CN103153043A - 促进植物的生长或生物量增加的ggps基因及其用途 - Google Patents

促进植物的生长或生物量增加的ggps基因及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN103153043A
CN103153043A CN201180048801XA CN201180048801A CN103153043A CN 103153043 A CN103153043 A CN 103153043A CN 201180048801X A CN201180048801X A CN 201180048801XA CN 201180048801 A CN201180048801 A CN 201180048801A CN 103153043 A CN103153043 A CN 103153043A
Authority
CN
China
Prior art keywords
plant
ggps
biomass
gene
growth
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201180048801XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN103153043B (zh
Inventor
柳炳泰
桑迪普·库玛尔塔塔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KRIBB
Original Assignee
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KRIBB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KRIBB filed Critical Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology KRIBB
Publication of CN103153043A publication Critical patent/CN103153043A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103153043B publication Critical patent/CN103153043B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8262—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield involving plant development
    • C12N15/827—Flower development or morphology, e.g. flowering promoting factor [FPF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y205/00—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5)
    • C12Y205/01—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5) transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5.1)
    • C12Y205/01029—Geranylgeranyl diphosphate synthase (2.5.1.29)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明涉及一种将含有GGPS基因的重组载体转化到植物细胞中，从而与对照组植物相比，在短时间内增加植物的生长或生物量的方法；一种与对照组植物相比，在短时间内生长或生物量得到增加的转化植物体的制备方法，其包括用含有GGPS基因的重组载体转化植物细胞的步骤；一种由上述方法制备的植物体及其种子，所述植物体及种子与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进；以及一种包含GGPS基因组合物，其用于和对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加。

