CN103275023A

CN103275023A - 1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物及其制备和应用

Info

Publication number: CN103275023A
Application number: CN2013102310987A
Authority: CN
Inventors: 崔冬梅; 卓子健; 陈颖; 张辰
Original assignee: Zhejiang University of Technology ZJUT
Current assignee: Anhui Yongshengtang Pharmaceutical Co ltd; Guangdong Gaohang Intellectual Property Operation Co ltd
Priority date: 2013-06-08
Filing date: 2013-06-08
Publication date: 2013-09-04
Anticipated expiration: 2033-06-08
Also published as: CN103275023B

Abstract

本发明公开了一种1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物，如式（III）所示，并公开了其制备方法，及其在制备抗子宫颈癌药物中的应用。

Description

1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物及其制备和应用

（一）技术领域

本发明涉及一类新的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物及其制备和抗肿瘤的应用。

（二）背景技术

1,2,3-三氮唑类化合物是一类重要的杂环化合物，由于其独特的化学性质和生物活性，在医药、农药和工业方面都得到广泛的应用。在医方面包括抗癌活性，抗菌活性，抗病毒活性，抗HIV活性，抗惊厥等作用。在农药方面具有除草、脱叶、杀虫、杀真菌和杀线虫的活性；在工业方面作为荧光增白剂、抗腐蚀剂及润滑油添加剂等被广泛的使用。因此，制备新颖的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物并研究其抗肿瘤方面的应用具有重要的意义。

（三）发明内容

本发明提供了一类新的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物（III），具体如式（III）所示：

式（III）中，R₁为C1～C10的烷基、C3～C10的环烷基、C3～C10 的环烯基、苯基或苯环上有取代基的取代苯基，所述取代基为Cl或C1～C6的烷基。进一步，R₁优选为苯基、4-氯苯基或1-环己烯基，更优选为苯基或4-氯苯基；

R₂为C1～C10的烷氧基或C1～C10的烷基酰胺基，优选为甲氧基、乙氧基或乙酰胺基，更优选为甲氧基或乙酰胺基。

本发明还提供式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物的制备方法，所述方法为：将式(I)所示的芳香碘代物与叠氮化钠混合加入溶剂二甲基亚砜（DMSO）中，在金属铜的催化作用下，在二异丙胺和L-脯氨酸的存在下，在80～85℃温度下搅拌反应20～30小时，然后加入式(II)所示的端基炔类化合物，于55～60℃温度下搅拌反应30～40小时，反应结束后，反应液后处理制得式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物；所述式(I)所示的芳香碘代物、叠氮化钠、L-脯氨酸、二异丙胺、式(II)所示的端基炔类化合物的物质的量之比为1：2～2.2：0.2～0.22：2～2.2：1.1～1.2；

式（II）中，R₁为C1～C10的烷基、C3～C10的环烷基、C3～C10的环烯、苯基或苯环有取代基的取代苯基，所述取代基为Cl或C1～C6的烷基；优选R₁为苯基、4-氯苯基或1-环己烯基，更优选为苯基或4-氯苯基。

式（I）中，R₂为C1～C10的烷氧基或C1～C10的烷基酰胺基，优选为甲氧基、乙氧基或乙酰胺基，更优选为甲氧基或乙酰胺基。

所述金属铜的物质的量用量通常为式(I)所示的芳香碘代物的物质的量的5～6%。

所述反应液后处理方法为：反应结束后，反应液用乙酸乙酯萃取、饱和食盐水洗涤，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经柱层析分离，以石油醚、乙酸乙酯体积比5:1的混合溶剂为洗脱剂，收集Rf值为0.3～0.35的洗脱液，洗脱液减压蒸馏除去溶剂，干燥制得式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物。

