CN103109765B - 绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法 - Google Patents

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Fujian min Rui Bao Marine Biotechnology Co., Ltd.
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Xiamen University
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Abstract

绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法，涉及一种贝类水产生物杂交制种方法。将皱纹盘鲍与绿鲍个体作为种鲍，通过控温设施，将海水温度控制在24～26℃的条件下进行亲鲍的性腺同步促熟，将种鲍按照雌、雄分别放置在不同的培育池中进行饲育，每个培育池内亲鲍的性别特征必须单一；将性腺发育成熟的个体采用阴干结合紫外线照射海水刺激方法进行催产，直至雌、雄种鲍产卵和排精为止；在20～22℃水温条件下授精，通过正交组合，即皱纹盘鲍♀×绿鲍组合，或通过反交组合，即绿鲍♀×皱纹盘鲍

Description

绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法
技术领域
本发明涉及一种贝类水产生物杂交制种方法，尤其是涉及一种绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法。
背景技术
鲍是海洋贝类的一种，被誉为海产八珍之首，素有“软黄金”之称，具有极高的经济价值。近年来，福建省鲍养殖业发展迅猛，2011年产量突破6万吨，约占全国的70%，产值近百亿元，鲍养殖业已成为福建省增长速度最快、经济效益最好的水产支柱产业。
皱纹盘鲍（Haliotis discus hannai）为冷水性种，原为我国北方的主要鲍养殖对象，但经在南方多年的驯化，目前已成为我国南方最主要的养殖鲍种。皱纹盘鲍的耐高温能力虽然较先前已有显著提高，但由于皱纹盘鲍自身的生活习性所限，皱纹盘鲍渡夏存活率低，仍是当前困扰鲍养殖产业发展的最主要问题和风险所在。
绿鲍（Haliotis fulgens）主要分布于美洲太平洋亚热带沿岸，属暖水性种类，在9～30℃的水温条件下可繁殖生长。该鲍种体型大，经济价值高，现为美国和墨西哥的主要养殖鲍种之一。厦门大学鲍类遗传育种项目组于2009年从美国引进绿鲍，并进行了驯化养殖，在此期间，绿鲍表现出良好的生长及抗高温特性。同时，项目组开展了绿鲍和皱纹盘鲍的种间杂交研究，结果表明，二者在性状方面具有一定的互补性，通过杂交途径，可以集两种鲍的优良性状于一体，培育出适温范围广、生长迅速的杂交鲍种，杂交种有望改良皱纹盘鲍的渡夏高死亡率问题，为产业发展提供潜在的新品种（系）。在绿鲍的引种与杂交育种方面，王子臣（1985）等从美国加利福尼亚引进绿鲍，并开展了绿鲍自繁及与皱纹盘鲍种间杂交的试验，但由于当年的条件所限，在大连的气候条件下难以适应存活，并未获得成功。许国领等（许国领，劳赞，杨小立，美国绿鲍驯育和人工育苗，热带海洋，1989，8(3)：75-80）于1985年11月引进40只6～7cm的绿鲍，该批次绿鲍于1987年1月多批次产下后代，受当时养殖技术限制，由于找不到适合的藻类食物，绿鲍自繁后代损耗严重，因此未见后续报道。Fabiola（FabiolaLafarga de la Cruz,Cristian Gallardo-Escarate.Intraspecies and interspecies hybrids in Haliotis:natural and experimental evidence and its impact on abalone aquaculture.Reviews in Aquaculture,2011,3:74–99）就目前国际上已开展的鲍种间杂交研究进行了综述，从文献看，目前国内外尚未见绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交成功的报道。
本申请人在中国专利CN101167444公开一种西氏鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法，在自然海水温度为22～26℃时，取西氏鲍为种鲍，取皱纹盘鲍为种鲍；将种鲍按照雌雄分别放置在不同的亲鲍培育池中培育；将性腺发育成熟的个体采用阴干结合紫外线照射海水刺激方法进行催产，直至雌雄种鲍产卵和排精为止。分别取西氏鲍的精子和皱纹盘鲍的卵子，将二者混合，调节受精卵海水pH值，待受精卵分裂至二细胞期后开始洗卵；西氏鲍♀×皱纹盘鲍杂交种受精卵的获得：分别取皱纹盘鲍的精子和西氏鲍的卵子混合，调pH值，待受精卵分裂至二细胞期后洗卵；按照常规的孵化及后期培育方法即可。
发明内容
本发明的目的是为了解决绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交所存在的受精率较低等问题，提供一种受精率高，可应用于规模化生产的绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法。
本发明所述一种绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法，包括以下步骤：
1）种鲍的选择与促熟培育：将皱纹盘鲍与绿鲍个体作为种鲍，通过控温设施，将海水温度控制在24～26℃的条件下进行亲鲍的性腺同步促熟，将种鲍按照雌、雄分别放置在不同的培育池中进行饲育，每个培育池内亲鲍的性别特征必须单一；
2）人工催产：将性腺发育成熟的个体采用阴干结合紫外线照射海水刺激方法进行催产，直至雌、雄种鲍产卵和排精为止；
3）授精：在20～22℃水温条件下授精，通过正交组合，即皱纹盘鲍♀×绿鲍组合，或通过反交组合，即绿鲍♀×皱纹盘鲍组合，获得授精后的杂交鲍苗；
4）将授精后的杂交鲍苗按照常规的幼体、苗种及中间培育方法进行培育，最终获得绿鲍与皱纹盘鲍正杂交或反杂交鲍苗。
在步骤1）中，所述绿鲍最好壳长大于7cm，个体重量大于50g；所述皱纹盘鲍最好壳长大于7cm，个体重量大于50g。
在步骤2）中，所述人工催产最好是在18～22℃条件下，阴干60～120min，然后将绿鲍和皱纹盘鲍的雌、雄种鲍分别置于不同的容器内，注入照射强度为500～1200mWh/L的紫外线处理海水，每隔40～60min更换一次紫外线处理海水，直至雌、雄种鲍产卵和排精为止。
在步骤3）中，正交组合时，绿鲍的精子浓度最好为3.39×105～6.31×106个/ml；反交组合时，皱纹盘鲍的精子浓度最好为6.76×105～6.31×106个/ml。
与现有技术比较，本发明具有如下突出优点：
本发明通过控温设施使绿鲍与皱纹盘鲍性腺同步发育成熟，用阴干与紫外线照射海水相结合的方法获得两种鲍的精子与卵子，在适宜的水温与精子浓度条件下，正交组合与反交组合的受精率可分别稳定在60%和15%以上，按照常规方法进行苗种培育，经养殖试验，所培育的正、反杂交鲍苗在抗高温能力与生长速度方面表现出显著的杂交优势，有望为产业发展提供优良新品种。
具体实施方式
实施例1
挑选个体活力良好、肌肉无损伤的绿鲍和皱纹盘鲍做为种鲍，绿鲍平均壳长7.54cm，皱纹盘鲍平均壳长8.32cm；通过循环水降温设施，将水温控制在24℃，雌、雄分别放置在不同的亲鲍培育池中进行饲育；待种鲍性腺发育成熟后，将性腺发育成熟的个体阴干70min，随后注入照射强度为1000mWh/L紫外线处理海水，海水水温22℃，每隔60min更换一次紫外线处理海水，直至雌雄种鲍产卵和排精为止。人工催产过程中将绿鲍和皱纹盘鲍的雌雄种鲍分别置于不同的容器内，雌、雄个体严格区分。取绿鲍的精子和皱纹盘鲍的卵子，将二者混合，其中绿鲍的精子浓度为9.43×105个/ml；结果皱纹盘鲍♀×绿鲍杂交受精率为63.42±2.14％，按照常规的幼体、苗种及中间培育方法进行，最终获得绿鲍与皱纹盘鲍的正交鲍苗。杂交种生长迅速，成活率高，抗高温能力强，具有明显的杂种优势，有潜力发展成为新的鲍养殖品种。
实施例2
与实施例1类似，区别在于，只是取绿鲍的精子和皱纹盘鲍的卵子，将二者混合，其中皱纹盘鲍的精子浓度为2.58×106个/ml，结果绿鲍♀×皱纹盘鲍杂交受精率为18.32±3.12％，按照常规的幼体、苗种及中间培育方法进行，最终获得绿鲍与皱纹盘鲍的反交鲍苗。杂交种生长迅速，成活率高，抗高温能力强，具有明显的杂种优势，有潜力发展成为新的鲍养殖品种。

