CN103323519B - 一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，其具体步骤为：（1）使用注射器或蠕动泵进样，使被测样品连续进入质谱离子源内；（2）选择一个子离子和适合的裂解能量；（3）设定时间多级质谱中母离子的初始质量数、终止质量数和步进距离，从初始质量数开始，每次步进一定的质量数作为步进距离，到终止数截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下能够产生步骤（2）中所述子离子的母离子的信息；（4）使用液质联用对（3）中得到的母离子进行验证。本发明在时间多级质谱上实现了母离子扫描，从而解决了现有技术中由于时间多级质谱仅有一个检测器而难以实现母离子扫描的问题，并有效排除假阳性结果的产生。

Description

一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法

技术领域

本发明涉及一种利用时间多级质谱实现母离子扫描分析的方法，属于分析检测的技术领域。

背景技术

质谱是对未知化合物分子进行定性和解析的重要手段。其中，母离子扫描技术是通过特定的质谱仪程序，寻找含有相同子离子的母离子化合物的质谱方法，与其他以目标母离子的所有子离子为研究对象的研究方法不同，母离子扫描技术侧重于寻找具有相同子离子的所有母离子信息，从而能有效检测出具有相同结构特征的一系列化合物，因此，该方法在新药研发、药物滥用检测以及体内代谢物分析等方面都有重要的应用价值。

目前已有文献报道或专利发布的母离子扫描方法，是在空间多级质谱上实现的，空间多级质谱是常用的定量质谱仪，也是现有报道中唯一能够实现母离子扫描的质谱仪。在众多种类的空间多级质谱仪中，最常用的是三重四级杆质谱（Triple Quadrupole Mass Spectrometer,TQ-MS）和三重四极杆-串联线性离子阱型串联质谱仪（Triple quadrupole-liner iontrap massspectrometer,Q-Trap-MS）。以三重四级杆质谱为例说明空间多级质谱的分析过程具体为：样品由液相色谱分离和进样；样品进入质谱后，第一个四级杆传送所有进入其中的母离子，并记录其质荷比；第二个四级杆按照规定能量进行裂解反应；第三个四级杆对裂解碎片，即子离子进行记录，如果存在特定质荷比的子离子，则在液质联用图中记录产生这个子离子的母离子信息。由于上述三重四级杆质谱有三个四级杆，在第二个四级杆中做裂解，在第一和第三个四级杆中同时进行母离子和子离子的采集，同时分析对比两个四级杆的数据，得到特定子离子的母离子信息，进而实现母离子扫描。

时间多级质谱（如离子阱质谱仪）只具有一个空间，通常用于对已知化合物的定性和定量分析以及未知化合物的结构解析，其分析的具体步骤为：第一阶段为捕获，对进入空间多级质谱质量分析器中的离子进行捕获，将其束缚在质量分析器中；第二阶段为隔离，对于待分析的样品中的离子，选定某一特定质量范围的离子将其隔离，被隔离的离子成为母离子；第三阶段为碰撞诱导解离，母离子与中性的气体分子例如氦气、氩气、氮气等发生碰撞，碰撞产生的能量沉积到母离子上，使母离子自身内能增加，最终母离子发生碎裂，得到碎片离子；第四阶段，对碎片离子进行质量分析，得到碎片离子的质谱峰，分析完成。然而，由于时间多级质谱，只具有一个空间，其分析过程中的离子捕获、裂解和检测都只能分不同时段、在同一个空间内完成，不能实现在不同的空间对快速通过的化合物的母离子和子离子进行对比，从而难以实现母离子扫描功能。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是现有技术中时间多级质谱仪由于只具有一个空间，其分析过程中的离子捕获、裂解和检测只能分不同时段、在同一个空间内完成，从而难以实现母离子扫描技术，进而本发明提供一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法。

本发明所要解决的第二个技术问题在于提供一种结合液-质联用验证以避免假阳性结果的利用时间多级质谱进行母离子扫描的分析方法。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，其具体步骤为：

（1）进样并选择样品的目标子离子及对应的裂解能量；

（2）设定时间多级质谱中母离子的初始质量数、终止质量数和步进距离，从初始质量数开始，每次步进一定的质量数作为步进距离，到终止质量数截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下能够产生步骤（1）中所述目标子离子的母离子信息。

