CN103239452A - 一种溴甲基纳曲酮药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种安全性高的溴甲基纳曲酮的药物组合物，具体包括溴甲基纳曲酮和式Ⅱ、式Ⅲ所示结构化合物。本发明进一步分离、纯化和表征了溴化甲基纳曲酮相关物质的结构和活性，发现式Ⅱ，式Ⅲ所示结构化合物是引起溴化甲基纳曲酮药物胃肠道不良反应的主要物质。

式Ⅱ

Description

一种溴甲基纳曲酮药物组合物

技术领域

本发明涉及药物化学合成领域，具体为一种溴化甲基纳曲酮药物组合物。

背景技术

溴甲基纳曲酮 (CAS 编号：73232-52-7)，英文俗名 ：Methylnaltrexone  bromide，化学名 ： (R)-N-(cyclopropylmethyl)noroxymorphone  methobromide，中文化学名：溴化 -17-(环丙基甲基)-4.5α-环氧-3，14-二羟基-17-甲基-6-氧代吗啡喃；分子式：C21H26NO4Br，分子量 436.36，缩写为(R)-MNTX，其化学结构式如下 ：  

式Ⅰ

溴甲基纳曲酮于上世纪 70 年代由美国芝加哥大学学者首次合成， 他们在偶然试验中发现溴甲基纳曲酮具有良好的外周阿片受体阻断作用。由美国 Progenics 公司进行了后续研发而成为第一个外周性阿片受体拮抗剂， 其拮抗阿片类药副反应的作用良好， 本身没发现有毒副作用， 同时不减弱阿片类药的中枢镇痛效应。其后Progenics公司联合惠氏公司共同研发推广， 于2008年4月24日通过标 准审批程序获得美国 FDA 批准， 商品名为“Relistor”， 用于皮下注射， 治疗阿片类药物引起的便秘 (opioid-induced constipation,OIC) 而使用轻泻药又无效的情况。2008年9月在英国上市，同年10月在加拿大和美国上市。

溴甲基纳曲酮禁用于已知或疑似患机械性胃肠道梗阻或紧急腹部外科手术患者，其在临床研究中的不良反应包括腹痛，气胀，恶心，眩晕和腹泻等。

有关溴化甲基纳曲酮公开的合成专利有US4176186、WO2004/43964、WO2006/127899（CN101208344A）、WO2008/034973（CN101516892A）、CN101607963、CN101845047、CN10037941、CN 102351876 A。

专利US4176186 存在原料反应不完全，副反应产生大量的酚羟基烷基化产物未能有效利用， 后处理复杂收率低等缺点。

专利WO2004/43964公开的方法原料反应不彻底， 易产生酚烷基化副产物， 精制收率偏低，且溴甲烷操作复杂不易放大制备生产。

专利 WO2006/127899（CN101208344A）克服了产生酚烷基化副产物的缺点， 但反应步骤长，中间体后处理需要过柱纯化， 季胺化直接在碘甲烷中进行， 需要在压力容器中进行且反应不完全， 仍存在收率不高等缺点。

WO2008/034973（CN101516892A）的方法虽然提高了收率，但采用了具有强烈催泪作用的溴苄和加氢脱苄的不利于工业化放大生产的工艺， 同时碱处理制备季胺碱的过程中， 季铵盐在碱性条件下不稳定易发生霍夫曼降解产生杂质。

CN101607963A 的路线长而复杂，成本较高，季胺化试剂三氟甲磺酸甲酯、甲磺酸甲酯昂贵不易得到。

由于溴化甲基纳曲酮在合成过程中，易产生一些副产物和杂质，所得到化合物药物非纯物质，使药物活性成分存在着无效、拮抗甚至是腹痛、气胀、恶心呕吐、腹泻等毒副作用物质，影响了治疗效果，危害用药健康。

发明内容

为此，本发明进一步分离、纯化和表征了研究溴化甲基纳曲酮相关物质的结构和活性，得到惊人的发现，药理实验证实，溴甲基纳曲酮的降解产物式Ⅱ，式Ⅲ所示结构化合物是引起溴化甲基纳曲酮药物胃肠道不良反应的主要物质。

  式Ⅱ        

式Ⅲ

本发明对式Ⅱ、式Ⅲ所示结构化合物进行药理毒理试验，试验证实这两个化合物具有较低的LD₅₀值，一定剂量可致小鼠死亡，该物质具有一定毒性，可引起腹痛、呕吐等不良反应，是引起溴化甲基纳曲酮药物副作用的关键物质，因此需控制其降解产物的量提高溴化甲基纳曲酮药物的稳定性和安全性。

本发明涉及一种溴甲基纳曲酮药物组合物，该药物组合物由溴甲基纳曲酮和含量不高于0.1%的式Ⅱ和含量不高于0.1%的式Ⅲ所示结构的化合物。

进一步，所述药物组合物中溴甲基纳曲酮的含量不低于95%，优选不高于98%，更优选不高于99.5%。

进一步，所述药物组合物中式Ⅱ所示化合物的含量不高于0.2%，优选不高于0.1%，更优选不高于0.05%。

进一步，所述药物组合物中式Ⅲ所示化合物的含量不高于0.3%，优选不高于0.2%，更优选不高于0.05%。

本发明提供一种溴化甲基纳曲酮的含量不低于99.5%，含量不高于0.1%的Ⅱ所示化合物，含量不高于0.1%的式Ⅲ所示化合物的制备方法。 

本发明的另一目的提供一种式Ⅱ，式Ⅲ所示杂质化合物的制备方法，可作为对照品，用于控制溴化甲基纳曲酮及其制剂的质量检测与检验。

进一步，所述的Ⅱ所示化合物的制备，是溴甲基纳曲酮经30%双氧水氧化反应得到。

进一步，所述的氧化反应，反应溶剂为PH8.0的钨酸缓冲液。

进一步，所述药物组合物中式Ⅲ所示化合物的制备，是由溴甲基纳曲酮霍夫曼消除反应降解得到。

进一步，本发明提供一种安全性高的药物组合物，由所述溴化甲基纳曲酮药物组合物与药学上可接受的载体组成。

本发明的药物制剂选自：口服制剂、外用制剂或注射制剂的一种或几种。优选为口服剂和注射剂。口服剂包括片剂、分散剂、泡腾片、双层片、缓释片、六安胶囊、硬胶囊、颗粒剂、散剂、丸剂等。优选为片剂。所述注射剂选自注射液、注射无菌粉末和注射用浓溶液，优选注射液。可用于皮下注射、肌肉注射、静脉注射、静脉滴注等，优选皮下注射。本发明注射液的规格选自0.6ml、1.0ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml。

本发明药物制剂可谓单位制剂，以溴化甲基纳曲酮计，含有溴化甲基纳曲酮作为药物活性成分0.1-200mg，优选1-100mg，更优选10-50mg。

本发明所述药学上可接受载体为本领域用于制备所述制剂的常用赋形剂或辅。包含但不限于填充剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、粘合剂、崩解剂、抗氧剂、乳化剂、防腐剂等。填充剂，如：淀粉、乳糖、可压性淀粉、微晶纤维素等。润滑剂，硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉等。粘合剂，包括淀粉浆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等。崩解剂包括干淀粉、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、泡腾崩解剂等。抗氧化剂包括：丁羟基茴香醚、丁羟基甲苯、硫二丙酸、亚硫酸盐、二硫代氨基甲酸盐等。乳化剂包括：硬脂酸钠、硬脂酸钾、油酸钠、硬脂酸钙、十二烷基硫酸钠、十六烷基硫酸化蓖麻油、单甘油脂脂肪酸、聚山梨酯、氢氧化镁、肥皂土等。防腐剂，包括：尼泊金类、苯甲酸盐、山梨酸、苯扎溴铵、醋酸氯已定。

进一步，本发明的溴化甲基纳曲酮药物组合物可用于治疗阿片类药物引起的便秘而使用轻泻药又无效的情况。

附图说明

图1溴甲基纳曲酮的液相图谱

图2式Ⅱ所示结构化合物和式Ⅲ所示结构化合物的分离液相图谱

具体实施方式

实施例1 溴化甲基纳曲酮的制备

将10.09g盐酸纳曲酮溶于二氯甲烷70ml，加入三乙胺4.0ml，反应瓶中充氮气保护，常温搅拌0.5h，冰浴冷却，控制温度5℃-10℃，缓慢滴加六甲基二硅亚胺5.6ml。反应结束处理后得白色固体9.77g,收率 93.3%。

将上述产物10.00g，溶于80ml丙酮中，搅拌下缓慢滴加10.99g硫酸二甲酯，滴加完，加热升温回流3h。得黄色固体12.15g，收率89.44%。

取5.4g上述产物，溶于54ml甲醇-水（2:1，v:v）溶液中，常温搅拌，加入47%氢溴酸10.8ml，冰浴加热并搅拌，控制温度60-65℃。得N-甲基 纳曲酮硫酸盐/氢溴酸盐水溶液。

取717型强碱性阴离子交换树脂50g，装柱，将150ml的4%氢氧化钠溶液通过树脂柱，以水冲洗树脂柱，直到流出液PH值接近中性，将150ml的4%氢溴酸水溶液通过树脂柱，以水冲洗树脂柱，直到流出液PH值接近中性，PH=6，将上述所得产物约75ml，通过树脂柱，分瓶收集洗脱液。分别取样，滴加氯化钡溶液，合并各瓶洗液。将树脂放干，流出液并入洗脱液，分别用氯化钡溶液对各组分进行硫酸根离子检测，均未检出硫酸根。将洗脱液合并得到约100ml无色溴化甲基纳曲酮水溶液，抽滤蒸干，投入20ml预冷的甲醇，冰浴保持5~10℃，搅拌1h，使溴化甲基纳曲酮充分结晶析出。真空干燥6h,得白色粉末3.04g,收率70.5%。

液相图谱见附图1。

实施例2式Ⅱ所示化合物的制备

将溴甲基纳曲酮为原料5.0g加入PH8.0钨酸缓冲液中，滴加30%双氧水1ml，常温搅拌。得产物4.05g，收率88.2%。制备薄层检测反应，反应结束后奋力纯化得到Ⅱ所示化合物。对其进行结构鉴定（1H NMR）

结构确证：仪器（Bruker AVANCE-600型核磁共振仪）；溶剂DMSO

¹H-NMR δ7.30（1H，d），6.57（1H，d），6.37（1H，d），5.05（,2H，s），4.44（1H，s），3.58（3H，t），3.51（2H，s），3.32（1H，t），2.64（2H，t）, 2.52（2H，t），1.93（2H，t），1.37（1H，t），0.77（2H，q）, 0.74（2H，q）。

实施例3  式Ⅲ所示化合物的制备

将溴化甲基纳曲酮5.0g溶解于100ml水，加入5ml 30%NaOH溶液，加热分解，温度70℃，制备薄层监测反应，反应完成后用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷层，无水硫酸钠干燥，过滤蒸干，得黄色固体；制备液相制备分离杂质（与主峰相对保留时间为2.5，液相图谱见附图2），减压蒸干，得杂质。

结构确证：质谱（ESIMS）；仪器：microTOFQ，Bruker Daltonics，USA；

测试条件：采用电喷雾(ESI)离子化源；正负离子方式检测； 

测定结果： M/Z=385，367（脱水）；与分子结构相符。

实施例4 杂质的分离纯化

制备液相分离方法：

流动相：A=水：MeOH:TFA(95：5：0.1%);B=水:MeOH :TFA(35：65：0.1%)。

表1 梯度洗脱的流动相控制

时间（分钟）	流动相A（%）	流动相B（%）
			0	100	0
45	50	50
			48	100	0
55	100	0

式Ⅱ所示结构化合物，式Ⅲ所示结构化合物的分离纯化方法统一为上述方法。

实验结果：式Ⅱ所示结构化合物与主峰的相对保留时间为0.89；式Ⅲ所示结构化合物与主峰的相对保留时间为2.5。

溴化甲基纳曲酮的含量为99.5%，式Ⅱ所示结构化合物含量为0.05%；式Ⅲ所示结构化合物0.08%。液相图谱见附图2。

实施例5 溴化甲基纳曲酮相关物质毒性研究

昆明中小鼠，60只，雌雄各半，体重18-22g。试验动物分4组，分别是对照组、溴化甲基纳曲酮组、式Ⅱ所示结构化合物组、式Ⅲ所示结构化合物组。对照组采用生理盐水。全部的药物采用尾静脉注射，首先用上下法评估受试动物的剂型毒性剂量，然后进行主试验，观察动物死亡时间及其死亡数量，计算LD₅₀值。结果如下：

