CN1922985B - 落叶松属植物胚性愈伤组织的继代方法及其专用培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种落叶松属植物愈伤组织的继代保存方法及其专用培养基。该培养基，是含有下述成分的DCR培养基：维生素B1 0.4-0.6mg/L、维生素B6 0.4-0.6mg/L、烟酸0.4-0.6mg/L、肌醇80-120mg/L、谷氨酰胺300-500mg/L、水解酪蛋白400-600mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.8-1.2mg/L、α-萘乙酸0.8-1.2mg/L、激动素0.4-0.6mg/L、6-BA0.4-0.6mg/L、蔗糖29.5-30.5g/L和琼脂6.5-7.5g/L。本发明的方法继代保存效果好，能较长时期的保持愈伤组织的胚性能力而不至于引起胚性能力的丧失。
Description
技术领域
本发明涉及一种落叶松属植物胚性愈伤组织的继代方法及其专用培养基。
背景技术
由于松杉类植物是林业生产上的重要树种，对于各种外植体诱导产生的愈伤组织，进行较长时间的继代保存，将对于体细胞胚发生和器官发生等方面的研究提供基础：既有利于树种的繁育，又可作为研究胚发育过程中结构、生理和分子事件的一种重要的模式系统。目前，已经成功的进行了多种被子植物的体细胞胚发生和器官发生，而对于松杉类植物的植株再生问题仍然存在各种难题，对于外植体诱导产生的愈伤组织进行一定时间的继代保存就显得很有必要。
松杉类植物胚性愈伤组织也称为胚性胚柄团，选择合适的培养基是其正常继代保存的关键。在继代阶段，培养物中有一系列大小的胚性胚柄团，只有保持适宜的培养条件，才能不断地分裂，细胞系得以正常继代而保存下来。一些细胞系在长期培养过程中会失去体细胞胚胎发生能力，而有体细胞胚胎发生能力的培养物是光滑的，其它培养物表面会出现绳索状生长物。日本落叶松胚性愈伤组织对培养基的各种成分和理化条件非常敏感，迄今为止还没有在常温下有效继代方法及其较有效的培养基，调整继代保存的培养基配方，改进继代方法，显然对于体细胞胚胎发生和器官发生等无性繁殖，以及保护生态环境具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种落叶松属植物胚性愈伤组织的继代方法及其专用培养基。
本发明提供的落叶松属植物愈伤组织的继代培养基，是含有下述成分的DCR培养基：维生素B1(VB1)0.4-0.6mg/L、维生素B6(VB6)0.4-0.6mg/L、烟酸0.4-0.6mg/L、肌醇80-120mg/L、谷氨酰胺(Glutamine)300-500mg/L、水解酪蛋白(casein hydrolysate，CH)400-600mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)0.8-1.2mg/L、α-萘乙酸(NAA)0.8-1.2mg/L、激动素(kinetin)0.4-0.6mg/L、6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.4-0.6mg/L、蔗糖29.5-30.5g/L和琼脂6.5-7.5g/L。
本发明提供的落叶松属植物愈伤组织的继代培养基，优选为含有下述成分的DCR固体培养基：维生素B1(VB1)0.5mg/L、维生素B6(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、肌醇100mg/L、谷氨酰胺400mg/L、水解酪蛋白500mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸1mg/L、α-萘乙酸1mg/L、激动素0.5mg/L、6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.5mg/L、30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂。
所述落叶松属植物愈伤组织的继代培养基的pH值为5.7-5.9，优选为5.8。
