CN103211141A - 一种口服抗缺氧耐疲劳组合物在保健品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及保健食品领域,尤其涉及D-核糖、L-肉碱、维生素C、精氨酸、牛磺酸、乙酰谷酰胺、烟酰胺以及矫味剂等为成分的保健品食品,通过实验筛选出合理的处方有效组合比例,以使处方功效产生协同作用,从而有效发挥抗缺氧耐疲劳的保健作用,帮助亚健康者或者进入高原者重新获得生命活动所需的充足能量,恢复机体应有的活力。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品领域,尤其涉及D-核糖、L-肉碱、维生素C、精氨酸、牛磺酸、乙酰谷酰胺、烟酰胺以及矫味剂等为成分的保健品食品,用于亚健康人群及进入高原人群的抗缺氧耐疲劳的保健品组合物。
背景技术
中国保健协会陈重在总结氧气对人类健康的重要性时,阐释了氧参与人体新陈代谢,是正常生命活动不可缺少的物质。成人在静息状态下,每分钟耗氧量约250ml;活动时,耗氧量增加。但人体内氧储量极少,必须依赖于外界环境氧的供给和通过呼吸、血液循环不断地完成氧的摄取和运输,以保证细胞的需要。当人体组织得不到充足的氧,或不能充分利用氧时,细胞、组织、器官的代谢、机能、甚至形态结构都可能发生异常变化,这一病理过程就称为缺氧。保健品的功能之一就是对抗缺氧,避免病变的进一步发展。
缺氧的表现
轻度缺氧表现为注意力不集中、易走神、犯困;经常无故出虚汗;到空气污浊、相对较密封的场所就感觉胸闷、气喘、心烦。
中度缺氧表现为稍加运动就大喘不止;经常感到腰酸腿疼、食欲不佳、肠胃不好;口臭、便秘、容易疲倦、经常失眠、头晕眼花、健忘、早起后感到腰酸背疼等。
重度缺氧表现为平时感到胸闷、气短、心慌,活动时加剧,心脏常不舒服,会突然心慌,记忆力减退,精神疲倦、乏力,蹲下或静坐后站起时头晕目眩、眼前发黑。
病理性缺氧多指患呼吸系统疾病、心脑血管疾病的病人,由于从外界摄取氧和通过血液输送氧的能力下降,造成机体缺氧。如冠心病、心肌梗塞、急性上呼吸道感染、慢性支气管炎等。
生理性缺氧指人到中年,随着年龄的增长,各器官生理性老化,直接造成人体摄入氧量降低,利用氧的效率降低,身体处于程度不同的慢性缺氧状态。人到老年,与年轻人相比血管腔狭窄,血管弹性降低,血流量减少,肺活量下降,运气功能大大下降。老年人摄入氧量减少,运送氧的能力降低,利用氧的效率下降,整个身体组织处于不同程度的缺氧状态,缺氧正是老年人容易发生脑、心、肝、肾功能降低的病理基础。
运动性缺氧紧张的体力和脑力活动会造成机体耗氧量增加,这样,由于体内耗氧量急剧增加,单纯地通过肺呼吸,不足以弥补体内的氧耗量,使细胞处于缺氧环境中,同时伴随大量乳酸产生,这就是为什么大量体力运动或紧张的脑力劳动后容易腰酸背痛的原因。
环境性缺氧正常情况下,大气中的氧含量是20.9%。如果处在一个氧含量低于18%的环境中,人体摄入的氧气不足,血液中的氧分压过低,血红蛋白处于不饱和状态,各部分组织的细胞就会由于供氧不足出现一定的变化,表现出相应的缺氧症状。一般说来,凡是氧含量 低于20.9%的环境,都是缺氧环境。即便是轻度缺氧的环境,长期在其中生活、工作,也会对身体健康带来不同程度的损伤。
另外还有一类缺氧环境是由于高原、高空的空气稀薄造成的。尽管在高原、高空大气当中,氧气的比例仍旧是20.9%,但是随着海拔高度增加,空气密度降低,氧气的绝对量也相应减少。
缺氧对机体是一种劣性刺激,影响机体各种代谢,特别是影响机体的氧化功能,最终会导致机体的心、脑等主要器官缺氧供给不足而死亡。目前,国家通过常压耐缺氧、亚硝酸钠中毒、急性脑缺血性缺氧三个动物实验认定“耐缺氧”的保健功能。如果三项实验中任意两项实验显示为阳性,就说明该产品有提高缺氧耐受性的保健功能。
有文献总结出人体缺氧后,主要危害集中表现在:
1、对中枢神经系统的影响
脑组织对缺氧极其敏感,耐受性最差,在体温37℃时循环停止3-4min,脑组织就可能遇到不可逆的损害。中度缺氧时可有疲劳、表情忧郁、淡漠、嗜睡等抑制症状,或多语、哭笑无常、语无伦次等精神症状,还可发生视力模糊、发音困难、共济失调、甚至引起脑水肿、颅内压升高,患者出现昏迷,终至细胞死亡。
2、对心脏的影响
心肌的耗氧量最大,也对缺氧最敏感。中度缺氧可反射性地刺激心脏,使心率增快、排血量增加,血压升高。严重缺氧又可使心肌内乳酸积聚,心肌收缩力下降,心率减慢,血压下降,心排血量降低。原有冠心病者,缺氧后心肌变性,易诱发心脏坏死,导致心肌梗死,严重者并发心律失常、室颤,甚至心脏停跳。
3、对呼吸的影响