表2 溴甲基纳曲酮及式Ⅱ、式Ⅲ所示结构化合物的LD₅₀值

化合物	LD50  （mg/kg)
		溴化甲基纳曲酮	3085
式Ⅱ所示结构化合物组	42
		式Ⅲ所示结构化合物组	37

从实验结果可以看出，溴化甲基纳曲酮的LD₅₀值远远大于降解杂质，因此，式Ⅱ所示结构化合物、式Ⅲ所示结构化合物是造成溴化甲基纳曲酮药物制剂的不良反应的主要物质。

实施例6 胃肠道不良反应

选取健康小鼠80只，体重18 ~ 22g，实验前禁食12 小时，雌雄各半, 平均分为4组，分别是对照组、溴化甲基纳曲酮组、式Ⅱ所示结构化合物组、式Ⅲ所示结构化合物组，对照采用生理盐水，每组20 只, 腹腔皮下注射给药，连续给药5天，每日两次，从第一次给药时间开始计算，观察并记录给药后小鼠活动及反应情况。

剂量设计：5g溴甲基纳曲酮药物加入到250ml的0.9%氯化钠溶液中，制备成供注射药物。根据人体临床用药剂量，折合动物用药剂量，药物组受试动物注射0.75ml/只；杂质组考虑到LD₅₀值较小，毒性较大，降低10倍剂量，0.5 g式Ⅱ所示结构化合物、0.5g式Ⅲ所示结构化合物分别加入到250ml的0.9%氯化钠溶液中，制备成供注射药物，以0.75ml/只注射。

观察指标：累计身体扭曲、呕吐次数。试验结果见表3。

表3 溴化甲基纳曲酮有关物质的胃肠道反应试验结果

*P<0.01

从实验结果可知，溴甲基纳曲酮对受试动物几乎无不良反应，而杂质式Ⅱ、式Ⅲ所示结构化合物导致严重的腹痛、呕吐等不良反应。因此，初步确定式Ⅱ、式Ⅲ所示结构化合物是导致溴化甲基纳曲酮药物不良反应的主要物质。

Claims (8)

1.一种溴甲基纳曲酮药物组合物，包含溴甲基纳曲酮以及式Ⅱ所示结构化合物和式Ⅲ所示结构化合物；

式Ⅱ      

式Ⅲ。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，溴化甲基纳曲酮含量不低于95%，式Ⅱ所示结构化合物含量不高于0.2%，式Ⅲ所示结构化合物含量不高于0.3%。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，溴化甲基纳曲酮含量不低于98%，式Ⅱ所示结构化合物含量不高于0.1%，式Ⅲ所示结构化合物含量不高于0.2%。

4.根据权利要求1-3所述药物组合物，所述药物组合物包括含量不低于99.5%的溴甲基纳曲酮、含量不高于0.05%的式Ⅱ所示结构化合物和含量不高于0.05%的式Ⅲ所示结构化合物，其余为其他物质。

5.含有权利要求1所述的溴甲基纳曲酮药物组合物和药学上可接受的辅料形成的药物组合物，其特征在于选自口服制剂、外用制剂和注射剂中的一种或几种。

6.权利要求6所述的药物组合物，其中的口服制剂，包括片剂、分散片、泡腾片、双层片、多层片、缓释片、软胶囊、硬胶囊、颗粒剂、散剂、丸剂、干混悬剂、悬浮剂、糖浆剂。

7.权利要求5所述的药物组合物，其中的注射剂选自注射液、注射用无菌粉末和注射用浓溶液，可用于皮下注射、肌肉注射、静脉注射、静脉滴注等。

8.权利要求1-7中任一权利要求所述溴甲基纳曲酮药物组合物在治疗阿片类药物引起的便秘而使用轻泻药又无效的情况时药物方面的应用。

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