所述初始质量数与终止质量数之间的步进距离为0.5-2.0m/z。

所述时间多级质谱为线性离子阱质谱、空间离子阱质谱、轨道离子阱质谱。

所述步骤（1）使用注射器或蠕动泵连续进样。

所述步骤（2）之后，还包括利用液-质联用进行验证的步骤，具体为：将步骤（2）中得到的所述目标子离子的母离子信息输入液质联用数据相关扫描母离子列表中，进行液质联用分析，以验证所述目标子离子的母离子是否产生所述目标子离子的裂解碎片，并判断所述目标子离子的母离子是否存在同分异构体。

所述液质联用验证步骤采用高分辨质谱作为液-质联用检测器。

所述液-质联用验证步骤采用数据相关扫描技术，对所述目标子离子的母离子进行质谱裂解实验，并采集高分辨的子离子裂解数据，以排除假阳性结果。

本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：

（1）本发明所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，首先，将样品引入离子源并选择样品的目标子离子及对应的裂解能量；接着，设定时间多级质谱中母离子的初始质量数、终止质量数和步进距离，从初始质量数开始，每次步进一定的质量数作为步进距离，到终止质量数截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下能够产生步骤（1）中所述目标子离子的母离子的信息；从而通过时间多级质谱获得被测样品中具有同一目标子离子的所有母离子化合物信息，即在时间多级质谱上实现了母离子扫描，克服了现有技术中由于时间多级质谱如离子阱质谱仪仅有一个检测器，且分析过程中的离子捕获、裂解和检测只能分不同时段完成，从而不可能完成传统技术中在不同空间对快速通过的母离子和子离子进行对比，进而难以实现母离子扫描技术的问题；

（2）本发明所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，还包括液相色谱-高分辨质谱验证步骤，所述验证步骤采用数据相关扫描技术，对所述目标子离子的母离子进行质谱裂解实验，并采集高分辨的子离子裂解数据，以验证所述目标子离子的母离子是否产生所述目标子离子的裂解碎片从而排除假阳性结果，此外，所述验证步骤还用于判断所述目标子离子的母离子是否存在同分异构体；本发明所述液相色谱-高分辨质谱验证步骤中，通过采集精确质量数的子离子对分析结果进行验证，能够有效排除假阳性结果，从而有效避免了现有技术中使用液相色谱-三重四级杆质谱进行母离子扫描时，容易出现假阳性结果的弊端；

（3）本发明所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，所述步骤（1）中，选择一个子离子和适合的裂解能量后，使用注射器或蠕动泵进行连续进样，其原因在于：整个扫描过程需要持续一定时间，在扫描期间内，需要连续向质谱仪提供被测样品，才能满足检测需求；

（4）本发明所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，所述初始质量数与终止质量数之间的步进距离为0.5～2.0m/z，所述步进距离决定了分辨率，步进距离过大，母离子扫描的分辨率会降低，影响扫描结果的准确度；步进距离过小，虽然可以提高分辨率，但会导致扫描时间过长，样品消耗量也会相应增多；

（5）本发明所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，所述裂解能量需要根据分析需求，选择适合目标化合物的裂解能量，如在磺胺类化合物标准品进行分析时，所述归一化裂解能量为35%，所述归一化裂解能量的大小将会影响裂解碎片产生的数量和丰度，在最佳优化状态下得到最高的灵敏度和最好的分析结果。

附图说明

为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中，

图1为本发明所述利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的流程示意图；

图2为本发明实施例1中所述能够产生目标子离子的母离子峰图谱；

图3为图2中编号1-16母离子峰的质谱裂解图；

图4为图2中编号17母离子峰的质谱裂解图；

图5为本发明实施例1中采用液相色谱-高分辨质谱得到16种磺胺类化合物的提取离子流图；

图6为本发明实施例2中所述能够产生目标子离子的母离子峰；

图7A为本发明实施例2中采用液相色谱-高分辨质谱得到混合标准溶液中三种化合物的提取离子流图；

图7B为本发明实施例2中采用液相色谱-高分辨质谱得到市售减肥保健食品中三种化合物的提取离子流图；

图8A为本发明实施例2中采用液相色谱-高分辨质谱得到的标准品中三种化合物的质谱裂解图；

图8B为本发明实施例2中采用液相色谱-高分辨质谱得到的市售减肥保健食品中三种化合物的质谱裂解图；

图9为本发明实施例3中所述能够产生目标子离子的母离子峰；

图10为本发明实施例3中采用液相色谱-高分辨质谱得到市售化妆品中5种化合物的提取离子流图。

图11为本发明实施例3中采用液相色谱-高分辨质谱得到市售化妆品中5种化合物母离子峰的质谱裂解图；

具体实施方式

实施例1

本实施例采用线性离子阱质谱对磺胺类药物进行母离子扫描，具体步骤如下：

a.标准品的配制：

如表1所示的16种磺胺类化合物标准品均购自Dr.Ehrenstorfer公司，纯度均在98%以上；试验用水为Milli-Q超纯水，其他试剂均为色谱纯；16种磺胺标准品用50%甲醇水溶液配成100ng/mL的混合标准溶液。