急性缺氧可刺激主动脉体、颈动脉窦化学感受器,使呼吸加深加快,严重缺氧可抑制呼吸中枢,甚至呼吸停止;缺氧损害血管内皮细胞,可使肺毛细血管通透性增强,严重时可导致肺水肿;缺氧使II型肺泡上皮细胞分泌表面活性物质减少,导致肺不张和肺内分流的加重;使支气管粘膜上的肥大细胞增加,生物活性介质和5-羟色胺、前列腺素、组织胺、白细胞三烯的分泌增多,引起支气管平滑肌痉挛;使肺血管收缩,肺动脉压升高,长期的肺动脉压升高,必然导致右心室肥厚和肺源性心脏病。
4、对肝、肾功能的影响
急性严重缺氧,可引起肝细胞水肿、变性和坏死,使转氨酶、乳酸脱氢酶升高;慢性严重缺氧,可诱发肝纤维化,使肝脏缩小,肝功能障碍;缺氧使肾血管收缩,肾血容量减少,肾小球滤过率降低,致使尿量减少并可发生氮质血症;肾脏缺氧时,肾小管上皮细胞出现水肿、水样变性,重者发生肾小管上皮细胞坏死而导致急性肾功能不全;慢性缺氧还可通过肾球旁细胞产生促细胞生成素因子,刺激骨髓引起继发性红细胞增多。
5、对其他方面的影响
缺氧时细胞内线粒体的氧分压降低,氧化过程发生障碍,无氧糖酵解过程加快,致大量的乳酸、酮体和无机磷积蓄,引起代谢性酸中毒。使体内儿茶酚胺增多,继发醛固酮增多,导致血容量增加。
但人体内氧储量极少,必须依赖于外界环境氧的供给和通过呼吸、血液循环不断地完成氧的摄取和运输,以保证身体各器官细胞对氧的需要。
成人在静息状态下,每分钟耗氧量约250ml,当人体组织得不到充足的氧,或不能充分利用氧时,细胞、组织、器官的代谢、机能、甚至形态结构都可能发生异常变化,这一病理过程就称为缺氧。保健品的功能之一就是对抗缺氧,避免病变的进一步发展。
轻度缺氧表现为注意力不集中、易走神、犯困;经常无故出虚汗;到空气污浊、相对较密封的场所就感觉胸闷、气喘、心烦。
中度缺氧表现为稍加运动就大喘不止;经常感到腰酸腿疼、食欲不佳、肠胃不好;口臭、便秘、容易疲倦、经常失眠、头晕眼花、健忘、早起后感到腰酸背疼等。
重度缺氧表现为平时感到胸闷、气短、心慌,活动时加剧,心脏常不舒服,会突然心慌,记忆力减退,精神疲倦、乏力,蹲下或静坐后站起时头晕目眩、眼前发黑。
高原适应不全症主要就是缺氧的问题。我国高原地区气压低、氧含量低、气候寒冷、紫外线辐射强等多种恶劣环境因素,这些恶劣环境因素对人的机体生理功能、生化代谢、包括营养代谢均会产生明显的影响,与营养代谢密切相关的消化系统的功能也出现明显改变,出现强烈的高原反应。
人的机体缺氧,对人的身体是一种最大的负面刺激,导致机体的心、脑等主要器官因缺氧供能不足而衰歇死亡,尤其老年人则常受到心脏病、冠状动脉疾病等引起的缺氧威胁。
氧分压与勃起功能障碍
海绵体是由高容量的结缔组织(占48%-55%)构成的特殊血管床,其中平滑肌是阴茎勃起功能的组织学基础,因为海绵体回流静脉的关闭必须依赖平滑肌。海绵体功能性平滑肌含量小于37%的ED病人,给予双剂量的缩血管活性剂,仍发生弥漫性静脉漏。说明不管平滑肌的张力如何,其含量低至一定程度,即不能关闭回流静脉。维持平滑肌与结缔组织含量比平衡的主要因素有,血管活性因子、细胞因子、激素和/或神经递质。
近年来对转化生长因子(transforming growth factor,TGF-β1)和前列腺素E(PGE1)的研究报告较多。两者均是小梁平滑肌细胞合成的血管活性因子,合成速度受氧分压调节。阴茎非勃起状态的低氧分压诱导TGF-β1生成;而勃起状态的高氧分压使PGE1的合成增加3倍。人类阴茎海绵体平滑肌细胞培养发现,在细胞合成胶原蛋白过程中,低氧分压可诱导TGF-β1的合成增加2.5-4倍,而且这种合成可被单剂量的PGE1抑制。
人类和动物ED模型证明,长时间的低氧分压可导致海绵体回流静脉关闭不全而发生ED,而且随ED程度的加重,小梁结缔组织含量增加,而平滑肌细胞数减少。说明氧分压不仅影响海绵体功能,而且影响其结构。因此不管是否有性活动,夜间阴茎勃起为海绵体提供的高氧分压环境,可维持小梁功能性平滑肌与结缔组织的含量比平衡。正常健康男性每夜有3-5次阴茎勃起,与快速动眼睡眠次数一致。而夜间阴茎勃起缺乏(睡眠呼吸暂停综合征)或被干扰(嗜睡症 和癫痫症),很可能发生ED。一个特别有趣的研究发现,33%睡眠呼吸暂停综合征并ED的病人,在接受连续正压呼吸治疗后,夜间阴茎勃起恢复正常,ED好转。
供氧不足和低氧分压可导致阴茎海绵体神经病变,进而加重ED。骶髓副交感神经引起阴茎动脉扩张和海绵体平滑肌松弛,胸段交感神经传出支控制平滑肌和阴茎动脉收缩。严重缺氧病人,无髓鞘神经纤维退化,表现为轴突密度降低和形态变小,并伴有无轴突的Schwann细胞增生。慢性呼吸功能不全病人,可能有神经源性ED的存在。糖尿病人的ED主要是神经病变,交感和副交感神经都可能受糖尿病的影响,因为糖尿病时毛细血管闭塞和内皮增生,导致神经组织缺氧。
很多研究报道都表明,采用适当的营养补充措施,可以达到减轻机体缺氧,尤其对高原反应更加有效,增强高原适应能力。