所述溶剂DMSO的体积用量通常以式(I)所示的芳香碘代物的质量计为5～20mL/g。

本发明反应的反应式如下：

本发明提供的式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物具有抗肿瘤活性，可用于制备抗子宫颈癌药物中。进一步，本发明实施例数据表明，式（III-2）、式（III-3）所示化合物具有一定的抗子宫颈癌活性，可用于制备抗子宫颈癌药物。

本发明的有益效果主要体现在：（1）1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物的制备工艺简便，成本低，有着广泛的工业应用前景。（2）本发明所提供的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物显示一定的抗人子宫颈癌活性，为新药筛选及开发奠定了基础，具有较好的实用价值。

（四）具体实施方式

下面将通过实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围不限于此。

实施例1：化合物（III-1）的制备

在反应容器中加入对碘苯乙醚(0.5046g)，叠氮化钠(0.2638g)，L-脯氨酸（0.0450g)，二异丙胺（0.56ml)，铜(0.0065g)，在DMSO（3ml）中混合，80℃油浴中搅拌反应20小时；再加入苯乙炔（0.245ml），55℃油浴中搅拌反应30小时；反应结束后用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，饱和食盐水洗涤；合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经柱层析分离，以石油醚:乙酸乙酯体积比=5:1的混合溶剂为洗脱剂，收集Rf值0.3～0.35的洗脱液，减压蒸馏除去溶剂，干燥得到目标化合物（III-1）0.4138克，收率为77%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ8.12(s,1H),7.93-7.91(m,2H),7.68(d,J=9.0Hz,2H),7.49-7.46(m,2H),7.39-7.38(m,1H),7.04(d,J=9.0Hz,2H),4.11(q,J=7.0Hz,2H),1.47(t,J=7.0Hz,3H).

实施例2：化合物（III-2）的制备

操作同实施例1，只是将对碘苯乙醚换成对乙酰氨基碘苯(0.2684g)，其他原料为：叠氮化钠(0.1403g)，L-脯氨酸(0.0277g)，二异丙胺(0.28ml)，铜(0.0038g)，苯乙炔（0.13ml），制得目标化合物（III-2）0.1564克，收率为55%。

¹H NMR(500MHz,DMSO)δ10.24(s,1H),9.22(s,1H),7.96-7.94(m,2H),7.88(d,J=9.0Hz,2H),7.82(d,J=9.0Hz,2H),7.52-7.49(m,2H),7.40-7.37(m,1H),2.10(s,3H).

实施例3：化合物（III-3）的制备

操作同实施例1，只是将对碘苯乙醚换成对碘苯甲醚(0.2374g)，将苯乙炔换成4-氯苯乙炔(0.1516g)，叠氮化钠(0.1371g)，L-脯氨酸(0.0247g)，二异丙胺(0.28ml)，铜(0.0038g)制得目标化合物（III-3）0.1376克，收率为48%。

¹HNMR(500MHz,DMSO):δ9.25(s,1H),7.96(d,J=8.5Hz,2H),7.85(d,J=9.0Hz,2H),7.58(d,J=8.5Hz,2H),7.19(d,J=9.0Hz,2H),3.85(s,3H).

实施例4：化合物（III-4）的制备

操作同实施例1，只是将对碘苯乙醚换成对碘苯甲醚(0.2365g)，将苯乙炔换成1-环己烯乙炔(0.1223g)，叠氮化钠（0.1371g），L-脯氨酸（0.0247g)，二异丙胺（0.28ml)，铜（0.0038g)制得目标化合物（III-4）0.2102克，收率为82%。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.74(s,1H),7.63(d,J=9.0Hz,2H),7.02(d,J=9.0Hz,2H),6.63-6.62(m,1H),3.87(s,3H),2.47-2.44(m,2H),2.26-2.23(m,2H),1.82-1.78(m,2H),1.73-1.70(m,2H).