Description

促进植物的生长或生物量增加的GGPS基因及其用途
技术领域
本发明涉及一种促进植物的生长或生物量增加的GGPS基因及其用途，更详细地，涉及一种将含有牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶（GGPS，geranylgeranyl pyrophosphate synthase）基因的重组载体转化到植物细胞中，从而与对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加的方法；一种与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进的转化植物体的制备方法，其包括用含有GGPS基因的重组载体转化植物细胞的步骤；一种由上述方法制备的植物体及种子，所述植物体及种子与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进；及一种包含GPS基因的组合物，其用于和对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加。
背景技术
由于全世界人口的增加及农业有用耕地的减少，越来越需要对能够提高农业效率性方面进行研究。此外，韩国的玉米、小麦、大豆等主要粮食作物的大部分依赖于从美国、中国等国家进口，并且农产品的输入额是输出额的几倍。植物遗传学的发展提供经济农业及园艺方面性状得到提高的作物或植物，对生长及生物量增加的转化植物体的研究开发有望成为应对粮食资源供给减少问题的方案。
到目前为止，已经进行了大量的用于增加植物产量的转化植物体的研究开发，已报道有大量的生长及生物量增加的多种转化植物体，它们是利用源自多种植物（玉米、大豆、辣椒、拟南芥菜、烟草或水稻等）或微生物（集胞藻、假单胞菌、芽胞杆菌或鱼腥藻等）基因制备。
已知GGPS是一种催化以下反应的酶，该反应是由作为β-羟-β-甲戊二酸单酰辅酶a（HMG-CoA）还原酶途径（reductase pathway）中间体的法尼焦磷酸（FPP，farnesyl pyrophosphate）向GGPP的生成反应，在上述反应中生成的GGPP为具有抗氧化活性的类胡萝卜素（carotenoid）的前体物质。
在韩国授权专利第10-0814941号中公开有一种通过转化GGPS基因的大肠菌大量制备作为类胡萝卜素之一的番茄红素的方法，在韩国授权专利第10-0871591号中公开有一种利用源自辣椒的CaPLA1基因制备生物量增加的转化植物体的方法，在韩国公开专利第2003-0011780号中公开有一种利用源自玉米的SH2-REV6-HS基因制备种子生产量及生物量增加的转化植物体的方法。
发明内容
要解决的技术问题
本发明是为了实现上述目的而完成的。本发明人通过确认与对照组植物相比，转化源自向日葵的GGPS基因的烟草植物体的生长或生物量增加得到促进，从而完成了本发明。
技术方案
为了解决上述问题，本发明提供一种将含有GGPS基因的重组载体转化到植物细胞中，从而与对照组植物相比，促进植物的生长或生物量增加的方法。
此外，本发明提供一种与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进的转化植物体的制备方法，其包括用含有GGPS基因的重组载体转化植物细胞的步骤。
此外，本发明提供一种由上述方法制备的植物体及其种子，所述植物体及种子与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进。
此外，本发明提供一种包含GGPS基因的组合物，其用于和对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加。
有益效果
利用本发明的源自向日葵的GGPS基因，能够制备与对照组植物相比，生长及生物量的增加得到促进的植物体，因此认为将其应用在粮食作物上，有助于解决粮食资源供给减少的问题。
附图说明
图1是表示与对照组GUS-转化烟草品系（T1）相比显示出快速生长的GGPS-转化烟草品系（T1）的图片。
图2是对与对照组GUS-转化品系（T1）相比GGPS-转化烟草品系（T1）的植物体生长速度的增加（72%更高的高度）进行量化的图表。
图3是对与对照组GUS-转化品系（T1）相比显示出更快速生长（51%更多的活体生物量的增加）的GGPS-转化烟草品系（T1）进行量化的图表。
图4是对与对照组GUS-转化品系（T1）相比显示出更快速生长（增加多出69%的干燥生物量）的GGPS-转化烟草品系（T1）进行量化的图表。
图5是表示与野生型（非转化母本，野生型）及比较组（异戊烯基焦磷酸（IPP）异构酶；IPPi-T2）烟草植物体相比，GGPS转化烟草品系（T2）的植物高度及生物量快速增加的照片。
图6是表示与对照组GUS-转化烟草品系（T0）相比，在GGPS-转化烟草品系（T0）中，心皮（seedpod）数量增加4倍的照片。
图7表示在GGPS-转化烟草品系（T1）中，与对照组GUS-转化烟草品系（T1）相比，开花所需的生长发育期缩短（缩短25%）的开花期。
图8是表示在GGPS-转化烟草品系（T0）中，与野生型（非转化母本）烟草植物体相比，增加的花/心皮数量的照片。
图9是对与野生型（非转化母本）植物体相比，在GGPS-转化烟草品系（T0）中，增加41%的心皮数量进行量化的图表。
图10是表示在GGPS-转化烟草品系（T2）中，与野生型（非转化母本）烟草植物体相比，增加的花/心皮数量的照片。
具体实施方式
为了实现本发明的目的，本发明提供一种与对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加的方法，该方法包括将含有GGPS基因的重组载体转化到植物细胞中，从而使GGPS基因过表达的步骤。
在本发明的方法中，上述植物的生长或生物量的增加可以是植物生长速度（growth rate）的增加、早花期（early flowering）的诱导、高度（height）的增加、种子产量（seed yield）的增加或花朵数量（numberof flower）的增加，但不限定于此。
优选地，上述GGPS基因可以源自向日葵（Helianthus annuus），但不限制基因源（source）。对GGPS蛋白质进行编码的基因组DNA和cDNA均包括在上述GGPS基因内。优选地，本发明的基因可以包括SEQ ID No.1所示的碱基序列。而且，上述碱基序列的变异体包括在本发明的范围内。具体地，上述基因可以包括与SEQ ID No.1的碱基序列分别具有70%以上、更优选80%以上、尤其优选90%以上、最优选95%以上的序列同源性的碱基序列。对于多聚核苷酸的“序列同源性的%”是通过比较两个以最优方式排列的序列和比较区域得以确认。比较区域中的部分多聚核苷酸序列与对于两个序列的最优排列的参考序列（不包括添加或者删除）相比，可包含添加或者删除（即间隙（gap））。
术语“重组”是指细胞复制异种核酸或表达上述核酸或表达由肽、异种肽或异种核酸编码的蛋白质细胞。重组细胞能将在上述细胞的天然形态中未被发现的基因或者基因片段表达为正义引物或者反义引物形态中的一个。而且，重组细胞可以表达从天然状态的细胞中发现的基因，但是上述基因是发生变形的，是通过人为的手段再导入至细胞内的基因。
本发明中，上述GGPS基因序列可以插入重组表达载体内。术语“重组表达载体”指细菌质粒、噬菌体、酵母菌质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒或其它载体。大体上，只要是在宿主内能够复制及稳定化的质粒及载体，均可使用。上述表达载体的重要特性在于，具有复制原点、启动子、标记基因及翻译控制单元（translation controlelement）。
通过本领域技术人员公知的方法可以构建包括GGPS基因序列及合适的转录/翻译调节信号的表达载体。上述方法包括试管内的重组DNA技术、DNA合成技术及活体内重组技术等。为了引导mRNA的合成，上述DNA序列可以有效地连接到表达载体内的合适的启动子上。而且，表达载体可以包括作为翻译起始部位的核糖体结合部位及转录终止子。
