CN103141439A - 一种营养强化卤虫体内dha、epa和ara的方法 - Google Patents

Abstract

一种营养强化卤虫体内DHA、EPA和ARA的方法，采用南极大磷虾粉作为强化卤虫的营养材料，其特征是用交叉搅拌研磨机将南极大磷虾粉超微粉碎使粒径＜120μm，然后按150g经超微粉碎的南极大磷虾粉加入到600mL纯净水的配比，用均质器搅拌，再用超声波破碎溶解，使虾粉的粒径＜50μm，制得南极大磷虾粉母液，并用纯净水将母液总体积补足至1L后，置于4℃冰箱内储存；强化卤虫的步骤是将卤虫收集至盛装清洁海水的桶中，水温(28±0.5)℃，盐度28±1，连续充气，自然光照，卤虫密度为（45±3）inds/mL，桶内施加上述制备的南极大磷虾母液，所用南极大磷虾粉的终浓度为150mg/L，强化时间6～18h。

Description

一种营养强化卤虫体内DHA、EPA和ARA的方法

技术领域

本发明属于水产生物饵料营养强化技术，特别是用南极大磷虾粉营养强化卤虫体内DHA、EPA和ARA的方法。

背景技术

卤虫（Artemia sp.），又称盐水丰年虫（Brine shrimp）、丰年虾等，隶属于节肢动物门，甲壳纲，鳃足亚纲，无甲目，盐水丰年虫科，是一种世界性分布的广温耐高盐的小型甲壳动物，也是海水仔、稚、幼鱼，虾蟹苗及名贵观赏水族动物的主要生物饵料。脂肪酸是水产动物幼体所必需的营养物质，也是幼体所需能量的主要来源，其组成和含量直接影响到幼体的正常生长发育和存活。脂肪酸中高度不饱和脂肪酸（HUFA）是水产动物幼体，尤其是海水仔、稚、幼鱼的必需脂肪酸，其中尤以二十二碳六烯酸（DHA）和二十碳五烯酸（EPA）最为重要。水产动物营养学的研究结果已表明：DHA和EPA有着维持海水仔稚鱼、虾蟹苗正常生长发育、细胞膜正常生理功能的重要作用。另外，近年来，HUFA中的二十碳四烯酸（ARA）也被认为是一种重要的必需脂肪酸，ARA可以衍生出多种二十烷类化合物包括前列腺素、凝血恶烷以及白三烯的前体物质，这些物质对鱼类具有广泛生理活性，有利于仔、稚鱼和虾蟹苗的渗透调节、生长发育及免疫防御等。卤虫作为一种重要的生物饵料，其营养价值的高低直接决定了海水仔稚鱼、虾蟹苗的正常生长发育及其他水产经济动物的养殖效果。然而，几乎所有品系的卤虫都缺乏DHA，ARA的含量也较低，EPA的含量则随卤虫品系的不同，而存在显著的差异，有些品系的卤虫具有一定量的EPA，而很多品系的卤虫也缺乏EPA。鉴于卤虫及其营养价值对于水产动物幼体的重要性，在投喂幼体之前，亟需对卤虫进行营养强化。

目前，卤虫主要采用微藻、油脂型强化剂和微囊强化剂等营养强化方法。微藻强化是最传统的卤虫营养强化方式，但微藻生产易受培养的环境条件和培养技术等因素的影响，而且有些微藻DHA含量比较低，如新月菱形藻（Nitzschia closterium），有些微藻本身缺乏DHA，如小球藻(Chlorella sp.)。黄旭雄等研究表明利用小球藻、螺旋藻(Spirulina sp.)干粉和新月菱形藻强化基本不能提高卤虫的DHA，因此微藻强化也存在较多的弊端。油脂型强化剂（如精制鱼油、乳化型鱼油等）和微囊强化剂（如50DE微囊等）均能起到营养强化作用，但由于油脂性强化剂易氧化，且易污染水质，导致卤虫成活率降低，而微囊化处理工艺复杂且成本昂贵，鉴于这些原因，这些产品在实践应用上受到诸多限制。因此，新型营养强化材料的开发利用仍是一项亟待解决的研究课题。

南极大磷虾（Euphausia superba）隶属节肢动物门，甲壳纲，磷虾目。南极大磷虾粉富含蛋白质、氨基酸、脂肪酸、维生素等营养物质，但是，目前未见有关南极大磷虾粉营养强化卤虫的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用南极大磷虾粉营养强化卤虫的方法，通过使用南极大磷虾粉提高卤虫体内DHA、EPA和ARA的含量，使强化后的卤虫营养更全面均衡，可满足鱼类、甲壳类幼体对卤虫的营养需求。

本发明的技术方案采用南极大磷虾粉作为强化卤虫的营养材料，其特征是先使用Pulverisette 16型交叉搅拌研磨机将南极大磷虾粉进行超微粉碎，使南极大磷虾粉的粒径＜120μm，然后按150g经超微粉碎的南极大磷虾粉加入到600mL纯净水的配比，并用均质器搅拌，均质器的转速为15500-22000rpm，搅拌时间为2min，然后按相同方法反复搅拌3次，再采用超声波破碎溶解20min，使南极大磷虾粉的粒径＜50μm，制得南极大磷虾粉母液，并用纯净水将南极大磷虾粉母液总体积补足至1L后，置于4℃冰箱内储存备用；强化卤虫的步骤是将卤虫收集至盛装清洁海水的桶中，水温(28±0.5)℃，盐度28±1，连续充气，自然光照，卤虫密度为（45±3）inds/mL，桶内施加上述制备的南极大磷虾粉母液，所用南极大磷虾粉的终浓度为150mg/L，即1L海水中，施加南极大磷虾粉的质量为150mg，强化时间6～18h。

