CN103141490B - N6-(2-羟乙基)腺苷在制备农作物杀虫试剂中的应用 - Google Patents

N6-(2-羟乙基)腺苷在制备农作物杀虫试剂中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种杀虫试剂,该试剂包括N6-(2-羟乙基)腺苷和辅助试剂,其中,该试剂可用于来防治农作物上的害虫。该杀虫试剂原料易得,配制方便,对环境污染小,具有较强的市场竞争力和开发前景。

Description

N6-(2-羟乙基)腺苷在制备农作物杀虫试剂中的应用
技术领域
本发明属于生物农药领域,特别的,本发明涉及一种可以防治农作物害虫的农药。
背景技术
随着化学农药及传统农药剂型的大量使用,农药公害、环境污染等一系列问题逐渐引起了人们的关注。在不断追求农药高效、低毒、低残留、与环境相容性好的同时,通过制剂技术的创新和完善,降低农药使用带来的风险,已经成为制剂领域的研究热点。一些传统的农药剂型如粉剂、可湿性粉剂、乳油正逐步被水基型对环境友好的农药新剂型如水悬浮剂(SC)、水乳剂(EW)、悬乳剂(SE)、微乳剂(ME)、水分散粒剂(WG)、干悬浮剂(DF)、可溶性粒剂(SG)、微囊悬浮剂(CS)等所取代,其中水悬浮剂(SC)发展迅速。1992年英国销售的悬浮剂占全部制剂销售量的23%,超过可湿性粉剂。我国自20世纪70年代开始研制悬浮剂以来,无论在配方研究、加工工艺,还是在制剂品种、数量上都获得较大发展。但是,还是有必要提供一些对环境几乎无有害影响的生物农药,这些农药残留小,对自然环境几乎没有污染。
发明内容
经本发明人小组的研究表明在医药上用于治疗一些疾病的化学试剂N6-(2-羟乙基)腺苷可以有效杀死农作物上的害虫。
一方面,本发明提供N6-(2-羟乙基)腺苷在制备农作物杀虫试剂的应用。在一个优选的方式中,害虫可以为鳞翅目(Lepidoptera)、膜翅目(Hymenoptera)或同翅目(Homoptera)的昆虫。在一些优选的方式中,昆虫为小菜蛾和蚜虫。
本发明提供一种杀虫试剂,其特征在于,该试剂包括N6-(2-羟乙基)腺苷和辅助试剂,其中,该试剂可用于来防治农作物上的害虫。
在优选的方式中,所述的农作物的害虫包括鳞翅目(Lepidoptera)、膜翅目(Hymenoptera)和同翅目(Homoptera)的昆虫。在一些优选的方式中,昆虫为小菜蛾和蚜虫。
优选的,所述的辅助试剂包括分散剂。优选的,所述的辅助试剂还包括防冻剂和增稠剂。
优选的,该试剂包括质量百分比为20%的N6-(2-羟乙基)腺苷,质量百分比为1-3%的分散剂和质量百分比为66.5%的水。优选的,分散剂选自于下列试剂中的一种或几种:木质素磺酸钠、NNO、农乳500#、农乳700#、农乳600#、农乳1602#、亚甲基双甲基萘磺酸钠、烷基萘磺酸缩聚物钠盐或蓖麻油聚氧乙烯醚。优选的,分散剂选质量百分比为3%的木质素磺酸钠、质量百分比为2%的农乳700#、质量百分比为1-2%的农乳600#、质量百分比为2%的农乳1602#、质量百分比为1%的亚甲基双甲基萘磺酸钠、质量百分比为1%的烷基萘磺酸缩聚物钠盐或质量百分比为1%的蓖麻油聚氧乙烯醚。更优选的,分散剂为质量百分比为3%的木质素磺酸钠和质量百分比为1.5%的农乳600#。
优选的,辅助试剂为质量百分比为3%的木质素磺酸钠、质量百分比为1.5%的农乳600#、质量百分比为1.5%的黄原胶、质量百分比为5%的丙三醇和质量百分比为3%的膨润土。
优选的,杀虫试剂为水悬浮剂、水乳剂、悬乳剂、微乳剂、水分散粒剂、干悬浮剂、可溶性粒剂或微囊悬浮剂。另外,配置的农药存在的形式也是多种,也是本领域的一般技术通过有限次实验可以得到的。
优选的,增稠剂为羧甲基纤维素、尿素、聚乙烯醇、硅酸镁铝或黄原胶。
优选的,辅助试剂还包括防冻试剂,防冻试剂选自于乙二醇、丙二醇、丙三醇、甘油-乙醚双甘醇、甲基丙撑双甘醇、或尿素中的一种或几种。