Claims (1)

1.绿鲍与皱纹盘鲍种间杂交制种方法，其特征在于包括以下步骤：
1)种鲍的选择与促熟培育：将皱纹盘鲍与绿鲍个体作为种鲍，通过控温设施，将海水温度控制在24～26℃的条件下进行亲鲍的性腺同步促熟，将种鲍按照雌、雄分别放置在不同的培育池中进行饲育，每个培育池内亲鲍的性别特征必须单一；所述的绿鲍的壳长大于7cm，个体重量大于50g；所述的皱纹盘鲍的壳长大于7cm，个体重量大于50g；
2)人工催产：将性腺发育成熟的个体采用阴干结合紫外线照射海水刺激方法进行催产，直至雌、雄种鲍产卵和排精为止；所述人工催产是在18～22℃条件下，阴干60～120min，然后将绿鲍和皱纹盘鲍的雌、雄种鲍分别置于不同的容器内，注入照射强度为500～1200mWh/L的紫外线处理海水，每隔40～60min更换一次紫外线处理海水，直至雌、雄种鲍产卵和排精为止；
3)授精：在20～22℃水温条件下授精，通过正交组合，即皱纹盘鲍♀×绿鲍♂组合，或通过反交组合，即绿鲍♀×皱纹盘鲍♂组合，获得授精后的杂交鲍苗；正交组合时，绿鲍的精子浓度为3.39×105～6.31×106个/ml；反交组合时，皱纹盘鲍的精子浓度为6.76×105～6.31×106个/ml；
4)将授精后的杂交鲍苗按照常规的幼体、苗种及中间培育方法进行培育，最终获得绿鲍与皱纹盘鲍正杂交或反杂交鲍苗。
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