如胶囊或药筒中，或者例如明胶或泡罩包装中，由此所述组合物可以借助吸入器、吹入器或定量吸入器(MDI)或干粉吸入器(DPI)给药。

当以气雾剂或用点滴器给药时，所述化合物还可以存在于水溶液中来给药。因此，其他气雾剂药物制剂可包括例如含有大约0.01-10%的所公开的类黄酮成分的生理学上可接受的缓冲盐溶液。液体制剂还可以含有例如羟苯甲酯、羟苯丙酯和苯扎氯铵等的防腐剂，诸如磷酸盐和柠檬酸盐等的缓冲剂的缓冲剂，诸如甘露醇、氯化钠等的渗透压调节剂，例如抗坏血酸、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠等的抗氧化剂，以及诸如D&C黄色10号、FD&C黄色6号等的色素。

对于通过吸入法向上呼吸道（鼻腔）或下呼吸道给药，可从喷雾器或加压包或其他输送气雾剂喷雾的方便手段中方便地输送活性剂。加压包可包括合适的推进物，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体。在加压气雾剂的情况中，剂量单位可以通过提供阀来输送被计量的量来确定。也可以通过使用喷雾器来输送产品。

对于鼻内给药，治疗剂也可通过滴鼻剂、液体喷雾的形式给药，例如通过塑料瓶喷雾器或定量吸入器等。典型的喷雾器有Mistometer(Wintrop)和Medihaler(Riker)。

载体和运载体

除了活性剂，所述制剂还包含一种或多种运载体，例如“药物学上可接受的”或者化妆品上或者“皮肤病学上可接受的”载体/运载体。“药物学上可接受的载体”基本不会对活性剂的药物活性有不利影响，当将足以输送有效剂量的活性成分的剂量给药于受体时，其对所述受体没有毒害或不适当的伤害且是无毒性的，并且所述载体（稀释剂、赋形剂和/或盐等）与制剂的其他成分是相容的。同样，“皮肤病学上可接受的载体”具有相同的性质。

皮肤病学上可接受的载体一般包括那些在化学上和物理上与活性成分相容的、在适当的保质期内稳定的、以及可以在外用给药后促进活性成分渗透进入皮肤里（例如到达表皮和/或真皮）的成分。任选地，皮肤病学上的载体含有有助于便于使用并具有令人愉悦的美学属性（颜色、气味、感觉等）的成分。

就药物输送情形而言，制剂的目标取决于外用产品的预期用途。对于防晒剂、抗真菌剂和角质软化剂制剂而言，希望能够增强的药物输送并存留在角质层（皮肤的较外层）中。相反，目的在于改善皮肤的生理机能的外用制剂则要求药物沉积在和通常是穿过皮肤的底层（有活力的表皮和真皮）。

运载体例如可以用作其他材料的稀释剂、分散剂和/或载体而存在于所述制剂中（例如，在组合物施用于皮肤时促进其分布）。一些示例性的运载体包括：有机组分（例如醇类、油类等）、水基溶剂（例如那些可以溶解或分散活性黄酮成分的水基溶剂，例如以其适于治疗处置的浓度）。

更具体地说，载体可以包括乙醇、异丙醇、苯甲醇（苄醇）、乙二醇（例如聚二醇、丙二醇、乙氧肌乙二醇等）、油类（例如葡萄籽、荷荷巴、椰子、芝麻、矿物等）、丙三醇、脂肪酸酯、二甲基异山梨醇，以及包含至少一种前述载体的制品。

所述载体可以以基于制剂的总重量为小于或等于99.99wt%，例如80wt%-99.99wt%的量存在于制剂中，可以是如上所述的所需最终制剂的各种形式中的任何一种。

除了水和油以外，载体成分还可包括液体软化剂、固体软化剂、溶剂、润湿剂、增稠剂、粉料、香料、气味掩蔽剂、着色剂、分散剂、润滑剂、硅酸盐以及包含至少一种前述成分的制品。示例性的溶剂包括乙醇、异丙醇、乙氧肌乙二醇和二甲基异山梨醇以及丙酮，作为防止和/或减缓干燥，和/或用于保护皮肤的例如硬脂醇、鲸蜡醇、乙酰化羊毛脂醇、硬脂酸、棕榈酸异丁酯、异鲸蜡硬脂酸酯、鲸蜡醇棕榈酸酯、硬脂酸异丙酯、硬脂酸丁酯、羊毛脂、可可油、牛油树脂、油（例如橄榄油、向日葵油、鳄梨油、矿物油）、凡士林油和十四酸酯（例如十四酸丁酯、十四酸异丙酯、十四酸十四酯），以及包含至少一种前述成分的制品。

在本发明的一个实施方式中，所述组合物采用肠溶包衣配制，以将活性药剂释放在肠道中。

添加剂

透明质酸（HA）

在皮肤结构中，HA起到空间填充、结构稳定和细胞保护分子的作用，具有显著的可延展的物理特性和极好的生物相容性特性。此外，具有高水平粘弹性的HA结构有助于保持与该皮肤的高水平的水合作用。在皮肤中的水分含量与皮肤组织内的HA水平之间存在紧密的关联。已有大量文献证明，HA的物理和生物性能会随着皮肤的老化、尤其是在皮肤的新陈代谢、内含物和机械性能的衰退而存在显著的变化。人们相信，保持富有活力的HA存在于皮肤的细胞间结构中有助于健康皮肤的物理外观的活力。

在另一方面，已有大量文献证明，诸如HA的多糖类分子会因酶机制和氧化（自由基）机制而降解。因此，期望开发用来防止诸如HA等的多糖类分解的外用制剂。为此，诸如黄酮等的类黄酮类可用通过其已被充分证明的抗透明质酸酶和抗氧化特性来达到这个目的，因此能够保持HA所期望的保护其避免分解机制的功能的活力。

从外用上说，HA具有储水特性，这使其可有利地成为膨胀剂和润滑剂，使其能够掺入到化妆品中，从而带来对皮肤状况的可感知的和明显的改善。在使用中，它形成薄的透明的粘弹性表面膜，其有助于保持年轻和健康的皮肤的特性：柔软、弹性和色泽。增加的皮肤的水合作用可使角质层的紧致结构膨胀和打开，导致增强本发明中所述的外用制剂的活性类黄酮类成分的渗透。

所述制剂还可以包括添加剂，只要该具体的添加剂不会对活性成分产生不利影响。可用于所述制剂的多种实施方式中的一些可能的添加剂包括：

抗氧化剂（例如生育酚、生育酚乙酸酯、丁基羟基甲苯、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠和没食子酸丙酯），

表面活性剂（例如，那些可以减小相之间的界面张力和/或改善所述制剂稳定性的表面活性剂，和/或那些可以用作乳化剂的表面活性剂，例如硬脂酸甘油酯、硬脂醇、鲸蜡醇、硬脂酸二甲聚硅氧烷、硅酮（硅氧烷）表面活性剂、聚山梨醇酯、十二烷基醚硫酸钠），

皮肤调理剂，例如硅油，

防腐剂（例如羟苯甲酯、羟苯丙酯、苄基醇、苯扎氯铵等），

保湿剂或软化剂或湿润剂，例如甘油、聚乙二醇、丙三醇、山梨醇、矿物油、十四酸异丙酯等，

缓冲剂（例如磷酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂和醋酸盐缓冲剂等），pH值调节剂（例如三乙醇胺、氢氧化钾、氢氧化钠、盐酸和磷酸等），

胶凝剂，例如羟丙基乙基纤维素、羟乙基纤维素、聚丙烯酸聚合物和泊洛沙姆等，

维生素（例如维生素A、B、C、D、E、K等），

矿物、植物提取物（例如芦荟、金缕梅、接骨木花、黄瓜、甘菊等），

抗炎剂，

软化剂，

湿润剂，

皮肤保护剂，

硅酮，

止痛剂，

皮肤渗透促进剂，例如丙二醇、二乙二醇单乙基醚、十四酸异丙酯，

着色剂，例如黄色5号，

香精（或香料），

蜡（例如蜂蜡、固体石蜡等），

推进剂（例如压缩空气、烃类（例如丙烷、丁烷、异丁烯等）），

防晒成分（例如无机的和/或有机的防晒霜，例如氧化钛、氧化锌、阿伏苯宗、氧苯酮、胡莫柳酯、奥克立宁桂皮酸盐等），或者

包含至少两种上述成分的制品。

对于防晒剂，该制剂可含有基于制剂总重量的0.01wt%到20wt%的防晒成分，特别是0.1wt%到大约10wt%，尤其特别的是0.5wt%到5wt%。对于皮肤产品，运载体是脂溶性的，即可有效地透过皮肤层并将类黄酮类输送至皮肤的富脂质层。可将含有分散的和/或增溶后的类黄酮类的处于混合胶体状态的制剂与钛和锌的氧化物一起加入到运载体中，使得类黄酮类将在使用者的皮肤中被优先吸收，而含有锌和钛氧化物的相将不会被吸收，但是将会在皮肤表面之外形成防护UV膜屏障。