国际上关于低氧的研究主要集中于低氧遗传适应、氧感受信号传导、间歇性低氧和高原病的防治等几个重要研究方向。一方面向细胞生物学和分子生物学发展,另一方面注重整体综合研究,为此出现了多个学科互相渗透、互相交融的研究局面。
有关低氧与健康的问题也受到国内很多研究人员的关注,其研究工作主要包括低氧诱导因子、细胞凋亡及间歇性低氧、低压低氧等几个研究热点,有关抗疲劳耐缺氧的保健品研究也得到了广泛深入的重视。
专利文献CN101356971A公开了一种用于抗疲劳耐缺氧的保健品组合物,该组合物尤其涉及以L-肉碱、D-核糖为主功效成分,为了充分发挥D一核糖与L一肉碱的保健功能,使该组合物迅速发挥疗效,使处于疲劳状态下或者缺氧状态下的人群较快的得到恢复,该发明的维力保健食品组合物优选制成口服溶液。
专利文献CNI01356972A公开了一种抗疲劳、耐缺氧的运动保健品,该保健品由活性成分西洋参提取物和L一肉碱组成,该品属于成分明确、无毒、无兴奋剂作用的抗疲劳、耐缺氧的保健品。
专利文献CN1682715A公开了一种抗缺氧药物组合物,其主要组分为牛磺酸、维生素C、或精氨酸中的至少两种组合而成的抗缺氧及防治肺动脉高压的药物组合物。
专利文献CN1778291A公开了口服过碳酰胺给氧剂的制备方法,其主要成分为过碳酰胺和脱乙酰甲壳素,制成片剂、颗粒剂、胶囊剂或者液体制剂。
专利文献CNI02406722A公开了一种抗缺氧药物组合物及制备方法,涉及一种含有红景天、葛根的药物组合物,以及该药物组合物在抗缺氧药物制备中的应用。
发明内容
本发明提供了一种配方合理、成分明确、无毒的抗缺氧、耐疲劳的保健品,由活性成分L一肉碱、D-核糖、维生素C、精氨酸、牛磺酸、乙酰谷酰胺、烟酰胺以及矫味剂等为成分组成的保健品食品。该配方通过查新,尚未在国内外相关文献检索到本发明的处方文献。
本发明选用D一核糖、L一肉碱、维生素C、精氨酸、牛磺酸、乙酰谷酰胺、烟酰胺作为功效成分,通过实验筛选出合理的处方有效组合比例,以使处方功效产生协同作用,从而有效发挥抗缺氧耐疲劳的保健作用,帮助亚健康者或者进入高原者重新获得生命活动所需的充 足能量,恢复机体应有的活力。
所述矫味剂选自食品可接受的辅料,尤其为国家规定可用于食品的添加剂,优选以下物质:甘露醇、柠檬酸、阿斯巴坦、甜蜜素、木糖醇、甜菊苷、草莓香精、赤鲜糖醇、菠萝香精、甜橙香精、水蜜桃香精、青苹果香精、西瓜香精等,其中优选柠檬酸、木糖醇、阿斯巴坦、甜菊苷、草莓香精。以上所述矫味剂物质,可以是单一物质,也可以是两种或者两种以上的混合物。
根据本发明配方,结合文献将各组分进行分析,结果如下:
D-核糖:一种五碳糖,存在于一切细胞中,是生物体内物质代谢和能量代谢的重要物质。D-核糖是mRNA、RNA、5sRNA等各种RNA以及许多辅酶在内的核苷衍生物的构成成分。九十年代末,人们发现D-核糖具有快速恢复肌肉组织ATP合成的能力。ATP是人体中的通用能量,在进行强体力活动以及缺氧时,ATP会降解为前体物质,这些前体物质会从细胞中流失,使ATP在短期内无法达到正常水平,使人感到无力、疲劳。任何引起肌肉细胞氧气压力局部缺氧降低的都会损耗细胞能量储备。能量的减少会破坏钙的流向管理,引起肌肉紧张、僵硬、疼痛和疲劳。细胞内Ca++的增加引起K+的流失,这就会刺激细胞膜上疼痛感受部位器。疼痛进一步增加肌肉紧张,加重能量损耗,导致恶性循环。慢性局部缺血、缺氧或者频繁的高强度训练会使嘌呤从细胞中流失,并且降低细胞能量负荷。组织缺氧的频率和严重程度决定了能量损耗的速度和程度。对未经训练的人来说,一次高强度训练就足以耗尽能量储备,引起肌肉僵硬和疼痛。对受过训练的人来说,多日频繁的高强度锻炼也会产生这种后果。对运动员来说,能量耗尽会导致训练过度,引起肌肉疼痛、虚弱和肌肉的生理损伤。D-核糖的摄入可以防止ATP前体物质的流失、迅速恢复机体ATP的水平,使机体能够迅速获得生命活动所需的充足能量。在高强度的训练之后,肌肉组织中ATP的水平会降低60%-70%,要恢复到正常水平需3天时间,如果食用了D-核糖,可在24小时内快速恢复正常ATP水平。D-核糖还可以使经受缺血损伤的心肌快速恢复ATP水平。
当组织面对代谢压力时,补充核糖能加速细胞能源恢复,刺激嘌呤新陈代谢。低氧状况会引起肌肉功能和性能的各种生理状况,包括:
1、肌肉僵硬、疼痛、虚弱以及从锻炼中恢复缓慢;
2、细胞膜和肌肉纤维损伤;
3、水肿,肿胀和电化学混乱;
4、蛋白酶和磷脂酶攻击细胞;
5、形成自由基和损害细胞膜、线粒体等组织结构;
6、延迟性肌肉酸痛(DOMS);
7、疲劳;
8、推迟如遗传大分子的合成。
通过保持细胞氧能量负荷,控制细胞嘌呤的损失,增加氧能量合成与补救,核糖能够减轻这些症状,加速恢复,并且补偿由于训练过度或者高原环境引起的细胞和组织损伤。