本发明的重组载体的优选例为Ti-质粒载体，其存在于根癌土壤杆菌等合适的宿主中时，能够将其自身的一部分，所谓的T-区域转移到植物细胞中。其它类型的Ti-质粒载体（参见EP0116718B1号）作为能够将目前的植物细胞，或者杂合DNA适当地转移至植物基因组内的，能够生产出新型植物的原生质体，用于转移杂合DNA序列。Ti-质粒载体最优选的形态是EP0120516B1号及美国专利第4,940,838号中要求保护的所谓双元（binary）载体。本发明中的可用于将基因导入植物宿主中的其它适合的载体可以选自源自双链植物病毒（例如，花椰菜花叶病毒（CaMV））及单链病毒、双粒病毒等病毒载体，例如可以选自非完整性植物病毒载体。这些载体特别有利于难以适当地转化植物宿主时使用。优选地，上述重组载体可以是pBI101载体，但不限定于此。
表达载体优选包含一个以上的选择性标记。上述标记作为具有能够用常规的化学方法筛选的特性的核酸序列，即，包括能将转化细胞从非转化细胞中区分出来的所有的基因。例如有草甘膦（glyphosate）或草丁膦（phosphinothricin）等除草剂抗性基因、卡那霉素（kanamycin）、G418、博来霉素（Bleomycin）、潮霉素（hygromycin）、氯霉素（chloramphenicol）等抗生素耐受性基因，但不限定于此。
在本发明的重组载体中，启动子可以是CaMV35S、肌动蛋白、泛素、pEMU、MAS或组蛋白启动子，但不限定于此。所谓“启动子”是指始于结构基因的DNA上游区域，为了开始转录，RNA聚合酶结合的DNA分子。“植物启动子”是一种在植物细胞内能够开始转录的启动子。“组结构型（constitutive）启动子”是一种在大部分的环境条件及发育状态或细胞分化下具有活性的启动子。因为转化体的筛选能够在各阶段、通过各种组织形成，因此本发明优选结构型启动子。因此，不限制结构型启动子的选择可能性。
在本发明的重组载体中，可以使用普通的终止子，例如有胭脂碱合酶（NOS）、水稻α-淀粉酶RAmy1A终止子、菜豆碱（phaseoline）终止子、根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）的章鱼碱（Octopine）基因的终止子等，但不限定于此。关于终止子的必要性，一般被认为是这些区域能促进植物细胞内转录的确定性及效率。因此，在本发明的内容中使用终止子是非常适合的。
能够使本发明的载体稳定在原核细胞内并能够连续地克隆及表达的宿主细胞可以使用本领域公知的任何宿主细胞，例如大肠杆菌（E.coli）JM109、大肠杆菌BL21、大肠杆菌RR1、大肠杆菌LE392、大肠杆菌B、大肠杆菌X1776、大肠杆菌W3110、枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌等芽孢杆菌属菌株，还可以是鼠伤寒沙门氏菌、粘质沙雷氏菌及多种假单胞菌属等肠杆菌科菌株等。
此外，将本发明的载体转化到真核细胞的情况下，可以使用酵母（酿酒酵母（Saccharomyce cerevisiae））、昆虫细胞、人类细胞（例如，CHO细胞系（中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary））、W138、幼仓鼠肾细胞（BHK）、非洲绿猴肾细胞（COS-7）、293、HepG2、3T3、RIN及狗肾（MDCK）细胞系）及植物细胞等作为宿主细胞。宿主细胞优选植物细胞。
作为将载体运送到宿主细胞内的方法，在宿主细胞为原核细胞的情况下，可以通过CaCl2方法、Hanahan方法（Hanahan,D.，J.Mol.Biol.，166：557-580（1983（Hanahan，D.，分子生物学杂志，166：557-580（1983）））及电穿孔方法等来实施。此外，在宿主细胞为真核细胞的情况下，可以通过显微注射法、磷酸钙沉淀法、电穿孔法、脂质体-介导转染法、二乙氨基乙醇（DEAE）-右旋糖酐处理法及基因枪等方法，将载体注入到宿主细胞内。
植物的转化是指将DNA转移到植物的任意的方法。这些转化方法不一定需要经过再生及（或）组织培养期。目前，植物种的转化不仅对于双子叶植物，包括单子叶植物量子的植物种也非常普遍。原则上，任意的转化方法均可被用于将本发明的杂合DNA导入到祖细胞中。所述方法可选自对于原生质体的钙/聚乙二醇方法（Krens，F.A.etal.，1982，Nature296，72-74;Negrutiu I.et al.，June1987，Plant Mol.Biol.8，363-373（Krens，F.A.等人，1982，自然296，72-74;NegrutiuI.等人，1987年6月，植物分子生物学8，363-373））、原生质体的电穿孔法（Shillito R.D.et al.，1985Bio/Technol.3，1099-1102（ShillitoR.D.等人，1985生物/技术3，1099-1102））、作为植物元素的显微注射法（Crossway A.et al.，1986，Mol.Gen.Genet.202，179-185（克洛斯威A.等人，1986，分子遗传学和基因组202，179-185））、各种植物元素的（DNA或者RNA-涂布的）微粒轰击法（Klein T.M.et al.，1987，Nature327，70（Klein T.M.等人，1987，自然327，70））、依据植物的浸润或者成熟花粉或者小孢子转化的，根癌土壤杆菌介导的基因转移（非完整性）中依据病毒的感染（EP0301316号）等。本发明的优选方法包含土壤杆菌介导的DNA转移。更为优选的是利用EP A120516号及美国专利第4,940,838号所记载的所谓双元载体技术的方法。
此外，本发明提供一种与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进的转化植物体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：用含有GGPS基因的重组载体转化植物细胞；及从上述转化的植物细胞中在分化植物。
本发明的方法包括用本发明的重组载体对植物细胞进行转化的步骤，上述转化可以通过例如根癌土壤杆菌介导。此外，本发明的方法包括从上述转化的植物细胞中对转化的植物进行再分化的步骤。从转化的植物细胞中对转化的植物进行再分化的方法可以使用本领域公知的任意方法。本发明方法中的GGPS基因如上所述。
转化的植物细胞要再分化成完整植物。来自愈伤组织或原生质体培养的用于成熟植物的再分化的技术为本领域所公知。
此外，本发明提供一种由含有GGPS基因的重组载体转化的植物体及种子，所述植物体及种子与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进。优选地，上述GGPS基因可以由SEQ ID No.1的碱基序列构成。优选地，上述植物体可以是双子叶植物，但并不限定于此。
上述双子叶植物可为岩梅科（裂缘花科，Diapensiaceae）、桤叶树科（Clethraceae）、鹿蹄草科（Pyrolaceae）、杜鹃花科（Ericaceae）、紫金牛科（Myrsinaceae）、报春花科（Primulaceae）、蓝雪科（Plumbaginaceae）、柿树科（Ebenaceae）、安息香科（Styracaceae）、山矾科、灰木科（Symplocaceae）、木犀科（木犀，Oleaceae）、马钱科（Loganiaceae）、龙胆科（Gentianaceae）、睡菜科（Menyanthaceae）、夹竹桃科（亚洲络石，Apocynaceae）、萝摩科（Asclepiadaceae）、茜草科（Rubiaceae）、花葱科（Polemoniaceae）、旋花科（Convolvulaceae）、紫草科（Boraginaceae）、马鞭草科（Verbenaceae）、唇形科（Labiatae）、茄科（Solanaceae）、玄参科（Scrophulariaceae）、紫葳科（Bignoniaceae）、爵床科（Acanthaceae）、胡麻科（Pedaliaceae）、列当科（Orobanchaceae）、苦苣苔科（Gesneriaceae）、狸藻科（Lentibulariaceae）、透骨草科（Phrymaceae）、车前草科