通过将本发明的浓缩物加入油/水（“o/w”）和/或水/油/水（“w/o/w”）乳状液中，可将其加载到制剂中，该乳状液可包含分散剂、乳化剂、表面活性剂等。

值得注意的是，虽然载体可包含相对简单的溶剂或分散剂（例如油类和有机醇类），然而通常优选的是，所述载体包含更加有助于外用的组合物，尤其是会在其所施用的皮肤上形成膜或表层以使施用局部化并提供止汗功能的组合物，和/或有助于输送到皮肤（如皮肤的表层）和活性成分渗透到皮肤的富脂质层的组合物。许多这样的组合物以乳液、膏霜、喷雾和凝胶的形式存在。典型的组合物包括含有水和/或醇类的洗液、软化剂（例如烃油、烃蜡、硅油、植物脂和/或油、动物脂和/或油、海产脂和/或油、甘油酯衍生物、脂肪酸类、脂肪酸酯类、醇类（例如多羟基醇类、醇醚类）、羊毛脂（包括其衍生物）、酯类（例如多羟基酯类、蜡酯类）、甾醇类、磷脂类，以及包括至少一种前述成分的制品），通常还包括乳化剂（非离子型、阳离子型或阴离子型）。上述这些常用的成分可以通过使用不同比例的这些成分和/或通过掺和诸如树胶或其他形式的亲水性胶体的增稠剂来配制成膏霜而不是乳液，或者配制成凝胶。

在一个实施方式中，该制剂包含溶解和分散（例如微粒）形式的平面化合物。溶解的形式可穿透皮肤层而变得有生物活性，而分散的水合物用作储库，用于在溶解的化合物被消耗掉时保持溶解的浓度水平，以便保持持续的输送。

可使用基于制剂的总重量计含有大约2.0wt%的芹菜素以及大约0.5wt%的抗坏血酸，含有大约0.5wt%的生育酚醋酸盐和大约0.25wt%的乙醇酸，以及含有余量的运载体成分的卵磷脂基水包油膏霜来制备制剂。

在另一个实施例中，可使用基于制剂的总重量计含有大约3.0wt%的卵磷脂、大约0.5wt%的抗坏血酸，大约0.5wt%的生育酚醋酸盐、大约0.25wt%的乙醇酸，以及大约总量为8wt%的锌和钛的氧化物、含有余量的运载体成分的卵磷脂基的水包油膏霜来制备制剂。

任选地，该制剂还可以包括：(i)添加剂，选自由表面活性剂、维生素、矿物、植物提取物、抗炎剂、植物提取物的浓缩物、软化剂、湿润剂、护肤剂、保湿剂、硅酮、皮肤舒缓成分、皮肤渗透促进剂、着色剂、香料（香精）、防腐剂、pH值调节剂，以及包含至少一种前述成分的制品构成的集组；和/或(ii)氧化钛、氧化锌，或者包含至少一种前述成分的制品。

通常情况下，基于组合物的总重量计，所述平面化合物组合物可包含大于或等于0.01重量百分比(wt%)的平面化合物，特别地，大于或等于1wt%，例如0.1wt%到10wt%，特别是0.5wt%到8wt%，更特别的是2wt%到5wt%。所述制剂可包含大于或等于0.01wt%（例如0.01wt%到20wt%）的平面化合物，特别地，0.05wt%到15wt%，更特别的是0.1wt%到10wt%的平面化合物，尤其更特别是0.5wt%到4wt%的平面化合物，甚至更特别是1wt%到2wt%的平面化合物。

本发明所公开的范围可以是包括在内的或者是可结合在一起的（例如，范围“达到25wt%或者更特别地为0.5wt%到5wt%”包含了范围“5wt%到25wt%”范围内的端点值和所有的中间值等）。“制品”包括掺和物、混合物、合金、反应产物等。更进一步地，用语“第一”、“第二”等在此并不指示任何顺序、数量或重要性，而是用来区分不同的要素，而术语“一”在此并不表示对数量的限制，而是表示存在至少一个所指对象。本发明所使用后缀“（s）”包括了其所修饰的术语的单数和复数，因而包括一个或多个所述术语（例如膜包括一个或多个膜）。整个说明书中的“一个实施方式”、“另一个实施方式”、“实施方式”等意味着与实施方式有关的所述的具体要素（例如特征、结构和/或特性）被包括在至少一个本发明所述的实施方式中，并且可能出现或可能不出现在其他的实施方式中。此外应该理解，所述要素在不同的实施方式中可以以任何合适的方式相结合。本发明所用术语“（甲基）丙烯酸酯”包括丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯类。

本发明的制剂的例子列于表Ⅵ。

表Ⅵ-含有所公开的增溶后的活性剂的制剂的例子

优选的外用组合物

下面的组合物是本发明优选的实施方式。在其它实施方式中，另一种类黄酮，例如木犀草素或类黄酮类的制品，可以由芹菜素替代，另一种表面活性剂可以由聚山梨醇酯80替代来制备浓缩物。在本发明的又一实施方式中，本发明的其他平面化合物如多酚类可以由芹菜素替代。

一种使用二甲亚砜-水溶液的芹菜素制剂，其基于制剂的总重量含有1-20重量%的（优选约10%（重量））芹菜素/聚山梨醇酯80的浓缩物、0-99.9重量%（优选约45%（重量））二甲亚砜，且包括余量的水。

一种使用二甲亚砜-水溶液的芹菜素凝胶制剂，其基于制剂的总重量包括1-20重量%（优选约10%（重量））芹菜素/聚山梨醇酯80浓缩物，0-60重量%（优选约45%（重量））的二甲亚砜，2-4重量%（优选约3%（重量））羟丙基纤维素（其量足以达到所需的粘度），且包括余量的水。

使用乙醇水溶液的芹菜素溶液制剂，其基于制剂的总重量含有1-20重量%（优选约10%（重量））的芹菜素/聚山梨醇酯80浓缩物，0至80%（重量）（优选约66%（重量））乙醇，0-20重量%（优选约10重量%的丙二醇），且包括余量的水。

一种使用乙醇水溶液的芹菜素凝胶制剂，其基于制剂的总重量含有1-20重量%（优选约10%（重量））的芹菜素/聚山梨醇酯80浓缩物，0至80%（重量）（优选约66%（重量））乙醇，0-20重量%（优选约10重量%）的丙二醇，以～0.5到～2.5%（重量）羟乙基纤维素或～0.5到2.5%（重量）透明质酸钠或～0.5到～2%（重量）的聚羧乙烯（其量足以达到所需的粘度）进行凝胶化，且包括余量的水。

一种芹菜素乳状液制剂，其基于制剂的总重量含有1-20%（重量）（优选约5-10%（重量））的芹菜素/聚山梨醇酯80浓缩物，0-20重量%（优选约10%（重量））乙氧肌乙二醇，0-20重量%（优选12重量%）乳酸肉豆蔻酯，0.1-1.0%（重量）（优选约0.4重量%）聚羧乙烯980，0.1-1.0重量%（优选为0.3重量%）的Pemulen TR1，～0.17%（重量）对羟苯甲酯，～0.03%（重量）羟苯丙酯，～0.1（重量）%乙二胺四乙酸（EDTA），0-15%（重量）（优选约10%（重量））环聚二甲基硅氧烷，0-10%（重量）（优选约2重量%）的油醇，～0.1%（重量）丁基羟基甲苯，且包括余量的水（用稀HCl或10%氢氧化钠溶液将最终pH值调节至～6.5）。Pemulen聚合物是丙烯酸和C10-C30丙烯酸烷基酯的高分子量交联共聚物。Carbopol980是交联聚丙烯酸酯聚合物。

保健品/膳食补充剂

增溶后的化合物，诸如多酚浓缩物或这种浓缩物的制剂等，可用于许多保健产品，如纯营养物质，强化食品和膳食补充剂。本发明所用的保健品是经科学证明可用于治疗和预防疾病的有益于健康的任何无毒食品的提取物补充剂。

食品/医疗食品

医疗食品被配制来用于食用或在医生的监管下体内给药。它们用于在公认的科学原理的基础上通过医学评价建立起对于某种疾病或病症的特殊营养需求进行特定的饮食管理。医疗食品可通过口服或通过管饲来摄取。医疗食品常常被设计来满足被诊断为患有特殊疾病的人们的某些营养需求。一种平面化合物的浓缩物，如类黄酮的浓缩物或其制剂，可用于医疗食品。例如，将多酚（如类黄酮）浓缩物加入饮料（如酒精型）可以用作难溶但有益的多酚类的口服输送的一种手段。此外，本发明还包括含有浓缩物的功能性饮料和功能性丸剂、遗传工程“设计”食品、草药产品，以及加工产品如谷类、汤剂和饮料。

化妆品/药用化妆品

本发明的浓缩物或制剂，例如包括多酚浓缩物，可以用于许多产品中，如化妆品和皮肤病学上的产品等，包括基底、防晒产品、非日晒型皮肤晒黑产品、脱毛产品、膏霜（例如湿润霜、烫伤膏、护肤霜、晚霜、皮肤病霜等）、浆液、液体、护肤乳液、柔软剂、凝胶剂、喷剂、泡沫、溶液、肥皂、洗发剂、软膏、唇膏、清洁剂、化妆水、着色剂、面膜、毛发产品、指甲产品，以及其他化妆品产品或用途。

IV-药剂盒

根据本发明的另一个方面，提供了用于形成用于传递生物活性剂的制剂的药剂盒。本发明的药剂盒包括第一等分部分的浓缩物溶液，和第二等分部分的载体。混合时，第一和第二等分部分形成用于输送其中所含的生物活性剂的组合物。防腐剂可以掺入到第一和第二等分部分中的一种内。载体一般是皮肤的，口服，注射或气雾剂载体。