b.质谱条件及参数设置：

质量分析器：LTQ线性离子阱质谱；离子化方式：ESI⁺；喷雾电压：4.5kV；管状透镜电压：115V；鞘气（氮气）流速：25arb；辅助气（氮气）流速：3.00arb；毛细管温度：350℃；母离子质量范围(m/z)：200-360，即初始质量数200，终止质量数360；母离子扫描步进距离(m/z)：0.5；裂解模式：CID；隔离宽度(m/z)：0.5；裂解能量为：35%；扫描频率：30msec；子离子质量数(m/z)：156.0。

表1.16种磺胺类化合物的化学信息

c.在离子阱质谱中实现磺胺类化合物的母离子扫描：

其具体步骤包括：

（1）通过研究磺胺类化合物的离子阱质谱裂解图，得到磺胺类化合物的质谱裂解规律图，并选择丰度较高的共有子离子m/z156.0作为目标子离子，能够获得所述目标子离子的归一化裂解能量为35%；

磺胺类化合物的质谱裂解规律图如下所示：

（2）使用500μL注射器吸取a中所述混合标准溶液以10μL/min的流速向离子阱质谱仪连续进样；

（3）设定所述线性离子阱质谱的步进距离为0.5m/z，从初始质量数m/z200.0开始，每次步进0.5m/z，到终止质量数m/z360.0截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下能够产生步骤（1）中所述m/z156.0目标子离子的母离子的信息，如图2所示为本实施例所有能够产生目标子离子的母离子峰图谱，并对所述母离子峰进行编号，其中编号1-16的母离子峰与表1中已知的16种磺胺类化合物标准品相对应，编号17的母离子峰需要进一步进行验证；

（4）采用液相色谱-高分辨质谱联用对母离子扫描结果进行验证

仪器及相关参数设置如下：

液质联用分析条件：Accelar液相色谱仪，色谱柱为Waters ACQUITYBEH shield RP18柱（2.1×100mm，1.7μm），柱温为35℃，流速0.25mL/min；梯度洗脱条件：A相（5mmol/L乙酸铵水溶液），B相（乙腈）；0.0～1.0min，80%～50%A；10.0～12.0min，50%A；12.0～13.0min，50%～80%A；13.0～15.0min，80%A；

质量分析器：Orbitrap；离子化方式：ESI+；喷雾电压：4.5kV；管状透镜电压：115V；鞘气（氮气）流速：25arb；辅助气（氮气）流速：3.00arb；毛细管温度：350℃；静电场轨道阱的高分辨扫描（分辨率R=30000）；扫描分2个事件：（a）全扫描，扫描范围为200.00-500.00m/z，分辨率为60000；（b）CID裂解，选择图2中得到的母离子，扫描范围为50.00-500.00m/z；实验前使用仪器规定的校正方法和标准校正物质对仪器进行质量轴校正。

所述验证步骤如下：将步骤（2）中得到的所述目标子离子的母离子信息输入液质联用数据相关扫描母离子列表中，对所述目标子离子的母离子进行质谱裂解实验，并采集高分辨的子离子裂解数据，如图3所示为编号1-16磺胺类化合物标准品的质谱裂解图，图4为编号17母离子峰的质谱裂解图。

结果讨论：根据磺胺类化合物的裂解规律，图2中编号1-16的化合物质谱裂解图中都有与目标子离子m/z156.01138的质量偏差在5ppm以内的裂解碎片（见图3），而编号17的化合物其质谱裂解图中虽有156.01414的裂解碎片（见图4），但该碎片与目标子离子m/z156.01138质量偏差为17.69ppm，远远超出高分辨质谱规定的5ppm的偏差范围，故可最终判定图2中编号17的化合物母离子峰为假阳性结果。

进一步地，如图5所示为编号1-16磺胺类化合物标准品的液质联用提取离子流图，结合上述已排除假阳性结果的编号1-16母离子峰，可以得出：图2中的13个母离子峰（除编号17母离子峰外）中包括3对同分异构体，而所述同分异构体可通过液相色谱进行有效分离，从而达到区分同分异构体的目的。

