CN105613605B - 一种植物源杀蚜剂刺槐种子杀虫植物材料 - Google Patents
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Abstract
一种植物源杀蚜剂刺槐种子杀虫植物材料，属于杀虫剂技术领域。将刺槐种子干燥粉碎，再浸提减压浓缩后的浸膏、浸膏干燥后的粉末以及经过不同溶剂萃取后的浓缩浸膏及干燥后物质。本发明研究表明：刺槐种子提取物对蚜虫具有较高的杀虫活性，具有防治蚜虫危害的作用，且具有无公害、安全高效的特点，能够适用于为生产绿色、无污染农产品的植物源农药的新的潜在植物材料。
Description
技术领域
本发明属于杀虫剂技术领域，具体涉及一种植物源杀蚜剂刺槐种子杀虫植物材料。
背景技术
蚜Myzus persicae(Sulzer)，属半翅目Hemiptera，蚜科Aphididae。别名蜜虫、腻虫。蚜虫是地球上繁殖最快、繁殖能力最强、最具破坏性的害虫之一，是农业和林业生产上危害最为重要的害虫之一。目前对蚜虫的控制多还是采用化学农药控制为主，然而长期的化学农药的使用，使得蚜虫产生了抗性并促进了高抗性种群的形成，并且广谱性农药的大量施用还容易杀伤天敌及有益生物。植物在生长发育过程中产生很多具有活性的次生代谢物，这次化合物多具有各种生物活性，因此，筛选具有杀虫活性的植物是未来开发新型安全的植物源杀蚜剂的发展方向和研究热点。目前，苦豆子、鱼藤、印楝以及除虫菊等杀虫活性的植物，已经被广泛的用作植物源杀虫剂的原料。
刺槐，学名Robinia pseudoacacia L。又名洋槐。属被子植物门，蔷薇目，豆科，蝶形花亚科，刺槐属的落叶乔木。原产北美，于18世纪末从欧洲引入青岛栽培，因其具有较强的适应性和速生性，现中国各地广泛栽植。目前国内外已有很多学者对刺槐的不同部位的化学成分及生物活性开展了相关的研究工作。已报道研究结果表明，刺槐中主要含有黄酮类、苷类、蛋白质及其多酚类等成分。具有多种生物活性，被广泛应用在医学和农业等领域。
经对现有的文献资料查阅表明，目前，刺槐用在植保中的研究较少。陈娇等在《天然产物研究与开发》(2002年5期)题为“58种植物提取物对葡萄霜霉病的抑菌活性筛选研究”的文章中报道了刺槐枝叶提取物对葡萄霜霉病菌孢子的萌发有抑制作用。代光辉等的中国专利(CN101147499)研究表明：刺槐茎叶水提取物对黄瓜白粉病有很好防治效果。代光辉等的中国专利(CN102687733A)研究表明刺槐枝、茎、叶、花提取物对朱砂叶螨具有很好的杀螨活性。刘红霞等在《林业科学研究》(2004年2期)题为“刺槐种子凝集素对舞毒蛾幼虫营养代谢影响的初步研究”表明，刺槐种子凝集素对舞毒蛾幼虫具有一定的毒杀作用。进一步检索表明，未见刺槐种子杀蚜虫活性的研究报道，同时也未见刺槐种子提取物用作植物源农药的专利公开。
发明内容
一种植物源刺槐种子杀虫植物材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将刺槐种子自然晾干粉碎后。加入4-20倍重量于刺槐种子粉末的乙醇-水溶液常温浸提，提取液过滤、收集、合并减压浓缩至浸膏，即得到刺槐种子乙醇粗提物浸膏；将刺槐种子乙醇粗提物放入-80℃的冷冻干燥机中冻干，即得到刺槐种子乙醇提取物干燥粉末；乙醇:水体积比1:(0-1)；
(2)将刺槐种子乙醇提物粗提物浸膏加入等体积的蒸馏水，超声波助溶，将其变成浸膏悬浮液，再用其等体积的石油醚萃取1-5次，萃取后取上层的石油醚相；减压浓缩至干，即得石油醚刺槐种子萃取物；
(3)将刺槐种子乙醇提取物干燥粉末用吐温80的蒸馏水溶液溶解，放入匀浆仪中匀浆，即得含量百分比为0.02％-0.5％的水悬浮液(药液1)，吐温80的蒸馏水溶液的质量浓度为0.01％-10％；
或将刺槐种子乙醇提取物干燥粉末用蒸馏水溶解，加丙酮助溶，放入涡旋仪上涡旋匀浆，配制成质量浓度为30-1000mg/L的水溶液(药液2)；
或将石油醚刺槐种子萃取物用丙酮溶解，配制成质量浓度为30-500mg/L的丙酮溶液(药液3)。
本发明得到的植物源刺槐种子杀虫植物材料作为杀蚜剂或防治蚜虫剂的应用。
本发明应用刺槐种子提取物控制蚜虫危害，为开发高效、低毒、低残留的植物源杀虫剂提供新材料和新方法，同时也为综合开发利用刺槐资源提供了新思路。本发明所述的刺槐种子提取物，包含将刺槐种子干燥粉碎，再浸提减压浓缩后的浸膏、浸膏干燥后的粉末以及经过不同溶剂萃取后的浓缩浸膏及干燥后物质。本发明研究表明：刺槐种子提取物对蚜虫具有较高的杀虫活性，具有防治蚜虫危害的作用，且具有无公害、安全高效的特点，能够适用于为生产绿色、无污染农产品的植物源农药的新的潜在植物材料。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明并不限于以下实施例。
实施例1
供试昆虫
棉蚜(Aphis gossypii Glover)2013年8月采集于河北省廊坊市郊棉田，室内用Holland营养液培育的棉苗繁殖数代。
供试药液的配制
将刺槐种子乙醇提取物干燥粉末用十万分之一的吐温80蒸馏水溶解，放入匀浆仪中匀浆，即含量百分比分别为0.02％、0.05％、0.1％和0.5％的水悬浮液(药液1)，保存待测。
将刺槐种子乙醇提取物干燥粉末用丙酮-蒸馏水溶液溶解(丙酮:蒸馏水的体积比范围为40:60-85:15)，放入涡旋仪上涡旋匀浆，配制成质量浓度分别为1000mg/L、500mg/L、250mg/L、125mg/L、62.5mg/L、31.25mg/L的真溶液(药液2)，保存待测。
将刺槐种子乙醇提取物的石油醚萃取物用丙酮溶解，配制成质量浓度分别为500mg/L、250mg/L、125mg/L、62.5mg/L、31.25mg/L的真溶液(药液3)，保存待测。
生物测定方法
1、触杀活性试验——浸叶法，刺槐种子乙醇提取物水悬浮液(药液1)对棉蚜的触杀活性的测定采用浸叶法，按照中华人民共和国农业行业标准(NY/T 1154.14-2008)杀虫剂第14部分-浸叶法标准实施。
选取室内水培棉苗上人工饲养的棉蚜，用毛笔轻挑出虫龄、大小一致的若蚜，作为活性试验中的供试用虫。将完整、生长良好的的带虫棉叶在待测药液(药液1)中浸渍5秒后取出，用吸水纸吸去多余的药液，设置不含刺槐种子乙醇提取物的对照组，处理相同，保证每个处理点滴150头以上，3次重复。处理后用湿棉花包住棉花叶柄放入培养皿里保湿。置于光照培养箱中，24h后在放大镜下进行镜检，记录死虫数，并用Abbott公式计算校正死亡率。
计算公式：
2、触杀活性试验——点滴法，刺槐种子乙醇提取物丙酮水溶液(药液2)和刺槐种子乙醇提取物的石油醚萃取物(药液3)对棉蚜的触杀活性采用点滴发，按照中华人民共和国农业行业标准(NY/T1154.1-2006)杀虫剂第1部分-点滴法标准实施。
选取室内水培棉苗上人工饲养的棉蚜，用毛笔轻挑出虫龄、大小一致的若蚜，作为活性试验中的供试用虫，用微量注射器吸取待测溶液，用自动微量点滴仪将供试药液点滴在蚜虫的前胸背板上，并设置不含药剂的丙酮作为空白对照。保证每个处理点滴150头以上，3次重复。处理后用湿棉花包住棉花叶柄放入培养皿里保湿，置于光照培养箱中，24h后在放大镜下进行镜检，记录死虫数，并用Abbott公式计算校正死亡率。
实验结果
1、浸叶法实验结果，在药液1浸叶法中，测定了刺槐种子乙醇提取物干燥粉末含量百分比分别为0.02％、0.05％、0.1％和0.5％的水悬浮药液对棉蚜的触杀活性。处理24h后，镜检结果表明，含量为0.02％、0.05％、0.1％和0.5％的三种水悬浮药液对蚜虫的24h校正死亡率分别为58.91％、81.73％、96.46％和100％。
2、六个不同浓度(1000mg/L、500mg/L、250mg/L、125mg/L、62.5mg/L、31.25mg/L)的刺槐种子乙醇提取物丙酮-蒸馏水溶液(药液2)对棉蚜的室内生物测定结果表明：刺槐种子乙醇提取物对蚜虫具有很好的杀蚜活性，实验结果见表1。从表1可知：刺槐种子乙醇提取物药液处理蚜虫24h后，表现出了很好的浓度-效应正相关关系。在供试浓度为500mg/L和1000mg/L，24h校正死亡率分别高达86.67％和94.44％，其24h的LC50值为148.476mg/L。实验结果表明刺槐种子乙醇提取物对蚜虫具有很好的杀蚜活性，具有很好的开发价值。
表1：刺槐种子乙醇提取物对蚜虫的杀虫活性
3、五个不同浓度(500mg/L、250mg/L、125mg/L、62.5mg/L、31.25mg/L)的刺槐种子乙醇提取物石油醚萃取物丙酮溶液(药液3)对棉蚜的室内生物测定结果表明：石油醚萃取物对蚜虫具有更高的杀蚜活性，实验结果见表2。从表2可知：刺槐种子乙醇提取物石油醚萃取物药液处理蚜虫24h后，同样表现出了很好的浓度-效应正相关关系。在供试浓度为250mg/L和500mg/L，24h校正死亡率分别高达79.55％和92.04％，其活性明显的高于乙醇提取物活性。石油醚萃取物对蚜虫的24h触杀活性的LC50值为61.405mg/L，显著的高于乙醇提取物活性(LC50＝148.476mg/L)。实验结果表明刺槐种子乙醇提取物的石油醚萃取相对蚜虫具有更好的的杀蚜活性，其活性较乙醇粗提物提高了2倍以上，将其进行深加工，做成合适的农药剂型具有很广泛的推广应用价值。
表2：刺槐种子乙醇提取物石油醚萃取物对蚜虫的杀虫活性
Claims (3)
1.一种植物源刺槐种子杀虫植物材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将刺槐种子自然晾干粉碎后,加入4-20倍重量于刺槐种子粉末的乙醇-水溶液常温浸提，提取液过滤、收集、合并减压浓缩至浸膏，即得到刺槐种子乙醇粗提物浸膏；将刺槐种子乙醇粗提物放入-80℃的冷冻干燥机中冻干，即得到刺槐种子乙醇提取物干燥粉末；
(2)将刺槐种子乙醇提物粗提物浸膏加入等体积的蒸馏水，超声波助溶，将其变成浸膏悬浮液，再用其等体积的石油醚萃取1-5次，萃取后取上层的石油醚相；减压浓缩至干，即得石油醚刺槐种子萃取物；
(3)将刺槐种子乙醇提取物干燥粉末用吐温80的蒸馏水溶液溶解，放入匀浆仪中匀浆，即得水悬浮液，吐温80的蒸馏水溶液的质量浓度为0.01％-10％；
或将刺槐种子乙醇提取物干燥粉末用蒸馏水溶解，加丙酮助溶，放入涡旋仪上涡旋匀浆，配制成水溶液；
或将石油醚刺槐种子萃取物用丙酮溶解，配制成丙酮溶液；
步骤(1)乙醇:水溶液的体积比范围是1:(0-1)；
步骤(3)水悬浮液中刺槐种子乙醇提取物干燥粉末质量含量百分比为0.02％-0.5％；水溶液中刺槐种子乙醇提取物干燥粉末质量浓度为30-1000mg/L；丙酮溶液中石油醚刺槐种子萃取物质量浓度为30-500mg/L。
2.按照权利要求1所述的制备方法制备得到的植物源刺槐种子杀虫植物材料。
3.按照权利要求1所述的制备方法制备得到的植物源刺槐种子杀虫植物材料作为杀蚜剂或防治蚜虫剂的应用。
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