所述DCR培养基由大量元素、微量元素和铁盐成分组成，其中，大量元素：340mg/LKNO3，556mg/L CaNO3·4H2O，400mg/L NH4NO3，170mg/L KH2PO4，85mg/LCaCl2·2H2O，370mg/L MgSO4；微量元素：6.2mg/L HBO3，8.6mg/L ZnSO4·7H2O，22.3mg/L Mn SO4·H2O，0.25mg/L Na2MoO4·2H2O，0.83mg/L KI，0.25mg/LCuSO4·5H2O，0.025mg/L CoCl2；铁盐成分：5.57g/L FeSO4，7.45g/L Na2EDTA。
本发明提供的日本落叶松胚性愈伤组织继代的方法，是将落叶松属植物愈伤组织在上述继代培养基上进行继代培养。
所述落叶松属植物愈伤组织可按照常规方法获得。
所述继代培养条件为23-27℃，黑暗培养。所述继代培养温度优选为25℃。
所述继代培养时间为16-22天，优选为18-20天。待愈伤组织生长至直径为0.8-1.2cm时再进行下一次继代。
所述落叶松属植物愈伤组织来自外周颜色较白部分的愈伤组织。
本发明的培养基，其中的蔗糖和其他有机物组分是胚性愈伤组织生长的主要营养物质，激素组合2，4-D 0.8-1.2mg/L+NAA 0.8-1.2mg/L+kinetin 0.4-0.6mg/L+6-BA0.4-0.6mg/L有利于胚性组织的增殖，以免由于长期继代在2，4-D培养基上造成体细胞胚成熟能力的丧失；并用琼脂维持培养基的固态环境；此外，pH值5.7-5.9，为愈伤组织的生长提供必需的微酸性环境条件，过碱环境不利于细胞的增殖和发育。本发明的方法适用于落叶松属植物胚性愈伤组织的继代保存，尤其适用于日本落叶松、华北落叶松、长白落叶松等胚性愈伤组织的继代保存。用本发明的方法进行落叶松胚性愈伤组织的继代保存，培养效果好，能较长时期的保持愈伤组织的胚性能力而不至于引起胚性能力的丧失，为以后的体细胞胚发生和器官发生等研究带来极大的方便，具有较大的实际应用价值。
附图说明
图1为本发明方法继代保存五年的日本落叶松胚性愈伤组织及其胚头和胚柄胚细胞照片，和胚性组织通过PAS反应检测到的胚头细胞照片
具体实施方式
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。
实施例1、日本落叶松胚性愈伤组织的继代方法。
一、日本落叶松胚性愈伤组织的诱导
1、诱导培养基的配制
诱导培养基：以DCR培养基为基本培养基，其组成为DCR+维生素B1(VB1)0.5mg/L+维生素B6(VB6)0.5mg/L+烟酸0.5mg/L+肌醇100mg/L+谷氨酰胺(Glutamine)400mg/L+水解酪蛋白(casein hydrolysate，CH)500mg/L+2，4-D2mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖(surcose)30g/L+琼脂(agar)7g/L，培养基pH值为5.8。灭菌后第二天使用。
其中，DCR培养基的组成为：大量元素：340mg/L KNO3，556mg/L CaNO3·4H2O，400mg/L NH4NO3，170mg/L KH2PO4，85mg/L CaCl2·2H2O，370mg/L MgSO4；微量元素：6.2mg/L HBO3，8.6mg/L ZnSO4·7H2O，22.3mg/L MnSO4·H2O，0.25mg/L Na2MoO4·2H2O，0.83mg/L KI，0.25mg/L CuSO4·5H2O，0.025mg/L CoCl2；铁盐成分：5.57g/L FeSO4，7.45g/L Na2EDTA。
2、诱导日本落叶松胚性愈伤组织
将胚发育至子叶前合子胚时期的未成熟日本落叶松球果采摘后，放在4-6℃低温下冷藏1-2个月，然后从球果中取出种子，将种子用70％(体积百分含量)的酒精浸润1min，无菌水冲洗3次后，再放入0.1％(质量百分含量)的升汞溶液中灭菌5-10min，无菌水冲洗三次后，剥出的幼胚作为外植体，将外植体转入装有诱导培养基的三角瓶(100ml三角瓶，40ml培养基)中，每个三角瓶中外植体个数为6-8个.置于黑暗的环境中，温度为25±2℃，诱导培养30天，得到白色的胚性愈伤组织.
二、日本落叶松胚性愈伤组织的继代培养
1、配制培养基
继代培养基：以DCR培养基为基本培养基，其组成为DCR+维生素B1(VB1)0.5mg/L+维生素B6(VB6)0.5mg/L+烟酸0.5mg/L+肌醇100mg/L+谷氨酰胺(Glutamine)400mg/L+水解物(casein hydrolysate，CH)500mg/L+2，4-D1mg/L+α-萘乙酸(NAA)1mg/L+激动素(kinetin)0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L，调整好pH至5.8。灭菌后第二天使用。
2、日本落叶松胚性愈伤组织的继代方法
取步骤一产生的胚性愈伤组织中外周颜色较白的部分进行分割，每块分成4-6小块，接入装有步骤1制备的继代培养基的三角瓶(100ml三角瓶，40ml培养基)中，每瓶放置6-8组织块；置于黑暗的环境中，温度为25℃的条件下，培养18-20天，待愈伤组织生长至直径约为0.8-1cm时再进行下一次继代。经五年继代后，胚性愈伤组织存活率为100％，如图1所示，图1中a为本发明方法继代保存五年的日本落叶松胚性愈伤组织，图1中b为继代保存时间五年的日本落叶松胚性愈伤组织，通过细胞学观察其仍然具有明显的胚头和胚柄胚细胞，图1中c为胚性组织通过PAS反应，检测到细胞仍保持很强的分裂能力。
Claims (7)
1.一种日本落叶松胚性愈伤组织的继代培养基，是含有下述成分的DCR培养基：维生素B10.4-0.6mg/L、维生素B60.4-0.6mg/L、烟酸0.4-0.6mg/L、肌醇80-120mg/L、谷氨酰胺300-500mg/L、水解酪蛋白400-600mg/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.8-1.2mg/L、α-萘乙酸0.8-1.2mg/L、激动素0.4-0.6mg/L、6-苄氨基嘌呤0.4-0.6mg/L、蔗糖29.5-30.5g/L和琼脂6.5-7.5g/L。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述日本落叶松胚性愈伤组织的继代培养基，是含有下述成分的DCR固体培养基：0.5mg/L维生素B1、0.5mg/L维生素B6、0.5mg/L烟酸、100mg/L肌醇、400mg/L谷氨酰胺、500mg/L水解酪蛋白、1mg/L 2，4-二氯苯氧乙酸、1mg/L α-萘乙酸、0.5mg/L激动素、0.5mg/L6-苄氨基嘌呤、30g/L蔗糖和7.0g/L琼脂。
3.根据权利要求1或2所述的培养基，其特征在于：所述日本落叶松胚性愈伤组织的继代培养基的pH值为5.7-5.9。
4.日本落叶松愈伤组织继代的方法，是将日本落叶松胚性愈伤组织在权利要求1或2或3所述继代培养基上，在23-27℃、黑暗条件下，进行继代培养。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述培养温度为25℃。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述继代培养时间为16-22天。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述日本落叶松愈伤组织来自外周颜色较白部分的胚性愈伤组织。
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| CN102369879B (zh) * | 2010-08-10 | 2013-10-09 | 中国科学院植物研究所 | 杉木胚性愈伤组织的继代保存方法及其继代培养基 |
| CN102450214B (zh) * | 2010-10-21 | 2013-02-13 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种黑麦草胚性愈伤组织的筛选和保存方法 |
| CN102599064B (zh) * | 2012-04-11 | 2013-12-04 | 成都大学 | 一种以叶原基为外植体的金钱松愈伤组织培养方法 |
| CN105409767B (zh) * | 2015-10-23 | 2017-11-07 | 东北林业大学 | 一种提高长白落叶松体细胞胚发生和植株再生效率的过渡培养基及培养方法 |
| CN106879473B (zh) * | 2017-04-21 | 2019-06-07 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 一种落叶松植物离体发生的方法 |
| CN107517851B (zh) * | 2017-09-08 | 2020-01-10 | 海南大学 | 橡胶树胚性愈伤组织的低温保存培养基及其低温保存方法 |
| CN113115706B (zh) * | 2020-01-15 | 2022-03-15 | 东北林业大学 | 一种长白落叶松胚性愈伤组织胚性恢复与保持的方法 |
-
2006
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| krystyna klimaszewska.plantlet development from immature zygotic embryos of hybridlarch through somatic embryogenesis.plant science63.1989,6395-103. * |
| 郭奕明等.落叶松体细胞的胚胎发生.植物生理学通讯39 5.2003,39(5),531-535. |
| 郭奕明等.落叶松体细胞的胚胎发生.植物生理学通讯39 5.2003,39(5),531-535. * |
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