CN102812969B - 一种植物源抗病毒剂，其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种植物源抗病毒剂，其中含有以甾烯醇类化合物为有效成分的锦葵科植物提取物原药为活性成分，以抗病毒剂的总重量计，所述原药的含量为0.01％－75重量％，以及助剂的含量为99.9－25重量％；其中所述原药中甾烯醇类化合物的含量为0.05-20重量％。本发明提供了该抗病毒剂的制备方法和应用；经室内和田间大量实验结果证明，本抗病毒剂可应用于防治多种植物的多种病毒病，其综合防效可达到72-82%。本发明抗病毒剂是一种对人、畜无害，安全高效的植物源农药。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物源抗病毒剂，其中含有以甾烯醇类化合物为有效成分的锦葵科植物提取物，并选择性地含有助剂。本发明的抗病毒剂具有良好的抗病毒活性，是天然、高效、安全的植物源抗病毒农药制剂。
背景技术
植物病毒病在世界范围内对农作物产量和质量构成严重威胁，每年造成的减产达10-30%，经济损失约200亿美元。我国是一个农业大国，每年因病毒病对粮食生产、园艺作物、经济作物等所造成的经济损失达数百亿元以上。因此，迫切需要开发研制抗病毒药物。国外从60年代初加大了这方面的研究，1985年日本登记的藻酸酪液蛋白（Mosanon）为紫茉莉提取蛋白和香菇菌汁提取物香菇菌素（Lentemin）曾被用于防治番茄病毒病。人工合成的抗病毒药物有病毒唑（Virazole，德国，1972）、吗啉甲基四氢嘧啶（1982；1996）、苯甲酰聚胺类（法国，1991）、三嗪类衍生物（德国，1992）等，但在田间应用较少。国内的病毒药物研究始于80年代初，迄今，研制并登记的产品有高脂膜、NS-83增抗剂、病毒A、植病灵等几种产品，大多是以化学品为主的混配制剂。目前国内病毒农药的现状是：（1）由于病毒对寄主的绝对寄生（专化寄生），其复制所需能量和物质由寄主细胞提供，虽然混配制剂较多，但是，缺乏直接作用于病毒的单一化合物农药品种，导致防治效果较差。（2）目前国内登记的药物绝大多数以盐酸吗啉胍等为主要成分，而盐酸吗啉胍长期以来作为医药用于临床病毒性疾病的治疗，如果在粮食作物与水果蔬菜等长期使用会造成药物残留，长期食用带残留农药的食品通常会引起人体产生抗药性问题。（3）化学病毒制剂的长期、大量使用，会造成严重的“农药公害”。因此，从生物源、特别是植物源寻找与开发新型的高活性抗病毒药物，不仅具有很高的理论价值，而且也在控制作物病毒病确保粮食丰产，绿色生态农业持续发展中具有重要的实际意义。
锦葵科(学名：Malvaceae）是锦葵目的一个科。木本或草本，茎皮有很多纤维，有粘液。锦葵科大约有75属，1000-1500种植物，分布于温带及热带。中国有16属，81种，36变种或变型，在全国各地都有分布。目前有关锦葵科植物含有的化合物的功能研究与抗病毒应用开发的报道较少，若能成功地从锦葵科植物筛选并开发研究具有生物活性的甾烯醇类化合物，这对农药、特别是抗病毒相关研究领域具有重要的意义。
本发明人以甾烯醇类化合物为有效成分的锦葵科植物提取物制备了抗病毒剂，在室内外系统测定了其生物活性与防治效果。锦葵科植物提取物在100ppm以下的优选浓度区间，对多种植物病毒以及所述病毒在不同植物上引起的单一类别的病害或多种类别的病害具有良好的防治效果，从而扩展了锦葵科植物提取物的应用范围。
发明内容
本发明的目的是提供了一种植物源抗病毒剂，所述的抗病毒剂含有以甾烯醇类化合物为有效成分的锦葵科植物提取物，并选择性地含有助剂。
本发明提供一种植物源抗病毒剂，其中含有以甾烯醇类化合物为有效成分的锦葵科植物提取物原药为活性成分，以抗病毒剂的总重量计，所述原药的含量为0.01％－75重量％，以及助剂的含量为99.9－25重量％；其中所述原药中甾烯醇类化合物的含量为0.05-20重量％。
优选地，所述原药中甾烯醇类化合物为1-10重量%，最优选为10重量％。
本发明的锦葵科植物可以是锦葵、木槿、黄花稔、花稔、秋葵、棉花、苘麻和大麻槿等植物。