本实施例利用LTQ线性离子阱质谱对16种磺胺类化合物的混合标准溶液进行了母离子扫描，并记录下来所有产生m/z156.0目标子离子的母离子峰。实验通过母离子扫描得到了一组母离子信息，进一步通过液质联用排除了一个假阳性结果，有效的检出了样品溶液中的16种磺胺类化合物。

实施例2

本实施例采用线性离子阱质谱对市售某减肥保健食品中添加非法药物西布曲明及其结构类似药物进行母离子扫描，具体步骤如下：

a.样品描述及前处理：

将某市售减肥保健食品，胶囊；包装中标示的有效成分为：甲壳素、茶叶、决明子、荷叶素、山楂、麦冬、槟榔、青皮、维生素C；使用范围：单纯性肥胖、青春期肥胖、产后肥胖。

取胶囊内药物粉末0.1g，加入10mL50%甲醇水溶液，充分混匀；14000R，5min高速离心，取上清液10μL样品浓溶液，使用50%甲醇水溶液定容至10mL容量瓶，得到样品的工作溶液，供母离子扫描分析和液质联用验证使用。

试验用水为Milli-Q超纯水，其他试剂均为色谱纯。西布曲明、N-去甲基西布曲明和N-去二甲基西布曲明标准品购买自Dr.Ehrenstorfer公司，纯度均在98%以上。精确称取三种标准品，用50%甲醇水溶液配置成100ng/mL的混合标准溶液。

b.进行母离子扫描时质谱条件及参数设置：

质量分析器：LTQ线性离子阱质谱；离子化方式：ESI⁺；喷雾电压：4.5kV；管状透镜电压：115V；鞘气（氮气）流速：25arb；辅助气（氮气）流速：3.00arb；毛细管温度：350℃；母离子质量范围(m/z)：220-300；母离子扫描步进距离(m/z)：1.0；裂解模式：CID；隔离宽度(m/z)：1.0；归一化裂解能量：35%；扫描频率（activation time）：30msec；子离子(m/z)：139.0；

c.在离子阱质谱中对保健品非法添加西布曲明及其类似物进行母离子扫描：

其具体步骤包括：

（1）通过研究西布曲明类化合物的离子阱质谱裂解图，得到西布曲明及其类似物的质谱裂解规律，并选择丰度较高的共有子离子m/z139.0作为目标子离子，能够获得所述目标子离子的归一化裂解能量为35%；

（2）使用500μL注射器吸取a中所述样品的工作溶液以10μL/min的流速向离子阱质谱仪连续进样；

（3）设定所述线性离子阱质谱的步进距离为1.0m/z，从初始质量数m/z220.0开始，每次步进1.0m/z，到终止质量数m/z300.0截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下能够产生所述目标子离子m/z139.0的母离子峰，实验结果如图6所示，得到质量数分别为280，266和252的三个母离子峰，其分别对应西布曲明（1）、N-去甲基西布曲明（2）、N-去二甲基西布曲明（3）三个化合物；

（4）采用液相色谱-高分辨质谱对母离子扫描结果进行验证

液质联用分析条件：Accelar液相色谱仪，色谱柱为Waters ACQUITYBEH shield RP18柱（2.1×100mm，1.7μm），柱温为36℃，流速0.25mL/min。梯度洗脱条件：A相（5mmol/L乙酸铵水溶液），B相（乙腈），0.0～6.0min:65%A～10%A，6.0～6.5min:10%A，6.5～7.0min:10%～95%A。

质量分析器：Orbitrap；离子化方式：ESI⁺；喷雾电压：4.5kV；管状透镜电压：115V；鞘气（氮气）流速：25arb；辅助气（氮气）流速：3.00arb；毛细管温度：350℃；静电场轨道阱的高分辨扫描（分辨率R=30000）；扫描分2个事件：（a）全扫描，扫描范围为200.00-500.00m/z，分辨率为60000；（b）CID裂解，选择图6中得到的母离子峰，扫描范围为50.00-500.00m/z；

采用所述液相色谱-高分辨质谱对步骤（a）中配制的样品的工作溶液和标准品的混合标准溶液进行测试和分析，如图7A、7B所示分别为采用液相色谱-高分辨质谱检测得到的混合标准溶液中西布曲明（a-1）、N-去甲基西布曲明（a-2）、N-去二甲基西布曲明（a-3）和市售减肥保健食品中西布曲明（b-1）、N-去甲基西布曲明（b-2）、N-去二甲基西布曲明（b-3）的提取离子流图将图7A和图7B进行对比，结果表明步骤(3)中使用母离子扫描检出的保健食品样本中西布曲明和西布曲明类似物与其标准品保留时间完全一致。