本发明的药剂盒优选可以配备具有分别含有反应混合物的第一和第二等分部分的第一和第二针筒的双筒注射器。双筒注射器设置可以用于制备根据本发明的制剂。例如，类黄酮的浓缩物溶液如芹菜素可以包含于一个注射器针筒内，而载体可以包含于另一个注射器针筒内。注射器彼此连通，以使其中内含物可以通过将混合物交替地从一个注射器针筒中转移到另一个中达约30个循环来进行混合。所述浓缩的溶液可以稳定至少一年，而载体可以稳定至少同样的时间，在某些情况下是无限期。保持生物活性剂的无菌状态、广泛的适用性和稳定性以及其易用性是这种双重筒注射器系统的特性。

V-本发明的化合物和制剂的用途

类黄酮类

类黄酮类具有多种医疗用途，这是因为它们是自由基清除剂、抗氧化剂、超氧化物阴离子、UV吸收剂、血管扩张剂、抗透明质酸酶（通过抑制透明质酸酶而抑制透明质酸的分解）、抗弹性蛋白酶（通过抑制弹性蛋白酶而抑制弹性蛋白酶的分解），可以清除脂质过氧化物自由基。还已知类黄酮化合物可有效地增强胶原蛋白结构。此外，类黄酮类具有抗诱变、抗血管增生、抗癌、抗炎症、抗菌和抗病毒作用。抗炎症作用包括对TNF-α、IL-β、COX-2、蛋白激酶PKC、iNOS以及T辅助性细胞Th1和Th17的抑制。类黄酮类、尤其是芹菜素是p53的刺激物。研究者发现，芹菜素会在细胞周期的G1和G2/M期诱导可逆的细胞周期阻滞。

单纯类黄酮类或与其他预防性和/或治疗有效药物相结合可有效地用于治疗或预防包括人类的哺乳动物中的最常见疾病，例如癌症、自身免疫性疾病、糖尿病、溃疡、心血管疾病、动脉硬化症和肝脏疾病。该化合物还有抗血栓活性。

皮肤疾病

本发明公开提供了用于制备含有黄酮类如芹菜素的外用制剂的方法，该类黄酮类在皮肤病学上可接受的pH范围内具有药物学意义上的浓度。该类黄酮类可以是溶解形式。外用制剂可以是凝胶、软膏、溶液、乳液、膏霜、喷雾、皮肤贴剂、透皮贴剂等的形式，以将足够量的类黄酮类输送到哺乳动物（例如人类）的组织（例如进入哺乳动物的角质组织）中。

外部施用量

典型的外用剂量范围是1到10mg/cm²，优选1到5mg/cm²，并且最优选1到3mg/cm²。剂量根据病情和给药模式而变。在FDA防晒霜外用试验中所使用的外用剂量是2mg/cm²的制剂施用于暴露的皮肤。文献“Re:Tentative Final Monographfor OTC Sunscreen”,Food and DrugAdministration(U.S.).1998-09-11.Retrieved2009-09-25提供了一种假设，“平均的”成年人高5英尺4英寸(163cm)，重150磅(68kg)，腰围32英寸(82cm)，该成年人穿着覆盖腹股沟区域的泳衣，那么应该用29g（大约1盎司）均匀地施用于未覆盖的身体区域。若只考虑面部，则转换成1/4到1/3匙的量用于平均的成年人的面部。对于更大的个体应相应地放大这些量。

按照通常应当用于受影响皮肤的外用药物的量，皮肤科医生将“指尖单位”作为推荐指导。一指尖单位是从标准管挤出的沿成年人指尖的外用制剂的量。一指尖单位大约是500mg的制剂（具有5mm喷嘴的管），并推荐需要用于覆盖受影响区域的单位数量。例如，充分地覆盖头皮上的牛皮癣需要三指尖单位，而整个腿部和足部需要八指尖单位。该方法为病人提供了更精确地使用其外用药物的方法。

预防和治疗由于太阳辐射造成的皮肤损伤

诸如芹菜素和/或木犀草素的类黄酮的可溶形式可以容易地渗透进入皮肤并被皮肤吸收，从而预防损伤（光老化）或修复已损伤的皮肤基质。如在以下的实施例15中所显示的，本发明的制剂使得类黄酮得以大量进行皮肤渗透。

芹菜素和/或木犀草素在通常包括乳液和膏霜的赋形剂中的低溶解度使得形成溶液中含有所需量的类黄酮的这种组合物变得困难。在一个实施方式中，该制剂包含足量的处于近中性pH下的增溶后的类黄酮，以渗透进入活性的皮肤基质中，使皮肤组织的损伤最小化或消除，从而保护活性皮肤免受由暴露于UV射线和/或预渗透引起的损伤。该外用制剂可以对个体给药，优选局部施用于个体的皮肤、口服（例如作为食品补充剂）等。该制剂可以能有效预防UV损伤的量来施用，以便例如抑制自由基、活性氧和/或其他氧化物。

对于抵抗皮肤癌的活性，芹菜素即使在很低的小于约50μM的浓度下仍表现为有效的。通过在细胞增殖和血管再生期间影响细胞凋亡和坏死的机制而产生对癌细胞增殖的抑制，芹菜素展示出抗恶性细胞增生和细胞毒素的作用，上述细胞增殖和血管再生是包括前列腺癌、乳房癌、肺癌、白血病、甲状腺癌和肝癌的多种癌症细胞的主要特性。

机理

类黄酮类如芹菜素的主要机理被认为是它们能够增加p53的稳定性；由此诱导G1和G2/M细胞周期的阻滞，以及已被充分证明的抗炎、抗氧化、无毒以及非诱变的特性。在通过清洗去除芹菜素或在其扩散离开皮肤外之后，这些细胞周期阻滞是完全可逆的。

鉴于芹菜素可以引起G1和G2/M细胞周期阻滞的事实，芹菜素的化学预防活性的本质可能是，通过确保在DNA损伤和肿瘤促进剂的存在下有足够的固有的和人为强加的细胞周期检测点来抑制癌症的发生和发展。在暴露于日光之前对皮肤进行芹菜素和木犀草素处理，可以延长细胞对DNA损伤作出反应而通常在G1和G2/M中阻滞的时间。这些黄酮增加了存在于对DNA损伤作出反应的正常细胞中的G1相的持续时间，或者，这些黄酮阻碍了含有在G1中激活的致癌基因的细胞，否则即使在存在大量的DNA损伤时细胞周期的发展也会继续。因此，花费在G1和G2/M中的时间对于细胞高效地修复所有DNA突变并因此减缓或阻止致癌过程是很关键的。

由于阳光损伤的作用在一生中是累积的，作为在所有的人类和动物癌症中最容易突变的基因，肿瘤抑制蛋白p53在人们外部施用芹菜素和/或木犀草素的时候可能已经在一些角化细胞中被灭活。由于这些黄酮的作用在G1阻滞中依赖于p53、在G2/M阻滞中不依赖于p53，例如在角化细胞已经有灭活的p53基因时，芹菜素将增强在癌前细胞的这些小病灶中的G2/M阻滞，以防止额外的突变、转移和/或有丝分裂期间的染色体损失。此外，芹菜素和/或木犀草素可通过清除响应于UV-B/A日光照射而产生的自由基来发挥其保护作用。

可以认为，芹菜素治疗可增强由UVB引发的细胞凋亡反应。不受理论的约束，可认为芹菜素的化学预防行为可用它的通过显著提高p53的稳定性来增加UV诱导的细胞凋亡的能力来解释，其中p53是皮肤癌细胞凋亡过程中的主要因素。因此，需要将药物学上有效的浓度的芹菜素输送到有活力的表皮或整个皮肤层中，以便有效地预防皮肤癌(Li B.;Birt D.F.;Pharmaceutical Research,Volume 13,Number11,November1996,pp.1710-1715(6))。

如本发明所公开的，用于外部施用的含有类黄酮类、尤其是芹菜素和/或木犀草素的组合物可用于预防和/或治疗因暴露于太阳辐射（UVA和/或UVB）引发的皮肤损伤。芹菜素和/或木犀草素组合物还可以增大外用组合物中的其他成分在预防和治疗晒伤中的功效。

在使用中，该产品可单次或多次施用，以获得所期望的结果。在一些实施方式中，防晒霜成分可以是制剂的一部分，和/或可以用作二次施用，使得含有防晒霜成分的膜通过阻挡或反射UV辐射而提供额外的全光谱UV辐射防护。

由于芹菜素和木犀草素可以在细胞周期中在细胞内发挥作用，所以任何一种均可与简单地作为细胞外屏障来吸收或反射日光中的UV能量的其他防晒剂相结合。因此，芹菜素和/或木犀草素作为可逆的细胞周期调节剂的外部施用，对于皮肤癌的预防提供了有用的、新颖的方法，其可连续地使用，或者与目前市售的防晒产品结合使用。

这些类黄酮类因其抗氧化、抗炎、UV皮肤保护和其他让人满意的特性而可特别有利地作为外用制剂的添加剂。因此，芹菜素和木犀草素的外部施用为皮肤癌预防/治疗提供了有用的、新颖的方法，并且可在目前市售的防晒产品之前使用，或与之相结合地使用。

不受理论的限制，可认为该制剂可用于例如治疗或预防由暴露于紫外(UV)光或日光而引发的皮肤癌。

本发明公开了用于预防和/或治疗皮肤癌以及其他包括但不限于宫颈癌和乳房癌的局部癌症的含有类黄酮类的组合物或其外部施用。该组合物含有药物学上有效量的芹菜素来渗透进入皮肤层中，以例如增加p53的稳定性来预防和治疗皮肤和其他局部癌症。