上述锦葵科植物提取物原药可按下述方法制备：
（1）采集锦葵科植物的枝叶以及树皮，烘干并粉碎后备用；
（2）将粉碎后的材料按重量体积比1：1加水充分浸泡；
（3）加入三倍体积的乙酸乙酯提取，过滤获得提取液；
（4）材料残渣用乙酸乙酯重复循环提取一次，过滤获得重提液，残渣弃掉;
（5）将初次提取液和重提液合并；
（6）将合并后的提取液减压浓缩，得到原药。
上述锦葵科植物提取物可不经提纯直接用作本发明抗病毒剂的原料，为提高有效成分含量可以在再提纯之后用作抗病毒剂的原料。
本发明植物源抗病毒剂中所含有的助剂是农药制剂领域常规的辅助载体，可根据所制备的剂型进行选择，所述的助剂例如是赋形剂、填充剂、分散剂、悬浮剂、崩解剂、防腐剂或表面活性剂等。
本发明植物源抗病毒剂可以被制成任何常用的农药剂型，例如水剂、乳油剂、粉剂、微乳剂等。针对现代农药剂型向水基化、超微化、无粉尘和控制释放方面发展，其中水基化是农药发展的主要方向之一，故优选水剂、乳油剂。
当本发明的植物源抗病毒剂为水剂时，所述的水剂按体积百分比计包括下述组分：原药0.1-75％、溶剂11-80％，和助剂12-22％，优选为原药10-75％、溶剂11-80％，和助剂12-22％。
当本发明的植物源抗病毒剂为乳油剂时，所述的乳油剂以体积百分比计包括下述组分：原药为0.1-50％、溶剂20-70％，和助剂7-30％，优选的原药为10-50％、溶剂20-70％，和助剂7-30％。
其中所述的溶剂为选自水、乙醇、甲醇、乙腈、乙二醇、氯仿或乙酸乙酯的任意一种溶剂，或任意两种或多种溶剂的结合。
其中所述的助剂为选自下述的一种或多种辅剂：表面活性剂、湿润剂、分散剂、悬浮剂、填充剂、助溶剂、芳香剂、着色剂和防腐剂。
在制备水剂或乳油剂时，表面活性剂的使用非常重要。具体的，本发明所使用的表面活性剂包括阴离子表面活性剂或非离子表面活性剂，它们可单独使用，或一种或多种同类或不同类的表面活性剂复配使用。例如各种非离子表面活性剂单独使用或数种非离子表面活性剂复配使用；或各种阴离子表面活性剂单独使用或数种非离子表面活性剂复配使用；或一种或多种阴离子表面活性剂和一种或多种非离子表面活性剂复配使用。其中所述的非离子表面活性剂例如是：十八酸异丙酯、乳化剂NR-40、仲醇聚氧乙烯醚、松香胺聚氧乙烯(2)醚、谷氨酸月桂醇酯、双长链烷基酚聚氧乙烯醚柠檬酸酯、蓖麻油聚氧乙烯(20)醚、CGN-3植物性农药表面活性剂、表面活性剂JS-PS007、氨基聚醚有机硅表面活性剂SSI(epoxy modified polysiloxane)和农用硅表面活性剂BD-3077。所述的阴离子表面活性剂例如是C12-C16仲醇磺酸钠、棉籽油酸单乙醇酰胺-聚氧乙烯酸硫酸钠、2-十四烷氧基丙酸钠和琥珀酸二(2-甲基戊酯)磺酸钠。
通常，为方便使用或运输储存，可首先制备成浓度较高的制剂，例如活性成分浓度大于0.03％(重量比)或浓度更高的制剂，例如制成活性成分浓度为0.3％-5％的制剂，在使用之前通过稀释获得活性成分浓度适于使用的制剂，例如0.0007％-0.01％(即7-100ppm)的制剂。
本发明的又一目的是提供了上述抗病毒剂的制备方法，该方法可采用农药制剂领域的常用方法进行。
具体的，例如在制备本发明植物源抗病毒剂的水剂时，可将原药、溶剂与助剂按下述体积比混合：原药∶溶剂∶助剂＝0.1-75∶11-80∶12-22，优选原药∶溶剂∶助剂＝10-75∶11-80∶12-22，并在室温下充分搅拌即完成制备。
在制备本发明植物源抗病毒剂的乳油剂时，将原药、溶剂与助剂按下述体积比混合：原药∶溶剂∶助剂＝0.1-50∶20-70∶7-30，优选原药∶溶剂∶助剂＝10-50∶20-70∶7-30并在室温下充分搅拌即完成制备。
本发明的又一目的是提供了上述植物源抗病毒剂的应用，所述的应用包括用于防治病毒寄主植物时所引起的植物病害。
具体的，上述植物源抗病毒剂的应用是将所述抗病毒剂用于防治单一病毒侵染不同寄主或综合防治多种不同病毒混合侵染同一寄主或同类寄主引起的一种或多种植物病害。其综合防效可达到72-82%。