（Plantaginaceae）、忍冬科（Caprifoliaceae）、五福花科（Adoxaceae）、败酱科（Valerianaceae）、川续断科（Dipsacaceae）、桔梗科（Campanulaceae）、菊科（Compositae）、杨梅科（Myricaceae）、胡桃科（Juglandaceae）、杨柳科（Salicaceae）、桦木科（Betulaceae）、山毛榉科（壳斗科，Fagaceae）、榆科（Ulmaceae）、桑科（Moraceae）、荨麻科（Urticaceae）、檀香科（Santalaceae）、桑寄生科（Loranthaceae）、蓼科（蓼，Polygonaceae）、商陆科（商陆，Phytolaccaceae）、紫茉莉科（Nyctaginaceae）、番杏科（Aizoaceae）、马齿苋科（Portulacaceae）、石竹科（Caryophyllaceae）、藜科（Chenopodiaceae）、苋科（Amaranthaceae）、仙人掌科（Cactaceae）、木兰科（Magnoliaceae）、八角科（Illiciaceae）、樟科（Lauraceae）、连香树科（Cercidiphyllaceae）、毛茛科（Ranunculaceae）、小檗科（Berberidaceae）、木通科（Lardizabalaceae）、防己科（茎藤，Menispermaceae）、睡莲科（Nymphaeaceae）、金鱼藻科（Ceratophyllaceae）、莼菜科（Cabombaceae）、三白草科（Saururaceae）、胡椒科（Piperaceae）、金粟兰科（Chloranthaceae）、马兜铃科（Aristolochiaceae）、猕猴桃科（Actinidiaceae）、茶科（山茶科，Theaceae）、藤黄科（Guttiferae）、茅膏菜科（Droseraceae）、罂粟科（Papaveraceae）、白花菜科（Capparidaceae）、十字花科（十字花，Cruciferae）、洋桐木科（悬铃木科，Platanaceae）、金镂梅科（金镂梅，Hamamelidaceae）、景天科（景天，Crassulaceae）、虎耳草科（Saxifragaceae）、杜仲科（Eucommiaceae）、海桐花科（Pittosporaceae）、蔷薇科（Rosaceae）、豆科（Leguminosae）、酢浆草料（Oxalidaceae）、牛儿苗科（Geraniaceae）、旱金莲科（Tropaeolaceae）、蒺藜科（Zygophyllaceae）、亚麻科（Linaceae）、大戟科（Euphorbiaceae）、水马齿科（Callitrichaceae）、芸香料（Rutaceae）、苦木科（Simaroubaceae）、楝科（Meliaceae）、远志科（Polygalaceae）、漆树科（Anacardiaceae）、槭树科（枫树科，Aceraceae）、无患子科（Sapindaceae）、七叶树科（hippocastabaceae）、清风藤科（Sabiaceae）、凤仙花科（水凤仙，Balsaminaceae）、冬青科（Aquifoliaceae）、卫矛科（卫茅科，Celastraceae）、旌节花科（Staphyleaceae）、黄杨科（Buxaceae）、岩高兰科（Empetraceae）、鼠李科（Rhamnaceae）、葡萄科（Vitaceae）、杜英科（Elaeocarpaceae）、椴树科（Tiliaceae）、锦葵科（Malvaceae），梧桐科（Sterculiaceae），瑞香科（瑞喷鼻科，Thymelaeaceae）、胡颓子科（Elaeagnaceae）、大风子科（Flacourtiaceae）、堇菜科（Violaceae）、西番莲科（Passifloraceae）、柽柳科（Tamaricaceae）、沟繁缕科（Elatinaceae）、海棠科（Begoniaceae）、葫芦科（Cucurbitaceae）、千屈菜科（千屈菜，Lythraceae）、石榴科（Punicaceae）、柳叶菜科（Onagraceae）、小二仙草科（Haloragaceae）、八角枫科（Alangiaceae）、山茱萸科（四照花科，Cornaceae）、五茄科（五科加，Araliaceae）或者伞形科（伞形花科）（Umbelliferae（Apiaceae）），但不局限于此。此外，本发明提供一种包含GGPS基因的组合物，其用于和与对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加。在本发明的组合物中，上述GGPS基因可以由SEQ IN No.1的碱基序列构成。本发明的组合物含有GGPS基因作为有效成分，通过将上述基因GGPS转化到植物体中，与对照组植物相比，能够促进植物体的生长或生物量的增加。上述植物如上所述。
下面，通过实施例详细地说明本发明。但是，下述实施例只是为了例示本发明，本发明的内容并不限定于下述实施例。
植物材料
在塑料容器内，在含有3%（w/v）蔗糖和0.3%（w/v）植物凝胶的穆拉西格（Murashige）及斯库格（Skoog）（1962）（MS）-基础培养基中生长的试管内培育的烟草植物体（（Nicotiana tabacum xanthi）获自高丽大学的申正燮教授。植物在23℃下，在由16小时的明亮及8小时的黑暗状态构成的长日照条件下维持1-2个月左右，所述16小时的明亮通过20μmolm-2s-1光强的40W冷白及富贵红荧光灯（1：1混合）来实现。从试管内培养的烟草叶上，在无菌状态下切下外植体（直径约为0.5cm）用于转化。
叶子外植体的再分化
为了形成新枝，将剪切的叶子的外植体分别转移到具有30ml培养基的9cm培养皿中，所述培养基含有MS盐和3%蔗糖、1%麦芽糖、2mg/l丙烯酸丁酯（BA）、0.2mg/l萘乙酸（NAA）及0.2%植物凝胶（pH5.8）。为了测定生长调节剂的效果，将MS培养基调节为NAA（0.2及0.5mg/l）及BA浓度（维持2mg/l）的组合。这些激素的组成基于对俄罗斯蒲公英的组织培养实验（Bae et al.，Plant Cell Tiss Org2005，80:51-57）（Bae等人，植物细胞、组织与器官培养2005,80：51-57））。培养条件是在20μmolm-2s-1光强的40W冷白及富贵红荧光灯（1:1混合）下的16小时的光周期下，维持在23±1℃。为了生根，将生出新枝（不定芽）的叶子的外植体在含有在1/2MS盐、1.5%蔗糖、0.05mg/l NAA及0.2%植物凝胶（pH5.8）的培养基中培养。
分别含有GGPS及GUS基因的pBI121的GV3101转化
根据冷冻解冻的方法对具有质粒pBI121的根癌土壤杆菌菌株GV3101进行分离，所述质粒pBI121分别含有β-葡萄糖醛酸酶（GUS）和GGPS（（Weigel and Glazebrook，Arabidopsis:A laboratory Manual.Cold Spring Harbour Laboratory Press，New York，2002，125-127（Weigel,Glazebrook，拟南芥：实验手册。冷泉港实验室出版社，纽约，2002，125-127））。GGPS基因从向日葵cDNA表达库中进行扩增，并在CaMV35S启动子的调节下，向pBI121载体的XbaI及BamHI位点克隆。使用含有GUS的pBI121作为对照组。在含有50mg/l的利福平和50mg/l的卡那霉素的固体YEP培养基中筛选具有质粒pBI121的农杆菌GV3101转化体，所述质粒分别含有GGPS及GUS基因。向农杆菌GV3101的质粒转化是从卡那霉素抗性GV3101菌落分离质粒后，使用GGPS特异性引物，通过PCR进行确认。
农杆菌介导转化协议（Bae等人，植物细胞、组织与器官培养2005，80：51-57（Bae et al.，Plant Cell Tiss Org2005，80:51-57））
1.叶子的外植体从实验管内培养的烟草幼苗上切取，在光照条件下，在预培养基（MS盐、3%蔗糖、1%葡萄糖、0.2mg/l NAA、2.0mg/lBA、50mg/l甜菜碱（betaine）、0.3%植物凝胶及0.1mM乙酰丁香酮，pH5.2）中培养6天左右。