可以认为，当用在适当运载体中的特定混合物中时，抗氧化剂芹菜素和木犀草素的UVB光保护作用是明显的。类黄酮与其他成分一起以提供保护免受晒伤和慢性UV损伤的方式提供了能有效地支持人体自身防御机制的天然的方法。与矿物颜料相结合的芹菜素和/或木犀草素的天然抗氧化特性和抗癌特性提供了协同的光保护作用，以减小UV损伤和皮肤癌的风险。可加入包括诸如维生素E的抗氧化剂和湿润剂的其他天然成分，以产生可增强UV保护并同时舒缓皮肤的协同作用。

在此还公开了减小和/或预防日晒后果的方法，包括：施用含有类黄酮和皮肤病学上可接受的载体的外用制剂，以向哺乳动物的角质组织输送类黄酮组分。任选地，外用的化妆品组合物可以二次、三次或更多次地施用。

癌症

癌症化学预防药剂的三个理想特性是：1)是存在于已知与减少癌症发病率有关的食品中的天然化合物；2)具有已知的作用机理；和3)其作用是可逆的。可以认为，诸如芹菜素和木犀草素等的类黄酮类满足所有的三条标准。

本发明制剂可用于癌症预防和癌症治疗。该制剂可用于治疗或预防皮肤癌（包括光化性角化病、黑色素瘤、基底细胞癌）、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、乳房癌、肺癌、白血病、甲状腺癌、肝癌和包括神经母细胞瘤的脑癌。

其他皮肤疾患的治疗方法

本发明的化合物和制剂可用于治疗牛皮癣。实施例15证明了外用制剂能以足以具备治疗价值的浓度穿透人体皮肤。

能够通过外用本发明的制剂和组合物来治疗或预防的其它皮肤疾患和相关的病痛/病症包括但不限于以下所述：痤疮、脱发、特应性皮炎/湿疹、皮肤红斑狼疮、皮肤致敏和刺激、干性皮肤（干燥病、鱼鳞癣）、真菌感染、红斑痤疮、接触性皮肤病、包括牛皮癣的自身免疫性病痛，关节炎。芹菜素/类黄酮类的外用给药提供了极好的生物利用率。因此，这些外用制剂是昂贵的、不太令人满意的类固醇和细胞毒素药物的替代品。

其他疾患的治疗方法

本发明的化合物、组合物和制剂也可以用于治疗其他自身免疫性疾病，例如狼疮、关节炎、过敏症和哮喘。本发明的类黄酮制剂呈现出对他自身免疫性疾病的新的辅助性治疗效能。诸如芹菜素的源自食用植物的COX-2和NF-kB抑制剂的生物利用率对抑制狼疮和其他Th17介导的疾病如风湿性关节炎、克罗恩氏病和牛皮癣中的炎症，以及在基于过度表达COX-2的肿瘤的炎症（例如结肠、乳房）的预防中是有价值的。芹菜素通过抑制自身抗原呈递对于自身反应性Th1和Th2细胞的扩张来抑制狼疮。本发明的制剂提供了用于治疗自身免疫适应症/疾病的输送芹菜素/类黄酮类的新颖方法。给药可以作为其它自体免疫疗法的辅助，如抗肿瘤坏死因子抗体（例如，对于牛皮癣或对于类风湿关节炎）。

该化合物和制剂对治疗神经学和神经退行性疾患也是有用的。几项研究已为芹菜素和木犀草素的抗炎作用及其在包括阿耳滋海默氏病的各种神经退行性疾患中的神经保护/疾病缓解特性提供了证明。

在另一个实施方式中，本发明的化合物和组合物对于治疗变应性疾病和细菌感染是有用的。

可用本发明的类黄酮类治疗、预防或减轻的TNFα相关病症的例子包括但不限于：风湿性关节炎、幼年型类风湿性关节炎、骨关节炎、脊椎关节炎、肠炎疾病、慢性心力衰竭、糖尿病、系统性红斑狼疮、硬皮病、肉状瘤病、多肌炎/皮肌炎、牛皮癣、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症、急性髓细胞白血病、帕金森氏症、AIDS痴呆综合症、阿耳滋海默氏病、抑郁症、脓毒症、坏疽性脓皮病、败血症、感染性休克、贝赫切特综合症、移植物抗宿主病、葡萄膜炎、韦格纳肉芽肿病、干燥综合症、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、急性胰腺炎、牙周病、恶病、癌症、中枢神经系统损伤、病毒性呼吸道疾病和肥胖症。

可用本发明的类黄酮类来治疗、预防或者减轻的IL-1β相关疾病的例子包括但不限于：风湿性关节炎、败血症、牙周疾病、慢性心力衰竭、多肌炎/皮肌炎、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺疾病、阿耳滋海默氏病、骨关节炎、细菌感染、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症、葡萄膜炎、中枢神经系统损伤、病毒性呼吸道疾病、哮喘、抑郁症和硬皮病。

由于类黄酮类对IL-4和IL-13合成的抑制活性，可以预测的是，取决于数量和质量的类黄酮类摄入可以改善过敏症状，或者预防过敏性疾病的发作（Int ArchAllergy Immunol.2004Jun;134(2):135-40.)。

芹菜素在人类牙周韧带(hPDL)细胞中具有抗炎活性，并通过新的机制来起作用，所述机制包括血红素加氧酶-1(HO-1)的作用。因此，芹菜素在预防和治疗与抽烟有关的牙周疾病以及牙菌斑中作为宿主调节剂是有益的(Gil-SaengJeong etal,;Anti-infiammatory effects of apigenin on nicotine-andlipopolysaccharide-stimulatedhuman periodontal ligament cells via hemeoxygenase-1.,InternationalImmunopharmacology,Vol.:9,Nov.2009)。

在另一个实施方式中，本发明的化合物和制剂可用于促进头发的生长。研究表明，芹菜素通过TGF-β1基因的下调来刺激头发的生长。

本发明的制剂也可用于治疗和预防动脉硬化。

其他活性剂

使用上文第I节“本发明的化合物”中所述的化合物的本发明方法制得的制剂可用于适应症（使用）规定的或已知的这些化合物。例如，使用如同本发明中使用聚山梨醇酯制得的喜树碱制剂可用于治疗癌症。

实施例

实施例1.在聚山梨醇酯中的溶解度

由芹菜素和聚山梨醇酯80制得的产品被称为“A/PS80”。A/PS80通过如下步骤制成：

·将未经加工的芹菜素粉末和粘性的液体聚山梨醇酯80(PS80)以大约5～10wt%的芹菜素与95～90wt%的聚山梨醇酯80的比例和少量的去离子以及任选地还有丙酮和/或乙醇在烧杯中混合；

·之后将混合物充分搅拌，以形成黏稠的糊状混合物；

·之后在搅拌的同时将混合物缓慢加热至相对较高的温度。加热过程伴随着水和存在于聚山梨醇酯80中的挥发性组分的蒸发。小心控制加热过程，以避免由于加热过程引起的起泡而使混合物从烧杯中溢出；

·在移除挥发性物质和加热至温度超过约200到300℃时，产生深褐色的透明液体，使得所有的固体芹菜素都增溶在聚山梨醇酯80混合物中；

·在冷却至周围环境温度时，得到粘性的、褐色透明液体。芹菜素的含量越高，得到的颜色越深。此外，将一些晶体芹菜素加入到冷却后的A/PS80液体中并没有导致沉淀；从而证明了A/PS80液体不是过饱和的。

根据表VII中所示的所公布的溶解度结果，将芹菜素在水、乙醇和聚山梨醇酯80中的溶解度列出如下：(Ref.Li等人,J of Pharm Sci,Vol.86,No.6,June1997)。

表VII芹菜素溶解度（25℃下）

采用HPLC-MS测定A/PS80中的芹菜素的浓度。基于根据粘性A/P80液体中浓度为4.05%的芹菜素的计算值测得A/P80中的芹菜素的浓度，芹菜素的含量为40.5mg/ml或40,500ppm。

以下段落列出了有助于A/PS80的实验观测。

·向标准的水合芹菜素乳液（含有高浓度的纳米颗粒）中添加A/PS80有助于增加饱和的溶解度浓度水平。所提高的溶解度水平通过对穿过0.2微米过滤器的滤出液进行的比色测试来定量测定。

·向普瑞来（Pureil，广泛使用的杀菌液）中添加A/PS80，产生明显的芹菜素可溶性水平，这归因于普瑞来的高乙醇含量。用聚山梨醇酯80获得的可溶的芹菜素水平明显高于水合芹菜素和未加工芹菜素。

·将A/PS80加入普瑞来，然后应用芹菜素乳液的实验效果良好。该方案是利用乙醇的良好的渗透和溶解度特征（应指出的是，乙醇在使用后会很快蒸发，这将倾向于使皮肤变干），接着使用本发明的芹菜素制剂来帮助皮肤的再水化。

由LCMS（液相色谱-质谱仪）测定的芹菜素在所选定溶剂中的以重量%计的浓度如表VIII所示。

表VIII-所选定溶剂中的芹菜素分析总汇

其他试验证明，由于加热PS80和芹菜素至接近～250到300℃的高温而产生的分解产物基本上微不足道。

图2显示了与A/PS80溶液对比的、在加热之前的PS80的统计学分析。在对照样品和本发明样品之间可观察到微不足道的差异，这表明表面活性剂并未降解。在图2中，所检测的每一种成分用点来表示。PS80是聚合物，因此显示了许多低聚物。这解释了图中大量的成分或点。X代表质量特征，其与A/PS80样品之间存在统计学差异。可观察到非常少的不同特征，表明了PS80没有明显降解。只有少数几个X的存在表明了对照样品和本发明样品之间的差异很小。