L-肉碱:是广泛存在于人体内的一种氨基酸,是食物的组成部份,被认为是人体代谢的 必需的“类维生素”的营养素。
1、L-肉碱的“转用”作用
L-肉碱的主要生理功能就是转运活化的FFA(游离脂肪酸)进入线粒体基质,而脂肪又是低强度长时间运动时的主要能源物质,脂肪细胞内脂肪被“动员”释放出FFA。FFA的氧化分解主要有3大步骤:(1)活化;(2)β-氧化;(3)三羧酸循环,后2步均在线粒体内进行。FFA由骨骼肌细胞进入线粒体氧化分解时需要线粒体膜上的载体-肉碱的帮助才能进入,因为线粒体内膜对FFA不通透。增加肌肉中的肉碱水平可以增强FFA的利用,此外,肉碱的增加可促进丙酮酸氧化变为乙酰COA而非接受NADH+H+而被还原成乳酸,从而减少乳酸生成,进而提高运动成绩。
2、调节线粒体内酰基COA/COA比率,促进丙酮酸的氧化
氧化或其他线粒体代谢过程产生的短链或中链脂肪酰基COA,通过酰基转移反应生成酰基肉碱,酰基肉碱在酶的作用下运出线粒体,进入循环系统起调节线粒体酰基COA/COA比率的作用。线粒体内酰基COA/COA比率的稳定,对能量代谢有重要作用。若线粒体基质中的乙酰基不及时运出,乙酰COA/COA比率上升,对丙酮酸脱氢酶有抑制作用。肉碱能提高丙酮酸脱氢酶的活性,促进葡萄糖的氧化利用,还可以提高支链的酰基COA与肉碱结合成酯,从而减少过量的支链酰基COA对支链丙酮酸脱氢酶的抑制,有利于其氧化利用。
3、L-肉碱与线粒体H+-ATP酶(F0F1ATP酶)
细胞线粒体内ATP水平是决定运动能力的主要因素。如大分子的酶裂解、核凝集以及囊泡的形成,都需要大量ATP酶的参与,线粒体内ATP的来源主要是通过有氧运动使线粒体氧化磷酸化,补充肉碱加合理的有氧训练导致机体线粒体数量增多,ATP酶的活性提高,ATP的生成增多,SOD活性显著增高,MDA含量下降,过氧化脂质反应减弱,有氧代谢能力得到改善,因此细胞能量供应增多,提高抗疲劳能力。
4、L-肉碱对骨骼肌线粒体酶的影响外源性补充
L-肉碱可增加骨骼肌线粒体代谢酶活性,加速自由基的清除速率,延缓运动性疲劳的发生。研究证明,补充L-肉碱能使小鼠力竭游泳运动后骨骼肌中三羧酸循环限速酶的表达量升高,抗氧化能力增强,提高运动能力。广泛的人体和动物实验显示左旋肉碱还可降低血脂,促进心肌代谢和改善心功能、神经传导、周围动脉疾病的缺血症状,以及改善体能等作用。
维生素C:维生素C有利于形成和维持胶原蛋白,使身体全部细胞结合起来,维生素C是胶原蛋白的主要物质,细胞保护层结缔组织的重要构成,但同时钙也是不可缺少的.像对果胶有凝结效果一样,钙能使维生素C结缔组织强壮而有弹性。维生素C缺乏时结缔组织遭到破坏,缺乏钙使之变得脆弱。此时细胞就缺乏防御能力。
维生素C的解毒作用是能和侵人机体有毒物结合.随尿排泄出。当人感染疾病时,皿液中维生素C含量会减少和消失,服用足够的维生素C能帮助机体抗病。大剂量的维生素C能降低血液中胆固醇和毛细血管的脆性。
在治疗肝胆疾病方面,它能促进肝细胞的再生及肝糖原的合成,增强肝脏的解毒能力。
维生素C有阻断亚硝胺在体内形成的作用,所以有抗癌作用。
维生素C能有效阻断自由基引起的连锁反应,从而起到清除自由基的作用,具有对机体中起着抗氧剂的作用。
大剂量的服用维生素C,例如感冒发烧时有人建议摄人可达4000mg,2-3小时即进人血液细胞,第二天可减少。过量的维生素C,在每个细胞有足够的维生素C,呈现饱和状态,多余的就会随尿液排出。但随着年龄的增加,其需要量也要增加,美国尼尔·沙罗门研究指出,吸烟者每天要100mg,体力劳动者为200mg,老年人、进入高原的平原人群及肥胖者每天为1000mg。
L-精氨酸:根据文献获知,外源性给予一氧化氮前体L-精氨酸,可以缓解缺氧性肺血管结构重建。临床上已开始应用NO吸入的方法来治疗持续胎儿循环和胎粪吸入综合征等疾病,并已取得初步疗效。但NO吸入费用高,仪器操作复杂,因此限制了其临床应用。
L-精氨酸为NO合成的前体,它进入体内后经NO合酶催化生成NO。近年关于应用L-精氨酸干预缺氧性肺血管结构重建的研究得到越来越多的重视,很多研究结果表明,L-精氨酸使缺氧性肺动脉高压大鼠肺动脉压力明显降低,肺小血管肌化程度明显减轻,肺中、小肌型动脉RMT和RMA明显降低,肺动脉胶原表达减少,肺动脉超微结构的改变明显缓解。
体外实验证实,NO对血管平滑肌细胞的增殖有直接抑制作用,提示L-精氨酸干预缺氧性肺血管结构重建的机制之一可能是通过NO的直接作用;另一方面,体外实验显示,NO可抑制脐静脉内皮细胞ET-1的合成与分泌,并可降低血浆ET-1水平。NO对慢性缺氧大鼠肺动脉ET-1基因表达有抑制作用。而ET-1是目前发现的体内最强的缩血管活性多肽,并且具有强烈的促血管平滑肌增殖的作用。由此间接提示,L-精氨酸干预缺氧性肺血管结构重建的另一可能机制是通过促进NO合成,从而对促进血管平滑肌细胞增殖因子ET-1的抑制作用。
