CN103097414B - 膜联蛋白1抗体 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种特异性结合分子，该特异性结合分子针对具有图2A所示的氨基酸序列的人类Anx-A1蛋白而产生。本发明还涉及这种特异性结合分子在治疗T细胞介导的疾病中的用途。
Description
技术领域
本发明涉及与膜联蛋白-A1结合的特异性结合分子和产生这种特异性结合分子的杂交瘤细胞系，特别涉及该分子的抗体和片段。这种特异性结合分子可用于治疗T-细胞介导的疾病。
背景技术
由于糖皮质激素(GCs)能够同时阻止固有免疫应答和适应性免疫应答，因此经常被用于治疗各种慢性自身免疫疾病。通过本发明人和其他研究组过去约10年的研究已经表明GCs对固有免疫应答的某些炎症效应是由被称作膜联蛋白-1（Anx-A1）的蛋白介导的。已经证明该蛋白在许多细胞种类包括中性粒细胞、巨噬细胞和内皮细胞的自我平衡控制中发挥着作用。然而，经常被忽视的方面是Anx-A1在适应性免疫应答中的作用。令人惊讶的是考虑已经将Anx-A1提议作为GCs的药理作用的第二信使之一。
本发明人先前已经证明，Anx-A1通过调节T细胞受体（TCR）信号的强度在T细胞中发挥自我平衡作用(D’Acquistoetal.,Blood109:1095-1102,2007)。
而且，本发明人已经证明，高水平的Anx-A1降低T细胞活化的阈值，并促进其分化成Th1细胞，但Anx-A1基因缺陷型小鼠却表现出T细胞活化受损和分化成Th2细胞的增加(D’Acquistoetal.,Eur.J.Immunol.37:3131-3142,2007)。
WO2005/027965记载了凋亡中性粒细胞将抗炎信号传递到树突细胞的机制的发现过程，并识别了干扰该过程的抗体。
发明内容
本发明人已经识别出一种在T细胞活化的特异性抑制方面性能良好且没有任何不利的细胞毒性效应的单克隆抗体。该抗体可用于治疗T细胞介导的疾病，例如风湿性关节炎或多发性硬化症。
因此，本发明提供一种针对具有图2A所示的氨基酸序列的人类Anx-A1蛋白而产生的特异性结合分子。
定义
本文中使用的“特异性结合分子”是一对彼此具有结合特异性的分子中的成员。特异性结合对中的成员可以是天然来源的或其整个或部分是合成产生的。成对分子中的一个成员的表面具有一个能与成对分子中的另一成员的特定空间和极性结构特异性结合从而互补的区域，该区域可以为突起或凹陷。因此，每对成员具有彼此特异性结合的特性。各种类型的特异性结合对的实例为抗原-抗体、生物素-亲和素、激素-激素受体、受体-配体、酶-基质。本发明主要考虑抗原-抗体类型的反应。本发明的特异性结合分子与Anx-A1的结合亲和力大于与其它分子的结合亲和力，即该特异性结合分子与Anx-A1特异性结合。与Anx-A1结合的特异性结合分子包括抗Anx-A1抗体和适体。本发明的特异性结合分子通常为抗体。本发明的抗Anx-A1抗体通过阻止T细胞活化而发挥功能，因此，当被给药时，该抗体可以用于治疗T细胞介导的疾病，该疾病通常是由异常的T细胞活化引起的。
本文中使用的术语“抗体”是指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有抗原结合位点的分子，该抗原结合位点特异性结合抗原，无论该抗原是天然的还是部分或全部合成产生的。该术语还包括任何具有结合结构域的多肽或蛋白质，该结合结构域为抗体结合结构域或与抗体结合结构域同源的结构域。这些可以从天然来源得到，它们还可以部分或全部通过合成得到。抗体是通常含有两条相同重链和两条相同轻链的多肽，所述轻链小于所述重链。哺乳动物的抗体有两种称作λ和κ的轻链。每条重链和每条轻链都由可变区和恒定区组成。重链可变区被称作VH区，轻链可变区被称作VL区。对于κ轻链来说，VL区也可以被称作VK区。重链和轻链的每个可变区都包括3个互补决定区(CDRs)，CDR1、CDR2和CDR3。将这些分别称作VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3。抗体的实例有免疫球蛋白亚型（例如IgG、IgE、IgM、IgD和IgA）和它们的亚型子类；包含抗原结合结构域的片段如Fab、F(ab’)2、Fv、scFv、dAb、Fd；和双体抗体。所述抗体可以为多克隆抗体或单克隆抗体。本文中，单克隆抗体可以被称作“mAb”。
具体实施方式
膜联蛋白是一类结合钙和磷脂的细胞蛋白，也被称作脂皮质蛋白。膜联蛋白家族有13个成员，包括膜联蛋白A1、膜联蛋白A2和膜联蛋白A5。膜联蛋白A1也被称作膜联蛋白-1，在本文中被称作“Anx-A1”。膜联蛋白-1（Anx-A1）是一种分子量为37kDa的蛋白，并且最初被认为是糖皮质激素活动的介导物。在过去的几年中，已经有证据表明Anx-A1通过调节T细胞受体（TCR）信号的强度在适应性免疫系统，特别是在T细胞中发挥着自我平衡的作用。Anx-A1在体内固有免疫系统的细胞中发挥着炎症内源性下调物的作用。图1A是显示Anx-A1三维结构的带状图。
人类有8个编码Anx-A1的核苷酸序列。其中，仅有四个被翻译，因此有四种Anx-A1的亚型，所述四个亚型被命名为ANXA1-002、ANXA1-003、ANXA1-004和ANXA1-006。这些序列可以从数据库网站(www.ensembl.org)中得到，且被命名为OTTHUMT00000052664(ANXA1-002)、OTTHUMT00000052665(ANXA1-003)、OTTHUMT00000052666(ANXA1-004)和OTTHUMT00000052668(ANXA1-006)。图2A显示了一种人类膜联蛋白-1（Anx-A1）的ANXA1-003亚型的氨基酸和核苷酸序列。图2B、2C和2D分别显示了亚型ANXA1-002、ANXA1-004和ANXA1-006的氨基酸序列。从图2可以看出，亚型ANXA1-002、ANXA1-004和ANXA1-006是ANXA1-003的短剪接变体或是少量氨基酸发生改变的ANXA1-003的变体。
许多研究已经表明，被称作Ac.2-26的Anx-A1的N-末端肽作为整个蛋白质的生物活性代表物（surrogate）(参见例如Limetal.,ProcNatlAcadSciUSA95,14535-9,1998)。
图1B是膜联蛋白重复序列和该生物活性序列位点的示意图。肽Ac.2-26是一种乙酰化的肽，该肽具有图2所示的Anx-A1的全长氨基酸序列的氨基酸残基2-26的序列。图1C显示了肽Ac.2-26的序列，该序列如下所述：
CH3CO-AMVSEFLKQAWFIENEEQEYVQTVK
Anx-A1及其N-末端衍生的生物活性肽通过甲酰肽受体（FPR）家族的成员介导它们的生物效应。Anx-A1通过直接结合和活化该家族中的成员类甲酰肽受体-1(FPRL-1)在中性粒细胞溢出和固有免疫中起到反向调节作用。先前，本发明的发明人就已经发现，在存在hrAnx-A1的情形下，通过刺激FPRL-1来刺激T细胞可提高T细胞的活化作用(D’Acquistoetal.,Blood109:1095-1102,2007)。
本发明的特异性结合分子可与膜联蛋白-1（Anx-A1）结合。特异性结合分子结合的Anx-A1是具有图2A所示的多肽序列的人类Anx-A1。
在第一方面中，本发明提供一种针对具有图2A所示的氨基酸序列的人类Anx-A1蛋白而产生的特异性结合分子。
本发明的这个方面还涉及一种包括本发明的第一方面的特异性结合分子的互补决定区(CDRs)VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，或与每个单独的CDR具有至少70%同一性的氨基酸序列的特异性结合分子。该特异性结合分子通常为抗体。
在一种实施方式中，所述特异性结合分子具有互补决定区(CDRs)VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，或与它们具有至少70%同一性的氨基酸序列，所述每个互补决定区都各自具有如下所述的氨基酸序列，其中
VLCDR1为KASENVVTYVS
VLCDR2为GASNRYT
VLCDR3为GQGYSYPYT
VHCDR1为GYTFTNYWIG
VHCDR2为DIYPGGDYTNYNEKFKG
VHCDR3为WGLGYYFDY。
CDRs是根据保守序列定义(Kabatetalin“SequencesofProteinsofImmunologicalInterest”,Nat’l.Inst.Health,Bethesda,MD(1987))和结构化定义(ChothiaandLeskJ.MolBiol.196:901-17(1987))的结合指定的。后来在Carteretal,ProcNat’lAcadSciUSA.89:4285-9(1992)中也记载了这些定义。
本发明还涉及上述肽序列的变体。本文中使用的术语“变体”指的是具有相似氨基酸序列和/或保持相同功能的蛋白质。例如，术语“变体”包括包含增加、缺失或置换等一个或多个氨基酸的蛋白质或多肽。本发明的变体的一个实例是蛋白，如融合蛋白，所述蛋白包括上面定义的肽，但其中用一个或多个其它氨基酸置换了上面定义的肽中的一个或多个氨基酸。技术人员知道有几种氨基酸具有相似的性质。通常可以用一个或多个其它的这类氨基酸来置换物质中的一个或多个同类氨基酸，而不会丧失该物质的所需活性。
因此，氨基酸甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸通常能够互相置换（具有脂肪族侧链的氨基酸）。在这些可能的置换中，优选使用甘氨酸和丙氨酸互相置换（因为它们具有相对较短的侧链），并且优选使用缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸互相置换（因为它们具有较大的脂肪族疏水侧链）。其它可经常互相置换的氨基酸包括：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸（具有芳香族侧链的氨基酸）；赖氨酸、精氨酸和组氨酸（具有碱性侧链的氨基酸）；天冬氨基酸和谷氨酸（具有酸性侧链的氨基酸）；天冬酰胺和谷氨酰胺（具有酰胺侧链的氨基酸）；以及半胱氨酸和蛋氨酸（具有含硫侧链的氨基酸）。
这种性质的置换通常被称作“保守的”或“半保守”的氨基酸置换。因此，本发明涉及一种具有CDRs的特异性结合分子，所述CRDs具有上述的氨基酸序列，但在CDRs中有一个或多个保守置换，从而使得CFRs的氨基酸序列与上述序列具有至少70%的同一性。例如，与上面列出的CDRs的氨基酸序列相比，每个CDR可有1、2、3、4或5个保守置换（取决于CDR）。例如，在上面列出的VLCDR1的氨基酸序列中能有1、2或3个保守置换，在上面列出的VLCDR2的氨基酸序列中能有1或2个保守置换，在上面列出的VLCDR3的氨基酸序列中能有1或2个保守置换，在上面列出的VHCDR1的氨基酸序列中能有1、2或3个保守置换,在上面列出的VHCDR2的氨基酸序列中能有1、2、3、4或5个保守置换，在上面列出的VHCDR3的氨基酸序列中能有1、2或3个保守置换，并且所述序列仍保持与上面列出的CDR序列至少70%的同一性。
氨基酸可以用下述的三字母代码和单字母代码表示：甘氨酸(G或Gly)、丙氨酸(A或Ala)、缬氨酸(V或Val)、亮氨酸(L或Leu)、异亮氨酸(I或Ile)、脯氨酸(P或Pro)、苯丙氨酸(F或Phe)、酪氨酸(Y或Tyr)、色氨酸(W或Trp)、赖氨酸(K或Lys)、精氨酸(R或Arg)、组氨酸(H或His)、天门冬氨酸(D或Asp)、谷氨酸(E或Glu)、天冬酰胺(N或Asn)、谷氨酰胺(Q或Gln)、半胱氨酸(C或Cys)、蛋氨酸(M或Met)、丝氨酸(S或Ser)和苏氨酸(T或Thr)。在残基可以是天门冬氨酸或天冬酰胺的位置，可以使用符号Asx或B。在残基可以是谷氨酸或谷氨酰胺的位置，可以使用符号Glx或Z。除非上下文中指定，否则所提及的天门冬氨酸包括天冬氨酸盐，且谷氨酸包括谷氨酸盐。
也可以对上述蛋白如融合蛋白的氨基酸序列进行氨基酸的缺失或插入。因此，例如，对多肽活性没有实质作用的氨基酸或至少没有消除该活性的氨基酸是可以缺失的。这种缺失可能是有益的，因为在保持活性的同时，降低了该多肽的整体长度和分子量。这可以减少特定目的所需的多肽量，如可以减少剂量水平。
也可以对上述的融合蛋白进行氨基酸插入。进行该过程可以改变本发明物质的性质（如有助于识别、纯化或表达，如上文与融合蛋白有关的解释）。
可以使用任何合适的技术进行与上述序列有关的氨基酸改变，如通过使用定点诱变或固态合成。
应该理解的是本发明范围内的氨基酸置换或插入可以使用天然存在的或非天然存在的氨基酸进行。无论使用的是天然氨基酸还是合成氨基酸，优选仅存在L-氨基酸。
本领域中已知的“同一性”是指两个或多个多肽序列或两个或多个多核苷酸序列之间的关系，这是通过比较序列确定的。在本领域中，同一性也可以指多肽或多核苷酸序列之间的序列关联度，视具体情况而定，这是通过比对序列的字符串确定的。虽然有多种方法都可以测量两个多肽序列或两个多核苷酸序列之间的同一性，但是用于确定同一性的一般方法是在计算机程序中进行编码。优选的用于确定两个序列之间同一性的计算机程序包括但不局限于GCG程序包(Devereux,etal.,NucleicAcidsResearch,12,387(1984),BLASTP,BLASTN和FASTA(Atschuletal.,J.Molec.Biol.215,403(1990))。
人们可以使用程序如CLUSTAL程序比较氨基酸序列。所述程序比较氨基酸序列，并通过在任一适合的序列中插入空格找到最优比对。用最优比对能够计算出氨基酸的同一性或相似性（同一性加上保守氨基酸的类型）。程序如BLASTx将比对最长的一段相似序列，并赋给一个合适的值。因此，可能获得发现多个相似区域的比较，每个区域都有不同的评分。本发明中考虑了两种类型的同一性分析。
两个氨基酸序列或两个核酸序列的同一性百分比是通过以实现最佳比对为目的的序列比对（例如，为了与序列最佳比对，可以在第一个序列中引入缺口）并比较相应位置的氨基酸残基或核苷酸确定的。“最优比对”是指两个同一性百分比最高的序列的比对。同一性百分比是通过被比较的序列中同源氨基酸残基或核苷酸的数量确定的（即，同一性百分比=同源位置的数量/位置的总数量×100）。
使用本领域技术人员已知的数学算法能够完成两个序列之间同一性百分比的确定。用于比较两个序列的数学算法的一个实例是KarlinandAltschul(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA87:2264-2268中的算法，后修改为KarlinandAltschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:5873-5877。Altschul,etal.(1990)J.Mol.Biol.215:403-410中的NBLAST和XBLAST程序已经纳入了该算法。用分数=100、字长=12的NBLAST程序可以进行BLAST核苷酸检索，以得到与本发明核酸分子同源的核苷酸序列。用分数=50、字长=3的XBLAST程序可以进行BLAST蛋白质检索，以得到与本发明蛋白分子同源的氨基酸序列。为了得到用于比较目的的间隙比对，可以使用Altschuletal.(1997)NucleicAcidsRes.25:3389-3402中记载的间隙BLAST。或者，可以使用PSI-Blast进行重复检索，该重复检索可检测分子之间的远缘关系(Id.)。当使用BLAST、间隙的BLAST和PSI-Blast程序时，可以使用各个程序（例如XBLAST和NBLAST）的默认参数。参见http://www.ncbi.nlm.nih.gov。序列比较使用的数学算法的另一个实例是CABIOS(1989)中的Myers和Miller算法。属于CGC序列比对软件包的ALIGN程序（版本2.0）已经纳入了该算法。本领域中已知的其他序列分析算法包括TorellisandRobotti(1994)Comput.Appl.Biosci.,10:3-5中记载的ADVANCE和ADAM；以及PearsonandLipman(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.85:2444-8中记载的FASTA。在FASTA内，ktup是一个设置灵敏度和检索速度的控制选项。