实施例2.通过HPLC测定选定的类黄酮在聚山梨醇酯80和PEG400中的溶解度

这项工作的目的是对PS80和PEG-400中的共六种不同的类黄酮进行量化。还对样品进行了定性分析，以寻找由于热处理过程中所要求的高温导致溶剂的降解迹象。

该方案分为三个不同的阶段：方法验证/研发、各种黄酮的定量，以及定性分析以寻找PS80/PEG400的降解迹象。方法研发用于确定以前使用的用于芹菜素的高效液相色谱法（HPLC）是否适合用于量化PEG400或PS80中剩余的类黄酮。

表IX提供了HPLC测得的通过热处理过程所制备的类黄酮浓缩物中的PS80和PEG-400中的类黄酮的浓度。

在与对照PS-80和PEG-400参考材料进行比较时使用了统计分析软件来寻找表Ⅸ中不同类黄酮样品中的独特特性的存在。液相色谱-质谱法（LCMS）可以用来测定PS80和PEG-400降解产物。每个样品中的独特成分的数目从橘皮苷-PEG-400的样品中的12到芹菜素-PEG-400的样品中的55不等。由于类黄酮的加入以及由类黄酮产生的任何痕量成分，预计有少数独特成分存在。因此，少量独特成分表明没有发生明显的降解。

实施例3.其他类黄酮聚山梨醇酯制剂

除了芹菜素，用聚山梨醇酯80进行的试验可以扩展到包含几种类黄酮的化合物。表X包含了被选择采用聚山梨醇酯80进行溶解度试验的类黄酮的化学和物理特征数据。

表X-所试验的类黄酮的化学和物理特征总汇

表XI包含了采用多种类黄酮进行聚山梨醇酯80溶解度试验的结果汇总。

表XI–采用PS80进行的类黄酮试验总汇

实施例4.通过高温处理方法的非聚山梨醇酯80的其他聚山梨醇酯中的溶解度

非离子型表面活性剂被广泛用于化妆品和食品中，因为它们被认为是无害的，因为它们是多羟基化合物如山梨聚糖、蔗糖和丙三醇等的脂肪酸酯。因此，决定评价若干合适的非离子型聚山梨醇酯结构的表面活性剂，以通过实施例1所公开的高温处理方法来提高饱和溶解浓度。

表XII列出了几种由脂肪酸酯化的PEG基化山梨聚糖（山梨糖醇的衍生物）组成的非离子型表面活性剂。所试验的所有表面活性剂是油性液体，其满足了在>200℃的温度下保持稳定的标准。类似地，所试验的所有类黄酮（包括芹菜素）都是基于其难溶的特性来选择的。

当温度水平超过200-300℃时，可观察到类黄酮的浆状混合物在颗粒溶解性和颜色（深褐色-红色）上的变化。一些芹菜素晶体加入到冷却后的液体并没有产生沉淀，从而表明该液体没有过饱和。

表XII中所列出的非离子型表面活性剂以HLB值（亲水-亲油平衡值）的升序来排列。HLB是用于表面活性剂的亲水（“好水”）和疏水（“憎水”）基团的关系的经验表达式。表面活性剂的HLB值越高，其水溶性就越好。大多数是乳液（水包油型乳状液）或膏霜（油包水型乳状液）。最常用的乳状液类型即水包油型(o/w)通常需要较高HLB、优选为12-16的表面活性剂，而油包水型(w/o)乳状液需要低HLB、优选为7-11的表面活性剂。HLB值<10的表面活性剂是油溶性的，而那些>10的是可溶的。

如表XII所示，司盘20非常适于油包水型外用制剂，而聚山梨醇酯80最适合用于将芹菜素增溶于水包油型外用制剂中。

表XII通过高温处理方法的在非离子型表面活性剂中的芹菜素溶解度总汇

备注：*不是表面活性剂

实施例5.经热处理法处理的PS80和PEG400中的活性剂的溶解度

进行了一项研究，考察通过所披露的热处理法来实现溶解在PS80和PEG400中的活性剂的潜在水溶性的提高。

表XIII简要汇总了采用所公开的热处理方法来形成可以致使几种相对不溶性的类黄酮的水溶性提高的浓缩物的4种活性剂的溶解度结果。

表XIII-利用热处理法进行活性剂/表面活性剂试验汇总

备注：^（1）通过加入晶体没有出现沉淀析出可以确定溶液没有过饱和。

本研究的结果表明，热处理法对于提高溶解度、溶出率以及随后提高难溶性药物的生物利用度是有用的。

实施例6.通过高温处理法的鲸蜡硬脂醇聚醚-20中的溶解度

采用热处理法对鲸蜡硬脂醇聚醚-20（一种非离子型表面活性剂）、类黄酮、芹菜素、木犀草素和槲皮素进行溶解度试验，考察在水溶液中的溶解度提高的可能性。

鲸蜡硬脂醇聚醚-20（CAS＃68439-49-6）从位于美国华盛顿州Renton的Making Cosmetics公司获得。鲸蜡硬脂醇聚醚-20是一种较高度饱和的脂肪族醇（鲸蜡/硬脂醇）的聚氧乙烯醚。鲸蜡硬脂醇聚醚-20在室温下是固体，无味，在40℃下熔化。鲸蜡硬脂醇聚醚-20可以形成水包油型乳状液，并具有范围为15-17的HLB值。

对每一种类黄酮进行溶解度试验，其过程如下：

1．称取6.0克固体白色鲸蜡硬脂醇聚醚-20粒料放入50毫升派热克斯耐热玻璃容器中。

2．将鲸蜡硬脂醇聚醚-20粒料加热到略微高于约100℃的温度。（粒料的熔点约为40℃）

3．称取0.06克的类黄酮。

4．加入类黄酮，然后加入到熔化的鲸蜡硬脂醇聚醚-20中。

5．将混合物缓慢加热到超过200℃的温度，以完全溶解类黄酮/鲸蜡硬脂醇聚醚-20混合物。

6．将增溶后的混合物冷却至<～80℃，并同时仍然在液体状态下加入水和醇溶剂，观察溶解度。此外，通过加入晶体并观察是否出现沉淀来考察是否过饱和。

表XIV汇总了通过热处理提高溶解度的观测的实验观察。形成溶液的难易程度呈现以下顺序：

槲皮素>木犀草素>芹菜素

进行试验的3种类黄酮要求温度>200℃，以在鲸蜡硬脂醇聚醚20中完全溶解达到1%（重量/重量）。所有类黄酮浓缩溶液均完全溶于乙醇。此外，当每种类黄酮/鲸蜡硬脂醇聚醚-20溶液都与等体积的水混合时，所有的类黄酮溶液均完全溶解。通过热处理过程可以获得在鲸蜡硬脂醇聚醚20中的3种相对水不溶性类黄酮的水溶性显著增加的浓缩物。

表XIV-类黄酮/鲸蜡硬脂醇聚醚20溶解度结果总汇

实施例7.处于聚山梨醇酯80中的水不溶性平面环状有机化合物－具有或没有经热处理过程的浓缩物形成的水溶性比较

甲芬那酸、木犀草素和芹菜素是水不溶性平面芳族化合物，它们在高温下溶解于聚山梨醇酯80，以形成稳定的可溶性浓缩物，其在冷却至环境温度时产生非过饱和的且远远超出预期的饱和浓度的可溶性浓缩物。通过在室温下加入晶体到该溶液中进行试验来评价过饱和度。将水加入这些浓缩物中，并注意其水溶液特性。为便于比较，在加热到接近沸点前分别将浓缩物中的相同量的组分加入到等量的水中。在冷却至室温后，对聚山梨醇酯80浓缩物和非浓缩物这二种方法的目测观察结果进行比较。

当将用于制备浓缩物的相同量的甲芬那酸、木犀草素和芹菜素以及聚山梨醇酯80加入到17毫升的水中并加热至接近沸点的温度时，形成了不透明的溶液。当将溶液冷却至环境温度时，大多数的甲芬那酸、木犀草素和芹菜素均从水溶液中沉淀析出。

有关将聚山梨醇酯80与相对水不溶性的环状有机化合物混合以提高其在水溶液中的溶解度的顺序和方式的数据表明，该化合物应在溶解于水中之前首先被加热，并在聚山梨醇酯80中增溶，以形成浓缩物。

表XV-聚山梨醇酯80试验结果

实施例8.处于壬苯醇醚-9中的相对水不溶性平面环状有机化合物－具有或没有经过热处理过程的壬苯醇醚-9浓缩物形成的水溶性比较

用壬苯醇醚-9（一种在化妆品和清洁产品中普遍使用的非离子型表面活性剂）进行溶解度试验，研究作为除芹菜素之外的其他相对水不溶性平面芳族化合物如甲芬那酸（活性剂）、木犀草素（类黄酮）等的增溶剂。甲芬那酸、木犀草素、芹菜素在高温下溶解于壬苯醇醚-9中，形成稳定的可溶性浓缩物，其冷却至环境温度时产生非过饱和的且超出了预期的饱和浓度的可溶性浓缩物。向这些浓缩物中加入水，注意其水溶液特性。为便于比较，在加热到接近沸点前，将浓缩物中相同量的组分分别加入到相同体积的水中。在冷却至室温后，对浓缩物和非浓缩物这二种方法的目测观察结果进行比较。

