CN103182726A - 一种新型的装饰性木质材料及其制备方法 - Google Patents
一种新型的装饰性木质材料及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及利用真菌侵染木材形成新型装饰性木质材料的制备方法，它包括采集标本、配置培养基、标本的表面消毒及预处理、菌种的分离和纯化、菌种的保存、木块接菌、确定菌种、制取菌纹木等步骤。
Description
技术领域
本发明涉及利用微生物染色木材，特别涉及一种变色木材形成新型装饰性木质材料的制备方法。
背景技术
变色是木材的缺陷之一，木材变色可分为光变色、化学变色、生物变色。其中生物变色对木材材色影响最严重，它又可分为木材早期腐朽变色、霉菌变色和边材变色。边材变色是由具有色素的真菌侵染引起的，被害木材的颜色主要包括灰色、蓝色、黑色、黄色、红色等，虽然不会严重影响其强度，但是却在很大程度上决定着木材商品的价值。
发明内容
在天然阔叶林的枯枝中常常发现许多真菌染色形成的具有独特花纹的木材，在腐朽材的横断面和纵断面上，常常有各种带线。带线区域内材色较白，这些带线的颜色，与木材的基调往往不一致，而且多数情况下为暗色，如黑色、黑褐色或黄褐色等等，形状也不规则，却赋予了木材奇特的装饰图案。我们将这种由真菌染色而形成的木材称为菌纹木，这些真菌染色包括漂白（白腐菌腐朽）、染色（真菌染色）和带线花纹（菌丝分泌的色素）。菌纹木在实现人工培育后，可利用其表面线条的随机变化，制作出绿色、低碳、环保的且花纹美丽的工艺制品和贴面用薄木单板，提高了木材的综合利用率和附加值，有极高的经济价值和社会意义。
本发明的目的是提供一种新型装饰材料的制备方法。
为了得到菌纹木所采用的技术方案是：通过对天然形成的菌纹木上侵染菌的培养、分离和纯化以及菌纹木真菌的筛选，能够筛选出形成菌纹木的菌种,再将这些真菌接种到材色正常的木材上，便能稳定可重复的得到菌纹木。所述方法包括下述步骤：
（1）采集标本
在树林的腐朽的树桩、倒木或枯枝中采集，选择具有带线花纹的木材组织及其木材上生长的真菌子实体，装入封口袋，编号，放入冰箱中保存，冷藏温度4℃。
（2）配置培养基
配制2%马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），马铃薯(去皮)200 g、蔗糖20 g、琼脂15g、蒸馏水1 L、pH自然。将去皮的新鲜马铃薯200 g切成1 cm见方的小块放入铝锅中,加入蒸馏水1 L，煮沸30min后，用双层纱布过滤，得滤液,加入蔗糖20 g、琼脂15 g，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量至1 L，分装于锥形瓶中，标号，并在121℃高压灭菌20min。
（3）标本的表面消毒及预处理
在超净工作台（预先紫外灯灭菌20min）上进行操作，将步骤（1）贮藏的标本切成10mm×10mm×2mm的小块，真菌子实体保留原状。预处理后的木块先用75%酒精浸泡消毒，再用0.1%升汞浸泡消毒，最后用灭菌蒸馏水清洗。
（4）菌种的分离和纯化
将步骤（3）得到的表面消过毒的小木块切成适宜的大小，置于PDA培养基的培养皿中，将培养皿倒扣，然后放入恒温箱中培养，直到小木块周围明显长出菌丝时，采用尖端菌丝挑取法,挑取形态、色泽不同的菌落分开来培养，并做好菌种代号标记。
（5）菌种的保存
将分离出来的不同菌种转入到小试管中的PDA斜面培养基上,然后在22℃－27℃条件下进行纯化培养，再置于4℃冰箱中保存备用。
（6）木块接菌
木块制成一定规格的小块，装入广口瓶，加适量水，于高压灭菌锅中灭菌1.5h，培养基介质也同时置于高压灭菌锅灭菌1.5h。将步骤（5）中保存的菌种挑出，在摇床上用锥形瓶盛装液体PDA培养基中培养一段时间。木块接菌方式分为：菌液单株菌种接菌和配对菌种接菌。将以上接种好的木块置于22℃－27℃的恒温恒湿箱中黑暗培养。
（7）确定菌种
培养2-3个月后，取出木块，刮掉其表面菌丝洗净晾干再观察，看木块内外是否形成明显的带线花纹，再做一次接种验证此种菌种形成带线花纹的能力，最后确定为目标菌种。经过分子形态鉴定，单个菌种如Xylaria venosula能独自形成带线花纹，而Polyporus brumalis需要和Trametes versicolor接种在同一块木块上才能形成带线花纹。
（8）制取菌纹木
将以上分离出的能形成带线花纹的菌种按照步骤（6）的方法就能重复稳定的得到这种木质装饰性材料。
根据本发明的优选实施方式，在步骤（1）中 所述的标本应在较潮湿的阔叶林中找寻，将带线花纹尽可能多的树桩、倒木或枯枝作为标本。
根据本发明的优选实施方式，在于步骤（3）中，预处理后的木块先用75%酒精浸泡10-20s，然后用0.1%升汞浸泡4-7min，再用灭菌蒸馏水清洗3次。
根据本发明的优选实施方式，在步骤（4）中的恒温培养箱的温度为27℃。
根据本发明的优选实施方式在于步骤（5）中，纯化培养直到菌丝布满小试管中的PDA斜面培养基。
根据本发明的优选实施方式，在步骤（6）中，培养基以蛭石作为培养介质。
根据本发明的优选实施方式，在步骤（6）中，液体菌种培养的时间为10天，直到锥形瓶中出现大量絮状成团的菌丝体。
根据本发明的优选实施方式，在步骤（6）中，液体接菌，用镊子夹木块沾菌液，用蛭石覆盖，加入一定量的无菌蒸馏水，以湿透蛭石与木块为准，盖紧瓶盖。
根据本发明的优选实施方式，在步骤（6）中，单株菌种液体接菌时，整个木块都沾上菌夜；两种菌种配对接菌，液体接菌时木块两端各沾一种菌液。
下面将更详细的描述本发明。
本发明涉及一种变色木材形成新型装饰性木质材料的制备方法。
该方法的步骤如下：
（1）采集标本
在较潮湿的阔叶林的腐朽的树桩、倒木或枯枝中采集，选择具有带线花纹的木材组织及其木材上生长的真菌子实体，装入封口袋，编号，放入冰箱中保存，冷藏温度4℃。
（2）配置培养基
配制2%马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），马铃薯(去皮)200 g、蔗糖20 g、琼脂15g、蒸馏水1 L、pH自然。将去皮的新鲜马铃薯200 g切成1 cm见方的小块放入铝锅中,加入蒸馏水1 L，煮沸30min后，用双层纱布过滤，得滤液,加入蔗糖20 g、琼脂15 g，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量至1 L，分装于锥形瓶中，标号，并在121℃高压灭菌20min。
（3）标本的表面消毒及预处理
在超净工作台（预先紫外灯灭菌20min）上进行操作，将步骤（1）贮藏的标本切成10mm×10mm×2mm的小块，真菌子实体保留原状。预处理后的木块先用75%酒精浸泡消毒15 s，再用0.1%升汞浸泡消毒5min，最后用灭菌蒸馏水清洗3次。
（4）菌种的分离和纯化
将步骤（3）得到的表面消过毒的小木块切成适宜的大小，置于PDA培养基的培养皿中，将培养皿倒扣，然后放入恒温箱中培养，直到小木块周围明显长出菌丝时，采用尖端菌丝挑取法,挑取形态、色泽不同的菌落分开来培养，并做好菌种代号标记。
在本发明中，将培养皿倒扣可以更好的防止菌种被污染，真菌大多数适宜的范围为10℃－40℃，这里的温度设置在27℃。
（5）菌种的保存
将分离出来的不同菌种转入到小试管中的PDA斜面培养基上,然后在27℃条件下进行纯化培养，再置于4℃冰箱中保存备用。
（6）木块接菌
木块制成一定规格的小块，装入广口瓶，加适量水，于高压灭菌锅中灭菌1.5h，培养基介质也同时置于高压灭菌锅灭菌1.5h。将步骤（5）中保存的菌种挑出，在摇床上用锥形瓶盛装2%马铃薯葡萄糖培养基中培养10天。木块接菌方式分为：菌液单株菌种接菌与配对菌种接菌。将以上接种好的木块置于27℃的恒温恒湿箱中黑暗培养。
单株菌种接菌，接菌时木块尽量多的沾上菌夜，木块上具有明显的菌丝分布为准；两种菌种配对接菌，在木块两端各沾一种菌液，也要使木块上具有明显的菌丝分布，用蛭石覆盖，加入一定量的无菌蒸馏水，以湿透蛭石与木块为准，盖紧瓶盖。
（7）确定菌种
培养2-3个月后，取出木块，刮掉其表面菌丝洗净晾干再观察，看木块内外是否形成明显的带线花纹，再做一次接种验证此种菌种形成带线花纹的能力，最后确定为目标菌种。经过分子形态鉴定，单个菌种如Xylaria venosula能独自形成带线花纹，而Polyporus brumalis需要和Trametes versicolor接种在同一块木块上才能形成带线花纹。
（8）制取菌纹木
将以上分离出的能形成带线花纹的菌种按照步骤（6）的方法就能重复稳定的得到这种木质装饰性材料。
附图说明
图1示出具有黑色带线花纹的天然菌纹木标本；
图2示出按照本发明实施例1制取的菌纹木。
具体实施方式
实施例1：本发明制备装饰性木质材料的方法
该方法的步骤如下：
（1）采集标本
在较潮湿的阔叶林的腐朽的树桩、倒木或枯枝中采集选择具有带线花纹的木材组织及其木材上生长的真菌子实体，装入封口袋，编号，放入冰箱中保存，冷藏温度4℃。
（2）配置培养基
配制2%马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），马铃薯(去皮)200 g、蔗糖20 g、琼脂15g、蒸馏水1 L、pH自然。将去皮的新鲜马铃薯200 g切成1 cm见方的小块放入铝锅中,加入蒸馏水1 L，煮沸30min后，用双层纱布过滤，得滤液,加入蔗糖20 g、琼脂15 g，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量至1 L，分装于锥形瓶中，标号，并在121℃高压灭菌20min。
（3）标本的表面消毒及预处理
在超净工作台（预先紫外灯灭菌20min）上进行操作，将步骤（1）贮藏的标本切成10mm×10mm×2mm的小块，真菌子实体保留原状。预处理后的木块先用75%酒精浸泡消毒15 s，再用0.1%升汞浸泡消毒5min，最后用灭菌蒸馏水清洗3次。
（4）菌种的分离和纯化
将步骤（3）得到的表面消过毒的小木块切成适宜的大小，置于PDA培养基的培养皿中，将培养皿倒扣，然后放入27℃恒温箱中培养，直到小木块周围明显长出菌丝时，采用尖端菌丝挑取法,挑取形态、色泽不同的菌落分开来培养，并做好菌种代号标记。
（5）菌种的保存
将分离出来的不同菌种转入到小试管中的PDA斜面培养基上,然后在27℃条件下进行纯化培养，再置于4℃冰箱中保存备用。
（6）木块接菌
木块制成一定规格的小块，装入广口瓶，加适量水，于高压灭菌锅中灭菌1.5h，培养基介质也同时置于高压灭菌锅灭菌1.5h。将步骤（5）中保存的菌种挑出，在摇床上用锥形瓶盛装2%马铃薯葡萄糖培养基中培养10天。木块接菌方式为单株菌种液体接菌，接菌时将木块浸入菌液中，使木块尽量多的沾上菌夜，木块上具有明显的菌丝分布为准，放入广口瓶中，用蛭石覆盖，加入一定量的无菌蒸馏水，以湿透蛭石与木块为准，盖紧瓶盖。将以上接种好的木块置于27℃的恒温恒湿箱中黑暗培养。
（7）确定菌种
培养2-3个月后，取出木块，刮掉其表面菌丝洗净晾干再观察，看木块内外是否形成明显的带线花纹，再做一次接种验证此种菌种形成带线花纹的能力，最后确定为目标菌种。经过分子形态鉴定，单个菌种如Xylaria venosula能独自形成带线花纹。
（8）制取菌纹木
将以上分离出的能形成带线花纹的Xylaria venosula按照步骤（6）的方法就能重复稳定的得到这种木质装饰性材料。
实施例2：本发明制备装饰性木质材料的方法
该方法的步骤如下：
（1）采集标本
在较潮湿的阔叶林的腐朽的树桩、倒木或枯枝中采集选择具有带线花纹的木材组织及其木材上生长的真菌子实体，装入封口袋，编号，放入冰箱中保存，冷藏温度4℃。
（2）配置培养基
配制2%马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），马铃薯(去皮)200 g、蔗糖20 g、琼脂15g、蒸馏水1 L、pH自然。将去皮的新鲜马铃薯200 g切成1 cm见方的小块放入铝锅中,加入蒸馏水1 L，煮沸30min后，用双层纱布过滤，得滤液,加入蔗糖20 g、琼脂15 g，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量至1 L，分装于锥形瓶中，标号，并在121℃高压灭菌20min。
（3）标本的表面消毒及预处理
在超净工作台（预先紫外灯灭菌20min）上进行操作，将步骤（1）贮藏的标本切成10mm×10mm×2mm的小块，真菌子实体保留原状。预处理后的木块先用75%酒精浸泡消毒15 s，再用0.1%升汞浸泡消毒5min，最后用灭菌蒸馏水清洗3次。
（4）菌种的分离和纯化
将步骤（3）得到的表面消过毒的小木块切成适宜的大小，置于PDA培养基的培养皿中，将培养皿倒扣，然后放入27℃恒温箱中培养，直到小木块周围明显长出菌丝时，采用尖端菌丝挑取法,挑取形态、色泽不同的菌落分开来培养，并做好菌种代号标记。
（5）菌种的保存
将分离出来的不同菌种转入到小试管中的PDA斜面培养基上,然后在27℃条件下进行纯化培养，再置于4℃冰箱中保存备用。
（6）木块接菌
木块制成一定规格的小块，装入广口瓶，加适量水，于高压灭菌锅中灭菌1.5h，培养基介质也同时置于高压灭菌锅灭菌1.5h。将步骤（5）中保存的菌种挑出，在摇床上用锥形瓶盛装2%马铃薯葡萄糖培养基中培养10天。木块接菌方式为配对菌种液体接菌，液体接菌时木块两端各沾一种菌液，也要使木块上具有明显的菌丝分布，放入广口瓶中，用蛭石覆盖，加入一定量的无菌蒸馏水，以湿透蛭石与木块为准，盖紧瓶盖。将以上接种好的木块置于27℃的恒温恒湿箱中黑暗培养。
（7）确定菌种
培养2-3个月后，取出木块，刮掉其表面菌丝洗净晾干再观察，看木块内外是否形成明显的带线花纹，再做一次接种验证此种菌种形成带线花纹的能力，最后确定为目标菌种。经过分子形态鉴定，配对菌种如Polyporus brumalis和Trametes versicolor接种到同一木块上也能形成带线花纹。
（8）制取菌纹木
将以上分离出的能形成带线花纹的Polyporus brumalis和Trametes versicolor按照步骤（6）的方法就能重复稳定的得到这种木质装饰性材料。
Claims (10)
1.一种新型的木质装饰材料的制备方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
（1）采集标本
在树林的腐朽的树桩、倒木或枯枝中采集，选择具有带线花纹的木材组织及其木材上生长的真菌子实体，装入封口袋，编号，放入冰箱中保存，冷藏温度4℃；
（2）配置培养基
配制2%马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），马铃薯(去皮)200 g、蔗糖20 g、琼脂15g、蒸馏水1 L、pH自然；
将去皮的新鲜马铃薯200 g切成1 cm见方的小块放入铝锅中,加入蒸馏水1 L，煮沸30min后，用双层纱布过滤，得滤液,加入蔗糖20 g、琼脂15 g，加热搅拌至琼脂完全融化，并补足水量至1 L，分装于锥形瓶中，标号，并在121℃高压灭菌20min；
（3）标本的表面消毒及预处理
在超净工作台（预先紫外灯灭菌20min）上进行操作，将步骤（1）贮藏的标本切成10mm×10mm×2mm的小块，真菌子实体保留原状，预处理后的木块先用75%酒精浸泡消毒，再用0.1%升汞浸泡消毒，最后用灭菌蒸馏水清洗；
（4）菌种的分离和纯化
将步骤（3）得到的表面消过毒的小木块切成适宜的大小，置于PDA培养基的培养皿中，将培养皿倒扣，然后放入恒温箱中培养，直到小木块周围明显长出菌丝时，采用尖端菌丝挑取法,挑取形态、色泽不同的菌落分开来培养，并做好菌种代号标记；
（5）菌种的保存
将分离出来的不同菌种转入到小试管中的PDA斜面培养基上,然后在22℃－27℃条件下进行纯化培养，再置于4℃冰箱中保存备用；
（6）木块接菌
木块制成30mm×20mm×20mm的小块，装入广口瓶，加适量水，于高压灭菌锅中灭菌1.5h，培养基介质也同时置于高压灭菌锅灭菌1.5h，将步骤（5）中保存的菌种挑出，在摇床上用锥形瓶盛装液体PDA培养基中培养一段时间，木块接菌方式分为：液体单株菌种接菌与配对菌种接菌；
（7）确定菌种
培养2-3个月后，取出木块，刮掉其表面菌丝洗净晾干再观察，看木块内外是否形成明显的带线花纹，再做一次接种验证此种菌种形成带线花纹的能力，最后确定为目标菌种，经过分子形态鉴定，单个菌种如Xylaria hypoxylon能独自形成带线花纹，而Polyporus brumalis需要和Trametes versicolor接种在同一块木块上才能形成带线花纹；
（8）制取菌纹木
将以上分离出的能形成带线花纹的菌种按照步骤（6）的方法就能重复稳定的得到这种木质装饰性材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（1）中 ，在较潮湿的阔叶林中找寻带线花纹尽可能多的树桩、倒木或枯枝作为标本。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（3）中，预处理后的木块先用75%酒精浸泡10-20s，然后用0.1%升汞浸泡4-7min，再用灭菌蒸馏水清洗3次。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（4）的恒温培养箱的温度为22℃－27℃。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（5）中，纯化培养直到菌丝布满小试管中的PDA斜面培养基。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（6）中，培养基用蛭石作为培养介质。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（6）中，液体菌种培养的时间为4－10天，直到锥形瓶中出现大量絮状成团的菌丝体。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（6）中，液体接菌，用镊子夹木块沾菌液，用蛭石覆盖，加入一定量的无菌蒸馏水，以湿透蛭石与木块为准，盖紧瓶盖。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于步骤（6）中，液体单株菌种接菌，接菌时木块尽量多的沾上菌夜，木块上具有明显的菌丝分布为准；两种菌种配对接菌，液体接菌时木块两端各沾一种菌液，也要使木块上具有明显的菌丝分布。
10.一种新型的木质装饰材料，其特征是按照如权利要求1－9任一所述方法制备而成。
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