CN103131718A - 来源产甘油假丝酵母新型耐高渗功能基因CgHog1的克隆及其应用 - Google Patents
来源产甘油假丝酵母新型耐高渗功能基因CgHog1的克隆及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103131718A CN103131718A CN2012105787828A CN201210578782A CN103131718A CN 103131718 A CN103131718 A CN 103131718A CN 2012105787828 A CN2012105787828 A CN 2012105787828A CN 201210578782 A CN201210578782 A CN 201210578782A CN 103131718 A CN103131718 A CN 103131718A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gene
- cghog1
- candida
- pyx212
- hog1
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 35
- 241000431964 Candida glycerinogenes Species 0.000 title claims abstract description 15
- 238000010367 cloning Methods 0.000 title abstract description 6
- 206010020852 Hypertonia Diseases 0.000 title description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims abstract description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 101100395423 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) hog-1 gene Proteins 0.000 claims description 21
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 7
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims 1
- 238000010359 gene isolation Methods 0.000 claims 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 claims 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 7
- 230000037361 pathway Effects 0.000 abstract description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 4
- 101150064643 GPD gene Proteins 0.000 abstract description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 abstract description 3
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 abstract description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 abstract 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 15
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 15
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 5
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- 101000702488 Rattus norvegicus High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 4
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 101150096276 HOG1 gene Proteins 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 2
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100532518 Arabidopsis thaliana SAHH1 gene Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 2
- 101100395426 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) sty1 gene Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M lithium acetate Chemical compound [Li+].CC([O-])=O XIXADJRWDQXREU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000012215 gene cloning Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002727 hyperosmolar Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 230000008723 osmotic stress Effects 0.000 description 1
- 230000010254 physiological adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000028160 response to osmotic stress Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)耐高渗功能基因CgHog1克隆及其应用，属于分子生物学、生物技术领域。本发明涉及一种新型耐高渗功能基因CgHog1，从产甘油假丝酵母Candida glycerinogenes的染色体基因组中分离得到HOG途径的核心分子Hog1p的基因CgHog1。该基因全长1164bp，该序列无内含子，编码387个氨基酸。该基因是耐高渗功能基因，为今后更好地利用和改造包括产甘油关键酶基因GPD基因在内的600个生物基因表达调控这一重要的生物资源提供十分重要的手段，为利用基因工程技术改善微生物及其他高等真核生物的抗逆性改良提供了更加丰富的优良基因材料。
Description
技术领域
本发明涉及一种产甘油假丝酵母Hog1基因的克隆、重组及耐高渗透压抗盐性功能分析和应用，属于分子生物学和生物技术领域。
背景技术
产甘油假丝酵母(Candida glycerolgenesis)是我国拥有自主知识产权的一株具有优良发酵性能的工业菌株，能在55％葡萄糖或15％NaCl的高渗透压培养基上正常生长繁殖，具有耐高渗，目标产物高产量、高转化率、生产强度大的特点。
生物细胞在长期的进化过程中形成了一种保守的生理适应机制来应对外界环境的胁迫，例如：酿酒酵母拥有典型的有丝分裂原激活蛋白酶(MAPK)信号转导途径，其中高渗透压甘油应答途径(HOG途径)对于酵母细胞在耐渗条件下的生长是必需的，而且酿酒酵母的HOG途径是目前已知研究最为透彻的渗透压胁迫应答调控机制，根据报道，酿酒酵母Hog1一旦进入细胞核就调控基因转录，高渗应激下Hog1调节大约包括产甘油关键酶基因GPD基因在内的600个基因表达。但当前研究比较透彻的酵母其本身耐渗透性能不佳，正常生长一般不超过30％葡萄糖或7％NaCl，无法与产甘油假丝酵母相比，主要原因之一就是这些酵母的Hog1基因耐渗透性能不佳，故这些酵母的Hog1基因在生物细胞耐渗透改造中的应用受限制。
因此，克隆获得耐高盐高渗的产甘油假丝酵母Hog1基因并进行功能研究，是为今后更好地利用及改造包括产甘油关键酶基因GPD基因在内的600个生物基因表达调控这一重要的生物资源提供十分重要的手段。若将耐高盐高渗的功能基因Hog1导入植物，就可以进行耐盐新品种的选育，又若利用Hog1调控GPD高效启动子，可用于工业上浓醪发酵菌株改造。从而为培养抗旱耐盐生物新品种提供了新的材料和新的思路。
发明内容
本发明从产甘油假丝酵母中分离得到完整的Hog1基因序列，命名为CgHog1。并将CgHog1在真核宿主进行互补表达提高其耐盐、耐高渗功能。以在酿酒酵母Hog1缺失突变株为宿主为例说明。
本发明的技术方案：
(1)利用引物P-F：5′-CGCGAATTCATGTCTGCTGATGGAGAATTTA-3′；P-R：5′-GGGAAGCTTTTATTGCTGTTGTTGTTGGTGC-3′，克隆Candida glycerinogenes HOG1基因的全长序列基因SEQ ID NO.1；
(2)构建包含SEQ ID NO.1的表达载体，在真核宿主，如酿酒酵母Hog1Δ缺陷型突变株Y508中表达，表达的氨基酸序列为SEQ ID NO.2；以表达载体pYX212为例构建如下：
根据核苷酸序列SEQ ID NO.1设计一对引物克隆CgHog1基因全序列：
P-F：5′-CGCGAATTCATGTCTGCTGATGGAGAATTTA-3′；
P-R：5′-GGGAAGCTTTTATTGCTGTTGTTGTTGGTGC-3′；
在两引物的5′端分别添加EcoR I和HindIII酶切位点，下划线“_”表示引入的酶切位点。以Candida glycerinogenes基因组DNA为模板，经PCR得到HOG1的基因片段，经TA克隆挑取阳性克隆子。用EcoR I和Hind III双酶切基因片段和质粒pYX212经T4-DNA连接酶连接，导入E.coli JM109中，抗性平板挑取阳性克隆子，阳性克隆子即得表达质粒pYX212-CgHog1。
(3)CgHog1在耐盐耐高渗的改造应用，以在酿酒酵母Hog1Δ缺陷型突变株Y508为例说明：
1、CgHog1转入S.cerevisiae Hog1Δ缺失突变株Y508
将表达载体pYX212-CgHog1和pYX212分别醋酸锂转化S.cerevisiae Hog1缺失突变株Y508，以添加了酸水解干酪素和腺嘌呤，缺少尿嘧啶的培养基筛选转化子。菌落PCR验证转化子Y508-pYX212-CgHog1(Y-C)和Y508-pYX212(Y-p)。
2、高葡萄糖浓度(浓醪，高渗)下Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212的生长。
分别接种Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212于葡萄糖浓度为30％的培养基中，培养48h，菌株Y508-pYX212-CgHog1生长正常，原始对照菌株Y508-pYX212无生长现象。
3、不同NaCl浓度(盐)Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212的耐受试验.
Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212培养到菌浓大约106个/毫升，系列稀释10-1、10-2、10-3、10-4和10-5，点种4μL于NaCl浓度分别为0、0.5、1.0、2.0M的固体培养基中，培养3d观察酿酒酵母Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212菌落的差别(见图2.Y508-pYX212-CgHog1(Y-C)和Y508-pYX212(Y-p)在不同NaCl浓度的固体培养基上的菌落形态)。
通过CgHog1基因在酿酒酵母Hog1Δ缺陷型突变株Y508中互补表达可以看出，重组菌株Y508-CgHog1相较于对照原始菌株Y508抗盐耐高渗能力显著提高，可耐受2.0M以上的盐浓度。
结果表明转基因Y508相较于原始菌株，盐的耐受性、耐渗透压和甘油产量显著增加；
本发明的有益效果：本发明从产甘油假丝酵母Candida glycerinogenes的染色体基因组中分离得到HOG途径的核心分子Hog1p的基因CgHog1。该基因全长1164bp，该序列无内含子，编码387个氨基酸。研究表明基因CgHog1功能与在酿酒酵母Hog1完全相同，且性能更佳。该基因的获得扩大了微生物抗渗透压胁迫研究的基因资源，也为产甘油假丝酵母高产甘油的分子机理研究奠定了基础。是为今后更好地利用及改造包括产甘油关键酶基因GPD基因在内的600个生物基因表达调控这一重要的生物资源提供十分重要的手段。若将耐高盐高渗的功能基因Hog1导入植物，就可以加快耐盐新品种的选育，又若利用Hog1调控GPD高效启动子，可用于工业上浓醪发酵菌株改造，从而为培养抗旱耐盐生物新品种提供了新的材料和新的思路。
附图说明：
图1.PCR扩增CgHog1全基因
M：DL2000Marker；1：PCR获得的CgHog1全基因
图2.Y508-pYX212-CgHog1(Y-C)和Y508-pYX212(Y-p)在不同NaCl浓度的固体培养基上的菌落形态
具体实施方式
下面通过具体的实施例进一步阐述本发明，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明。
实施例1：Candida glycerinogenes Hog1基因克隆
利用引物P-F：5′-CGCGAATTCATGTCTGCTGATGGAGAATTTA-3′；P-R：5′-GGGAAGCTTTTATTGCTGTTGTTGTTGGTGC-3′，克降Candida glycerinogenes Hog1基因的全长序列基因SEQ ID NO.1；其核苷酸序列全长1164bp，序列详见SEQ ID NO.1，编码387个氨基酸，并且编码框内不含有内含子。见图1.PCR扩增CgHog1全基因。
将产甘油假丝酵母Hog1基因序列及其编码蛋白用BLAST程序GeneBank数据库进行核苷酸和蛋白质同源性检索，结果发现在氨基酸水平上，属于同一家族蛋白，且经验证功能相同。
实施例2：表达载体pYX212-CgHog1的构建
根据核苷酸序列SEQ ID NO.1设计一对引物克隆CgHog1基因全序列：
P-F：5′-CGCGAATTCATGTCTGCTGATGGAGAATTTA-3′；
P-R：5′-GGGAAGCTTTTATTGCTGTTGTTGTTGGTGC-3′；
在两引物的5′端分别添加EcoR I和Hind III酶切位点，下划线“_”表示引入的酶切位点。以Candida glycerinogenes基因组DNA为模板，经PCR得到HOG1的基因片段，经TA克隆挑取阳性克隆子。用EcoR I和Hind III双酶切基因片段和质粒pYX212经T4-DNA连接酶连接，导入E.coli JM109中挑取阳性克隆子，即得表达质粒pYX212-CgHog1。
实施例3：Candida glycerinogenes Hog1基因在提高酿酒酵母Hog1Δ缺陷型突变株Y508中耐盐耐高渗的应用
1、CgHog1转入S.cerevisiae Hog1Δ缺失突变株Y508
将表达载体pYX212-CgHog1和pYX212分别醋酸锂转化S.cerevisiae Hog1缺失突变株Y508，以添加了酸水解干酪素和腺嘌呤，缺少尿嘧啶的培养基筛选转化子。菌落PCR验证转化子Y508-pYX212-CgHog1(Y-C)和Y508-pYX212(Y-p)。
2、高葡萄糖浓度(浓醪，高渗)下Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212的生长。
分别接种Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212于葡萄糖浓度为30％的培养基中，培养48h，菌株Y508-pYX212-CgHog1生长正常，原始对照菌株Y508-pYX212无生长现象。
3、不同NaCl浓度(盐)Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212的耐受试验.
Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212培养到菌浓大约106个/毫升，系列稀释10-1、10-2、10-3、10-4和10-5，点种4μL于NaCl浓度分别为0、0.5、1.0、2.0M的固体培养基中，培养3d观察酿酒酵母Y508-pYX212-CgHog1与Y508-pYX212菌落的差别(见图2.Y508-pYX212-CgHog1(Y-C)和Y508-pYX212(Y-p)在不同NaCl浓度的固体培养基上的菌落形态)。
通过CgHog1基因在酿酒酵母Hog1Δ缺陷型突变株Y508中互补表达可以看出，重组菌株Y508-CgHog1相较于对照原始菌株Y508抗盐耐高渗能力显著提高，可耐受2.0M以上的盐浓度。
Claims (5)
1.一种产甘油假丝酵母(Candidaglycerinogenes)CgHog1基因，其核酸序列为SEQ ID NO.1，其特征在于Candida glycerinogenes耐高渗透压的功能基因。
2.根据权利要求1所示的核苷酸序列，编码Candida glycerinogenes Hog1p，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。
3.根据权利要求1所示的核苷酸序列，其特征在于基因分离自Candida glycerinogenes，基因全长1164bp，编码387个氨基酸。
4.如权利1所述Hog1的功能验证，其特征在于能显著提高生物细胞的抗盐耐渗透压能力。
5.如权利1所述Hog1基因用于抗旱、耐盐、浓醪发酵等生物新品的改造。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210578782.8A CN103131718B (zh) | 2012-12-28 | 2012-12-28 | 来源产甘油假丝酵母新型耐高渗功能基因CgHog1的克隆及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210578782.8A CN103131718B (zh) | 2012-12-28 | 2012-12-28 | 来源产甘油假丝酵母新型耐高渗功能基因CgHog1的克隆及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103131718A true CN103131718A (zh) | 2013-06-05 |
| CN103131718B CN103131718B (zh) | 2018-04-20 |
Family
ID=48492170
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210578782.8A Expired - Fee Related CN103131718B (zh) | 2012-12-28 | 2012-12-28 | 来源产甘油假丝酵母新型耐高渗功能基因CgHog1的克隆及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103131718B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106916837A (zh) * | 2017-03-31 | 2017-07-04 | 昆明理工大学 | 高渗透压甘油蛋白激酶基因RkHog1及其重组表达载体 |
| CN107384979A (zh) * | 2017-06-16 | 2017-11-24 | 昆明理工大学 | 高渗透压甘油蛋白激酶基因RKHog1的新用途 |
| CN107723302A (zh) * | 2017-11-30 | 2018-02-23 | 江南大学 | 一种过表达产甘油假丝酵母CgGAD1提高渗透压耐受性的方法 |
| CN114561410A (zh) * | 2022-03-30 | 2022-05-31 | 陕西科技大学 | 极端嗜盐曲霉Hog1基因及其在提高植物耐盐性中的应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102676539A (zh) * | 2011-03-16 | 2012-09-19 | 嘉汉林业(广州)有限公司 | 桉树wpgs5或wpgs6基因及其过量表达具有调控和增加植物生长量的功能 |
-
2012
- 2012-12-28 CN CN201210578782.8A patent/CN103131718B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102676539A (zh) * | 2011-03-16 | 2012-09-19 | 嘉汉林业(广州)有限公司 | 桉树wpgs5或wpgs6基因及其过量表达具有调控和增加植物生长量的功能 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BANSAL PK 等: "Isolation and sequence of the HOG1 homologue from Debaryomyces hansenii bycomplementation of the hog1 Delta strain of Saccharomyces cerevisiae", 《YEAST》 * |