在本发明中，所述的病毒主要是指西瓜、甜瓜、西葫芦、番茄、烟草、小麦、水稻、玉米等寄主植物上的多种植物病毒。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步详细说明本发明
实施例1：锦葵科植物提取物原药的制备
（1）采集锦葵科植物的枝叶以及树皮，烘干并粉碎后备用；
（2）将粉碎后的材料按重量体积比1：1加水充分浸泡；
（3）加入三倍体积的乙酸乙酯提取，过滤获得提取液；
（4）材料残渣用乙酸乙酯重复循环提取一次，过滤获得重提液，残渣弃掉;
（5）将初次提取液和重提液合并；
（6）将合并后的提取液减压浓缩，得到原药。
经测试，该实施例制得的原药中甾烯醇类化合物的含量为10重量％。
实施例2水剂的制备
在调制釜中加入实施例1制备的原药12.0L、加2.0L乙腈和2.5L OP-10，在常温下搅拌40min，制得16.5L本农药水剂，该水剂中甾烯醇类化合物的含量为7.2重量％。
实施例3乳油剂的制备
取实施例1制备的原药110ml，加100毫升乙腈和16ml OP-1，在常温下搅拌40min，即制得226ml乳油剂，该乳油剂中甾烯醇类化合物的含量为4.9重量％。
实施例4生物测试
实验药剂为实施例2的本发明的植物源抗病毒剂，对照药剂为20%盐酸吗啉胍.铜WP/1)moroxydine hydrochloride 2）copperacetate，黑龙江省齐齐哈尔市化工研究所产品。供试作物为番茄，防治对象为番茄花叶病毒。
实验小区田块做试验药剂200ml/亩，对照药剂和空白对照，设立3个处理，每个处理重复3次，共9个小区，每个小区15平方米，均采用随机区组排列。施药方法为每亩地兑水75公斤，喷雾。第一次施药在发病初期，以后每隔7天喷雾防治一次，共施三次药。试验期间棚内最低温度为20℃，最高为34℃。土壤肥力中等。每次施药后都持续观察番茄植株是否产生药害，并记录。
药害分级方法：
-：无药害；+：轻度药害，不影响作物生长；++：中毒药害，可复原，不会造成作物减产；+++：重度药害：影响作物生长，对作物产量和质量造成一定程度的损失；++++：严重病害，作物生长受阻，产量和质量损失严重。
药效调查采用每小区对角线5点取样，每点选3株，共15株。第一次施药前调查病情基数，第三次施药后7天调查病情。根据病情指数按下列公式计算出防治效果，再按DMRT法测定处理间防效差异显著性。
病叶分级标准：
0：无症状；1：1-2叶片花叶；3：中上部叶片花叶；5：少数叶片畸形；7：多数叶片重花叶，畸形，植株矮缩；9：多数叶片重花叶，畸形，植株矮化严重或枯死。
式中：CK0-——空白对照区施药前病情指数；
CK1-——空白对照区施药后病情指数；
Pt0-——药剂处理区施药前病情指数；
Pt1-——药剂处理区施药后病情指数。
调查结果见下表，从表中数据可得出本发明植物源抗病毒剂对番茄花叶病毒病的防效为72.3%，可见本发明植物源抗病毒剂对番茄花叶病毒病有较好的防治效果。
本发明植物源抗病毒剂防治番茄花叶病毒病
本发明的一种植物源抗病毒剂，其制备方法和应用已经通过具体的实例进行了描述，本领域技术人员可借鉴本发明内容，适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。
Claims (2)
1.一种植物源抗病毒剂，其中含有以甾烯醇类化合物为有效成分的锦葵科植物提取物原药为活性成分，以体积计算，所述抗病毒剂包含72.73％的锦葵科植物提取物原药，12.12％的乙腈以及15.15％的OP-10；所述锦葵科植物提取物原药是按照如下方法制备的：
（1）采集锦葵科植物的枝叶以及树皮，烘干并粉碎后备用；
（2）将粉碎后的材料按重量体积比1：1加水充分浸泡；
（3）加入三倍体积的乙酸乙酯提取，过滤获得提取液；
（4）材料残渣用乙酸乙酯重复循环提取一次，过滤获得重提液，残渣弃掉；
（5）将初次提取液和重提液合并；
（6）将合并后的提取液减压浓缩，得到原药；
所述原药中甾烯醇类化合物的含量为10重量％。
2.权利要求1所述的抗病毒剂用于防治番茄花叶病毒的用途。
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