表XVI汇总了制得的壬苯醇醚-9浓缩物、增溶所需要的温度，以及有关水性浓缩物溶液的透明度的观测结果。

表XVI-壬苯醇醚-9试验结果

当将相同量的用于制备浓缩物的甲芬那酸、木犀草素、芹菜素和壬苯醇醚-9中加入到17毫升水中并加热至接近沸点的温度时，形成了不透明的溶液。当该溶液冷却至环境温度时，大多数的甲芬那酸、木犀草素和芹菜素会从水溶液中沉淀析出。

有关将壬苯醇醚-9与相对水不溶性的环状有机化合物混合来提高其在水溶液中的溶解度的顺序和方式的数据表明，该化合物应在溶解在水中之前首先被加热，并在壬苯醇醚-9中增溶，以形成浓缩物。

实施例9.胆固醇的溶解度试验

由于环中的每个扩展环单位都由一个碳原子与两个从该环中扩展出去的氢原子组成，因此胆固醇的环由饱和烃环构成。类黄酮主要由环状平面不饱和芳香环构成，而胆固醇包含环状平面饱和环。值得注意的是，大多数类固醇都具有胆固醇的环结构。

采用非离子型表面活性剂PS80和壬苯醇醚-9和溶剂PEG400，通过经热处理过程的浓缩物形成的方法和无浓缩物的方法进行胆固醇的水溶性试验。

可用于该试验的材料包括：

·超精制级的PS80和PEG400来自于美国新泽西州爱迪生的Croda公司。

·壬苯醇醚-9来自于美国新泽西州新不伦瑞克的Spectrum Chemical公司。

·胆固醇来自于美国密苏里州圣路易斯的Sigma-Aldrich公司，纯度>99%。

所制备的浓缩物中的胆固醇的特性和浓度汇总于表XVII。

表XVII胆固醇试验结果

通过首先形成溶剂的浓缩物进行胆固醇在PS80、壬苯醇醚-9和PEG400中的溶解度试验包括以下步骤：

·将30毫克的胆固醇加入到被单独装在50毫升烧杯中的2.97克PS80、壬苯醇醚-9和PEG400中

·分别将PS80、壬苯醇醚-9和PEG 400组合物的混合物加热到约120℃而和80℃。

·进行通过将晶体加入到所述溶液中测定是否产生沉淀的方式来评价室温下的过饱和度的试验

·在将17毫升的水加入到每一种浓缩物再冷却到室温后50小时以上，目测观察PS80、壬苯醇醚-9和PEG-400中的胆固醇水溶液的透明度。

胆固醇的PS80和壬苯醇醚-9水溶液在溶液被冷却到环境温度后仍保持清澈超过50小时。然而，当向胆固醇/PEG400浓缩物中加入17毫升水时，即产生混浊的不透明溶液。应该指出的是，在加入少量水后得到透明溶液。

为便于比较，在加热到接近沸点前，将存在于胆固醇浓缩物中的相同量的组分分别加入到相同体积的水中。

水溶液试验包括以下步骤：

·采用单独的50毫升烧杯，将30mg胆固醇和17毫升水加入到分别装在50毫升烧杯中的2.97克PS80、壬苯醇醚-9和PEG400中。

·搅拌混合的同时将每种溶液都加热至约100℃。

·在该溶液冷却到环境温度后，目测观察每种含胆固醇的溶液的透明度。

PS80、壬苯醇醚-9和PEG 400胆固醇溶液产生不透明的浑浊溶液。

该实施例表明，该化合物应在加入水之前被加热，并溶解于诸如PS80和壬苯醇醚-9等的表面活性剂中，以形成浓缩物。

实施例10-处于丙二醇和乙二醇中的芹菜素的溶解度研究

已知芹菜素在25℃下只微溶于所试验的亲水性和亲脂性表面活性剂中（0.15-0.68毫克/毫升）。（Li等人,Journal of Pharmaceutical Sciences,Vol.86,No.6,June1997）。由于本发明所公开的表面活性剂的热处理法导致大幅度提高的水相和亲脂相的溶解性改善，因此决定进行实验以确定处于用作制造上文所评价的一些表面活性剂的前驱体的表面活性剂溶剂的聚丙二醇（PG）和乙二醇（EG）中芹菜素的溶解度性能/特性。对在PG和EG中增溶后的芹菜素所产生的结果进行观测。

丙二醇（PG）是一种略有甜味、有吸湿性并易与水混合的无色、几乎无臭、透明的粘性液体。PG是许多药物，包括口服、注射和制剂中的溶剂。在很多应用中其用作保湿剂，在医药、化妆品、食品、牙膏、洗发水、漱口水、头发护理和烟草制品中用作湿润剂。其沸点为188℃，其分子量为76克/摩尔。丙二醇是构成聚丙二醇表面活性剂（PPGS）的基本亚单位。

丙二醇的结构式为：

乙二醇是一种具有甜味且气味温和的无色、油状液体。其分子量为62，沸点197℃。乙二醇是构成聚乙二醇表面活性剂（聚乙二醇）的基本亚单位。

乙二醇的结构式为：

对PG＆EG进行如下溶解度试验：

·在单独的18ml小瓶中，将200毫克的芹菜素加入到4.80克PG以及EG中。加热两个小瓶，PG的小瓶约到175℃，而EG小瓶至约到190℃。芹菜素完全溶解于两个小瓶中，形成40毫克/毫升的溶液。

·在冷却至室温后，PG和EG溶液均观察到明显的芹菜素沉淀析出。由此证明，这些溶液是过饱和的。

·然后将芹菜素/PG和芹菜素/EG混合物以3600rpm的速度离心处理20分钟；产生的淡黄色透明液体和已从两种溶液中析出的大量的芹菜素沉淀。

此外，在将几滴水加入到饱和的增溶后的芹菜素/ PG和EG溶液中之后，大量增溶后的芹菜素成分从两种溶液中沉淀析出，从而限制了它们在随后的水合制剂开发中的有用性。

实施例11-类黄酮表面活性剂和PEG400浓缩物在油性溶剂中的溶解度

这项研究的主要目的是评价平面环状结构的有机化合物在油剂中的溶解浓度的提高。一般情况下，非离子型表面活性剂的特征在于在水中不会有一点离子化的亲水性头基。其例子包括聚氧乙烯烷基酚、脂肪醇聚氧乙烯醚、烷基酚乙氧基化物和链烷醇酰胺。非离子型表面活性剂往往是良好的增溶剂且相对无毒。它们通常很容易与其他类型的表面活性剂（即，用作助表面活性剂）混合，因此在化妆品、药品和环境应用方面具有广泛的用途。与阴离子表面活性剂不同的是，非离子型表面活性剂的性能对溶液中的盐的存在较为不敏感。

亲水-亲油平衡（HLB）值表示分子的亲水性和疏水性部分的相对强度，可用于表征表面活性剂对水相和有机相的相对亲和力。高的HLB值通常表示表面活性剂良好的水溶性，而低HLB值表示较低的水溶性和对有机相相对较高的亲和力。具有低HLB值的表面活性剂可以明确划分到有机相，并形成具有内部亲水性和外部亲油性的反胶束。

聚甘油-4油酸酯（CAS＃68605-19-6）是HLB值为5的非离子型表面活性剂，表明适用于提高用于油基外用制剂的平面环状结构的有机化合物的溶解度，而实施例4中所述的HLB值为15的聚山梨醇酯80应该是最合适用于增溶在水包油型的外用制剂中的芹菜素。

从Making Cosmetics公司（华盛顿州Renton）获得的聚甘油-4油酸酯是一种基于蔬菜油酸的由蒸馏得到的甘油酯，其不含PEG。其可以分散于水中，非常适合于油包水型乳状液。琉璃苣油是从Sigma-Aldrich公司（圣路易斯，美国密苏里州）获得的，而矿物油、USP、芥花籽油和荷荷巴油是从位于美国新泽西州新不伦瑞克的Spectrum Chemical公司获得的。

表XVIII、XIX和XX汇总了当由木犀草素在聚甘油-4油酸酯中、芹菜素在聚山梨醇酯80和PEG-400中形成的浓缩物被加入到各种油类时的目测观察结果。应该指出，木犀草素和芹菜素是不溶于试验油的，通过将木犀草素晶体加入到木犀草素/聚甘油-4油酸酯浓缩物中没有沉淀析出，确定了处于聚甘油-4油酸酯中的10毫克/毫升木犀草素浓缩物在室温下不是过饱和的。

较低HLB值的乳化剂可以更好用于在油包水型剂中，因为他们更具亲脂性；而较高HLB值的乳化剂更具亲水性。

表XVIII-木犀草素/聚甘油-4油酸酯的溶解度观测

第XIX-芹菜素/聚山梨醇酯80浓缩物在油中的溶解度观测

表XX-芹菜素/PEG-400浓缩物在油中的溶解度观测

实施例12.辣椒素溶解性测试

采用非离子型表面活性剂PS80和溶剂PEG400通过经热处理过程的浓缩物形成进行辣椒素（一种止痛药）水溶性试验，并与无浓缩物的方法进行比较。

用于该试验的材料包括：

·超级精制级的PS80和PEG 400从美国新泽西州爱迪生的Croda公司获得。

·辣椒素从位于美国密苏里州圣路易斯的Sigma-Aldrich公司获得，产品号＃360376。

所制备的浓缩物中辣椒素的特性和浓度汇总于表XXI。

表XXI-辣椒素的特性

通过首先采用热处理法形成浓缩物来对PS80和PEG400中的辣椒素的溶解度进行试验：

·将30毫克的辣椒素加入到独立装在50毫升的烧杯中的2.97克的PS80和PEG 400

·在搅拌的同时将这些混合物加热到约50℃下。

·将一些辣椒素晶体加入到冷却的液体中并没有产生沉淀；从而表明这些液体不过饱和。

·在冷却至室温超过50小时后向每种辣椒素浓缩物中加入17ml的水，目测观察PS80和聚乙二醇400中的辣椒素水溶液的透明度。

在加入17毫升H2O后产生PS80浓缩物的透明溶液，将该溶液冷却至室温后可以如此保持超过50小时。然而，只将极少量的水（约2～4ml）加入到辣椒素/PEG400浓缩物中将获得透明的溶液，而在加入17毫升H₂O后成为不透明的和浑浊的。