牛磺酸:牛磺酸是广谱的细胞保护剂,对缺氧引起的细胞损伤有保护作用。牛磺酸可抑制缺氧机体ET-1和ACE分泌,增加NO和SOD水平,降低肺动脉压力,减轻心肺组织损伤。牛磺酸能减弱缺氧对肺动脉内皮细胞的增殖抑制作用,抑制缺氧的促肺动脉平滑肌细胞增殖作用,使之接近常氧水平。
通过试验研究表明,D-核糖、L-肉碱、维生素C、L-精氨酸、牛磺酸、乙酰谷酰胺、烟酰胺的联合处方具有优势,不只是几种药物的简单相加,它们相互协同作用增加彼此的功能。内皮细胞是NO产生的细胞基础,牛磺酸可通过保护细胞免受缺氧损伤,提高NO产量。研究还表明,牛磺酸能使缺氧所致的L-精氨酸转运能力障碍有所恢复,使L-精氨酸的转运率、NOS活性增加,NO生成增多。NO除了调节血管张力外,还具有抑制血小板和血细胞粘附,抗脂质过氧化及保护细胞的功能。
由于上述几种药物是机体内存在的天然分子,对人体均无毒害作用,可成为抗缺氧耐疲劳的长期使用的保健品。
本发明选用D-核糖、L-肉碱、维生素C、L-精氨酸、牛磺酸、乙酰谷酰胺、烟酰胺作为功效成分,并通过实验筛选出合理有效组合比例,使本发明的处方功效产生协同作用,从而有效发挥抗缺氧耐疲劳的保健作用,帮助机体重新获得生命活动所需的充足能量,恢复机体应有的活力。
以处方组合重量比表示,本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物的各个组成的重量比如下:D-核糖500-2000mg L-精氨酸50-500mg L-肉碱80-1000mg 维生素C30-250mg烟酰胺30-300mg 谷氨酰胺30-300mg 牛磺酸30-250mg 柠檬酸15-150mg甜菊苷10-50mg 茶多酚10-150mg 甘露醇15-150mg 阿斯巴甜3-10mg香精0.6-2mg
优选本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物的各个组成的重量比为:D-核糖800-1800mg L-精氨酸100-300mg L-肉碱200-800mg 维生素C 80-200mg烟酰胺100-200mg 谷氨酰胺100-200mg 牛磺酸50-200mg 柠檬酸35-150mg甜菊苷20-30mg 茶多酚30-100mg 甘露醇50-150mg 阿斯巴甜3-8mg 香精0.6-1.5mg
更加优选的是,本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物的各个组成的重量比为:D-核糖900-1800mg L-精氨酸150-300mg L-肉碱400-800mg 维生素C 90-200mg烟酰胺100-150mg 谷氨酰胺150-200mg 牛磺酸90-130mg 柠檬酸55-120mg甜菊苷20-30mg 茶多酚40-100mg 甘露醇80-140mg 阿斯巴甜3-8mg 香精0.6-1.5mg
具体实施方式
下面结合实施例对发明抗缺氧耐疲劳组合物做进一步说明,下述实施例仅用以说明本发明而并非是对本发明的限制。
本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,可以根据不同的添加剂制备成液体制剂或者固体制剂。事实上本发明的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,无论采用液体制剂或者固体制剂,均可获得理想的保健功能,只要以水为介质服用,两种剂型均能使该组合物充分发挥疗效,使处于缺氧或者疲劳状态下的人群较快的得到体能恢复,本发明的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,优选制剂可以是口服溶液,也可以是固体剂型,包括固体片剂、固体颗粒剂型、泡腾片及型、固体粉末剂型,本实施例仅用以说明本发明,并不是对本发明的其他制剂形式的限制。
本发明的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,以口服溶液的制备方法如下:
实施例一
1、将处方量D-核糖1000mg、L-精氨酸150mg、L-肉碱500mg、维生素C 200mg、烟酰胺100mg、谷氨酰胺150mg、牛磺酸100mg、柠檬酸55mg、甜菊苷20mg、茶多酚50mg、甘露醇80mg、阿斯巴甜4mg、香精0.6mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例二
1、将处方量D-核糖1200mg、L-精氨酸150mg、L-肉碱550mg、维生素C 150mg、烟酰胺110mg、谷氨酰胺130mg、牛磺酸110mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚60mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌 使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例三
1、将处方量D-核糖1300mg、L-精氨酸160mg、L-肉碱600mg、维生素C 160mg、烟酰胺120mg、谷氨酰胺140mg、牛磺酸120mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚60mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例四
1、将处方量D-核糖1400mg、L-精氨酸170mg、L-肉碱600mg、维生素C 170mg、烟酰胺130mg、谷氨酰胺150mg、牛磺酸120mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚60mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例五
1、将处方量D-核糖1500mg、L-精氨酸180mg、L-肉碱600mg、维生素C 170mg、烟酰胺140mg、谷氨酰胺140mg、牛磺酸130mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚60mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例六
1、将处方量D-核糖1500mg、L-精氨酸180mg、L-肉碱600mg、维生素C 170mg、烟酰胺140mg、谷氨酰胺140mg、牛磺酸140mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚70mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例七
1、将处方量D-核糖1600mg、L-精氨酸180mg、L-肉碱600mg、维生素C 180mg、烟酰胺150mg、谷氨酰胺150mg、牛磺酸150mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚80mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例八
1、将处方量D-核糖1700mg、L-精氨酸190mg、L-肉碱600mg、维生素C 190mg、烟酰胺150mg、谷氨酰胺150mg、牛磺酸150mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚80mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
实施例九
1、将处方量D-核糖1800mg、L-精氨酸190mg、L-肉碱600mg、维生素C 190mg、烟酰胺150mg、谷氨酰胺150mg、牛磺酸150mg、柠檬酸60mg、甜菊苷30mg、茶多酚80mg、甘露醇90mg、阿斯巴甜4mg、香精0.7mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。
2、将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
对五种违禁药物进行测定
本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物中,对五种违禁药物采用HPLC法进行同时测定方法:
西地那非(枸橼酸西地那非Sildenafilcltrate),伐地那非(Vardenafil)和他达那非(Tadalafil)是目前治疗男性性功能障碍的一类药物。
还阳碱为还阳草提取物的化合物,系由西地那非经甲酞化重整,而保留西地那非相关药物构效集团,属西地那非衍生物化学变构体。新阳碱(又名新西地那非)也是西地那非的衍生物。新阳碱、还阳碱的功能和副作用与西地那非相同,都属5-磷酸二醋酶抑制剂(西地那非)类药物。上述五种违禁药物均为处方药,有不同程度的副作用,尤其是心血管患者和肝、肾功能不全者副作用影响巨大,一旦使用不当就会对人体造成损害。
我国相关标准明确规定:禁止在保健食品中添加上述五种药物。而这些药物常被添加于抗疲劳、延缓衰老等补益类保健食品中,但由于其保健功能的特殊性,一些厂家常将这些违禁药物掺入保健食品内,以达到其夸大宣传的“保健疗效”,危害服用者的健康。因此,有必要进行上述五种药物的含量检测。
1、仪器和试剂
Waters2695高效液相色谱仪(配Waters2996型紫外二极管阵列检测器,自动进样装置,Empowerz色谱工作站),梅特勒一托利多AL204型电子天平,Milli-Q去离子水制备系统(美国Millipore公司)、2200H型超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)。西地那非、他达那非(西力士)、伐地那非对照品(纯度>99%);新阳碱、还阳碱对照品(纯度>99%,昆明迪尔生物化工厂);甲醇(色谱纯);乙睛(色谱纯);磷酸(分析纯);二次蒸馏水;去离子水。
2、色谱条件
色谱柱:AgilentCl:柱(25ommx4·6mm);柱温:30℃;进样体积:20mL;流速:1.0mL/min;检测波长:226nm。
3、对照溶液的配制
精密称取伐地那非、还阳碱、西地那非、新阳碱、他达那非对照品各10mg,分别置于100mL容量瓶中,先加40mL甲醇超声溶解,冷却,稀释至刻度,摇匀,得浓度为0.1mg/mL的对照品贮备液,保存在4℃冰箱中。然后再分别吸取储备液于50mL容量瓶中用甲醇定容至刻度,摇匀,上机测定对照溶液。
4、样品处理
固体样品处理:精密称取0.509置于50mL容量瓶中加甲醇40mL,超声波发生器上超声提取,冷却至室温,用甲醇定容至刻度,摇匀,经0.45四微孔滤膜过滤备用。
液体样品处理:准确吸取5.0mL液体样品,置于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,用微孔滤膜过滤,备用。
5、柱温的选择
以15℃、20℃、25℃、30℃、35℃5种不同柱温按上述色谱条件进行试验,发现样品分析的总时间相差不大,22分钟内都能完成分析。但是,柱温在15℃、20℃、25℃、35℃时,伐地那非和还阳碱会随柱温降低而使两峰保留时间间隔缩短、分离度下降,甚至峰部分重叠。而在柱温30℃时,伐地那非和还阳碱已达到良好的基线分离效果。所以综合考虑确定柱温为30℃。
6、测定波长的选择
5种组分用二极管阵列检测器在190-600nm进行全波长扫描,结果发现,伐地那非的特征波长214nm和249nm,还阳碱的特征波长193nm、234nm和280nm,西地那非的特征波长224nm和294nm,新阳碱的特征波长226nm、294nm和354nm,他达那非的特征波长199nm、220nm和284nm。但在测定样品时发现在200nm以下测定时有很多较强吸收的杂质峰,综合考虑选择226nm。
7、方法线形关系与检测限
分别吸取对照品贮备液0.2mL、1.0mL、2.omL、10mL、20mL、40mL干50mL容量瓶中,用甲醇定容配制成浓度为0.4mg/mL,2.0mg/mL,4.0ng/mL,20.0ng/mL,40.0ng/mL,80.0ng/mL系列标准混合工作溶液。将这系列混合标准工作溶液在相同色谱条件下进样,以峰面积A对浓度进行回归分析。
按照信噪比(s/n=3)计算得到,伐地那非、还阳碱、西地那非、新阳碱、他达那非检测限分别为39.41、24.37、23.11、22.92、6.75ng/mL。
8、精密度试验
取同一份混合对照品溶液,按上述色谱条件进行HPLC测定,重复进样6次,每次20mL,以伐地那非、还阳碱、西地那非、新阳碱、他达那非的峰面积计算各特征峰,RSD分别为1.46%,0.%%,0.51%,0.91%,0.65%(n=6)。
9、稳定性试验
取同一份混合对照品溶液,按照实验条件每隔2h、4h、3h、16h、1d、1个星期进行实验,观察其峰面积变化情况计算得伐地那非、还阳碱、西地那非、新阳碱、他达那非RSD分别为2.21%、2.03%、1.72%、2.35%、2.01%(n=6),结果表明,放在冰箱内冷藏的测试液的5个组分性质稳定,一个星期内未见明显变化。
10、样品测定与回收率
按照上述样品处理,在相同的色谱条件下,用外标定量方法对本品进行5个组分的分析测定,以不含伐地那非、还阳碱、西地那非、新阳碱、他达那非的保健品胶囊为样品,准确称取试样0.509置于50mL容量瓶,准确加入混合对照品溶液,然后按上述色谱条件进行HPLC测定,根据样品和加标测定的平均值计算出方法的平均回收率。
为了充分说明本发明处方组合物的优良效果,我们结合文献通过了以下动物试验进行抗缺氧耐疲劳验证。
1材料和方法
提高缺氧耐受力功能检测程序和方法见《保健食品功能学评价程序与检验方法规范》(2003版),包括常压耐缺氧实验,亚硝酸钠中毒存活实验,急性脑缺血性缺氧实验。
1.1实验动物 近交系成年小鼠,单一性别,18-20g,每组10-15只小鼠,SPF级动物房饲养。温度22-24摄氏度,湿度55%-60%.
1.2剂量分 每次均设3个剂量组(摄入量分别为送检样品日推荐剂量的10、20、30倍)和一个正常对照组。每日灌胃给予受试物,阴性对照组灌饲同等容量的溶剂,连续30d。
1.3实验步骤
a、常压耐缺氧实验:末次灌胃1h后,将各组小鼠分别放入盛有15g钠石灰的250ml广口瓶中,每瓶1只,用涂抹凡士林瓶盖封口,计时,以呼吸停止为计时终止指标。记录从封口到死亡的时间。即常压耐缺氧时间(A-time)。
b、亚硝酸钠中毒实验:末次灌胃1h后,各组小鼠腹腔注射亚硝酸钠(220mg/kg·BW),立即计时,记录小鼠死亡时间,即亚硝酸钠中毒存活时间(B-time)。
c、急性脑缺血性缺氧实验:末次灌胃1h后,各组小鼠在乙醚浅麻醉下自颈部断头,立即计时,记录小鼠断头后至张口喘息停止的时间,即急性脑缺血性缺氧时间(C-time)。
1.4统计处理 因为剂量组的数据受受试物的影响,比较不同缺氧耐受力影响因素分析只采用了每次实验正常对照组的数据。在做缺氧耐受力3个指标相关性分析时用到了剂量组的数据。统计计算采用spss 11.0.1,包括方差分析,协方差分析,相关分析,检验水准为双侧α=0.05。
通过给予小鼠不同剂量的本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物30天,三个剂量组小鼠常压缺氧时间明显长于对照组,具有显著性差异。三个剂量组小鼠的脑缺血性缺氧时间长于对照组,具有显著性差异。说明给予小鼠不同剂量的本发明一种口服抗缺氧耐疲劳组合物30天,能够明显延长小鼠常压耐缺氧时间,延长小鼠急性脑缺血性缺氧时间,具有明显的耐缺氧作用。
Claims (8)
1.一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:以重量比计,该口服抗缺氧耐疲劳组合物主要成分包含D-核糖500-2000mg、L-精氨酸50-500mg、L-肉碱80-1000mg、维生素C30-250mg、烟酰胺30-300mg、谷氨酰胺30-300mg、牛磺酸30-250mg、茶多酚10-150mg,以及矫味剂;
2.根据权利要求1所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:所述矫味剂是选自食品可接受的辅料,尤其为国家规定可用于食品的添加剂,优选以下物质:甘露醇、柠檬酸、阿斯巴坦、甜蜜素、木糖醇、甜菊苷、草莓香精、赤鲜糖醇、菠萝香精、甜橙香精、水蜜桃香精、青苹果香精、西瓜香精等,其中优选柠檬酸、木糖醇、阿斯巴坦、甜菊苷、草莓香精。以上所述矫味剂物质,可以是单一物质,也可以是两种或者两种以上的混合物。
3.根据权利要求1所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:优选主要组合物的各个组成的重量比为:D-核糖800-1800mg、L-精氨酸100-300mg、L-肉碱200-800mg、维生素C 80-200mg、烟酰胺100-200mg、谷氨酰胺100-200mg、牛磺酸50-200mg、茶多酚30-100mg;
4.根据权利要求3所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:优选矫味剂组合物的各个组成的重量比为:柠檬酸35-250mg、甜菊苷20-50mg、甘露醇50-250mg、阿斯巴甜1-10mg、香精0.6-1.5mg;
5.根据权利要求1所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:其加入固体辅料添加剂制备成固体制剂。
6.根据权利要求1所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:其加入无菌纯净水制备成口服液体制剂。
7.根据权利要求1所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:将处方量D-核糖1000mg、L-精氨酸150mg、L-肉碱500mg、维生素C 200mg、烟酰胺100mg、谷氨酰胺150mg、牛磺酸100mg、柠檬酸55mg、甜菊苷20mg、茶多酚50mg、甘露醇80mg、阿斯巴甜4mg、香精0.6mg置于约70%处方量的无菌纯水中,搅拌使其溶解,补水定容至全量。将上述药液进行无菌过滤,分装到专用口服液瓶中,压盖,灭菌,即得本发明的一种抗缺氧耐疲劳保健品口服溶液。
8.根据权利要求1所述的一种口服抗缺氧耐疲劳组合物,其特征在于:本发明的优选制剂可以是口服溶液,也可以是固体剂型,包括固体片剂、固体颗粒剂型、泡腾片及型、固体粉末剂型,本发明实施例中仅用以说明本发明,并不是对本发明的其他制剂形式的限制。
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