通常，使用HGMP(人类基因组图谱计划)提供的BLAST计算机程序(Atschuletal.,J.Mol.Biol.215,403-410(1990))中的默认参数时，本发明特异性结合分子的CDRs的氨基酸序列在氨基酸水平上与上述CDRs的氨基酸序列具有至少70%的同一性。更典型地，CDR序列在氨基酸水平上与上述序列具有至少75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或至少99%的同一性。通常，本发明中特异性结合分子的每个CDR序列与上面列出的CDRs的氨基酸序列都有该水平的同一性。或者，本发明的特异性结合分子的任何1个，2个，3个，4个或5个CDRs与上面列出的CDRs的氨基酸序列有该水平的同一性。
本发明的特异性结合分子通常是抗体，更典型的是单克隆抗体。在一种实施方式中，本发明的单克隆抗体是人源化的。
通过修饰抗体的氨基酸序列可以将本发明的单克隆抗体人源化。降低本发明特异性结合分子的免疫原性的方法包括例如通过定位诱变或其它常用的分子生物学方法(RoguskaetalProteinEng.9895-904(1996))将CDR移植到适合的抗体主链骨架上或重塑可变表面残基。
其它可用的方法可以包括分子内潜在的T细胞表位的识别和随后如通过定点诱变移除这些表位（去免疫法）。当将特异性结合分子用作药物时可能需要所述特异性结合分子的人源化。也可以按照需要进行CDR区域或骨架序列周围的人源化。
可以使用单克隆抗体和其它抗体并通过重组DNA技术来产生保持原抗体特异性的其它抗体或嵌合分子。这类技术可以包括将编码抗体的免疫球蛋白可变区或互补决定区（CDRs）的DNA引入不同的免疫球蛋白的恒定区或恒定区加上骨架区。参见如EP-A-184187、GB2188638A或EP-A-239400。产生抗体的杂交瘤细胞或其它细胞可进行基因突变或其它改变，这可能改变或不改变所得抗体的结合特异性。
由于可以在多个方面对抗体进行修饰，术语“抗体”应该被解释为涵盖具有所需特异性结合结构域的任何特异性结合成员或物质。因此，该术语涵盖抗体片段、衍生物、功能等效物和抗体类似物，人源化抗体，包括任何包括免疫球蛋白结合结构域的多肽，不论是天然的还是整体或部分合成的。因此，涵盖了与另一种多肽融合的含有免疫球蛋白结合结构域或其等效物的嵌合分子。EP-A-0120694和EP-A-0125023中记载了嵌合抗体的克隆和表达。人源化的抗体可以是被修饰的具有非人如小鼠抗体的可变区和人类抗体的恒定区的抗体。例如，专利号为No.5225539的美国专利中记载了制备人源化抗体的方法。
本发明的特异性结合分子可以是抗体的片段。已经证明一个完整抗体的片段能够发挥结合抗原的作用。结合片段的实例有（i）由VL,VH,CL和CH1结构域组成的Fab片段；（ii）由VH和CH1结构域组成的Fd片段；（iii）由单一抗体的VL和VH结构域组成的Fv片段；（iv）由VH结构域组成的dAb片段(Ward,E.S.etal.,Nature341:544-546(1989))；（v）分离的CDR区域；（vi）F(ab’)2片段，包括两个联合的Fab片段的二价片段；（vii）单链Fv分子（scFv），其中VH结构域和VL结构域是通过肽连接物连接的，所述肽连接物使两个结构域相连接以形成抗原结合位点(Birdetal.,Science242:423-426(1988);Hustonetal.,PNASUSA85:5879-5883(1988));（viii）双特异性单链Fv二聚体(PCT/US92/09965)和（ix）“双体抗体”，通过基因融合构建的多价或多特异性片段(WO94/13804;P.Hollingeretal.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448(1993))。通常，所述片段为Fab、F(ab’)2或Fv片段或scFv分子。
双体抗体是多肽的多聚体，每个多肽都具有第一结构域和第二结构域，所述第一结构域具有免疫球蛋白轻链的结合区域，所述第二结构域具有免疫球蛋白重链的结合区域，两个结构域相连接（例如，通过肽连接物）但不能彼此结合成抗原结合位点：抗原结合位点是通过将多聚体内一个多肽的第一结构域和多聚体内另一多肽的第二结构域结合形成的(WO94/13804)。
当使用双特异性抗体时，可以是常规的双特异性抗体，这些抗体可以用各种方法(Hollinger&Winter,CurrentOpinionBiotechnol.4:446-449(1993))来制造，如通过化学方法制备或从混合的杂交瘤中制备，或这些抗体可以是任何上述的双特异性抗体片段。优选使用scFv二聚体或双体抗体，而非完整抗体。双体抗体和scFv可以仅使用可变结构域而不使用Fc区域来构建，这潜在地减少抗独特型反应的效果。其它形式的双特异性抗体包括Trauneckeretal.,EMBOJournal10:3655-3659(1991)中记载的单链“Janusins”。
也可以使用与双特异性整体抗体不同的双特异性双体抗体，因为它们在E.coli中很容易被构建和表达。使用噬菌体展示技术(WO94/13804)能够从文库中很容易的筛选出具有合适的结合特异性的双体抗体（和许多其它的多肽如抗体片段）。例如，如果对抗原X有特异性的双体抗体的一个臂保持恒定，那么在另一个臂变化时就可以制备文库并筛选出具有合适特异性的抗体。
单克隆抗体VJ-4B6是杂交瘤细胞系VJ-4B6-E5-B10-D4分泌的，所述细胞系根据布达佩斯条约于2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)、HealthProtectionAgency,CentreforEmergencyPreparednessandResponse,PortonDown,Salisbury,SP40JG,UnitedKingdom、登记号为no.10060301。
保藏是由FulvioD’Acquisto,QueenMaryandWestfieldCollege,CentreforBiochemicalPharmacology,CharterhouseSquare,LondonEC1M6BQ完成的。根据欧洲专利公约的31(1)(d)款，保藏人已经授权申请人可在本申请中援引该保藏材料，并且已经给出无限制且不可撤销的承诺，同意将该保藏材料向公众提供。
杂交瘤细胞系VJ-4B6-E5-B10-D4可产生与膜联蛋白-A1特异性结合的单克隆抗体VJ-4B6。本发明的单克隆抗体VJ-4B6属于IgG2b亚型。
抗体VJ-4B6是针对具有图2所示的氨基酸序列的全长人类Anx-A1蛋白而产生的。
图11中显示了抗体VJ-4B6的轻链可变区的DNA和氨基酸序列。图12显示了VJ-4B6的轻链可变区的氨基酸序列，其中标注了CDRs。图12还显示了VJ-4B6的轻链恒定区的最初几个氨基酸。
图13中显示了抗体VJ-4B6的重链可变区的DNA和氨基酸序列。图14显示了VJ-4B6的重链可变区的氨基酸序列，其中标注了CDRs。图14还显示了VJ-4B6的重链恒定区的最初几个氨基酸。
抗体VJ-4B6的CDRs如下：
VLCDR1为KASENVVTYVS
VLCDR2为GASNRYT
VLCDR3为GQGYSYPYT
VHCDR1为GYTFTNYWIG
VHCDR2为DIYPGGDYTNYNEKFKG
VHCDR3为WGLGYYFDY
本发明涉及具有如本文所述的抗体VJ-4B6的CDRs的特异性结合分子，并且本发明还涉及具有与如本文所述的抗体VJ-4B6的一个或多个CDRs有至少70%同一性的CDRs的特异性结合分子。
本发明还涉及具有抗体VJ-4B6的轻链可变区、重链可变区或具有轻链可变区和重链可变区的特异性结合分子。
因此，在一个具体实施方式中，根据本发明的第一方面，本发明提供一种具有具有图11和/或图13所示的氨基酸序列的多肽的特异性结合分子。
本发明的这个实施方式还涉及特定的抗体片段，所述片段具有具有图11所示的氨基酸序列的轻链可变区和/或具有图13所示的氨基酸酸序列的重链可变区。例如，该实施方式涉及Fab、F(ab’)2或Fv片段和scFv分子。
根据本发明的第一方面，本发明还涵盖包括具有图12和/或图14所示的氨基酸序列的多肽的特异性结合分子。
在一个具体实施方式中，根据本发明的第一方面，本发明提供一种由杂交瘤细胞系产生的特异性结合分子，所述杂交瘤细胞系于2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)，登记号为No.10060301。
在第二方面，本发明提供一种可产生特异性结合分子的杂交瘤细胞系，所述杂交瘤细胞系产生针对具有图2A所示的氨基酸序列的人类Anx-A1蛋白而产生的特异性结合分子。
在一个具体的实施方式中，根据本发明的第二方面，本发明提供一种杂交瘤细胞系，所述杂交瘤细胞系于2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)，登记号为No.10060301。
在第三方面，本发明提供一种包括本发明的特异性结合分子的药物组合物。
根据本发明第三方面的组合物可以用任何方便的途径制备。本发明的药物组合物除包括本发明的特异性结合分子外，通常还包括药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂、辅助剂、运载工具、缓冲液或稳定剂。所述载体包括但不局限于生理盐水、缓冲盐水、葡萄糖、脂质体、水、甘油、聚乙二醇、乙醇及其组合。该药物组合物可以为任何适合的形式，这取决于对患者给药所需的方法。
该药物组合物可以以单位剂型提供，通常是用密闭容器提供，并且可以作为试剂盒的一部分来提供。这种试剂盒通常（虽然不是必须的）包括使用说明书。该试剂盒可以包括多个所述单位剂型。
可以通过任何适当的途径使药物组合物适合于给药，如通过口服（包括口腔或舌下）、直肠、鼻、局部（包括口腔、舌下或透皮）、阴道或非肠道（包括皮下注射、肌肉注射、静脉注射或真皮内注射）途径。该组合物可通过药学领域中已知的任何方法制备，例如，通过在无菌条件下将活性成分与载体或赋形剂混合。
适合口服给药的药物组合物能够以离散单元如胶囊或药片、粉末或颗粒、溶液、酏剂或悬浮液（在水或非水液体中；或者作为可食用的泡沫或搅拌泡沫（whips）；或作为乳剂）存在。
用于药片或硬明胶胶囊的合适赋形剂包括乳糖、玉米淀粉或其衍生物、硬脂酸或硬脂酸盐。
用于软明胶胶囊的合适赋形剂包括如植物油、蜡、油脂、半固态或液态多元醇等。
对于溶液和酏剂的制备，可使用的赋形剂包括如水、多元醇和糖类。对于悬浮液的制备，可使用油（例如植物油）来提供水包油或油包水悬浮液。
适合经皮给药的药物组合物可以离散贴剂存在，这是为了在很长的一段时间中可以与受体的表皮保持紧密接触。例如，活性成分可通过PharmaceuticalResearch,3(6):318(1986)中普遍记载的电离子渗入疗法从贴剂中释放出来。
适合局部给药的药物组合物可制造成药膏、乳脂、悬浮液、洗液、粉剂、溶液、糊剂、凝胶剂、喷雾、气溶胶或油。对于眼睛或其它外部组织如口和皮肤的感染，优选使用局部药膏或乳脂形式的组合物。配制软膏时，可以使用活性成分与石蜡或可与水混溶的软膏基质。或者，活性成分可以制成具有水包油乳脂基质或油包水基质的乳脂。适合眼睛局部给药的药物组合物包括眼药水，其中活性成分溶解或悬浮在合适的载体特别是水溶剂中。适合口中局部给药的药物组合物包括糖果、药片和漱口水。
适合直肠给药的药物组合物可以栓剂或灌肠剂存在。
适于鼻腔给药且载体是固体的药物组合物包括例如粒度在20-500微米范围内的粗粉剂，使用鼻烟的方式给药，即将持有粉剂的容器靠近鼻子并通过鼻腔通道将容器内的粉剂迅速吸入。通过喷鼻剂或滴鼻剂给药且载体是液体的药物组合物包括活性成分的水性或油性溶液。
适于吸入给药的药物组合物包括可以由各种类型的压力定量气溶胶、喷雾器或吹药器产生的微粒粉尘剂或雾剂。
适合阴道给药的药物组合物可以以阴道栓、棉球、乳脂、凝胶剂、糊剂、泡沫或喷雾制剂存在。
适合肠胃外给药的药物组合物包括水和非水无菌注射液以及水和非水无菌悬浮液，所述注射液可以含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和使该剂型与目标受试者的血液基本上等渗的溶质；所述悬浮液可以含有悬浮剂和增稠剂。用于注射用溶液剂的赋形剂包括例如水、乙醇、多元醇、丙三醇和植物油。所述组合物可以置于单位剂量或多剂量的容器内，例如密封的安瓿和小瓶中，并可以储藏于冷冻干燥(冻干的)的条件下，仅需添加无菌液体载体，例如注射用水，就可以立即使用。可用无菌粉剂、颗粒剂和片剂制备临时的注射溶液剂和悬浮液。
药物组合物可包括防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、香味剂、盐(本发明的物质本身就可以以药学上可接受的盐的形式提供)、缓冲剂、包衣剂或抗氧化剂。
除本发明的分子外，本发明的药物组合物还可以含有一种或多种其它治疗活性剂。
在某些实施方式中，活性药物浓缩物的剂型可以包括药学上可接受的等渗剂、缓冲剂和药学上可接受的表面活性剂。
或者，所述剂型可以包括活性成分和磷酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、吐温80或吐温20（降低搅动诱导的聚集风险的表面活性剂）和水(USP/Ph.Eur)，任选地可将pH调整到约6.0-7.0，如6.5左右。
活性药物浓缩物可以被冻干或不被冻干。
其它剂型可以包括缓冲剂三水乙酸钠、渗透压调节剂氯化钠、调节pH的乙酸和注射用水。
本发明组合物的剂量范围较宽，其剂量范围取决于治疗的疾病或失调、治疗的个体的年龄和状况等，而且医生将最终决定所使用的合适剂量。
该剂量可适当地重复使用。如果产生副反应，则可根据日常临床实践减少剂量或该剂量的频率。
对于哺乳动物特别是人类给药，预期的活性剂的日剂量为1μg/kg体重至10mg/kg体重，通常为10μg/kg体重至1mg/kg体重。在任何情况下，医生将决定最适合个体的实际剂量，该剂量取决于各种因素，包括个体的年龄、体重、性别和应答等。上述剂量是一般情况的示例。当然，也有使用较高剂量或较低剂量的实例，并且这都在本发明的范围内。
本发明的特异性结合分子可以用在医药学上，如用于治疗T细胞介导的疾病。
因此，在第四方面，本发明提供一种供医药学上使用的本发明的特异性结合分子。
在第五方面，本发明提供一种用于治疗T细胞介导的疾病的本发明的特异性结合分子。因此，本发明的这方面还包括治疗受试者的T细胞介导的疾病的方法，通常是需要被治疗的受试者，所述方法包括向受试者给药本发明的特异性结合分子。因此，本发明还涉及本发明的特异性结合分子在制备用于治疗T细胞介导的疾病的药物中的用途，或还涉及本发明的特异性结合分子在制备治疗T细胞介导的疾病的药物中的用途。所述治疗方法可以用于人类受试者或动物受试者，而且本发明同样涉及在人类药品和/或动物药品中的用途。本发明的特异性结合分子优选以“治疗有效量”向个体给药，该量足以显示出对个体的益处。本文中使用的“治疗”包括能够对人类或非人类动物优选为哺乳动物有益的任何方案。治疗可以是针对现存的病症或可以是预防性的（预防性治疗）。
在本发明的这个方面，本发明的特异性结合分子可以用于治疗由T细胞介导的各种不同疾病。在本文中，“T细胞介导的疾病”是指T细胞在发病或疾病或病症的发展中能够发挥作用的任何疾病或病症。T细胞介导的疾病通常是由异常的T细胞活化引起的。相应地，可以通过阻止Anx-A1的活性而阻止T细胞的活化来治疗这种疾病，本文中已经证明这可以通过单克隆抗体VJ-4B6起作用。通常，本发明中治疗的T细胞介导的疾病是Th1细胞起作用的疾病。
T细胞介导的疾病包括但不局限于移植物抗宿主疾病、移植排斥反应、动脉粥样硬化、HIV和/或AIDS、牛皮癣、流产和一些自身免疫疾病。根据本发明可治疗的自身免疫疾病包括风湿性关节炎（RA）、多发性硬化症(MS)、全身性红斑狼疮(SLE)、艾迪生氏病（Addison'sdisease）、格雷夫斯病（Grave'sdisease）、硬皮症、多肌炎、糖尿病且特别是某些形式的糖尿病（例如，青少年糖尿病）、自身免疫性葡萄膜视网膜炎、溃疡性结肠炎、寻常型天疱疮、炎性肠病、自身免疫性甲状腺炎、葡萄膜炎、贝赛特氏症（disease）和舍格伦式综合症（disease）。典型的T细胞介导的疾病是风湿性关节炎、多发性硬化症、全身性红斑狼疮、动脉硬化、HIV、AIDS或牛皮癣。更典型地，T细胞介导的疾病是风湿性关节炎或多发性硬化症。
本文中限定的T细胞介导的疾病还包括流产。本文中限定的治疗可以是预防性的（预防性治疗）。因此本发明的特异性结合分子可以用来预防流产。已知的是失控的Th1应答与流产有关，并且增加的Th2应答有助于怀孕。
典型的T细胞介导的疾病是风湿性关节炎。在风湿性关节炎（RA）中，认为是滑膜中T细胞识别抗原呈递细胞且与抗原呈递细胞相互作用。这些细胞一旦被活化，就会产生细胞因子和效应物分子；细胞因子的连续放大生产会形成“细胞因子级联反应”，该级联反应会导致巨噬细胞的活化和诱导炎性过程，使软骨和骨头的退化和吸收达到最高。随着时间的推移，会出现骨腐蚀，软骨损坏，以及完全丧失关节的完整性。最终，可能会影响多个器官系统。
在另一种实施方式中，T细胞介导的疾病是多发性硬化症(MS)。
在另一种实施方式中，T细胞介导的疾病是动脉硬化。炎症在冠状动脉疾病和动脉硬化的其它临床表现中起着关键的作用。免疫细胞控制早期的粥样硬化病变，它们的效应物分子加速了病变的进程，并且炎症的活化可以引起急性冠状动脉综合症。适应性免疫高度地参与了动脉粥样化的形成，因为已经表明它与代谢危险因子相互作用以启动、传播和活化动脉树中的病变。
在另一实施方式中，T细胞介导的疾病是系统性红斑狼疮(SLE)。
鉴于Anx-A1促进Th1细胞分化的能力，本发明也可以用于例如限制失控的保护性细胞（Th1）对抗细胞内病原体的应答和通过抑制Th1分化和促进Th2分化来治疗细胞外感染（Th2应答）。
本发明的第二方面和后续方面的优选特征是对第一方面中的特征所做的适应性改变。
在一种实施方式中，本发明提供一种针对具有图2所示的氨基酸序列的全长人类Anx-A1蛋白而产生的特异性结合分子。
所述特异性结合分子的一个实例为单克隆抗体VJ-4B6，该抗体是由2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)，登记号为No.10060301的杂交瘤细胞系产生的。
在一种实施方式中，本发明提供具有单克隆抗体VJ-4B6的CDRs的特异性结合分子，所述单克隆抗体VJ-4B6的CDRs具有下述氨基酸序列：
VLCDR1为KASENVVTYVS
VLCDR2为GASNRYT
VLCDR3为GQGYSYPYT
VHCDR1为GYTFTNYWIG
VHCDR2为DIYPGGDYTNYNEKFKG
VHCDR3为WGLGYYFDY
在一种实施方式中，本发明提供具有单克隆抗体VJ-4B6的VH和/或VL区域的特异性结合分子，图11和图13分别显示了所述区域。
在一种实施方式中，本发明提供杂交瘤细胞系VJ-4B6-E5-B10-D4，该细胞系于2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)，登记号为No.10060301。
单克隆抗体VJ-4B6是由图3A所述的方法产生的。简单地说，将cDNA编码的具有图2A所示序列的全长人类Anx-A1克隆到表达载体中，并确认其细胞表面的表达。将吸附到金微粒的载体DNA通过几次皮内应用后给药小鼠。鼠细胞接受了免疫载体并表达了cDNA编码的蛋白，从而刺激了免疫应答。然后，将鼠淋巴细胞与鼠骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤。然后，进行特异性测试，克隆杂交瘤和并产生单克隆抗体。
因此，用于产生单克隆抗体VJ-4B6的方法使用了被Anx-A1的cDNA转染的细胞，该细胞能够在细胞表面表达整个分子，因此，该蛋白以与体内存在形式相同的形式即以它的四级天然结构存在。这种产生抗体的方法与产生其它市售Anx-A1抗体的方法不同，所述其他市售抗体是通过用Anx-A1肽或变性全长蛋白免疫小鼠而产生的。
本发明的抗体特别可用于治疗T细胞介导的疾病，如风湿性关节炎和多发性硬化症。
现在将参照下述实施例进一步描述本发明，下述实施例仅是为了说明的目的。在实施例中，参考了多个附图，其中：
图1A是膜联蛋白-1结构的带状图，该图显示了四个膜联蛋白重复序列和N-末端结构域。图1B是膜联蛋白重复序列（repeat）和生物活性序列膜联蛋白-1肽Ac.2-26位置的示意图。图1C显示了肽Ac.2-26的氨基酸序列，该序列是Anx-A1乙酰化的N-末端肽片段。
图2A显示了人类膜联蛋白-1（Anx-A1）亚型ANXA1-003的（i）氨基酸序列和（ii）核苷酸序列。图2B显示了人类膜联蛋白-1（Anx-A1）亚型ANXA1-002的氨基酸序列。图2C显示了人类膜联蛋白-1（Anx-A1）亚型ANXA1-004的氨基酸序列。图2D显示了人类膜联蛋白-1（Anx-A1）亚型ANXA1-006的氨基酸序列。
图3显示了VJ-4B6的生成。（A）用于分离和产生VJ-4B6的方法的示意图；(B)柱状图显示了用VJ-4B6对被膜联蛋白-1的cDNA（绿线；右手峰）或无关的对照cDNA（红线；左手峰）稳定转染的细胞系进行染色的结果。
图4显示了VJ-4B6的确认。（A）用VJ-4B6(50ng/ml)对透化的人类外周血单核细胞（PBMC）或多形单核细胞（PolymorphMononuclearCells）（PMN）进行染色。（B）用VJ-4B6(50ng/ml)对透化的小鼠淋巴细胞或驻留的腹腔巨噬细胞进行染色。在所有的试验中，细胞都用4%的多聚甲醛进行固定，然后在FACS缓冲液中用0.02%的皂苷使细胞透化。在4℃下，将细胞与生物素化的VJ-4B6培养过夜，然后，用链霉亲和素-FITC缀合的抗体(稀释度1:200)染色1小时。在所有的图中，左手峰代表对照，而右手峰代表VJ-4B6。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图5显示了VJ-4B6抑制抗-CD3-诱导的T细胞增殖。在所示浓度的VJ-4B6存在下，用包被在培养板上的抗-CD3(1μg/ml)刺激AnxA1+/+(A)和AnxA1-/-(B)小鼠的脾脏和淋巴结中的T细胞。18-20小时后，用3H-胸苷(1μCi)脉冲细胞12小时，然后用细胞收集器处理，以测量3H-胸苷整合的水平。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图6显示了VJ-4B6抑制抗-CD3/CD28诱导的T细胞增殖。在所示浓度的VJ-4B6存在下，用包被在培养板上的抗-CD3(1μg/ml)和抗-CD28(1μg/ml)刺激AnxA1+/+(A)和AnxA1-/-(B)小鼠的脾脏和淋巴结中的T细胞。18-20小时后，用3H-胸苷(1μCi)脉冲细胞12小时，然后用细胞收集器处理，以测量3H-胸苷整合的水平。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图7显示了VJ-4B6抑制抗-CD3-诱导的IL-2生成。在所示浓度的VJ-4B6存在下，用包被在培养板上的抗-CD3(1μg/ml)刺激AnxA1+/+(A)和AnxA1-/-(B)小鼠的脾脏和淋巴结中的T细胞。20-24小时后，收集细胞上清液，并用ELISA分析上清液以得到IL-2的水平。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图8显示的是VJ-4B6抑制抗-CD3/CD28-诱导的IL-2生成。在所示浓度的VJ-4B6存在下，用包被在培养板上的抗-CD3(1μg/ml)和抗-CD28(1μg/ml)刺激AnxA1+/+(A)和AnxA1-/-(B)小鼠的脾脏和淋巴结中的T细胞。20-24小时后，收集细胞上清液，并用ELISA分析上清液以得到IL-2的水平。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图9显示了VJ-4B6抑制抗-CD3-诱导的CD25/CD69上调。在所示浓度的VJ-4B6存在下，用包被在培养板上的抗-CD3(1μg/ml)刺激AnxA1+/+(A)和AnxA1-/-(B)小鼠的脾脏和淋巴结中的T细胞。18-20小时后，收集细胞，并用抗-CD25FITC和抗-CD69PE给细胞染色。用FACScalibur流式细胞仪获得样品并用FlowJo软件分析样品。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图10显示了VJ-4B6抑制抗-CD3/CD28-诱导的CD25/CD69上调。在所示浓度的VJ-4B6存在下，用包被在培养板上的抗-CD3(1μg/ml)和抗-CD28(1μg/ml)刺激AnxA1+/+(A)和AnxA1-/-(B)小鼠的脾脏和淋巴结中的T细胞。18-20小时后，收集细胞，并用抗-CD25FITC和抗-CD69PE给细胞染色。用FACScalibur流式细胞仪获得样品并用FlowJo软件分析样品。显示的数据来自单一实验，并代表其它两组有相似结果的实验。
图11显示了VJ-4B6的轻链可变区的DNA和氨基酸序列。
图12显示了VJ-4B6的轻链可变区的氨基酸序列，并标注出了CDRs。突出了CDR1,CDR2,CDR3和恒定区的起点。根据Kabat标准进行编号和CDRs的确定。
图13显示了VJ-4B6的重链可变区的DNA和氨基酸序列。
图14显示了VJ-4B6的重链可变区的氨基酸序列，并标注出了CDRs。突出了CDR1,CDR2,CDR3和恒定区的起点。根据Kabat标准进行编号和CDRs的确定。在重链可变区中，残基26-29虽然不是Kabat定义的高变区的一部分，却是Chothia(ChothiaandLesk,1987)定义的CDR环的一部分。插入位置52、52a、82、82a、82b、82c、100和100a用52a,82abc,100a表示。
图15显示了VJ-4B6抑制EAE的发育。用CFA中的MOG35-55使C57BL/6小鼠免疫，并在以后的22天中每天进行监测，以获得EAE信号。从免疫后的第6天开始，每六天给小鼠腹腔内注射100ng的IgG(A)或5(B)、50(C)100ng(D)的VJ-4B6(溶于100μl的PBS中)。结果表示为平均值±SEM(n=6/组)。*p<0.05,***p<0.001。
图16显示了VJ-4B6降低与EAE的发育相关的体重减少。用CFA中的MOG35-55使C57BL/6小鼠免疫，并在以后的22天中每天进行监测，以获得体重的增加/减少。从免疫后的第6天开始，每六天给小鼠腹腔注射100ng的IgG(A)或5(B)、50(C)100ng(D)的VJ-4B6(溶于100μl的PBS中)。结果表示为平均值±SEM(n=6/组)。*p<0.05,***p<0.001。
图17显示的是VJ-4B6降低了CIA的发育。用CFA中的牛科动物类型II胶原使DBA/1小鼠免疫。在初次免疫后的第21天，小鼠通过完全CFA中的200μg类型II胶原增强免疫(s.c.)，并在以后的20天中每天进行监测，以获得疾病指征。从小鼠增强免疫的那天开始，每六天给小鼠腹腔注射100ng的VJ-4B6(溶于100μl的PBS中)。结果表示为平均值±SEM(n=6/组)。***p<0.001。
实施例1-VJ-4B6特异性抑制含有膜联蛋白-1的T细胞中的T细胞活化
材料和方法
小鼠（图4B、5、6、7、8、9和10中使用的小鼠）
Balb/C小鼠来自B&KUniversal(Grimston,England)。AnxA1-/-小鼠来自发明人的实验室，该小鼠在无菌条件下出生于B&KUniversal。这些研究中使用的所有小鼠的年龄都在6-8周龄。动物实验是根据英国内政部规定(GuidanceontheOperationofAnimals,ScientificProceduresAct1986)和欧洲联盟条款的规定进行的。
小鼠T细胞的提取（图4B、5、6、7、8、9和10中使用的细胞）
脾脏和淋巴结（腋窝淋巴结、腹股沟淋巴结和肠淋巴结）取自6至8周龄的小鼠，并如前人所述地用注射器柱塞和50μm细胞滤网（BD）使组织温和降解而制备。用Ficoll将细胞悬液分层，以获得单核细胞，然后收集细胞并用RPMI培养基（Gibco）洗涤。
T细胞增殖试验（图5和图6中的数据）
将纯化的淋巴结T细胞(105细胞/ml)在96孔板中用包被在培养板上的抗-CD3(克隆145-2C11;eBioscience)或抗-CD3和抗-CD28(克隆37.51;eBioscience)刺激。18-20小时后，将培养物用1μCi的[3H]-胸苷(AmershamPharmaciaBiotech)脉冲12小时，并用自动闪烁计算器测量整合后的放射性。
IL-2的产生（图7和图8中的数据）
将纯化的淋巴结T细胞(105细胞/ml)在96孔板中用包被在培养板上的抗-CD3(克隆145-2C11;eBioscience)或抗-CD3和抗-CD28(克隆37.51;eBioscience)刺激。20-24小时后，收集培养上清液，并按照制造商的说明书使用鼠IL-2ELISA试剂盒(eBioscience)分析上清液，以得到IL-2的含量。
流式细胞术分析（图9和图10）
将细胞在FACS缓冲液(含有1%FCS和0.02%NaN2的PBS)中重悬。将淋巴细胞以1x106/ml的密度在100μl的FACS缓冲液中染色，并用CellQuestTM软件（BectonDickinson）在FACScalibur流式细胞仪中捕获。使用的抗体为抗-CD25FITC(克隆PC61,eBioscience)和PE-缀合的抗-CD69（克隆H1.2F3）。在4℃下将细胞在含有抗-CD16/32的FACS缓冲液中预培养30分钟以排除非特异性结合，然后用合适浓度的缀合抗体在4℃标记30分钟。标记后，洗涤并分析细胞。设定正向散射和侧向散射以排除红细胞和死细胞，每个样品至少分析2×104个淋巴细胞。在所有实验中，被染色的细胞都用FACScalibur流式细胞仪捕获并用FlowJo软件进行分析。
用流式细胞术分析确认VJ-4B6（图4）
将人类PBMC和PMN或小鼠的脾细胞和腹膜巨噬细胞先在含有4%多聚甲醛的FACS缓冲液中重悬10分钟，随后在含有4%多聚甲醛和0.02%皂苷的FACS缓冲液中重悬15分钟。将细胞与50ng/ml的生物素化VJ-4B6在4℃培养12小时。然后用链霉亲和素-FITC(稀释度1:200;eBioscience)将细胞在室温下培养1小时。标记后，洗涤并分析细胞。设定正向散射和侧向散射以排除红细胞和死细胞，每个样品至少分析2×104个淋巴细胞。在所有实验中，被染色的细胞都用FACScalibur流式细胞仪捕获并用FlowJo软件进行分析。
人类外周血白细胞（图4A中使用的细胞）
献血者为20-35岁的健康男性和女性，他们的血液测试结果是HIV、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒均呈阴性。进一步筛选标准是在过去的四周里没有经历明显的感染，发烧、过敏症状、异常的血液细胞计数、肝脏酶的增加或任何药物治疗。从健康的志愿者中收集新鲜的静脉血，并将其立刻转移到含有3.2%柠檬酸钠的试管中(1:10稀释)。然后，使用密度梯度法将细胞分离：将3ml的FicollHistopaque-10771置于3ml的FicollHistopaque-11911上层（都来源于Sigma），以实现分层，并将6ml血液(用RPMI培养基1：1稀释)置于Histopaques上层。在室温下以1500RPM离心30分钟后，使用无菌滴管将PBMCs和PMNs从合适的层中吸出，并用RPMI洗涤三次。
统计分析
所有的统计分析都是用Prism软件进行的(GraphPadsoftware)。所有的数值都用平均值±SE表示。统计分析是通过Student’st检验或适当的单向ANOVA评估的。P<0.05的概率被认为是显著的。
结果
新的抗AnxA1抗体是由图3A中所示的遗传免疫方法产生的(GenovacGmbH,Germany)。测试了来自几只被免疫小鼠的血清，并用AnxA1cDNA对三个IgG识别细胞的结果呈阳性的小鼠进行转染。将这些小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤细胞。三个杂交瘤细胞克隆中仅有一个可以成功地被亚克隆和扩增。这些杂交瘤细胞被称作VJ-4B6-E5-B10-D4。从杂交瘤细胞纯化的IgG2b碎片识别转染有AnxA1cDNA的细胞(图3B，绿线；右手峰)，但不识别转染有无关cDNA的细胞(图3B，红线；左手峰)。
为了确认VJ-4B6的特异性，通过FACS分析已知表达不同蛋白水平的透化人类和小鼠细胞中的AnxA1表达。如图4A所示，与人类PBMC相比，人类PMN的VJ-4B6染色结果是高度阳性的（图4A，右手峰，分别为右栏和左栏）。这与先前观察到(D’Acquistoetal,结果未公布)的PMN与PBMC相比显著地表达更高的AnxA1水平是一致的。同样地，与脾细胞相比，用VJ-4B6染色的小鼠巨噬细胞表现出更高的AnxA1表达水平（图4B，右手峰，分别为右栏和左栏）。总体来说，这些结果显示了VJ-4B6可识别人类AnxA1和小鼠AnxA1。
然后，测试了VJ-4B6对T细胞活化的作用和特异性。为了这个目的，先用AnxA1+/+或AnxA1-/-小鼠的T细胞测量了VJ-4B6对抗-CD3诱导细胞增殖的作用(以3H-胸苷整合的平均值为指标)。图5显示了AnxA1+/+和AnxA1-/-的T细胞用抗-CD3刺激后，3H-胸苷整合的增加（分别为图5A和图5B）。在刺激后的培养物中加入VJ-4B6引起了AnxA1+/+的T细胞中3H-胸苷整合的浓度依赖性抑制，但对AnxA1-/-的T细胞中3H-胸苷整合没有影响。用抗-CD3和抗-CD28刺激的T细胞也出现类似的结果（分别为图6A和6B）。
为了进一步确认这些结果，测试了VJ-4B6对T细胞活化的其它传统标记即白细胞介素-2(IL-2)的产生和CD25/CD69上调的作用。用抗-CD3单独刺激或用抗-CD3和抗-CD28刺激T细胞可产生大量的IL-2（分别为图7和图8）。VJ-4B6的添加以浓度依赖性方式显著地抑制了AnxA1+/+T细胞中IL-2的产生，但对AnxA1-/-的T细胞中IL-2的产生没有影响。对于CD25/CD69上调也得到了相似的结果。用抗-CD3单独刺激或用抗-CD3和抗-CD28刺激T细胞活化诱导CD25/CD69双阳性T细胞的百分比显著提高（分别为图9和图10中从左起第二栏）。在VJ-4B6存在下的刺激可以浓度依赖性方式显著抑制AnxA1+/+T细胞中CD25/CD69的诱导，而不影响AnxA1-/-的T细胞中CD25/CD69的诱导。
这些结果共同表明VJ-4B6显著抑制T细胞增殖、IL-2的产生和由抗-CD3或由抗-CD3和抗-CD28引起的信号诱导的CD25/CD69的上调。另外，由于在AnxA1-/-T细胞中它的作用消失，因此这种作用应特别地归因于VJ-4B6与AnxA1的中和。这与发明人先前观察到的活化的T细胞释放合适的T细胞活化所需的内源性AnxA1-/-的结果相一致(D’Acquistoetal.,Blood109:1095-1102,2007;D’Acquistoetal.,Eur.J.Immunol.37:3131-3142,2007)。
总之，这些数据表明VJ-4B6以浓度依赖性方式抑制了抗-CD3诱导的CD25和CD69（T细胞活化的标记）的上调。在IL-2的产生和T细胞增殖上也观察到了相似的抑制作用。更重要的是，在膜联蛋白-1-缺乏的T细胞中没有观察到这种作用，这说明这种抑制是特异性的且抗体并没有引起任何不利的毒性作用。
实施例2-VJ-4B6的测序
本实施例的目的是从杂交瘤细胞中克隆抗体重链和轻链可变区域的基因和确定互补决定区(CDRs)的DNA序列和定位以及其他特征。
抗体可变区的克隆和测序
利用QiagenRNeasy迷你试剂盒(CatNo:74104)从1小瓶杂交瘤细胞中制备总RNA。用50μL水洗脱RNA并在1.2%琼脂糖凝胶上检查。
VH和VK(可变的kappa轻链)的cDNAs是用逆转录酶和IgG和kappa恒定区域的引物制备的。使用一大组信号序列引物，可通过PCR扩增出第一条链cDNAs。将扩增的DNAs用硅胶纯化，并克隆到载体TEasy(Promega)中。筛选得到的VH和VK的克隆以确定其中含有合适大小的插入物。通过自动DNA测序在两个方向上测定选定克隆的DNA序列。参照其它抗体序列确定序列中互补决定区（CDRs）的定位(KabatEAetal.,1991)。
结果
VJ-4B6轻链
识别了单一VK序列。图11显示了VJ-4B6VK的DNA序列和推导出的氨基酸序列。图12显示了推导出的蛋白序列，并标注了CDRs。两个单独扩增步骤中的九个克隆（七个是独立的）得到了相同的V区域序列。由杂交瘤融合伴侣产生的非生产性的异常VK序列也在多个克隆中出现，并且还有一个序列中有缺失的克隆。
VJ-4B6重链
识别了单一VH序列。图13显示了VJ-4B6VH的DNA序列和推导出的氨基酸序列。在九个单独的克隆中发现了相同的V区域序列。有两个克隆产生的序列中都有一个单碱基对的改变，有一个克隆产生的序列中有一个单碱基对的缺失和一个单碱基对的改变，还有一个克隆产生的序列中有两个单碱基对的改变。这五个单碱基对的变化中的每一个仅发生在一个克隆中。剩下的五个克隆有相同的序列。图14显示了推导出的蛋白序列，并标注了CDRs。
参考文献
ChothiaCandLeskAM.Canonicalstructuresforthehypervariableregionsofimmunoglobulins.JMolBiol.196:901-17,1987.