为了比较的目的，将存在于辣椒素浓缩物中的相同量成分分别加入到相同体积的水中，加热到接近沸点。

水溶液试验包括以下步骤：

·采用单独的50毫升烧杯中，将30毫克的辣椒素和17毫升的水加入到分别装在50毫升烧杯中的2.97克的PS80和PEG400中。

·在搅拌的同时，将每种溶液加热至约100℃。

·在冷却至室温超过50小时后向每种辣椒素浓缩物中加入17ml的水，目测观察PS80和PEG400中的辣椒素水溶液的透明度。

PS80和PEG400辣椒素溶液产生不透明的混浊溶液。

该实施例表明，该化合物应在加到水之前被加热，并在诸如PS80等的表面活性剂中增溶形成浓缩物。

实施例13.辅酶Q10、聚山梨醇酯80和荷荷巴油的溶解性试验

由于实验观察到，形成浓缩物（由非离子型表面活性剂如PS80和各种含有平面芳香环结构的有机化合物形成）的热处理过程能有效地提高水溶性，对具有良好油溶性的平面芳香环进行结构化的化合物CoQ10连同PS80和如霍霍巴油等的油剂进行溶解度试验，以提供额外的数据。

辅酶Q10是一种油溶性的维生素类，主要存在于大多数细胞的线粒体中。它是电子传递链的一个组成部分，并参与细胞有氧呼吸，产生ATP形式的能量。人体的能量的百分之九十五是通过这种方式产生的。

霍霍巴油是一种蜡酯的混合物，具有36至46个碳原子的长度。每个分子中包含通过酯键连接的脂肪酸和脂肪醇。98%脂肪酸分子在第9个碳-碳键位点处是不饱和的。

荷荷巴油、辅酶Q10和聚山梨醇酯80均从美国华盛顿州Renton的MakingCosmetics公司获得。

首先试验（试验1）验证荷荷巴油和水相的不混溶性。因此，

·将6毫升荷荷巴油和20ml水在一个30毫升烧杯中充分混合。

·在2个多小时后，观察到浅黄色的荷荷巴油相和水相分离。水相是透明的，也是无色的，表明浅黄色霍霍巴油是不溶于水相。

进行下一个试验（试验2），如下：

·将0.3克橙色辅酶Q10粉末加入到1克PS80中，并加热至约50℃。CoQ10溶解在PS80中，形成红色/橙色溶液。CoQ10保持增溶状态，并在混合物冷却至室温时仍保持增溶状态。

·通过将晶体加入到该溶液中以确定是否发生沉淀来进行室温下过饱和度的评价试验。据观察，辅酶Q10/PS80浓缩物没有过饱和。

·将6毫升荷荷巴油与20毫升水混合，并将该混合物充分搅拌，同时加热到约50℃。

·然后在50℃下将油包水混合物加入到辅酶Q10/PS80浓缩物中，并充分搅拌约1分钟。

·在2小时多一点之后观察到，含辅酶Q10的水相可以观察到透明的红色/橙色水相。荷荷巴油相与水相分离，如果有的话会出现很少一点溶解的辅酶Q10，可以观察到呈浅黄色，油相与显示增溶后的辅酶Q10PS8O浓缩物的水相的红色/橙色的颜色不同。

最后用CoQ10、荷荷巴油和水进行试验（试验3），如下：

·在室温下将0.3克的辅酶Q10粉末溶解在6毫升荷荷巴油中。向此混合物中加入1克的PS80，然后将得到的混合物加热到约50℃。

·将20ml预热至约50℃的水加入到该混合物中。将掺和的混合物充分搅拌1分钟。

·约2小时后用肉眼观察，大部分的CoQ10都从水相中分离出来，大多集中在红色/橙色荷荷巴油相中。此外，水相部分是局部不透明的，完全不同于试验2的烧杯中的含有大量红/橙色的增溶辅酶Q10的透明水相。

从这些测试的结果中可以得出，应首先将难溶性辅酶Q10增溶于PS80中以形成浓缩物，以提高其在水溶液中的溶解度。

实施例14–采用芹菜素/表面活性剂浓缩物来制备芹菜素外用制剂

活性剂浓缩物可以用于制备与先前不采用制成活性剂浓缩物所能达到的浓度相比在所制备的制剂中具有较高浓度的溶解后的活性剂的组合物。含有溶解状态的芹菜素的多种原溶液、凝胶、软膏、以及乳状液外用制剂均采用芹菜/聚山梨醇酯80浓缩物和芹菜素/PEG300浓缩物来制备。这些制剂均汇总于表XXII和XXIII。

表XXII-原溶液、凝胶和软膏，采用芹菜/表面活性剂浓缩物制备的制剂

表XXII–采用芹菜/表面活性剂的浓缩物制备的乳状液制剂

实施例15-使用人体皮肤对来自制剂的芹菜素进行体外透皮吸收

总体上，体外皮肤渗透实验数据表明，通过感官/化妆品性能的对比，DPSI原液展示出来自于各种制剂的输送特性。

这项研究的目的是根据施用于来自择期手术的离体人皮肤来体外表征来自外用制剂的芹菜素的透皮吸收。

这项研究采用改编自FDA和AAPS关于体外透皮研究理论与实践研讨会报告：Relevance to Bioavailability and Bioequivalence (Skelly等,1987)。来自单独志愿者的人体组织的制剂剂量为5毫克/平方厘米。在本研究中的所有制剂的组合物评估汇总于表XXIV和XXV。

将为5毫克/厘米平方的临床相关剂量施用于来自于择期手术后单个志愿者的离体人体腹部组织。该组织的厚度范围为0.034英寸（0.870毫米），平均±标准偏差为，厚度±0.005英寸（±0.131毫米），变异系数为15%。

采用对固定在Bronaugh流通扩散细胞中的来自单独志愿者的人体腹部组织来进行皮肤吸收的评价。通过使用循环水浴装置维持细胞在恒温32℃。这类细胞的标称扩散面积为0.64cm²。新受体相（磷酸盐缓冲液，pH=7.4，含有0.1%叠氮化钠和4%的牛血清白蛋白）在组织下连续不断地以额定0.25ml/hr的流量汲取，每隔6个小时收集一次。新受体相样品存放在预先称量重量的闪烁瓶子中；在研究结束时进行权重。接下来的24小时持续曝光，滞留在组织表面上的制剂用CuDerm D-Squame表皮贴剥离剔除。在后续的通过LC-MS/MS测定芹菜素含量和最终样品处理之前，标记和冷冻表皮、真皮以及受体相样品。

一般来说，芹菜素渗透到受体舱是很低的。然而，当芹菜素以处于纯DMSO中的方式施用，则可以实现相对高的渗透进入受体相。在相对高的表皮值与所评价的大部分组合物有关时，可观察到中度的皮肤沉积。总体而言，DMSO基溶液，3530-14A，-15B和-31（纯DMSO对照）可以产生最高的组织渗透和沉积。一种无水溶液（3530-14B，EtOH/PG/IPM/ML/油酸）也提供了相对有利的传输特性。虽然制剂3530-14B与DMSO基的溶液相比产生较低的组织渗透性和沉积，但是它可以提供一个可行的替代。正如预期的那样，与PEG软膏相比，基于PEG的溶液可以产生更大的输送。

对一些半固态的原剂进行了评估，包括凝胶（3530-22）、水凝胶基纳米悬浮液（3530-24）、两种乳状液（3530-29[乳化蜡基]和3530-30[Pemulen基]）和PEG软膏（3530-18B）。值得注意的是，与类似的溶液对照相比，存在于含水凝胶中的透明质酸钠聚合物没有明显损害受体渗透和真皮沉积。

就芹菜素的输送率（%施用剂量）而言，与增溶后的芹菜素/透明质酸钠基凝胶（3530-22）相比，Pemulen乳液可以提供稍微更有利的输送特性。当考虑输送量时，水凝胶（3530-22）可以产生Pemulen乳状液更高的组织沉积。然而，当评价输送率和输送量时，Pemulen产生了在所试验的半固体组合物中的最高的受体水平。

图3是以所施用的芹菜素剂量百分比计的几种外用制剂的表皮、真皮、受体流体和芹菜素总渗透率的示意图。

表XXIV-溶液和凝胶组成

表XXV乳状液组成

实施例16-芹菜素制剂的体外刺激性检测

这项研究的目的是使用表皮MTT ET₅₀检验法比较5种含有制剂的芹菜素急性真皮刺激潜力。供试品减少组织活力50%所需要的时间，即ET50，与传统的家兔体内皮肤刺激试验密切相关。

这项研究在MB研究实验室进行（PA Spinnerstown进行表皮MTT检测，表皮组织用API原制剂孵育1、4和24小时（每个供试品每个时间点两个组织），1%的曲通X-10用作阳性对照，孵育后，冲洗组织，以除去供试品，并用MTT染料[3-（4，5-二甲基吡啶-2-基）-2,5-二苯基四氮唑溴化物、噻唑蓝]测定细胞毒性。只有活细胞才能对MTT进行酶法还原生成紫色的甲臜产物，将其从组织中提取之后定量测量。死细胞不减少MTT，从而，该法允许确定当与未经处理的对照组织相比时受试品暴露的对组织的存活能力的影响。

三个孵育时间点的组织的存活能力数据被用来计算每种制剂组织存活能力降低50%所需的时间（有效时间，ET₅₀）。ET₅₀与传统的Draize兔皮肤刺激试验真皮分数相同，并用来预测刺激性种类（表XXVI）。

表XXVI-表皮MTT ET₅₀分析=体内德赛莱(Draize)刺激性相关

ET50（h）	预测的体内刺激性
		＜0.5	严重，可能有害
0.5-4	中度
		4-12	中度到轻度
12-24	极轻度
		＞24	无刺激性

表XXVII列出基于未经核实的ET50值及其预测的刺激性分类的供试品的等级。

这些制剂为从非刺激性、轻度至中度刺激性。

表XXVII–制剂刺激性分类

所述制剂可以根据ET50值排序，如下所示：

[非刺激性]（J）=（C）<F=（H）<（B）[轻度至中度]

阳性对照1%的TritonX-100的ET50，为5.9小时，并且在制造商的测定历史范围内，经确认该测试系统对刺激物是敏感的。

综上所述，在体内刺激性测定的5个制剂从无刺激性、轻度至中度刺激性不等，被认为具有低度急性皮肤刺激潜力。

应当了解，可以对上述的实施方式进行广泛的改变和修改。因而前文说明书只是解释说明但并不是限制本发明，并且其权利要求包括本发明所定义的所有的等同物。

上述所引用的所有文件和参考文献在此通过引用而全部结合于本申请中。

虽然已经参考了示例性实施方式来描述了本发明，但是本领域的技术人员应了解，可以所作出的各种变化，并采用等同物来替代其要素而不会脱离本发明的范围。此外，可作出许多修改来使特定的情形或材料适应于本发明的教示而不脱离本发明的实质范围。因此，本发明不限制于所公开的预计是实现本发明的最佳模式的具体实施方式，但本发明将包括所有落入所附权利要求范围内的实施方式。

Claims (56)

1.一种包括含有平面环状结构的有机化合物和热稳定性增溶化合物的浓缩物的组合物，

其中，所述浓缩物中的所述平面环状结构的有机化合物的浓度大于所述热稳定性增溶化合物中的所述平面环状结构的有机化合物的饱和浓度，并且

所述浓缩物不是过饱和的。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物是多酚。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物是芹菜素。

5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述热稳定性增溶化合物是表面活性剂。

6.根据权利要求5所述所述的组合物，其特征在于，所述表面活性剂是非离子型表面活性剂。

7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述热稳定性增溶化合物是聚山梨醇酯。

8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物是芹菜素，所述热稳定性增溶化合物是聚山梨醇酯80。

9.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括载体。

10.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体是水基载体。

11.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体包括二甲亚砜和水。

12.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体包括二甲亚砜、羟丙基纤维素和水。

13.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体包括乙醇、丙二醇和水。

14.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体包括乙醇、丙二醇、水，以及选自由羟乙基纤维素、透明质酸钠和聚羧乙烯构成的组中的胶凝剂。

15.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体包括油相、表面活性剂和水。

16.根据权利要求15所述的组合物，其特征在于，所述油相包括乙氧基二甘醇、乳酸肉豆蔻酯、环聚二甲基硅氧烷或油醇。

17.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体为油基载体。

18.根据权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述载体包括短链醇、乙氧基二甘醇、丙二醇、己二醇、丁二醇、二丙二醇、丙三醇、水、盐溶液、DMSO、肉豆蔻酸异丙酯、矿物油、表面活性剂或二甲基异山梨醇酯。

19.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，还包括透明质酸。

20.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物以药物的形式存在。

21.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物以营养品、药用化妆品、食品或医疗食品的形式存在。

22.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物以饮料的形式存在。

23.一种组合物，包括：

i)平面环状结构的有机化合物，和

ii)热稳定性增溶化合物，

其中，所述组合物是在所述热稳定性增溶化合物的存在下通过将所述平面环状结构的有机化合物加热到使得所述平面环状结构的有机化合物溶解于所述热稳定性增溶化合物中的温度下来制成。

24.根据权利要求23所述的组合物，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物和所述热稳定性增溶化合物被加热到大于100℃的温度。

25.一种透皮贴剂，其包括具有两个面的基底，其中第一面具有设置在其上的根据权利要求1所述的组合物和黏合剂，第二面包括不能透过所述组合物和所述黏合剂的材料。

26.根据权利要求25所述所述的透皮贴剂，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

27.一种用于施用平面环状结构的有机化合物的贴剂，包括具有两个面的基底，其中第一面具有包含于通过半透膜与黏合剂分开的贮液器中的根据权利要求1所述的组合物。

28.一种制备增溶的平面环状结构的有机化合物的组合物的方法，包括：

i）将所述平面环状结构的有机化合物与热稳定性增溶化合物混合，以形成混合物，

ⅱ）将从步骤i）得到的所述混合物加热到使得所述平面环状结构的有机化合物增溶以形成浓缩物的温度，以及

ⅲ）冷却从步骤ii）得到的所述浓缩物。

29.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，步骤i）和步骤ii）同时进行。

30.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，所述的热稳定性增溶化合物是表面活性剂。

31.根据权利要求30所述的方法，其特征在于，所述表面活性剂是非离子型表面活性剂。

32.根据权利要求31所述的组合物，其特征在于，所述非离子型表面活性剂为聚山梨醇酯。

33.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，所述混合物被加热到高于80℃。

34.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，所述混合物被加热到高于100℃。

35.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，还包括在步骤ii）或步骤iii）之后加入载体。

36.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

37.根据权利要求36所述的方法，其特征在于，所述热稳定性增溶化合物为聚山梨醇酯，所述类黄酮为芹菜素。

38.根据权利要求28所述的方法，其特征在于，还包括，在步骤ii）或步骤iii）之后将短链醇加入到所述混合物中，以降低所述混合物的粘度。

39.一种提高难溶性平面环状结构的有机化合物的组合物的溶解度的方法，包括：

i）将所述平面环状结构的有机化合物与热稳定性增溶化合物混合，以形成混合物，以及

ⅱ）将从步骤i）得到的所述混合物加热到使得平面环状结构的有机化合物溶解以形成浓缩物的温度。

40.根据权利要求39所述的方法，其特征在于，所述平面环状结构的有机化合物难溶于水。

41.一种降低或防止日光照射影响的方法，包括将含有根据权利要求3所述的组合物的治疗有效剂量的防晒制剂用于个体的皮肤。

42.一种治疗日光照射的影响的方法，包括将含有根据权利要求3所述的组合物的治疗有效剂量的制剂用于个体的日光灼伤的皮肤。

43.一种治疗癌症的方法，包括将含有根据权利要求3所述的组合物的治疗有效剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物。

44.一种减少哺乳动物罹患癌症的可能性的方法，包括将含有根据权利要求3所述的组合物的预防剂量的制剂施用于所述哺乳动物。

45.一种治疗痤疮、脱发、皮肤致敏和刺激，皮肤干燥（干燥症、鱼鳞癣）、真菌感染、红斑痤疮或接触性皮肤病的方法，包括将含有根据权利要求3所述的组合物的治疗有效剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物。

46.一种治疗自身免疫性疾病的方法，包括将含有根据权利要求3所述的组合物的治疗有效剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物。

47.根据权利要求46所述的方法，其特征在于，所述自身免疫性疾病选自由牛皮癣、狼疮和关节炎构成的组。

48.一种治疗与肿瘤坏死因子相关的疾病的方法，包括将含有根据权利要求1所述的组合物的治疗有效剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物，其中所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

49.一种降低罹患与肿瘤坏死因子相关的疾病的可能性的方法，包括将含有根据权利要求1所述的组合物的预防剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物，其中所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

50.一种治疗IL-Ιβ相关疾病的方法，包括将含有根据权利要求1所述的组合物的治疗有效剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物，其中所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

51.一种降低罹患IL-Ιβ相关疾病的可能性的方法，包括将含有根据权利要求1所述的组合物的预防剂量的制剂施用于需要这种治疗的哺乳动物，其中所述平面环状结构的有机化合物是类黄酮。

52.一种用于形成适于输送活性剂的组合物的药剂盒，所述药剂盒包括：

第一等分部分的平面环状结构的有机活性剂和热稳定性增溶化合物的浓缩物，以及

第二等分部分的载体，

其中，在混合时，所述第一和第二等分部分形成用于输送包含于其中的所述活性剂的组合物。

53.根据权利要求52所述的药剂盒，其特征在于，所述活性剂是类黄酮，而所述热增溶化合物是表面活性剂。

54.根据权利要求52所述的药剂盒，其特征在于，所述的第二等分部分包括皮肤科、口服、注射或气雾载体。

55.根据权利要求52所述的药剂盒，其特征在于，所述活性剂选自由抗生素、麻醉剂、抗肿瘤剂、抗炎剂和抗寄生物药剂组成的组。

56.根据权利要求52所述的药剂盒，其特征在于，还包括具有分别含第一和第二等分部分的第一和第二注射器筒的双筒注射器。

Images