进一步地，对保健品样本中得到的西布曲明及其类似物进行质谱裂解分析，如图8A所示为标准品中西布曲明（a-1）、N-去甲基西布曲明（a-2）和N-去二甲基西布曲明（a-3）的质谱裂解图，如图8B所示为减肥功能保健食品中西布曲明（b-1）、N-去甲基西布曲明（b-2）和N-去二甲基西布曲明（b-3）的质谱裂解图，将图8A和图8B进行对比，结果表明减肥功能保健食品样本裂解方式与标准品中所述三种化合物的裂解方式完全一致。

本实施例利用LTQ线性离子阱质谱对市售某减肥功能保健食品进行了母离子扫描，检测结果表明所述保健食品中添加有西布曲明（1）、N-去甲基西布曲明（2）、N-去二甲基西布曲明（3）三种化合物，然而三种西布曲明类化合物都是国家严令禁止生产和使用的违禁药物并且都没有在样本标签中加以标明；进一步地，采用液相色谱-高分辨质谱对母离子扫描结果进行了验证，确认所述采用母离子扫描得到的三个西布曲明化合物的母离子峰都是含有目标子离子的母离子峰，且不存在同分异构体现象，从而表明本实施例中采用LTQ线性离子阱质谱对市售某减肥保健食品中添加非法药物西布曲明及其结构类似药物进行母离子扫描，具有较高的准确性。

实施例3

本实施例采用线性离子阱质谱对市售某化妆品中氨基酸类表明活性剂进行母离子扫描，具体步骤如下：

a.样品描述及前处理：

将某市售瘦脸功能化妆品，液体，取10μL样品浓溶液，使用50%甲醇水溶液定容至10mL容量瓶，得到样品的工作溶液，供母离子扫描和液质联用分析使用。试验用水为Milli-Q超纯水，其他试剂均为色谱纯。

b.质谱条件及参数设置：

母离子扫描条件：

质量分析器：LTQ线性离子阱质谱；离子化方式：ESI⁺；喷雾电压：4.5kV；管状透镜电压：115V；鞘气（氮气）流速：25arb；辅助气（氮气）流速：3.00arb；毛细管温度：350℃；母离子质量范围(m/z)：200-400；母离子步进距离(m/z)：2.0；裂解模式：CID；隔离宽度(m/z)：1.0；归一化裂解能量：25%；扫描频率（activation time）：30msec；子离子(m/z)：130.0。

c.在离子阱质谱中对化妆品中氨基酸类表面活性剂进行母离子扫描：

其具体步骤包括：

（1）通过研究谷氨酸类表面活性剂的离子阱质谱裂解图，得到谷氨酸类表面活性剂及其类似物的质谱裂解规律，选择丰度较高的共有子离子m/z130.0作为目标子离子，能够获得所述目标子离子的裂解能量为25%；

（2）使用500μL注射器吸取a中所述样品的工作溶液以10μL/min的流速向离子阱质谱仪连续进样；

（3）设定所述线性离子阱质谱的步进距离为2.0m/z，从初始质量数m/z200.0开始，每次步进2.0m/z，到终止质量数m/z400.0截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下所有能够产生所述目标子离子m/z130.0的母离子峰，结果如图9所示，得到质量数分别为274、302、330、358和386五个母离子峰，分别对应辛酰谷氨酸钠（图9-1）、癸酰谷氨酸钠（图9-2）、月桂酰谷氨酸钠（图9-3）、肉豆蔻酰谷氨酸钠（图9-4）和棕榈酰谷氨酸钠（图9-5）5种化合物。

(4)采用液相色谱-高分辨质谱对母离子扫描结果进行验证

液质联用分析条件：Accelar液相色谱仪，色谱柱为Waters ACQUITYBEH shield RP18柱（2.1×100mm，1.7μm），柱温为36℃，流速0.25mL/min。梯度洗脱条件：A相（5mmol/L乙酸铵水溶液），B相（乙腈）；0.0～6.0min，80%A～500%A；6.0～6.1min，50～10%A；6.1～8.5min，10%～80%A；8.5～9.0min，10～80%A；9.0～12.0min，80%A；

