CN103299906B - 一种草莓继代培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种草莓继代培养基，其特征在于，包括1/2改良SH+2-4mg/L2,4-D+0.2-0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+3～4g/L phytagel，pH值为5.6-5.8。本发明通过控制草莓继代培养基的2,4-D的浓度，有利于体细胞的形成，降低次体细胞的产生，而通过用phytagel代替琼脂，有效地克服了传统琼脂在植物组织培养中的固有缺陷，有效地克服了草莓高频体胚再生培养中基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高了育种效率。
Description
技术领域
本发明涉及一种培养基，尤其是涉及一种草莓继代培养基，属于植物生物学技术领域。
背景技术
草莓以其突出的经济价值和生态功能在我国得到大面积的推广种植。而面对生产需要和现有的生产条件，草莓在产量、品质及抗性等方面都有待于进一步改良。将生物技术与常规育种方法结合起来进行草莓新品种培育，是提高育种草莓效率的有效途径。
传统的草莓继代培养基为：MS基本培养基+ 0.4～0.5mg/L BA + 0.1-0.2IBA+ 20～30 g/L白糖 + 3-4g/L琼脂。首先，在组成上，MS基本培养基中有机物的含量比较低，且含有组分肌醇，不利于植物的继代培养，其次，组分琼脂在植物组织培养中具有无法克服的固有缺陷，影响了培养基的整体效果。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种可有效提高草莓繁殖速度的草莓继代培养基。
为达到上述目的，本发明是通过以下的技术方案来实现的：
一种草莓继代培养基，其特征在于，包括1/2改良SH+2-4mg/L2,4-D+0.2-0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+3～4g/L phytagel，pH值为5.6-5.8。
进一步，所述的1/2改良SH包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂。
其中，所述的常量营养元素包括：
硫酸铵 450mg/L；
硝酸钾 2900 mg/L；
七水硫酸镁 200 mg/L；
无水磷酸二氢钾 450 mg/L；
乙二胺四乙酸铁钠盐1.4 mg/L。
所述的微量营养元素包括：
一水硫酸锰 12 mg/L；
硫酸锌 1.2 mg/L；
硼酸 4.0 mg/L；
碘化钾 0.8 mg/L；
钼酸钠 0.2 mg/L；
硫酸铜 0.1 mg/L；
氯化钴 0.1 mg/L。
而所述的有机试剂包括：
盐酸硫胺素 6 mg/L；
烟酸 2.2 mg/L；
盐酸吡哆醇 2.5 mg/L。
本发明的有益效果是：本发明通过控制草莓继代培养基的2,4-D的浓度，有利于体细胞的形成，降低次体细胞的产生，而通过用phytagel代替琼脂，有效地克服了传统琼脂在植物组织培养中的固有缺陷，有效地克服了草莓高频体胚再生培养中基因型限制问题，大幅度提高体细胞胚发生频率和再生植株频率，提高了育种效率。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行具体的介绍。
实施例1
1/2改良SH+2mg/L2,4-D+0.2mg/L6-BA+30g/L蔗糖+4g/L phytagel，pH值为5.6左右。
实施例2
1/2改良SH+3mg/L2,4-D+0.3mg/L6-BA+30g/L蔗糖+4g/L phytagel，pH值为5.6左右。
实施例3
1/2改良SH+4mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+3g/L phytagel，pH值为5.7左右。
实施例4
1/2改良SH+2.5mg/L2,4-D+0.4mg/L6-BA+30g/L蔗糖+3.2g/L phytagel，pH值为5.8左右。
实施例5
1/2改良SH+3.4mg/L2,4-D+0.4mg/L6-BA+30g/L蔗糖+3.5g/L phytagel，pH值为5.8左右。
在上述实施例1-5中，1/2改良SH培养基包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂。其中，所述的常量营养元素包括：硫酸铵450mg/L；硝酸钾2900 mg/L；七水硫酸镁200 mg/L；无水磷酸二氢钾450 mg/L；乙二胺四乙酸铁钠盐1.4 mg/L。所述的微量营养元素包括：一水硫酸锰12 mg/L；硫酸锌1.2 mg/L；硼酸4.0 mg/L；碘化钾0.8 mg/L；钼酸钠0.2 mg/L；硫酸铜0.1 mg/L；氯化钴0.1 mg/L。而所述的有机试剂包括：盐酸硫胺素6 mg/L；烟酸2.2 mg/L；盐酸吡哆醇2.5 mg/L。
将260个经过胚发生愈伤组诱导培养后的草莓外植体分别接种于5个实施例所述的培养基上进行培养，培养过程如下：首先进行5天的2-3℃低温人工气候暗箱中培养，然后在白天室温25±1℃、夜晚20±2℃的条件下暗培养25-30天。
结果为：胚继代培养结束后，大幅度提高了体细胞胚的成熟率，使上、下胚轴胚状体分化率平均提高了25%以上，配愈伤组织也不再增大变浅或出现褐色，克服了传统的继代培养基容易出现基因型障碍，不能正长培养，或者出现叶片发黄，植株畸形化的问题。
因此可以得出通过改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，有效地克服了草莓继代培养中的基因型障碍问题，大幅度提高体细胞胚胎发生频率和再生植株频率的结论。
按照上述实施例进行了说明，应当理解，上述实施例不以任何形式限定本发明，凡采用等同替换或等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种草莓继代培养基，其特征在于，由1/2 改良SH+2-4mg/L2,4-D+0.2-0.5mg/L6-BA+30g/L 蔗糖+3 ～ 4g/L phytagel组成，pH 值为5.6-5.8，
所述的1/2 改良SH 由下述常量营养元素、微量营养元素和有机试剂组成，
所述的常量营养元素为：
硫酸铵 450mg/L ；
硝酸钾 2900 mg/L ；
七水硫酸镁 200 mg/L ；
无水磷酸二氢钾 450 mg/L ；
乙二胺四乙酸铁钠盐1.4 mg/L，
所述的微量营养元素为：
一水硫酸锰 12 mg/L ；
硫酸锌 1.2 mg/L ；
硼酸 4.0 mg/L ；
碘化钾 0.8 mg/L ；
钼酸钠 0.2 mg/L ；
硫酸铜 0.1 mg/L ；
氯化钴 0.1 mg/L，
所述的有机试剂为：
盐酸硫胺素 6 mg/L ；
烟酸 2.2 mg/L ；
盐酸吡哆醇 2.5 mg/L。
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