本领域的技术人员知晓,选取何种浓度的N6-(2-羟乙基)腺苷来配置杀虫试剂可以根据需要进行配置,例如浓度为1-50%都可以,通过有限次实验就可以得到,例如配置质量百分比浓度为5%,2%,25%,30%等。
本发明的有效成分N6-(2-羟乙基)腺苷可以从自然界分离获得,也可以从商业市场上购买。例如参照中国专利200610008465.7的方法进行提取,也可是从上海信燃科技发展有限公司(地址:上海市莘浜路35弄1号501室)等购买。该结构一般常在医药上作为药物,例如止痛药等的研究,本发明小组发现对农作物上的一些害虫也具有致死作用,可以用防治农作物的昆虫。
有益效果
本发明提供一种新型的生物农药,该农药的原料易得,配制方便,对环境污染小,具有较强的市场竞争力和开发前景。
附图说明
图1是本发明的一个实施方式中的20%蝉拟青霉提取物悬浮剂制备流程图。
图2为20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾的选择性拒食作用效果比较图;
图3为20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾的非选择性拒食作用效果比较图。
具体实施方式
以下列举有限的实施例子来说明书本发明是如何实施的,这些说明并不是对本发明的权利要求的限制。
一、包括N6-(2-羟乙基)腺的悬浮剂的制备
1.1材料
N6-(2-羟乙基)腺苷(≥98%)(从上海信燃科技发展有限公司(地址:上海市莘浜路35弄1号501室);
木质素磺酸钠(俄罗斯),广州柏延化工有限公司;
亚甲基双萘磺酸盐(NNO),上海助剂厂;
农乳500#,农乳700#,农乳600#,农乳1602#,邢台蓝星助剂厂;
亚甲基双甲基萘磺酸钠(MF),上海助剂厂;
烷基萘磺酸缩聚物钠盐(M),AKZO NOBEL Co;
蓖麻油聚氧乙烯醚(BY),欧斯特化工有限公司;
黄原胶(XG),淄博海澜化工有限公司;
丙三醇,上海助剂厂;
膨润土,潍坊市坊子区兴隆膨润土厂。
1.2仪器与设备
日本岛津LC-6A高效液相色谱;
S-501型超级数显恒温器(辽阳博大科学仪器有限公司);
DNP-9162型电热恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司);
旋转式黏度计NDJ-型(上海天平仪器厂);
马尔文激光粒度分布仪(英国马尔文公司);
高剪切混合乳化机(上海坤丰日化设备有限公司);
砂磨机(沈阳化工研究院有限公司)。
实施例1 悬浮剂的制备
按照配方要求,将N6-(2-羟乙基)腺苷原药、分散剂、防冻剂、增稠剂和水计量后加入原料混合罐中,开动高剪切乳化机,以9000r/min的速度搅拌5min,搅拌粗磨后,将浆料移入砂磨机中,进行砂磨,直至细度达到平均粒径3~5μm时为止,即得成品。工艺流程如图1所示。
实施例2 润湿分散剂的选择
由于农药悬浮剂属于一种不稳定的分散体系,其粒径一般只有几个微米大小。如果选择的分散剂不适合原药本身的理化性质,那么所制作出来的悬浮剂的稳定性就会很差,在贮存过程中通常发生凝聚和结底现象。从而影响产品的质量和药效的发挥。通过大量的工作和仔细的筛选,结合N6-(2-羟乙基)腺苷的理化性质的研究经验,选择了木质素磺酸钠、NNO、500#、700#、600#、1602#、MF、M、BY不同种类的分散剂进行试验。试验结果(见表1)表明第1、2号样品的配方不符合农药悬浮剂的要求,而第3-10号样品的配方均符合农药悬浮剂的标准要求,其中第6号样品性能最稳定,效果最好。
表1:20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂配方筛选
实施例3 增稠剂的选择
黏度是悬浮剂稳定机制的3个重要因素之一。适宜的黏度将使制剂具有良好的稳定性和高的悬浮率。通过我们的实验,本发明的悬浮剂一般情况下采用黄原胶、羧甲基纤维素、尿素、聚乙烯醇、硅酸镁铝等物质作增稠剂(实验数据略)。
其中:当使用黄原胶时,可以获得适宜的黏度,当用量为3%时,获得的黏度过大,影响了产品在水中的分散性及悬浮率;用量为1.5%时,可以获得较为理想的制剂黏度,对分散性和悬浮率无影响(各个配方的实验数据见表1)。