2.农杆菌在28℃下，在含有100mg/l卡那霉素及50mg/l利福平的50ml YEP培养基中昼夜培养至OD600nm的值为0.6-0.8。
3.对培养液进行离心分离，沉淀物（pellet）在28℃下，在50ml的诱导溶液（1/2MS盐、3%蔗糖、1%葡萄糖、50mg/l甜菜碱、0.5g/lMES及0.1mM乙酰丁香酮，pH5.2）中悬浮1小时左右。
4.在常温下，将预培养的烟草叶外植体，轻轻地搅拌15分钟，并浸渍到最终的细菌培养液中，在灭菌的滤纸上简单地晾干，在25℃下，将用诱导溶液润湿的过滤纸覆盖到外植体上，从而能够维持共培养基（MS盐、3%蔗糖、1%葡萄糖、50mg/l甜菜碱、0.2mg/l NAA、2.0mg/l BA、0.3%植物凝胶及0.2mM乙酰丁香酮，pH5.2)的水分，并在黑暗条件下培养3天左右。
5.用清洗液（1/2MS盐、1.5%蔗糖、0.25g/l抗坏血酸及250mg/l头孢噻肟，pH5.8）清洗后，将外植物体移植到新枝诱导培养基（MS盐、3%蔗糖、1%麦芽糖、0.2mg/l NAA、2mg/l BA、0.3%植物凝胶及250mg/l头孢噻肟，pH5.8）中。
6.一周后，为了选择性再分化，在含有100mg/l卡那霉素的新枝诱导培养基中培养外植体。
7.外植体在3-5周期间，每2周转移到新鲜的选择性培养基中。
8.将生出新枝的外植体移植到含有100mg/l卡那霉素的生根培养基（1/2MS盐、1.5%蔗糖、0.05mg/l NAA、0.2%植物凝胶、pH5.8、250mg/l头孢噻肟）中。
9.在形成根后，为了强化植物体的耐受性（hardening），在移植到土壤3周之后，最终移植到温室中。
转化植物体的栽培
将转化植物体转移到温室中，用聚乙烯（有几个窟窿的）覆盖一周以防止水分的流失。使植物能够生长2周左右，竖起铁支撑杆使植物能够垂直地生长。及时地供水以使植物能够茁壮地生长。为了搜集关于花的个数、开花期、高度、生物量及种子的收获量的数据，定期查看温室。在其成熟时，搜集种子并收获植物。
收集种子并在28℃下干燥1周左右。此外，为了计算生物量，在65℃下，将收获的植物干燥10天左右。所搜集的种子用10%（v/v）次氯酸钠（sodium hypochlorite）+0.05%（v/v）吐温-20处理20分钟，用灭菌水清洗5次。在含有卡那霉素（100mg/l）的MS培养基中使种子发芽，在4℃的黑暗条件下维持3天左右，之后在23℃下，在由16小时的明亮及8小时的黑暗状态构成的长日照条件下维持15天左右，所述16小时的明亮通过20μmolm-2s-1光强的40W冷白及富贵红荧光灯（1:1混合）来实现。从培养基中筛选出茁壮的植物体，并移植到土壤中。使植物体在温室中健康的条件下生长，定期地查看温室并搜集数据。
酵母品系的筛选
为了获得T2酵母品系，从卡那霉素选择性培养基中进一步筛选转化的烟草植物体(T0代）。在T0、T1及T2再分化植物体中均观察到表现型特性。
实施例1：烟草的转化及再分化
使用农杆菌介导方法，生成对外来基因GGPS的3个独立的烟草转化品系。为了测定诱导不定芽的能力，对固定的BA浓度（2.0mg/l）和NAA的组合（0.2，0.5mg/l）进行研究。基于显示新枝形成的外植体的百分比及再分化的叶子形态，2mg/l BA及0.2mg/l NAA的组合最适合于烟草新枝的再分化。根的再分化不需要其它的细胞分裂素，在含有0.05mg/l NAA的MS培养基中显著地得到诱导。上述转化效率在20～50%的范围内。将再分化的新枝移植到含有100mg/l卡那霉素的生根诱导培养基中。在1个月之后观察到这些新枝的根的形成。上述根的形成的比例约为90%左右。用流水清洗生根植物体后，在23℃下，在由16小时的明亮及8小时的黑暗状态构成的长日照条件下，为了根系的训化及壮实的发育，将其种植在土壤中，维持45天，所述16小时的明亮通过20μmolm-2s-1光强的40W冷白及富贵红荧光灯（1:1混合）来实现。在45天之后，本发明人可以从植物中观察到生长良好的根系，之后，将上述植物转移到温室中。
实施例2：与对照组（GUS-转化烟草）及野生型（非转化母本）植物相比，GGPS-转化烟草的高度及生物量快速增加
过表达GGPS基因的转化的烟草与对照组的烟草植物体进行对比时，从整体上表现出快速的生长及发育。GGPS-T1-转化的植物体与GUS-T1-转化的植物体相比，显示出生长得到促进（高出72%的高度）（表1，图2）。在与GUS-T1-烟草品系（17cm）进行对比时，转化的GGPS-T1-烟草品系明显具有更高的高度（29cm）（图1）。此外，从T2转化的烟草品系中也可以看到相同的现象（图5）。因为p值非常小（p=0.0013，表1），因此原始数据非常具有显著性。
表1对照组和GGPS-转化的烟草植物体高度的比较
植物体 高度（cm）/植物体
对照组（GUS） 16.67±2.52
GGPS-4、5、6品系（T1） 28.67±0.58
*t-实验（p=0.0013），（时间（Age）-50天）
在对比转化-GGPS-T1-品系及对照组（GUS-T1-品系）活体及干燥的生物量时，与对照组烟草植物体相比，转化-GGPS-烟草品系表现出多出51%的生物体生物量（表2，图3）及多出69%的干燥生物量（表3，图4）。不仅是活体的生物量，在与干燥生物量的比较相关的数据等各种情况下，因p值非常小，因此非常具有显著性。
表2对照组及转化烟草植物体的新鲜的（fresh）生物量的比较
植物体 新鲜重量（g）/植物体
对照组（GUS） 54.18±3.64
GGPS-4,5,6品系（T1） 82.04±0.55
*t-实验（p=0.008），（时间-50天）
表3对照组和转化的烟草植物体的干燥（dried）生物量的比较
植物体 干重（g）/植物体
对照组（GUS） 5.38±0.76
GGPS-4,5,6品系（T1） 9.08±0.16
*t-实验（p=0.021），（时间-50天）
将野生型（非转化的母本）烟草植物体及用GGPS基因转化的烟草品系（T2）种植在温室内的土壤（上等土：珍珠岩：蛭石：泥炭=4:2:1:1）中，之后测定其5周之后的生长情况。其结果，可以确认用GGPS基因转化的烟草植物体与野生型（非转化的母本）烟草植物体相比，生长及生物量增加了约2倍左右（图5）。在与对照组IPPi（IPP异构酶）-转化的烟草品系（T2）相比，GGPS-转化烟草品系（T2）中也更显著地表现出植物生长促进现象（图5）。IPPi基因作为促进将IPP异构化（isomerization）为二甲基烯丙基焦磷酸酯（DMAPP，dimethylallyl pyrophosphate）的过程的酶，在相同的类异戊二烯（isoprenoid）化合物合成回路中，与GGPS相比处于上游（upstream）。
实施例3：心皮/花朵数量及开花期
本发明人不仅调查了GGPS-转化品系的植物高度及生物量的快速增加，而且还调查了心皮/花朵数量及开花期的GGPS的效果。开出将能够用肉眼确认第一朵花蕾且第一朵花开时定为花期。
在与对照组（GUS-转化）烟草品系进行对比时，种子/花朵数量在GGPS转化的烟草（T1）中增加了4倍（表4，图6）。因为p值非常小（p=0.003），因此上述数据非常具有显著性。
表4对照组和转化的烟草植物体的心皮/花朵数量的比较
植物体 心皮/植物体
对照组（GUS） 2.67±2.52
GGPS品系（T1） 12.67±4.62
*t-实验（p=0.0030），盆径：2.5L
在T0及T2GGPS-转化的烟草品系中也观察到了心皮/花朵数量的增加现象（图8、10）。在与野生型（非转化的母本）进行对比时，GGPS-T0-转化品系表现出花/心皮数量增加41%（表5，图9）。
表5野生型（非转化的母本）和转化烟草植物体的心皮/花朵数量的比较
植物体 种子荚/植物体
野生型 34.3±2.08
GGPS系（T0） 48.33±7.64
*t-实验（p=0.056），（时间-75天），盆径：7.5L
观察到开花所需的生长时间与对照组GUS-T1-转化烟草植物体相比，在GGPS-T1-转化烟草植物体中减少（图7）。本发明人可以确认转化的植物体开花所需的时间比对照组植物体少25%。
Figure IDA00003022594700011