| DE SCHUTTER,K. 等: "XM_002489530", 《GENBANK》 * |
| 岳华 等: "转酿酒酵母HOG1基因拟南芥植株的获得与检测", 《西北农业学报》 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106916837A (zh) * | 2017-03-31 | 2017-07-04 | 昆明理工大学 | 高渗透压甘油蛋白激酶基因RkHog1及其重组表达载体 |
| CN106916837B (zh) * | 2017-03-31 | 2020-05-15 | 昆明理工大学 | 高渗透压甘油蛋白激酶基因RkHog1及其重组表达载体 |
| CN107384979A (zh) * | 2017-06-16 | 2017-11-24 | 昆明理工大学 | 高渗透压甘油蛋白激酶基因RKHog1的新用途 |
| CN107723302A (zh) * | 2017-11-30 | 2018-02-23 | 江南大学 | 一种过表达产甘油假丝酵母CgGAD1提高渗透压耐受性的方法 |
| CN114561410A (zh) * | 2022-03-30 | 2022-05-31 | 陕西科技大学 | 极端嗜盐曲霉Hog1基因及其在提高植物耐盐性中的应用 |
| CN114561410B (zh) * | 2022-03-30 | 2024-07-16 | 陕西科技大学 | 极端嗜盐曲霉Hog1基因及其在提高植物耐盐性中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103131718B (zh) | 2018-04-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107828712B (zh) | 一种抗酸胁迫重组乳酸菌及其应用 | |
| CN103849576B (zh) | 一株具有胁迫耐受性的重组酿酒酵母菌株 | |
| CN101880681B (zh) | 麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因序列及其重组蛋白制备方法 | |
| CN103131718B (zh) | 来源产甘油假丝酵母新型耐高渗功能基因CgHog1的克隆及其应用 | |
| CN108913706A (zh) | 一种枯草芽孢杆菌甘油激酶突变基因glpK及其应用 | |
| CN105481955A (zh) | 速生水生植物硝酸盐转运蛋白GeNRT2.1及其编码基因与应用 | |
| CN107828711A (zh) | 一种抗酸胁迫重组乳酸菌及其构建方法 | |
| CN107937297B (zh) | 一株多抑制物胁迫耐受性酿酒酵母及制备方法、应用 | |
| CN105368732A (zh) | 一株产木糖醇的工业酿酒酵母菌株及构建方法 | |
| CN106916837A (zh) | 高渗透压甘油蛋白激酶基因RkHog1及其重组表达载体 | |
| CN108485996B (zh) | 一种新型产乙酸乙酯的酿酒酵母菌株及构建方法 | |
| CN102604849B (zh) | 一株高效利用乳糖生产燃料乙醇的酿酒酵母工程菌 | |
| CN106399114A (zh) | 一种提高集胞藻pcc6803乙醇耐受能力的方法及应用 | |
| CN105255951A (zh) | 一种通过过量表达hac1基因提高酒精生产效率的方法 | |
| WO2020134427A1 (zh) | sll0528基因在提高集胞藻PCC6803乙醇耐受性中的应用 | |
| CN107974453A (zh) | 一种提高酿酒酵母细胞活力及多重抗逆性的方法和应用 | |
| CN116064266B (zh) | 盐胁迫抗性增强的重组酿酒酵母菌及其构建方法与应用 | |
| CN111484942A (zh) | 一种利用酿酒酵母生产己二酸的方法 | |
| CN114736918B (zh) | 一种整合表达生产红景天苷的重组大肠杆菌及其应用 | |
| CN108865912A (zh) | 一种甲醇高耐受毕赤酵母工程菌株及其构建方法 | |
| CN103614408A (zh) | 一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法 | |
| CN107723302B (zh) | 一种过表达产甘油假丝酵母CgGAD1提高渗透压耐受性的方法 | |
| CN103233018B (zh) | 加强了adpA表达的重组淀粉酶产色链霉菌及构建方法与用途 | |
| CN106978380A (zh) | 一株高木糖耐性肺炎克雷伯氏菌株及其构建方法 | |
| CN106086055A (zh) | 一种对乙醇耐受性显著提高的集胞藻pcc6803藻株及其构建方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20180420 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |