一种施氏鲟雌鱼和匙吻鲟雄鱼杂交育苗方法
技术领域:
本发明涉及水产养殖技术领域,具体涉及一种施氏鲟雌鱼和匙吻鲟雄鱼杂交育苗方法。
背景技术:
鲟鱼是一种经济价值很高的鱼类,其性成熟晚,世代间隔周期比较长,常见种属间杂交选育是一种高效易行的育种策略,远缘杂交可创造出比双亲性能更优良且更符合市场需要的新品种,目前产量中国养殖的杂交鲟占所有养殖鲟种类的60-70%。鲟形目鱼类全部为多倍体起源,种间具有较强的杂交能力,通过不同类型鲟鱼杂交已选育出几十个杂交新品种,其中,前苏联的小鲟鳇(欧洲鳇♀×小体鲟♂)以及黑龙江大鳇鲟(达氏鳇♀×施氏鲟♂)具有生长速度快、抗病力强、适应广等优点,而被大面积推广养殖。但目前优质鲟鱼新品种均不耐高温,缺乏适合南方水域养殖的耐温苗种。近年来在南方夏季高温期养殖的鲟鱼死亡率高,出现鲟鱼度夏难的现象,严重影响了我国南方鲟鱼养殖业的健康发展,需要寻求一种耐高温,优质优产综合性能良好的适应南方养殖的鲟鱼新品种。
施氏鲟是鲟形目,鲟科,分布于黑龙江流域,寿命长,属冷水性经济鱼类,染色体238±8条,为八倍体物种;匙吻鲟隶属鲟形目,匙吻鲟科,是一种适应性强的广温性淡水经济鱼类,引自美国,染色体120条,属四倍体物种。由于施氏鲟,鲟科鲟属,主要分布于黑龙江流域的冷水性鱼类,为八倍体物种,以ZW型性别决定机制为主;匙吻鲟,白鲟科,为美国密西西比河自然分布物种,四倍体物种,以XY型性别决定机制为主,温水性鱼类,两者亲缘关系较远,自然繁殖时间不重叠,因此调控这两种鲟鱼繁殖产卵时间是技术难点。施氏鲟和匙吻鲟杂交目前为止没有相关报道。
发明内容:
本发明的目的是提供一种施氏鲟雌鱼(施氏鲟(♀))和匙吻鲟雄鱼匙吻鲟(♂)杂交育苗方法,利用性激素和温度水流调节实现两种鲟鱼产卵排精的同步进行,解决了两者亲缘关系较远,自然繁殖时间不重叠导致杂交困难的问题,同时采用水蚯蚓开口和鲟鱼饲料驯化相结合培育出高产、优质、综合性能优良的适应南方的高温天气的低碳型鲟鱼新品种,本方法培育的杂交苗受精率高达60%,孵化率达7.5%,耐受温度达30℃,具有耐高温、适应性广、抗逆性强等生长性状优良的特点,适合于我国南方养殖。
本发明是通过以下技术方案予以实现的:
一种施氏鲟雌鱼和匙吻鲟雄鱼杂交育苗方法,该方法包括以下步骤:
一、亲本选择:母本选用10龄以上施氏鲟,父本选用10龄以上匙吻鲟;
二、亲鱼培育和生殖调控:通过控温、水流刺激和提高营养,促进雌雄亲鱼性成熟同步,具体包括以下步骤:
1)、亲鱼优选:选择形态、体色正常、个体大、健康无伤的10龄以上施氏鲟为母本和10龄以上匙吻鲟为父本;
2)、亲鱼饲养:施氏鲟投喂鲟鱼专用人工配合饲料,日投喂量按亲鱼体重的0.5-1wt%,每天投喂2次;匙吻鲟主要以肥水培育浮游动物供其摄食,日投喂量为亲鱼体重的0.5-1wt%,每天投喂2次;
3)、水温调控:施氏鲟池塘养殖,调高培育水温,池塘水温在20-22℃;匙吻鲟水温控制在16~18℃,两者都进行流水刺激,并定期观察其性腺发育情况;
三、催产:待施氏鲟雌鱼性腺发育到Ⅳ期时,产卵24h前注射催产素,剂量为亲鱼每㎏体重注射4-5μg,匙吻鲟雄鱼的剂量与施氏鲟雌鱼的相同;施氏鲟雌鱼和匙吻鲟雄鱼催产素都分两次注射,第一针注射催产剂总量的50%,间隔12h后第二针注射剩余的药物剂量,使得雌雄鱼产卵排精同时进行;
四、人工受精和孵化:包括以下步骤:1、挤卵、采精;2、人工受精;3、脱粘;4、受精卵孵化;
五、仔稚鱼和幼苗的培育:出膜仔鱼8-10天不喂食,培养密度为500尾/m2,水温控制在18-20℃,pH7-9,溶氧量5-8mg/L,每天水交换量2-3次;出膜10天后开口,开口率1%,培养水温、pH、溶氧量不变,饵料投喂水蚯蚓,每次投喂量为仔鱼体重的10wt%,投喂次数为每日3次;开口后7天,其培育密度变为250尾/m2,使用鲟鱼专用人工配合饲料进行驯化,每次喂量为仔鱼体重的5wt%,每日喂3-4次,驯化4-5天;驯化好2周后,培养密度变为120尾/m2;幼苗期正常管理,每10天测量鱼苗体重,按照鱼苗体重的5wt%投喂饲料,每日投喂3次。
其中步骤四中人工受精,受精率达60%,孵化水温17.5-18℃,受精卵144-168h后孵出仔鱼,孵化率7.5%。
施氏鲟,鲟科鲟属,主要分布于黑龙江流域的冷水性鱼类,为八倍体物种,以ZW型性别决定机制为主;匙吻鲟,白鲟科,为美国密西西比河自然分布物种,四倍体物种,以XY型性别决定机制为主,温水性鱼类,两者亲缘关系较远,自然繁殖时间不重叠,因此调控这两种鲟鱼繁殖产卵时间是本发明的技术难点。本发明利用性激素和温度水流调节实现两种鲟鱼产卵排精的同步进行,解决了两者亲缘关系较远,自然繁殖时间不重叠导致杂交困难的问题。
本发明的有益效果如下:
本发明利用性激素和温度水流调节实现两种鲟鱼产卵排精的同步进行,解决了两者亲缘关系较远,自然繁殖时间不重叠导致杂交困难的问题,同时采用水蚯蚓开口和鲟鱼饲料驯化相结合培育出高产、优质、综合性能优良的适应南方的高温天气的低碳型鲟鱼新品种,本方法培育的杂交苗受精率高达60%,孵化率达7.5%,耐受温度达30℃,具有耐高温、适应性广、抗逆性强等生长性状优良的特点,适合于我国南方养殖。
具体实施方式:
以下是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:
一种施氏鲟雌鱼和匙吻鲟雄鱼杂交育苗方法,该方法包括以下步骤:
一、亲本选择:母本选用10龄以上施氏鲟,父本选用10龄以上匙吻鲟;
二、亲鱼培育和生殖调控:通过控温、水流刺激和提高营养,促进雌雄亲鱼性成熟同步,具体包括以下步骤:
选择形态、体色正常、个体大、健康无伤的10龄以上施氏鲟为母本和10龄以上匙吻鲟为父本;施氏鲟池塘培育,投喂鲟鱼专用人工配合饲料(升索牌鲟鱼饲料,山东升索渔用饲料研究中心生产),日投喂量按亲鱼体重的0.5-1wt%,每天投喂2次;调高培育水温,池塘水温在20-22℃,使正常在3-4月份才繁殖的亲鱼能够提前3个月开始繁殖;匙吻鲟主要以肥水培育浮游动物供其摄食,日投喂量为亲鱼体重的0.5-1wt%,每天投喂2次;匙吻鲟水温控制在16~18℃,且施氏鲟和匙吻鲟两者都进行流水刺激,并定期观察其性腺发育情况;将发育较早较好的鱼选出进行提前繁殖。
三、催产:待施氏鲟雌鱼性腺发育到Ⅳ期时,产卵24h前注射催产素,剂量为亲鱼每㎏体重注射4-5μg,匙吻鲟雄鱼的剂量与施氏鲟雌鱼的相同;施氏鲟雌鱼和匙吻鲟雄鱼催产素都分两次注射,第一针注射催产剂总量的50%,间隔12h后第二针注射剩余的药物剂量,使得雌雄鱼产卵排精同时进行;
四、人工受精和孵化包括以下步骤:1、挤卵、采精;2、人工受精;3、脱粘;4、受精卵孵化。
具体如下:
1、挤卵、采精:提前捞出匙吻鲟雄鱼边挤压边用饭盒收集精液,2-4℃冰箱低温保存备用,人工受精前进行精液镜检,挑选精子活力强的精液进行人工受精;再捞取施氏鲟雌鱼,使用手推压法挤卵流入洗脸盆内等待受精。
2、人工受精:采用干法人工授精。精液用量为每10000粒(约200mL)鱼卵用1mL精原液。将镜检合格的精液倒入盛卵的洗脸盆中,用羽毛搅拌均匀,使精卵充分混合,然后加入20倍鱼卵量的孵化用水,不停地搅拌激活精子,快速搅拌约15s,使精卵充分结合。把完成受精的鱼卵静置片刻后,弃去污水,漂洗干净。
3、脱粘:将洗好的受精卵倒入盛有10﹪滑石粉水溶液盆中,脱粘60min。
4、受精卵孵化:孵化采样全自动网箱孵化器,水温控制在17.5-18℃,pH7-9,受精卵在微流水中培养6-7天,仔鱼脱膜孵出。
其中人工受精,受精率达60%,孵化水温17.5-18℃,受精卵144-168h后孵出仔鱼,孵化率7.5%。
五、仔稚鱼和幼苗的培育:出膜仔鱼8-10天不喂食,培养在10m2圆形水泥池内,培养密度为500尾/m2,水深40-80cm,水温控制在18-20℃,pH7-9,溶氧量5-8mg/L,每天水交换量2-3次;出膜10天后开口,开口率1%,培养水温、pH、溶氧量不变,饵料投喂水蚯蚓,每次投喂量为仔鱼体重的10wt%,投喂次数为每日3次;开口后7天,仔鱼体长约3cm,此时培育密度变为250尾/m2,使用鲟鱼专用人工配合饲料(升索牌鲟鱼饲料,山东升索渔用饲料研究中心生产)进行驯化,每次喂量为仔鱼体重的5wt%,每日喂3-4次,驯化4-5天;驯化好2周后,培养密度变为120尾/m2;幼苗期正常管理,每10天测量鱼苗体重,按照鱼苗体重的5wt%投喂饲料,每日投喂3次。
表1:杂交实验繁殖情况表
杂交后代形态与母本较相似,但头较尖且长,头长占体长1/3,这与父本匙吻鲟较相似(匙吻鲟头长/体长为1/3),母本侧骨板一般为32-40个,而杂交后代侧骨板较多且密,约50-60个;其生长速度与父母本较一致,但能耐高温。本方法能够成功培育远缘杂交新品种,并且培育的杂交苗受精率高达60%,孵化率达7.5%,耐受温度达30℃,具有耐高温、适应性广、抗逆性强等生长性状优良的特点,适合于我国南方养殖。