质量分析器：Orbitrap；离子化方式：ESI⁺；喷雾电压：4.5kV；管状透镜电压：115V；鞘气（氮气）流速：25arb；辅助气（氮气）流速：3.00arb；毛细管温度：350℃；静电场轨道阱的高分辨扫描（分辨率R=30000），扫描范围为200.00-400.00m/z，分辨率为60000；

采用所述液相色谱-高分辨质谱对步骤（a）中所述样品的工作溶液进行测试和分析，如图10所示为采用液相色谱-高分辨质谱检测得到的样品中辛酰谷氨酸钠（图10-1）、癸酰谷氨酸钠（图10-2）、月桂酰谷氨酸钠（图10-3）、肉豆蔻酰谷氨酸钠（图10-4）和棕榈酰谷氨酸钠（图10-5）5种化合物的提取离子流图；并进一步得到所述5种化合物质谱裂解的高分辨数据，如图11所示为所述5种化合物的质谱裂解图，结果表明，所述化妆品样本中存在辛酰谷氨酸钠、癸酰谷氨酸钠、月桂酰谷氨酸钠、肉豆蔻酰谷氨酸钠和棕榈酰谷氨酸钠5种化合物。

本实施例使用LTQ线性离子阱质谱得对市售化妆品中氨基酸类表面活性剂进行了母离子扫描，检测结果表明所述市售某化妆品样本中存在辛酰谷氨酸钠、癸酰谷氨酸钠、月桂酰谷氨酸钠、肉豆蔻酰谷氨酸钠和棕榈酰谷氨酸钠5种化合物，且所述5种化合物都属于允许在化妆品中添加的氨基酸类表面活性剂，统称为椰油酰谷氨酸钠；进一步地，本实施例采用液相色谱-高分辨质谱对母离子扫描结果进行了验证，确认采用线性离子阱质谱进行母离子扫描得到的五种化合物的母离子峰都是含有目标子离子的母离子峰，且不存在同分异构体现象，从而表明本实施例中采用LTQ线性离子阱质谱对市售某化妆品中添加的氨基酸类表面活性剂如椰油酰谷氨酸钠进行母离子扫描时，具有较高的准确性。

所述实施例1-3中的归一化裂解能量与端盖电极上施加的裂解电压、被裂解化合物的质量数（即母离子质量数）之间存在以下关系：

裂解电压=（归一化裂解能量/30%）*(被裂解的化合物质量数*激发电压斜率+激发电压截距)；

其中，激发电压斜率和激发电压截距都与质谱测试时的仪器参数直接相关，本发明实施例1-3中激发电压斜率为0.00003V/u，激发电压截距为0.012455V；

例如当将母离子质量数为500u的一个化合物使用35%的归一化裂解能量进行裂解，仪器参数中激发电压斜率为0.02V/u，激发电压截距为0.4V，则

裂解电压=（35%/30%）*(500u*0.00003V/u+0.012455V)=0.03203V。

需要说明的是，本发明所述时间多级质谱不仅限于所述线性离子阱质谱，作为可以选择的实施方式，还可以采用空间离子阱质谱和轨道离子阱质谱等在同一空间内实现多级质谱功能的质谱裂解装置。

显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。

Claims (3)

1.一种利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，其特征在于，具体步骤为：

(1)使用注射器或蠕动泵进行连续进样并选择样品的目标子离子及对应的裂解能量；

(2)设定时间多级质谱中母离子的初始质量数、终止质量数和步进距离，从初始质量数开始，每次步进一定的质量数作为步进距离，到终止质量数截止，连续选择进入质谱仪中的母离子进行裂解，记录下能够产生步骤(1)中所述目标子离子的母离子信息；

所述时间多级质谱为单个线性离子阱质谱、空间离子阱质谱或轨道离子阱质谱；

所述步骤(2)之后，还包括利用液质联用进行验证的步骤，具体为：

将步骤(2)中得到的所述目标子离子的母离子信息输入液质联用数据相关扫描母离子列表中，采用数据相关扫描技术，对所述目标子离子的母离子进行质谱裂解，并采集高分辨的子离子裂解数据，以验证所述目标子离子的母离子是否产生所述目标子离子的裂解碎片以排除假阳性结果，并判断所述目标子离子的母离子是否存在同分异构体。

2.根据权利要求1所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，其特征在于，所述初始质量数与终止质量数之间的步进距离为0.5-2.0m/z。

3.根据权利要求1或2所述的利用时间多级质谱进行母离子扫描分析的方法，其特征在于，所述液质联用验证步骤采用高分辨质谱作为液质联用检测器。