本发明的突出特点是用南极大磷虾粉营养强化卤虫，并具有以下显著技术效果：一是按150mg/L的浓度使用南极大磷虾粉强化卤虫6～18h后，卤虫体内的DHA和EPA的含量均显著高于未强化卤虫（见附表1），DHA含量几乎是未强化轮虫的37.06～82.17倍，EPA含量几乎是未强化轮虫的1.16～1.36倍；二是南极大磷虾粉不仅可提高卤虫体内DHA和EPA的含量，而且也可提高ARA的含量，强化12～18h后，卤虫体内的ARA含量几乎是未强化轮虫的1.12～1.20倍（详见附表1）；三是比较在不同取样时间点的DHA、EPA和ARA的含量，强化时间以12和18h为最适宜；四是南极大磷虾粉营养价值高且资源丰富，成本尚不及50DE微囊、乳化型鱼油或油脂型鱼油成本的1/3，而且不易污染水质，也不影响卤虫成活率，强化过程操作简单，便于使用。

具体实施方式

本发明采用南极大磷虾粉作为强化卤虫的营养材料，南极大磷虾粉所含的DHA、EPA和ARA在脂肪酸组成中的含量分别为（16.86±2.12）%、（23.54±2.36）%和（0.17±0.02）%；

南极大磷虾粉母液制备步骤是先使用交叉搅拌研磨机将南极大磷虾粉进行超微粉碎，例如选用Pulverisette 16型交叉搅拌研磨机（德国FRITSCH GmbH公司生产）将南极大磷虾粉进行超微粉碎，使南极大磷虾粉的粒径＜120μm，然后按150g经超微粉碎的南极大磷虾粉加入到600mL纯净水的配比用均质器搅拌，均质器的转速为15500-22000rpm，搅拌时间为2min，然后按相同方法反复搅拌3次，再采用超声波破碎溶解20min，使南极大磷虾粉的粒径＜50μm，制得南极大磷虾粉母液，并用纯净水将南极大磷虾粉母液总体积补足至1L后，置于4℃冰箱内储存备用；强化卤虫的步骤是将酵母培养的卤虫收集至盛清洁海水的桶中，水温(28±0.5)℃，盐度28±1，连续充气，自然光照，卤虫密度为（45±3）inds/mL，桶内施加上述制备的南极大磷虾粉母液，所用南极大磷虾粉的终浓度为150mg/L（即1L海水中，施加南极大磷虾粉的质量为150mg），强化时间6～18h。

本发明通过下述方式进行验证：一个桶内不施加南极大磷虾粉母液，另一个桶内施加终浓度为150mg/L的南极大磷虾粉母液，于第6、12和18h分别收集两桶内的卤虫，用纯净水漂洗干净，冷冻干燥后，用Agilent6890型气相色谱仪分析测定卤虫体内脂肪酸，以色谱峰峰面积归一法计算出DHA、EPA和ARA的含量，即可以见到强化后卤虫体内的DHA、EPA、和ARA的含量显著高于未强化卤虫，DHA含量几乎是未强化轮虫的37.06～82.17倍，EPA含量几乎是未强化轮虫的1.16～1.36倍，ARA含量几乎是未强化轮虫的1.12～1.20倍（见附表1）；而比较在不同取样时间点的DHA、EPA和ARA的含量，终浓度为150mg/L南极大磷虾粉强化卤虫的时间以12和18h为最适宜。

附表1.南极大磷虾粉处理后卤虫体内3种必需脂肪酸含量（%）的测定数据：

Claims (1)

1.一种营养强化卤虫体内DHA、EPA和ARA的方法，本发明的技术方案采用南极大磷虾粉作为强化卤虫的营养材料，其特征是先使用Pulverisette 16型交叉搅拌研磨机将南极大磷虾粉进行超微粉碎，使南极大磷虾粉的粒径＜120μm，然后按150g经超微粉碎的南极大磷虾粉加入到600mL纯净水的配比，并用均质器搅拌，均质器的转速为15500-22000rpm，搅拌时间为2min，然后按相同方法反复搅拌3次，再采用超声波破碎溶解20min，使南极大磷虾粉的粒径＜50μm，制得南极大磷虾粉母液，并用纯净水将南极大磷虾粉母液总体积补足至1L后，置于4℃冰箱内储存备用；强化卤虫的步骤是将卤虫收集至盛装清洁海水的桶中，水温(28±0.5)℃，盐度28±1，连续充气，自然光照，卤虫密度为（45±3）inds/mL，桶内施加上述制备的南极大磷虾粉母液，所用南极大磷虾粉的终浓度为150mg/L，即1L海水中，施加南极大磷虾粉的质量为150mg，强化时间6～18h。