CN103288800A - 达比加群酯苯磺酸盐及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了达比加群酯苯磺酸盐及其制备方法和应用，所述达比加群酯苯磺酸盐具有式I的结构。本发明的达比加群酯苯磺酸盐通过使活性物质达比加群酯成盐，从而改变了活性物质的理化性质，进而在无药动学差异的情况下显著提高了药物的药效，在制备抗凝血药物方面具有广阔的前景。

Description

达比加群酯苯磺酸盐及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于药物领域，更具体地说，本发明涉及达比加群酯苯磺酸盐(3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐)及其制备方法和应用。

背景技术

WO98/37075公开了一种具有抑制凝血酶的效应及延长凝血酶作用时间的化合物，其名称为1-甲基-2-[N-[4-(N-n-己氧基羰基-脒基)苯基]-氨基-甲基]-苯并咪唑-5-基-羧酸-N-(2-吡啶基)-N-(2-乙氧基羰基乙基)-酰胺，为式A化合物(达比加群酯，分子量为628.84)的前体药物。

式A化合物首先在体内转化为实际有效的化合物(即式B化合物)。式A化合物的主要适应症范围是术后预防深静脉血栓形成及防止中风。

WO2005/028468公开了3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-甲磺酸盐(又称：达比加群酯甲磺酸盐，分子量为723.84)及其制备方法。达比加群酯甲磺酸盐为黄白色到黄色结晶性粉末，晶型为圆柱形，含有2份弱碱基，pKa分别为4.0±0.1(苯并咪唑的一半)和6.7±0.1(氨基甲酸乙酯的一半)，其水溶性依靠pH值，在酸性介质中(0.1N HCl，＞50mg/mL)水溶性好，在中性或碱性介质中水溶性差(0.003mg/mL，pH7.4)。

对于弱酸性药物，pKa愈大，则非离子比例愈大，有利于药物在胃肠液中的吸收。相反，对于弱碱性药物，其pKa愈大，则离子型比例愈大，不利于吸收，对于弱酸性药物，特别是pKa值小的，提高胃肠液的pH值，可增加非离子型药物的比例，从而可增加药物在胃肠道内的吸收。故每种药物都有最适的吸收pH值；pKa大小相近的药物，在胃肠液内非离子型和离子型比例相近。但其吸收度可能存在相当大的差异，这决定于药物的脂溶性。药物脂溶性大小可用油/水分配系数表示。通常油/水分配系数大的药物，其吸收较好。但药物的脂溶性与吸收程度并不都成线性关系。药物的油/水分配系数过大，有时吸收反而不好，这是因为药物渗入类质层后可能与脂质强烈结合，不易向体循环系统转运。研究药物的这些存在形式，将对药物的临床应用具有指导作用。

因此，化合物的理化性质同样影响着药物发挥疗效，如化合物的溶解性、稳定性、吸湿性、脂水分配系数等，对达比加群酯改进盐的研究很有必要。

发明内容

基于此，本发明提供了一种达比加群酯苯磺酸盐——3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐。

为实现以上目的，本发明采取了以下技术方案：

3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐，具有式I的结构式(分子量为：787.02)：

本发明还提供了上述达比加群酯苯磺酸盐的制备方法，包括以下步骤：

20-60℃下，将过量苯磺酸搅拌加入溶于有机溶剂的达比加群酯中，20-60℃反应1-5小时后，降温到0-4℃继续搅拌12-32h，过滤或干燥，即得；所述达比加群酯与苯磺酸的摩尔比为1∶1-2。

在其中一些实施例中，所述反应温度为20-50℃，所述反应时间为4-5小时。

在其中一些实施例中，所述达比加群酯与苯磺酸的摩尔比为1∶1-1.2。

在其中一些实施例中，所述有机溶剂为芳香烃、脂肪烃、卤代烃、脂类、酮类、醇类、腈类、醚类的一种或几种。

在其中一些实施例中，所述有机溶剂为苯、甲苯、二甲苯(芳香烃)、乙烷、环己烷(脂肪烃)、二氯甲烷(卤代烃)、乙酸乙酯(酯类)、乙醚(醚类)、四氢呋喃(醚类)、石油醚(醚类)、丙酮(酮类)、丁酮(酮类)、甲醇(醇类)、乙醇(醇类)、乙腈(腈类)、DMF(酰胺类)中的一种或几种。

本发明还提供了上述达比加群酯苯磺酸盐在制备抗凝血药物中的应用。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明的达比加群酯苯磺酸盐通过使活性物质达比加群酯成盐，从而改变了活性物质的理化性质，进而在无药动学差异的情况下显著提高了药物的药效，在制备抗凝血药物方面具有广阔的前景。

具体实施方式

以下结合具体实施例来详细说明本发明。

以下实施例中所采用的各种原料均来源于市售。

实施例13-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯苯磺酸盐的制备

包括步骤：

将3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯5g(0.008mol)溶解于350ml的丙酮中，在室温条件下，搅拌加入1.56g(0.0096mol)苯磺酸固体，室温搅拌5h后，冰浴降温到0-4℃搅拌24h。过滤析出的固体，用适量的丙酮洗涤，于最大50℃的温度真空干燥产物4小时，得到淡黄色粉末5.10g(81％)，HPLC确定该淡黄色粉末即为目的产物，纯度为99.6％。

实施例23-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯苯磺酸盐的制备

包括步骤：

将3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯5g(0.008mol)溶解于500ml的四氢呋喃中，在45℃条件下，搅拌加入1.3g(0.008mol)苯磺酸固体，室温搅拌4h后，冰浴降温到0-4℃搅拌28h。向反应液里加入500ml乙醚析出固体。过滤析出的固体，用适量的丙酮洗涤，于最大50℃的温度真空干燥产物至少4小时，得到淡黄色粉末5.04g(80％)，HPLC确定该淡黄色粉末即为目的产物，纯度为99.5％。

实施例33-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯苯磺酸盐的制备

包括步骤：

将3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯5g(0.008mol)溶解于350ml的甲醇中，在50-60℃条件下，搅拌加入2.6g(0.016mol)苯磺酸固体，室温搅拌3h后，冰浴降温到0-4℃搅拌32h。过滤析出的固体，用适量的丙酮洗涤，于最大50℃的温度真空干燥产物至少4小时，得到淡黄色粉末4.9g(78％)，HPLC确定该淡黄色粉末即为目的产物，纯度为99.3％。

实施例43-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯苯磺酸盐的制备

包括步骤：

将3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯5g(0.008mol)溶解于350ml的丙酮中，在20-25℃条件下，搅拌加入2.6g(0.016mol)苯磺酸固体，控制反应温度在20-25℃搅拌4h后，冰浴降温到0-4℃搅拌12h。向反应液里加入500ml乙醚析出固体。过滤析出的固体，用适量的丙酮洗涤，于最大50℃的温度真空干燥产物至少4小时，得到淡黄色粉末4.2g(67％)，HPLC确定该淡黄色粉末即为目的产物，纯度为99.9％。

试验例1达比加群酯甲磺酸盐与达比加群酯苯磺酸盐的药代动力学对比研究

对3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐(实施例1制备得到)与3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-甲磺酸盐药代动力学对比研究。试验方法如下：

取体重为(200±20)g健康的SD大鼠，随机分为3组，每组10只，雌雄各半，给药方式为：

对照组——给药甲磺酸盐(0.945mg/kg按活性物质计算，该剂量是根据徐叔云教授主编的《药理实验方法学》中人与动物体表面积比值剂量比计的，下同)

治疗组——给药苯磺酸盐(0.945mg/g按活性物质计算)

灌胃给药，给药后分别于10、15、25、35、45、60、120、180、240、360min尾静脉取血，放置于4℃冰箱中储存，样品通过有机溶剂萃取，真空干燥，后溶解于二次蒸馏水中，进行HPLC分析。测得结果如表1所示。

表1

表1结果表明：本发明实施例1所示的3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐与3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-甲磺酸盐在体内的药代情况相似，无显著性差异(p＞0.05)。

试验例2达比加群酯甲磺酸盐与达比加群酯苯磺酸盐的抗凝血作用对比研究

对3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐(实施例1制备得到)与3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-甲磺酸盐抗凝血作用对比研究。试验方法如下：

取体重为(20±2)g健康的昆明种小鼠，随机分为3组，每组10只，雌雄各半，给药方式为：

空白组——给等体积生理盐水

对照组——给药甲磺酸盐(1.186mg/kg按活性物质计算)

治疗组——给药苯磺酸盐(1.186mg/g按活性物质计算)

在实验室中喂养2天后进行试验。对小鼠的灌胃体积为0.25mL，24h后用乙醚麻醉，在距小鼠尾尖3cm处剪断，血液自然流出。用滤纸在小鼠尾尖轻轻蘸血，每分钟—次，直至血液出现拉丝现象为止，这时血液出现有凝固状况，

每次实验都以同样的拉丝现象为基准，记录时间。测得结果如表2所示。

表2抗凝血时间(平均值，n＝10)

表2结果表明：与空白组比较，对照组和治疗组均有延长小鼠凝血时间的作用，且具有极显著性差异p＜0.01，治疗组与对照组相比具有显著性差异0.01＜p＜0.05，本发明所示3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯苯磺酸盐，具有较好的抗凝血效果，这可能由其理化性质的改变造成的。

虽然本发明仅用了实施例1制备得到的3-[(2-{4-(己氧基羰基氨基-亚氨基-甲基)-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪唑-5-羰基)-吡啶-2-基-氨基]-丙酸乙酯-苯磺酸盐进行了药代动力学和抗凝血试验，但是本领域技术人员都知道，采用其他实施例得到的达比加群酯苯磺酸盐均能达到与试验例1和2相似的结果。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (7)

1.具有式I结构的达比加群酯苯磺酸盐： 

。

2.权利要求1所述的达比加群酯苯磺酸盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 

20-60℃下，将过量苯磺酸搅拌加入溶于有机溶剂的达比加群酯中，20-60℃反应1-5小时后，降温到0-4℃继续搅拌12-32h，过滤或干燥，即得；所述达比加群酯与苯磺酸的摩尔比为1∶1-2。 

3.根据权利要求2所述的达比加群酯苯磺酸盐的制备方法，其特征在于，所述反应温度为20-50℃，所述反应时间为4-5小时。 

4.根据权利要求2所述的达比加群酯苯磺酸盐的制备方法，其特征在于，所述达比加群酯与苯磺酸的摩尔比为1∶1-1.2。 

5.根据权利要求2-4任一项所述的达比加群酯苯磺酸盐的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为芳香烃、脂肪烃、卤代烃、脂类、酮类、醇类、腈类、醚类的一种或几种。 

6.根据权利要求5所述的达比加群酯苯磺酸盐的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为苯、甲苯、二甲苯、乙烷、环己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙 醚、四氢呋喃、石油醚、丙酮、丁酮、甲醇、乙醇、乙腈、DMF中的一种或几种。 

7.权利要求1所述的达比加群酯苯磺酸盐在制备抗凝血药物中的应用。