Claims (10)

1.一种与对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加的方法，该方法包括将含有GGPS基因的重组载体转化到植物细胞中，从而使GGPS基因过表达的步骤。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物的生长或生物量的增加为植物生长速度的增加、早花期的诱导、高度的增加、种子产量的增加或花朵数量的增加。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述GGPS基因由SEQ ID No.1的碱基序列构成。
4.一种与对照组植物相比，生长或生物量的增加得到促进的转化植物体的制备方法，其包括以下步骤：用含有GGPS基因的重组载体转化植物细胞；及从所述转化的植物细胞再分化植物。
5.一种由权利要求4所述的方法制备的植物体，所述植物体与对照组相比，生长或生物量的增加得到促进。
6.根据权利要求5所述的植物体，其特征在于，所述植物体为双子叶植物。
7.权利要求5所述植物体的种子。
8.一种包含GGPS基因的组合物，所述组合物与对照组植物相比，促进植物的生长或生物量的增加。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述GGPS基因由SEQ ID No.1的碱基序列构成。
10.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述植物为双子叶植物。
CN201180048801.XA 2010-10-08 2011-10-05 促进植物的生长或生物量增加的ggps基因及其用途 Expired - Fee Related CN103153043B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20100098072 2010-10-08
KR10-2010-0098072 2010-10-08
PCT/KR2011/007351 WO2012047006A2 (ko) 2010-10-08 2011-10-05 식물의 생장 또는 바이오매스 증가를 촉진시키는 ｇｇｐｓ 유전자 및 이의 용도

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103153043A true CN103153043A (zh) 2013-06-12
CN103153043B CN103153043B (zh) 2015-04-08

Family

ID=45928212

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201180048801.XA Expired - Fee Related CN103153043B (zh) 2010-10-08 2011-10-05 促进植物的生长或生物量增加的ggps基因及其用途

Country Status (4)

Country Link
US (1) US9879236B2 (zh)
KR (1) KR101289405B1 (zh)
CN (1) CN103153043B (zh)
WO (1) WO2012047006A2 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103820475A (zh) * 2013-11-11 2014-05-28 天津大学 枸杞牦牛儿基牦牛儿焦磷酸合成酶基因及其编码的蛋白质和应用

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101334408B1 (ko) * 2012-06-08 2013-11-29 포항공과대학교 산학협력단 바이오매스 생산 증가 유전자 및 이를 이용한 형질 전환 식물체
KR101376520B1 (ko) * 2013-01-18 2014-03-26 서울대학교산학협력단 벼 유래의 OsPrMC3 유전자를 이용한 바이오매스 또는 종자 생산량이 조절된 형질전환 식물체의 제조방법 및 그에 따른 식물체
KR101449846B1 (ko) * 2013-04-25 2014-10-20 포항공과대학교 산학협력단 Ｍａｘ２－ｌｒｒ 도메인 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자를 포함하는 식물체의 유효 번식성 줄기 형성 촉진용 조성물

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1347454A (zh) * 1999-03-05 2002-05-01 格林诺瓦森植物生物技术股份有限公司 改善植物的农艺和营养价值的方法
US6410827B1 (en) * 1998-12-02 2002-06-25 E. I. Du Pont De Nemours And Company Geranylgernayl pyrophosphate synthases
JP2002281990A (ja) * 2001-12-26 2002-10-02 Human Genome Sciences Inc ヒトゲラニルゲラニルピロリン酸シンセターゼ
CN1406282A (zh) * 2000-03-01 2003-03-26 研究与发展研究院公司 种子产量、生物量、和收获指数增加的转基因植物
KR20070082647A (ko) * 2006-02-17 2007-08-22 주식회사 에이스바이오텍 대장균에 의한 라이코펜의 대량 제조방법
CN101138314A (zh) * 2007-07-26 2008-03-12 中国农业科学院油料作物研究所 具有高维生素a、抗衰老、抗病、抗氧化功能的油料作物的培育方法
KR20080101303A (ko) * 2007-05-17 2008-11-21 연세대학교 산학협력단 생장이 촉진된 고추 씨에이피엘에이원 (ＣａＰＬＡ１)형질전환 식물체 및 고추 씨에이피엘에이원 (ＣａＰＬＡ１)유전자
EP2199304A1 (en) * 2004-12-17 2010-06-23 Metanomics GmbH Process for the control of production of fine chemicals

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0290799B9 (en) 1983-01-13 2004-09-01 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Transgenic dicotyledonous plant cells and plants
NL8300698A (nl) 1983-02-24 1984-09-17 Univ Leiden Werkwijze voor het inbouwen van vreemd dna in het genoom van tweezaadlobbige planten; agrobacterium tumefaciens bacterien en werkwijze voor het produceren daarvan; planten en plantecellen met gewijzigde genetische eigenschappen; werkwijze voor het bereiden van chemische en/of farmaceutische produkten.
US6429356B1 (en) * 1996-08-09 2002-08-06 Calgene Llc Methods for producing carotenoid compounds, and specialty oils in plant seeds
WO2010033564A1 (en) * 2008-09-17 2010-03-25 Ceres, Inc. Transgenic plants having increased biomass