实施例5：抗Hela人子宫颈癌生物活性测试：人子宫颈癌细胞株

体外抗Hela人子宫颈癌活性测试方法：MTT法

A原理：细胞通过线粒体水解酶将噻唑兰（MTT）分解为不溶于水的蓝紫色结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜溶解，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，间接反映细胞的增殖情况和数量变化。

B细胞：人子宫颈癌细胞株Hela（购自中国科学院上海生命科学院细胞库）

C实验步骤：

1）样品的准备：对于可溶样品，每1mg用20μL DMSO溶解，取2uL用1000μL培养液（即步骤2.1中的培养基）稀释，使浓度为100μg/mL，再用培养液连续稀释至使用浓度。

2）细胞的培养

2.1）培养基的配制:每1000mL培养基中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。

2.2）细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％CO₂培养箱中培养，3～5d传代。

3）测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用

将细胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×10⁵/mL，加到96孔细胞培养板中，每孔100uL，置37℃，5％CO₂培养箱中培养。接种24h后，加入用培养基稀释的样品，每孔100μL，每个浓度加3孔，置37℃，5％CO₂培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/mL的MTT，每孔10μL，置37℃孵育4h，加入DMSO，每孔150μL，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件用不含样品，含同样浓度DMSO的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的半数致死浓度（IC₅₀），结果如表1所示。

以人子宫颈癌细胞株Hela肿瘤细胞为模型，以顺铂为阳性对照品，测定了实施例1～4中制备的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物（III-1）～（III-4）4个样品体外对人子宫颈癌肿瘤细胞生长的抑制作用。结果显示，本实验所测试的样品中，化合物（III-2）、（III-3）对实验所用的Bewo肿瘤细胞有一定的抑制作用（结果详见表1）。表1各化合物对Hela的IC₅₀（ug/mL)

实施例	化合物	IC₅₀
			1	（III-1）	>50
2	（III-2）	20.43
			3	（III-3）	45.24
4	（III-4）	>50
			6	顺铂	0.57

Claims

1.一种式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物：

式（III）中，R₁为C1～C10的烷基、C3～C10的环烷基、C3～C10的环烯基、苯基或苯环上有取代基的取代苯基，所述取代基为Cl或C1～C6的烷基；

R₂为C1～C10的烷氧基或C1～C10的烷基酰胺基。

2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述式（III）中，R₁为苯基、4-氯苯基或1-环己烯基。

3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述式（III）中，R₂为甲氧基、乙氧基或乙酰胺基。

4.如权利要求1所述的式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物的制备方法，其特征在于所述方法为：将式(I)所示的芳香碘代物与叠氮化钠混合加入溶剂二甲基亚砜中，在金属铜的催化作用下，在二异丙胺和L-脯氨酸的存在下，在80～85℃温度下搅拌反应20～30小时，然后加入式(II)所示的端基炔类化合物，于55～60℃温度下搅拌反应30～40小时，反应结束后，反应液后处理制得式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物；所述式(I)所示的芳香碘代物、叠氮化钠、L-脯氨酸、二异丙胺、式(II)所示的端基炔类化合物的物质的量之比为1：2～2.2：0.2～0.22：2～2.2：1.1～1.2；

式（II）中，R₁为C1～C10的烷基、C3～C10的环烷基、C3～C10的环烯、苯基或苯环有取代基的取代苯基，所述取代基为Cl或C1～C6的烷基；

式（I）中，R₂为C1～C10的烷氧基或C1～C10的烷基酰胺基。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述金属铜的物质的量用量为式(I)所示的芳香碘代物的物质的量的5～6%。

6.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述反应液后处理方法为：反应结束后，反应液用乙酸乙酯萃取、饱和食盐水洗涤，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩后经柱层析分离，以石油醚、乙酸乙酯体积比5:1的混合溶剂为洗脱剂，收集Rf值为0.3～0.35的洗脱液，洗脱液减压蒸馏除去溶剂，干燥制得式（III）所示的1-芳基-1,2,3-三氮唑类化合物。

7.如权利要求1～3之一所述的式（II）所示的1-苄基-1,2,3－三氮唑类化合物在制备抗子宫颈癌药物中的应用。