实施例4 防冻剂的选择
防冻剂也称冰点调节剂或抗凝剂。以水为分散介质的农药悬浮剂,其配方不仅适用于南方的生产、贮存和应用,而且也要适用于北方地区寒冷条件下的生产、贮存和应用。在南方可以少加甚至不加防冻剂,而在北方必须添加防冻剂。本发明可以使用的防冻剂有乙二醇、丙二醇、丙三醇、甘油-乙醚双甘醇、甲基丙撑双甘醇、尿素等。本配方选用了乙二醇、尿素和丙三醇做防冻效果试验。试验表明:当使用丙三醇,用量为5%时,在-18℃下,连续7d不冻结,可以得到满意的结果(各个配方的实验数据见表1)。
实施例5、热贮稳定性试验
将试样(6号配方)装于安瓿瓶中,密封后放入(54±2)℃的恒温烘箱中,热贮14d后取出,进行检测分析,其中20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂的有效成分分解率、悬浮率、流动性、倾倒性、湿筛等指标检测结果均符合标准要求(各个配方的实验数据见表1)。
实施例6 20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂的各项技术指标测定
按上述优选配方6配制的样品,检测其各项技术指标,结果见表2。
表2 20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂各项技术指标测定结果
实施例7、室内生测试验
采用配方6的药剂对小菜蛾进行了室内生测试验,处理后96h,500mg/L、400mg/L、300mg/L、200mg/L、100mg/L平均校正死亡率分别为:86.84%、84.21%、68.42%、32.89%、27.63%。其中500mg/L处理组平均校正死亡率极显著优于300mg/L、200mg/L和100mg/L处理组(1%),而与400mg/L处理组之间不存在显著差异;400mg/L处理组平均校正死亡率显著高于300mg/L处理组(5%),并极显著高于200mg/L和100mg/L处理组(1%);200mg/L和100mg/L处理组平均校正死亡率之间不存在显著差异。
表3 20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾防治效果
同时对配方3-5,7-10做了类似的实验获得类似的结果,实验数据略。
结论
按本配方配制的20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂,经室内生测试验,测得结果表明400mg/L处理组96小时平均校正死亡率已达到80%以上,具有较好的杀虫效果。20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂制作工艺简单易行,性能稳定,质量可靠。所用原料易得,配制方便,对环境污染小,具有较强的市场竞争力和开发前景。
实施例8、N6-(2-羟乙基)腺苷对小菜蛾的杀虫活性研究
1.1供试材料
1.1.1供试药剂
20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂(实施1中的配方6)。
1.1.2供试昆虫
采集自温州新桥大棚蔬菜地的小菜蛾于恒温光照培养箱中经人工继代培养繁殖。挑选个体、色泽一致的2龄幼虫供试。
1.2试验方法
1.2.1N6-(2-羟乙基)腺苷各浓度梯度的制备
将20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂经梯度稀释成有效成分含量为1000mg/L、800mg/L、600mg/L、400mg/L、200mg/L用于测定其对小菜蛾幼虫胃毒活性。
将20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂经梯度稀释成有效成分含量为300mg/L、250mg/L、200mg/L、150mg/L、100mg/L用于测定其对小菜蛾幼虫的拒食活性和迟育活性。
1.2.2试虫的处理
对小菜蛾幼虫胃毒活性的测定:
剪取直径约7cm的健康、新鲜包菜叶片,涂抹各孢子悬浮液,自然晾干,连续涂抹3次,置于塑料培养皿中,培养皿盖留有直径约2cm的小孔,覆盖透气尼龙膜,保持叶片新鲜。用毛笔挑取室内饲养的健康、个体基本一致的3龄小菜蛾幼虫,接种于包菜叶片上饲养。每个处理设4个重复,每个重复供试虫数为20头。将各处理置于温度为25±1℃,相对湿度为75~80%,光照为16L:8D的培养箱中饲养,每日观察记录感染死亡虫数。以0.1%曲拉通溶液为对照(CK)。采用Abbott公式对死亡率进行校正。校正死亡率(%)=[(处理组死亡率-对照组死亡率)/(1-对照组死亡率)]×100。
对小菜蛾幼虫拒食活性的测定:
采用浸渍圆形叶碟法。将新鲜平整的甘蓝叶片圆形打孔器(d=2cm)打成叶碟,在不同浓度N6-(2-羟乙基)腺苷药液中浸渍30s后取出,用干净的吸水纸吸去叶碟上多余的药液,为处理叶碟;对照叶碟用0.1%曲拉通溶液浸渍。
选择性拒食作用:
在培养皿中放入适当大小滤纸,同一培养皿中放入处理和对照叶碟各2枚,呈十字交错排列。接入3头已饥饿4h的3龄小菜蛾幼虫,封口。每处理10次重复,48小时后取死亡率为0的五组重复分别用方格纸测定叶碟被取食的叶面积,并计算平均取食叶面积。
选择性拒食率(%)=[(对照组取食叶面积-处理组取食叶面积)÷(对照组取食叶面积+处理组取食叶面积)]×100
非选择性拒食作用:
在培养皿中放入适当大小滤纸,同一培养皿中仅放入处理叶碟2枚,对照2枚叶碟放入另一培养皿中。接入3头已饥饿4h的3龄小菜蛾幼虫,封口。每处理10次重复,48小时后取死亡率为0的五组重复分别用方格纸测定叶碟被取食的叶面积,计算平均取食叶面积。
非选择性拒食率(%)=(对照组取食叶面积-处理组取食叶面积)÷对照组取食叶面积×100
小菜蛾幼虫迟育活性的测定:
将直径为7cm的甘蓝叶片在配制好的药液中浸30s后取出,晾干后置于直径为9cm、垫有湿滤纸的培养皿中,每皿接入15头已称重的小菜蛾3龄幼虫,3d后选取10头存活幼虫称重,每个处理重复4次,计算小菜蛾虫体体重增长抑制率。
体重增长抑制率(%)=(对照组平均增重一处理组平均增重)÷对照组平均增重×100
1.2.5数据分析
所得结果均采用Ducan’s新复极差法进行差异显著性分析。同列数据后不同小写字母表示在0.05水平上差异显著(P<0.05);同列数据后不同大写字母表示在0.01水平上差异显著(P<0.01)。
2结果与分析
2.120%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾的胃毒作用
表4表明,20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂1000mg/L、800mg/L、600mg/L、400mg/L、200mg/L处理组对小菜蛾均有一定的胃毒作用,且对小菜蛾的平均校正死亡率随着处理浓度的增加而增大。其中各浓度处理小菜蛾24h其死亡率均小于30%,但所有试虫均表现为食欲不振,精神萎靡,行动迟缓,且随着浓度的增大,其症状极为明显。
处理48h后,1000mg/L、800mg/L处理组平均校正死亡率分别为53.75%、48.75%,两者之间不存在显著差异,但均极显著优于600mg/L、400mg/L和200mg/L处理组(1%);600mg/L处理组平均校正死亡率极显著优于400mg/L和200mg/L处理组(1%);400mg/L和200mg/L处理组平均校正死亡率之间不存在显著差异。
处理后72h,1000mg/L、800mg/L、600mg/L、400mg/L、200mg/L平均校正死亡率分别为:78.21%、71.79%、58.97%、28.21%、21.79%。其中1000mg/L处理组平均校正死亡率极显著优于600mg/L、400mg/L和200mg/L处理组(1%),而与800mg/L处理组之间不存在显著差异;800mg/L处理组平均校正死亡率显著高于600mg/L处理组(5%),并极显著高于400mg/L和200mg/L处理组(1%);400mg/L和200mg/L处理组平均校正死亡率之间不存在显著差异。
处理后96h,1000mg/L、800mg/L、600mg/L、400mg/L、200mg/L平均校正死亡率分别为:86.84%、71.79%、84.21%、68.42%、32.89%。其中1000mg/L处理组平均校正死亡率极显著优于600mg/L、400mg/L和200mg/L处理组(1%),而与800mg/L处理组之间不存在显著差异;800mg/L处理组平均校正死亡率显著高于600mg/L处理组(5%),并极显著高于400mg/L和200mg/L处理组(1%);400mg/L和200mg/L处理组平均校正死亡率之间不存在显著差异。
表4 20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾的胃毒作用
2.2 20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾的拒食作用
室内拒食活性测定结果(图2、图3)表明,20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂300mg/L、250mg/L、200mg/L、150mg/L、100mg/L处理小菜蛾,其取食能力明显下降,表明该药液对小菜蛾3龄幼虫具有一定的拒食效果,其中随着处理浓度的增高,其拒食活性增强。20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂300mg/L、250mg/L处理小菜蛾48h后,其选择性拒食率分别为:83.82%、83.47%,该两处理组选择性拒食率之间不存在显著差异,但均极显著高于其它各低浓度处理组(1%);20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂300mg/L、250mg/L处理小菜蛾48h后,其非选择性拒食活性分别为:77.64%、75.73%,该两处理组非选择性拒食率之间不存在显著差异,但均极显著高于其它各地浓度处理组(1%)。
2.3 20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂对小菜蛾的迟育作用
20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂300mg/L、250mg/L、200mg/L、150mg/L、100mg/L处理小菜蛾3龄幼虫后其取食减少,排出的粪便也随之减少,虫体呈现活动缓慢,精神不振状态;3d后,随着处理浓度的增加其体重增加呈下降趋势(表5),各处理组试虫的平均体重增加值均极显著低于对照组(1%);从表5可见,300mg/L、250mg/L、200mg/L、150mg/L、100mg/L处理3龄幼虫3d后其生长发育抑制率分别为90.59%、87.13%、73.76%、52.48%、18.32%,其中,300mg/L和250mg/L处理组体重增长抑制率之间不存在显著差异,而300mg/L处理组体重增长抑制率极显著高于其它各处理组(1%);250mg/L处理组体重增长抑制率显著高于200mg/L处理组(5%),并极显著高于其它各低于其浓度的处理组(1%);200mg/L、150mg/L、100mg/L三处理组体重增长抑制率之间均存在极显著差异(1%)。
表5 蝉拟青霉分离水溶组分对小菜蛾的生长发育影响
2.4同时对配方3-5,7-10做了类似的实验获得类似的结果,实验数据略。
3讨论
迄今为止,国内外对蝉拟青霉的研究工作不多,且集中在其对人的药用治病方面。本研究组通过对N6-(2-羟乙基)腺苷的研究,发现对小菜蛾存在较强的致死作用。
