CN103651130B - 一种脱毒草莓试管苗复壮培养基 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种脱毒草莓试管苗复壮培养基。种脱毒草莓试管苗复壮培养基，包括大量元素、铁盐、微量元素、激素配成的营养液及其它物质混合，所述大量元素为：硝酸铵1100～1237.5mg/L、硝酸钾1266.7～1425mg/L、磷酸二氢钾113.3～127.5mg/L、七水硫酸镁246.7～277.5mg/L、氯化钙221.5～249.2mg/L；所述铁盐为：七水硫酸亚铁27.8mg/L+乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；将以上物质混合配制成营养液；所述的其它物质为蛭石，蛭石与营养液按体积比1:1混合。克服了脱毒草莓试管苗反复继代由于激素累加致使植株内源激素紊乱，试管苗退化；以及，反复继代过程中细菌感染二大难题。既节约了生产成本，也为脱毒草莓种苗的适时生产提供了有效的途径。

Description

一种脱毒草莓试管苗复壮培养基

技术领域

本发明涉及组培试管苗复壮技术领域，具体是一种脱毒草莓试管苗复壮培养基。

背景技术

草莓是蔷薇科草莓属植物，属多年生草本植物，全世界已知品种有50多种。是一种深受人们喜爱的水果。草莓的栽培始于14世纪的欧洲，主产区是欧洲，其次是美洲和亚洲，平均亩产以美国和加拿大最高。

美国和加拿大的草莓生产特色是：一，草莓种植全部采用脱病毒种苗；二，运用了配套的良种良法高产栽培技术。我国主产区分布在辽宁、河北、山东、江苏、上海、浙江等东部沿海地区，当然在新疆等地也有生产。脱毒方法主要是：1，热处理脱毒，对活跃生长的茎尖效果较好，但脱毒时间较长，高温下的草莓易死亡，需将根部降温处理；2，花药培养脱毒，花药组织培养消毒简单，接种容易，从愈伤组织形成到分化出芽过程中可100%脱除病毒，花药培养过程中有2%左右的变异，另外，花药培养从接种到分化成苗需时间长；3，叶片培养脱毒，利用茎尖培养以得到脱毒试管苗中剪切其叶片和叶柄，先诱导出愈伤组织，然后再分化出苗；4，茎尖培养脱毒，利用病毒在茎尖中成梯度分布的特性，进行茎尖分生组织培养，从而获得大量的无病毒草莓苗。

试管苗在培养瓶中时，是人为控制其光照、温度、湿度等条件，使试管苗在恒温、商湿和弱光且无菌生长环境下生长的，然而，当试管苗被移入大田中时，环境发生了骤变，变温、低湿、强光、充满微生物的相对恶劣环境下会影响试管苗的成活率和初期生存质量。主要体现在：试管苗失水较快；自身光合作用能力不健全；茎叶柔软；自然光与温度共同作用对试管苗呼吸作用和蒸腾作用的强制性作用过大，试管苗应激反应钝化。

脱毒草莓组培试管苗因反复继代会引起两方面的问题：一，由于激素的累积造成试管苗内源激素紊乱生长势变弱，质量下降等种苗退化问题；二，在反复继代过程中，易造成因操作不当而导致的细菌感染，并且随着继代次数的增殖，细菌感染不断蔓延，使生产不能持续。

发生草莓脱毒种苗退化或大面积的细菌感染，常规的解决办法就是重新选取母本苗采集外植体，经过外植体消毒、剥取茎尖脱毒、茎尖培养、继代增殖的漫长过程，在实际生产中，对生产进度的影响是致命的。

为此如何对发生种苗退化及感染细菌的脱毒草莓试管苗进行复壮是一个难题。

发明内容

本发明目的在于：提供一种脱毒草莓试管苗复壮培养基，可以对发生种苗退化及感染细菌的脱毒草莓试管苗进行复壮，恢复种苗生长势。

本发明的再一目的在于：提供一种针对上述脱毒草莓试管苗复壮培养基的使用方法。

本发明目的通过下述方案实现：一种脱毒草莓试管苗复壮培养基，包括大量元素、铁盐、微量元素、激素配成的营养液与其它物质混合制得，其配方如表1：

本发明是在MS培养基的基础上通过改良，获得的一种脱毒草莓试管苗复壮的培养基配方。其与MS培养基相比，本配方去掉了MS配方中的有机成分，大量元素各成分含量比MS少，铁盐和微量元素与MS相同。七水硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠两种物质复配后称为铁盐。

本发明与现有技术比，有的是通过降低激素的用量进行复壮，但并不能解决试管苗因不断继代培养而感染细菌的问题，本发明不但解决了试管苗的复壮问题，而且防止试管苗因不断继代培养而感染细菌。

本发明还提供了利用上述一种脱毒草莓试管苗复壮培养基的使用方法，进行试管苗的复壮，将受细菌感染且生长势弱的脱毒草莓试管苗切成单株，接种于复壮培养基中，培养30～45天，完成第一次复壮培养；然后再将经一次复壮的组培苗切去老叶及基部根系，转入复壮培养基进行第二次复壮培养，如此反复继代培养3～4次，恢复种苗生长势，起到壮苗作用，细菌感染比例可降低60%以上。

在上述方案基础上，培养条件具体为：培养温度22～24℃，光照强度1000～200Lux，每日光照时间为10～12小时的培养条件下培养30～45天，完成第一次复壮培养；然后再将经一次复壮的组培苗切去老叶及基部根系，转入复壮培养基进行第二次复壮培养，如此反复继代培养3～4次。

本发明优越性在于：提供了一种可以对发生种苗退化及感染细菌的脱毒草莓试管苗进行复壮的培养基，此配方的特点是不添加有机物质及糖，用蛭石替代琼脂粉作为支撑物，在此培养基上复壮培养3-4个周期后，接种到原增殖培养基MS+6-BA0.1-0.5mg/L+白砂糖30g/L上，试管苗恢复生长势，生长健壮、叶色浓绿，细菌感染比例可降低60%以上。

具体实施方式

实施例1

一种脱毒草莓试管苗复壮培养基，配方如表2，将受细菌感染且生长势弱的脱毒草莓试管苗切成单株，接种于复壮培养基配方1中，在培养温度22～24℃，光照强度1000～200Lux，每日光照时间为10～12小时的培养条件下培养30～45天，完成第一次复壮培养；然后再将经一次复壮的组培苗切去老叶及基部根系，转入复壮培养基配方2中，进行第二次复壮培养，配方1与配方2间隔使用。如此反复继代培养3～4次后，接种到原增殖培养基MS+6-BA0.1-0.5mg/L+白砂糖30g/L上，试管苗恢复生长势，生长健壮、叶色浓绿，细菌感染比例降低60%以上。

实施例2

将受细菌感染且生长势弱的脱毒草莓试管苗切成单株，接种于复壮培养基配方2中，在培养温度22～24℃，光照强度1000～200Lux，每日光照时间为10～12小时的培养条件下培养30～45天，完成第一次复壮培养；然后再将经一次复壮的组培苗切去老叶及基部根系，转入复壮培养基配方4中，进行第二次复壮培养，配方3与配方4间隔使用。如此反复继代培养3～4次后，接种到原增殖培养基MS+6-BA0.1-0.5mg/L+白砂糖30g/L上，试管苗恢复生长势，生长健壮、叶色浓绿，细菌感染比例可降低60%以上。

实施例3

将受细菌感染且生长势弱的脱毒草莓试管苗切成单株，接种于复壮培养基配方3中，在培养温度22～24℃，光照强度1000～200Lux，每日光照时间为10～12小时的培养条件下培养30～45天，完成第一次复壮培养；然后再将经一次复壮的组培苗切去老叶及基部根系，转入复壮培养基配方4中，进行第二次复壮培养，配方3与配方4间隔使用。如此反复继代培养3～4次后，接种到原增殖培养基MS+6-BA0.1-0.5mg/L+白砂糖30g/L上，试管苗恢复生长势，生长健壮、叶色浓绿，细菌感染比例可降低60%以上。

实施例4

将受细菌感染且生长势弱的脱毒草莓试管苗切成单株，接种于复壮培养基配方4中，在培养温度22～24℃，光照强度1000～200Lux，每日光照时间为10～12小时的培养条件下培养30～45天，完成第一次复壮培养；然后再将经一次复壮的组培苗切去老叶及基部根系，转入复壮培养基配方4中，进行第二次复壮培养，配方3与配方4间隔使用。如此反复继代培养3～4次后，接种到原增殖培养基MS+6-BA0.1-0.5mg/L+白砂糖30g/L上，试管苗恢复生长势，生长健壮、叶色浓绿，细菌感染比例可降低60%以上。

Claims (1)

1.一种脱毒草莓试管苗复壮培养基，包括大量元素、铁盐、微量元素、激素配成的营养液及其它物质混合，其特征在于：

所述大量元素为：

硝酸铵1100-1237.5mg/L

硝酸钾1266.7-1425mg/L

磷酸二氢钾113.3-127.5mg/L

七水硫酸镁246.7-277.5mg/L

氯化钙221.5-249.2mg/L；

所述铁盐为：

七水硫酸亚铁27.8mg/L+乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；

所述的微量元素为：

硼酸6.2mg/L

一水硫酸锰16.9mg/L

二水钼酸钠0.25mg/L

七水硫酸锌8.6mg/L

碘化钾0.83mg/L

六水氯化钴0.025mg/L

五水硫酸铜0.025mg/L；

所述的激素为：

6-苄胺基嘌呤0-0.002mg/L；

将以上物质混合配制成营养液；

所述的其它物质为蛭石，蛭石与营养液按体积比1:1混合。