KabatEA,WuTT,PerryHM,GottesmanKS,FoellerC.SequencesofproteinsofImmunologicalInterest,USDepartmentofHealthandHumanServices,1991
实施例3-VJ-4B6的体内免疫抑制作用
为了测试VJ-4B6的体内免疫抑制作用，我们选择了两种传统的免疫疾病模型：MOG33-55诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE；多发性硬化的小鼠模型)和胶原诱导的关节炎(CIA；风湿性关节炎的小鼠模型)。
方法
实验性自身免疫性脑脊髓炎。0天时用溶于PBS的300μg的MOG35-55以及等体积的含有300μg热灭活的结核分枝杆菌（M.tuberculosis）H37Ra的CFA组成的300μl的乳剂对小鼠进行皮下免疫。小鼠身体两侧均注射乳剂，然后在0天和2天时腹腔内注射溶于100μl生理盐水中的百日咳杆菌毒素（B.pertussistoxin）(500ng/100μl)。每天观察小鼠，以得到EAE指征和体重的减少量。将疾病严重性分为6个等级：0=没有疾病；1=尾部部分迟缓；2=尾部全部迟缓；3=正位反射受损；4=局部后肢瘫痪；5=全部后肢瘫痪；6=动物濒临死亡或死亡。
胶原诱导的关节炎。将乳化在弗氏完全佐剂（completeFreund’sadjuvant）(CFA;Hookelabs)中的200μg胶原类型II皮下注射到6-8只雄性DBA/1小鼠(8-12周大)的尾部。在初次免疫后的第21天，给小鼠皮下注射200μg用IFA(Hookelabs)乳化的胶原类型II以增强免疫（s.c.）。使用两种临床参数监测小鼠的关节炎发病的指征，所述参数为爪肿胀和临床评分。爪肿胀是通过用器官血量测量仪（plethysmometer）测量受影响的后爪的厚度来评估的。临床评分是通过制造商推荐的标准(http://hookelabs.com/protocols/ciaInductionDBA1/ciaInduction_DBA1.html)评估的。将四肢进行分级，以得出12只动物中每只动物的最高可能得分。
结果
如前人所述(Paschalidisetal.,JNeuroinflammation.2009;6:33)地用MOG33-55/CFA对雄性C57/BL6小鼠进行免疫。从用MOG33-55/CFA免疫后的第六天开始，每六天给小鼠腹膜内(i.p.)注射VJ-4B6(5、50和100ng/100μl)、IgG对照(100ng/μl)或PBS载体(对照)。如图15所示，与对照小鼠相比，用5、50和100ng的VJ-4B6处理的小鼠显示出统计学上显著的剂量依赖性减少的疾病指征(分别为图15B、C和D)，然而，注射对照IgG却没有作用（图15A）。每种治疗的曲线下面积（AUC）和相对于对照(27.29AUC)的抑制百分比如下：IgG100ng，24.17AUC，11.4%；VJ-4B65ng，15.04AUC，44.8%；VJ-4B650ng，5.87AUC，78.5%；VJ-4B6100ng，7.04AUC，74.2%。
对EAE动物模型的研究已经表明疾病的急性期与体重的减轻同步发生，这可能是由于食欲不振和流体摄入不足。处理过的小鼠的重量测量与临床评分的严重度相关，并显示了与对照小鼠相比从第18天开始的VJ-4B6处理过的小鼠中剂量依赖性减少的体重减轻，但是IgG处理过的小鼠则没有这种现象（图16）。
为了确认治疗潜在的VJ-4B6作为体内免疫抑制剂，我们在CIA模型中测试了它的作用。如前人所述地用CFA中的牛科动物类型II胶原对雄性DBA/1小鼠进行免疫(D’Acquistoetal.,Blood.2007;109(3):1095-102)。从注射胶原增强免疫那天开始，每六天给小鼠腹腔内注射VJ-4B6(100ng/100μl)或PBS载体(对照)。与针对EAE所得到的数据一致的是，与对照小鼠(AUC83.50)相比，注射VJ-4B6显著地减少了(AUC26.75;67.9%)疾病指征的发展(图17)。
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关于微生物或其他生物材料保藏的说明
（专利合作条约实施细则13之2）
Claims (12)
1.一种抗体或该抗体的片段，该抗体或该抗体的片段具有互补决定区(CDRs)VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，其中
VLCDR1为KASENVVTYVS
VLCDR2为GASNRYT
VLCDR3为GQGYSYPYT
VHCDR1为GYTFTNYWIG
VHCDR2为DIYPGGDYTNYNEKFKG
VHCDR3为WGLGYYFDY。
2.根据权利要求1所述的抗体或该抗体的片段，其中，所述抗体是单克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的抗体或该抗体的片段，其中，所述单克隆抗体是人源化的。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的抗体或该抗体的片段，其中，所述片段为Fab、F(ab’)2或Fv片段或scFv分子。
5.根据权利要求1-3中任意一项所述的抗体或该抗体的片段，所述抗体或该抗体的片段包括具有图11和/或图13所示的氨基酸序列的多肽。
6.根据权利要求1-3中任意一项所述的抗体或该抗体的片段，所述抗体或该抗体的片段是由2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)，登记号为No.10060301的杂交瘤细胞系产生的。
7.一种杂交瘤细胞系，所述杂交瘤细胞系产生针对具有图2A所示的氨基酸序列的人类Anx-A1蛋白而产生的抗体或该抗体的片段，所述抗体或该抗体的片段具有互补决定区(CDRs)VLCDR1、VLCDR2、VLCDR3、VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，其中
VLCDR1为KASENVVTYVS
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VHCDR1为GYTFTNYWIG
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VHCDR3为WGLGYYFDY；
其中，所述杂交瘤细胞系是于2010年6月3日保藏于欧洲细胞培养物保藏中心(ECACC)，登记号为No.10060301的杂交瘤细胞系。
8.一种药物组合物，所述药物组合物包括如权利要求1-6中任意一项所述的抗体或该抗体的片段。
9.根据权利要求8所述的药物组合物，所述药物组合物还包括另一种治疗活性剂。
10.根据权利要求1-3中任意一项所述的抗体或该抗体的片段，所述抗体或该抗体的片段用于药物。
11.根据权利要求1-3中任意一项所述的抗体或该抗体的片段，所述抗体或该抗体的片段用于治疗T细胞介导的疾病，其中，所述T细胞介导的疾病为风湿性关节炎(RA)或多发性硬化症(MS)。
12.权利要求1-6中任意一项所述的抗体或该抗体的片段在制备用于治疗T细胞介导的疾病的药物中的用途，其中，所述T细胞介导的疾病为风湿性关节炎(RA)或多发性硬化症(MS)。
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| Lipocortin-1:cellular mechanisms and clinical relevance;Flower R J et al;《Trends in Pharmacological Sciences》;19940301;第15卷(第3期);71-16 * |
| Modulation of experimental autoimmune encephalomyelitis by endogenous Annexin A1;Paschalidis Nikolaos et al;《Journal of Neuroinflammation》;20091113;第6卷(第1期);33 * |
| Monoclonal antibodies to lipocortin-1 as probes for biological function;Pepinsky R B et al;《FEBS Letters》;19900226;第261卷(第2期);247-252 * |
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