本研究组通过研究,得到20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂,为探索其对小菜蛾的致病作用,我们配置成不同浓度试验其对小菜蛾的胃毒、拒食和抑制生长发育作用。试验结果表明20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂处理小菜蛾3龄幼虫96h后,1000mg/L、800mg/L平均校正死亡率分别为:86.84%、84.21%,两处理组平均校正死亡率之间不存在显著差异,但显著优于600mg/L处理组(5%),并极显著优于400mg/L和200mg/L处理组(1%),由此结果,我们可以指导田间药效试验时的浓度设置,上下限有效成分量分别为1000mg/L、600mg/L。20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂300mg/L、250mg/L、200mg/L、150mg/L、100mg/L处理小菜蛾,其取食能力明显下降,300mg/L、250mg/L处理小菜蛾48h后,其选择性拒食率和非选择性拒食率之间均不存在显著差异,但均极显著高于其它各低浓度处理组(1%),200mg/L处理小菜蛾48h后其选择性拒食率和非选择性拒食率分别为71.30%和65.75%,均极显著优于150mg/L、100mg/L处理组(1%);说明20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂在有效成分含量为200mg/L~300mg/L时虽然对小菜蛾的胃毒作用较低,但能抑制小菜蛾取食行为,可在小菜蛾种群量小时处理蔬菜预防小菜蛾的危害。20%N6-(2-羟乙基)腺苷悬浮剂300mg/L、250mg/L、200mg/L、150mg/L、100mg/L处理小菜蛾3龄幼虫后其体重增加呈下降趋势,生长发育抑制分别为90.59%、87.13%、73.76%、52.48%、18.32%,其中,300mg/L处理组和250mg/L处理组体重增长抑制率之间不存在显著差异,而300mg/L处理组体重增长抑制率极显著高于其它各处理组(1%);250mg/L处理组体重增长抑制率显著高于200mg/L处理组(5%),并极显著高于其它各低于其浓度的处理组(1%)。小菜蛾在其生长发育过程中要通过不断的取食才能维持其机体的正常生长,含有N6-(2-羟乙基)腺苷的农药,其高剂量能够对小菜蛾较快的致死,而低剂量能引起小菜蛾的取食活动降低,从而抑制其生长发育最终导致其死亡,因此有望发展N6-(2-羟乙基)腺苷成为新型安全的小菜蛾生物防治农药。
实施例9、N6-(2-羟乙基)腺苷对蚜虫的杀虫活性研究
通过实验,获得与小菜蛾类似的结果,发现N6-(2-羟乙基)腺苷对蚜虫也有致死的作用,虽然具体对蚜虫的致死浓度不太一样(具体实验数据略)。

Claims (3)

1.N6-(2-羟乙基)腺苷在制备防治农作物上蚜虫的杀虫试剂的应用,其中,所述杀虫试剂包括质量百分比为20.5%的N6-(2-羟乙基)腺苷,质量百分比为3%的木质素磺酸钠、质量百分比为1.5%的农乳600#、质量百分比为1.5%的黄原胶、质量百分比为5%的丙三醇;质量百分比为3%的膨润土和质量百分比为65.5%的水。
2.N6-(2-羟乙基)腺苷在制备防治农作物上同翅目的杀虫试剂的应用,其中,所述的杀虫试剂包括质量百分比为20.5%的N6-(2-羟乙基)腺苷,质量百分比为3%的木质素磺酸钠、质量百分比为1.5%的农乳600#、质量百分比为1.5%的黄原胶、质量百分比为5%的丙三醇;质量百分比为3%的膨润土和质量百分比为65.5%的水。
3.N6-(2-羟乙基)腺苷在制备防治农作物上的小菜蛾的杀虫试剂的应用,其中,所述的杀虫试剂包括质量百分比为20.5%的N6-(2-羟乙基)腺苷,质量百分比为3%的木质素磺酸钠、质量百分比为1.5%的农乳600#、质量百分比为1.5%的黄原胶、质量百分比为5%的丙三醇;质量百分比为3%的膨润土和质量百分比为65.5%的水。
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