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6410827B1 (en) * 1998-12-02 2002-06-25 E. I. Du Pont De Nemours And Company Geranylgernayl pyrophosphate synthases
CN1347454A (zh) * 1999-03-05 2002-05-01 格林诺瓦森植物生物技术股份有限公司 改善植物的农艺和营养价值的方法
CN1406282A (zh) * 2000-03-01 2003-03-26 研究与发展研究院公司 种子产量、生物量、和收获指数增加的转基因植物
JP2002281990A (ja) * 2001-12-26 2002-10-02 Human Genome Sciences Inc ヒトゲラニルゲラニルピロリン酸シンセターゼ
EP2199304A1 (en) * 2004-12-17 2010-06-23 Metanomics GmbH Process for the control of production of fine chemicals
KR20070082647A (ko) * 2006-02-17 2007-08-22 주식회사 에이스바이오텍 대장균에 의한 라이코펜의 대량 제조방법
KR20080101303A (ko) * 2007-05-17 2008-11-21 연세대학교 산학협력단 생장이 촉진된 고추 씨에이피엘에이원 (ＣａＰＬＡ１)형질전환 식물체 및 고추 씨에이피엘에이원 (ＣａＰＬＡ１)유전자
CN101138314A (zh) * 2007-07-26 2008-03-12 中国农业科学院油料作物研究所 具有高维生素a、抗衰老、抗病、抗氧化功能的油料作物的培育方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHRISC.N.VANSCHIE ET.AL: "Geranyl diphosphate synthase is required for biosynthesis of gibberellins", 《THE PLANT JOURNAL 》, 31 December 2007 (2007-12-31) *
JERRY HEFNER ET.AL: "Cloning and Functional Expression of a cDNA Encoding Geranylgeranyl Diphosphate Synthase from Taxus canadensis and Assessment of the Role of this Prenyltransferase in Cells Induced for Taxol Production", 《ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS》, vol. 360, no. 1, 1 December 1998 (1998-12-01), XP002187493, DOI: doi:10.1006/abbi.1998.0926 *
KAI AMENT ET.AL: "Induction of a leaf specic geranylgeranyl pyrophosphate synthase and emission of (E,E)-4,8,12-trimethyltrideca-1,3,7,11-tetraene in tomato are dependent on both jasmonic acid and salicylic acid signaling pathways", 《PLANTA》, vol. 224, 20 June 2006 (2006-06-20), XP019443319, DOI: doi:10.1007/s00425-006-0301-5 *
SOO-KYUNG OH ET.AL: "Cloning, characterization, and heterologous expression of a functional geranylgeranyl pyrophosphate synthase from sunflower (Helianthus annuus l.)", 《J.PLANT PHYSIOL.》, vol. 157, 31 December 2000 (2000-12-31), pages 539 - 1 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103820475A (zh) * 2013-11-11 2014-05-28 天津大学 枸杞牦牛儿基牦牛儿焦磷酸合成酶基因及其编码的蛋白质和应用
CN103820475B (zh) * 2013-11-11 2016-06-22 天津大学 枸杞牦牛儿基牦牛儿焦磷酸合成酶基因及其编码的蛋白质和应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2012047006A3 (ko) 2012-07-19
KR20120036757A (ko) 2012-04-18
WO2012047006A2 (ko) 2012-04-12
US9879236B2 (en) 2018-01-30
US20130205447A1 (en) 2013-08-08
CN103153043B (zh) 2015-04-08
KR101289405B1 (ko) 2013-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105010339B (zh) 植物生长调整剂及其利用
JP6499292B2 (ja) プロトポルフィリノーゲンオキシダーゼ変異体を用いた植物及び／又は藻類の除草剤抵抗性付与又は増進方法
US20180135067A1 (en) Plant body ideal for high-density planting and use thereof
RU2446688C2 (ru) Композиция для получения растительного организма с улучшенным содержанием сахара и ее применение
CN103153043B (zh) 促进植物的生长或生物量增加的ggps基因及其用途
CN103269578A (zh) 源自甘薯的IbOr-Ins基因突变体及其用途
Fukuda Advanced light control technologies in protected horticulture: A review of morphological and physiological responses in plants to light quality and its application
US20150240251A1 (en) Composition for regulating flowering of a plant containing the gene coding for abi3 protein
CN105925590B (zh) 除草剂抗性蛋白质、其编码基因及用途
CN114277014B (zh) 拟南芥at5g10290基因在调控植物生长中的应用
KR101315068B1 (ko) 시네코시스티스 속 ＰＣＣ6803 유래 ＳｂｔＡ 유전자 및 이의 용도
KR101270232B1 (ko) 식물의 카로티노이드 함량을 증가시키는 ｐａｃ 다중 발현 유전자 및 이의 용도
CN103917087A (zh) 大量蓄积类胡萝卜素以及花青素的转化甘薯植物体的制备方法以及由此制备的植物体
KR101350170B1 (ko) 안토시아닌 함량이 증가된 형질전환 식물체의 제조 방법 및 그에 따른 식물체
JP2011239684A (ja) 転写因子を利用した植物の物質生産性の改良
CN102206259B (zh) 来自红薯根茎的IbLEA14基因及其用途
WO2010125221A1 (es) Genes homólogos al gen flowering locus t (ft) y su uso para modular la tuberización
Sharma et al. Plant leaf senescence: Integrating multiple environmental and internal cues
KR101407336B1 (ko) 택사디엔 신타아제 유전자로 형질전환된 식물체 및 이를 이용한 택사디엔의 대량 생산 방법
KR101270231B1 (ko) 식물의 염 스트레스에 대한 저항성을 증가시키는 ＡｔＳＺＦ2 유전자 및 이의 용도
KR101325046B1 (ko) 자스몬산 유도발현 시스-액팅 인자 및 이의 용도
KR101315345B1 (ko) 도꼬마리 개화조절 유전자 ＸｓＦＴｓ 및 이의 용도
JP2022154069A (ja) 植物における、クロロフィルを保持する能力、クロロフィルを生産する能力、及び、生長する能力から選択される１以上の能力を評価する方法
KR101548052B1 (ko) 식물의 개화조절인자인 ＣｍＳＯＣ１ 신규 유전자 및 이를 이용한 식물의 개화시기 조절 방법
JP2005065693A (ja) ユビキノン高含有酵母又は植物の作製方法、及び、該ユビキノン高含有酵母又は植物を用いたユビキノンの製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150408

Termination date: 20201005

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee