CN103285040A - 一种纳米美洲大蠊的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种纳米美洲大蠊的制备方法,包括以下步骤:浸泡、脱脂、加热、冲洗、三次提取、第一次过滤、浓缩、第二次过滤、超音速射流干燥。通过本发明提供的制备方法得到的纳米美洲大蠊颗粒细小、均匀,分散性好,粒径为0~100nm;能改善或提高美洲大蠊药用成份的溶解度与生物有效性;可将美洲大蠊药用成份运送到指定的靶区,达到靶向给药的目的;具有安全性,降低某些对胃肠的刺激;最大限度地保护美洲大蠊的特殊生物活性,如丙氨酸等。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种纳米美洲大蠊的制备方法。
背景技术
在中药制剂的生产和制备过程中,如何将药材中(特别是动物药材)的药用成分充分和最大限度的提取出来,对中药进行提取,精制,向微量化方向发展是一个不断研究的课题。普遍存在对原料药材的粉碎程度不够,影响使用效果。往往为了提高产品性能,剂量使用都偏大,导致使用成本偏高。药材微细化与固体药物的溶解释放、药物在体内的吸收和生物利用度之间有密切关系。因此超微粉碎技术是一项提高药材利用效果的新技术。
当物质的颗粒小到1~100nm时,由于其量子效应、物质的局域性、巨大的表面及界面效应,会使物质的很多性能发生质变。
药物经纳米化处理后出现了某些新的药效学特性。对于采用高新技术提升传统中药的质量和水平以及研制开发具有新药效的中药制剂具有重要的意义。
据文献记载,美洲大蠊是蜚蠊科中体积最大的昆虫,原产于南美洲,我国各地均有分布,尤以我国南方地区更为常见。美洲大蠊是传统的中药材,以干燥和鲜成虫入药,其性寒味咸,有辛辣味,有散瘀、消积、解毒、利水、消肿等功效;主治儿童疳积、扁桃腺炎、身体包块、痈疮肿痛和蜈蚣、毒蛇咬伤等。
近年来随着科技不断地发展,经多年研究发现,美洲大蠊表皮含有巩膜质和甲壳质、溴、锌、镍、猛、钾、钙、钛、氯、硫、硅、铝、镁等元素。肌肉水解13种氨基酸。此外,身体贮藏微生素B1、维生素B2、烟酸和抗坏血酸等,淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原儿茶酸葡萄甙等。全体含麦角硫因、龙虾肌碱、胡芦巴碱、甘氨酸、甜菜碱、肛碱、三甲胺、腺嘌呤等。美洲大蠊的药理作用主要表现在抗肿瘤作用、提高免疫作用、保肝作用、促进组织修复作用、抗炎和镇痛作用等。
目前,美洲大蠊提取物的制备方法具有很多种,而能达到纳米量级的确鲜有报道,结合上面所述,制备纳米级的美洲大蠊具有深远意义,也将是对美洲大蠊进行深入研究的一个重要方向之一。
发明内容
本发明的目的在于针对上述现有技术的不足,提供一种制备纳米粒径0~100nm的纳米美洲大蠊的制备方法。
本发明采取的技术方案是:提供一种纳米美洲大蠊的制备方法,包括以下步骤:
A、浸泡:将美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入美洲大蠊干燥虫体重量3~8倍的水,在70~78℃的温度条件下浸泡0.5~3小时;
B、脱脂:向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入浸泡液重量 1/200~1/1000的碱液进行脱脂;
C、加热:密闭多功能提取罐,煮沸30~60min;
D、冲洗:当多功能提取罐中的压力升至0.08~0.18Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为4~8;
E、提取:对步骤D得到的多功能提取罐中的溶液进行2~4次提取,每次提取时间为3~9小时;
F、第一次过滤:将步骤E中提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;
G、浓缩:将一级滤液浓缩至70℃~90℃时相对密度为1.00~1.25的浓缩液;
H、第二次过滤:将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;
I、超音速射流干燥:将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在30~70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为330~990m/s。
上述纳米美洲大蠊的制备方法,在优选的实施方式中,包括以下步骤:
A、浸泡:将美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入美洲大蠊干燥虫体重量3~6倍的水,在70~78℃的温度条件下浸泡0.5~2小时;
B、脱脂:向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入浸泡液重量 1/300~1/1000的NaOH进行脱脂;
C、加热:密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸30~60min;
D、冲洗:当多功能提取罐中的压力升至0.11~0.12Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为4~8;
E、三次提取:对步骤D得到的多功能提取罐中的溶液进行第一次提取,提取时间为7~9小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液2~4倍量的水后进行第二次提取,提取时间为5~7小时;最后向第二次提取后的余液中加入余液2~4倍量的水后进行第三次提取,提取时间为3~5小时;
F、第一次过滤:将步骤E中三次提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;
G、浓缩:将一级滤液浓缩至70℃~90℃时相对密度为1.05~1.25的浓缩液;
H、第二次过滤:将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;
I、超音速射流干燥:将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在30~70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为330~990m/s。
更优选的,步骤A中采用的美洲大蠊干燥虫体与水重量比为1:6。
更优选的,步骤A中,在水中浸泡美洲大蠊干燥虫体的时间为2小时。
更优选的,步骤B中,向美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入浸泡液重量 1/300的NaOH进行脱脂。
更优选的,步骤C中,密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸60分钟。
更优选的,步骤D中冲洗方法为当多功能提取罐中的压力升至0.11~0.12Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为8。
更优选的,步骤E中的三次提取方法为对多功能提取罐中的溶液进行第一次提取,提取时间为9小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液4倍量的水后进行第二次提取,提取时间为7小时;最后向第二次提取后的余液中加入余液4倍量的水后进行第三次提取,提取时间为5小时。
更优选的,步骤G中将一级滤液浓缩至70℃~90℃时相对密度为1.05的浓缩液。
更优选的,步骤I中的超音速射流干燥方法为:将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为990m/s。
本发明采用的NaOH的纯度为分析纯;本发明采用的水为纯净水。
通过本发明提供的制备方法得到的纳米美洲大蠊加入药学上可接受的辅料或者辅助性成分制成更适宜于临床应用的剂型,如丸剂、散剂、片剂、栓剂、颗粒剂、膜剂、胶囊剂、微囊剂、滴丸剂、气雾剂、注射剂、膏剂或者口服溶液剂;上述剂型的药物组合物主要用于活血散瘀、解毒利疳、利尿消肿;用于癓瘕积聚,小儿疳积,脚气水肿,疔疮,肿毒及蛇虫咬伤、创面修复、原发性肝癌等。
通过本发明提供的制备方法得到的纳米美洲大蠊具有以下有益效果:
1、颗粒细小、均匀,分散性好,粒径为0~100nm;
2、能改善或提高美洲大蠊药用成份的溶解度与生物有效性;
3、便于制作缓释剂或控释制剂;
4、便于靶向给药,根据体内不同部位的生理酶和细菌分布、细胞分布、网状结构、淋巴分布等的不同,采用不同高分子材料进行表面修饰,制成需要的美洲大蠊纳米颗粒,可将美洲大蠊药用成份运送到指定的靶区,达到靶向给药的目的;
5、具有安全性,降低某些对胃肠的刺激;
6、最大限度地保护美洲大蠊的特殊生物活性,如丙氨酸等。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细的描述,但它们不是对本发明的进一步限制。
实施例1:将100Kg美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入300Kg的水,在70~78℃的温度条件下浸泡0.5小时;向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入0.5Kg的NaOH进行脱脂;密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸30min;当多功能提取罐中的压力升至0.08~0.18Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为4;提取两次,第一次提取7小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液2倍量的水后进行第二次提取,提取时间为5小时;将两次提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;将一级滤液浓缩至70℃时相对密度为1.25的浓缩液;将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在30℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为330m/s。
本实施例得到的纳米美洲大蠊粒径在0~100nm,体表面积大,晶界处的原子数比率高达15~50%;经检测,该美洲大蠊纳米提取物的干燥品中含总氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)计为12.0%(质量百分比)。
实施例2:将100Kg美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入400Kg的水,在70~78℃的温度条件下浸泡1.5小时;向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入2.5Kg的NaOH进行脱脂;密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸40min;当多功能提取罐中的压力升至0.08~0.18Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为8;提取四次,第一次提取3小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液3倍量的水后进行第二次提取,提取时间为6小时;再向第二次提取后的余液中加入余液3倍量的水后进行第三次提取,提取时间为5小时;最后向第三次提取后的余液中加入余液3倍量的水后进行第三次提取,提取时间为4小时;将四次提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;将一级滤液浓缩至80℃时相对密度为1.00的浓缩液;将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在45℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为550m/s。
本实施例得到的纳米美洲大蠊粒径在0~100nm,体表面积大,晶界处的原子数比率高达15~50%;经检测,该美洲大蠊纳米提取物的干燥品中含总氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)计为13.0%(质量百分比)。
实施例3:将100Kg美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入800Kg的水,在70~78℃的温度条件下浸泡3小时;向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入0.9Kg的NaOH进行脱脂;密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸50min;当多功能提取罐中的压力升至0.11~0.12Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为4;提取三次,第一次提取8小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液3倍量的水后进行第二次提取,提取时间为6小时;最后向第二次提取后的余液中加入余液3倍量的水后进行第三次提取,提取时间为4小时;将三次提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;将一级滤液浓缩至80℃时相对密度为1.15的浓缩液;将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在55℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为770m/s。
本实施例得到的纳米美洲大蠊粒径在0~100nm,体表面积大,晶界处的原子数比率高达15~50%;经检测,该美洲大蠊纳米提取物的干燥品中含总氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)计为14.5%(质量百分比)。
实施例4:将100Kg美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入600Kg的水,在70~78℃的温度条件下浸泡2小时;向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入2.33Kg的NaOH进行脱脂;密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸60min;当多功能提取罐中的压力升至0.11~0.12Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为8;提取三次,第一次提取9小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液4倍量的水后进行第二次提取,提取时间为7小时;最后向第二次提取后的余液中加入余液4倍量的水后进行第三次提取,提取时间为5小时;将三次提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;将一级滤液浓缩至90℃时相对密度为1.05的浓缩液;将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为990m/s。
本实施例得到的纳米美洲大蠊粒径在0~100nm,体表面积大,晶界处的原子数比率高达15~50%;经检测,该美洲大蠊纳米提取物的干燥品中含总氨基酸以丙氨酸(C3H7NO2)计为15.0%(质量百分比)。
参比实施例1
美洲大蠊提取物制剂的制备:
a、粗碎:将干燥的美洲大蠊进行粉碎,制得美洲大蠊粗粉,备用;
b、浸泡:按照每100kg的粗粉加入3~5倍量的水,在70~78℃的温度条件下浸泡0.5~2小时制得粗粉混合液,备用;
c、三次提取:粗粉混合液采用煎煮的方法进行三次提取,对粗粉混合液进行第一次提取时,提取时间为7~9小时;然后向经第一次提取后的余液中加入余液2~4倍量的水后进行第二次提取,提取时间为5~7小时;最后向经第二次提取后的余液中加入余液2~4倍量的水后进行第三次提取,提取时间为3~5小时,分别制得三次的提取液,备用;
d、第一次过滤:将三次的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液,备用;
e、第一次浓缩:将一级滤液浓缩至70~90℃时相对密度为1.05~1.25的一级浓缩液,备用;
f、醇化处理:向一级浓缩液中逐渐加入浓度为93~97%w/w的乙醇,并充分搅拌,使其含醇量达到45~55%为止,在70~90℃的温度条件下保温20~40分钟,然后静置10~14小时,制得醇化液,备用;
g、第二次过滤:将醇化液弃去上层油脂,下层药液进行过滤制得二级滤液,备用;
h、第二次浓缩:将二级滤液进行乙醇回收处理后,浓缩至70~90℃时相对密度为1.15~1.30的二级浓缩液,备用;
i、膏剂制备:将二级浓缩液在常压条件下浓缩至水分≤25~35%的膏剂,即得含美洲大蠊提取物,备用;
成药:按照有效成分混合物(美洲大蠊提取物):纯化水:甘油=1000g:800~1200ml:4~6ml的重量比向有效成分混合物中加入纯化水和甘油,充分搅拌均匀,经板框过滤,滤液煮沸30分钟后,分装成100ml/瓶或50ml/瓶,再经高温高压灭菌消毒,冷至室温,即得成药。
试验例:
以本发明提供的制备方法制备的纳米美洲大蠊为活性成分,加入药学上可接受的辅料或者辅助性成分制成用于治疗散瘀消肿病症的药物组合物,可以制成散剂、膏剂、片剂、胶囊等多种形式,以满足不同患者的用药习惯
以实施例1~4制备的纳米美洲大蠊为散剂。
上述散剂用于治疗散瘀消肿病症的临床试验数据:
一、患者分组资料:
消肿止血患者(包括原发性肝癌手术切除后复发或转移和经手术治疗需创面修复的患者)150例,符合诊断标准。随即分为治疗组和对照组,治疗组100例,男性55例,女性45例,年龄16~40岁;对照组50例,男性26例,女性24例,年龄16~40岁。两组患者年龄、性别和病程经统计学处理,差异无显著性意义,具有可比性。
二、治疗方法:
治疗组1~4:取按照实施例1、2、3、4中制备方法制得的纳米美洲大蠊散剂,作为治疗组1、2、3、4。口服,一次2-5g;一日3次;连续服用1个月;
对照组1:云南白药酊,云南白药集团股份有限公司生产,口服,一次3~5ml,一日3次;连续服用1个月。
对照组2:美洲大蠊提取物制剂,按照参比实施例1的方法制备,口服,一次10ml,一日3次;连续服用1个月。
三、疗效比较结果:
表1所示为六组在经过服用1个月后的疗效比较,治疗4组,对照2组,表2所示为六个组在15天和1个月疗效比较(表1和表2中n代表人数)。
评判指标:
治愈:术后创面周围水肿在规定时间内减轻或消失,创面经细菌培养检验,无感染,无毒性、过敏反应及其他不良反应,疼痛减轻或消失。
有效:减少换药次数以及引起的疼痛;缩短创面完全修复时间,创面疼痛减轻,水肿减轻。
无效:术后疼痛加重或无变化,创面未能止血,且出现并发症。
总有效率:指治愈率和有效率之和。
表1:
表2:
四、试验结论
表1所示为六组疗效比较,其中治疗组100例,总有效率分别为88.0%,88.0%,92.0%,96.0%,对照组100例,总有效率分别为84.0%,84.0%;治疗组均优于对照组。表2所示15天总有效率分别为32.0%,34.0%,36.0%,40.0%,28.0%,30.0% ,治疗组疗效均明显优于对照组。由此可见,纳米美洲大蠊为活性成分的药物组合物与传统工艺和传统药物方法相较,能更大限度的发挥药物疗效,取得理想的治疗效果。
本发明提供的以纳米美洲大蠊为活性成分的药物组合物,提高了细胞破壁率、比表面积、分子量小,能直接作用于病灶,显著提高其活性成分的溶出率和体内吸收率以及生物利用度,在缩短术后创面修复时间、减轻缓解疼痛、消肿止血方面起到积极的治疗效果。同时减少用药剂量,减少肝肾胃不良反应,值得临床推荐使用。
Claims (10)
1.一种纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
A、浸泡:将美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入美洲大蠊干燥虫体重量3~8倍的水,在70~78℃的温度条件下浸泡0.5~3小时;
B、脱脂:向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入浸泡液重量 1/200~1/1000的碱液进行脱脂;
C、加热:密闭多功能提取罐,煮沸30~60min;
D、冲洗:当多功能提取罐中的压力升至0.08~0.18Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为4~8;
E、提取:对步骤D得到的多功能提取罐中的溶液进行2~4次提取,每次提取时间为3~9小时;
F、第一次过滤:将步骤E中提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;
G、浓缩:将一级滤液浓缩至70℃~90℃时相对密度为1.00~1.25的浓缩液;
H、第二次过滤:将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;
I、超音速射流干燥:将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在30~70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为330~990m/s。
2.一种纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
A、浸泡:将美洲大蠊干燥虫体置于多功能提取罐中,加入美洲大蠊干燥虫体重量3~6倍的水,在70~78℃的温度条件下浸泡0.5~2小时;
B、脱脂:向上述美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入浸泡液重量 1/300~1/1000的NaOH进行脱脂;
C、加热:密闭多功能提取罐,煮沸30~60min;
D、冲洗:当多功能提取罐中的压力升至0.11~0.12Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为4~8;
E、三次提取:对步骤D得到的多功能提取罐中的溶液进行第一次提取,提取时间为7~9小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液2~4倍量的水后进行第二次提取,提取时间为5~7小时;最后向第二次提取后的余液中加入余液2~4倍量的水后进行第三次提取,提取时间为3~5小时;
F、第一次过滤:将步骤E中三次提取的提取液合并混合,然后进行过滤制得一级滤液;
G、浓缩:将一级滤液浓缩至70℃~90℃时相对密度为1.05~1.25的浓缩液;
H、第二次过滤:将浓缩液弃去上层油脂后,下层药液进行过滤得二级滤液;
I、超音速射流干燥:将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在30~70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为330~990m/s。
3.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤A中采用的美洲大蠊干燥虫体与水重量比为1:6。
4.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤A中,在水中浸泡美洲大蠊干燥虫体的时间为2小时。
5.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤B中,向美洲大蠊干燥虫体和水的浸泡液中加入浸泡液重量 1/300的NaOH进行脱脂。
6.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤C中,密闭多功能提取罐,开启夹层蒸汽及直气进行共同加热,煮沸60分钟。
7.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤D中冲洗方法为当多功能提取罐中的压力升至0.11~0.12Mpa时,反复加水冲洗至多功能提取罐中溶液的pH值为8。
8.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤E中的三次提取方法为对多功能提取罐中的溶液进行第一次提取,提取时间为9小时;然后向第一次提取后的余液中加入余液4倍量的水后进行第二次提取,提取时间为7小时;最后向第二次提取后的余液中加入余液4倍量的水后进行第三次提取,提取时间为5小时。
9.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤G中将一级滤液浓缩至70℃~90℃时相对密度为1.05的浓缩液。
10.根据权利要求2所述的纳米美洲大蠊的制备方法,其特征在于:步骤I中的超音速射流干燥方法为:将二级滤液置于喷雾干燥塔,采用超音射流技术在70℃,压力0~0.05Mpa下进行干燥即得纳米美洲大蠊;超音速射流速度为990m/s。
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CN101837018A (zh) * | 2010-05-25 | 2010-09-22 | 耿福能 | 一种治疗溃疡或溃疡性炎症的美洲大蠊药物组合物及其制备方法 |
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2012
- 2012-08-30 CN CN2013102426042A patent/CN103285040A/zh active Pending
Patent Citations (2)
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